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自噬相关分子mTOR、Beclin-1及LC3在胸腔积液中的表达及临床意义
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作者 景学芬 王翠峰 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第6期1060-1065,共6页
目的:探讨自噬相关分子mTOR、Beclin-1及LC3在良恶性胸腔积液中的表达,分析其临床意义。方法:通过液基薄层细胞学检查及免疫组化检查并结合患者临床资料纳入300例胸腔积液标本作为研究对象,分为group165例(漏出性胸腔积液组)、group2142... 目的:探讨自噬相关分子mTOR、Beclin-1及LC3在良恶性胸腔积液中的表达,分析其临床意义。方法:通过液基薄层细胞学检查及免疫组化检查并结合患者临床资料纳入300例胸腔积液标本作为研究对象,分为group165例(漏出性胸腔积液组)、group2142例(非肿瘤炎性胸腔积液组)及group393例(非小细胞肺癌性胸腔积液组),通过RT-PCR方法及Western blot方法分别检测各组胸腔积液中mTOR、Beclin-1及LC3在基因及蛋白水平的表达。结果:在基因和蛋白表达水平,group1及group2相较于group3在Beclin-1和LC3的表达水平均升高,而mTOR的表达则显著减低,差异均有统计学意义;同时,group2较group1在Beclin-1和LC3表达中均降低,mTOR的表达则升高,差异均有统计学意义;此外在良、恶性胸腔积液相关性分析中发现,在蛋白水平Beclin-1相对表达值与LC3表达值呈正相关,而mTOR相对表达值与Beclin-1、LC3表达值呈负相关。结论:自噬相关分子mTOR、Beclin-1及LC3在不同性质胸腔积液中表达存在差异,可能与炎性及非小细胞肺癌引起的肿瘤性胸腔积液的发病机制有关,可为胸腔积液性质鉴定提供新的分子学依据。 展开更多
关键词 MTOR BECLIN-1 lc3 胸腔积液 自噬
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三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响
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作者 袁宇晴 龙丹 +4 位作者 谢超群 魏堰翀 刘旭东 朱莹 邹君君 《中医药导报》 2024年第3期30-36,共7页
目的:探讨三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响,探究三物白散抗胃癌的作用机制。方法:将28只SPF级雄性大鼠随机分为4组,每组7只,分别予以0.03125、0.0625、0.1250 g/(kg·d)三物白散及相同体积生理盐水灌胃... 目的:探讨三物白散对胃癌细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3、p62表达的影响,探究三物白散抗胃癌的作用机制。方法:将28只SPF级雄性大鼠随机分为4组,每组7只,分别予以0.03125、0.0625、0.1250 g/(kg·d)三物白散及相同体积生理盐水灌胃,经腹主动脉采血制备含药血清。体外培养AGS细胞,设置空白对照组(空白组)、三物白散低剂量含药血清组(低剂量组)、三物白散中剂量含药血清组(中剂量组)、三物白散高剂量含药血清组(高剂量组)。采用CCK-8法检测不同浓度(5%、10%、15%、20%)三物白散含药血清对AGS细胞活性的影响;倒置显微镜下观察三物白散含药血清对AGS细胞形态的影响;RT-qPCR法检测Beclin1 mRNA、LC3 mRNA、p62 mRNA表达;Western blotting法检测Beclin1、LC3、p62蛋白表达。结果:与空白组比较,5%、10%、15%、20%三物白散高剂量含药血清可呈浓度-时间依赖性抑制AGS细胞活性;随着含药血清浓度升高,细胞形态逐渐不规则,细胞数量逐渐减少;中、高剂量组Beclin1 mRNA、LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量均高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01);低剂量组LC3-ⅠmRNA、LC3-ⅡmRNA相对表达量高于空白组,p62 mRNA相对表达量低于空白组(P<0.01)。高剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ均高于空白组,p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01);中剂量组Beclin1蛋白相对表达量及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ高于空白组(P<0.05或P<0.01),p62蛋白相对表达量低于空白组(P<0.01)。结论:三物白散对胃癌细胞的增殖有抑制作用,上调Beclin1、LC3表达、下调p62的表达、诱导胃癌细胞自噬可能是其抗胃癌作用机制之一。 展开更多
关键词 胃癌 三物白散 自噬 BECLIN1 lc3 P62
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伊立替康、紫杉醇联合顺铂治疗对宫颈癌CYFRA21-1、VEGF-C及LC3-Ⅱ水平的影响
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作者 邹科 朱庆博 刘艳 《四川生理科学杂志》 2024年第3期657-659,共3页
