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糖的基质辅助激光解吸/电离质谱(MALDI-MS)研究 被引量:7
1
作者 郝春雁 马秀俐 +5 位作者 刘志强 季怡萍 刘淑莹 刘长城 孙允秀 刘举正 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第7期1090-1094,共5页
通过糖类化合物3种常用基质MALDI-MS分析效果的比较以及寡糖和多糖正、负离子MALDI-MS谱的对比,找到了适合糖分析的基质2,5-DHB,探讨了糖类化合物激光解吸/电离条件下形成离子的过程,指出了Na+、K+离... 通过糖类化合物3种常用基质MALDI-MS分析效果的比较以及寡糖和多糖正、负离子MALDI-MS谱的对比,找到了适合糖分析的基质2,5-DHB,探讨了糖类化合物激光解吸/电离条件下形成离子的过程,指出了Na+、K+离子在寡糖分子量测定中的重要作用,借助柱层析分离手段,成功地测出了分子量大于10000的葡聚糖的分子量. 展开更多
关键词 maldi-ms 寡糖 多糖 分子量测定 葡聚糖 糖类
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基于MALDI-MS技术的新基质大黄酸在代谢组学研究中的应用 被引量:2
2
作者 叶慧 王赟 +5 位作者 王琳 徐小为 吴梦秋 曹国秀 梁艳 王广基 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期727-733,共7页
基质辅助激光解析电离质谱(MALDI-MS)是一项快速、高通量检测未知物质的新兴技术。然而,该技术对代谢物的检测分析往往被复杂的基质峰所干扰,限制了其在代谢组学领域的应用。研究发现,大黄酸能作为一种MALDI新基质用于阳离子模式下代谢... 基质辅助激光解析电离质谱(MALDI-MS)是一项快速、高通量检测未知物质的新兴技术。然而,该技术对代谢物的检测分析往往被复杂的基质峰所干扰,限制了其在代谢组学领域的应用。研究发现,大黄酸能作为一种MALDI新基质用于阳离子模式下代谢物的检测。首先运用大黄酸分析了生理学浓度下多种强、弱碱性代谢物的标准品,结果表明与传统基质比较,大黄酸能获得基本无基质峰干扰的质谱图。进一步将大黄酸运用于生物样本的分析,选取小鼠内容物作为模型样本,显示该基质可用于复杂生物样本的代谢组分析。最后考察大黄酸的MALDI质谱成像能力,表明该基质可成功运用于小鼠肠段切片的代谢组原位成像。研究表明,大黄酸作为一种新型MALDI基质,能可靠、高效地完成基于MALDI-MS的代谢物检测及原位成像分析,对MALDI-MS技术广泛运用于代谢组学研究具有推动作用。 展开更多
关键词 maldi-ms 质谱成像 基质 大黄酸 代谢组学
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提高MALDI-MS测量溶菌酶分子量灵敏度的研究 被引量:1
3
作者 石磊 王勇 +1 位作者 刘志强 刘淑莹 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第12期2247-2249,共3页
Sodium dodecyl sulfate(SDS) is a powerful solubilizing detergent which is often used during the separation of highly complex protein mixtures by one- or two-dimensional(2D) gel electrophoresis. Matrix-assisted laser d... Sodium dodecyl sulfate(SDS) is a powerful solubilizing detergent which is often used during the separation of highly complex protein mixtures by one- or two-dimensional(2D) gel electrophoresis. Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry(MALDI-MS) is a widely used technique for mass spectrometric analysis of some protein molecules compared to other techniques. But the presence of SDS or some salts usually leads to signal deterioration when using MALDI-MS. A method for using nitrocellulose membrane as the solid-phase carrier combined with n-octyl-β-D-glucopyranoside in the matrix highly enhances the sensitivity of the molecular mass determination of lysozyme. This technique has the advantage that the signal-to-noise of the molecular weight profile is improved compared with the mass spectrum and the profile is relatively easy to interpret. 展开更多
