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传染性喉气管炎病毒(ILTV)糖蛋白gB在重组鸡痘病毒中的表达 被引量：16
1
作者 张绍杰 童光志 +5 位作者 王柳 仇华吉 倪建强 孟松树 于力 王玫 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期205-208,共4页
本试验首先用PCR方法扩增出ILTVgB基因 ,将其克隆到质粒pUC1 1 9中 ,并进行了序列分析。将克隆的gB基因再亚克隆到禽痘病毒转移载体质粒中 ,然后 ,通过质脂体方法转染由禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,筛选蓝色的重组病毒 ,并... 本试验首先用PCR方法扩增出ILTVgB基因 ,将其克隆到质粒pUC1 1 9中 ,并进行了序列分析。将克隆的gB基因再亚克隆到禽痘病毒转移载体质粒中 ,然后 ,通过质脂体方法转染由禽痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,筛选蓝色的重组病毒 ,并对其进行了 6轮蚀斑纯化。该重组病毒通过PCR方法鉴定证明其基因组中含有完整的鸡传染性喉气管炎gB基因 。 展开更多
关键词 鸡 糖蛋白gB 重组鸡痘病毒 iltv 基因表达
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多重PCR同时检测鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG方法的建立和临床应用 被引量：6
2
作者 黄溢泓 陈强 +5 位作者 韦正吉 李志源 盘美妮 黄小武 李璧梅 蒋柳平 《广西农业科学》 CSCD 2009年第6期759-763,共5页
通过建立针对鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG的多重PCR鉴别诊断技术,并进行了特异性、敏感性试验和临床应用。结果表明:设计的5对引物对同一样品中的RNA(AIV、NDV、IBV)和DNA(ILTV、MG)进行多重PCR扩增,均同时得到5条片段大小与设计相符的... 通过建立针对鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG的多重PCR鉴别诊断技术,并进行了特异性、敏感性试验和临床应用。结果表明:设计的5对引物对同一样品中的RNA(AIV、NDV、IBV)和DNA(ILTV、MG)进行多重PCR扩增,均同时得到5条片段大小与设计相符的特异性片段,即268bp(AIV)、321bp(NDV)、457bp(IBV)、662bp(ILTV)和732bp(MG)。说明该多重PCR技术具有较强特异性和较高敏感性,能检测出1pg AIV、1pg NDV、10pg IBV的RNA和1pg ILTV、10pgMG的DNA。对自然感染鸡临床样品检测的结果则证明,该技术在临床诊断方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 多重PCR AIV NDV IBV iltv MG
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兽用干扰素诱生剂对人工感染IBDV和ILTV的临床防治效果 被引量：2
3
作者 时秀梅 李慧玲 +3 位作者 高华方 王希敏 刘治西 伍富尧 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第1期50-51,共2页
应用兽用干扰素诱生剂对人工感染ＩＢＤＶ和ＩＬＴＶ的雏鸡进行了防治试验。结果表明，预防组无一发病；治疗组对ＩＢＤ、ＩＬＴ的治愈率分别为９６９％和９５８％，明显高于同类药物对照组和感染不投药对照组。
关键词 干扰素诱生剂 IBDV iltv 鸡病 防治
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鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)单克隆抗独特型抗体的研究 被引量：2
4
作者 杨润德 冯书章 +3 位作者 郑瑞峰 马丛林 高轩 李谭清 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第9期15-16,共2页
鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）单克隆抗独特型抗体的研究＊杨润德冯书章＊＊郑瑞峰马丛林＊＊张旭曰升高轩李谭清（河北农业大学动物科技学院，保定０７１００１）Ｊｅｒｎｅ［１］提出了免疫网络调节学说，他认为机体在接受抗原刺... 鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）单克隆抗独特型抗体的研究＊杨润德冯书章＊＊郑瑞峰马丛林＊＊张旭曰升高轩李谭清（河北农业大学动物科技学院，保定０７１００１）Ｊｅｒｎｅ［１］提出了免疫网络调节学说，他认为机体在接受抗原刺激时，会产生一系列的复杂的应答反应... 展开更多
