FHL2蛋白对心血管系统的调控作用 被引量：1

1

作者 余宏 马青艳 林吉进 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期3662-3664,共3页

由4个半LIM 结构域组成的FHL家族蛋白（four and a half LIM domains protein）包括FHL1、FHL2、FHL3、FHT4 和ACT.FHL2蛋白参与多种蛋白质的相互作用以及多种转录因子、骨架蛋白、酶等的调控作用.这些作用已经发现在包括心律失常、心... 由4个半LIM 结构域组成的FHL家族蛋白（four and a half LIM domains protein）包括FHL1、FHL2、FHL3、FHT4 和ACT.FHL2蛋白参与多种蛋白质的相互作用以及多种转录因子、骨架蛋白、酶等的调控作用.这些作用已经发现在包括心律失常、心肌肥厚、动脉粥样硬化和心血管新生成等方面充当各种重要的角色.而心血管系统是一个精细而复杂的调控系统,心肌拥有复杂、内在的机制来调控相应的心肌重构.很多类型的蛋白,包括结构和信号网络,用于维持机体内稳态以及对环境压力的响应. 展开更多

关键词 心血管系统 调控作用 l2蛋白 动脉粥样硬化 FHl2 心肌肥厚 家族蛋白 转录因子

下载PDF 职称材料

染色质免疫沉淀技术分析HePG2细胞TCF7L2蛋白与IDE基因转录启动子的结合 被引量：1

2

作者 许丹 任伟 +1 位作者 郑晓雅 毕健琨 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期54-58,共5页

TCF7L2是一种重要的转录因子,通过Wnt信号途径,调节葡萄糖代谢.胰岛素降解酶(IDE)是细胞水平催化胰岛素降解的最关键的酶,与2型糖尿病(T2DM)高血糖、胰岛素抵抗、高胰岛素血症密切相关.为了检测HePG2细胞内转录因子TCF7L2与IDE基因启动... TCF7L2是一种重要的转录因子,通过Wnt信号途径,调节葡萄糖代谢.胰岛素降解酶(IDE)是细胞水平催化胰岛素降解的最关键的酶,与2型糖尿病(T2DM)高血糖、胰岛素抵抗、高胰岛素血症密切相关.为了检测HePG2细胞内转录因子TCF7L2与IDE基因启动子区的结合情况,采用染色质免疫沉淀技术结合PCR技术检测IDE基因启动子序列.结果表明,在特异性TCF7L2抗体免疫沉淀的DNA片段中扩增出IDE基因启动子序列,因此证实在HePG2细胞内,TCF7L2蛋白可与IDE基因转录启动子的特异区域结合,进而可能参与IDE基因的表达调控. 展开更多

关键词 染色质免疫沉淀:TCF7l2蛋白:IDE基因

下载PDF 职称材料

HPV16　L1／L2蛋白单克隆抗体的制备

3

作者 刘鈺 耿宜萍 +2 位作者 刘培军 王一理 司履生 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期32-34,共3页

用真核表达的ＨＰＶ１６Ｌ１／Ｌ２蛋白作为抗原，经免疫、融合、选择性培养、克隆化等过程，我们建立了两株抗ＨＰＶ１６Ｌ１／Ｌ２蛋白的杂交瘤细胞株（另有数株仍在建株中）。免疫斑点法检测证明，它们产生的抗体，只与ＨＰＶ１６Ｌ... 用真核表达的ＨＰＶ１６Ｌ１／Ｌ２蛋白作为抗原，经免疫、融合、选择性培养、克隆化等过程，我们建立了两株抗ＨＰＶ１６Ｌ１／Ｌ２蛋白的杂交瘤细胞株（另有数株仍在建株中）。免疫斑点法检测证明，它们产生的抗体，只与ＨＰＶ１６Ｌ１／Ｌ２蛋白起反应，而不与ＨＰＶ１６Ｅ６、Ｅ７蛋白、人血清蛋白和牛血清蛋白起反应。另外，免疫组化试验证明，这种抗体可应用于临床ＨＰＶ１６感染的检验，具有敏感、特异、准确、快捷、经济的优点。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 l1/l2蛋白 单克隆抗体