关键词 maldi-ms 测量 分子量 灵敏度 基质辅助激光解吸电离质谱 溶菌酶 硝酸纤维素膜
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MALDI-MS反应性基质选择性检测啤酒中低聚糖的创新实践
4
作者 姜丽艳 闫国栋 +1 位作者 玲玲 国新华 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2021年第6期67-71,共5页
糖类是啤酒中含量最丰富的营养物质之一,对啤酒泡沫的稳定性起着十分重要的作用。通过大学生创新训练项目开发并优化了MALDI-MS反应性基质用于选择性检测啤酒中低聚糖的新方法,具有响应信号强、特异性检测等优点。利用贴近生活的实验研... 糖类是啤酒中含量最丰富的营养物质之一,对啤酒泡沫的稳定性起着十分重要的作用。通过大学生创新训练项目开发并优化了MALDI-MS反应性基质用于选择性检测啤酒中低聚糖的新方法,具有响应信号强、特异性检测等优点。利用贴近生活的实验研究,激发了学生的学习热情和实验兴趣,提高了学生的创新能力和科研素养。 展开更多
关键词 maldi-ms 反应性基质 低聚糖 实践教学
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MALDI-MS在各领域的应用概述 被引量:1
5
作者 秦园 陈祝军 《中国设备工程》 2018年第3期210-212,共3页
MALDI-MS是一种新型的检测技术手段,具有快速、准确、易于自动化和耗费少等优点。MALDI-MS相较于传统检测手段,样品不需要复杂的前处理;可对样品中的特定成份进行空间定位检测;对微生物鉴定能进行图像观测和实时数据分析,同时数据能批... MALDI-MS是一种新型的检测技术手段,具有快速、准确、易于自动化和耗费少等优点。MALDI-MS相较于传统检测手段,样品不需要复杂的前处理;可对样品中的特定成份进行空间定位检测;对微生物鉴定能进行图像观测和实时数据分析,同时数据能批量化处理和编辑等。这些技术优势使得MALDI-MS在食品、微生物检测和医学研究方面发挥着越来越重要的作用。MALDI-MS作为一种新技术仍有许多尚未解决的问题和有待提升的技术短板。本文就MALDI-MS在各领域的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 质谱 maldi-ms 食品 微生物 医学
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Direct MALDI-MS Analysis of Proteins Isolated by Liquid-phase Isoelectric Focusing Electrophoresis
6
作者 LüLei ZHANGXuan +3 位作者 WANGZhi SUNYa-dong LIUZhi-qiang LIUShu-ying 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2005年第4期436-438,共3页
A liquid-phase isoelectric focusing electrophoresis system(Rotofor) was used as the prefractionation tool for the sample preparation in the MALDI-MS analysis of a protein mixture. Each fraction collected was then dire... A liquid-phase isoelectric focusing electrophoresis system(Rotofor) was used as the prefractionation tool for the sample preparation in the MALDI-MS analysis of a protein mixture. Each fraction collected was then directly subjected to MALDI-TOF-MS analysis. By this approach, we are able to resolve two types of hemoglobins, A and C, which cannot be successfully separated by means of the traditional SDS-PAGE method. 展开更多
关键词 Liquid-phase isoelectric focusing electrophoresis maldi-ms analysis Hemoglobin A and C Cytochrome c
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MALDI-MS:蛋白组学研究的推动力
