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葡萄糖转运蛋白5低表达对骨肉瘤MG-63细胞系克隆形成能力和迁移能力的影响及其可能机制 被引量：1
1
作者 沈朝 刘树江 +2 位作者 苑萌萌 吴文杰 李志强 《广西医学》 CAS 2021年第4期459-463,483,共6页
目的分析抑制葡萄糖转运蛋白5(Glut5)的表达对骨肉瘤MG-63细胞系克隆形成能力和迁移能力的影响,并基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探讨其可能的作用机制。方法取对数生长期的MG-63细胞分为Con组、NC组和短发夹RNA(shRNA)-Glut5组。Con组未... 目的分析抑制葡萄糖转运蛋白5(Glut5)的表达对骨肉瘤MG-63细胞系克隆形成能力和迁移能力的影响,并基于Wnt/β-连环蛋白信号通路探讨其可能的作用机制。方法取对数生长期的MG-63细胞分为Con组、NC组和短发夹RNA(shRNA)-Glut5组。Con组未进行基因干扰,NC组和shRNA-Glut5组则采用RNA干扰技术将杂序的shRNA、shRNA-Glut5分别转染至MG-63细胞。转染48 h后,检测3组细胞的增殖能力、细胞克隆数和迁移能力,以及细胞中Glut5、β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和基质金属蛋白酶3(MMP3)的mRNA和蛋白的表达水平。结果与其他两组比较,shRNA-Glut5组MG-63细胞的增殖和迁移能力下降,细胞克隆数减少,Glut5、β-连环蛋白、cyclinD1和MMP3的mRNA和蛋白表达水平均降低(均P<0.05)。结论下调Glut5基因表达可以抑制骨肉瘤MG-63细胞系的增殖、克隆形成和迁移能力,Wnt/β-连环蛋白信号通路可能参与调控该过程。 展开更多
关键词 骨肉瘤 mg-63细胞系 葡萄糖转运蛋白5 Wnt/β-连环蛋白信号通路 细胞克隆 细胞迁移 RNA干扰技术
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重组可溶性TRAIL联合顺铂诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的研究
2
作者 沈滟 赵大治 唐艳平 《河南科技大学学报（医学版）》 2007年第3期164-166,共3页
目的研究重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)与化疗药物顺铂(CDDP)单独及联合使用诱导骨肉瘤细胞MG-63的凋亡作用。方法常规培养骨肉瘤细胞系MG-63,用不同浓度rsTRAIL、CDDP和两药联用处理细胞,于处理后的不同时间观察细胞形态变化。应用四氮唑蓝... 目的研究重组可溶性TRAIL(rsTRAIL)与化疗药物顺铂(CDDP)单独及联合使用诱导骨肉瘤细胞MG-63的凋亡作用。方法常规培养骨肉瘤细胞系MG-63,用不同浓度rsTRAIL、CDDP和两药联用处理细胞,于处理后的不同时间观察细胞形态变化。应用四氮唑蓝(MTT)比色法和吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双重荧光染色法检测两药单独使用和联合使用诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用。结果rsTRAIL对MG-63细胞的生长有明显的抑制作用,可见典型的细胞凋亡特点,细胞抑制率从6μg/L的10.1%上升到800μg/L的84.6%,细胞凋亡率从3μg/L的19%提高到25μg/L的69.7%,均具显著的剂量效应;亚毒性剂量的CDDP与低浓度的rsTRAIL合用,明显提高了MG-63细胞的生长抑制率和凋亡率(P<0.05)。结论rsTRAIL具有诱导骨肉瘤MG-63细胞凋亡的作用,并通过诱导凋亡的方式有效地杀伤肿瘤细胞;化疗药物CDDP能加强rsTRAIL的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 mg-63细胞系 细胞凋亡 顺铂
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阻断Notch信号通路抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖的实验研究 被引量：4
3
作者 游浩 张觅 +3 位作者 刘洋 李明辉 陈方舟 郑先念 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期541-545,共5页
目的探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响及其机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞株;MTT法检测不同浓度DAPT(1.0、5.0、10.0μmol/L)对骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察不同浓度... 