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油菜含MATH结构域基因BnaMT-1的克隆及表达分析 被引量：1
1
作者 赵黎明 佘媛 +1 位作者 刘春林 阮颖 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期251-255,共5页
利用已构建的甘蓝型油菜种子发育过程SSH文库,筛选得到1个含MATH结构域的EST序列,并以其为信息探针,经电子克隆获得了该基因的全长cDNA,命名为BnaMT-1。BnaMT-1的开放阅读框(ORF)全长1 209 bp,编码402个氨基酸,相对分子质量为46 130.7,... 利用已构建的甘蓝型油菜种子发育过程SSH文库,筛选得到1个含MATH结构域的EST序列,并以其为信息探针,经电子克隆获得了该基因的全长cDNA,命名为BnaMT-1。BnaMT-1的开放阅读框(ORF)全长1 209 bp,编码402个氨基酸,相对分子质量为46 130.7,预测的理论等电点为8.50,其结构包括信号肽、跨膜结构及2个连续的MATH结构域,为亲水性胞外分泌蛋白;进化树分析发现,该基因与拟南芥含MATH结构域基因亲缘关系较近;利用半定量RT-PCR技术对该基因在甘蓝型油菜湘油15号不同组织及种子不同发育时期的表达分析表明:BnaMT-1在叶、花和果荚中都有表达,在根和茎中没有表达;种子发育过程中,BnaMT-1均有表达,且表达量于花后30～35 d最高,之后表达量下降。推测该基因可能与种子发育及油脂合成代谢相关。 展开更多
关键词 油菜 math结构域基因 克隆 表达分析
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甘蓝型油菜含MATH结构域基因BnMT-1干扰载体的构建及遗传转化 被引量：2
2
作者 胡燕 彭琦 +3 位作者 尹峰 刘武 阮颖 刘春林 《分子植物育种》 CAS CSCD 2010年第2期283-286,共4页
本研究以甘蓝型油菜湘油15种子不同发育时期抑制差减文库为研究对象,设计特异性引物扩增得到一个与油脂代谢相关,含MATH结构域的基因片段,长度为327bp,命名为BnMT-1。根据RNA干扰的基本原理,将目的片段正反向插入到表达载体pFGC5941.na... 本研究以甘蓝型油菜湘油15种子不同发育时期抑制差减文库为研究对象,设计特异性引物扩增得到一个与油脂代谢相关,含MATH结构域的基因片段,长度为327bp,命名为BnMT-1。根据RNA干扰的基本原理,将目的片段正反向插入到表达载体pFGC5941.nap查尔酮内含子两侧,经限制性内切酶酶切和质粒PCR扩增检测,证明已成功构建了干扰载体PP-MT。采用根癌农杆菌法将PP-MT干扰载体转入甘蓝型油菜中,对转化植株基因组DNA的PCR检测表明,干扰载体已转入到甘蓝型油菜中,共获得了两株转基因植株。这为进一步研究BnMT-1基因在甘蓝型油菜中的功能打下了基础。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 math结构域基因 RNA干扰载体
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一种确定无网格法权函数影响域的新方法
3
作者 熊勇刚 杨小娟 +1 位作者 陈莘莘 谭建平 《重庆工学院学报（自然科学版）》 2008年第7期26-29,39,共5页
提出了一种无网格法效率的简略量化计算公式;然后在区间数学的理论基础上,视影响域和无网格计算误差为一区间变量,以RKPM无网格计算误差为约束函数,计算效率为目标函数,结合线性规划的思想探求a最佳取值;用Matlab编写了程序,计算得到影... 提出了一种无网格法效率的简略量化计算公式;然后在区间数学的理论基础上,视影响域和无网格计算误差为一区间变量,以RKPM无网格计算误差为约束函数,计算效率为目标函数,结合线性规划的思想探求a最佳取值;用Matlab编写了程序,计算得到影响域的最佳值a=6;将此法应用于无网格RKPM法建立铸轧辊弹性变形计算.算例显示,该方法是可行而有效的,消除了影响域半径对计算效率和精度的影响,突破了经验法的局限性. 展开更多
关键词 影响域 区间数学 线性规划 a最佳取值
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声波测试系统数学模型的建立
4
作者 张美凤 《重庆科技学院学报（自然科学版）》 CAS 2008年第3期150-152,共3页
介绍声波测试系统数学模型的建立过程。首先对声波测试系统进行频率域动态校准得到系统频率特性曲线,再通过非线性建模和镜像映射法得到此系统的传递函数,最后通过检查频率域的回归效果得到数学模型。
关键词 测试系统 数学模型 频率域校准 传递函数
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CRISPR/Cas9技术在获取拟南芥双突变体材料中的应用 被引量：1
5
作者 吕晶森 谭成方 +1 位作者 刘春林 阮颖 《中国农学通报》 2018年第8期27-36,共10页