关键词 鸡病 iltv 单克隆抗体
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ILTV Glycoprotein B(gB)与鸡Interleukin-18(IL-18)真核双表达载体的构建及表达
5
作者 王淑娟 商艳红 +5 位作者 陈红英 邵攀峰 刘金朋 朱前磊 王子馨 崔保安 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期549-554,共6页
将ILTVgB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒。通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达。将重组... 将ILTVgB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒。通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达。将重组质粒通过腿部肌肉多点注射免疫21日龄雏鸡,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。结果显示,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB转染细胞中分别含gB/IL-18基因的mRNA和gB基因的mRNA。间接免疫荧光检测表明,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB在CEF细胞中有效地转录并表达gB蛋白。pIRES-gB/IL18和pIRES-gB免疫雏鸡后均能促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,但前者的免疫效果明显优于后者,表明gB基因和鸡IL-18基因均获得了表达,且鸡IL-18能明显增强ILTV DNA疫苗诱发的免疫应答。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒(iltv) GLYCOPROTEIN B(gB) 鸡Interleukin-18基因 真核表达 DNA疫苗
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中药“双炎散”颗粒剂对人工感染ILTV和IBV的防治试验
6
作者 赵香汝 苏杰 +1 位作者 杨玉成 张煜 《中兽医医药杂志》 2006年第1期31-32,共2页
关键词 防治试验 iltv 人工感染 双炎散 颗粒剂 IBV 中药 鸡传染性喉气管炎 病毒性疾病
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ILTVgB基因重组BCG菌株的构建及其免疫原性 被引量：1
7
作者 宋杰 苏钢 +1 位作者 裴艳涛 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期413-417,共5页
gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆... gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pR-α-gB,再电转化至BCG中,形成重组菌株rBCG-gB。热激后gB蛋白在耻垢分枝杆菌M.smegmatismc2155中高效表达,并且通过ELISA和Western blotting检测能够被抗ILTVgB蛋白的单克隆抗体识别。将106CFU的重组菌株rBCG-gB皮下注射免疫3周龄的SPF鸡,分别测定了淋巴细胞指数(SI)、吞噬细胞的吞噬能力以及血清中IL-2和IFN-γ的水平,结果表明重组菌株rBCG-gB作为载体疫苗具有较强的免疫反应。动物保护试验结果表明,重组菌株rBCG-gB对鸡具有一定的免疫保护效果,能够保护SPF鸡抵抗ILTV强毒株的攻击,血凝抑制试验表明血凝抑制抗体滴度能够显著增加。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 gB糖蛋白基因 rBCG 免疫原性
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传染性喉气管炎病毒(ILTV)gI-gE基因的PCR-RFLP分析
8
作者 何召庆 王云峰 +3 位作者 张绍杰 孟松树 童光志 黄骏明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期52-54,共3页
