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sLRIG1蛋白多克隆抗体的制备及鉴定
1
作者 易伟 余信远 +1 位作者 柯应兵 卢祖能 《中国临床神经外科杂志》 2012年第12期743-745,共3页
目的制备专门针对富含亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)胞外段(或称可溶性LRIG1,sLRIG1)抗体。方法人工设计、合成sLRIG1抗原多肽,免疫日本大耳朵白兔,颈动脉取血,分离兔血清;酶联免疫吸附分析法测定抗体效价,免疫印迹鉴定所获抗... 目的制备专门针对富含亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)胞外段(或称可溶性LRIG1,sLRIG1)抗体。方法人工设计、合成sLRIG1抗原多肽,免疫日本大耳朵白兔,颈动脉取血,分离兔血清;酶联免疫吸附分析法测定抗体效价,免疫印迹鉴定所获抗体。结果抗sLRTG1抗体滴度可高达1:512000;免疫印迹证实所获抗体能与sLRIG1特异性结合,在100kD处蛋白显影清晰。结论成功获得兔抗人sLRIG1多克隆抗体,可满足进一步研究的需要。 展开更多
关键词 富含亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(lrig1) 可溶性lrig1 多克隆抗体 抗体制备 鉴定
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LRIG1、EGFR、E-Cadherin及N-Cadherin在胶质瘤中表达及其临床意义 被引量：9
2
作者 王鹏 杨勇 +5 位作者 王景文 胡昌龙 袁志诚 陆培松 湛利平 李巧玉 《临床神经外科杂志》 CAS 2016年第2期118-121,126,共5页
目的研究富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)、表皮生长因子受体(EGFR)、ECadherin及N-Cadherin在不同病理级别胶质瘤中表达差异,探讨LRIG1在胶质瘤恶性进展中可能的作用机制。方法收集74例胶质瘤患者手术标本,包含12对原发及... 目的研究富含亮氨酸重复序列免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)、表皮生长因子受体(EGFR)、ECadherin及N-Cadherin在不同病理级别胶质瘤中表达差异,探讨LRIG1在胶质瘤恶性进展中可能的作用机制。方法收集74例胶质瘤患者手术标本,包含12对原发及复发配对胶质瘤标本,采用qRT-PCR检测LRIG1、EGFR、E-Cadherin、N-Cadherin基因的表达,并采用免疫印迹检测LRIG1、EGFR、E-Cadherin、NCadherin、Vimentin蛋白表达情况。结果随着胶质瘤病理级别的升高,LRIG1、E-Cadherin基因及蛋白表达水平降低,EGFR、N-Cadherin基因及蛋白表达水平升高,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。WHOⅢ-Ⅳ组胶质瘤EGFR/LRIG1及N-Cadherin/E-Cadherin比值显著高于WHOⅠ-Ⅱ组(均P<0.05)。EGFR/LRIG1与NCadherin/E-Cadherin变化之间存在正相关(r=0.56,P<0.05)。对原发及复发配对胶质瘤标本的研究结果与上述一致。结论胶质瘤中EGFR/LRIG1表达失衡,可能通过诱导上皮间质转化(EMT)促进胶质瘤细胞的恶性进展。LRIG1可能成为胶质瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 lrig1 表皮生长因子受体 脑胶质瘤 上皮间质转化
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LRIG1对胶质瘤细胞中表皮生长因子受体的抑制作用及其机制 被引量：4
3
作者 叶飞 高庆蕾 +1 位作者 徐同江 雷霆 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期49-51,63,共4页
目的验证LRIG1在胶质瘤细胞中对表皮生长因子受体(EGFR)的抑制作用,探讨其作用机制。方法采用激光共聚焦显微镜及Western blot法检测LRIG1质粒转染前后神经胶质瘤H4细胞中EGFR和LRIG1的亚细胞定位和表达情况。结果在H4细胞中LRIG1低表达... 目的验证LRIG1在胶质瘤细胞中对表皮生长因子受体(EGFR)的抑制作用,探讨其作用机制。方法采用激光共聚焦显微镜及Western blot法检测LRIG1质粒转染前后神经胶质瘤H4细胞中EGFR和LRIG1的亚细胞定位和表达情况。结果在H4细胞中LRIG1低表达,EGFR高表达,均主要为膜表达;转染LRIG1质粒后,LRIG1表达增强,EGFR表达下降。结论LRIG1主要位于胶质瘤细胞膜上,对膜受体EGFR有抑制作用,参与EGFR的负反馈调节。 展开更多