原文传递

100例肺腺癌组织中ALDH1L2蛋白的表达

4

作者 文韬 曹小庆 +1 位作者 韩毅 刘志东 《中国药业》 CAS 2017年第A01期133-134,共2页

目的探究ALDH1L2蛋白在肺腺癌组织中的表达。方法将2013年7月至2017年7月期间接收并行手术治疗100例肺腺癌患者,设为研究组。将手术切除的肺腺癌标本用免疫组织化学法染色存档蜡块,并将同期收集的100例癌旁肺组织进行染色观察,设为对照... 目的探究ALDH1L2蛋白在肺腺癌组织中的表达。方法将2013年7月至2017年7月期间接收并行手术治疗100例肺腺癌患者,设为研究组。将手术切除的肺腺癌标本用免疫组织化学法染色存档蜡块,并将同期收集的100例癌旁肺组织进行染色观察,设为对照组,比较组间ALDHlL2蛋白的表达情况。结果肺癌组织中的ALDH1L2蛋白阳性表达率明显要高于癌旁组织组(P<0.05),且表达跟TNM分期、肺腺癌分化程度、既往吸烟史等因素相关。结论通过对ALDH1L2蛋白表达的染色,可以对肺腺癌组织预后进行评价。该项表达可能参与肺腺癌干细胞功能的调节与维持,可作为研究肺腺癌的潜在靶点。 展开更多

关键词 AlDH1l2蛋白 肺腺癌组织 表达

下载PDF 职称材料

猴痘病毒E2L蛋白的表达、纯化及免疫原性评价

5

作者 贾梦乐 熊嘉琦 +6 位作者 杨领弟 王毅豪 孙静婷 王婷 黎美凤 孔令保 彭棋 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3056-3063,共8页

【目的】构建猴痘病毒E2L蛋白原核表达载体,经诱导表达及纯化鉴定后免疫接种昆明小鼠评价其免疫原性,为猴痘病毒诊断试剂、疫苗和特异性治疗药物的研发打下基础。【方法】根据GenBank已公布的猴痘病毒基因组序列优化密码子后合成E2L基因... 【目的】构建猴痘病毒E2L蛋白原核表达载体,经诱导表达及纯化鉴定后免疫接种昆明小鼠评价其免疫原性,为猴痘病毒诊断试剂、疫苗和特异性治疗药物的研发打下基础。【方法】根据GenBank已公布的猴痘病毒基因组序列优化密码子后合成E2L基因,将其克隆至表达载体pET-28a(+)上构建原核表达载体pET-28a-E2L,然后转化大肠杆菌BL21(DE3)受态细胞,采用控制变量的方法对融合蛋白最佳诱导表达条件进行优化,通过SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定。融合蛋白经His-Bind柱亲和层析纯化后,经腹腔注射免疫昆明小鼠,从免疫当天(第0 d)开始每隔7 d通过断尾法采集昆明小鼠血清1次,采用ELISA检测血清抗体效价。【结果】以构建的原核表达载体pET-28a-E2L转化BL21(DE3)受态细胞后,经IPTG诱导,能成功表达获得融合蛋白E2L,且主要以包涵体的形式进行表达。融合蛋白E2L的最佳诱导表达条件为40℃下以1.0 mmol/L IPTG诱导16 h,通过His-Bind柱亲和层析纯化时的最佳咪唑洗脱浓度为100 mmol/L。昆明小鼠免疫试验结果表明,纯化后的融合蛋白E2L能诱导昆明小鼠产生较高水平的体液免疫,至免疫第42 d昆明小鼠血清仍然维持较高抗体水平,抗体效价高达1∶70400,说明融合蛋白E2L具有良好的免疫原性。【结论】猴痘病毒E2L蛋白在原核表达系统能实现高效表达,且以纯化后的融合蛋白E2L免疫昆明小鼠能产生较强的体液免疫,表明具有良好的免疫原性,可用于新型猴痘病毒检测方法及预防疫苗的研发。 展开更多

关键词 猴痘病毒 E2l蛋白 原核表达 免疫原性

下载PDF 职称材料

58型人乳头瘤病毒L2蛋白的原核表达、纯化及单克隆抗体的制备 被引量：2

6

作者 林洁 吕琦 +2 位作者 童亮 刘芳 马岚 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期398-403,共6页