目的:分析伊立替康、紫杉醇联合顺铂治疗对宫颈癌的治疗效果及对细胞角蛋白19片段抗原21-1(Cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1)、血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(Microt... 目的:分析伊立替康、紫杉醇联合顺铂治疗对宫颈癌的治疗效果及对细胞角蛋白19片段抗原21-1(Cytokeratin 19 fragment 21-1,CYFRA21-1)、血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(Microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3-Ⅱ)水平的影响.方法:回顾性分析本院2020年3月至2023年4月收治的122例宫颈癌患者的临床资料,根据治疗方案不同将患者分为IP组(伊立替康+顺铂治疗,60例)和TP组(紫杉醇+顺铂治疗,62例).分析对比两组的临床疗效、CYFRA21-1、VEGF-C及LC3-Ⅱ水平以及毒副反应.结果:IP组与TP组总疗效率分别为56.67%、79.03%,TP组总疗效率显著高于IP组(P<0.05).两组治疗后的CYFRA21-1、VEGF-C及LC3-Ⅱ水平均显著下降,且TP组CYFRA21-1、VEGF-C及LC3-Ⅱ水平均显著低于IP组(P<0.05).TP组0度、Ⅰ度例数占比显著高于IP组,Ⅲ度例数占比显著低于IP组(P<0.05).结论:与伊立替康联合顺铂比较,紫杉醇联合顺铂治疗宫颈癌临床疗效更为理想,可有效降低CYFRA21-1、VEGF-C及LC3-Ⅱ水平,且安全性高. 展开更多
关键词 伊立替康 紫杉醇 顺铂 宫颈癌 CYFRA21-1 VEGF-C lc3-Ⅱ
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真武汤、越婢汤对阿霉素肾病大鼠肾组织自噬相关基因PTEN/LC3的影响
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作者 宋纯东 宋丹 +5 位作者 段风阳 郭婷 花淑婷 张霞 黄书丽 王耀献 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第1期6-9,I0011,I0012,共6页
目的观察真武汤、越婢汤对阿霉素肾病大鼠肾组织磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)及肾脏自噬标志性分子微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)... 目的观察真武汤、越婢汤对阿霉素肾病大鼠肾组织磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)及肾脏自噬标志性分子微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)表达的影响。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组、真武汤组(真武组)、越婢汤组(越婢组),每组12只。用阿霉素复制肾病综合征大鼠模型。造模成功后空白组和模型组以生理盐水灌胃,中药两组分别以真武汤和越婢汤颗粒剂灌胃,6周后检测血清白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白定量(24-hour urine total protein quantity,24 h UTP)等,光镜观察肾脏病理,免疫组化观察大鼠肾组织PTEN、LC3的表达。结果与空白组相比,模型组肾脏病理可见部分肾小球肥大、毛细血管腔变窄,肾小管扩张、管腔可见蛋白质管型,间质可见炎性细胞浸润等;24 h UTP及Scr、BUN升高,ALB、LC3及PTEN表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,中药两组肾脏病理改善,24 h UTP、Scr明显下降,ALB升高,肾组织LC3、PTEN表达增强,差异有统计学意义(P<0.05)。而真武组与越婢组比较无明显差异。结论真武汤和越婢汤均能改善阿霉素肾病大鼠的生化指标及肾脏病理,其作用机制可能与升高肾组织PTEN、LC3表达有关。 展开更多
关键词 阿霉素肾病 PTEN lc3 自噬 真武汤/越婢汤
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牦牛LC3B蛋白多克隆抗体制备及在生殖器官表达检测中的应用 被引量:1
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作者 焦正兴 潘阳阳 +7 位作者 王萌 王靖雷 马文斌 高翔 张晖 崔燕 余四九 王立斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2436-2447,共12页
旨在克隆牦牛微管相关蛋白1轻链3B(microtubule associated protein 1 light chain 3B,LC3B)基因,制备牦牛LC3B多克隆抗体,为探究自噬在牦牛生殖生理过程中的作用奠定基础。本研究通过基因克隆方法获得牦牛LC 3B基因序列,利用原核表达... 旨在克隆牦牛微管相关蛋白1轻链3B(microtubule associated protein 1 light chain 3B,LC3B)基因,制备牦牛LC3B多克隆抗体,为探究自噬在牦牛生殖生理过程中的作用奠定基础。本研究通过基因克隆方法获得牦牛LC 3B基因序列,利用原核表达、亲和层析法纯化牦牛LC3B重组蛋白,使用纯化的蛋白为抗原免疫10月龄日本大耳白兔,Sepharose4B柱层析法纯化制备牦牛LC3B多克隆抗体,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体效价,并使用蛋白质免疫印迹(WB)、免疫组织化学法(IHC)和免疫荧光技术(IF)检测牦牛生殖器官中LC3B蛋白的表达。结果显示,本研究成功克隆了牦牛LC 3B基因(登录号:OP572227),构建的重组质粒pET-32a-LC3B能够诱导产生重组蛋白,并且在包涵体和上清中均有表达;所纯化的牦牛LC3B重组蛋白大小为34 ku(含Trx和His标签),符合预期结果。通过免疫日本大耳兔后得到的兔抗牦牛LC3B蛋白血清,抗体效价分别为1∶640000和1∶320000,特异性良好,表明牦牛LC3B蛋白多克隆抗体制备成功。纯化后的抗体应用于牦牛生殖器官中LC3B的表达检测,LC3B在牦牛卵巢、输卵管和子宫中表达,并且能识别LC3B-Ⅰ和发生脂化后的LC3B-Ⅱ,主要表达于细胞质及细胞核周。本研究通过成功克隆牦牛LC 3B基因制备了牦牛LC3B多克隆抗体,使用抗体检测发现LC3B蛋白在牦牛生殖器官中均有表达,表明所制备的多克隆抗体特异性良好,能够应用于牦牛LC3B蛋白的检测和细胞自噬水平的研究。 展开更多
关键词 牦牛 lc3B 原核表达 多克隆抗体 生殖
