乳腺癌MCF-7细胞系9p21缺失断点的精确定位分析 被引量：2

1

作者 谢华平 严江涛 +1 位作者 汤琳 田德安 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期405-408,共4页

目的对乳腺癌MCF-7细胞系9p21区缺失断点进行精确定位。方法采用多重连接探针扩增技术(MLPA)检测MCF-7细胞系9p21区缺失断点的大致区间,采用长PCR扩增缺失断点,引物步移缩小缺失断点的所在区间,测序确定缺失断点的位置。结果 MLPA检测探... 目的对乳腺癌MCF-7细胞系9p21区缺失断点进行精确定位。方法采用多重连接探针扩增技术(MLPA)检测MCF-7细胞系9p21区缺失断点的大致区间,采用长PCR扩增缺失断点,引物步移缩小缺失断点的所在区间,测序确定缺失断点的位置。结果 MLPA检测探明MCF-7细胞系的端粒侧断点位于MTAP基因内,着丝粒侧断点位于CDKN2A基因内;通过长PCR、引物步移及测序确定在MCF-7细胞系中,缺失位点位于chr9:21819532至chr9:21989622之间,大小为170kb;断点端粒侧位于MTAP基因的内含子4内,着丝粒侧位于CDKN2A(p14)基因的内含子1内近外显子1β处。结论长PCR是缺失断点定位的良好方法。在MCF-7细胞系中,存在一个起于MTAP基因内、止于CDKN2A基因内、大小为170kb的缺失片段,其意义有待进一步研究。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 细胞系 mcf-7 染色体缺失

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MCF-7细胞系乳腺癌裸鼠模型病理学特点及生物学性状的研究 被引量：7

2

作者 刘建中 谷俊朝 俞巍 《国际外科学杂志》 2010年第3期165-167,共3页

目的探讨荷人乳腺癌裸鼠移植模型的病理学特点及生物学性状，为乳腺癌病因学、发病学研究提供可靠的工具。方法在裸鼠右侧腋窝注射人乳腺癌MCF-7细胞悬液0．1mL（5×108个／mL），建立乳腺癌裸鼠动物模型。混合干预组小鼠，肿瘤接... 目的探讨荷人乳腺癌裸鼠移植模型的病理学特点及生物学性状，为乳腺癌病因学、发病学研究提供可靠的工具。方法在裸鼠右侧腋窝注射人乳腺癌MCF-7细胞悬液0．1mL（5×108个／mL），建立乳腺癌裸鼠动物模型。混合干预组小鼠，肿瘤接种部位旁皮下注射瘦素0．2mL（15×104ng／mL）和雌激素0．2mL（0．15mg／mL），每天1次；雌激素组注射雌激素0．2mL（0．15mg／mL）；瘦素组注射瘦素0．2mL（15×104ng／mL）；空白组注射0．9％氯化钠溶液，每日观察肿块生长情况及肿瘤体积变化。宰杀取材，观察肿瘤组织学特征。结果（1）空白组肿瘤移植成功率为33．3％（10／30），瘦素组为46．7％（14／30），模型失败。混合干预组肿瘤移植成功率为96．7％（29／30），雌激素组为93．3％（28／30），两组间无明显差异（P〉0．05）；（2）混合干预组裸鼠平均肿瘤最长径明显优于雌激素组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；混合干预组裸鼠平均体积明显优于雌激素组，差异具有统计学意义（P〈0．05）；（3）病理诊断符合浸润性导管癌。结论（1）MCF-7裸鼠模型的成功建立，需体外补充雌激素。（2）瘦素有增强雌激素刺激MCF-7细胞在裸鼠体内增生的作用；（3）移植的肿瘤细胞保持了人乳腺癌肿瘤细胞的部分病理学特点及生物学特性，可以为病因学、发病学、临床治疗及疗效判断提供可靠的工具。 展开更多

关键词 mcf-7细胞系 裸鼠 乳腺癌 动物模型

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不同来源MCF-7细胞系的增殖速度及ERα表达上的差异 被引量：2

3

作者 许炜茹 林洪生 +1 位作者 陈信义 张英 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2010年第1期121-125,共5页

通过体外培养不同来源的乳腺癌MCF-7细胞系发现细胞的形态、增殖速度都存在很大的差异。随后进行了NOD/SCID小鼠异种移植实验并对瘤体进行免疫组织化学的检测,发现两株MCF-7细胞系均丢失人表皮生长因子受体2(human epidermal growth fac... 通过体外培养不同来源的乳腺癌MCF-7细胞系发现细胞的形态、增殖速度都存在很大的差异。随后进行了NOD/SCID小鼠异种移植实验并对瘤体进行免疫组织化学的检测,发现两株MCF-7细胞系均丢失人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor2,Her2),并且其中一株细胞系的雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)也丢失。本研究提示MCF-7细胞系细胞增殖速度变快可能与ERα的丢失相关。 展开更多

