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中国人Brugada综合征SCN5A基因突变K317N的定点诱变及其载体构建
被引量：
1
1
作者
易绍东
孟素荣
+2 位作者
崔英凯
陈哲明
彭健
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第11期1139-1142,共4页
目的对我们发现的中国人Brugada综合征新的SCN5A基因突变K317N进行体外定点诱变研究,并构建携带有基因突变K317N的pRc/CMV-hH1的表达载体。方法采用PCR定点突变技术,根据突变位置附近的两个单一限制性内切酶位点AgeI/Sse8387I设计一对...
目的对我们发现的中国人Brugada综合征新的SCN5A基因突变K317N进行体外定点诱变研究,并构建携带有基因突变K317N的pRc/CMV-hH1的表达载体。方法采用PCR定点突变技术,根据突变位置附近的两个单一限制性内切酶位点AgeI/Sse8387I设计一对定点诱变引物,将突变位点设计在引物上,通过PCR扩增,使扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pRc/CMV-hH1载体中。结果DNA测序表明,在预期位点巳经发生突变,SCN5A基因在第317密码子由赖氨酸(K)突变为天冬氨酸(N),成功实现定点诱变。结论PCR技术诱导定点突变,准确、高效。pRc/CMV-hH1(K317N)的成功构建,为进一步进行该突变的结构与功能研究奠定了基础。
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关键词
中国人
BRUGADA综合征
SCN5A
基因突变
k317n
定点诱变
载体构建
下载PDF
职称材料
题名
中国人Brugada综合征SCN5A基因突变K317N的定点诱变及其载体构建
被引量：
1
1
作者
易绍东
孟素荣
崔英凯
陈哲明
彭健
机构
第一军医大学南方医院心内科
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第11期1139-1142,共4页
基金
国家自然科学基金(30278368)
广东省自然科学基金(20042)~~
文摘
目的对我们发现的中国人Brugada综合征新的SCN5A基因突变K317N进行体外定点诱变研究,并构建携带有基因突变K317N的pRc/CMV-hH1的表达载体。方法采用PCR定点突变技术,根据突变位置附近的两个单一限制性内切酶位点AgeI/Sse8387I设计一对定点诱变引物,将突变位点设计在引物上,通过PCR扩增,使扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pRc/CMV-hH1载体中。结果DNA测序表明,在预期位点巳经发生突变,SCN5A基因在第317密码子由赖氨酸(K)突变为天冬氨酸(N),成功实现定点诱变。结论PCR技术诱导定点突变,准确、高效。pRc/CMV-hH1(K317N)的成功构建,为进一步进行该突变的结构与功能研究奠定了基础。
关键词
中国人
BRUGADA综合征
SCN5A
基因突变
k317n
定点诱变
载体构建
Keywords
polymerase chain reaction
site-directed mutagenesis
SCN5A
pRc/CMV-hH1
Brugada syndrome
分类号
R541.7 [医药卫生—心血管疾病]
R394 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
中国人Brugada综合征SCN5A基因突变K317N的定点诱变及其载体构建
易绍东
孟素荣
崔英凯
陈哲明
彭健
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003
1
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