目的原核表达并纯化我国高发的致宫颈癌58型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)次要衣壳蛋白L2,并制备其单克隆抗体。方法从含有HPV-58基因组的质粒pHPV58中扩增L2基因,插入改构的原核表达载体pGEX-KGV中,转化大肠杆菌BL21(DE3),... 目的原核表达并纯化我国高发的致宫颈癌58型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)次要衣壳蛋白L2,并制备其单克隆抗体。方法从含有HPV-58基因组的质粒pHPV58中扩增L2基因,插入改构的原核表达载体pGEX-KGV中,转化大肠杆菌BL21(DE3),乳糖诱导表达,透析复性并亲和层析纯化重组蛋白,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并对其进行鉴定。结果重组表达质粒pGEX-KGV-HPV58 L2经双酶切和测序证明构建正确;表达的重组蛋白主要以包涵体形式存在,表达量可占菌体总蛋白的15.5%;纯化的重组蛋白纯度可达95%;共获得10株抗HPV-58 L2的高效价单克隆抗体。结论已成功原核表达、纯化了HPV-58 L2重组蛋白,并制备了单克隆抗体,为下一步HPV-58 L2蛋白抗原表位的研究以及相关预防性抗体药物和广谱重组疫苗的开发奠定了基础。 展开更多

关键词 58型人乳头瘤病毒 l2蛋白 原核细胞 基因表达 蛋白质复性 抗体 单克隆

原文传递

人乳头瘤病毒6b型晚期蛋白L_2免疫反应表位的确定

7

作者 于修平 戴景宜 +3 位作者 赵蔚明 董杰德 周亚滨 袁晓霞 《中国病毒学》 CSCD 1995年第3期228-231,共4页

人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）含有２个晚期开放读码框（ＯＲＦ），Ｌ＿２ＯＲＦ编码的蛋白具有型特异性。本研究用能表达产生完整ＨＰＶ６ｂＬ＿２蛋白的质粒ｐ６ｂＬ＿２ＮＸ，采取核酸外切酶Ⅲ定向连续次级克隆的方法，制备了一系列一端逐... 人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）含有２个晚期开放读码框（ＯＲＦ），Ｌ＿２ＯＲＦ编码的蛋白具有型特异性。本研究用能表达产生完整ＨＰＶ６ｂＬ＿２蛋白的质粒ｐ６ｂＬ＿２ＮＸ，采取核酸外切酶Ⅲ定向连续次级克隆的方法，制备了一系列一端逐渐删切的ＤＮＡ片段，诱生一组从Ｃ端至Ｎ瑞依次减少的Ｌ＿２蛋白与相应血清作免疫印迹实验，最小的仍保持阳性反应的多肽即含有抗原表位，实验结果ＨＰＶ６ｂＬ＿２蛋白的核酸编码区位于５４８１－５５０６之间，其相应氨基酸序列是ＥＰＧＩＮＰＴＱ。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 6b型 l2蛋白 免疫反应表位

下载PDF 职称材料

三氧化二砷诱导豚鼠QT间期延长及其对L型Ca^(2+)通道蛋白mRNA表达的影响 被引量：6

8

作者 王晓慧 孙宏丽 +5 位作者 霍蓉 焦军东 孙建平 董德利 吕延杰 杨宝峰 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2007年第2期89-91,共3页

目的观察三氧化二砷(As2O3)对豚鼠心脏QT间期的影响,并初步探讨其对L型通道蛋白mRNA表达的影响。方法将豚鼠随机分为4组,分别为正常对照组、As2O3大、中、小剂量组。实验组豚鼠静脉给予不同剂量的As2O3(大剂量组1.6mg/kg、中剂量组0.8mg... 目的观察三氧化二砷(As2O3)对豚鼠心脏QT间期的影响,并初步探讨其对L型通道蛋白mRNA表达的影响。方法将豚鼠随机分为4组,分别为正常对照组、As2O3大、中、小剂量组。实验组豚鼠静脉给予不同剂量的As2O3(大剂量组1.6mg/kg、中剂量组0.8mg/kg和小剂量组0.4mg/kg),分别测量不同时间点的心电图,观察QTc(校正的QT间期)的变化。提取心肌组织总RNA,用RT-PCR方法观察As2O3对豚鼠心肌L型Ca2+通道蛋白mRNA表达的影响。结果在2h的观察时间内,0.8mg/kg和1.6mg/kg As2O3分别使QTc从对照组的(324±20)ms延长到(368±29)ms(P<0.01)和(388±31)ms(P<0.01)。RT-PCR结果显示1.6mg/kg As2O3可以使豚鼠心肌L型钙通道mRNA表达增强(与对照组相比,P<0.01)。结论As2O3可引起豚鼠心脏QT间期延长,其机制可能与增强L型钙通道蛋白mRNA表达有关。 展开更多

