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Live-cell imaging:new avenues to investigate retinal regeneration 被引量:1
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作者 Manuela Lahne David R.Hyde 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2017年第8期1210-1219,共10页
Sensing and responding to our environment requires functional neurons that act in concert. Neuronal cell loss resulting from degenerative diseases cannot be replaced in humans, causing a functional impairment to integ... Sensing and responding to our environment requires functional neurons that act in concert. Neuronal cell loss resulting from degenerative diseases cannot be replaced in humans, causing a functional impairment to integrate and/or respond to sensory cues. In contrast, zebrafish(Danio rerio) possess an endogenous capacity to regenerate lost neurons. Here, we will focus on the processes that lead to neuronal regeneration in the zebrafish retina. Dying retinal neurons release a damage signal, tumor necrosis factor α, which induces the resident radial glia, the Müller glia, to reprogram and re-enter the cell cycle. The Müller glia divide asymmetrically to produce a Müller glia that exits the cell cycle and a neuronal progenitor cell. The arising neuronal progenitor cells undergo several rounds of cell divisions before they migrate to the site of damage to differentiate into the neuronal cell types that were lost. Molecular and immunohistochemical studies have predominantly provided insight into the mechanisms that regulate retinal regeneration. However, many processes during retinal regeneration are dynamic and require live-cell imaging to fully discern the underlying mechanisms. Recently, a multiphoton imaging approach of adult zebrafish retinal cultures was developed. We will discuss the use of live-cell imaging, the currently available tools and those that need to be developed to advance our knowledge on major open questions in the field of retinal regeneration. 展开更多
关键词 multiphoton microscopy live-cell imaging ZEBRAFISH interkinetic nuclear migration tissue culture retinal regeneration Miiller glia neuronal progenitor cell differentiation PHAGOCYTOSIS
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Molecular engineering and live-cell imaging in mechanobiology
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作者 Yingxiao Wang(Departments of Bioengineering,Molecular and Integrative Physiology,Neuroscience Program,Center for Biophysics and Computational Biology,Institute of Genomic Biology,Beckman Institute for Advanced Science and Technology,University of Illinois,Urbana-Champaign,Urbana,IL 61801,USA.) 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2010年第S1期27-27,共1页