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NIX和LC3-Ⅱ在成年牦牛不同脑组织中的表达与定位分析
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作者 冯法铭 张倩 +2 位作者 崔燕 何俊峰 靳宏亮 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2378-2386,共9页
为了探讨牦牛(Bos grunniens)脑组织低氧适应性,选择成年(3~5岁)牦牛脑组织,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫组织化学技术及免疫荧光技术检测低氧诱导因子2α(HIF2α)与促凋亡BNIP3L蛋白(BNIP3L/NIX)和微管相关蛋白轻链3(LC3-Ⅱ)在... 为了探讨牦牛(Bos grunniens)脑组织低氧适应性,选择成年(3~5岁)牦牛脑组织,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、免疫组织化学技术及免疫荧光技术检测低氧诱导因子2α(HIF2α)与促凋亡BNIP3L蛋白(BNIP3L/NIX)和微管相关蛋白轻链3(LC3-Ⅱ)在大脑皮质、海马、丘脑、延髓和小脑中的表达与定位情况,并用半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase-3)检测脑组织中细胞的凋亡水平。qRT-PCR和免疫组织化学光密度分析结果显示,成年牦牛大脑皮质和海马的HIF2α、NIX、LC3-ⅡmRNA和蛋白水平显著高于丘脑、延髓及小脑(P<0.05),另外Caspase-3 mRNA和蛋白水平在五个部位之间无显著差异。免疫组化镜下观察发现HIF2α阳性反应表达于神经元胞核及胞质,而NIX、LC3-Ⅱ和Caspase-3阳性反应均集中在细胞质,且上述四个因子主要分布于大脑皮质的多形细胞层和海马的CA区锥体细胞层,另外,在丘脑、延髓和小脑神经元中均有表达。免疫荧光结果显示,HIF2α、NIX、LC3-Ⅱ与神经元核抗原抗体NeuN在上述各部位神经元细胞共定位,Caspase-3荧光强度较弱。以上结果表明,海马和大脑皮质可能更容易受到低氧刺激;另外,HIF2α的表达可能促进NIX和LC3-Ⅱ的表达,降低Caspase-3表达水平,从而使牦牛大脑和海马适应高原环境。本试验为深入研究牦牛中枢神经系统的低氧适应机制提供了基础数据。 展开更多
关键词 牦牛 低氧 脑组织 NIX lc3-Ⅱ
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基于mTOR/Beclin1/LC3信号轴探讨制萎扶胃丸对胃癌前病变大鼠胃窦组织自噬的影响 被引量:1
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作者 封壮壮 宋瑞平 +3 位作者 豆鹏程 陈心怡 左娇娇 舒劲 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第4期361-370,共10页
目的:探讨制萎扶胃丸(ZWFW)对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃窦组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1)/微管相关蛋白1轻链3(LC3)信号轴关键分子表达的影响。方法:SPF级SD大鼠随机分为正常组,模型组,叶酸组,ZWF... 目的:探讨制萎扶胃丸(ZWFW)对胃癌前病变(PLGC)大鼠胃窦组织哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1)/微管相关蛋白1轻链3(LC3)信号轴关键分子表达的影响。方法:SPF级SD大鼠随机分为正常组,模型组,叶酸组,ZWFW低、中、高剂量组,除正常组常规饲养外,模型组、叶酸组、ZWFW低、中、高剂量组,采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)联合饥饱失常、乙醇灌胃、氨水自由饮用以及雷尼替丁饲料喂养五因素复合造模法建立PLGC大鼠模型后,分别用生理盐水、叶酸片水溶液(0.002 g/kg)、ZWFW低、中、高剂量水溶液(0.42,0.84,1.67 g/kg)予以治疗4周后剖腹取胃。采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃窦组织病理学变化,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)及免疫组化检测大鼠胃窦组织mTOR、Beclin1、微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)的mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠胃窦组织胀大,胃壁变薄,胃黏膜色泽苍白,皱襞萎缩浅平,走行紊乱,可见结节及赘生物;HE染色示:与正常组比较,模型组胃黏膜腺体排列拥挤、紊乱,细胞形态不一,可见大量杯状细胞,细胞浆嗜碱性,细胞核大、深染、不规则,黏膜肌层浸润破坏;与模型组比较,ZWFW显著改善了胃黏膜腺体结构排列紊乱和细胞异型性等病理表现。与正常组比较,模型组大鼠胃窦组织m TOR mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),Beclin1和LC3B mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与模型组比较,ZWFW中、高剂量组胃窦组织mTOR mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),ZWFW低剂量组胃窦组织Beclin1、LC3B蛋白表达升高(P<0.05),中、高剂量组胃窦组织Beclin1、LC3B mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论:ZWFW可显著改善PLGC模型大鼠胃黏膜异常组织病理学表现,其机制可能与下调mTOR表达,上调Beclin1、LC3B表达进而促进自噬相关。 展开更多