7
《实验与分析》 2009年第3期49-50,共2页
越来越多的蛋白质需要研究,蛋白组学专家感觉到需要加快速度了,而基质辅助激光解吸质谱(MALDI-MS)因此应运而生。Shimadzu,Thermo Fisher、Bruker Daltonics、Waters公司旗下的MALDI-MS产品,都将加速蛋白组学的研究。
关键词 maldi-ms 蛋白组学 基质辅助激光解吸 FISHER 蛋白质需要
原文传递
西洋参多糖PPQI-1~4的分离和表征 被引量:8
8
作者 马秀俐 赵德超 +3 位作者 孙允秀 刘举正 郝春艳 刘树莹 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期165-167,共3页
为研究生物活性西洋参多糖的性质 ,采取热水提取乙醇分级沉淀、葡聚糖凝胶分离等手段从西洋参根中分得 4个纯多糖 (PPQI- 1~ 4)。基质辅助激光解吸电离质谱 (MAL DI- MS)测定分子量 ,乙酰化衍生结合GC分析测定糖组成。甲基化结合 GC- M... 为研究生物活性西洋参多糖的性质 ,采取热水提取乙醇分级沉淀、葡聚糖凝胶分离等手段从西洋参根中分得 4个纯多糖 (PPQI- 1~ 4)。基质辅助激光解吸电离质谱 (MAL DI- MS)测定分子量 ,乙酰化衍生结合GC分析测定糖组成。甲基化结合 GC- MS分析测定糖苷键连接位点。结果表明 ,这 4个多糖化合物都是杂多糖 ,分别由不同比例的阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、糖醛酸组成 ,糖醛酸含量为 30 %~ 6 0 % ,分子量范围 2~ 展开更多
关键词 西洋参 多糖 maldi-ms GC-MS 中药
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基体辅助激光解吸质谱法(MALDI-MS)在生物化学中的应用 被引量:6
9
作者 赵善楷 钟峰 张晓红 《质谱学报》 EI CAS CSCD 1996年第2期1-7,共7页
本文叙述应用自行研制的激光微探针飞行时间质谱仪及采用近年发展起来的基体辅助激光解吸的新方法对多种已知蛋白质的分子量进行测量,表明此法比一般的常规方法具有速度快(10分钟1个样品)、准确度高(±1%~0.1%)、灵... 本文叙述应用自行研制的激光微探针飞行时间质谱仪及采用近年发展起来的基体辅助激光解吸的新方法对多种已知蛋白质的分子量进行测量,表明此法比一般的常规方法具有速度快(10分钟1个样品)、准确度高(±1%~0.1%)、灵敏度高(10-12~10-15mol)等优点。同时我们结合SDS-PAGE等生化方法,对蛋白质、多肽、伴花生蛋白酶和合成多聚物的分子量进行测定,也取得了令人满意的结果。 展开更多
关键词 质谱法 大分子 生物化学 分子量 maldi-ms
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高效氯氰菊酯对斑马鱼胚胎毒性的研究 被引量:7
10
作者 王健 刘丽丽 +3 位作者 余凯敏 李国超 吴巍 闫艳春 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期223-229,共7页
高效氯氰菊酯是一种Ⅱ型拟除虫菊酯类农药,对鱼类及其它水生生物具有高毒,且在其它食物中也可检测到它的残留,高效氯氰菊酯的残留对人类的健康同样具有不容忽视的影响。为了解高效氯氰菊酯对鱼、对人类的毒性机制,选用0.05、0.1、0.2、... 高效氯氰菊酯是一种Ⅱ型拟除虫菊酯类农药,对鱼类及其它水生生物具有高毒,且在其它食物中也可检测到它的残留,高效氯氰菊酯的残留对人类的健康同样具有不容忽视的影响。为了解高效氯氰菊酯对鱼、对人类的毒性机制,选用0.05、0.1、0.2、0.6、1 mg/L五个梯度浓度的高效氯氰菊酯溶液,对斑马鱼胚胎进行毒性处理,在显微镜下观察其对斑马鱼发育形态变化和孵化率等影响。发现高效氯氰菊酯农药对斑马鱼胚胎有严重的致畸效应,这种致畸性呈现剂量依赖性。使用0.1 mol/L浓度的高效氯氰菊酯农药对斑马鱼胚胎进行处理,进行早期胚胎发育的毒性研究。采用荧光差异双向凝胶电泳(2-D DIGE)-质谱相结合的方法,鉴定出11个差异表达蛋白质。这些蛋白质与细胞骨架、应激反应和新陈代谢有关。这些研究结果为进一步研究高效氯氰菊酯对动物的毒性机制提供了基本信息。 展开更多
关键词 斑马鱼 胚胎 β-高效氯氰菊酯 DIGE 质谱
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兔肝金属硫蛋白亚型异构体的高效液相色谱分离与ESI-MS,MALDI-TOF-MS鉴定 被引量:8
11
作者 赵锐 纪建国 +2 位作者 袁洪生 管华诗 茹炳根 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期1086-1090,共5页