根据 ＵＳＤＡ（美国农业部）标准攻毒株 ＩＬＴＶ ｇＩ－ｇＥ基因的序列，在 ＩＬＴＶ ｇＩ基因、ｇＥ基因及 ｇＩ－ｇＥ基因连接部的上下游分别设计了一对引物。以 ＳＤＳ－蛋白酶 Ｋ法提取的 ８株 ＩＬＴＶ ＤＮＡ为模板，分别用这 ... 根据 ＵＳＤＡ（美国农业部）标准攻毒株 ＩＬＴＶ ｇＩ－ｇＥ基因的序列，在 ＩＬＴＶ ｇＩ基因、ｇＥ基因及 ｇＩ－ｇＥ基因连接部的上下游分别设计了一对引物。以 ＳＤＳ－蛋白酶 Ｋ法提取的 ８株 ＩＬＴＶ ＤＮＡ为模板，分别用这 ３对引物进行 ＰＣＲ扩增，均获得了与预期片段大小一致的ＤＮＡ片段。然后，用４种限制性内切酶（Ａｖａ Ⅱ、ＨｉｎｆⅠ、ＤｄｅⅠ和ＨａｅⅢ）对所有ＰＣＲ产物进行ＲＦＬＰ分析。结果发现， ＨｉｎｆⅠ和 ＤｄｅｌⅠ可以分别将 ８株 ＩＬＴＶ ｇＥ基因的酶切图谱分为两类， ＨａｅⅢ可将 ８株 ＩＬＴＶ的ｇＩ－ｇＥ基因连接部的酶切图谱分为两类。这表明不同的ＩＬＴＶ毒株的ｇＥ基因变异较大，而ｇＩ基因则相对比较保守。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 gI-gE基因 聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性分析
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ILTV基因缺失疫苗有望用于商业鸡群免疫
9
《中国家禽》 北大核心 2008年第8期64-64,共1页
传染性支气管炎病毒（ILTV）可导致鸡群的呼吸系统疾病，通常采用传统的灭活疫苗进行控制。但是残留和返毒的问题使这种疫苗存在着缺陷。为了避免这些问题以及更好控制该病，研究者开始着力于开发毒力基因缺失疫苗。糖蛋白G（gG）是ILTV... 传染性支气管炎病毒（ILTV）可导致鸡群的呼吸系统疾病，通常采用传统的灭活疫苗进行控制。但是残留和返毒的问题使这种疫苗存在着缺陷。为了避免这些问题以及更好控制该病，研究者开始着力于开发毒力基因缺失疫苗。糖蛋白G（gG）是ILTV的1种毒力因子。 展开更多
关键词 基因缺失疫苗 鸡群免疫 iltv 传染性支气管炎病毒 商业 呼吸系统疾病 毒力因子 灭活疫苗
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实时荧光定量RT-PCR检测ICP4、IFN-γ和IL-18基因在ILTV感染鸡三叉神经节中的表达 被引量：2
10
作者 木古丽 王云峰 +3 位作者 石星明 童光志 何来 王玫 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1150-1153,1166,共5页
将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2... 将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2、4、7、10、30d每组各取1只鸡颈静脉放血致死后无菌采集三叉神经节,提总RNA后利用real-timeRT-PCR的方法定量检测ICP4、IFN-γ和IL-18特异性mRNA。结果表明,在人工感染后处于潜伏状态的病毒能再被激活,并且ICP4基因在病毒还未被激活时就能低水平表达,这种低水平的立即早期(IE)基因的表达能提供持续的抗原刺激来维持神经节中的炎性细胞分泌IFN-γ和IL-18,以至于维持病毒处于潜伏状态而不致激活后感染其他的健康宿主;DEX处理后2d,IFN-γ的表达达到峰值,对病毒的再激活起抑制作用,尽管DEX处理前后IL-18的表达量没有明显变化,推测当潜伏的病毒一旦被激活时,IFN-γ可协同IL-18起到抑制IL-TV的作用。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 地塞米松(DEX) 基因表达定量分析 实时荧光定量RT—PCR 鸡
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可鉴定鸡ILTV的同聚延长片段
11
作者 李秉鸿 《畜牧兽医科技信息》 2000年第8期11-11,共1页
台湾学者最近从鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)基因的终端重复序列中扩增到一个750bp片段,该片断包含一个467bp区域,在CSW-1株中是被删除的,他们发现在这个区域中有一个由重复胞苷残基组成的同聚延长片段,在不同的ILTV毒株中。
关键词 喉气管炎病毒 iltv 疫苗株 重复序列 鸡传染性 基组 流行病学研究 台湾学者 组织器官 标记物
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鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立
12
作者 谢志勤 谢芝勋 +14 位作者 张艳芳 范晴 谢丽基 万丽军 罗思思 李孟 张民秀 曾婷婷 黄娇玲 王盛 李丹 韦悠 李小凤 任红玉 阮志华 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期381-388,共8页
旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR... 旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为56℃。特异性检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株。敏感性检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL。对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5%。对83份病鸡喉拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳性样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳性样品9份,ddPCR的阳性检出率(12.05%)高于荧光定量PCR的阳性检出率(10.84%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异性强、敏感性高、重复性好,为绝对定量检测ILTV提供更好的技术支撑。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 微滴式数字PCR 定量检测
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传染性喉气管炎病毒基因疫苗免疫效应 被引量：8
13
作者 王利丽 王云峰 +5 位作者 孙惠玲 杨春富 都兴洋 王玫 步志高 童光志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期175-183,共9页
以传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株gB和gD基因为目的基因构建真核表达质粒pCAGG-gB和pCAGG-gD。将75只SPF鸡随机分为7组,经肌肉注射接种pCAGG-gB、pCAGG-gD、pCAGG-gB+pCAGG-gD、pCAGG-gB+rFPV-ILTVgB以及rFPV-ILTVgB,并设有生理盐水和空... 以传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株gB和gD基因为目的基因构建真核表达质粒pCAGG-gB和pCAGG-gD。将75只SPF鸡随机分为7组,经肌肉注射接种pCAGG-gB、pCAGG-gD、pCAGG-gB+pCAGG-gD、pCAGG-gB+rFPV-ILTVgB以及rFPV-ILTVgB,并设有生理盐水和空载体(pCAGG)对照组。免疫2周后以500EID50ILTV WG株强毒进行攻击,以评价ILTV基因疫苗以及基因疫苗和重组病毒联合应用对SPF鸡的免疫保护作用。血清抗体的检测表明:在免疫后的2周,各免疫组的鸡只均产生了特异性的ILTV抗体,外周血CD4+T、CD8+T、TCRγδ+T细胞明显高于对照组,并且pCAGG-gB和pCAGG-gD分别诱导了高水平的IL-18和IFN-γ的表达。ILTV强毒攻击后,非免疫鸡全部发病,并在第2天出现死亡。而各质粒免疫组均获得了一定的保护(保护率44%),两种质粒联合免疫(pCAGG-gB和pCAGG-gD)和重组病毒(rFPV-ILTVgB)与质粒(pCAGG-gB)联合免疫的免疫组的保护率(56%)高于单独免疫组,产生高水平细胞因子表达的免疫组的保护率高于对照组。重组鸡痘病毒免疫组的保护率(69%)最高。这些结果表明ILTV的DNA疫苗能够诱导鸡体产生特异性免疫应答,并能对传染性喉气管炎强毒的攻击提供一定的免疫保护。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒(iltv) DNA疫苗 免疫效力
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鸡传染性喉气管炎病毒可视化LAMP快速诊断方法的建立和应用 被引量：11
14
作者 谢晶 于吉锋 +7 位作者 周泷 曹冶 林毅 李兴玉 肖璐 叶勇刚 潘梦 康润敏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第2期565-572,共8页
试验旨在建立简易、快速、高效的鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)检测和诊断方法。根据GenBank上公布的ILTV TK基因序列,设计检测ILTV的特异性环介导的等温扩增(loop media-ted isothermal amplificatio... 试验旨在建立简易、快速、高效的鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)检测和诊断方法。根据GenBank上公布的ILTV TK基因序列,设计检测ILTV的特异性环介导的等温扩增(loop media-ted isothermal amplification,LAMP)技术反应引物,通过对LAMP反应体系和反应条件的优化,以及特异性、敏感性和临床样品的检测,建立了ILTV LAMP检测方法。