关键词 胃癌前病变 制萎扶胃丸 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR) 自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1) 微管相关蛋白1轻链3β(lc3B) 自噬
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芍药甘草汤对Oddi括约肌功能障碍豚鼠自噬相关蛋白Beclin1和LC3-B的影响
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作者 胡永红 陈萌 +3 位作者 王旋 陈晓东 张晞文 李甫 《辽宁中医杂志》 CAS 2023年第10期220-224,I0006,共6页
目的探讨芍药甘草汤对豚鼠Oddi括约肌功能障碍的治疗作用及其对自噬相关蛋白Beclin1和LC3-B表达的影响。方法30只豚鼠随机分为正常组、模型组和芍药甘草汤治疗组,每组10只。模型组和芍药甘草汤组按0.6 mg/kg体质量静脉注射吗啡注射液以... 目的探讨芍药甘草汤对豚鼠Oddi括约肌功能障碍的治疗作用及其对自噬相关蛋白Beclin1和LC3-B表达的影响。方法30只豚鼠随机分为正常组、模型组和芍药甘草汤治疗组,每组10只。模型组和芍药甘草汤组按0.6 mg/kg体质量静脉注射吗啡注射液以诱导Oddi括约肌功能障碍模型,正常组豚鼠予等体积0.9%氯化钠溶液静脉注射,每周三次;从第一次造模起,芍药甘草汤组按12.5 g/kg灌胃治疗;正常组和模型组分别予等体积0.4%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃,1次/d,共计4周。末次给药后禁食,收集血清和Oddi括约肌组织。全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;H&E染色检测Oddi括约肌病理变化;qRT-PCR检测c-Kit、Beclin1、LC3-B mRNA表达;Western blot检测c-Kit、Beclin1、LC3-B蛋白表达。结果(1)与对照组相比,模型组豚鼠血清ALT、AST水平显著增高(P<0.01);与模型组相比,芍药甘草汤组豚鼠血清ALT、AST水平均明显下降(P<0.05)。(2)H&E染色显示,模型组豚鼠Oddi括约肌纤维排列不规则、部分紊乱,并可见炎性细胞浸润,黏膜下纤维组织增生明显、平滑肌层显著增厚;与模型组相比,芍药甘草汤组豚鼠Oddi括约肌组织中纤维排列紊乱、炎性细胞浸润及黏膜下纤维组织增生明显改善。(3)与正常组相比,模型组豚鼠Oddi括约肌中c-Kit的mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05),自噬相关Beclin1和LC3-B的mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01,P<0.05);与模型组相比,芍药甘草汤组c-Kit的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01),Beclin1和LC3-B的mRNA和蛋白表达则显著减少(P<0.01)。结论芍药甘草汤可有效治疗吗啡诱导的豚鼠Oddi括约肌功能障碍,其作用机制可能是与减少细胞过度自噬、提升Cajal细胞活性有关。 展开更多
关键词 芍药甘草汤 ODDI括约肌功能障碍 自噬 BECLIN1 lc3-B
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益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织LC3Ⅱ、p62表达的影响
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作者 雷清清 张紫媛 +5 位作者 胡雅玲 范彦君 刘文媛 张晓东 孙艳艳 方敬爱 《中国中西医结合肾病杂志》 2023年第9期773-776,I0002,共5页
目的:探讨益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织LC3Ⅱ、p62表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、糖尿病肾病组、益肾胶囊组、白藜芦醇组,每组10只。益肾胶囊组给予益肾胶囊(0.625 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃、白藜芦醇... 目的:探讨益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织LC3Ⅱ、p62表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、糖尿病肾病组、益肾胶囊组、白藜芦醇组,每组10只。益肾胶囊组给予益肾胶囊(0.625 g·kg^(-1)·d^(-1))灌胃、白藜芦醇组给予白藜芦醇(30 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃、正常组和糖尿病肾病组每日给予等量生理盐水灌胃,时间为8周。观察大鼠一般状态,在0、4、8周末测定大鼠体重、血糖及24 h尿蛋白定量;并在8周末于大鼠腹主动脉取血,测定肌酐(Scr)、尿素(BUN)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG),用HE、PAS染色法分别观察肾脏组织病理变化,用免疫组化法测定自噬相关蛋白LC3Ⅱ及泛素结合蛋白p62(p62/SQSTMI)的表达变化。结果:(1)与正常组相比,糖尿病肾病组Scr、BUN、TC、TG、24 h尿蛋白定量均有所升高(P<0.05);与糖尿病肾病组相比,益肾胶囊组及白藜芦醇组Scr、BUN、TC、TG、24 h尿蛋白定量均有所下降(P<0.05);(2)与正常组相比,糖尿病肾病组镜下肾组织系膜基质增生较明显,肾小管管腔狭窄,上皮细胞水肿,呈现空泡样变性,足细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ表达减少(P<0.05),p62表达增多(P<0.05);与糖尿病肾病组相比,益肾胶囊组及白藜芦醇组肾组织病理改变明显减轻,足细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达增加(P<0.05),p62表达减少(P<0.05)。结论:益肾胶囊可能通过改善糖尿病肾病大鼠肾组织的自噬障碍,从而对糖尿病肾病的肾脏发挥保护作用。 展开更多