关键词 三氧化二砷 QT间期 l型Ca^2%PlUS%通道蛋白 MRNA表达

下载PDF 职称材料

表达人乳头瘤病毒58型L1、L2壳蛋白的非复制型重组痘苗病毒疫苗株的构建 被引量：1

9

作者 田厚文 韩立群 +3 位作者 任皎 骆卫峰 陆振华 阮力 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期222-226,共5页

采用PCR定点突变方法 ,对HPV5 81L1基因中痘苗病毒早期基因转录终止信号TTTTTNT结构进行修饰 ,并保留氨基酸不变。选用非复制型重组痘苗病毒为载体 ,将修饰的L1基因 1 5kb和L2基因 1 4kb分别插入痘苗病毒表达载体 pJSD的 7 5k和H6早... 采用PCR定点突变方法 ,对HPV5 81L1基因中痘苗病毒早期基因转录终止信号TTTTTNT结构进行修饰 ,并保留氨基酸不变。选用非复制型重组痘苗病毒为载体 ,将修饰的L1基因 1 5kb和L2基因 1 4kb分别插入痘苗病毒表达载体 pJSD的 7 5k和H6早期启动子之后 ,使之与非复制型重组痘苗病毒在TK区重组。经单斑筛选纯化 ,获得共表达HPV5 8L1、L2晚期蛋白的非复制型重组痘苗病毒疫苗实验株。该病毒在CEF细胞上连续传至第15代 ,经斑点杂交分析 ,重组痘苗病毒基因组中有L1和L2基因插入 ;经Westernblot检测 ,重组病毒能稳定表达HPV5 81L1及L2蛋白。此结果为HPV5 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒58型 l1 l2壳蛋白 非复制型 重组痘苗病毒 疫苗株 基因诱变 载体 宫颈癌

下载PDF 职称材料

表达羊口疮病毒B2L蛋白重组小反刍兽疫病毒的拯救 被引量：3

10

作者 刘拂晓 孙成友 +1 位作者 李岭 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2019年第10期71-77,共7页

羊口疮(传染性脓疱)和小反刍兽疫的病原体分别为羊口疮病毒(orf virus,ORFV)和小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)。如果通过反向遗传技术进行基因修饰,PPRV可成为表达外源蛋白的有效载体。ORFV含有1个具有高免疫... 羊口疮(传染性脓疱)和小反刍兽疫的病原体分别为羊口疮病毒(orf virus,ORFV)和小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)。如果通过反向遗传技术进行基因修饰,PPRV可成为表达外源蛋白的有效载体。ORFV含有1个具有高免疫原性的B2L蛋白。本研究首先构建了含B2L基因开放阅读框的重组PPRV cDNA clone,然后通过反向遗传技术,拯救了一株表达B2L蛋白的重组PPRV。试验表明,该重组病毒的生长动力学类似其母源病毒;Western blot和质谱分析表明,该重组PPRV可在细胞内表达B2L蛋白。该研究为羊口疮和小反刍兽疫二联疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 重组小反刍兽疫病毒 羊口疮病毒 反向遗传 B2l蛋白 蛋白表达

下载PDF 职称材料

日本血吸虫组织蛋白酶L2(SjCL2)基因巴氏毕赤酵母表达载体的构建 被引量：2

11

作者 易冰 何蔼 +6 位作者 雷智刚 郑小英 张瑞林 孟锦绣 申川军 李卓雅 詹希美 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期390-393,共4页

目的　扩增SjCL2基因 ,构建巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB -SjCL2 ,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础。方法　运用RT -PCR技术 ,从日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫总RNA中扩增获得SjCL2基因 ;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZ... 目的　扩增SjCL2基因 ,构建巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB -SjCL2 ,为进一步研究其蛋白酶的功能奠定基础。方法　运用RT -PCR技术 ,从日本血吸虫 (中国大陆株 )成虫总RNA中扩增获得SjCL2基因 ;将其定向克隆至巴氏毕赤酵母表达载体pPICZαB质粒 ;经KpnⅠ、XbaⅠ双酶切分析和PCR鉴定筛选出阳性克隆 ,测序分析SjCL2基因并确定其读码框的正确插入。结果　利用RT -PCR技术从日本血吸虫成虫总RNA中扩增到约 1Kb大小的SjCL2基因 ,通过双酶切分析、PCR鉴定以及DNA序列分析确定SjCL2基因被克隆到巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB中。 结论　成功构建了含有SjCL2基因编码区序列的巴氏毕赤酵母表达载体 pPICZαB 展开更多