由于金属硫蛋白 (MT)基因的多态性 ,决定不同亚型的 MT异构体的存在 ,MT亚型异构体的结构是MT功能研究的基础 .通过离子交换柱可将 MT分成 MT-1和 MT-2两个异构体 ,用不同条件的反相高效液相色谱 (RP-HPLC)可将 MT-1和 MT-2分成不同的... 由于金属硫蛋白 (MT)基因的多态性 ,决定不同亚型的 MT异构体的存在 ,MT亚型异构体的结构是MT功能研究的基础 .通过离子交换柱可将 MT分成 MT-1和 MT-2两个异构体 ,用不同条件的反相高效液相色谱 (RP-HPLC)可将 MT-1和 MT-2分成不同的亚型异构体 ,并利用 MALDI-TOF MS和 LC-ESI-MS对比确定了它们的分子量 .结果表明 ,兔肝 MT在不同的 p H条件下分离得到不同分子量的亚型异构体 .在酸性条件下 ,MT-1可分为 2个主要亚型异构体 ,分子量分别为 61 49.0和 62 44.5 ,而 MT-2主要分为 3个亚型异构体 ,分子量分别为 61 49.0 ,62 44.0和 61 2 7.0 . MT-1和 MT-2有 2个亚型异构体分子量相同的异构体存在 .在酸性条件下 ,MT-1的 2个异构体及 MT-2分子量为 61 2 7的亚型异构体可稳定存在 . 展开更多
关键词 高效液相色谱 分离 鉴定 金属硫蛋白 亚型异构体 电喷雾离子化质谱 基质辅助激光解析飞行时间质谱
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肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的研究 被引量:5
12
作者 代智 刘银坤 +8 位作者 崔杰峰 冯钜涛 宋海燕 陈洁 孙瑞霞 李娜 申华莉 张予 杨芃原 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期442-448,共7页
通过比较研究不同转移潜能肝癌细胞系中核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的差别,筛查与转移相关的重要糖蛋白.用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、双向电泳(2-DE)和凝集素印迹技术联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分... 通过比较研究不同转移潜能肝癌细胞系中核心岩藻糖基化蛋白质表达谱的差别,筛查与转移相关的重要糖蛋白.用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、双向电泳(2-DE)和凝集素印迹技术联合基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-MS/MS)分析,建立3种不同转移潜能人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97L和MHCC97H的核心岩藻糖基化蛋白质表达图谱.比较研究发现,不同转移潜能肝癌细胞呈现不同的SDS-PAGE/LCA凝集素印迹图谱,MHCC-97H和MHCC-97L在35~45 ku和45~60 ku间出现了Hep3B未见的条带.在核心岩藻糖基化蛋白质表达图谱中,Hep3B、MHCC97L和MHCC97H分别平均检测到(55±7)个蛋白质点(n=3),(60±6)个蛋白质点(n=3),(61±4)个蛋白质点(n=3);以各自双向电泳图谱为参考胶,Hep3B、MHCC97L和MHCC97H分别与其匹配的平均匹配点数为(25±3)个(n=3),(30±4)个(n=3),(28±3)个(n=3).该图谱中,与Hep3B相比,MHCC97L有13个点未匹配,其中9个点为Hep3B(-)/MHCC97L(+);MHCC97H有9个点未匹配,其中6个点为Hep3B(-)/MHCC97H(+),MALDI-TOF-MS/MS可鉴定出Annexin1、Keratin 8等12种差异蛋白质.这些结果证实了不同转移潜能的肝癌细胞有明显的核心岩藻基化糖蛋白差异性表达.提示肝癌转移可能与这些差异糖蛋白及其核心岩藻糖基化有关. 展开更多
关键词 肝癌细胞 核心岩藻糖蛋白 基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱 扁豆凝集素 糖蛋白质组学
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西洋参多糖PPQI-1~4理化性质的研究 被引量:6
13
作者 马秀俐 郝春艳 +3 位作者 李耀先 孙允秀 刘举正 刘树莹 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期946-948,共3页
AIM: To study the characteristics of the four bioactive pure polysaccharides of Panax quiquefolium L. (PPQI 1~4). METHODS: The polysaccharides were extracted with hot water and grade precipitated with ethanol. They w... AIM: To study the characteristics of the four bioactive pure polysaccharides of Panax quiquefolium L. (PPQI 1~4). METHODS: The polysaccharides were extracted with hot water and grade precipitated