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RNA-sequencing expression profile and functional analysis of retinal pigment epithelium in atrophic age-related macular degeneration
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作者 Miao Xu Yan Gao +2 位作者 Wenjie Yin Qinghuai Liu Songtao Yuan 《Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2024年第5期500-511,I0012-I0018,共19页
The retinal pigment epithelium(RPE)is fundamental to sustaining retinal homeostasis.RPE abnormality leads to visual defects and blindness,including age-related macular degeneration(AMD).Although breakthroughs have bee... The retinal pigment epithelium(RPE)is fundamental to sustaining retinal homeostasis.RPE abnormality leads to visual defects and blindness,including age-related macular degeneration(AMD).Although breakthroughs have been made in the treatment of neovascular AMD,effective intervention for atrophic AMD is largely absent.The adequate knowledge of RPE pathology is hindered by a lack of the patients'RPE datasets,especially at the single-cell resolution.In the current study,we delved into a large-scale single-cell resource of AMD donors,in which RPE cells were occupied in a substantial proportion.Bulk RNA-seq datasets of atrophic AMD were integrated to extract molecular characteristics of RPE in the pathogenesis of atrophic AMD.Both in vivo and in vitro models revealed that carboxypeptidase X,M14 family member 2(CPXM2),was specifically expressed in the RPE cells of atrophic AMD,which might be induced by oxidative stress and involved in the epithelial-mesenchymal transition of RPE cells.Additionally,silencing of CPXM2 inhibited the mesenchymal phenotype of RPE cells in an oxidative stress cell model.Thus,our results demonstrated that CPXM2 played a crucial role in regulating atrophic AMD and might serve as a potential therapeutic target for atrophic AMD. 展开更多
关键词 age-related macular degeneration retinal pigment epithelium high-throughput rna-sequencing bioinformatics analysis
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基于Illumina MiSeq的海南近岸海湾浮游植物群落组成及其物种多样性分析
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作者 李智杰 费小雯 +4 位作者 田冶 张秀霞 何丽敏 伍丽娴 邓晓东 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2798-2812,共15页
【目的】调查研究海南近岸海湾浮游植物群落组成及其物种多样性,探索导致浮游植物多样性差异的原因,为预测赤潮发生及改善水体质量提供参考依据。【方法】在陵水湾、海尾湾、清澜湾和三亚湾各设4个采样站位采集水环境样本,PCR扩增18S r... 【目的】调查研究海南近岸海湾浮游植物群落组成及其物种多样性,探索导致浮游植物多样性差异的原因,为预测赤潮发生及改善水体质量提供参考依据。【方法】在陵水湾、海尾湾、清澜湾和三亚湾各设4个采样站位采集水环境样本,PCR扩增18S rRNA序列V4可变区,基于Illumina MiSeq高通量测序分析4个近岸海湾浮游植物群落组成及其物种多样性,并通过典型对应分析(CCA)、Mantel检验及Spearman相关分析探索浮游植物群落组成与环境因子的相关性。【结果】测序获得的542个浮游植物OTUs共注释到8门24纲147个属246种,角毛藻属、菱形藻属、近囊胞藻属、Ciliophrys、骨条藻属、海链藻属、斜纹藻属、原多甲藻属等为优势浮游植物属。硅藻门为陵水湾和三亚湾的优势物种,浮游植物群落多样性最高的属均为角毛藻属;清澜湾的优势物种为绿藻门,优势多样性最高的属为菱形藻属;海尾湾的优势物种为褐藻门,优势多样性最高的属为近囊胞藻属。陵水湾浮游植物群落的Shannon指数和Simpson指数与其他3个海湾间存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)差异,而海尾湾、清澜湾与三亚湾间的多样性指数均无显著差异(P>0.05)。4个海湾的浮游植物群落组成均受到不同环境因子的影响,其中总氮、总磷、电导率、盐度和水温是影响浮游植物组成的主要环境因子。【结论】海南近岸海湾浮游植物群落中硅藻门物种丰度最高,三亚湾的浮游植物群落多样性最高,陵水湾的浮游植物群落多样性最低且存在赤潮发生的风险。总氮、总磷、电导率、盐度和水温是影响海南近岸海湾浮游植物群落组成的主要环境因子,因此,在海洋资源开发利用过程中要实时监控水质污染及环境因子的变化,确保浮游植物等关键生态组分的健康与多样性,避免浮游植物群落失衡和赤潮等生态灾害发生,以保持海洋生态系统的稳定性。 展开更多