关键词 乳腺癌 mcf-7细胞系 雌激素受体

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微小RNA-145影响乳腺癌细胞系MCF-7增殖和凋亡的机制 被引量：3

4

作者 齐玉林 韩慧芳 张海新 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期58-61,共4页

目的探讨微小RNA-145(miR-145)参与乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的机制。方法体外培养永生化乳腺癌细胞系MCF-7细胞,并转染miR-145。分别应用Real-time PCR与Western blotting检测mRNA和蛋白水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞增... 目的探讨微小RNA-145(miR-145)参与乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的机制。方法体外培养永生化乳腺癌细胞系MCF-7细胞,并转染miR-145。分别应用Real-time PCR与Western blotting检测mRNA和蛋白水平。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞增殖水平,流式细胞术检测不同处理组MCF-7细胞的凋亡水平。结果 Real-time PCR结果表明,高表达miR-145对MCF-7细胞Caspase-3、增殖细胞核抗原(PCNA)和Bcl-2的mRNA水平并无影响;而Western blotting实验结果表明,与对照组相比,转染miR-145 96 h可显著提高Caspase-3的表达,并抑制PCNA与Bcl-2的表达。CCK-8实验结果表明,过表达miR-145 72 h、96 h后MCF-7细胞增殖率降低,差异具有统计学意义(P<0. 05)。流式细胞术结果表明,过表达组MCF-7细胞的凋亡率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0. 05)。结论 miR-145可通过下调PCNA与Bcl-2蛋白、上调Caspase-3蛋白的表达,从而抑制MCF-7细胞增殖和促进MCF-7细胞凋亡,有望成为乳腺癌治疗的新靶点。 展开更多

关键词 乳腺癌 mcf-7细胞系 微小RNA-145 细胞增殖 免疫印迹法 人

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紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖及凋亡的影响 被引量：9

5

作者 田志华 梁云燕 +1 位作者 李振甫 王代树 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期48-52,共5页

目的观察复方中药紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖的抑制作用及对其凋亡的诱导作用,探讨紫龙金治疗乳腺癌的作用机制。方法依据培养液紫龙金浓度的差异,实验共设4组:(1)对照组:不加紫龙金干预的1640培养液;(2)紫龙金低浓度组:1.5 mg生... 目的观察复方中药紫龙金对人乳腺癌细胞系MCF-7增殖的抑制作用及对其凋亡的诱导作用,探讨紫龙金治疗乳腺癌的作用机制。方法依据培养液紫龙金浓度的差异,实验共设4组:(1)对照组:不加紫龙金干预的1640培养液;(2)紫龙金低浓度组:1.5 mg生药/mL紫龙金培养液;(3)紫龙金中浓度组:3 mg生药/mL紫龙金培养液;(4)紫龙金高浓度组:6 mg生药/mL紫龙金培养液。采用细胞计数法绘制生长曲线及四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度紫龙金对MCF-7细胞增殖能力的影响,并应用流式细胞术、Hoechst 33342核染色法及DNA梯度形成法测定紫龙金诱导凋亡的作用。结果(1)与对照组比较,紫龙金各剂量组的细胞计数在各时间点(24、48、72、96、120、144 h)明显减少,其差异均有统计学意义(P<0.05);紫龙金各剂量组间的生长抑制率差异除低、中浓度组间在24、72 h无统计学意义外(P>0.05),各剂量组间两两比较在不同时间点(24、48、72、96、120、144 h),其差异均有统计学意义(P<0.05)。紫龙金对MCF-7细胞的增殖抑制作用呈时间依赖性和剂量依赖性;(2)紫龙金使细胞阻滞在G_0/G_1期;(3)中、高浓度紫龙金诱导MCF-7细胞凋亡,并形成DNA ladder。结论紫龙金能抑制人乳腺癌细胞MCF-7细胞增殖,并诱导细胞凋亡,从而起到抗肿瘤的作用。 展开更多

关键词 紫龙金 人乳腺癌细胞系mcf-7 增殖 凋亡

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MCF-7/BCRP细胞系的建立及其生物学特征 被引量：3

6

作者 李文通 周庚寅 +3 位作者 宋现让 迟伟玲 任瑞美 王兴武 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第6期469-472,共4页