关键词 lrig1 胶质瘤 表皮生长因子受体 转染
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LRIG1诱导人胶质瘤细胞凋亡与表皮生长因子受体基因关系 被引量：6
4
作者 姚声涛 唐文渊 郭川 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期157-160,共4页
目的研究LRIG1诱导神经胶质瘤细胞的凋亡作用,探讨LRIG1对表皮生长因子受体信号转导通路抑制效应的分子机制。方法采用Lipofectamine介导的基因转染技术,将质粒pcDNA3.1-LRIG1转染原代神经胶质瘤细胞,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和W... 目的研究LRIG1诱导神经胶质瘤细胞的凋亡作用,探讨LRIG1对表皮生长因子受体信号转导通路抑制效应的分子机制。方法采用Lipofectamine介导的基因转染技术,将质粒pcDNA3.1-LRIG1转染原代神经胶质瘤细胞,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测转染后胶质瘤细胞LRIG1和EGFR mRNA与蛋白水平的变化,Western blot方法检测神经胶质瘤细胞PKCα、Bax、bcl-2蛋白水平的变化。MTT法和流式细胞技术分析细胞的增殖和凋亡的变化。结果细胞中转染pcDNA3.1-LRIG1组中以LRIG1 mRNA和蛋白质的表达水平较未处理组和转染空载体组明显升高,而EGFR mRNA和蛋白质的表达水平较对照组和转染空载体组明显降低,PKCα、Bax表达上调,bc1-2表达下降,胶质瘤细胞生长受到抑制,凋亡显著增强。结论LRIG1可能通过参与形成EGFR的负反馈环,从多种途径抑制了肿瘤的生长。 展开更多
关键词 胶质瘤 lrig1 表皮生长因子受体
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LRIG1基因在人星形细胞瘤中的表达与意义 被引量：7
5
作者 易伟 叶飞 +2 位作者 郭东升 薛德麟 雷霆 《中国临床神经外科杂志》 2006年第1期29-31,共3页
目的探讨LRIG1在人星形细胞瘤中的表达与意义。方法设计、制作LRIG1mRNA寡核苷酸探针,用原位杂交检测LRIG1mRNA在16例不同级别人星形细胞瘤组织及11例原代培养的人脑星形细胞瘤细胞中的表达,同时用免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表... 目的探讨LRIG1在人星形细胞瘤中的表达与意义。方法设计、制作LRIG1mRNA寡核苷酸探针,用原位杂交检测LRIG1mRNA在16例不同级别人星形细胞瘤组织及11例原代培养的人脑星形细胞瘤细胞中的表达,同时用免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,分析肿瘤LRIG1表达和PCNA表达之间的关系。结果人星形细胞瘤组织和培养的星形细胞瘤细胞中均有一定程度的LRIG1表达,其表达的程度与PCNA表达呈显著负相关(P<0.05)。结论LRIG1蛋白具有抑制星形细胞瘤增殖的作用,可能参与了肿瘤的发生和发展过程。 展开更多
关键词 lrig1 星形细胞瘤 原位杂交 原代培养 增殖细胞核抗原(PCNA) 免疫组化
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LRIG1在脑膜瘤中的表达及与其生物学行为的关系 被引量：7
6
作者 曾令成 欧一博 +1 位作者 雷霆 郭东生 《中国临床神经外科杂志》 2007年第10期601-604,共4页
目的探讨一新的可能的抑癌基因——富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样多肽1(LRIG1)在脑膜瘤中的表达和其与脑膜瘤病理学分级及生物学行为的关系。方法收集我科2005年8月～2006年8月共98例脑膜瘤病例资料及石蜡标本,行LRIG1、内皮因子受... 目的探讨一新的可能的抑癌基因——富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样多肽1(LRIG1)在脑膜瘤中的表达和其与脑膜瘤病理学分级及生物学行为的关系。方法收集我科2005年8月～2006年8月共98例脑膜瘤病例资料及石蜡标本,行LRIG1、内皮因子受体(EGFR)和Ki67免疫组化染色,分析LRIG1、EGFR和Ki67蛋白表达与脑膜瘤病理学分级及侵袭性的关系。结果①LRIG1表达强度在不同级别、不同亚型、不同侵袭性表现的脑膜瘤中,无显著差异(P>0.05)。②EGFR与Ki67表达强度则随脑膜瘤级别的增高而增高(P<0.05),而在侵袭性及非侵袭性脑膜瘤中的表达无显著差异(P>0.05)。结论①LRIG1可能并未参加脑膜瘤的恶性进展或在其侵袭性行为中发挥效应。②EGFR信号系统的异常可能参与了脑膜瘤的恶性发展。 展开更多