关键词 浮游植物 群落结构 物种多样性 环境因子 illumina MiSeq 海南近岸海湾
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基于Illumina Bovine SNP 50K芯片对比利时蓝牛的遗传规律解析
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作者 王雪艳 李小鹏 +8 位作者 韩亚辉 刘悦欣 陶雪雨 韩志鹏 杨睿智 张成龙 周稳 徐新如 刘书东 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第20期45-52,62,125,126,共11页
为了研究大型肉牛比利时蓝牛生长发育的遗传规律,筛选优异基因,试验基于Illumina Bovine SNP 50K芯片数据,采用PLINK软件对270头比利时蓝牛常染色体数据进行基因组长纯合片段(ROH)检测并基于选择信号分析,通过核苷酸多态性检测取前5%的... 为了研究大型肉牛比利时蓝牛生长发育的遗传规律,筛选优异基因,试验基于Illumina Bovine SNP 50K芯片数据,采用PLINK软件对270头比利时蓝牛常染色体数据进行基因组长纯合片段(ROH)检测并基于选择信号分析,通过核苷酸多态性检测取前5%的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点,基于牛参考基因组(ARS-UCD1.2)对结果SNPs进行基因注释,对候选基因进行GO功能注释与KEGG信号通路富集分析,并计算染色体上ROH长度占基因组总长度的比例(FROH)。结果表明:在全部270个个体数据中共检测出1893个ROH片段,平均长度13.2311 Mb,平均FROH为0.0392;得到与生长发育相性状相关的基因有NEB、TET2、NEK11、NCKAP1、MYH15、EIF4A2、bta-miR-1248-1、DCAF8、PRORP、DOCK3、SYT15、MYEF2、ZDHHC13,与公牛生育能力相关的基因有CFAP61、DNAL1、BAG1。说明通过对比利时蓝牛生长发育性状相关分子标记的解析可以为比利时蓝牛遗传改良提供理论指导。 展开更多
关键词 比利时蓝牛 illumina Bovine SNP 50K芯片 长纯合片段 选择信号分析 基因注释 基因功能富集分析
原文传递
Combining single-cell RNA-sequencing and bulk data to reveal immunity-related genes expression pattern in the systemic lupus erythematosus and target organ kidney
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作者 Ying Zhang Tong Zhou +4 位作者 Yi-Ting Wang Xiao-Xian Pei Zhe Sun Ming-Cheng Li Wen-Gang Song 《Medical Data Mining》 2023年第1期1-9,共9页
Background:Systemic lupus erythematosus(SLE)is a complex chronic autoimmune disease with no known cure.However,the regulatory mechanism of immunity-related genes is not fully understood in SLE.In order to explore new ... Background:Systemic lupus erythematosus(SLE)is a complex chronic autoimmune disease with no known cure.However,the regulatory mechanism of immunity-related genes is not fully understood in SLE.In order to explore new therapeutic targets,we used bioinformatical methods to analyze a series of data.Methods:After downloading and processing the data from Gene Expression Omnibus database,the differentially expressed genes of SLE were analyzed.CIBERSORT algorithm was used to analyze the immune infiltration of SLE.Based on single-cell RNA-sequencing data,the role of immune-related genes in SLE and its target organ(kidney)were analyzed.Key transcription factors affecting immune-related genes were identified.Cell-cell communication networks in SLE were analyzed.Results:In total,15 hub genes and 4 transcription factors were found in the bulk data.Monocytes and macrophages in GSE81622(SLE)showed more infiltration.There were four cell types were annotated in scRNA sequencing dataset(GSE135779),as follows T cells,monocyte,NK cells and B cells.Immunity-related genes were overexpressed in monocytes.Conclusion:The present study shows that immune-related genes affect SLE through monocytes and play an important role in target organ renal injury. 展开更多