关键词 日本血吸虫 组织蛋白酶l2 基因克隆 巴氏毕赤酵母表达载体

下载PDF 职称材料

日本血吸虫组织蛋白酶L2基因扩增及克隆 被引量：2

12

作者 雷智刚 何蔼 +3 位作者 李卓雅 孟锦绣 易冰 詹希美 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第6期32-34,共3页

目的　体外扩增日本血吸虫中国大陆株组织蛋白酶L2 (SjCL2 )的编码区基因序列 ,将其克隆到真核表达质粒pcDNA3中 ,为进一步对其进行功能研究奠定基础。方法　用TRIZOL分离日本血吸虫成虫RNA ,RT -PCR扩增目的基因 ,将扩增产物定向克隆... 目的　体外扩增日本血吸虫中国大陆株组织蛋白酶L2 (SjCL2 )的编码区基因序列 ,将其克隆到真核表达质粒pcDNA3中 ,为进一步对其进行功能研究奠定基础。方法　用TRIZOL分离日本血吸虫成虫RNA ,RT -PCR扩增目的基因 ,将扩增产物定向克隆到真核表达载体 pcDNA3中。 结果　RT -PCR特异性扩增出SjCL2编码区基因序列 ,其片段大小为1kb左右 ,经酶切和PCR鉴定表明所构建的质粒pcDNA -SjCL2中含有所扩增的基因序列。 结论　RT -PCR扩增的SjCL2编码区基因序列与预期长度相符合 ,成功构建了含SjCL2编码区基因的真核表达质粒pcDNA -SjCL2。 展开更多

关键词 日本血吸虫 组织蛋白酶l2 基因扩增 基因克隆 基因表达

下载PDF 职称材料

片形吸虫“中间型”组织蛋白酶L2基因的原核表达及鉴定 被引量：2

13

作者 王晓旭 曾敏浩 +3 位作者 吕庆博 邱鸿宇 常巧呈 王春仁 《黑龙江八一农垦大学学报》 2019年第6期29-34,共6页

组织蛋白酶L2(CathepsinL2,CatL2)存在于片形吸虫发育的各个时期,具有潜在的免疫保护性及诊断性。为了获得片形吸虫"中间型"("intermediate form"of Fasciola,Fsp)CatL2基因的重组蛋白,根据GenBank中公布的肝片形... 组织蛋白酶L2(CathepsinL2,CatL2)存在于片形吸虫发育的各个时期,具有潜在的免疫保护性及诊断性。为了获得片形吸虫"中间型"("intermediate form"of Fasciola,Fsp)CatL2基因的重组蛋白,根据GenBank中公布的肝片形吸虫组织蛋白酶L2基因设计特异性引物,应用RT-PCR获得虫体的FspCatL2基因,经TA克隆后,进行测序及生物学分析;进一步构建原核表达重组质粒PET-28a(+)-FspCatL2,在大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行诱导表达,将纯化后的蛋白进行SDS-PAGE和Western Blot分析。结果表明扩增得到的FspCatL2基因的大小为933 bp,编码311个氨基酸,生物信息学显示FspCatL2有较多的α-螺旋,具有较好的抗原表位,推测该蛋白应有较好的抗原性。SDS-PAGE结果显示在35 kDa处有目的条带,Western Blot分析发现重组FspCatL2与片形吸虫"中间型"阳性血清发生反应,而与阴性血清不发生反应。实验成功克隆表达了片形吸虫"中间型"组织蛋白酶L2,为进一步研究其功能奠定了基础。 展开更多