关键词 lrig1 脑膜瘤 病理 侵袭性 免疫组化
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哈萨克族食管癌患者中Lrig1通过MEK-ERK信号通路调控NF-κB及MMP-2表达 被引量：2
7
作者 姜孝芳 李卉 +9 位作者 刘玲 王洪江 李秀梅 陈艳 庞作良 谌宏鸣 尹娜 李艳 沙亚哈提.别尔克哈之 李惠武 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期575-578,582,共5页
目的:探讨Lrig1、NF-κB及MMP-2在哈萨克族食管癌患者中的表达与PI3K-AKT、MEK-ERK信号通路及与临床病理指标之间的关系。方法:采用RT-PCR方法检测48例哈萨克族食管癌患者组织中Lrig1、NF-κB、MMP-2表达,探讨NF-κB、MMP-2的表达与Lrig... 目的:探讨Lrig1、NF-κB及MMP-2在哈萨克族食管癌患者中的表达与PI3K-AKT、MEK-ERK信号通路及与临床病理指标之间的关系。方法:采用RT-PCR方法检测48例哈萨克族食管癌患者组织中Lrig1、NF-κB、MMP-2表达,探讨NF-κB、MMP-2的表达与Lrig1的关系。纳入PI3K及MEK信号通路的关键基因PI3K、AKT1、MEK1、MEK2、MEK5、ERK1、ERK2,研究Lrig1调控NF-κB、MMP-2基因表达的通路。结果:转录水平mRNA检测显示在肿瘤组织及远端正常组织中NF-κB(P<0.001,P=0.014)、MMP-2(P=0.003,P=0.045)的表达与Lrig1 mRNA表达相关;蛋白水平Western blot检测显示Lrig1与NF-κB、MMP-2可能呈负相关。在肿瘤组织中MEK5(P<0.001)及ERK2(P=0.009)的表达与Lrig1相关;PI3K在正常组织中(P<0.001)的表达与Lrig1相关。Lrig1、MMP-2及NF-κB协同表达率为52.1%(25/48),其协同表达与淋巴结转移相关(P=0.020)。结论:NF-κB、MMP-2与Lrig1协同表达促进食管癌患者的淋巴结转移,Lrig1可能是通过MEK-ERK信号通路调控相关基因表达。 展开更多
关键词 食管癌 lrig1 NF-ΚB MMP-2 哈萨克族
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LRIG1和EGFR在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义 被引量：10
8
作者 严泽军 叶章群 +1 位作者 杨为民 郭东升 《临床泌尿外科杂志》 2007年第3期216-218,共3页
目的:探讨LRIG1和表皮生长因子受体(EGFR)在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测LRIG1和EGFR蛋白在52例膀胱移行细胞癌和8例正常膀胱组织中的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果:52例膀胱癌组织中,LR... 目的:探讨LRIG1和表皮生长因子受体(EGFR)在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测LRIG1和EGFR蛋白在52例膀胱移行细胞癌和8例正常膀胱组织中的表达情况,并结合临床资料进行分析。结果:52例膀胱癌组织中,LRIG1和EGFR蛋白的阳性表达率分别为38.5%(20/52)和65.4%(34/52)。8例正常膀胱组织中,LRIG1均呈阳性表达,EGFR均呈阴性表达。随着膀胱癌病理分级和临床分期的增高,LRIG1表达显著减少,而EGFR表达增高。LRIG1蛋白阳性表达率在未复发组高于复发组,EGFR蛋白阳性表达率在未复发组低于复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。LRIG1与EGFR的表达强度之间呈明显负相关(r=-0.505,P=0.000)。结论:LRIG1和EGFR可以作为判定膀胱移行细胞癌恶性程度及复发的参考指标。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 移行细胞癌 lrig1 EGFR 免疫组织化学