目的:建立表达乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的耐药细胞系MCF-7/BCRP。方法:提取MCF-7细胞的总RNA,设计BCRP基因上下游引物,用RT-PCR法克隆出BCRP基因全长并连接到真核表达载体pcDNA3.1穴-雪上,转染MCF-7细胞后以G418筛选细胞。采用米托蒽醌外... 目的:建立表达乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的耐药细胞系MCF-7/BCRP。方法:提取MCF-7细胞的总RNA,设计BCRP基因上下游引物,用RT-PCR法克隆出BCRP基因全长并连接到真核表达载体pcDNA3.1穴-雪上,转染MCF-7细胞后以G418筛选细胞。采用米托蒽醌外排实验、细胞毒性实验、细胞群体倍增时间、免疫荧光法鉴定构建的耐药细胞系。结果:MCF-7/BCRP对米托蒽醌耐药指数增加至14.72;外排米托蒽醌的作用增强;细胞群体倍增时间较亲代细胞延长;MCF-7/BCRP细胞能表达一定量的BCRP。结论:MCF-7/BCRP细胞能够表达BCRP并具有BCRP的耐药表型。 展开更多

关键词 多药耐药相关蛋白类 乳腺肿瘤 mcf-7/BCRP细胞系 基因表达

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人乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/MDR^a的建立及其生物学特性的初步研究 被引量：14

7

作者 严婷 张莲芬 +2 位作者 张熔熔 冯磊 金坚 《细胞生物学杂志》 CSCD 2006年第4期591-595,共5页

实验以MCF-7细胞株为亲本细胞,采用阿霉素(ADM)低浓度持续加量诱导法建立了多药耐药的人乳腺癌细胞系MCF-7/MDRa,并对其耐药谱、动力学周期分布、表型变化、药物的蓄积量等生物学特性进行了初步分析评价。结果表明,MCF-7/MDRa细胞较亲... 实验以MCF-7细胞株为亲本细胞,采用阿霉素(ADM)低浓度持续加量诱导法建立了多药耐药的人乳腺癌细胞系MCF-7/MDRa,并对其耐药谱、动力学周期分布、表型变化、药物的蓄积量等生物学特性进行了初步分析评价。结果表明,MCF-7/MDRa细胞较亲本细胞的ADM半数致死浓度(IC50)高500倍,撤药培养150天后耐药指数仍维持在200倍以上,并对多种化疗药物产生交叉耐药性;耐药细胞分化程度低于同步传代的MCF-7细胞,细胞倍增时间与亲本细胞接近,S期细胞显著增加,G1期细胞减少;随着撤药时间的延长,细胞的增殖速度加快;耐药细胞P-gP、LRP和GSTπ的表达水平较亲本细胞有显著增加,ER阳性表达丢失;在稳定生长的撤药培养6天的细胞中仍有ADM蓄积。建立的MCF-7/MDRa模型具有多药耐药细胞的基本生物学特性,可用于肿瘤多药耐药机制的研究。 展开更多

关键词 乳腺癌 细胞系mcf-7/MDR^a 阿霉素 多药耐药

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紫龙金抑制人乳腺癌细胞系MCF-7生长的体内外实验研究 被引量：4

8

作者 田志华 梁云燕 +1 位作者 李振甫 王代树 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1292-1296,共5页

目的探讨复方中药紫龙金在体内和体外对MCF-7人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 (1)台盼蓝拒染法和双层软琼脂克隆形成法检测紫龙金对MCF-7细胞增殖活性和克隆形成的影响;(2)Westernblot法检测紫龙金对p-ERK1/2蛋白表达的影... 目的探讨复方中药紫龙金在体内和体外对MCF-7人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法 (1)台盼蓝拒染法和双层软琼脂克隆形成法检测紫龙金对MCF-7细胞增殖活性和克隆形成的影响;(2)Westernblot法检测紫龙金对p-ERK1/2蛋白表达的影响;(3)17-β-雌二醇缓释药片包埋法构建MCF-7细胞的BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型,并检测紫龙金(实验组灌胃生药20g紫龙金/kg体重)对肿瘤生长的抑制效应。结果 (1)紫龙金降低MCF-7细胞的存活率,并呈剂量和时间依赖性;(2)紫龙金组MCF-7细胞克隆形成率显著低于对照组,且随着浓度的增加,克隆形成能力明显降低[0.75、1.5、3.0、6.0mg/mL紫龙金组细胞克隆形成抑制率分别为(12.66±1.54)%、(88.83±2.13)%、100%、100%],克隆直径也明显减小或无克隆形成;(3)紫龙金下调p-ERK1/2蛋白的表达;(4)实验组裸鼠与对照组裸鼠4周后移植瘤的平均体积分别为(0.73±0.58)cm3、(1.36±0.64)cm3,平均瘤重分别为(1.02±0.25)g、(1.66±0.09)g,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),实验组抑瘤率为38.55%。结论紫龙金可显著抑制MCF-7细胞的体内和体外增殖、转化和致瘤性,这可能与p-ERK1/2蛋白的表达下调有关。 展开更多