with ethanol. They were further purified with Sephadex DEAE A50 and Sephadex G200 chromatography. The molecular weights of the polysaccharides were determined with matrix assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI MS). The sugar compositions were analyzed with GC. The linkage positions of the component sugars were determined by methylation and GC MS. RESULTS: The four polysaccharides are all uronic acid containing heteropolysaccharides with the component sugars of arabinose, galactose and glucose in different molar ratios. The uronic acid contents are within 30%~60%. Their molecular weights are in the range of 2×10 4~7×10 4 u. CONCLUSION: The four new bioactive polysaccharides are all uronic acid containing heteropolysaccharides. 展开更多
关键词 西洋参多糖 PPQI-1-4 理化性质
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基于基质辅助激光解吸-电离质谱的磷脂分析和成像的基质体系与制样方法 被引量:2
14
作者 周丽华 陈安珣 +1 位作者 赵肃清 于会娟 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第4期289-301,共13页
由于磷脂在神经传递和生物膜功能方面的重要作用,磷脂分析已成为目前脂质组学研究的热点,而基质辅助激光解吸-电离成像质谱(MALDI-IMS)是磷脂分析和成像的先进技术。针对磷脂特点,优化基质溶液组成并建立合适的基质制样与覆盖方法是最... 由于磷脂在神经传递和生物膜功能方面的重要作用,磷脂分析已成为目前脂质组学研究的热点,而基质辅助激光解吸-电离成像质谱(MALDI-IMS)是磷脂分析和成像的先进技术。针对磷脂特点,优化基质溶液组成并建立合适的基质制样与覆盖方法是最关键的环节。为了建立具有高真空稳定性(稳定存在2h以上)、耐高频率激光辐射、无基质峰干扰、分布均匀且不引起分析物位移、能全面解吸-电离不同结构与浓度的磷脂,并准确表征其空间分布情况的基质体系,不少研究者进行了大量的研究。本工作从基质类型变化出发,综述了近10年来MALDI-IMS用于生物组织磷脂分析和成像的基质体系及制样方法,并对其发展前景进行了展望。 展开更多
关键词 磷脂 基质辅助激光解吸-电离质谱(maldi-ms) 基质 成像 制样
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表面活性剂的基体辅助激光解吸电离/质谱分析表征 被引量:2
15
作者 郭忠 张清春 +1 位作者 罗权舟 邹汉法 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期182-185,共4页
利用基体辅助激光解吸电离 /质谱 ( MAL DI- MS)技术对表面活性剂的分析表征进行了详细研究。以 2 ,5 -二羟基苯甲酸作为基体 ,考察 MAL DI样品制备方法如液滴干燥法、快速干燥法及三明治法对测定结果的影响 ,发现三明治方法更适合表面... 利用基体辅助激光解吸电离 /质谱 ( MAL DI- MS)技术对表面活性剂的分析表征进行了详细研究。以 2 ,5 -二羟基苯甲酸作为基体 ,考察 MAL DI样品制备方法如液滴干燥法、快速干燥法及三明治法对测定结果的影响 ,发现三明治方法更适合表面活性剂的分析。MALDI可以准确测定离子型表面活性剂的分子量 ,同时对于非离子型表面活性剂 。 展开更多
关键词 基体辅助激光解吸电离/质谱 分析 表面活性剂 maldi-ms 分子量 样品制备
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PCR-核酸飞行时间质谱系统检测新型冠状病毒方法的建立及应用研究 被引量:12
16
作者 王俊 张栋 +4 位作者 陈晴晴 俞俊岭 杨奕 乔亮 孙永 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2020年第35期4430-4435,4442,共7页