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口腔疣状癌中LRIG1的表达及其抑癌作用的初步研究 被引量：2
9
作者 邓智元 唐瞻贵 +1 位作者 王月红 李毅萍 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期184-188,共5页
目的:探讨富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样多肽1(LRIG1)在口腔疣状癌中的表达及其抑癌作用的机制。方法:收集口腔疣状癌(n=15)、口腔鳞状细胞癌(n=30)及对应癌旁组织石蜡标本共90例,以15例外伤患者的正常黏膜组织作为对照;免疫组织化... 目的:探讨富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样多肽1(LRIG1)在口腔疣状癌中的表达及其抑癌作用的机制。方法:收集口腔疣状癌(n=15)、口腔鳞状细胞癌(n=30)及对应癌旁组织石蜡标本共90例,以15例外伤患者的正常黏膜组织作为对照;免疫组织化学染色技术(SP法)检测其中LRIG1和Bcl-2的表达,并用皮尔森分析二者相关性。结果:LRIG1在正常黏膜、口腔疣状癌、口腔鳞状细胞癌组织中的表达依次下降(P<0.05)并伴随Bcl-2的表达依次升高(P<0.05);并且,LRIG1与Bcl-2表达呈负相关。结论:LRIG1可能通过抑制Bcl-2的表达抑制口腔疣状癌的发生发展。 展开更多
关键词 口腔疣状癌 lrig1 BCL-2 凋亡
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Survivin启动子控制LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌裸鼠移植瘤的治疗 被引量：1
10
作者 孙家媛 何振宇 +2 位作者 李凤岩 管迅行 严泽军 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期582-586,共5页
【目的】探讨Survivin启动子控制LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌裸鼠移植瘤的治疗作用及机制。【方法】建立膀胱癌裸鼠移植瘤模型,将成瘤裸鼠随机分为3组,Ad-Surp-LRIGl组(尾静脉注射Ad-Surp-LRIGl上清液)、AD-LRIG1组(尾静脉注射... 【目的】探讨Survivin启动子控制LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌裸鼠移植瘤的治疗作用及机制。【方法】建立膀胱癌裸鼠移植瘤模型,将成瘤裸鼠随机分为3组,Ad-Surp-LRIGl组(尾静脉注射Ad-Surp-LRIGl上清液)、AD-LRIG1组(尾静脉注射Ad-LRIGl上清液)、PBS组(尾静脉注射PBS),观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线;RT-PCR和Western blot分别检测各组肿瘤组织中LRIG1和EGFR mRNA和蛋白的表达。【结果】Ad-Surp-LRIGl组肿瘤生长速度明显慢于其他2组,治疗结束后Ad-Surp-LRIGl组肿瘤较其他2组轻,差异有统计学意义(F=97.86,P<0.001),Ad-LRIGl组与PBS组相比差异无统计学意义(t=1.73,P=0.06)。与其他两组相比,Ad-Surp-LRIGl组LRIG1的mRNA和蛋白表达水平明显升高,而EGFR的mRNA和蛋白表达水平则显著降低(P<0.01)。【结论】Ad-Surp-LRIGl在体外均能明显抑制膀胱癌的生长,其机制可能部分与LRIG1能下调EGFR的表达有关。 展开更多
关键词 腺病毒载体 膀胱肿瘤 SURVIVIN启动子 lrig1基因 基因治疗
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Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌细胞BIU87生长的影响 被引量：1
11
作者 严泽军 程跃 +3 位作者 蒋军辉 胡嘉盛 施小东 黄坚成 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2012年第4期375-379,共5页