关键词 紫龙金 人乳腺癌细胞系mcf-7 软琼脂克隆形成 P-ERK1/2 裸鼠成瘤性

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ER-α36过表达促进人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移能力 被引量：10

9

作者 刘旺根 张钦宪 +4 位作者 王云龙 孙新城 王国强 李恒思 李玉林 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第6期713-717,共5页

目的探讨雌激素受体新亚型ER-α36过表达对人雌激素受体阳性乳腺癌细胞侵袭转移潜力的影响及其机制。方法以野生型乳腺癌细胞系MCF-7/W、转染pcDNA3.1空载体的细胞系MCF-7/pcDNA3.1和转染重组载体pcDNA3.1/ER-α36的细胞系MCF-7/ER-α3... 目的探讨雌激素受体新亚型ER-α36过表达对人雌激素受体阳性乳腺癌细胞侵袭转移潜力的影响及其机制。方法以野生型乳腺癌细胞系MCF-7/W、转染pcDNA3.1空载体的细胞系MCF-7/pcDNA3.1和转染重组载体pcDNA3.1/ER-α36的细胞系MCF-7/ER-α36为研究对象,分别用细胞黏附实验观测肿瘤细胞与细胞外基质的黏附能力、Transwell侵袭小室实验检测细胞侵袭转移能力,用Western blot法检测NF-κB P65、MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白表达。结果与MCF-7/W组细胞相比,MCF-7/ER-α36细胞的2 h细胞黏附率和24 h穿膜细胞数显著增加(P<0.05)。NF-κB P65、MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白的相对表达量及MMP-2/TIMP-1、MMP-9/TIMP-1显著增高(P<0.05)。结论 ER-α36过表达能促进ER-α66阳性乳腺癌细胞的体外黏附能力和侵袭转移潜力,其机制可能与通过NF-κB途径提高MMP-2、MMP-9的表达水平及打破二者与TIMP-1之间的平衡有关。 展开更多

关键词 乳腺癌 雌激素受体-α36 mcf-7细胞系 侵袭转移 核因子-ΚB

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乳腺癌MCF-7细胞系中侧群细胞分选及其生物学特性 被引量：1

10

作者 孙鑫 李平 +1 位作者 张梅 陈娇 《中国基层医药》 CAS 2012年第13期1927-1928,共2页

目的分离乳腺癌MCF-7细胞系中的侧群细胞（sP）并观察其生物学特性。方法利用流式细胞荧光分选法将乳腺癌MCF-7细胞系分成SP和非SP细胞两个亚群。对两个亚群细胞采用软琼脂克隆形成实验观察其增殖能力。结果MCF-7细胞株中分选出SP细胞占... 目的分离乳腺癌MCF-7细胞系中的侧群细胞（sP）并观察其生物学特性。方法利用流式细胞荧光分选法将乳腺癌MCF-7细胞系分成SP和非SP细胞两个亚群。对两个亚群细胞采用软琼脂克隆形成实验观察其增殖能力。结果MCF-7细胞株中分选出SP细胞占（6．5±0．4）％；SP细胞的体外克隆形成率为（38．5±9．4）％，高于非sP细胞的（8．4±2．6）％（t=5．34，P〈0．05）。结论乳腺癌MCF-7细胞中的SP细胞富集了乳腺癌干细胞，其增殖能力强于非SP细胞，表明SP表型的肿瘤细胞在乳腺癌的生长中具有重要的地位。 展开更多

关键词 mcf-7乳腺癌细胞系 侧群细胞 增殖

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人端粒酶逆转录亚单位(hTERT)基因特异性siRNA对MCF-7细胞生长抑制作用的研究 被引量：3