关键词 益肾胶囊 足细胞 lc3 P62
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基于LC3D的摔倒行为识别算法
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作者 查凯文 朱华生 +1 位作者 李伟 李舒宁 《计算机应用与软件》 北大核心 2023年第9期193-198,共6页
针对传统的三维卷积神经网络(C3D)用于摔倒行为识别时对特征的提取不明显,而传统的长短时记忆网络(LSTM)存在梯度消失的问题,提出一种新的基于时序三维卷积网络(LC3D)的摔倒行为识别算法。该算法同步获取视频和骨架两组数据,将视频数据... 针对传统的三维卷积神经网络(C3D)用于摔倒行为识别时对特征的提取不明显,而传统的长短时记忆网络(LSTM)存在梯度消失的问题,提出一种新的基于时序三维卷积网络(LC3D)的摔倒行为识别算法。该算法同步获取视频和骨架两组数据,将视频数据和骨架数据分别输入至改进后的C3D网络和LSTM网络进行训练并提取摔倒行为的C3D模型和LSTM模型;通过Stacking算法将两个模型进行融合得到LC3D模型;利用LC3D模型对摔倒行为进行识别。实验结果表明,使用LC3D网络识别摔倒行为比使用传统三维卷积网络和长短时记忆网络算法的准确率更高。 展开更多
关键词 摔倒行为识别 三维卷积神经网络 长短时记忆网络 lc3D
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双荧光mRFP-eGFP-LC3体系在细胞自噬中的作用 被引量:11
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作者 黄桢钧 刘彬 +1 位作者 刘本荣 刘少军 《贵阳医学院学报》 CAS 2015年第10期1029-1032,共4页
目的:探讨双荧光mRFP-e GFP-LC3(ptf LC3)体系在细胞自噬中的作用。方法:采用不同浓度雷帕霉素(50、100、200、500、1 000 nmol/L)处理人胚肾细胞(HEK293),蛋白印迹法检测不同浓度雷帕霉素组中自噬标记蛋白(LC3蛋白)的表达及LC3-II/LC3-... 目的:探讨双荧光mRFP-e GFP-LC3(ptf LC3)体系在细胞自噬中的作用。方法:采用不同浓度雷帕霉素(50、100、200、500、1 000 nmol/L)处理人胚肾细胞(HEK293),蛋白印迹法检测不同浓度雷帕霉素组中自噬标记蛋白(LC3蛋白)的表达及LC3-II/LC3-I比值;单荧光GFP-LC3质粒和双荧光mRFP-e GFP-LC3质粒转染HEK293细胞,雷帕霉素(200 nmol/L)处理3 h,采用荧光显微镜统计,并比较两种方法转染后HEK293细胞内LC3亮点的变化。结果:不同浓度雷帕霉素处理HEK293细胞,LC3-II蛋白和LC3-II/LC3-I比值均增加;转染GFP-LC3质粒时,雷帕霉素处理HEK293细胞中绿色亮点的数量增加;转染mRFP-e GFP-LC3质粒时,雷帕霉素处理HEK293细胞中绿色和红色亮点数量均增加。结论:双荧光mRFP-e GFP-LC3体系优于单荧光GFP-LC3体系,更能全面完整地反映细胞自噬水平,能够反映细胞内自噬流的变化,是自噬定量分析的可靠方法。 展开更多
关键词 雷帕霉素 自噬 人胚肾细胞 lc3 单荧光GFP-lc3质粒 双荧光mRFP-e GFP-lc3
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胃癌组织中LC3、ATG5和SATB2-AS1在不同部位表达与临床病理特征及预后的相关性
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作者 袁冬冬 温艳艳 +3 位作者 何慧丽 聂志勇 洪永贵 吴涛 《实用癌症杂志》 2023年第2期207-212,共6页
目的探究胃癌组织中LC3、ATG5和SATB2-AS1在不同部位表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取胃癌患者50例,收集患者临床资料。免疫组化法检测LC3、ATG5表达,以及RT-PCR检测SATB2-AS1表达,分析其在不同部位的表达与临床病理特征的... 目的探究胃癌组织中LC3、ATG5和SATB2-AS1在不同部位表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取胃癌患者50例,收集患者临床资料。免疫组化法检测LC3、ATG5表达,以及RT-PCR检测SATB2-AS1表达,分析其在不同部位的表达与临床病理特征的关系。采用多因素回归模型分析影响胃癌预后的独立因素。结果胃癌中LC3在癌周和癌巢表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移情况有关(P<0.05);ATG5在癌周表达与患者肿瘤分化程度、肿瘤分期有关(P<0.05),ATG5在癌巢表达与患者肿瘤分化程度、肿瘤分期和淋巴结转移情况有关(P<0.05);SATB2-AS1在癌周表达与患者肿瘤分化程度、肿瘤最大直径有关(P<0.05),SATB2-AS1在癌巢表达与患者肿瘤分化程度、肿瘤最大直径和临床分期有关(P<0.05)。单因素分析发现分化程度、淋巴结远处转移、癌巢LC3、ATG5和SATB2-AS1表达是影响胃癌预后的因素(P<0.05)。多因素分析显示肿瘤分化程度、淋巴结远处转移、癌巢LC3、ATG5和SATB2-AS1表达是影响胃癌预后的独立危险因素(P<0.05)。结论胃癌癌周和癌巢组织中LC3、ATG5和SATB2-AS1表达与临床病理特征存在相关性,癌巢组织LC3、ATG5和SATB2-AS1表达可作为预测胃癌患者预后的生物标志物。 展开更多
关键词 胃癌 lc3 ATG5 SATB2-AS1 临床病理特征 预后
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Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-Ⅱ mRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA的影响 被引量:5