Cells in the body are exposed to physiological and pathophysiological stimuli that encompass both chemical and mechanical factors,which coordinately modulate cellular functions. Compared to the large amount of informa... Cells in the body are exposed to physiological and pathophysiological stimuli that encompass both chemical and mechanical factors,which coordinately modulate cellular functions. Compared to the large amount of information on cellular re- 展开更多
关键词 CELL Molecular engineering and live-cell imaging in mechanobiology
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Thioredoxin pathway regulated live-cell synthesis of CdSe quantum dots in Saccharomyces cerevisiae
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作者 Xu Li Cai-Qin Wu +4 位作者 Jia-Wei Tu Juan Kong Ling-Ling Yang Zhi-Xiong Xie Dai-Wen Pang 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第11期3851-3860,共10页
Currently, the application of synthetic biology to artificially manipulate and utilize organisms for the synthesis of desired products such as nanomaterials with excellent fluorescence properties is attracting conside... Currently, the application of synthetic biology to artificially manipulate and utilize organisms for the synthesis of desired products such as nanomaterials with excellent fluorescence properties is attracting considerable attention. However, it is still difficult to obtain designed products efficiently due to insufficient knowledge of the biosynthetic mechanisms. The thioredoxin(TRX) and glutathione(GSH) pathways are generally conserved thiol-reductase systems that protect organisms from oxidative stress and are involved in selenium(Se) metabolism. In this study, we revealed the pivotal role of cytoplasmic TRX pathway in regulating the metabolism of Na_(2)SeO_(3) during the live-cell synthesis of cadmium-selenium quantum dots(Cd Se QDs) in Saccharomyces cerevisiae by regulating the expression level of genes related to TRX pathway and measuring the intracellular content of selenocysteine(Se Cys). The determination of Se Cys metabolism in yeast with GSH pathway-related genes deleted demonstrated that the TRX pathway played a more significant role in Se Cys metabolism than GSH pathway. A 6.4-fold enhancement in the synthetic yield of Cd Se QDs was achieved through the overexpression of TRX pathway-related genes,improvement of synthetic procedure, and supplementation of GSH based on the understanding of biological metabolism.Exploring the mechanism of CdSe QDs live-cell synthesis facilitates the precise manipulation of biological processes for the synthesis of inorganic nanomaterials. 展开更多
关键词 THIOREDOXIN GLUTATHIONE quantum dot live-cell synthesis selenium metabolism Saccharomyces cerevisiae
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Live-Cell Imaging of Dual-Labeled Golgi Stacks in Tobacco BY-2 Cells Reveals Similar Behaviors for Different Cisternae during Movement and Brefeldin A Treatment 被引量:1
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作者 Stephanie L. Madison Andreas Nebenfuhr 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2011年第5期896-908,共13页