关键词 systemic lupus erythematosus single-cell rna-sequencing data immunity-related genes Lupus nephritis monocytes
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Analysis of Microbial Community Structure and Diversity in Crop Rhizosphere Soil Based on Illumina NovaSeq Sequencing Platform
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作者 Huanhuan JIANG Lu CHEN +4 位作者 Jiamin ZHANG Honghuo HE Xiao CHEN Sainan LI Gang CHEN 《Asian Agricultural Research》 2024年第11期20-24,共5页
[Objectives]To make full use of crop rhizosphere microbial resources.[Methods]Illumina NovaSeq sequencing platform was used to analyze the richness and diversity of microbial community structure in rhizosphere soil of... [Objectives]To make full use of crop rhizosphere microbial resources.[Methods]Illumina NovaSeq sequencing platform was used to analyze the richness and diversity of microbial community structure in rhizosphere soil of rice and maize crops in Baitu Town,Gaoyao District,Zhaoqing City.[Results]A total of 14936 OTUs of bacteria and 1905 OTUs of fungi were obtained from three samples of rice rhizosphere soil,and 13437 OTUs of bacteria and 1413 OTUs of fungi were obtained from three samples of maize rhizosphere soil.The diversity and richness of bacterial communities were higher than those of fungi.There are differences in soil bacterial and fungal communities among different crop samples.The analysis of species with bacteria difference at genus level among crop rhizosphere soil samples showed that 18 genera with significant differences were obtained from 6 samples;species analysis of fungi at the genus level showed that 3 genera with significant differences were obtained from 6 samples.[Conclusions]The research results of this paper have positive significance for the development and utilization of soil resources in Zhaoqing City and the full exploitation of rice and maize rhizosphere microbial resources. 展开更多
关键词 Rhizosphere soil Microbial flora Community diversity illumina NovaSeq sequencing
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利用RNA-Sequencing鉴定大鼠脑缺血-再灌注损伤模型中差异表达的基因 被引量:3
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作者 白波 王春梅 《济宁医学院学报》 2016年第1期1-5,11,共6页
目的利用RNA-Sequencing方法,试图鉴定大鼠脑缺血-再灌注损伤模型中差异表达的基因,为探讨脑缺血-再灌注损伤的分子机制提供实验依据。方法首先利用RNA-Sequencing方法初步鉴定大鼠脑缺血-再灌注损伤模型中差异表达的基因,然后利用生物... 目的利用RNA-Sequencing方法,试图鉴定大鼠脑缺血-再灌注损伤模型中差异表达的基因,为探讨脑缺血-再灌注损伤的分子机制提供实验依据。方法首先利用RNA-Sequencing方法初步鉴定大鼠脑缺血-再灌注损伤模型中差异表达的基因,然后利用生物信息学方法对差异表达基因的功能进行预测分析;再利用RT-PCR和qRT-PCR方法进一步检测差异基因的表达变化。结果与对照组相比,脑缺血-再灌注损伤实验组共鉴定出182个基因差异表达,其中156个基因表达上调,26个基因表达下调;RT-PCR和qRT-PCR方法进一步验证其中3个基因表达上调,2个基因表达下调。结论利用RNA-Sequencing方法可以鉴定大鼠脑缺血-再灌注损伤模型中差异表达的基因,表明这些基因可能参与了脑缺血-再灌注损伤,为进一步揭示脑缺血-再灌注损伤机制奠定了实验基础。 展开更多