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作者 刘利娟 陈瑶 +4 位作者 周德生 王洪海 周颖璨 李中 胡华 《广东医学》 CAS 北大核心 2017年第4期509-513,共5页
目的探讨Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达的影响。方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)缺血再灌注模型。大鼠随机分为假手术组、模型组、Salubrinal组(Sal组),各组又分为再灌6、12、24、72 ... 目的探讨Salubrinal对大鼠脑缺血再灌注模型LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达的影响。方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉脑缺血(MCAO)缺血再灌注模型。大鼠随机分为假手术组、模型组、Salubrinal组(Sal组),各组又分为再灌6、12、24、72 h 4个亚组。各组于再灌相应时间点行神经功能缺损评分,并断头取脑行HE染色及Real time-PCR检测。结果神经功能缺损:与假手术组比较,模型组、Sal组各时间点均有神经功能缺损(P<0.01);与模型组比较,再灌24、72 h Sal组神经功能缺损评分降低(P<0.05)。HE染色:模型组神经元减少、缺失,细胞肿胀,部分破裂,细胞核固缩、偏移、深染,胶质细胞增生,经Salubrinal干预后,再灌各时间点神经元增多,胞膜较完整,核固缩现象较轻,水肿轻微。Real time-PCR检测:与假手术组比较,模型组、Sal组各指标于再灌各时间点均增高(P<0.01)。与模型组比,Sal组LC3-ⅡmRNA表达于再灌12、24、72 h下降明显(P<0.05);Sal组LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA于再灌后各时间点下降均明显(P<0.01)。结论 Salubrinal通过下调LC3-ⅡmRNA及LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA比值,对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用。 展开更多
关键词 Salubrinal 缺血再灌注大鼠模型 lc3-Ⅱ MRNA lc3-Ⅱ/lc3-ⅠmRNA 神经保护
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电针预处理对心肌缺血大鼠心肌自噬相关蛋白LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Beclin 1、HIF-1α表达影响 被引量:4
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作者 王堃 黄日龙 +3 位作者 吴生兵 蔡荣林 邹国蓉 周美启 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2020年第7期44-47,共4页
目的观察电针内关预处理对心肌缺血(AMI)大鼠心肌自噬相关蛋白的影响。方法大鼠随机分成伪手术组、模型组、电针预处理组;构建AMI大鼠模型,造模前电针刺激14 d,刺激电流1 mA,频率为2 Hz,30 min/d。运用PowerLab 16导生理记录仪记录分析... 目的观察电针内关预处理对心肌缺血(AMI)大鼠心肌自噬相关蛋白的影响。方法大鼠随机分成伪手术组、模型组、电针预处理组;构建AMI大鼠模型,造模前电针刺激14 d,刺激电流1 mA,频率为2 Hz,30 min/d。运用PowerLab 16导生理记录仪记录分析各组大鼠心电图,Western Blot检测心肌组织微管相关蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、Beclin 1基因(Beclin 1)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)水平,PCR检测LC3ⅠmRNA、LC3ⅡmRNA、Beclin 1 mRNA、HIF-1ɑmRNA。结果与伪手术组比较,模型组LC3Ⅱ、Beclin 1蛋白及mRNA表达水平升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值上升(P<0.01),LC3Ⅰ、HIF-1α蛋白及mRNA表达水平显著下降(P<0.01);与模型组相比,电针组LC3Ⅱ、Beclin 1蛋白及mRNA表达水平明显下降,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低(P<0.01),LC3Ⅰ、HIF-1α蛋白及mRNA水平升高(P<0.01)。结论针刺预处理对AMI大鼠心肌保护作用可能与下调LC3Ⅱ、Beclin 1及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,上调LC3Ⅰ、HIF-1α表达有关。 展开更多
关键词 电针预处理 心肌缺血 lc3 lc3 Beclin 1
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火针对膝骨关节炎大鼠关节软骨细胞自噬相关蛋白LC3及血清炎症因子的影响 被引量:1
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作者 高仰来 冯鹏 李晓霞 《风湿病与关节炎》 2023年第10期6-10,共5页