目的:构建Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIGl,并检测其对人膀胱癌细胞BIU87生长的影响。方法:将经同源重组产生的重组腺病毒Ad-Surp-LRIGl在293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测其滴度。用Ad-S... 目的:构建Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIGl,并检测其对人膀胱癌细胞BIU87生长的影响。方法:将经同源重组产生的重组腺病毒Ad-Surp-LRIGl在293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测其滴度。用Ad-Surp-LRIGl和Ad-LRIGl分别感染人膀胱癌细胞BIU87及人膀胱上皮永生化细胞SV-HUC-1,MTT法评估Ad-Surp-LRIGl和Ad-LRIGl对BIU87细胞生长的抑制作用。结果:当感染复数(MOI)=25时,Ad-Surp-LRIGl在BIU87细胞中的转染效率为74.56%,在SV-HUC-1细胞中转染率为0,差异有统计学意义(χ2=58.64,P<0.05);Ad-LRIGl在BIU87细胞中的转染效率为68.27%,在SV-HUC-1细胞中转染率为72.52%,差异无统计学意义(χ2=0.075,P>0.05)。Ad-Surp-LRIGl和Ad-LRIGl在BIU87细胞中的转染效率相比,差异无统计学意义(χ2=0.016,P>0.05)。与PBS相比,Ad-Surp-LRIGl和Ad-LRIGl均能明显抑制BIU87细胞的生长,转染后第4天这一差异显著(F=15.96,P<0.05),而Ad-Surp-LRIGl组和Ad-LRIGl组细胞生长速度无明显差异。结论:成功构建了含有Survivin启动子驱动LRIG1基因的重组复制腺病毒Ad-Surp-LRIGl并鉴定正确,Ad-Surp-LRIGl能选择性转染人膀胱癌细胞BIU87,在体外能明显抑制膀胱癌细胞BIU87的生长。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 SURVIVIN启动子 lrig1基因 基因治疗
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LRIG1基因与肿瘤关系的研究进展 被引量：2
12
作者 邢细红 王雄伟 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1120-1122,共3页
LRIG1是新近发现的抑癌基因,是LRIGs家族成员（LRIG1、LRIG2和LRIG3）之一,在哺乳动物体内广泛存在.目前其家族研究较为透彻的是LRIG1,表明其与多种恶性肿瘤密切相关,现就近几年LRIG1与肿瘤之间关系的研究予以综述.
关键词 基因 肿瘤抑制 肿瘤 lrig1
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杆状病毒蛋白表达系统制备可溶性LRIG1蛋白及其鉴定 被引量：3
13
作者 柯应兵 卢祖能 易伟 《中国临床神经外科杂志》 2012年第8期476-478,共3页
目的为进一步研究肿瘤的治疗提供高质量的可溶性多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白(sLRIG1)。方法用重组sLRIG1的杆状病毒(Bac-sLRIG1)感染sf9昆虫细胞,表达的蛋白经提纯,获得sLRIG1蛋白,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)... 目的为进一步研究肿瘤的治疗提供高质量的可溶性多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白(sLRIG1)。方法用重组sLRIG1的杆状病毒(Bac-sLRIG1)感染sf9昆虫细胞,表达的蛋白经提纯,获得sLRIG1蛋白,用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹进行分析鉴定。结果使用杆状病毒表达载体系统(BEVS)成功表达了重组sLRIG1蛋白,最佳感染复率为5,孵育时间为72 h,经鉴定蛋白表达正确,纯度高达95%。结论用BEVS可成功获得大量高纯度重组sLRIG1蛋白,可满足后续实验的需要。 展开更多
关键词 可溶性lrig1 杆状病毒蛋白表达系统 蛋白表达 纯化 鉴定
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LRIG1基因与肿瘤的关系 被引量：1
14
作者 邢细红 王雄伟 郭东生 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期3141-3143,共3页