关键词 rna-sequencing 缺血-再灌注损伤 基因表达
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基于Illumina MiSeq高通量测序的燕麦种带细菌多样性及功能分析 被引量:1
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作者 张振粉 黄荣 +2 位作者 李向阳 姚博 赵桂琴 《草业学报》 CSCD 北大核心 2023年第7期96-108,共13页
采用高通量测序法,分析7份来自不同地区的燕麦种带细菌群落的细菌丰度、Alpha多样性、Beta多样性和物种组成差异,并采用PICRUSt和FAPROTAX功能预测的方法分析了各种带细菌间的丰度差异。结果显示:1)7份燕麦中共获得5187个细菌可操作分... 采用高通量测序法,分析7份来自不同地区的燕麦种带细菌群落的细菌丰度、Alpha多样性、Beta多样性和物种组成差异,并采用PICRUSt和FAPROTAX功能预测的方法分析了各种带细菌间的丰度差异。结果显示:1)7份燕麦中共获得5187个细菌可操作分类单元(OTUs),主要归属于33个门、180个目和435个属。2)基于OTUs的丰度及注释信息,7份燕麦种带细菌群落中变形菌门、绿弯菌门、酸杆菌门、放线菌门和蓝菌门为优势菌门,立克次氏体目和鞘脂单胞菌目为优势菌目,鞘氨醇单胞菌属、Solibacter和假节杆菌属为优势菌属。3) Alpha多样性和Beta多样性表明不同燕麦品种的细菌群落多样性和群落结构具有较大差异,其中LXY-5具有最大的Alpha多样性。LEFSe分析更进一步显示不同的燕麦品种生物标记的物种不同。4) PICRUSt和FAPROTAX功能预测分析表明,燕麦种带细菌群落主要有代谢、有机系统和人类疾病3个代谢通路,分属于有42个KEGG和24个COG的二级代谢途径;FAPROTAX功能注释后共获得52个生态功能。研究结果为明确燕麦种带细菌多样性及开发新型基因资源提供了理论依据。 展开更多
关键词 illumina MiSeq高通量测序 燕麦种带细菌 生物信息学分析 PICRUSt FAPROTAX
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基于Illumina MiSeq的麋鹿粪样菌群多样性分析 被引量:1
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作者 李俊芳 白冰 +4 位作者 孟庆辉 程志斌 单云芳 刘田 钟震宇 《野生动物学报》 北大核心 2023年第1期98-105,共8页
为探究麋鹿(Elaphurus davidianus)肠道菌群的结构和组成,为麋鹿消化道疾病防治提供有价值的基础数据,应用Illumina MiSeq对4个麋鹿栖息地32只麋鹿粪便样本的16S rRNA的V3—V4可变区进行扩增,结合样本的OTU种类及丰度,用R软件进行聚类... 为探究麋鹿(Elaphurus davidianus)肠道菌群的结构和组成,为麋鹿消化道疾病防治提供有价值的基础数据,应用Illumina MiSeq对4个麋鹿栖息地32只麋鹿粪便样本的16S rRNA的V3—V4可变区进行扩增,结合样本的OTU种类及丰度,用R软件进行聚类和主成分分析(PCA),并计算多样性指数。结果表明:共获得1 438 677条有效序列,平均每个样品有(44 959±12 153)条有效序列;将序列拼接优化,在97%相似度条件下获得31 459个物种分类的OTUs,平均每个样品为(983±240)个OTUs;平均读长为426 bp。对测序数据注释后共获得11个门和74个属,在门水平上,厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes)为优势菌群;优势菌属(相对丰度大于1%)一共有15种,占89%。Alpha多样性物种指数范围区间较大,香农指数为2.42~5.83,辛普森指数为0.007 3~0.148 6,表明不同麋鹿的细菌多样性存在差异。运用主成分分析,将4地的麋鹿粪便样品聚为3个群落,其中石首麋鹿国家级自然保护区、大部分辽宁辽阳千山鹿场样品分别聚在一起,而北京麋鹿生态实验中心、河北滦河上游国家级自然保护区和少量辽宁辽阳千山鹿场样品聚在一起。研究表明,随麋鹿迁出时间的延长,麋鹿肠道菌群聚类分析的远近越明显,可能与迁出地的麋鹿饮食改变有关。 展开更多
关键词 麋鹿 肠道菌群 illumina MiSeq测序 粪便
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基于Illumina平台mNGS技术在老年社区获得性肺炎肺泡灌洗液病原学诊断中的应用 被引量:1
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作者 李兴明 谢秀芳 +5 位作者 王宪刚 李云 罗进 何珍 邓魏岚 胡晓菁 《分子诊断与治疗杂志》 2023年第11期1965-1968,共4页
目的 探讨基于Illumina平台宏基因组二代测序(mNGS)技术在老年社区获得性肺炎(CAP)肺泡灌洗液病原学检查中的应用。方法 选取2022年1月至2022年6月内江第一人民医院收治的疑诊老年CAP患者200例为研究对象,比较肺泡灌洗液mNGS病原体检测... 目的 探讨基于Illumina平台宏基因组二代测序(mNGS)技术在老年社区获得性肺炎(CAP)肺泡灌洗液病原学检查中的应用。方法 选取2022年1月至2022年6月内江第一人民医院收治的疑诊老年CAP患者200例为研究对象,比较肺泡灌洗液mNGS病原体检测与传统细菌培养鉴定法对老年CAP的诊断价值。结果 200例患者经病原学检查共检出阳性154例(77.00%),其中细菌感染119例(59.50%)、病毒感染59例(29.50%)、真菌感染30例(15.00%)、肺炎支原体感染11例(5.50%)、肺炎衣原体感染7例(3.50%),包含混合感染50例(25.00%);mNGS共检出阳性183例(91.5%),其中细菌感染127例(63.50%)、病毒感染96例(48.00%)、真菌感染37例(18.50%)、肺炎支原体感染29例(14.50%)、肺炎衣原体感染15例(750%),包含混合感染75例(37.50%);mNGS阳性检出率、混合感染检测率较传统细菌培养高,差异有统计学意义(χ^(2)=15.845、7.723,P<0.05);mNGS检测时间较传统细菌培养鉴定短,差异有统计学意义(t=86.888,P<0.05);以临床诊断为金标准,mNGS诊断老年CAP的灵敏度、特异度为97.31%、85.71%,传统细菌培养灵敏度、特异度为71.43%、80.64%。结论 基于Illumina平台mNGS对病原体具有较高的检出率,检测时间更短,检测灵敏度、特异度更好,可以为老年CAP临床诊断提供重要依据。 展开更多