11

作者 薛晓荣 李欣 +1 位作者 刘民 汤华 《实用癌症杂志》 2005年第5期452-454,461,共4页

目的研究人端粒酶逆转录亚单位(hTERT)特异性siRNA对MCF-7细胞体外生长及体内肿瘤形成能力的抑制作用。方法设计并化学合成针对hTERT的siRNA,用脂质体转染法将其导入MCF-7细胞内,通过软琼脂克隆形成试验及接种裸鼠的肿瘤形成实验,观察hT... 目的研究人端粒酶逆转录亚单位(hTERT)特异性siRNA对MCF-7细胞体外生长及体内肿瘤形成能力的抑制作用。方法设计并化学合成针对hTERT的siRNA,用脂质体转染法将其导入MCF-7细胞内,通过软琼脂克隆形成试验及接种裸鼠的肿瘤形成实验,观察hTERT-siRNA对人乳腺癌MCF-7细胞体外及体内的生长抑制作用。结果软琼脂克隆形成试验显示,hTERT-siRNA转染的MCF-7细胞克隆形成数量明显少于对照组,抑制率达到84.1%。裸鼠体内实验结果显示,hTERT-siRNA转染组肿瘤生长速度也明显慢于对照组。结论hTERT-siRNA在体内外均显示可以有效、特异地抑制肿瘤细胞的生长。 展开更多

关键词 人端粒酶逆转录亚单位 RNA干扰 小干扰RNA 乳腺癌 mcf-7细胞系

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重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响 被引量：2

12

作者 刘书中 劳立峰 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第3期458-463,共6页

背景:有研究发现重组人骨形态发生蛋白2的临床应用可增加恶性肿瘤的患病风险,但关于重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响及机制尚未被阐明。目的:探讨在体外及体内条件下重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖... 背景:有研究发现重组人骨形态发生蛋白2的临床应用可增加恶性肿瘤的患病风险,但关于重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响及机制尚未被阐明。目的:探讨在体外及体内条件下重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的影响及其作用机制。方法:①体外实验:无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理MCF-7细胞,通过MTT检测重组人骨形态发生蛋白2对细胞增殖能力的影响。利用流式细胞分析技术检测细胞周期,通过Real-time PCR检测不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2对p21、cyclinE表达的影响,应用Westernblot技术检测不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理对p21、cyclinE蛋白水平及对PI3K/Akt磷酸化水平的影响;②体内实验:将14只雌性裸鼠随机等分为实验组和对照组,实验组成瘤方案为MCF-7细胞+重组人骨形态发生蛋白2,对照组成瘤方案为等量MCF-7细胞,分别于6周龄裸鼠皮下注射。结果与结论:①体外实验:无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理细胞,发现重组人骨形态发生蛋白2可显著抑制乳腺癌细胞系MCF-7的增殖能力。无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理细胞24 h,发现重组人骨形态发生蛋白2可增加G1期细胞所占比率。重组人骨形态发生蛋白2可显著促进p21的表达,显著抑制cyclinE的表达,并显著抑制PI3K/Akt信号通路的磷酸化过程;②体内实验:实验组裸鼠皮下瘤体体积均较对照组低,免疫组化检测显示重组人骨形态发生蛋白2处理可显著降低瘤体组织中ki-67的表达水平;③研究证实在体外及体内条件下重组人骨形态发生蛋白2通过影响PI3K/Akt信号通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖能力发挥显著抑制作用,从基础水平进一步论证了重组人骨形态发生蛋白2的临床应用不能显著增加乳腺癌的患病风险,为脊柱融合及骨不连等骨科疾病的治疗中应用重组人骨形态发生蛋白2提供了一定的理论基础。 展开更多

关键词 重组人骨形态发生蛋白2 PI3K/AKT 乳腺癌 mcf-7细胞系 细胞增殖 细胞周期蛋白 体内实验 体外研究 临床应用 骨形态发生蛋白质类 肿瘤 细胞增殖 组织工程

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SCE诱导MCF-7细胞凋亡及其相关基因表达的研究

13

作者 张敏 陈莉 徐瑞成 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2005年第5期525-530,共6页

目的观察鲨鱼软骨提取物(SCE)对MCF-7细胞凋亡的诱导作用,并进一步研究在此过程中BCL-2和Caspase-3的表达。方法将不同浓度的SCE作用于MCF-7细胞,观察其作用的时间效应及剂量效应;在光镜和电镜下观察其形态变化;用流式细胞术分析细胞DN... 目的观察鲨鱼软骨提取物(SCE)对MCF-7细胞凋亡的诱导作用,并进一步研究在此过程中BCL-2和Caspase-3的表达。方法将不同浓度的SCE作用于MCF-7细胞,观察其作用的时间效应及剂量效应;在光镜和电镜下观察其形态变化;用流式细胞术分析细胞DNA含量的改变;用免疫组织化学法观察在此过程中BCL-2和Caspase-3的表达。结果SCE能抑制MCF-7细胞生长,在一定剂量和时间范围内引起细胞凋亡,并显示剂量和时间效应,在此过程中BCL-2蛋白表达减弱。结论SCE能明显抑制MCF-7细胞体外生长,并可诱导MCF-7细胞凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白的表达水平有关。 展开更多