背景新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在全球暴发,实验室检测结果是疾病诊断的重要依据,检测方法的灵敏度和特异度是影响实验结果的关键因素,现实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)核酸检测方法是COVID-19确诊的通用方法,但其检测灵敏度有方法局限... 背景新型冠状病毒肺炎(COVID-19)在全球暴发,实验室检测结果是疾病诊断的重要依据,检测方法的灵敏度和特异度是影响实验结果的关键因素,现实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)核酸检测方法是COVID-19确诊的通用方法,但其检测灵敏度有方法局限性,依赖标本病毒含量。通过对PCR-核酸飞行时间质谱检测方法的优化,从而提高对低新型冠状病毒(SARS-CoV-2)含量病例检测的灵敏度,可为现有方法做有效补充。目的应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)原理,在Clin-ToFⅡ飞行时间质谱系统上,建立PCR-核酸飞行时间质谱(PCR-TOF MS)系统检测SARS-CoV-2的方法,并评估其实际应用价值。方法2020年2—3月于上海市临床检验中心室间质评阳性样本40份、阴性样本7份,国家卫生健康委员会室间质评阳性样本41份、阴性样本33份,本实验室购买阳性质粒及稀释样本32份,健康人样本28份,空白对照超纯水5份,共186份样本作为建立PCR-TOF MS系统数据。于2020年1—2月收集安徽省内临床送检到安徽省疾病预防控制中心的疑似COVID-19患者上呼吸道样本80份(咽拭子样本55份、痰液样本25份)及健康人群样本20份(均为咽拭子样本)作为评估PCR-TOF MS系统效果的数据。建立PCR-TOF MS系统试验体系步骤,包括PCR扩增、虾碱性磷酸酶(SAP)消化、单碱基延伸和质谱检测;并基于阳性质粒优化模版量,根据186份样本检测质谱峰的信噪比(SNP)确定该方法在SARS-CoV-2检测时的判读标准。对80份疑似SARS-CoV-2样本和20份健康人群样本进行检测分析,并与实时荧光定量PCR法进行对比。结果通过对PCR-TOF MS模板条件的优化,模版量6μl时,扩增产物可获得典型的质谱峰图。建立的PCR-TOF MS反应体系可以对SARS-CoV-2核酸的开放读码框1ab(ORF1ab)基因和核壳蛋白(N)基因进行有效扩增检测。本研究PCR-TOF MS方法对临床疑似病例样本的检出率为90.00%,高于实时荧光定量PCR法的75.00%,同时,结果显示,实时荧光定量PCR法检出中含有25.00%的可疑结果,而PCR-TOF MS则无可疑结果。对于痰液和咽拭子两种样本的检出率,PCR-TOF MS法分别为100.00%和85.45%,高于荧光定量PCR法的64.00%和43.64%。阴性样本两种方法均未检出。结论通过PCR技术与飞行时间质谱技术的结合,使得检测SARS-CoV-2目标片段指数级扩大,从而提高样本的检测灵敏度。MALDI-TOF MS技术通过对离子分子量的检测分析,具有较高的准确性和特异性,同时证实了痰液样本优于咽拭子样本。该方法可作为实时荧光定量PCR法的补充和协同,在一定程度上有利于弥补假阴性的问题,从而降低临床漏诊率,提高检测效率,为疫情的研判缩短时间。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 新型冠状病毒 PCR-飞行质谱系统 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 核酸检测
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现代生物质谱技术在生物大分子分析研究中的应用 被引量:3
17
作者 王晓娜 许丽娜 +1 位作者 彭金咏 刘克辛 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期105-109,共5页
随着当今生物质谱技术的蓬勃发展,生物质谱已经成为分析,鉴定蛋白质、多肽、细胞因子等生物大分子的重要手段。笔者对基质辅助激光解吸离子化质谱(MALDI-MS),电喷雾离子化质谱(ESI-MS),飞行时间质谱(TOF-MS)和离子阱质谱(Ion trap-MS)... 随着当今生物质谱技术的蓬勃发展,生物质谱已经成为分析,鉴定蛋白质、多肽、细胞因子等生物大分子的重要手段。笔者对基质辅助激光解吸离子化质谱(MALDI-MS),电喷雾离子化质谱(ESI-MS),飞行时间质谱(TOF-MS)和离子阱质谱(Ion trap-MS)等生物质谱的功能和应用以及现代生物质谱与液相(LC)、毛细管电泳(CE)和二维液相色谱(2D-LC)等联用技术的最新应用与进展作了简要的综述。 展开更多
关键词 生物质谱 生物大分子 MALDI—MS ESI—MS TOF—MS
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长双歧杆菌NCC2705菌株应激蛋白的研究 被引量:4
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作者 袁静 朱力 +3 位作者 冯尔玲 王恒樑 黄翠芬 苏国富 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期390-396,共7页