关键词 肺泡灌洗液 基因组二代测序 illumina 社区获得性肺炎 细菌培养鉴定
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基于Illumina MiSeq技术的冷鲜肉食品微生物群落多样性分析
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作者 曾宣 《齐齐哈尔大学学报(自然科学版)》 2023年第4期62-67,80,共7页
为了分析冷鲜肉在冷冻过程中微生物群落变化,选取不同冷冻时间的冷鲜肉作为样品,采用Illumina MiSeq技术解析微生物结构,并获取微生物群落多样性分析结果;随着冷鲜肉冷藏时间的增长,样品OTU数量从209下降至98~125。通过分析Chao index与... 为了分析冷鲜肉在冷冻过程中微生物群落变化,选取不同冷冻时间的冷鲜肉作为样品,采用Illumina MiSeq技术解析微生物结构,并获取微生物群落多样性分析结果;随着冷鲜肉冷藏时间的增长,样品OTU数量从209下降至98~125。通过分析Chao index与Shannon index的计算结果可知,冷冻时间较短的试验D组具有更高值。冷鲜肉微生物群落结构中,样品中嗜冷菌属和Oceanisphaera的相对丰度超过89%。微生物群落主成分分析时,冷冻时间较短的样本点与冷冻时间最长的样本点,在PC1水平上处于两个极端,菌群结构变化显著。随着冷鲜肉冷冻处理时间的增长,食品微生物群落多样性大幅下降,但是嗜冷菌属与Oceanisphaera作为优势菌数量开始增加。结果表明,在冷鲜肉食品微生物检测过程中,该方法可以获得更加全面的微生物群落多样性分析结果,快速得出冷鲜肉处理过程中影响较大的优势腐败菌,为后期食品质量提升提供依据。 展开更多
关键词 illumina MiSeq技术 冷鲜肉食品 微生物群落 多样性 DNA提取 数据统计
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基于Illumina Miseq高通量测序技术探究藏茶发酵过程中微生物菌群变化 被引量:1
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作者 邓俊琳 何扬航 +7 位作者 陈建 朱永清 向卓亚 张文会 阎莹莹 夏陈 刘刚 施刘刚 《茶叶通讯》 2023年第1期104-113,共10页
应用Illumina Miseq高通量测序技术,研究藏茶毛茶(MC)、发酵阶段(S1~S5)及成品茶(S6)中的微生物的多样性与群落结构,并从成品茶(S7)中分离纯化出三株优势曲霉进行鉴定。结果表明,在S1~S5阶段,真菌丰度和多样性先降低后增加,而细菌丰度... 应用Illumina Miseq高通量测序技术,研究藏茶毛茶(MC)、发酵阶段(S1~S5)及成品茶(S6)中的微生物的多样性与群落结构,并从成品茶(S7)中分离纯化出三株优势曲霉进行鉴定。结果表明,在S1~S5阶段,真菌丰度和多样性先降低后增加,而细菌丰度和多样性先增加后减少;β多样性分析表明,S1~S5阶段藏茶中微生物组成趋于相近,而毛茶与成品茶均与S1~S5阶段有明显区分。优势真菌为子囊菌门曲霉属,经分离纯化鉴定为冠突曲霉、泡盛曲霉和米曲霉;细菌以变形杆菌、厚壁菌、放线菌和拟杆菌为优势菌,发酵全过程无稳定的优势细菌。 展开更多
关键词 藏茶 渥堆发酵 illumina MiSeq技术 微生物多样性 曲霉属
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基于Illumina PE300高通量测序的海南糟粕醋微生物多样性分析 被引量:3
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作者 吴慧玲 葛英亮 +3 位作者 仲瑞文 许舒雨 孙嘉航 卢琳 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第9期49-58,共10页
目的研究海南糟粕醋中微生物的多样性,分析海南糟粕醋在自然条件下贮藏时的优势菌及风险菌。方法采用Illumina PE300高通量测序技术对海南糟粕醋中细菌和真菌群落进行多样性分析,扩增糟粕醋中细菌的16S rDNA和真菌的ITS序列。结果细菌... 目的研究海南糟粕醋中微生物的多样性,分析海南糟粕醋在自然条件下贮藏时的优势菌及风险菌。方法采用Illumina PE300高通量测序技术对海南糟粕醋中细菌和真菌群落进行多样性分析,扩增糟粕醋中细菌的16S rDNA和真菌的ITS序列。结果细菌多样性测序获得306,600条序列,130,745,424碱基(base pair,bp),505操作分类单元(operational taxonomic units,OTU),可归属为23门(phylum)、51纲(class)、115目(order)、191科(family)、312属(genus)、432种(species);真菌多样性测序获得612,015条序列,132,784,567 bp,27 OTU,可归属为3 phylum、7 class、12 order、18 family、24 genus、25 species。糟粕醋在自然条件下贮藏时,主要细菌属为:乳酸菌属(Lactobacillus)、棒杆菌属(Corynebacteriums)、乳酪短杆菌属(Brevibacterium)、芽孢杆菌属(Bacillus)、葡萄球菌属(Staphylococcus);主要真菌属为:哈萨克斯坦酵母(Kazachstania)、伊萨酵母属(Issatchenkia)。未经灭菌的糟粕醋可能存在的风险菌为:炭疽杆菌(Bacillus anthracis)、伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)、布鲁氏菌(Brucella)、肉毒杆菌(Clostridium botulinum)。结论在糟粕醋中细菌的组成更为复杂,但真菌对糟粕醋品质的影响较大,本研究获得糟粕醋在自然放置条件下微生物菌群的变化,为糟粕醋的贮藏提供理论支持。 展开更多
关键词 illumina PE300测序 糟粕醋 微生物 多样性分析
原文传递
Fast genetic mapping in barley:case studies of cuticle mutants using RNA-sequencing