关键词 鲨鱼软骨提取物 mcf-7细胞系 细胞凋亡 BCL-2 CASPASE-3

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VEGF-C基因转染对人乳腺癌MCF-7细胞VEGF-C表达的影响 被引量：2

14

作者 单明 张建国 郭宝良 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2008年第10期739-742,共4页

目的探讨将真核表达载体pcDNA3.1-VEGF-C重组质粒转染入人乳腺癌MCF-7细胞后VEGF-C表达的变化。方法通过脂质体介导方法,将构建好含有VEGF-C的重组质粒转染入人乳腺癌MCF-7细胞中,新霉素(G418)筛选得到稳定转染细胞系,RT-PCR和Western b... 目的探讨将真核表达载体pcDNA3.1-VEGF-C重组质粒转染入人乳腺癌MCF-7细胞后VEGF-C表达的变化。方法通过脂质体介导方法,将构建好含有VEGF-C的重组质粒转染入人乳腺癌MCF-7细胞中,新霉素(G418)筛选得到稳定转染细胞系,RT-PCR和Western blot方法检测稳定转染后细胞中VEGF-C mRNA和蛋白的表达。结果成功转染并获得稳定高表达VEGF-C的乳腺癌MCF-7细胞系,其转染组VEGF-C mRNA相对吸光度值(12.382±2.183)较空载组(6.039±1.950)显著上调(P<0.01)。Western blot检测转染组VEGF-C蛋白相对灰度值(0.971±0.186)较空载组(0.594±0.196)明显上调(P<0.05)。结论脂质体介导重组质粒pcDNA3.1-VEGF-C转染入人乳腺癌MCF-7细胞中可显著增加VEGF-C表达水平。 展开更多

关键词 mcf-7细胞系 真核表达 质粒 血管内皮生长因子-C 基因转染

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新型大黄酸衍生物4F抑制MCF-7细胞增殖并通过旁凋亡途径诱导细胞死亡（英文） 被引量：3

15

作者 刘云风 田炜 +4 位作者 蓝富 亢健康 庞会锋 侯华新 黎丹戎 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第2期163-168,共6页

目的:探讨大黄酸及其衍生物4F对MCF-7细胞增殖能力、亚显微结构的影响及诱导细胞死亡的分子机制。方法:采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞仪检测比较4F、大黄酸和顺铂对乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤活性;采用透射电镜观察MCF-7细胞质空... 目的:探讨大黄酸及其衍生物4F对MCF-7细胞增殖能力、亚显微结构的影响及诱导细胞死亡的分子机制。方法:采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞仪检测比较4F、大黄酸和顺铂对乳腺癌细胞MCF-7的抗肿瘤活性;采用透射电镜观察MCF-7细胞质空泡及线粒体;免疫印迹实验则用于测定旁凋亡、自噬和凋亡相关蛋p62、微管相关蛋白轻链3(LC3)、葡萄糖调节蛋白(Grp)78、cleaved caspase-9和caspase-7的表达水平。结果:4F比大黄酸具有更强的细胞毒性(P<0.05),但均对MCF-7细胞凋亡率无明显影响(P>0.05);4F处理的MCF-7细胞质中可观察到大量空泡及肿胀的线粒体;免疫印迹结果显示Grp78、p62及LC3表达水平增高(P<0.05),而凋亡相关蛋白cleaved caspase-9及caspase-7表达水平无显著改变(P>0.05)。结论:4F可能通过旁凋亡,一种非凋亡或自噬性死亡的方式,诱导MCF-7细胞死亡;4F有望成为克服凋亡耐药的候选药物。 展开更多

关键词 细胞质空泡 旁凋亡 细胞死亡 乳腺癌mcf-7细胞系 大黄酸

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雄黄与β-榄香烯联合用药逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素耐药性的研究 被引量：6

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作者 胡军 赵瑾瑶 +2 位作者 金伟 杨进 杨佩满 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期704-707,共4页