结果显示,以内引物ILT9-FIP和ILT9-BIP、外引物ILT9-F3和ILT9-B3、环引物ILT9-LB和ILT9-LF为LAMP反应引物,反应温度为66℃时,所建立的LAMP检测方法反应效率最高;所建立的LAMP检测方法能够特异性地检测ILTV(匈牙利株和王岗株),不与新城疫病毒(NDV,B株)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV,H52株和H120株)、大肠杆菌、鸡副嗜血杆菌、巴氏杆菌等发生交叉反应,且能够检测到的病毒最低浓度达到0.06pg/μL,其灵敏度是普通PCR方法的100倍;采用建立LAMP方法对50个临床样本进行检测,阳性率为14%,且与PCR检测结果的符合率达96%。本研究建立了特异性强、灵敏度高、操作简单的LAMP检测方法,适用于临床上ILTV的快速检测和诊断。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒(iltv) 环介导的等温扩增技术(LAMP) TK基因
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鸡传染性喉气管炎、传染性支气管炎和新城疫病毒对10个家系BWEL-SPF鸡或鸡胚的感染试验 被引量：3
15
作者 夏长友 付朝阳 +3 位作者 张永久 南锡 杨奇伟 张德明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第1期37-39,共3页
用传染性喉气管炎（ＩＬＴ）强毒株感染１０个家系１５０日龄ＢＷＥＬＳＰＦ鸡，观察比较临床症状和剖检所见病变；用传染性支气管炎（ＩＢ）强毒株和新城疫（ＮＤ）疫苗株分别接种这１０个家系的鸡胚，收获胚液并测定其毒价。从而评... 用传染性喉气管炎（ＩＬＴ）强毒株感染１０个家系１５０日龄ＢＷＥＬＳＰＦ鸡，观察比较临床症状和剖检所见病变；用传染性支气管炎（ＩＢ）强毒株和新城疫（ＮＤ）疫苗株分别接种这１０个家系的鸡胚，收获胚液并测定其毒价。从而评估这三种呼吸道病毒在每个家系鸡或鸡胚上的敏感性。 展开更多
关键词 鸡 感染试验 病毒 iltv IBV NDV
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鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定 被引量：6
16
作者 周建强 潘琦 +2 位作者 吴敏秋 周广生 陈长春 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第26期12572-12573,12581,共3页
[目的]证实江都市存在鸡传染性喉气管炎。[方法]以江都市5只发病鸡的喉、气管粘膜及其分泌物为病料，采用鸡胚传代的方法从中分离出1株病毒（ILTV—JD07），对分离毒株进行了理化特性检验、毒价测定、中和试验、琼脂免疫扩散试验、PCR... [目的]证实江都市存在鸡传染性喉气管炎。[方法]以江都市5只发病鸡的喉、气管粘膜及其分泌物为病料，采用鸡胚传代的方法从中分离出1株病毒（ILTV—JD07），对分离毒株进行了理化特性检验、毒价测定、中和试验、琼脂免疫扩散试验、PCR扩增及电泳检测等。[结果]鸡胚接种病料后48h胚体活性减弱，3—8d内死亡6枚，解剖死胚可见其绒毛尿囊膜（CAM）增厚，取病变CAM传至第4代接种鸡胚，鸡胚集中于接种后3—5d内死亡；第4代分离毒的毒价基本稳定在10^5.77EID50／0．2ml，分离毒毒株可被鸡传染性喉气管炎（ILT）标准阳性血清中和，中和价为1：54；参考株ILT／13与分离株ILTV-JD07均可扩增出1条183bp的DNA条带。[结论]江都市存在鸡传染性喉气管炎。 展开更多
关键词 iltv 分离 鉴定
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鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的克隆及其原核表达 被引量：4
17
作者 郑海洲 柏佳宁 +1 位作者 边艳青 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期343-345,共3页
根据鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因序列和表达载体pBV221的多克隆位点,设计了1对引物。以ILTV疫苗株基因组为模板,应用PCR扩增出gB基因片段,然后将其定向克隆于原核表达载体pBV221中,构建了重组质粒pBV-gB。重组质粒转化到受体菌... 根据鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因序列和表达载体pBV221的多克隆位点,设计了1对引物。以ILTV疫苗株基因组为模板,应用PCR扩增出gB基因片段,然后将其定向克隆于原核表达载体pBV221中,构建了重组质粒pBV-gB。重组质粒转化到受体菌DH5α中,得到阳性重组菌株DH5α(pBV-gB)。该菌株在温控诱导下,SDS-PAGE电泳可见表达的特异蛋白。ELISA检测证明,表达的蛋白具有较好的反应原性。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 原核表达 GB基因 SDS-PAGE电泳 ELISA检测 多克隆位点 B基因序列 PCR扩增 iltv 基因片段 表达载体 定向克隆 重组质粒 质粒转化 重组菌株 特异蛋白 反应原性 基因组 疫苗株 受体菌