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作者 XiaoFeng Li Chao Li +2 位作者 Qin Zhou GuoXiong Chen PengShan Zhao 《Research in Cold and Arid Regions》 CSCD 2020年第3期180-188,共9页
Barley(Hordeum vulgare L.)is one of the earliest domesticated crop species and ranked as the fourth largest cereal production worldwide.Forward genetic studies in barley have greatly advanced plant genetics during the... Barley(Hordeum vulgare L.)is one of the earliest domesticated crop species and ranked as the fourth largest cereal production worldwide.Forward genetic studies in barley have greatly advanced plant genetics during the last century;however,most genes are identified by the conventional mapping method.Array genotyping and exome-capture sequencing have also been successfully used to target the causal mutation in barley populations,but these techniques are not widely adopted because of associated costs and partly due to the huge genome size of barley.This review summarizes three mapping cases of barley cuticle mutants in our laboratory with the help of RNA-sequencing.The causal mutations have been successfully identified for two of them and the target genes are located in the pericentromeric regions.Detailed information on the mapping-by-sequencing,mapping-and-sequencing,and RNA-sequencing assisted linkage mapping are presented and some limitations and challenges on the mapping assisted by RNA sequencing are also discussed.The alternative and elegant methods presented in this review may greatly accelerate forward genetics of barley mapping,especially for laboratories without large funding. 展开更多
关键词 BARLEY mapping-by-sequencing rna-sequencing cuticle point mutations
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基于Illumina MiSeq技术分析谷子根际丛枝菌根真菌群落多样性
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作者 段明 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第6期222-229,共8页
为研究谷子(Setaria italica)根际丛枝菌根真菌(AMF)群落的多样性特征,以便充分发掘和利用AMF优势菌群。本试验对土壤进行正常浇水与干旱处理,土壤含水量分别为7.6%和3.7%,并采集谷子(豫谷、安陵和沁黄3个品种)根系及无寄主对照土壤(CK)... 为研究谷子(Setaria italica)根际丛枝菌根真菌(AMF)群落的多样性特征,以便充分发掘和利用AMF优势菌群。本试验对土壤进行正常浇水与干旱处理,土壤含水量分别为7.6%和3.7%,并采集谷子(豫谷、安陵和沁黄3个品种)根系及无寄主对照土壤(CK),获得全部DNA并对其中的18S rRNA基因进行PCR扩增,并运用MiSeq高通量测序技术和生物信息学研究谷子的根际AMF及群落特征。物种多样性分析结果显示,在正常浇水与干旱处理下,谷子根系与CK的OTU数量在1 632~4 290个之间,共检测并鉴定出AMF 126种,隶属1门9属。其中,按优势种的占比高低依次是原囊霉属(Acaulospora)、球囊霉属(Glomus)、类球囊霉属(Paraglomus)和双型囊霉属(Ambispora)。与CK相比,谷子根际AMF群落多样性减少,AMF在原囊霉属水平上丰度显著降低。但正常浇水与干旱处理下,谷子根际AMF群落多样性并未发生显著变化。研究揭示了谷子根际AMF群落组成,主要为球囊霉属;与CK相比,3个谷子品种AMF群落分布在多样性及丰度方面具有普遍的相似性。此外,与正常浇水相比,干旱条件下谷子根际丛枝菌根群落多样性及丰度保持稳定,维持在较高的水平,可保证谷子根系对水分和养分的高效吸收与利用。 展开更多
关键词 谷子 丛枝菌根 illumina Miseq技术 群落多样性
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高温大曲真菌群落结构及其感官特性解析
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作者 王玉荣 侯强川 +5 位作者 田龙新 张振东 黄利科 孔金钊 郝光飞 郭壮 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期56-62,共7页