LRIGI是新近发现的抑癌基因，是LRIGs家族成员（LRIGl、LRIG2和LRIG3）之一，在哺乳动物体内广泛存在。它编码的产物为一类跨膜糖蛋白：在其胞外段含有多个亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域（tandemleucine—richrepeatsandimmunoglo... LRIGI是新近发现的抑癌基因，是LRIGs家族成员（LRIGl、LRIG2和LRIG3）之一，在哺乳动物体内广泛存在。它编码的产物为一类跨膜糖蛋白：在其胞外段含有多个亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样结构域（tandemleucine—richrepeatsandimmunoglobulin—likedomains，LRIG）。目前对其家族研究较为透彻的是LRIG1，研究表明其与多种恶性肿瘤密切相关，现就近几年LRIG1与肿瘤之间关系的研究予以综述。 展开更多
关键词 lrig1 恶性肿瘤 抑癌基因 LRIG2 免疫球蛋白 跨膜糖蛋白 家族成员 动物体内
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上调LRIG1对胶质瘤U251细胞侵袭、迁移的影响 被引量：1
15
作者 陶祥 张文斐 +5 位作者 刘骏辉 朱晓楠 冀保卫 张戈 徐海涛 陈治标 《中国临床神经外科杂志》 2021年第6期438-441,共4页
目的探讨上调LRIG1表达对胶质瘤U251细胞侵袭及迁移的影响。方法体外培养U251细胞,应用Lipofectami⁃neTM 2000试剂盒将质粒pLRIG1-GFP(pLRIG1-GFP组)及其空载pEGFP-N1质粒(pEGFP-N1组)转染U251细胞,G418挑选具有抗性的细胞并扩增,以供... 目的探讨上调LRIG1表达对胶质瘤U251细胞侵袭及迁移的影响。方法体外培养U251细胞,应用Lipofectami⁃neTM 2000试剂盒将质粒pLRIG1-GFP(pLRIG1-GFP组)及其空载pEGFP-N1质粒(pEGFP-N1组)转染U251细胞,G418挑选具有抗性的细胞并扩增,以供进一步实验。另选择不转染任何质粒U251细胞作为空白对照组。qRT-PCR、免疫印迹法检测LRIG1及细胞上皮-间充质转化(EMT)标志蛋白SNAI2、E-cadherin、N-cadherin和vimentin的mRNA和蛋白表达;应用Transwell小室实验检测U251细胞侵袭和迁移能力。结果成功构建高表达LRIG1的胶质瘤U251细胞,荧光显微镜下可见细胞散发绿色荧光。pLRIG1-GFP组LRIG1 mRNA及蛋白表达水平明显高于pEGFP-N1组和空白对照组(P<0.05),而后两组之间均无统计学差异(P>0.05)。pLRIG1-GFP组侵袭和迁移细胞数明显低于pEGFP-N1组和空白对照组(P<0.05),而后两组之间均无统计学差异(P>0.05)。pLRIG1-GFP组SNAI2、N-cadherin、vimentin mRNA及蛋白表达水平明显低于pEGFP-N1组和空白对照组(P<0.05),而E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显高于pEGFP-N1组和空白对照组(P<0.05);后两组之间均无统计学差异(P>0.05)。结论上调LRIG1,抑制U251细胞侵袭和迁移,其机制可能与调控细胞EMT过程有关。 展开更多
关键词 胶质瘤 U251细胞 lrig1 基因表达 细胞侵袭 细胞迁移 细胞上皮-间充质转化
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LRIG1基因功能域载体的构建及亚细胞定位 被引量：1
16
作者 郭东生 易伟 +1 位作者 薛德麟 雷霆 《华中医学杂志》 CAS 2006年第3期191-192,194,共3页
目的构建含LRIG1胞外段+跨膜段(ET)及跨膜段+胞内段(TC)基因的真核表达载体,并研究它们的亚细胞定位。方法以人LRIG1全长的质粒p3XFLAG-CMV-9-LRIG1为模板,PCR扩增出3XFLAG-LRIG1-ET和LRIG1-TC,并将之分别亚克隆入真核表达载体pIRES2-EG... 目的构建含LRIG1胞外段+跨膜段(ET)及跨膜段+胞内段(TC)基因的真核表达载体,并研究它们的亚细胞定位。方法以人LRIG1全长的质粒p3XFLAG-CMV-9-LRIG1为模板,PCR扩增出3XFLAG-LRIG1-ET和LRIG1-TC,并将之分别亚克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP-N1和p3XFLAG-CMV-9中。酶切和DNA测序鉴定,脂质体法将构建的质粒转染U251细胞,观察标记基因荧光蛋白EGFP的表达,间接免疫荧光检测标记基因3XFLAG的表达。结果构建的质粒序列正确,转染细胞后可检测到EGFP和3XFLAG基因的表达;LRIG1-ET和LRIG1-TC均主要表达在U251的胞膜上,少量表达在胞浆。结论包含LRIG1亚单位ET和TC的真核表达载体均构建成功,其表达产物均主要位于胞膜,少量位于胞浆。 展开更多