In plant cells, the Golgi apparatus consists of numerous stacks that, in turn, are composed of several flattened cisternae with a clear cis-to-trans polarity. During normal functioning within living cells, this unusua... In plant cells, the Golgi apparatus consists of numerous stacks that, in turn, are composed of several flattened cisternae with a clear cis-to-trans polarity. During normal functioning within living cells, this unusual organelle displays a wide range of dynamic behaviors such as whole stack motility, constant membrane flux through the cisternae, and Golgi enzyme recycling through the ER. In order to further investigate various aspects of Golgi stack dynamics and integrity, we co-expressed pairs of established Golgi markers in tobacco BY-2 cells to distinguish sub-compartments of the Golgi during monensin treatments, movement, and brefeldin A (BFA)-induced disassembly. A combination of cis and trans markers revealed that Golgi stacks remain intact as they move through the cytoplasm. The Golgi stack orientation during these movements showed a slight preference for the cis side moving ahead, but trans cisternae were also found at the leading edge. During BFA treatments, the different sub-compartments of about half of the observed stacks fused with the ER sequentially; however, no consistent order could be detected. In contrast, the ionophore monensin resulted in swelling of trans cisternae while medial and particularly cis cisternae were mostly unaffected. Our results thus demonstrate a re- markable equivalence of the different cisternae with respect to movement and BFA-induced fusion with the ER. In addi- tion, we propose that a combination of dual-label fluorescence microscopy and drug treatments can provide a simple alternative approach to the determination of protein localization to specific Golgi sub-compartments. 展开更多
关键词 Golgi apparatus Golgi stack integrity brefeldin A MONENSIN tobacco BY-2 cells live-cell imaging.
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Re-evaluation of physical interaction between plant peroxisomes and other organelles using live-cell imaging techniques 被引量:1
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作者 Kazusato Oikawa Makoto Hayashi +1 位作者 Yasuko Hayashi Mikio Nishimura 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2019年第7期836-852,共17页
The dynamic behavior of organelles is essential for plant survival under various environmental conditions. Plant organelles, with various functions,migrate along actin filaments and contact other types of organelles, ... The dynamic behavior of organelles is essential for plant survival under various environmental conditions. Plant organelles, with various functions,migrate along actin filaments and contact other types of organelles, leading to physical interactions at a specific site called the membrane contact site. Recent studies have revealed the importance of physical