该研究采用MiSeq高通量测序、电子鼻和电子舌技术对白色和黑色高温大曲的真菌群落结构、风味和滋味品质进行了差异性解析,同时对其微生物群落与风味和滋味指标的相关性进行了分析。测序结果表明,在白色高温大曲中Pichia的平均相对含量... 该研究采用MiSeq高通量测序、电子鼻和电子舌技术对白色和黑色高温大曲的真菌群落结构、风味和滋味品质进行了差异性解析,同时对其微生物群落与风味和滋味指标的相关性进行了分析。测序结果表明,在白色高温大曲中Pichia的平均相对含量显著偏高(P<0.05),Monascus的平均相对含量显著偏低(P<0.05),平均相对含量分别为49.62%和0.32%,而在黑色高温大曲中平均相对含量分别为23.17%和7.50%。此外,坐标分析、聚类分析和正交偏最小二乘判别分析等多元分析表明2种类型高温大曲的微生物类群存在明显差异。线性判别分析效应量(linear discriminant analysis effect size,LEfSe)分析发现,Pichia和Monascus可分别作为白色和黑色高温大曲的生物标志物。电子鼻结果显示,白色高温大曲中的烷烃类物质响应值显著高于黑色高温大曲(P<0.05)。电子舌结果显示,相较于黑色高温大曲,白色高温大曲的鲜味、丰度和咸味显著偏高(P<0.05),而酸味显著偏低(P<0.05)。相关性分析发现,高温大曲优势真菌属与滋味指标之间存在显著相关性(P<0.05),而与风味指标之间的相关性不显著(P>0.05)。由此可见,白色和黑色高温大曲的真菌类群和品质指标均存在明显差异,且高温大曲真菌类群与感官指标之间具有一定相关性。 展开更多
关键词 高温大曲 高通量测序 真菌群落结构 相关性
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Illumina MiSeq测序平台测定蒙古羊瘤胃液相和固相菌群多样性 被引量:19
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作者 曾燕 简平 +3 位作者 倪学勤 周毅 祝辉 曾东 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期3256-3262,共7页
本研究旨在比较蒙古羊瘤胃液相和固相细菌菌群多样性。应用Illumina Miseq测序平台的16S r RNA基因扩增子技术对采集自5只蒙古羊的瘤胃液相和固相样品进行高通量测序,采用UPARSE-操作分类单元(OTU)法和非加权组平均(UPGMA)法分析试验结... 本研究旨在比较蒙古羊瘤胃液相和固相细菌菌群多样性。应用Illumina Miseq测序平台的16S r RNA基因扩增子技术对采集自5只蒙古羊的瘤胃液相和固相样品进行高通量测序,采用UPARSE-操作分类单元(OTU)法和非加权组平均(UPGMA)法分析试验结果。结果表明,共获得91 971条序列和15 321个OTU,平均每个样品有13 138条序列和2 189个OTU。液相与固相样品相比:门水平分类上存在显著性差异的优势菌群为拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)(P<0.05),拟杆菌门在液相和固相样品中的比例分别为67%和45%;属水平分类上存在显著性差异的优势菌群为普氏菌属(Prevotella)和1种未鉴定(unknown)的属(P<0.05),液相样品优势菌群为普氏菌属,所占比例为53%,而固相样品优势菌群来自1种未鉴定的属,所占比例为32%;种水平分类上存在显著性差异的是栖瘤胃普雷沃菌(Prevotella ruminicola)(P<0.05),在液相和固相样品中所占的比例分别为41%和11%。与液相样品相比,固相样品的alpha多样性较好;主成分分析(PCA)和主坐标分析(PCo A)显示来自同一动物个体的瘤胃液相和固相样品聚类在一起。结果提示,蒙古羊瘤胃液相和固相样品均具有丰富的细菌菌群;与液相样品相比,固相样品细菌的多样性更好。 展开更多
关键词 illumina MiSeq 液相 固相 细菌 多样性
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Illumina测序16S rRNA标签法分析细菌性阴道病患者阴道菌群多样性 被引量:18
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作者 许苏容 宗利丽 +3 位作者 刘木彪 何彦 黄雪梅 周宏伟 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期672-677,共6页
目的从菌群总体角度分析和比较健康育龄期女性和细菌性阴道病(BV)患者阴道菌群差异。方法采集临床Amsel标准及Nugent评分筛选的37例BV患者及37例健康育龄期女性阴道穹窿分泌物标本,提取总基因组DNA,对16S rRNA V6区基因进行扩增,所有扩... 目的从菌群总体角度分析和比较健康育龄期女性和细菌性阴道病(BV)患者阴道菌群差异。方法采集临床Amsel标准及Nugent评分筛选的37例BV患者及37例健康育龄期女性阴道穹窿分泌物标本,提取总基因组DNA,对16S rRNA V6区基因进行扩增,所有扩增的PCR产物经IIlumina测序后,通过BIPES、UCHIME、TSC、GAST最终得到样品的物种信息。结果健康育龄期女性阴道分泌物乳酸杆菌占95%以上,单独以惰性乳酸杆菌或卷曲乳酸杆菌为主,或者两者比例相当,同时存在少量加德纳氏菌属,颗粒链球菌属,链球菌属,普氏菌菌属,埃希氏杆菌属和其它菌属;30例BV患者阴道菌群Alpha多样性明显增加(P<0.001),Beta多样性也发生了明显变化,表现为乳酸杆菌明显减少,其相对比例从45%到1%(24例),以惰性乳酸杆菌为主,部分患者(6例)甚至未检出,同时加德纳氏菌属,普氏菌菌属,颗粒链球菌属,厌氧球菌,微单胞菌属,Peptoniphilus.harei-消化链球菌属,戴阿李斯特杆菌属等相对丰富度增加,不同于既往研究的是7例BV患者以少见的格氏乳杆菌,嗜酸乳杆菌为优势菌群,约占75%~50%。结论健康育龄女性阴道菌群以乳酸杆菌占绝对优势,单独以惰性乳酸杆菌或卷曲乳酸杆菌为主,或者两者相当,并与多种微生物并存;大部分BV患者阴道菌群表现为乳酸杆菌显著减少甚至缺失,小部分BV患者以少见的格氏乳酸杆菌、嗜酸乳酸杆菌为优势菌群。 展开更多
关键词 illumina测序 BIPES 细菌性阴道病 阴道菌群 16S RRNA
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基于Illumina MiSeq技术分析腌干鱼加工过程中微生物群落多样性 被引量:25
