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慈菇消脂方对TGF-β1诱导LX2细胞miR-378a-3p表达及Hh信号通路的影响 被引量：1
1
作者 王爱娣 马燕花 +1 位作者 王莉 赵秀萍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1643-1648,共6页
目的观察慈菇消脂方对TGF-β1诱导活化LX2细胞miR-378a-3p表达及Hh信号通路的影响。方法将细胞分为对照组、诱导组、含药血清组、miR-378a-3p inhibitor组、miR inhibitor NC组。CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,... 目的观察慈菇消脂方对TGF-β1诱导活化LX2细胞miR-378a-3p表达及Hh信号通路的影响。方法将细胞分为对照组、诱导组、含药血清组、miR-378a-3p inhibitor组、miR inhibitor NC组。CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,RT-qPCR检测各组细胞miR-378a-3p表达,RT-qPCR和Western blot法检测各组细胞Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,诱导组细胞活力及Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA和蛋白表达升高(P<0.01),miR-378a-3p表达降低(P<0.01)。与诱导组比较,含药血清组细胞活力、Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA及α-SMA、Gli2蛋白表达降低(P<0.05),细胞凋亡率及miR-378a-3p表达升高(P<0.01);miR-378a-3p inhibitor组细胞活力、Shh、Gli1、Gli2、Col-I、α-SMA mRNA及Gli1、Gli2、α-SMA蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡率及miR-378a-3p表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论慈菇消脂方含药血清可上调TGF-β1诱导LX2细胞miR-378a-3p表达和下调Gli2、α-SMA表达,从而抑制LX2细胞活化,发挥抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 慈菇消脂方 lx2细胞 TGF-Β1 miR-378a-3p Hh信号通路
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乌索酸体外通过激活Nrf2信号通路抑制人肝星状细胞的增殖和细胞外基质相关基因的表达 被引量：3
2
作者 白庆云 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第1期140-146,共7页
目的乌索酸(Ursolic acid,UA)具有抗肝纤维化作用,但是其机制尚不完全清楚。由于肝纤维化与氧化应激有关,因此本文通过对乌索酸抗氧化作用的研究以阐释其抗肝纤维化机制。方法实验用实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain re... 目的乌索酸(Ursolic acid,UA)具有抗肝纤维化作用,但是其机制尚不完全清楚。由于肝纤维化与氧化应激有关,因此本文通过对乌索酸抗氧化作用的研究以阐释其抗肝纤维化机制。方法实验用实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)法和Western blot法检测氧化应激状态下LX2中α平滑肌肌动蛋白(alpha muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagen type I,COL1A1)、Ⅲ型胶原(collagen type Ⅲ,COL3A1)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase 1,TIMP1)mRNA和蛋白表达的变化以及UA对这些变化的影响;通过测定还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量以观察UA的抗氧化作用,并检测了核因子E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)及其下游基因血红素加氧酶(heme oxygenase 1,HO1)蛋白表达的变化,探察UA抗肝纤维化作用的可能机制。结果实验结果显示H2O2可引起LX2的活化和氧化应激,使细胞中的ECM mRNA表达增加。UA可抑制LX2的活化,减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的表达,显著升高GSH含量,降低MDA含量,并增加Nrf2的转核和HO1的表达。结论实验结果提示UA通过激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用从而抑制LX2的活化和ECM的产生。 展开更多
关键词 乌索酸 肝星状细胞lx2 肝纤维化 H2O2 抗氧化 NRF2
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乙型肝炎病毒全x蛋白体外诱导肝星状细胞炎症反应并促进肝细胞凋亡 被引量：1
3
作者 何亚娟 王飞 +2 位作者 姚耐娟 吴宇超 田臻 《实用肝脏病杂志》 CAS 2022年第3期323-326,共4页