研究长双歧杆菌NCC2705菌株发酵至稳定期时应激蛋白的表达情况。根据乳酸乳球菌IL1403菌株蛋白质参考图谱及长双歧杆菌NCC2705基因组注释中应激蛋白的分子量与等电点,确定应激蛋白在双向电泳凝胶上的相应蛋白点,并利用MALDI-TOF和/或ESI... 研究长双歧杆菌NCC2705菌株发酵至稳定期时应激蛋白的表达情况。根据乳酸乳球菌IL1403菌株蛋白质参考图谱及长双歧杆菌NCC2705基因组注释中应激蛋白的分子量与等电点,确定应激蛋白在双向电泳凝胶上的相应蛋白点,并利用MALDI-TOF和/或ESI-MS/MS对相应蛋白质点进行鉴定。每个蛋白质点的肽指纹图谱均在长双歧杆菌NCC2705的蛋白质数据库用Mascot进行检索,共鉴定到44个蛋白点对应8个应激蛋白。这些蛋白为亲水性酸性蛋白,大多具有翻译后修饰现象,它们基因的CAI值除DnaJ外,其余均在0.5以上,在全细胞表达谱中为高丰度蛋白;此外,菌体具有较强的抗脂质过氧化和清除DPPH自由基的能力,而对羟自由基和超氧负离子的清除力较弱,推测鉴定到的具有逆转氧化损害作用的碱性过氧化氢还原酶(ahpC)可能是体内表达的降低氧损伤的主要酶。 展开更多
关键词 长双歧杆菌NCC2705 应激蛋白 双向电泳 MALDI-TOF ESI-MS/MS
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磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的氨基酸序列分析及催化机理 被引量:2
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作者 张康逸 张丽霞 +2 位作者 王兴国 屈凌波 刘元法 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期70-74,80,共6页
研究磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的纯化、酶蛋白的氨基酸序列及活性中心的氨基酸残基组成,并推导水解磷脂酰胆碱(Pc)的机理。超滤法和RP-HPLC纯化酶液,除去了山梨醇和山梨醇盐,纯度97.7%;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI SYNAPT ... 研究磷脂酶A_1(Lecitase Ultra)的纯化、酶蛋白的氨基酸序列及活性中心的氨基酸残基组成,并推导水解磷脂酰胆碱(Pc)的机理。超滤法和RP-HPLC纯化酶液,除去了山梨醇和山梨醇盐,纯度97.7%;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI SYNAPT Q-TOF MS)和二级质谱(MS/MS)对酶蛋白进行分析,确定了氨基酸序列组成;数据库(http://www.matrixscience.com)比对,发现氨基酸序列信息与棉状嗜热丝孢菌(T.lanuginosus)脂肪酶和尖孢镰刀菌(F.oxysporum)脂肪酶高度吻合,序列中1-284是T.lanuginosus脂肪酶的氨基酸序列,序列中285-339是F.oxysporum脂肪酶的氨基酸序列;Lecitase Ultra和Sn-1-C16:0/sn-2-C2:0-PC的分子对接证实了酶活中心的三联体"Ser-His-Asp"催化机理。 展开更多
关键词 磷脂酶A_1 氨基酸序列 二级质谱 催化机理
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枯草芽孢杆菌F-2抗植物病原真菌活性物质的研究 被引量:4
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作者 鲁小城 赵宇华 方萍 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期34-39,共6页
枯草芽孢杆菌F-1和F-2与尖孢镰刀菌的对峙实验中,F-1没有抑菌作用,而F-2表现出强抑菌效果.为了分析测定F-2的抑菌活性物质,对F-1和F-2胞外代谢物粗提液的HPLC谱图进行比较,发现F-2具有F-1所没有的特征代谢产物.使用LC-MS对F-2的特征产... 枯草芽孢杆菌F-1和F-2与尖孢镰刀菌的对峙实验中,F-1没有抑菌作用,而F-2表现出强抑菌效果.为了分析测定F-2的抑菌活性物质,对F-1和F-2胞外代谢物粗提液的HPLC谱图进行比较,发现F-2具有F-1所没有的特征代谢产物.使用LC-MS对F-2的特征产物进行分析,推测主要产物的分子量为1477.0、1489.1和1505.1.进一步采用MALDI-TOFMS对F-2粗提液进行分析,发现F-2产生两组分子量相差14Da(CH2)的同系物.其中一组的分子量依次为1462.8、1476.8、1490.8、1504.8和1518.9,通过质量指纹谱技术鉴定为脂肽抗生素C14-18 Fengycin B.另一组的分子量依次为1432.8、1446.8、1460.8、1474.8和1488.9,与C14-18 Fengycin A对应分子分子量相差2Da,推测可能是Fengycin A的一种异构体,其碳链中具有一个双键,具体性质有待进一步分析. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 脂肽抗生素 质量指纹谱技术 LC—MS MALDI—TOF MS
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