interactions in maintaining efficient metabolite flow between organelles.In this review, we first summarize peroxisome function under different environmental conditions and growth stages to understand organelle interactions. We then discuss current knowledge regarding the interactions between peroxisome and other organelles, i.e., the oil bodies, chloroplast, and mitochondria from the perspective of metabolic and physiological regulation, with reference to various organelle interactions and techniques for estimating organelle interactions occurring in plant cells. 展开更多
关键词 physical interaction plant PEROXISOMES live-cell
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基于智能化控制的高效活细胞成像技术
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作者 缴莉 边鑫 +1 位作者 龙加福 刘如明 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2024年第10期36-39,共4页
为提升活细胞功能研究的效率与准确性,显微成像平台研发了1款智能化控制精准加样系统。自主研发的加样系统具备远程自动化控制功能,能实现精准的药物定时定点添加。经研究和测试,该系统展现出卓越的通用性,能与常见的光学成像设备搭载使... 为提升活细胞功能研究的效率与准确性,显微成像平台研发了1款智能化控制精准加样系统。自主研发的加样系统具备远程自动化控制功能,能实现精准的药物定时定点添加。经研究和测试,该系统展现出卓越的通用性,能与常见的光学成像设备搭载使用,并能满足从短期到长期活细胞功能研究的各种实验要求。在活细胞连续成像的过程中,采用智能化与精准化的控制方法,可显著提升实验的准确性、稳定性和效率,尤其是能确保关键数据的完整性。该研究工作有效促进了细胞功能等关键科研领域的深入探索,成功增强了多台光学成像仪器的测试能力和应用价值,同时也推动了创新人才的成长和高标准科研平台的搭建。 展开更多
关键词 活细胞成像 仪器设备研发 自动化精准加样 仪器平台建设
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在线活细胞定量检测模型的建立及其在辅酶Q10中的应用
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作者 葛燕 刘建镔 +4 位作者 翟辰欣 杨冰莹 郝喆江 王泽建 梁剑光 《中国食品添加剂》 CAS 2024年第4期219-226,共8页
在类球红细菌发酵生产辅酶Q10的过程中,其菌体生长代谢情况及产物合成与有活力的细胞量密切相关。活细胞传感仪通过利用细胞的介电特性,能够检测发酵液中的活细胞量,且检测结果不受死细胞、气泡的影响。在辅酶Q10的发酵过程中,运用活细... 在类球红细菌发酵生产辅酶Q10的过程中,其菌体生长代谢情况及产物合成与有活力的细胞量密切相关。活细胞传感仪通过利用细胞的介电特性,能够检测发酵液中的活细胞量,且检测结果不受死细胞、气泡的影响。在辅酶Q10的发酵过程中,运用活细胞传感仪采用全频扫描模式对检测到的电容值进行校正,校正后的电容值与CFU具有良好的线性关系,R^(2)=0.995,可以准确预测发酵液中菌体生长状态和活细胞量。基于电导率和校正后的电容值对辅酶Q10发酵过程中补料策略进行优化,辅酶Q10产量最终达到3420 mg/L。 展开更多
关键词 辅酶Q10 活细胞量 在线活细胞传感仪 电容值 电导率
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罗伊氏乳杆活菌和热灭活菌对小鼠抑郁样行为的影响及作用机制
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作者 于海宁 娄毛闪 《浙江工业大学学报》 CAS 北大核心 2024年第2期203-216,共14页
为了探究罗伊氏乳杆活菌与灭活菌对小鼠肠道菌群失衡引起的抑郁样行为的作用及作用机制,采用头孢曲松钠(Ceftriaxone sodium,CRO)处理构建肠道菌群失衡小鼠抑郁模型,并用罗伊氏乳杆活菌(Live Lactobacillus reuteri,Live LR)和热灭活菌(... 为了探究罗伊氏乳杆活菌与灭活菌对小鼠肠道菌群失衡引起的抑郁样行为的作用及作用机制,采用头孢曲松钠(Ceftriaxone sodium,CRO)处理构建肠道菌群失衡小鼠抑郁模型,并用罗伊氏乳杆活菌(Live Lactobacillus reuteri,Live LR)和热灭活菌(Heat-killed Lactobacillus reuteri,HK LR)进行干预。采用ELISA试剂盒测定5-羟色胺、5-羟基吲哚乙酸、色氨酸和皮质酮质量浓度;通过H&E染色观察结肠组织形态;通过高通量测序和生物信息学分析对肠道微生物组进行分析。结果表明:Live LR和HK LR干预缓解了小鼠抑郁样行为,修复了CRO引起的肠道菌群失调,并减少了结肠组织炎细胞浸润。两种益生菌的作用机制存在差异,Live LR侧重于肠道菌群的重塑,而HK LR则通过其代谢产物直接发挥抗炎作用。 展开更多
关键词 肠道微生物失调 罗伊氏乳杆活菌 罗伊氏乳杆热灭活菌 抑郁 炎细胞浸润
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基于铁配合物的焦磷酸根离子荧光探针的构建及生物成像
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作者 陈壹刘 宗洪凤 +3 位作者 李锦 高妍 肖嘉扬 高云 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1578-1586,共9页
