目的对一个中国汉族手足复发型单纯型大疱性表皮松解症(Weber-Cockayne type epidermolytic bullosa simplex,EBS-WC)家系进行致病基因检测,探讨KLHL24基因和KRT14基因在EBS发病机制中的相关性,为产前诊断和遗传咨询提供依据。方法提取...目的对一个中国汉族手足复发型单纯型大疱性表皮松解症(Weber-Cockayne type epidermolytic bullosa simplex,EBS-WC)家系进行致病基因检测,探讨KLHL24基因和KRT14基因在EBS发病机制中的相关性,为产前诊断和遗传咨询提供依据。方法提取该家系中4例患者以及5例健康人外周血基因组DNA,扩增KRT5和KRT14基因的全部外显子,以及KLHL24基因的启动子,并测序。以寻常性银屑病外显子测序研究中的676例正常人群为对照。收集先证者皮损组织进行病理检查。结果先证者病理诊断支持单纯型大疱性表皮松解症。所有患者均出现KRT14基因第6外显子第1162位错义突变(c.1162C>T),导致388位胞嘧啶(C)被胸腺嘧啶(T)替换,角蛋白结构中精氨酸被半胱氨酸取代。家系中的正常人和676例无血缘关系的健康人没有发现相同的碱基改变。家系中没有发现KLHL24基因起始密码子突变。结论KRT14基因第6外显子的错义突变是该中国汉族EBS-WC家系患者的致病基因。展开更多
[目的]探讨蒽醌四环类化合物调控甲状腺癌细胞增殖的机制。[方法]高通量测序检测人甲状腺滤泡上皮细胞和人甲状腺癌组织源细胞中的差异表达基因。选择15个甲状腺癌细胞中均表达上调的基因,将其与蒽醌四环类化合物进行分子对接,筛选抑制...[目的]探讨蒽醌四环类化合物调控甲状腺癌细胞增殖的机制。[方法]高通量测序检测人甲状腺滤泡上皮细胞和人甲状腺癌组织源细胞中的差异表达基因。选择15个甲状腺癌细胞中均表达上调的基因,将其与蒽醌四环类化合物进行分子对接,筛选抑制甲状腺癌细胞增殖的潜在化合物。[结果]差异基因KRT14在这15个癌细胞中均上调(P<0.05)。过表达KRT14后,甲状腺癌细胞TPC-1的增殖水平上升(1.92±0.21 vs 2.69±0.12,P<0.05)。敲低KRT14后,甲状腺癌细胞TPC-1的增殖水平下降(1.90±0.10 vs 1.32±0.20,P<0.05)。1μmol/L蒽醌类化合物处理后,对接结果阳性的doxorubicin的抑制甲状腺癌细胞TPC-1的增殖效果最明显(1.30±0.20 vs 0.33±0.01,P<0.05)。分子对接结果显示doxorubicin与KRT14的K352、E356、N357、E360存在潜在结合。构建甲状腺癌细胞TPC-1 KRT14敲除细胞系后,再过表达KRT14野生型和KRT14突变型(突变上述位点)。KRT14-MT过表达的甲状腺癌细胞TPC-1对doxorubicin的敏感性降低(P<0.05)。[结论]蒽醌四环类化合物doxorubicin能够与KRT14的K352、E356、N357、E360位点结合,减少甲状腺癌细胞TPC-1的增殖水平。展开更多
文摘目的对一个中国汉族手足复发型单纯型大疱性表皮松解症(Weber-Cockayne type epidermolytic bullosa simplex,EBS-WC)家系进行致病基因检测,探讨KLHL24基因和KRT14基因在EBS发病机制中的相关性,为产前诊断和遗传咨询提供依据。方法提取该家系中4例患者以及5例健康人外周血基因组DNA,扩增KRT5和KRT14基因的全部外显子,以及KLHL24基因的启动子,并测序。以寻常性银屑病外显子测序研究中的676例正常人群为对照。收集先证者皮损组织进行病理检查。结果先证者病理诊断支持单纯型大疱性表皮松解症。所有患者均出现KRT14基因第6外显子第1162位错义突变(c.1162C>T),导致388位胞嘧啶(C)被胸腺嘧啶(T)替换,角蛋白结构中精氨酸被半胱氨酸取代。家系中的正常人和676例无血缘关系的健康人没有发现相同的碱基改变。家系中没有发现KLHL24基因起始密码子突变。结论KRT14基因第6外显子的错义突变是该中国汉族EBS-WC家系患者的致病基因。
文摘[目的]探讨蒽醌四环类化合物调控甲状腺癌细胞增殖的机制。[方法]高通量测序检测人甲状腺滤泡上皮细胞和人甲状腺癌组织源细胞中的差异表达基因。选择15个甲状腺癌细胞中均表达上调的基因,将其与蒽醌四环类化合物进行分子对接,筛选抑制甲状腺癌细胞增殖的潜在化合物。[结果]差异基因KRT14在这15个癌细胞中均上调(P<0.05)。过表达KRT14后,甲状腺癌细胞TPC-1的增殖水平上升(1.92±0.21 vs 2.69±0.12,P<0.05)。敲低KRT14后,甲状腺癌细胞TPC-1的增殖水平下降(1.90±0.10 vs 1.32±0.20,P<0.05)。1μmol/L蒽醌类化合物处理后,对接结果阳性的doxorubicin的抑制甲状腺癌细胞TPC-1的增殖效果最明显(1.30±0.20 vs 0.33±0.01,P<0.05)。分子对接结果显示doxorubicin与KRT14的K352、E356、N357、E360存在潜在结合。构建甲状腺癌细胞TPC-1 KRT14敲除细胞系后,再过表达KRT14野生型和KRT14突变型(突变上述位点)。KRT14-MT过表达的甲状腺癌细胞TPC-1对doxorubicin的敏感性降低(P<0.05)。[结论]蒽醌四环类化合物doxorubicin能够与KRT14的K352、E356、N357、E360位点结合,减少甲状腺癌细胞TPC-1的增殖水平。