目的探究乙型肝炎病毒(HBV)全x蛋白(HBwx)诱导肝星状细胞(HSCs)炎症反应和促进肝细胞凋亡的作用及其机制。方法取LX2细胞,分为对照组、脂多糖(LPS)处理组、转染HBwx处理组和LPS联合转染HBwx处理组。采用Western blot法检测自噬相关蛋白... 目的探究乙型肝炎病毒(HBV)全x蛋白(HBwx)诱导肝星状细胞(HSCs)炎症反应和促进肝细胞凋亡的作用及其机制。方法取LX2细胞,分为对照组、脂多糖(LPS)处理组、转染HBwx处理组和LPS联合转染HBwx处理组。采用Western blot法检测自噬相关蛋白p62和LC3及炎症相关蛋白NLRP3和pro-IL表达,采用ELISA法检测培养上清IL-1β水平;收集上述各组LX2细胞培养上清刺激HL7702细胞培养,使用流式细胞仪检测HL7702细胞凋亡。结果经HBwx质粒转染的LX2细胞在细胞质表达HBwx蛋白;与正常组比,LPS组、HBwx组和LPS联合HBwx组LC3表达显著减低,而p62表达显著增强(P<0.05);与正常组比,LPS组、HBwx组和LPS联合HBwx组NLRP3和pro-IL1表达显著增强(P<0.05);与正常组比,LPS组、HBwx组和LPS联合HBwx组IL-1β分泌显著增多(P<0.05);与正常组比,LPS、HBwx和LPS联合HBwx处理HL-7702细胞凋亡水平显著增强(P<0.05);与LPS组或HBwx组比,LPS联合HBwx处理HL-7702细胞凋亡水平进一步增强(P<0.05)。结论HBwx作用于HSCs抑制自噬并促进细胞炎症反应,HSCs分泌IL-1β,诱导肝细胞凋亡。 展开更多
关键词 lx2细胞 HL7702细胞 乙型肝炎病毒全x基因 自噬 凋亡 体外
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17-DMAG对人LX2肝星状细胞增殖及凋亡作用的研究
4
作者 庄敏 王春波 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2014年第3期118-121,共4页
目的研究HSP90抑制剂17-DMAG在体外对人LX2肝星状细胞生长增殖及细胞凋亡的作用。方法 ?体外培养人LX2肝星状细胞,用细胞毒试验法(MTT)观察不同浓度和作用时间的17-DMAG对LX2细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测药物作用后LX2细胞凋亡的... 目的研究HSP90抑制剂17-DMAG在体外对人LX2肝星状细胞生长增殖及细胞凋亡的作用。方法 ?体外培养人LX2肝星状细胞,用细胞毒试验法(MTT)观察不同浓度和作用时间的17-DMAG对LX2细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测药物作用后LX2细胞凋亡的发生;Western blot检测α-SMA的表达,并与对照组进行对比。结果 17-DMAG能抑制人LX2肝星状细胞生长,且呈浓度和时间依赖性(P<0.01),随药物浓度加大和作用时间延长,存活细胞数量逐渐减少;流式细胞仪证实17-DMAG可诱导LX2细胞凋亡,与对照组比较,实验组细胞凋亡率明显增加(P<0.01);Western blot可以证实17-DMAG可使LX2细胞α-SMA表达减少,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 17-DMAG可呈浓度和时间依赖性的抑制人LX2肝星状细胞的生长,其机制为诱导细胞凋亡,并且通过这种机制来减少α-SMA的表达来抑制胶原的产生。 展开更多
关键词 HSP90热休克蛋白质类 细胞凋亡 17-DMAG 人肝星状细胞lx2 Α平滑肌肌动蛋白
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慈菇消脂丸含药血清对Hh信号通路相关miRNA的调控作用 被引量：2
5
作者 王莉 马燕花 +4 位作者 赵秀萍 王爱娣 尹硕 何燕芳 谢娇娇 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期2305-2309,共5页
目的探讨慈菇消脂丸含药血清对Hh信号通路相关差异表达miRNA的调控作用。方法利用生物信息学技术筛选不同浓度慈菇消脂丸含药血清干预组差异表达miRNAs,并进行GO和KEGG富集分析,筛选出Hh信号通路相关miRNA,运用Q-PCR技术进行验证。结果... 目的探讨慈菇消脂丸含药血清对Hh信号通路相关差异表达miRNA的调控作用。方法利用生物信息学技术筛选不同浓度慈菇消脂丸含药血清干预组差异表达miRNAs,并进行GO和KEGG富集分析,筛选出Hh信号通路相关miRNA,运用Q-PCR技术进行验证。结果生物信息学筛选差异miRNAs靶基因,结果显示:与正常组比较,2%含药血清组筛选出63个差异miRNAs,34个基因上调和29个基因下调;4%含药血清组筛选出72个差异miRNAs,37个基因上调和35个基因下调;6%含药血清组筛选出82个差异miRNAs,41个基因上调和41个基因下调。通过GO和KEGG富集分析,发现Hh信号通路中9个显著差异miRNAs:miR-149-5p、miR-199a-5p、miR-210-3p、miR-222-3p、miR-27b-3p、miR-34a-5p、miR-378a-3p、miR-497-5p、miR-671-5p,通过查阅相关文献,最终确定3个靶基因miR-378a-3p、miR-199a-5p、miR-34a-5p进行Q-PCR验证,结果显示:与正常对照组比较,不同浓度的慈菇消脂丸含药血清处理组miR-378a-3p基因表达上调(P<0.01),miR-199a-5p、miR-34a-5p基因表达下调(P<0.01)。结论中药慈菇消脂丸含药血清可以使LX2细胞中miR-199a-5p、miR-34a-5p基因表达下调,miR-378a-3p基因表达上调,可能通过干预差异表达miRNA调控Hh信号通路而抗肝纤维化。 展开更多
关键词 慈菇消脂丸 Hh信号通路 MIRNA 人肝lx2细胞
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