关键词 片形吸虫中间型 组织蛋白酶l2 表达分析

下载PDF 职称材料

SDH-SV2C-L4融合蛋白的表达及山梨糖脱氢酶活性检测 被引量：1

14

作者 韦娜 陈惠鹏 张惟材 《生物技术通讯》 CAS 2011年第3期354-357,共4页

目的:构建SDH-SV2C-L4融合蛋白表达载体,在大肠杆菌中表达具有山梨糖脱氢酶(SDH)活性的融合蛋白。方法:将C亚型突触囊泡蛋白2大突环L4(SV2C-L4)基因与SDH基因以GGGS柔性接头连接,在大肠杆菌DH5α中表达;用NBT染色和DCIP脱色的方法检测... 目的:构建SDH-SV2C-L4融合蛋白表达载体,在大肠杆菌中表达具有山梨糖脱氢酶(SDH)活性的融合蛋白。方法:将C亚型突触囊泡蛋白2大突环L4(SV2C-L4)基因与SDH基因以GGGS柔性接头连接,在大肠杆菌DH5α中表达;用NBT染色和DCIP脱色的方法检测融合蛋白的SDH活性。结果:DNA测序及SDS-PAGE结果显示构建了融合蛋白表达载体,并表达了SDH-SV2C-L4融合蛋白,相对分子质量约80×103;DCIP脱色及NBT染色均检测到融合蛋白的SDH活性。结论:与SV2C-L4融合的SDH仍具有活性,为下一步SV2C-L4活性检测方法的建立及SDH与SV2C-L4的其他相关研究奠定了基础。 展开更多

关键词 山梨糖脱氢酶 C亚型突触囊泡蛋白2大突环l4 融合蛋白

下载PDF 职称材料

Bcl2L12蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义 被引量：3

15

作者 韩洋 任建强 盛宇伟 《南昌大学学报（医学版）》 CAS 2018年第3期53-55,共3页

目的探讨Bcl2like 12(Bcl2L12)蛋白在乳腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集乳腺癌患者的石蜡包埋组织标本132例,采用免疫组织化学EnVision二步法检测Bcl2L12蛋白的表达水平,并分析Bcl2L12与临床病理学特征之间的关系,以及与患... 目的探讨Bcl2like 12(Bcl2L12)蛋白在乳腺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法收集乳腺癌患者的石蜡包埋组织标本132例,采用免疫组织化学EnVision二步法检测Bcl2L12蛋白的表达水平,并分析Bcl2L12与临床病理学特征之间的关系,以及与患者的无病生存期(DFS)、总生存期(OS)之间的关系。结果乳腺癌组织中Bcl2L12蛋白阳性表达呈棕黄色弥漫染色或颗粒状,主要定位于胞质。原发肿瘤>2cm、有淋巴结转移、组织学分级为Ⅱ—Ⅲ级Bcl2L12蛋白表达阳性率均明显高于原发肿瘤≤2cm、无淋巴结转移、组织学分级为Ⅰ级(均P<0.05)。Bcl2L12蛋白表达与原发肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级呈正相关(r=0.206、0.197、0.179,均P<0.05),Bcl2L12蛋白表达与年龄无关(r=-0.002,P>0.05)。Bcl2L12蛋白低表达者有更高的无病生存率(85.7%)和总生存率(96.4%)。结论 Bcl2L12蛋白的高表达与乳腺癌的发生、发展有关,其表达对乳腺癌患者具有病情判断和预后评估的价值。 展开更多

关键词 乳腺癌 Bcl2l12蛋白 免疫组织化学 Kaplan-Meier生存分析 临床意义

下载PDF 职称材料

自由基损伤和β2糖蛋白1在自身免疫疾病中的作用 被引量：4

16

作者 刘桂英 谭岩 +1 位作者 徐立 时彤 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期13-15,共3页

目的　研究被自由基氧化修饰的 β2糖蛋白 1(β2 GP1)在自身免疫疾病中自身抗体产生中的作用。方法　采用高氯酸沉淀 ,两步肝素连接的交联琼脂糖凝胶层析结合葡聚糖凝胶 G- 10 0分离纯化大鼠 β2 GP1;应用自由基氧化修饰大鼠 β2 GP1;... 目的　研究被自由基氧化修饰的 β2糖蛋白 1(β2 GP1)在自身免疫疾病中自身抗体产生中的作用。方法　采用高氯酸沉淀 ,两步肝素连接的交联琼脂糖凝胶层析结合葡聚糖凝胶 G- 10 0分离纯化大鼠 β2 GP1;应用自由基氧化修饰大鼠 β2 GP1;氧化修饰的 β2 GP1(oxβ2 GP1)、β2 GP1分别加与不加心磷脂 (CL)及 CL 免疫大鼠 ,EL ISA方法检测免疫大鼠血清中抗 β2 GP1抗体和抗心磷脂抗体 (ACA)。结果　两步亲和层析结合凝胶过滤层析有效地分离纯化了大鼠 β2 GP1,蛋白纯度达 90 .78% ;通过羰基含量测定证实了自由基对 β2 GP1的氧化修饰 ;oxβ2 GP1加 CL、β2 GP1加 CL、oxβ2 GP1免疫组与空白对照组、实验对照组比较 ACA水平有显著升高 (P<0 .0 0 1) ,oxβ2 GP1加 CL 免疫组与 β2 GP1加 CL 免疫组比较 ACA水平差异有显著性 (P<0 .0 5 ) ;oxβ2 GP1免疫组与oxβ2 GP1加 CL 免疫组比较 ACA水平差异不显著 (P>0 .0 5 ) ;oxβ2 GP1加 CL、oxβ2 GP1免疫组与对照组比较 ,抗oxβ2 GP1抗体水平有显著升高 (P<0 .0 5 )。结论　两步肝素连接的交联琼脂糖凝胶层析结合葡聚糖凝胶 G- 10 0能有效地分离纯化 β2 GP1;oxβ2 GP1诱导了 ACA和抗 oxβ2 GP1抗体的产生 ;β2 展开更多

