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鸡干扰素刺激基因12(ISG12)的克隆表达及抗病毒活性分析 被引量：1
1
作者 庞运倩 马秀丽 +4 位作者 刘爱玲 刘华雷 黄兵 宋敏训 胡敬东 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期938-943,共6页
干扰素刺激基因12(interferon-stimulated gene 12,ISG12)在病毒感染过程中已经被监测到,但是针对其抗病毒活性的研究却很少。本研究的主要目的是体外表达鸡的ISG12基因,以禽流感病毒(avian influenza viru,AIV)1215株为病毒模型,利用... 干扰素刺激基因12(interferon-stimulated gene 12,ISG12)在病毒感染过程中已经被监测到,但是针对其抗病毒活性的研究却很少。本研究的主要目的是体外表达鸡的ISG12基因,以禽流感病毒(avian influenza viru,AIV)1215株为病毒模型,利用细胞培养检测其抗病毒活性。利用RT-PCR方法扩增鸡胚成纤维细胞(CEF)的ISG12基因,经测序分析,该基因序列与GenBank中登录的禽属ISG12基因序列相似性为100%。将该基因亚克隆至pET-32a载体构建重组原核表达质粒p32a-C12;工程菌p32a-C12/BL21经IPTG诱导表达,重组蛋白经Ni 2+琼脂糖凝胶柱层析纯化,获得相对分子质量约30 000的目的蛋白。利用ISG12蛋白预处理CEF和鸡外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL)后感染AIV 1215株,或者将该病毒与ISG12蛋白一起接种CEF细胞和PBL细胞,AIV在CEF中的复制能力与对照组无明显差异,而ISG12蛋白预处理鸡PBL细胞和同时感染AIV 1215株时的病毒含量均比对照低。体外抗病毒活性试验表明,ISG12蛋白能够抑制AIV 1215株在PBL细胞中的复制,但在CEF细胞上的作用不明显。 展开更多
关键词 isg12 基因表达 禽流感病毒 病毒复制
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USP18促进溶瘤病毒诱导的肝癌细胞凋亡机制 被引量：1
2
作者 朱海珍 陈瑾文 +7 位作者 许艳 薛斌斌 王鑫涛 邓日林 田仁云 陈生稳 王静静 黄湘 《湖南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期88-95,共8页
NDV感染肝癌细胞后,能够诱导细胞的凋亡,在NDV感染肝癌细胞Huh7之后,能够诱导一种去泛素化酶USP18的表达显著上调.为了探究USP18在NDV诱导的肝癌细胞的凋亡过程中起什么作用,以肝癌细胞系Huh7为实验体系,以western blot蛋白免疫印迹和定... NDV感染肝癌细胞后,能够诱导细胞的凋亡,在NDV感染肝癌细胞Huh7之后,能够诱导一种去泛素化酶USP18的表达显著上调.为了探究USP18在NDV诱导的肝癌细胞的凋亡过程中起什么作用,以肝癌细胞系Huh7为实验体系,以western blot蛋白免疫印迹和定量PCR为主要方法.在细胞中过表达USP18,发现其能够明显促进肝癌细胞的凋亡,这表明USP18具有抗癌的功能.反之,敲低细胞中USP18的表达水平,能够有效地抑制NDV诱导的肝癌细胞凋亡.进一步揭示了USP18促进NDV诱导的细胞凋亡的机制,USP18上调了定位于线粒体上的Bax的蛋白水平,Bax能与Bak在线粒体外膜上形成孔道,增加线粒体外膜的通透性,从而促进凋亡蛋白细胞色素C的释放.同时,USP18还能诱导NOXA切割效应凋亡蛋白Caspase-7,进一步促进细胞凋亡.此外,USP18上调干扰素刺激基因ISG12a(IFN-stimulated gene 12a)的蛋白水平,抑制ISG12a的泛素化降解,这也是从另一个角度解释了其促进凋亡作用. 展开更多
关键词 线粒体 肝癌细胞 USP18 NDV 细胞凋亡 Bax NOXA isg12a
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干扰素-α诱导蛋白27在胰腺癌组织中的表达及临床意义
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作者 郑莹 王乾合 +2 位作者 张玲 姚丽 朱克祥 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第13期2380-2384,共5页
目的:探讨干扰素-α诱导蛋白27(IFI27)在胰腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:免疫组织化学法检测IFI27蛋白在胰腺癌、癌旁及慢性胰腺炎组织中的表达情况,分析阳性表达与胰腺癌患者相关临床病理参数和预后的关系。利用生物信息学... 目的:探讨干扰素-α诱导蛋白27(IFI27)在胰腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:免疫组织化学法检测IFI27蛋白在胰腺癌、癌旁及慢性胰腺炎组织中的表达情况,分析阳性表达与胰腺癌患者相关临床病理参数和预后的关系。利用生物信息学方法基于TCGA数据库分析IFI27在胰腺癌组织中的表达差异和预后相关性。结果:IFI27在胰腺癌组织中表达的阳性率高于癌旁以及慢性胰腺炎组织(P<0.05),且与血管侵犯、淋巴结转移以及肿瘤分化程度相关。胰腺癌患者的总体生存期与肿瘤分化程度、血管侵犯、淋巴结转移以及IFI27阳性表达相关。多因素分析显示IFI27阳性表达是胰腺癌患者预后的独立危险因素。基于TCGA数据库分析得出IFI27在胰腺癌组织中的表达量高于正常组织(P<0.05),生存曲线提示IFI27低表达患者的预后优于高表达患者(P<0.05)。结论:IFI27高表达的胰腺癌患者预后差,IFI27阳性表达是胰腺癌患者的独立预后指标。 展开更多
关键词 胰腺癌 isg12家族 干扰素-α诱导蛋白27 免疫组织化学 生物信息学方法
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白来航鸡干扰素刺激基因12 PCR扩增
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作者 张淑萍 葛中东 +3 位作者 张凯 夏宇欣 姜莉莉 樊兆斌 《中国畜禽种业》 2021年第4期42-44,共3页
本试验拟克隆白来航鸡干扰素刺激基因12(ISG12),并对其进行生物信息学预测分析。根据ncbi发表的原鸡ISG12基因序列(登录号:BN000223.1),设计ISG12基因特异性扩增引物。提取白来航鸡的肝脏、脾脏RNA,并反转录为cDNA,利用RT-PCR技术扩增... 本试验拟克隆白来航鸡干扰素刺激基因12(ISG12),并对其进行生物信息学预测分析。根据ncbi发表的原鸡ISG12基因序列(登录号:BN000223.1),设计ISG12基因特异性扩增引物。提取白来航鸡的肝脏、脾脏RNA,并反转录为cDNA,利用RT-PCR技术扩增白来航鸡ISG12基因序列,并利用生物软件对其编码蛋白进行生物信息学分析预测。结果显示,白来航鸡ISG12基因CDS区为324bp,编码107个氨基酸。ISG12编码蛋白理论分子量为10.28 kD,理论等电点(PI)为10.18,不稳定系数为59.46,脂肪系数为41.12。存在3个明显的亲水区,整条多肽链表现为亲水性;无信号肽,不存在跨膜区;存在21个潜在的磷酸化位点,6个潜在的O-糖基化位点,不含N-糖基化修饰位点;含有3个抗原决定簇区域。本试验成功克隆了白来航鸡ISG12基因,为深入了解ISG12编码蛋白的功能及进一步阐述其抗病毒的机理提供了科学依据。 展开更多
关键词 isg12基因 基因克隆 序列分析
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