为了研究含双MATH结构域基因sb3与sb6的功能,需要创制这2个紧密连锁基因的双突变体。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对拟南芥Col-0中的sb3、sb6基因进行特异性定点双敲除。通过PCR和Singer测序验证,共获得10株T0代转基因植株,其中5株在目... 为了研究含双MATH结构域基因sb3与sb6的功能,需要创制这2个紧密连锁基因的双突变体。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对拟南芥Col-0中的sb3、sb6基因进行特异性定点双敲除。通过PCR和Singer测序验证,共获得10株T0代转基因植株,其中5株在目标片段上没有发生编辑;另5株在sb3基因上的目标序列都发生了编辑,在sb6基因的目标序列上只有2株发生了编辑。至此成功获得了sb3与sb6基因双敲除的突变体,且获得该突变的类型为核苷酸缺失突变体。这个双突变体的获得为进一步研究双MATH结构域基因在拟南芥中的功能奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 拟南芥 双math结构域基因 紧密连锁 CRISPR/Cas9 定点双敲除
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甘蓝型油菜含MATH结构域基因BnaM154过表达载体的构建与转化 被引量：1
6
作者 陈吉杨 阮颖 刘博宇 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2022年第13期4377-4382,共6页
编码含MATH结构域(Meprin and TRAF homology domain)的基因目前在油菜中研究较少。本研究以甘蓝型油菜‘湘油15’(XY15)种子发育35 d抑制差减(suppression subtractive hybridization,SSH)文库为基础,进一步筛选获得实际编码中有两个连... 编码含MATH结构域(Meprin and TRAF homology domain)的基因目前在油菜中研究较少。本研究以甘蓝型油菜‘湘油15’(XY15)种子发育35 d抑制差减(suppression subtractive hybridization,SSH)文库为基础,进一步筛选获得实际编码中有两个连续MATH结构域的功能未知基因,该基因全长DNA序列为1800 bp,我们将其命名为BnaM154。将目的片段克隆后插入表达载体pFGC5941-Nap中,成功构建了pFGC5941-Nap::BnaM154过表达载体。利用农杆菌介导的甘蓝型油菜下胚轴遗传转化方法,成功获得8株稳定遗传的转基因苗,为进一步研究BnaM154基因在甘蓝型油菜中的功能提供了科学依据。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 math结构域 过表达载体 油菜遗传转化
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利用CRISPR/Cas9系统创制紧密连锁的M320与M330基因双突变体 被引量：1
7
作者 庞奥运 金璐 +2 位作者 陈吉杨 刘春林 阮颖 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期4301-4307,共7页
为了研究含有多MATH结构域基因的功能,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对拟南芥中两个紧密连锁的功能冗余基因M320(AT2G25320)和M330(AT2G25330)进行共敲除,获得了之前通过杂交无法获得的多MATH结构域基因双突变体材料。通过构建针对... 为了研究含有多MATH结构域基因的功能,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对拟南芥中两个紧密连锁的功能冗余基因M320(AT2G25320)和M330(AT2G25330)进行共敲除,获得了之前通过杂交无法获得的多MATH结构域基因双突变体材料。通过构建针对M320和M330基因的CRISPR/Cas9共敲除质粒,借助农杆菌介导的浸花法成功转化野生型拟南芥Col-0。最终测序验证显示多MATH结构域基因被成功敲除。M320、M330以及这两个基因同时被敲除的成功率分别是5.13%、17.95%和2.56%;通过测序分析发现突变体共产生了3种可造成移码突变的杂合突变类型:分别为在靶位点插入一个A或T以及缺失一个G。本研究为我们解析多MATH结构域基因的功能提供了材料基础,同时为紧密连锁基因的功能研究提供了创制突变体的有效方法。 展开更多
关键词 拟南芥 紧密连锁 多math结构域基因 CRISPR/Cas9 定向敲除
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