目的:观察火针对膝骨关节炎大鼠膝关节软骨细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3及血清炎症因子的影响。方法:将36只健康SD大鼠随机分为空白对照组(8只)和造模组(28只),采用改良Hulth法制备膝骨关节炎模型,6周后随机选取造模组4只大... 目的:观察火针对膝骨关节炎大鼠膝关节软骨细胞自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3及血清炎症因子的影响。方法:将36只健康SD大鼠随机分为空白对照组(8只)和造模组(28只),采用改良Hulth法制备膝骨关节炎模型,6周后随机选取造模组4只大鼠处死,行关节软骨病理学检查判定模型制备是否成功,随后将剩余24只大鼠随机分为模型对照组、西药组、火针组,每组8只。火针组给予火针治疗干预,每周2次;西药组给予盐酸氨基葡萄糖片溶液1.6 mL(0.384 mg)灌胃,每日1次;空白对照组、模型对照组给予等量生理盐水灌胃,每日1次。各组均以4周为1个疗程。1个疗程结束后,采集各组大鼠血清、关节软骨,采用ELISA法、PCR法对血清标本的基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3、MMP-13、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、LC3水平进行检测;HE染色法观察关节软骨组织形态结构。结果:与空白对照组比较,模型对照组、西药组、火针组MMP-1、MMP-3、MMP-13、TNF-α、IL-1β表达升高(P<0.05),LC3表达降低(P<0.05);与模型对照组比较,火针组MMP-1、MMP-3、MMP-13、TNF-α、IL-1β表达降低(P<0.05),LC3表达升高(P<0.05);与西药组比较,火针组MMP-1、MMP-3、MMP-13、TNF-α、IL-1β表达降低(P<0.05),LC3表达升高(P<0.05)。关节软骨病理切片显示,火针组关节腔隙明显,软骨表面毛糙,滑膜组织有少量破损,炎性细胞浸润但少于模型对照组,部分潮线破坏,软骨细胞排列尚均匀。结论:火针可降低血清炎性因子含量,上调自噬标志性蛋白LC3的表达,抑制膝骨关节炎炎症反应,缓解炎性浸润,减轻软骨细胞的破坏,改善其病理状态。 展开更多
关键词 膝骨关节炎 火针 自噬 微管相关蛋白1轻链3 炎症因子 大鼠
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微管相关蛋白LC3和自噬基因Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达及其意义 被引量:43
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作者 沈扬 梁立治 +3 位作者 洪明晃 熊樱 魏梅 朱孝峰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第6期595-599,共5页
背景与目的:有研究表明自噬活性的改变与肿瘤的发生、发展有关。诱导自噬性细胞死亡已经成为杀死肿瘤细胞的新策略。本研究检测微管相关蛋白LC3和自噬基因Beclin1在不同卵巢肿瘤组织中的表达情况,探讨其与上皮性卵巢癌发生、发展的相关... 背景与目的:有研究表明自噬活性的改变与肿瘤的发生、发展有关。诱导自噬性细胞死亡已经成为杀死肿瘤细胞的新策略。本研究检测微管相关蛋白LC3和自噬基因Beclin1在不同卵巢肿瘤组织中的表达情况,探讨其与上皮性卵巢癌发生、发展的相关性及意义。方法:用免疫组化法检测25例良性卵巢肿瘤、25例交界性卵巢肿瘤及75例上皮性卵巢癌组织的LC3和Beclin1表达,并结合临床病理因素进行分析。结果:良性肿瘤组LC3和Beclin1的阳性率(100%、100%)和交界性卵巢肿瘤组LC3和Beclin1的阳性率(96%、84%)都明显高于上皮性卵巢癌组(57%、57%),且差异具有统计学意义(P均<0.001)。LC3在上皮性卵巢癌中的表达与FIGO分期和肿瘤分化程度相关(P=0.017;0.001)。Beclin1表达与上皮性卵巢癌患者FIGO分期相关(P=0.04)。LC3和Beclin1在卵巢上皮癌中的表达无相关性(P=0.875)。结论:LC3和Beclin1在上皮性卵巢癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与上皮性卵巢癌的发生、发展相关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 自噬 BECLIN1 lc3
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妊娠早期稽留流产患者绒毛组织中HIF-1α、BNIP3、LC3的表达 被引量:13
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作者 袁恩武 王银芳 +3 位作者 邢金芳 闫广伟 孙利环 代延朋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第3期335-339,共5页
目的:检测妊娠早期稽留流产患者绒毛组织中HIF-1α、BNIP3、LC3的表达,探讨滋养层细胞自噬异常与稽留流产的关系。方法:收集正常早孕妇女及稽留流产妇女绒毛组织各30例,采用实时荧光定量PCR法检测HIF-1α、BNIP3 mRNA的表达;采用免疫组... 目的:检测妊娠早期稽留流产患者绒毛组织中HIF-1α、BNIP3、LC3的表达,探讨滋养层细胞自噬异常与稽留流产的关系。方法:收集正常早孕妇女及稽留流产妇女绒毛组织各30例,采用实时荧光定量PCR法检测HIF-1α、BNIP3 mRNA的表达;采用免疫组化SP法及蛋白印迹法检测HIF-1α、BNIP3及LC3蛋白的表达。结果:两组绒毛组织中均可见HIF-1α、BNIP3及LC3蛋白的表达,HIF-1α主要定位于滋养细胞胞核及胞质,BNIP3及LC3主要定位于滋养层细胞胞质中。与正常早孕组相比,稽留流产组HIF-1α与BNIP3 mRNA和蛋白表达水平以及LC3Ⅱ/Ⅰ均明显下降(P<0.05)。结论:绒毛组织滋养层细胞中HIF-1α/BNIP3信号通路调节的低氧诱导自噬水平下降可能是稽留流产发生的重要机制。 展开更多
关键词 稽留流产 绒毛组织 自噬 HIF-1Α BNIP3 lc3
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五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响 被引量:16
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作者 姜辉 秦秀娟 +2 位作者 万磊 刘健 高家荣 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1566-1572,共7页