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作者 吴燕燕 钱茜茜 +3 位作者 李来好 陈胜军 邓建朝 李春生 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1-8,共8页
为研究传统和乳酸菌法加工腌干鱼过程微生物的变化规律,为优化腌干鱼工艺提供理论依据,采用MiSeq测序技术,研究腌干鱼在不同加工阶段的细菌多样性,结果表明:腌干鱼加工过程微生物种类丰富,主要分为三大类:拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚... 为研究传统和乳酸菌法加工腌干鱼过程微生物的变化规律,为优化腌干鱼工艺提供理论依据,采用MiSeq测序技术,研究腌干鱼在不同加工阶段的细菌多样性,结果表明:腌干鱼加工过程微生物种类丰富,主要分为三大类:拟杆菌门(Bacteroidetes)、厚壁菌门(Firmicutes)和变性菌门(Proteobacteria);蓝圆鲹初始菌相中优势细菌为肠杆菌科(Enterbacteriaceae)、肠球菌科(Enterococcactae)、假单胞菌科(Pseudomonadaceae)和希瓦氏菌科(Shewanellaceae);海鲈初始菌相中优势菌主要是气单胞菌科(Aeromonadaceae)、芽孢杆菌科(Bacillaceae)、葡萄球菌科(Staphylococcaceae)、丛毛单胞菌科(Comamonadaceae)、肠杆菌科(Enterbacteriaceae)、肠球菌科(Enterococcaceae)、摩式摩根菌科(Moraganellaceae)、链球菌科(Streptococcaceae)等。传统腌制加工过程中菌相比较单一,优势菌主要是弧菌科(Vibrionaceae)、葡萄球菌科(Staphylococcaceae)、假单胞菌科(Pseudomonadaceae)和动性球菌科(Planococcaceae);而接种乳酸菌发酵后,加工过程中细菌多样性呈现增加趋势,并且乳酸菌成为优势菌,促进了微杆菌科(Exiguobacteracea),葡萄球菌(Staphylococcaceae)等优势菌的繁殖;此外还检测到气单胞菌(Aeromonadaceae)和乳杆菌(Lactobacillaceae)等传统蓝圆鲹腌制加工过程中没有出现的菌。海鲈在腌制加工过程中细菌多样性明显高于蓝圆鲹,乳酸菌法腌制加工过程中细菌多样性明显增加。 展开更多
关键词 腌干鱼 illumina MiSeq测序 微生物多样性 优势菌
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基于Illumina高通量测序的泡桐转录组研究 被引量:15
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作者 邓敏捷 董焱鹏 +2 位作者 赵振利 张晓申 范国强 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第6期30-36,共7页
利用新一代高通量测序技术平台Illumina Solexa对泡桐进行转录组测序和数据denovo组装,并对得到的unigene进行功能注释、分类及代谢通路分析。结果表明,N50值为2278bp、平均长度为1410bp的泡桐unigene共有188019条,将其与NCBI的Nr和Swis... 利用新一代高通量测序技术平台Illumina Solexa对泡桐进行转录组测序和数据denovo组装,并对得到的unigene进行功能注释、分类及代谢通路分析。结果表明,N50值为2278bp、平均长度为1410bp的泡桐unigene共有188019条,将其与NCBI的Nr和Swiss-Prot数据库比对后发现,分别有120808条和85880条unigene与其他物种的基因具有同源性。利用COG数据库可将有关的41914条泡桐unigene分成25类,KEGG数据库分析发现共有43553个unigene参与215种代谢通路。找到与木质素合成相关的泡桐unigene。 展开更多
关键词 泡桐 转录组 illumina高通量测序 从头组装
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采用Illumina MiSeq测序技术分析断奶幼兔盲肠微生物群落的多样性 被引量:13
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作者 许宇静 张煜坤 +2 位作者 沈雪梅 李晶 徐秀容 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期2793-2802,共10页
本试验旨在采用Illumina MiSeq测序技术分析断奶幼兔盲肠微生物群落的多样性。选取30窝同日出生、胎次相同和平均窝重相近的健康新生仔兔,于14日龄开始补饲,断奶当日(30日龄)从30窝仔兔中选取48只体重相近的健康幼兔作为试验兔,饲喂不... 本试验旨在采用Illumina MiSeq测序技术分析断奶幼兔盲肠微生物群落的多样性。选取30窝同日出生、胎次相同和平均窝重相近的健康新生仔兔,于14日龄开始补饲,断奶当日(30日龄)从30窝仔兔中选取48只体重相近的健康幼兔作为试验兔,饲喂不添加抗生素的基础饲粮。分别于断奶当日及断奶后1、2和3周随机选取6只健康幼兔屠宰,无菌采集盲肠内容物,从中选取3个样本提取微生物基因组总DNA,采用Illumina MiSeq测序技术检测其中的微生物群落多样性。结果显示:1)健康幼兔盲肠微生物群落α多样性指数指标(ACE值、Chao1值、Shannnon值)随日龄的增长有升高的趋势(P<0.10)。2)不同日龄健康幼兔盲肠微生物各菌门的相对丰度差异不显著(P>0.05),且均主要由厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门和疣微菌门组成;在科水平上,厚壁菌门主要由瘤胃球菌科和毛螺旋菌科组成,拟杆菌门主要由拟杆菌科和紫单胞菌科组成;在属水平上,拟杆菌属、Barnesiella、Akkermansia、普雷沃氏菌属和4种未知菌属为优势菌属;拟杆菌属和Parabacteroides在断奶当天的相对丰度较高,且与其他日龄组差异显著(P<0.05)。3)健康幼兔盲肠中均存在乳杆菌属,且相对丰度在各日龄组间差异不显著(P>0.05)。由此得出,断奶时健康幼兔盲肠微生物区系已基本建立,相对丰度最大的优势菌属为拟杆菌属,但断奶后随着日龄的增长,微生物组成趋于复杂。 展开更多
关键词 断奶幼兔 illumina MiSeq测序 盲肠 微生物群落 多样性
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