关键词 lrig1 表达载体 胞外段 胞内段 质粒构建
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Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒对人膀胱癌细胞T24侵袭能力的影响 被引量：1
17
作者 蒋军辉 严泽军 +2 位作者 程跃 蒋照辉 谢国海 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2013年第3期162-166,共5页
目的以Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌细胞系T24细胞,观察其对T24细胞侵袭能力的影响。方法 Ad-Surp-LRIG1转染T24细胞,用RT-PCR和Westernblot检测细胞中LRIG1的表达水平,并采用Transwell小室... 目的以Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌细胞系T24细胞,观察其对T24细胞侵袭能力的影响。方法 Ad-Surp-LRIG1转染T24细胞,用RT-PCR和Westernblot检测细胞中LRIG1的表达水平,并采用Transwell小室测定转染后细胞侵袭能力的变化。结果 Ad-Surp-LRIG1转染人膀胱癌T24细胞后,与对照组和空白对照组相比,体外侵袭实验显示实验组细胞的侵袭能力明显下降。LRIG1的mRNA和蛋白表达水平明显升高,而EGFR的mRNA和蛋白表达水平则显著降低(P<0.01)。结论 Survivin启动子驱动LRIG1基因表达的重组腺病毒Ad-Surp-LRIG1能够在T24细胞中有效表达,并显著抑制T24细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 lrig1基因 肿瘤侵袭 腺病毒载体
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Survivin启动子驱动的LRIG1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 被引量：3
18
作者 严泽军 程跃 +3 位作者 蒋军辉 胡嘉盛 施小东 黄坚成 《现代实用医学》 2012年第2期133-135,共3页
目的构建含Survivin启动子和LRIG1基因的重组复制缺陷型腺病毒并进行鉴定,为肿瘤基因治疗的研究奠定基础。方法应用分子克隆技术将Survivin启动子连接至pLRIGl-GFP上构建出pEGFP-Surp-LRIGl,将其与含有5型腺病毒右臂的质粒Pbhge3通过Lip... 目的构建含Survivin启动子和LRIG1基因的重组复制缺陷型腺病毒并进行鉴定,为肿瘤基因治疗的研究奠定基础。方法应用分子克隆技术将Survivin启动子连接至pLRIGl-GFP上构建出pEGFP-Surp-LRIGl,将其与含有5型腺病毒右臂的质粒Pbhge3通过Lipofectamine2000共转染至人胚肾293细胞,经同源重组产生重组腺病毒Ad-Surp-LRIGl。Ad-Surp-LRIGl在人胚肾293细胞中大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测其滴度。结果 pEGFP-Surp-LRIGl经酶切鉴定正确,扩增得到的Ad-Surp-LRIGl经PCR扩增证实为Survivin启动子驱动的LRIG1重组腺病毒,滴度为2.3×1010pfu/ml。结论成功构建出含有Sur-vivin启动子和LRIG1基因的重组复制缺陷型腺病毒并鉴定正确,可用于下一步膀胱癌基因治疗的研究中。 展开更多
关键词 腺病毒载体 SURVIVIN启动子 lrig1基因 基因治疗
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富含亮氨酸重复序列和LRIG1在人脑星形细胞瘤中的表达及意义 被引量：1
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作者 何毅 《海南医学院学报》 CAS 2013年第1期11-14,共4页