目的探讨不同作用机制的雄黄(REA)与β-榄香烯(β-ELE)联合应用,从不同环节逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素(ADM)的耐药性。方法联合用药后,经MTT法测定对MCF-7/ADM细胞药物敏感性的影响,通过荧光分光光度法检测对细胞内化疗药物阿... 目的探讨不同作用机制的雄黄(REA)与β-榄香烯(β-ELE)联合应用,从不同环节逆转人乳腺癌MCF-7/ADM细胞对阿霉素(ADM)的耐药性。方法联合用药后,经MTT法测定对MCF-7/ADM细胞药物敏感性的影响,通过荧光分光光度法检测对细胞内化疗药物阿霉素积累的影响,应用流式细胞术检测P-GP、Bcl-2蛋白表达的改变。结果联合用药对MCF-7/ADM的耐药性有明显的逆转作用,逆转倍数约为4.2倍,明显好于两者单独应用(P<0.01)。联合用药后,MCF-7/ADM细胞内阿霉素浓度明显增加(P<0.01),P-GP表达由(95.90±3.02)%降至(76.50±5.16)%(P<0.01),Bcl-2表达由(90.20±3.99)%降至(50.00±1.63)%(P<0.01)。结论雄黄与β-榄香烯联合用药可显著增强对MCF-7/ADM细胞的耐药逆转作用,逆转机制与增加细胞内药物积累,降低P-GP、Bcl-2的表达有关。 展开更多

关键词 雄黄 Β-榄香烯 mcf-7/ADM细胞系 耐药性 MTT法 流式细胞术

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桃儿七提取物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖及凋亡的作用 被引量：6

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作者 李国元 马兰 格日力 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第23期2185-2188,共4页

目的:研究桃儿七对人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制和促进凋亡的作用,探讨其抗癌作用的机制.方法:应用MTT法检测桃儿七提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显微镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,FCM分析细胞周期及凋亡率,免疫... 目的:研究桃儿七对人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制和促进凋亡的作用,探讨其抗癌作用的机制.方法:应用MTT法检测桃儿七提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显微镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,FCM分析细胞周期及凋亡率,免疫细胞化学法检测细胞增殖凋亡调控相关蛋白的表达.结果:桃儿七提取物可明显抑制MCF-7细胞的增殖,1,2,3 mg/L桃儿七作用72 h后,细胞生长抑制率分别为43.0%,54.9%,78.5%,抑制作用呈时间及浓度依赖性.形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成.FCM分析发现桃儿七阻断MCF-7细胞生长于细胞周期的G2/M期,凋亡诱导作用呈时间及浓度依赖性.免疫细胞化学结果显示,2 mg/L桃儿七作用48 h后,PCNA,Bc l-2蛋白表达分别由154.78±0.16,85.56±0.09降至78.46±0.15,40.43±0.07,P<0.01;而p21WAF1/C IP1和c-Myc蛋白由92.32±0.12,114.48±0.14增至125.54±0.09,156.52±0.08,P<0.01.结论:桃儿七提取物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长有明显的呈时间及浓度依赖性的抑制作用,G2/M期阻滞并诱导凋亡.该作用与p21WAF1/C IP1表达增加及PCNA表达降低有关,通过下调Bc l-2和上调c-Myc表达诱导乳腺癌细胞凋亡. 展开更多

关键词 桃儿七 乳腺癌 人乳腺癌细胞系mcf-7 凋亡 细胞增殖

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钙调素拮抗剂O-(4-乙氧基)-丁基-小檗胺增强阿霉素杀伤MCF-7/ADR细胞的机制研究 被引量：1

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作者 赵英新 刘荣 +5 位作者 范冬梅 任思楣 李崴 师锐赞 张砚君 杨铭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期231-235,共5页

目的研究钙调素拮抗剂0-4-乙氧基-丁基-小檗胺(EBB)增强阿霉素诱导乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR细胞的杀伤作用及其相关机制。方法用MTT法测定阿霉素、EBB单独及联合用药对阿霉素杀伤乳腺癌多药耐药细胞系(MCF-7/ADR)及其亲代细胞系(M... 目的研究钙调素拮抗剂0-4-乙氧基-丁基-小檗胺(EBB)增强阿霉素诱导乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR细胞的杀伤作用及其相关机制。方法用MTT法测定阿霉素、EBB单独及联合用药对阿霉素杀伤乳腺癌多药耐药细胞系(MCF-7/ADR)及其亲代细胞系(MCF-7)的作用的IC50值,用不同浓度EBB处理MCF-7/ADR细胞后用FACS法分析EBB对阿霉素诱导细胞凋亡及对mdr1mRNA和P-gp蛋白水平表达的影响,通过激光共聚焦显微镜观察EBB处理前后及用EBB预处理24和48h后MCF-7/ADR和MCF-7细胞内阿霉素浓度的改变。结果MTT结果显示EBB对MCF-7和MCF-7/ADR都具有抗肿瘤活性;EBB还能协同提高阿霉素的细胞毒作用,MCF-7组两药相互作用指数(CDI)值为0.73,MCF-7/ADR组CDI值为0.49,其对耐药细胞的协同作用更为明显。随EBB剂量增加,低剂量阿霉素诱导MCF-7/ADR细胞凋亡增加而且P-gp蛋白表达水平逐渐下降,细胞内阿霉素浓度逐渐提高,而且用EBB预处理MCF-7/ADR细胞24和48h后细胞内阿霉素和罗丹明浓度也逐渐提高。结论EBB是有效的肿瘤细胞化疗药物,它不但能直接抑制P-gp功能还具有下调P-gp蛋白表达的作用,从而有效逆转MCF-7/ADR细胞的耐药现象,协同增强化疗药物对耐药细胞的杀伤作用。 展开更多