以萘并[2,1-b]呋喃-2-碳酰肼和4-甲酰基-3-羟基-N-丁基-1,8-萘二甲酰亚胺为原料经缩合反应制备了一种新型配体ARC,配体ARC与Fe^(3+)按照1∶1络合制备了荧光探针ARC-Fe^(3+),通过高分辨率质谱(HR-MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)对探针结构进... 以萘并[2,1-b]呋喃-2-碳酰肼和4-甲酰基-3-羟基-N-丁基-1,8-萘二甲酰亚胺为原料经缩合反应制备了一种新型配体ARC,配体ARC与Fe^(3+)按照1∶1络合制备了荧光探针ARC-Fe^(3+),通过高分辨率质谱(HR-MS)、核磁共振氢谱(1H NMR)对探针结构进行了表征。利用紫外-可见吸收光谱、荧光光谱等方法对ARC-Fe^(3+)的识别性能进行了研究。结果表明,探针ARC-Fe^(3+)可通过荧光“OFF-ON”高选择、高灵敏地识别焦磷酸根离子(PPi),探针ARC-Fe^(3+)识别PPi的检测限为1.12×10^(-8) mol/L,且可在60 s内完成对PPi的响应。探针ARC-Fe^(3+)已被成功应用于细胞和活鼠体内对PPi的荧光成像研究。 展开更多
关键词 Fe^(3+)配合物 荧光探针 PPI 细胞成像 活鼠成像
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一种用于过氧亚硝酸根检测的近红外比率荧光探针的研制
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作者 韩志湘 代晓婷 熊杰 《江苏大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第1期112-118,共7页
设计合成了一种基于半花菁的近红外比率荧光探针分子Cy-P,并将其用于活细胞中的外源性和内源性过氧亚硝酸根(ONOO-)荧光成像检测.研究结果表明:探针分子Cy-P自身具有较大的π共轭结构,其最大发射波长在近红外区域;加入ONOO-后,强氧化性... 设计合成了一种基于半花菁的近红外比率荧光探针分子Cy-P,并将其用于活细胞中的外源性和内源性过氧亚硝酸根(ONOO-)荧光成像检测.研究结果表明:探针分子Cy-P自身具有较大的π共轭结构,其最大发射波长在近红外区域;加入ONOO-后,强氧化性的ONOO-会导致Cy-P的π共轭体系被破坏,并生成蓝色荧光物质,最大发射波长蓝移了268 nm;探针分子Cy-P对ONOO-线性检测范围为0~15μmol/L,检测下限为13 nmol/L;该探针分子对ONOO-的识别性能优于其他各种可能干扰的生物分析物;该探针分子具有低细胞毒性,适用于活细胞中的外源性和内源性ONOO-的成像检测. 展开更多
关键词 近红外比率荧光探针 过氧亚硝酸根 半花菁 活细胞 荧光成像
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解析疫苗接种后抗体记忆的维持:进展与挑战
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作者 李嘉杰 汪舒杨 +3 位作者 王思捷 马思轩 冀正林 刘万里 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1569-1578,共10页
“首次感染可以为二次感染提供免疫保护”的生物学基本原理推动近代疫苗的诞生与使用。这种免疫保护的基础是抗体记忆,然而各种疫苗引起的有效抗体应答的持续时间各不相同。临床研究发现,接种减毒活疫苗后引起的中和抗体滴度通常水平较... “首次感染可以为二次感染提供免疫保护”的生物学基本原理推动近代疫苗的诞生与使用。这种免疫保护的基础是抗体记忆,然而各种疫苗引起的有效抗体应答的持续时间各不相同。临床研究发现,接种减毒活疫苗后引起的中和抗体滴度通常水平较高且持续时间久。但减毒活疫苗存在难以回避的安全性风险,因此有必要进一步研究高水平、高质量抗体记忆的产生机制与调控因素,以开发兼具保护性与安全性的新型疫苗。抗体记忆的维持主要依赖于长寿浆细胞介导的抗体分泌,以及记忆B细胞在二次感染时介导的快速记忆性抗体应答。抗原结构与抗原效价、疫苗的抗原载量与免疫策略、病原体相关物质与疫苗佐剂等因素均可通过影响生发中心反应调控抗体记忆的持续时长。本文将梳理疫苗中各成分及因素对抗体记忆生成和维持的相关机制,并尝试讨论目前疫苗学和基础免疫学领域对此方面仍存有的问题与挑战。 展开更多
关键词 减毒活疫苗 中和抗体 B细胞 抗体记忆
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基于图像识别的酵母活细胞率快速测定系统
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作者 张小骥 秦磊磊 +2 位作者 江一飞 何小艳 张雪琪 《食品安全导刊》 2024年第19期92-96,共5页
酵母活细胞率作为评判活性干酵母质量优劣的重要指标之一,准确快速地检测出结果显得尤为重要。本文针对传统方法进行活细胞率检测存在效率低、过程复杂等问题开发了一款计数软件,并将血球计数板替换为96孔细胞培养板进行计数。对比人工... 酵母活细胞率作为评判活性干酵母质量优劣的重要指标之一,准确快速地检测出结果显得尤为重要。本文针对传统方法进行活细胞率检测存在效率低、过程复杂等问题开发了一款计数软件,并将血球计数板替换为96孔细胞培养板进行计数。对比人工计数和软件计数在检测酵母活细胞率的误差以及采用不同容器进行检验的效率,结果表明,相对于人工计数,软件计数耗时更短,且误差较小;采用96孔细胞培养板批量检测比采用血球计数板耗时更短。 展开更多
关键词 酵母计数 活细胞率 霍夫圆变换 图像处理
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The Limbal Niche and Its Role in Maintaining Corneal Regeneration
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作者 Jaysukh P. Singh 《Open Journal of Ophthalmology》 2024年第1期76-91,共16页