目的:探讨富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样多肽1(over-expressing leucine-rich repeats and immunoglobulin bulin-like domain protein 1,LRIG1)在人脑星形细胞瘤中的表达,并研究其表达与临床病理分级的关系,分析LRIG1基因的表达与... 目的:探讨富含亮氨酸重复序列和免疫球蛋白样多肽1(over-expressing leucine-rich repeats and immunoglobulin bulin-like domain protein 1,LRIG1)在人脑星形细胞瘤中的表达,并研究其表达与临床病理分级的关系,分析LRIG1基因的表达与表皮生长因子受体(epidermal growth factor recep-tor,EGFR)、P27及Rad51基因表达的相关性。方法:分别采用链霉亲和素复合体(strept Avidin-Bio-tin Complex,SABC)免疫组化法及逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)法检测了LRIG1mRNA和蛋白在70例具有不同临床病理分期的星形细胞瘤组织及10例正常人脑组织中的表达,并进一步分析了LRIG1与人脑星形胶质瘤临床病理学特征的关系。此外,从mRNA水平检测了EGFR、P27、Rad基因的表达情况,并采用SPSS17.0分析LRIG1基因表达与EGFR、P27及Rad51的相关性。结果:LRIG1及p27在正常脑组织中表达较高,而在脑胶质瘤中的表达水平均明显低于正常脑组织(P<0.05),且其表达水平与脑胶质瘤病理分级呈负相关,此外LRIG1mRNA的表达水平与p27具有显著性的正相关性;研究结果还显示EGFR及Rad51在正常脑组织中表达较低,而在脑胶质瘤中的表达显著性高于正常脑组织(P<0.05),且其表达水平随着脑胶质瘤病理分级的增加而增高,LRIG1mRNA的表达水平与EGFR及Rad51的表达水平分别成负相关性。结论:LRIG1可能参与了脑星形胶质细胞瘤的发生、发展及转归,LRIG1可作为判定脑星形胶质细胞瘤恶性程度及复发的参考指标。 展开更多
关键词 lrig1 EGFR P27 RAD 星形细胞瘤 免疫组化
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LRIG1基因特异性RNA干扰表达载体的构建、鉴定和稳定株的筛选
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作者 谢蕊繁 陈如东 +2 位作者 徐钰 郭东生 雷霆 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期274-277,共4页
目的构建针对LRIG1LRIG1(leucine-rich repeats andi mmunoglobulin-like domains1,LRIG1)基因的特异性RNA干扰质粒,稳定转染人胶质瘤GL15细胞系,观察其对目的基因LRIG1表达的影响,为探讨LRIG1基因沉默对人脑胶质瘤细胞的生物学行为调... 目的构建针对LRIG1LRIG1(leucine-rich repeats andi mmunoglobulin-like domains1,LRIG1)基因的特异性RNA干扰质粒,稳定转染人胶质瘤GL15细胞系,观察其对目的基因LRIG1表达的影响,为探讨LRIG1基因沉默对人脑胶质瘤细胞的生物学行为调控奠定基础。方法根据GenBank提供的LRIG1基因序列设计2条RNA干扰序列,命名为LRIG1-shRNA1、LRIG1-shRNA2,并设计1条非特异性序列作为阴性对照,命名为pGenesil2-negativesh RNA。合成各自的寡核苷酸链,退火后与pGenesil2质粒载体连接,转化扩增后测定序列。用不同浓度的G418作用于GL15细胞确定G418对GL15的筛选浓度。将3种重组表达载体转染GL15细胞,G418筛选后挑单克隆并扩增获得稳定株。Western印迹法在蛋白水平上检测LRIG1的表达。结果重组pGenesil2-LRIG1-sh RNA质粒经限制性酶切及DNA测序分析证明序列插入正确。G418对GL15细胞的筛选浓度为600mg/L,筛选出稳定转染三种质粒的GL15细胞,转染pGenesil2-LRIG1-sh RNA1组细胞LRIG1蛋白表达明显低于转染pGenesil2-negativesh RNA组。结论成功构建了针对LRIG1基因的特异性shRNA表达载体(pGenesil2-LRIG1-sh RNA1),转染细胞后可抑制LRIG1基因表达,为下一步研究其功能奠定基础。 展开更多
关键词 lrig1 RNA干扰 脑胶质瘤细胞
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