关键词 多药耐药 EBB MDR1基因 P-GP 阿霉素 共聚焦激光扫描显微镜 mcf-7/ADR细胞系

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柴桂龙牡汤含药血清对人乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用及对雌激素受体α表达的影响 被引量：3

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作者 蔡琳琳 姚明江 +3 位作者 郭全 吴显文 朱尧武 许云 《中国药业》 CAS 2018年第12期1-4,共4页

目的观察柴桂龙牡汤(CGLM)含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞株体外生长的抑制作用及对雌激素受体α(ERα)表达的影响。方法将人乳腺癌MCF-7细胞株细胞分别加入相应(含药)培养基,对照组含有10%空白大鼠血清,给药组分别含有柴桂龙牡汤低、中... 目的观察柴桂龙牡汤(CGLM)含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞株体外生长的抑制作用及对雌激素受体α(ERα)表达的影响。方法将人乳腺癌MCF-7细胞株细胞分别加入相应(含药)培养基,对照组含有10%空白大鼠血清,给药组分别含有柴桂龙牡汤低、中、高剂量的10%含药血清。加药后,置37℃及5%CO2培养箱中继续培养48 h。噻唑蓝(MTT)法检测柴桂龙牡汤各组含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。将10%的含药血清培养基加入MCF-7细胞中,孵育48 h,提取细胞总mRNA及蛋白,反转录合成c DNA,采用实时荧光定量PCR方法检测各组细胞中ERαmRNA的表达水平,采用Western blot方法检测各组ERα蛋白表达水平。结果 MTT法检测结果显示,与对照组相比,低、中、高剂量柴桂龙牡汤均可抑制MCF-7细胞体外增殖,中、高剂量组的差异有统计学意义(P<0.01);PCR法检测结果显示,与对照组相比,柴桂龙牡汤低、中、高剂量组中ERαmRNA均有升高,其中高剂量组有显著差异(P<0.01);Western blot法检测结果显示,与对照组相比,低、中、高剂量柴桂龙牡汤均使ERα蛋白表达水平升高,中、高剂量组有显著差异(P<0.01)。结论柴桂龙牡汤对MCF-7细胞的体外生长有抑制作用,并与剂量浓度呈正相关,其机制可能与提高ERαmRNA含量、上调ERα蛋白的表达水平有关。 展开更多

关键词 柴桂龙牡汤 乳腺癌 人乳腺癌细胞系mcf-7细胞株 雌激素受体Α

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桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响 被引量：18

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作者 李国元 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期1064-1067,共4页

目的:研究桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,探讨其抗癌作用的机制。方法:应用MTT法检测桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显徽镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)分析细胞周... 目的:研究桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响,探讨其抗癌作用的机制。方法:应用MTT法检测桃儿七根醇提物对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,倒置显徽镜、HE染色及电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期及凋亡率,免疫细胞化学法(ICC)检测细胞增殖、凋亡相关调控蛋白的表达。结果:桃儿七根醇提物可明显抑制MCF-7细胞的增殖,1,2,3 mg．L^(-1)桃儿七根醇提物作用72h后,细胞生长抑制率分别为43．0%,54．9%,78．5%,抑制作用呈时间及浓度依赖性。形态学观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征,伴有多核细胞形成。FCM分析发现桃儿七根醇提物阻断MCF-7细胞生长于细胞周期的G_2/M期,凋亡诱导作用呈时间及浓度依赖性。免疫细胞化学结果显示,2mg·L^(-1)桃儿七根醇提物作用48h后,PCNA,Bcl-2蛋白表达较对照组显著下降;而p21^(WAFI-CIP1)和c-Myc蛋白显著增加(P＜0．01)。结论:桃儿七根醇提物可能通过增加p21^(WAFI-CIP1)蛋白表达及降低PCNA蛋白表达而抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并可能下调Bcl-2蛋白表达和上调c-Myc蛋白表达来促进MCF-7细胞凋亡。 展开更多

关键词 桃儿七根醇提物 人乳腺癌细胞系mcf-7 细胞增殖 细胞凋亡

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