关键词 自由基损伤 β2糖蛋白l 自身免疫疾病 自身抗体

下载PDF 职称材料

HPV L2肽段宫颈癌疫苗的研究进展 被引量：3

17

作者 徐海燕 辛晓燕 蔡国青 《中国妇幼健康研究》 2008年第5期489-491,共3页

在全世界范围内,宫颈癌是女性的高发肿瘤,死亡率极高,人乳头瘤病毒是其主要的致病因子。关于宫颈癌的人乳头瘤病毒疫苗研究为宫颈癌的防治带来了曙光。目前已上市的人乳头瘤病毒疫苗虽已取得一定的临床疗效,但仍然存在着许多不足,其中,... 在全世界范围内,宫颈癌是女性的高发肿瘤,死亡率极高,人乳头瘤病毒是其主要的致病因子。关于宫颈癌的人乳头瘤病毒疫苗研究为宫颈癌的防治带来了曙光。目前已上市的人乳头瘤病毒疫苗虽已取得一定的临床疗效,但仍然存在着许多不足,其中,仅能抑制少数高危型人乳头瘤病毒感染是最主要的缺陷之一。人乳头瘤病毒次要衣壳蛋白L2与宫颈癌的关系密切,同时L2肽段在所有人乳头瘤病毒型别均有表达,虽然免疫原性较弱,但具有很强的序列保守性,可交叉免疫多种型别的人乳头瘤病毒感染。由其构建的以人乳头瘤病毒L2肽段为基础的集预防与治疗为一体的疫苗有着极大的优越性和潜力,但也存在着不足之处,目前该方面的相关研究已在国内外逐渐展开起来,并取得了一定的进展。该文就人乳头瘤病毒次要衣壳蛋白L2与宫颈癌的关系及其构建人乳头瘤病毒疫苗的研究进展作以系统的回顾。 展开更多

关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒 次要衣壳蛋白l2 疫苗

下载PDF 职称材料

人乳头瘤病毒6/11型L2片段的高效表达及免疫效果评价

18

作者 任皎 张忠献 +4 位作者 赵莉 郝明强 田厚文 谭文杰 阮力 《生物技术通讯》 CAS 2016年第1期12-16,共5页

目的：原核表达人乳头瘤病毒（HPV）6型和11型L2 N端融合蛋白,并初步评价其免疫效果。方法：用重叠PCR将HPV6和HPV11次要衣壳蛋白L2基因5＇端片段融合,并在大肠杆菌中表达融合蛋白,纯化后与Al（OH）3佐剂配伍肌肉注射免疫BALB/c小鼠,用E... 目的：原核表达人乳头瘤病毒（HPV）6型和11型L2 N端融合蛋白,并初步评价其免疫效果。方法：用重叠PCR将HPV6和HPV11次要衣壳蛋白L2基因5＇端片段融合,并在大肠杆菌中表达融合蛋白,纯化后与Al（OH）3佐剂配伍肌肉注射免疫BALB/c小鼠,用ELISA检测血清抗体,以基于假病毒的体外中和试验评价中和抗体水平。结果：ELISA结果显示,3种融合蛋白均能产生针对同型别L2蛋白的高滴度特异性Ig G抗体,滴度为1∶10 000～1∶200 000;体外中和试验显示,3种融合蛋白均能诱发中和抗体和交叉中和抗体,针对同型别的滴度最高可达1∶3200,对于高危型能产生一定水平的交叉中和抗体,滴度为1∶50～1∶800。结论：HPV6/11 L2融合蛋白能够诱发较强的体液免疫反应,产生较高的中和抗体及交叉中和抗体,为HPV L2新型预防性疫苗的研究提供了初步的实验基础。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 融合蛋白 预防性疫苗 中和抗体 次要衣壳蛋白l2