In recent years, stem cells have been a focal point in research designed to evaluate the efficacy of ophthalmologic therapies, specifically those for corneal conditions. The corneal epithelium is one of the few region... In recent years, stem cells have been a focal point in research designed to evaluate the efficacy of ophthalmologic therapies, specifically those for corneal conditions. The corneal epithelium is one of the few regions of the body that maintains itself using a residual stem cell population within the adjacent limbus. Stem cell movement has additionally captivated the minds of researchers due to its potential application in different body regions. The cornea is a viable model for varying methods to track stem cell migratory patterns, such as lineage tracing and live imaging from the limbus. These developments have the potential to pave the way for future therapies designed to ensure the continuous regeneration of the corneal epithelium following injury via the limbal stem cell niche. This literature review aims to analyze the various methods of imaging used to understand the limbal stem cell niche and possible future directions that might be useful to consider for the better treatment and prevention of disorders of the cornea and corneal epithelium. . 展开更多
关键词 CORNEA LIMBUS Molecular Biology Stem Cells Lineage Tracing Live Imaging
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基于受激发射损耗显微术的活细胞和活体超分辨成像 被引量:2
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作者 周汉秋 朱殷铷 +4 位作者 韩鸿怡 王璐玮 杨志刚 严伟 屈军乐 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第3期513-528,共16页
细胞作为生命体基本的结构和功能单元,在生物、医学等领域有着非常重要的研究意义。随着现代科学和技术的发展,科学家们借助电镜对细胞以及细胞器的空间结构已经有非常清晰的认识,但是对它们的功能以及细胞之间的相互作用却了解得非常少... 细胞作为生命体基本的结构和功能单元,在生物、医学等领域有着非常重要的研究意义。随着现代科学和技术的发展,科学家们借助电镜对细胞以及细胞器的空间结构已经有非常清晰的认识,但是对它们的功能以及细胞之间的相互作用却了解得非常少,而这恰恰又是疾病治疗和药物开发亟需了解的信息,因此对离体活细胞(简称活细胞)和活体生物组织细胞(简称活体细胞)中亚细胞器的研究变得非常重要。然而细胞中许多细胞器的结构在纳米量级,传统的光学成像技术由于受到光学衍射极限的限制是无法观察到纳米量级的生物结构,因此光学超分辨成像技术是目前研究亚细胞器结构和功能的有效工具。在所有光学超分辨显微技术中,受激发射损耗显微术(stimulated emission depletionmicroscopy,STED)由于具有实时成像、三维超分辨和断层成像的能力,非常适合用于纳米尺度的活细胞和活体细胞成像研究,而且STED超分辨成像技术经过近几十年的发展,已经广泛用于活细胞甚至活体小鼠细胞的超分辨动态观测。本文总结了近年来活细胞和活体小鼠神经元细胞等领域STED超分辨成像的研究进展,介绍了用于活细胞和活体细胞STED超分辨成像的荧光染料和荧光蛋白的发展现状,讨论当前活细胞和活体细胞的超分辨成像面临的问题,以及对未来发展的展望。 展开更多
关键词 活细胞 活体 受激辐射损耗显微术 超分辨率成像
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一种新型水溶性聚集诱导发光探针的合成
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作者 谢样梓 李莹 +3 位作者 罗媛 蔡林涛 焦哲 张鹏飞 《合成化学》 CAS 2023年第7期533-538,共6页
传统有机染料在稀溶液中表现出强烈的荧光现象,而在聚集态的情况下,因受到聚集诱导淬灭效应(ACQ)的影响,荧光强度会大幅度降低,致使光量子产率低,很大程度上限制了有机染料的应用。基于在生物学的研究中,通常以水相的方式进行,然而有机... 传统有机染料在稀溶液中表现出强烈的荧光现象,而在聚集态的情况下,因受到聚集诱导淬灭效应(ACQ)的影响,荧光强度会大幅度降低,致使光量子产率低,很大程度上限制了有机染料的应用。基于在生物学的研究中,通常以水相的方式进行,然而有机染料水溶性差且生物相容性差。因此,以简单的方法合成水溶性的AIE染料在研究中具有很大的优势。本文以4,4′-[(4-溴苯基)亚甲基]双(N,N-二甲基苯胺)和5-甲酰基呋喃-2-硼酸作为底物经过Suzuki偶联反应得到水溶性聚集诱导发光(AIE)材料MG-A。通过^(1)H NMR,^(13)C NMR,HR-MS(ESI)等分析表征,确定了产物的结构。通过光物理表征和活细胞共聚焦成像实验证明了本文中合成的分子MG-A具有良好的水溶性以及聚集诱导发光特性,活细胞共定位成像实验结果显示MG-A具有很好的线粒体靶向性。 展开更多
关键词 水溶性 染料 聚集诱导发光 有机合成 线粒体 活细胞成像
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CRISPR-Cas9基因编辑技术对细胞内源蛋白进行荧光标记的实验操作 被引量:3
16