目的明确五味温通除痹胶囊(桂枝、茯苓、淫羊藿,等)对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响,探讨其防治类风湿关节炎的可能机制。方法雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、五味温通除痹胶囊(0.80、1.60、3.20 g/kg)组、... 目的明确五味温通除痹胶囊(桂枝、茯苓、淫羊藿,等)对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响,探讨其防治类风湿关节炎的可能机制。方法雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、五味温通除痹胶囊(0.80、1.60、3.20 g/kg)组、阳性药雷公藤多苷片(40 mg/kg)组,每组10只。除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎大鼠模型。致炎后第12天灌胃给药,连续12 d。实验结束后,取非致炎侧踝关节,HE染色观察病理学改变,实时定量荧光PCR测定滑膜组织中Beclin-1、LC3-ⅡmRNA的表达,免疫荧光组织化学染色和Western blot法检测滑膜组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果与模型组相比,五味温通除痹胶囊(1.60、3.20 g/kg)不仅可减轻佐剂性关节炎大鼠关节病理损伤程度,还可显著升高Beclin-1、LC3-ⅡmRNA和蛋白的表达水平。结论五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与促进细胞自噬,减少滑膜细胞的过度增殖,从而减轻关节软骨损伤有关。 展开更多
关键词 五味温通除痹胶囊 佐剂性关节炎 大鼠 BECLIN-1 lc3-Ⅱ
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乳腺癌中自噬相关基因LC3与凋亡相关基因XIAP的表达及意义 被引量:12
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作者 闫红 吴正升 +2 位作者 江冬瑞 王晓洁 吴强 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期409-412,共4页
目的观察自噬相关基因LC3和凋亡相关基因XIAP在乳腺癌组织中的表达,探讨其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用组织芯片平台,应用免疫组化法检测121例乳腺癌组织中LC3、XIAP的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果乳腺癌组织中,... 目的观察自噬相关基因LC3和凋亡相关基因XIAP在乳腺癌组织中的表达,探讨其表达与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用组织芯片平台,应用免疫组化法检测121例乳腺癌组织中LC3、XIAP的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果乳腺癌组织中,LC3和XIAP的高表达率分别为84.2%(102/121)和90.9%(110/121)。LC3的高表达与HER-2过表达呈显著正相关(P<0.05),XIAP的高表达与Ki-67和HER-2过表达呈显著正相关(P均<0.05),但均与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移、ER和PR表达无关(P均>0.05)。经Spearman秩相关检验,LC3和XIAP在乳腺癌中的表达呈显著正相关(P<0.05)。结论在乳腺癌中,高自噬活性与低凋亡现象并存,HER-2可能参与其中。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 自噬 凋亡 lc3 XIAP
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Beclin-1、LC3-Ⅱ在缺血后处理大鼠再灌注中的表达及意义 被引量:13
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作者 石秋艳 杨斌 +3 位作者 孙原 范亚霞 张春阳 刘冰 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期687-690,共4页
目的研究自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ在缺血后处理大鼠脑缺血再灌注海马中的表达及意义。方法根据Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,将实验动物随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组,缺血后处理组再按... 目的研究自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ在缺血后处理大鼠脑缺血再灌注海马中的表达及意义。方法根据Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,将实验动物随机分为3组:假手术组、缺血再灌注组、缺血后处理组,缺血后处理组再按不同缺血后处理时间分为15 s、30 s、1 min 3个亚组。缺血2 h再灌注24h后用免疫组织化学法检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达情况,透射电镜观察神经细胞中自噬和溶酶体的激活以及细胞超微结构的变化。结果与缺血再灌注组相比,缺血后处理组神经行为学评分明显降低(P<0.05),脑梗死体积明显减小(P<0.01),Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达细胞数明显增加(P<0.01),自噬体形成和溶酶体激活量增加;缺血30 s亚组相比较15 s和1 min亚组上述指标(神经行为学评分除外)(P>0.05),差异亦有显著性(P<0.01)。结论脑缺血后处理的抗缺血再灌注损伤作用可能与上调自噬相关蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的表达有关。 展开更多
关键词 BECLIN-1 lc3-Ⅱ 自噬 缺血后处理 缺血再灌注损伤
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