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鸡传染性喉气管炎病毒王岗株gC和gD基因的克隆及序列分析 被引量：4
18
作者 孟松树 郭鑫 +4 位作者 张绍杰 王柳 仇华吉 王玫 童光志 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期108-111,共4页
根据已发表的传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA-2株的核酸序列 ,设计了 1对引物 ,以 ILTV中国王岗株 DNA为模板 ,PCR法扩增出 1条 1 .3 9kb的基因片段 ,将扩增产物插入到真核表达质粒 p CRTM 3 -Uni,得到重组质粒 p TA-g D。另将克隆到 p ... 根据已发表的传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA-2株的核酸序列 ,设计了 1对引物 ,以 ILTV中国王岗株 DNA为模板 ,PCR法扩增出 1条 1 .3 9kb的基因片段 ,将扩增产物插入到真核表达质粒 p CRTM 3 -Uni,得到重组质粒 p TA-g D。另将克隆到 p Bluescript SK质粒中的 g C基因酶切后 ,插入到 p CRTM 3 -Uni载体 ,得到重组质粒 p TA-g C。经电泳分析、酶切、PCR鉴定后 ,进行序列测定。序列分析表明 ,ILTV王岗株 g C基因的编码序列与 SA-2株的核苷酸同一性为 99%,而王岗株 g D基因的编码序列在其 C端多了 1 7个核苷酸 ,其余部分的同一性为 97%。鉴于 g C、g D基因在诱导机体产生对 ILTV的免疫应答中的作用 ,g C、g D基因的克隆及其真核表达质粒的构建 ,为 展开更多
关键词 GC基因 GD基因 克隆 序列分析 鸡 iltv 基因免疫
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抗传染性喉气管炎病毒中药的筛选试验 被引量：2
19
作者 白挨泉 乔莉 +1 位作者 高作信 郑涛 《动物医学进展》 CSCD 2001年第4期100-103,共4页
本文用细胞培养法、鸡胚培养法对 42种中药进行抗传染性喉气管炎病毒的筛选试验。通过细胞病变 ( CPE)抑制试验对 42种中药进行初步筛选 ,结果发现石榴皮等 5种中药有抑制 CPE的作用。培养细胞有 2 0 %的细胞发生病变 ,认为这些中药有抗... 本文用细胞培养法、鸡胚培养法对 42种中药进行抗传染性喉气管炎病毒的筛选试验。通过细胞病变 ( CPE)抑制试验对 42种中药进行初步筛选 ,结果发现石榴皮等 5种中药有抑制 CPE的作用。培养细胞有 2 0 %的细胞发生病变 ,认为这些中药有抗 ILTV的作用 ;应用空斑形成抑制试验对 5种抗 ILTV中药进行复筛 ,结果表明 5种中药均有不同程度的抑制病毒空斑形成作用。其中以石榴皮等 2种中药作用较强 ,空斑形成抑制率可达 98%以上 ;应用鸡胚培养法对 5种中药进行抗 ILTV试验 ,结果发现 5种中药均显著地减少了鸡胚绒毛尿囊膜上的痘疱 ,其中以石榴皮等 2种中药抑制痘疱形成的强度最高 ;通过不同加药时间 ,观察 CPE抑制情况。结果表明 ,在接毒前 48h给药有 2种中药具明显的抑制 CPE。接毒同时加药以及接毒后 1 h加药 ,这 5种中药均呈现明显的抑制 CPE。 展开更多
关键词 中药 iltv CPE 空斑形成抑制试验 抗病毒 鸡病 筛选
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间接法Dot—ELISA检测传染性喉气管炎病毒的研究 被引量：6
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作者 郑世军 甘孟侯 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1991年第3期2-5,共4页
本文首次成功地建立了间接法Dot—ELISA检测传染性喉气管炎病毒。对传染性喉气管炎发病鸡群口咽、泄殖腔拭子的ILTV抗原阳性检出率分别为80.20%(162/202)、75.41%(92/122)。两者没有显著差异(p>0.05)。结果表明,间接法Dot—ELISA对... 本文首次成功地建立了间接法Dot—ELISA检测传染性喉气管炎病毒。对传染性喉气管炎发病鸡群口咽、泄殖腔拭子的ILTV抗原阳性检出率分别为80.20%(162/202)、75.41%(92/122)。两者没有显著差异(p>0.05)。结果表明,间接法Dot—ELISA对传染性喉气管炎的早期诊断具有简单、快速、经济、敏感性高、特异性强和重复性好等优点,是疫病早期诊断与流行病学调查的有效手段。 展开更多
关键词 鸡 ILT iltv DOT-ELISA 检测
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