作者 吴仲胜 高誉 +2 位作者 杜勇涛 党颂 何康敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期165-175,共11页
CRISPR-Cas9是目前广泛应用的基因编辑技术,可对目的基因进行高效精准编辑,快速实现目的基因的敲除或敲入。Cas9蛋白在sgRNA引导下对靶序列进行剪切并造成DNA双链断裂,在与剪切位点两端同源的DNA模板序列存在时,可通过同源重组修复方式... CRISPR-Cas9是目前广泛应用的基因编辑技术,可对目的基因进行高效精准编辑,快速实现目的基因的敲除或敲入。Cas9蛋白在sgRNA引导下对靶序列进行剪切并造成DNA双链断裂,在与剪切位点两端同源的DNA模板序列存在时,可通过同源重组修复方式引入外源序列,实现荧光蛋白或其他标签在基因组上的精准敲入,进而实现对内源蛋白进行荧光标签的融合标记。通过基因编辑技术对内源目的蛋白进行标记,可避免由于过表达造成蛋白质定位、动力学或功能等的潜在影响,可显著提升细胞成像实验的稳定性和可重复性。本文重点介绍了利用CRISPR-Cas9基因编辑系统对目的蛋白进行荧光蛋白或自标记蛋白标签标记的方法与操作流程,为构建内源蛋白荧光标记的哺乳动物细胞系提供参考。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9基因编辑 活细胞 内源蛋白 荧光蛋白 自标记蛋白标签
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一锅法高效制备橙色荧光氧化石墨烯量子点及其在细胞pH成像中的应用 被引量:2
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作者 王鸿锦 尹桂 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第7期1338-1348,共11页
以价廉、易得的石墨片为原料,采用改进的Hummers法,简单、快速、高效地制备了具有良好生物相容性的橙色荧光氧化石墨烯量子点(GOQDs)。所制备的GOQDs尺寸约7.2 nm,具有尺寸均匀、晶格间距为0.20 nm的高度结晶的核心和氧化的外围结构。... 以价廉、易得的石墨片为原料,采用改进的Hummers法,简单、快速、高效地制备了具有良好生物相容性的橙色荧光氧化石墨烯量子点(GOQDs)。所制备的GOQDs尺寸约7.2 nm,具有尺寸均匀、晶格间距为0.20 nm的高度结晶的核心和氧化的外围结构。与大多数报道的碳点(CDs)、包裹掺杂碳点(掺杂CDs)、石墨烯量子点(QDS)和GOQDs不同,我们的方法制备的GOQDs显示出橙红色并具有激发波长独立的荧光发射。此外,GOQDs具有pH依赖性荧光发射、强的光漂白抗性、低细胞毒性、良好的水溶性(ρ=10 mg·mL^(-1))和优异的生物相容性。这些特性使其成功应用于细胞pH成像。 展开更多
关键词 氧化石墨烯量子点 橙色荧光 PH传感器 活细胞成像
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CRISPR/Cas9系统在临床医学研究的应用与改进 被引量:2
18
作者 杨育宾 黄卫人 陈巍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期16-23,共8页
癌症与遗传疾病等难治性疾病的发生发展一般是多因素协同的结果,涉及复杂的信号网络及多生物分子的相互作用。了解其中驱动的关键元素有助于为临床上的治疗和研究打开新的突破口。然而,探究驱动元素用于难治性疾病治疗的挑战之一是缺乏... 癌症与遗传疾病等难治性疾病的发生发展一般是多因素协同的结果,涉及复杂的信号网络及多生物分子的相互作用。了解其中驱动的关键元素有助于为临床上的治疗和研究打开新的突破口。然而,探究驱动元素用于难治性疾病治疗的挑战之一是缺乏方便、可编程的基因编辑工具。近年来,新型的CRISPR/Cas9系统由于其组分简单、基因编辑效率高等特点逐渐成为临床医学研究中应用最为广泛的基因编辑工具。本文介绍了CRISPR系统应用于临床研究中的相应进展和潜在挑战。阐述了基于CRISPR系统sgRNA序列重构能改变靶向性及系统本身的可编程性等特性,其可在进行适当的改造和修饰后实现对活细胞染色体的实时成像,用以了解生物体在面临外界刺激时基因组的时空调节。评估了CRISPR系统在基因筛选、免疫治疗和遗传疾病治疗方面的重大价值,尤其是CRISPR系统进行相应改造后系统用在临床研究中安全性与功能性的提升。介绍了CRISPR系统在临床研究中的应用障碍、局限以及对其相应的优化改造,展望CRISPR/Cas9基因编辑技术的应用前景及其在临床医学领域的发展优势,以期能为CRISPR系统的进一步应用与优化提供参考。 展开更多
关键词 临床医学 CRISPR/Cas9系统 CRISPR活细胞成像技术 基因编辑 CRISPR系统的局限和优化
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血液系统疾病生物样本库的建立 被引量:2
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作者 韩星星 马艺戈 +9 位作者 梁昭 李玥 夏爽 李磊 祁仕林 李长虹 郑学通 宋振 程涛 马士卉 《实用器官移植电子杂志》 2023年第5期464-469,共6页
目的 探讨建立设施完备、信息互通的规范化血液系统疾病样本采集、存储、管理、服务体系,实现全方位血液系统活细胞及相关血液成分的规范化保藏,为临床研究及转化应用提供资源保障。方法 血液系统疾病生物样本库集收集处理、质量控制、... 目的 探讨建立设施完备、信息互通的规范化血液系统疾病样本采集、存储、管理、服务体系,实现全方位血液系统活细胞及相关血液成分的规范化保藏,为临床研究及转化应用提供资源保障。方法 血液系统疾病生物样本库集收集处理、质量控制、基因分析、功能鉴定于一体,另设有独立的存储区,具有与临床诊疗数据、组学信息联通的一体化信息管理系统,以保藏血液系统疾病骨髓活细胞为特色,建立规范化样本接收、处理、存储及使用流程,定期进行质控检测,完善共享机制及运营模式。结果 血液样本资源库已保藏血液系统活细胞等各类样本共计超40万份,实现全部临床诊疗科室与疾病类型的样本全覆盖,并建立疾病来源i PSC七百余株。随机抽取新鲜和冻存样本6例,质量检测全部合格,为所院高质量科研产出提供样本支持。结论 通过全流程管控实现血液病理活细胞及相关组分的规范化收集、制备、存储和使用,建成以整合生物样本、临床诊疗数据、生物信息学等生物医学信息与资源为一体的“干湿”结合升级版生物样本库。 展开更多
关键词 生物样本库 血液系统疾病 活细胞 规范化
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