下载PDF 职称材料

HPV16 L2肽段疫苗的构建及免疫学功能研究

19

作者 徐海燕 李英辉 +3 位作者 蔡国青 龚照 鲁瑶 辛晓燕 《中国妇幼健康研究》 2009年第3期256-258,共3页

目的探讨基于人乳头瘤病毒16次要衣壳蛋白L2抗原优势表位多倍复制重组多肽疫苗的构建与诱导免疫应答之间的关系。方法采用芴甲氧羰基（Fmoc）固相合成法合成多肽，用高效液相色谱分析多肽的纯度，对所合成的多肽采用质谱进行定性鉴定。... 目的探讨基于人乳头瘤病毒16次要衣壳蛋白L2抗原优势表位多倍复制重组多肽疫苗的构建与诱导免疫应答之间的关系。方法采用芴甲氧羰基（Fmoc）固相合成法合成多肽，用高效液相色谱分析多肽的纯度，对所合成的多肽采用质谱进行定性鉴定。通过淋巴细胞增殖试验、细胞毒性杀伤试验及酶联免疫吸附试验方法研究该疫苗激发的细胞免疫及反应强度。结果合成的多肽经纯化后纯度均达到95％以上，经质谱分析，各肽的分子量测定值与理论值相符。所设计的多肽疫苗免疫小鼠后，小鼠淋巴细胞体外培养增殖明显，并可特异性地在体外杀伤小鼠肺上皮细胞，小鼠血清体外可诱导较高的干扰素-γ。结论在多肽疫苗的设计中，多倍复制重组人乳头瘤病毒次要衣壳蛋白L2肽段优势表位可增强疫苗的免疫原性，为进一步研制开发宫颈癌疫苗打下了基础。 展开更多

关键词 子宫颈癌 人乳头瘤病毒16 次要衣壳蛋白l2 优势表位 多肽疫苗

下载PDF 职称材料

P21/WAF1蛋白在肝细胞癌中的表达及DNA含量分析的意义

20

作者 孟芝兰 叶大雄 +2 位作者 宋晓华 杨春明 张宁 《肝脏》 2002年第4期226-228,共3页

目的　探讨肝细胞癌p2 1/WAF1蛋白的表达情况及DNA含量的定量分析及临床意义。方法　应用免疫组织化学和多功能真彩色图像分析仪检测 60例肝细胞癌 p2 1蛋白表达量和DNA含量 ,同时取 2 0例癌旁组织作对照。结果　 60例肝细胞癌 p2 1蛋... 目的　探讨肝细胞癌p2 1/WAF1蛋白的表达情况及DNA含量的定量分析及临床意义。方法　应用免疫组织化学和多功能真彩色图像分析仪检测 60例肝细胞癌 p2 1蛋白表达量和DNA含量 ,同时取 2 0例癌旁组织作对照。结果　 60例肝细胞癌 p2 1蛋白阳性表达率为 47% (2 8/60 ) ,癌旁组织为 15 % (3 /2 0 )。 60例肝细胞癌中高分化癌阳性表达率为 13 % (2 /15 ) ,低分化癌为 5 8% (2 6/4 5 )。可见p2 1蛋白在肝细胞癌中的表达明显高于癌旁肝组织 (P <0 .0 5 ) ,低分化癌明显高于高分化癌 (P <0 .0 1)。肝细胞癌DNA相对倍体均值 (U值 )范围为 1.0 8～ 3 .17,U值随病理分级的增高而增高 (P <0 .0 5 )。结论　p2 1蛋白的表达情况与肝细胞癌的发生发展及恶性程度有关 ,肝细胞癌DNA含量与病理学特征及临床生物学行为之间有密切的关系。两者相结合可作为肝细胞癌诊断和预后的参考指标。 展开更多

关键词 肝细胞癌 P2l/WAF1蛋白 表达 DNA含量 定量分析 临床意义 免疫组织化学

下载PDF 职称材料