目的探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响及其机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞株;MTT法检测不同浓度DAPT(1.0、5.0、10.0μmol/L)对骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察不同浓度DAPT对骨肉瘤MG-63细胞形态的影响;流式细胞术结合AnnexinⅤ-FITC/PI双染分析不同浓度DAPT对骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测骨肉瘤MG-63细胞Notch1、HES1基因表达。结果不同浓度的DAPT作用于骨肉瘤MG-63细胞后,细胞增殖水平明显下降(P<0.05),1.0μmol/L DAPT即抑制细胞生长,随着DAPT浓度增加抑制效果明显增强,呈显著的浓度依赖关系,且随着DAPT作用时间延长,抑制效果也明显增强。细胞凋亡结果分析表明,DAPT能浓度依赖性地诱导骨肉瘤MG-63细胞发生凋亡。RT-PCR显示随着DAPT量的增加,Notch l、HES l mRNA的表达逐渐下降(均P<0.05)。结论 DAPT对骨肉瘤MG-63细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用可能与下调MG-63细胞中Notch l、HES 1mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 NOTCH信号通路 骨肉瘤 mg-63细胞系 增殖抑制
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磷酸酶基因PTEN对骨肉瘤细胞凋亡机制研究 被引量：2
4
作者 张昊 王勇 +3 位作者 成志勇 张金金 鲁会亮 张楠 《医学研究杂志》 2015年第8期53-55,共3页
目的探讨肿瘤抑制基因PTEN对人骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡的影响及其分子作用机制。方法将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP),转染MG-63细胞系,流式细胞仪分析转染效率及细胞凋亡率,半定量RT-... 目的探讨肿瘤抑制基因PTEN对人骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡的影响及其分子作用机制。方法将携带有野生型PTEN及绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及空载体腺病毒(Ad-GFP),转染MG-63细胞系,流式细胞仪分析转染效率及细胞凋亡率,半定量RT-PCR检测PTEN mRNA水平变化,Western blot法检测PTEN蛋白表达,试剂盒检测caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性。结果以感染复数为100,转染MG-63细胞2天后腺病毒感染效率即达93.2%±4.7%。转染PTEN基因5天后,细胞凋亡率为29.8%,细胞形态出现明显凋亡改变。分子学检测结果显示转染PTEN基因后,PTEN mRNA及蛋白表达明显升高;caspase-3、caspase-7、caspase-9蛋白活性明显增加。结论 PTEN基因可能通过提高caspase-3、caspase-7、caspase-9活性,诱导人骨肉瘤MG-63细胞凋亡。 展开更多
关键词 PTEN基因 mg-63细胞系 CASPASE家族 骨肉瘤
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甲状腺激素对成骨样MG-63细胞甲状腺激素受体不同亚型表达的影响 被引量：2
5
作者 杨宇虹 左爱军 +3 位作者 朱志峰 赵学勤 郭刚 张镜宇 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期242-245,共4页
目的 检测人类成骨样细胞MG-63中甲状腺激素受体（TR）的表达情况以及甲状腺激素（T3或T4）对其的影响.方法 用实时荧光定量PCR法对MG-63细胞中TR的主要4个亚型,α1、α1、β1、β2的mRNA表达进行了测定.结果 TRα1 mRNA的表达水平最高,... 目的 检测人类成骨样细胞MG-63中甲状腺激素受体（TR）的表达情况以及甲状腺激素（T3或T4）对其的影响.方法 用实时荧光定量PCR法对MG-63细胞中TR的主要4个亚型,α1、α1、β1、β2的mRNA表达进行了测定.结果 TRα1 mRNA的表达水平最高,为10.70±0.45;TRβ1仅及其半,为5.75±0.10;TRβ2不低,相当于TRβ1的60%,为3.34±0.08;TRα2的表达极低,仅为（3.66±0.59）×10-2.分别加入不同浓度的T3或T4,仅TRα1和TRα2对T3表现明显的降调节,且TRα1和TRα2的表达与相应T3浓度之间负相关,其他亚型无显著性变化,也无相关关系;同样浓度范围的T4作用各亚型,表达均无显著性变化.结论 在骨细胞发育分化中TRα1起关键作用. 展开更多
关键词 甲状腺激素 甲状腺激素受体 人类成骨样细胞系mg-63 基因表达
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成骨样细胞MG-63中的甲状腺激素受体Ⅰ——细胞核可溶性甲状腺激素受体与激素（T3）结合的动力学
6
作者 杨宇虹 左爱军 +3 位作者 朱志峰 赵学勤 郭刚 张镜宇 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期125-127,共3页
建立人类成骨样细胞系MG-63中甲状腺激素受体的结合实验的方法，测定受体动力学参数。体外培养MG-63细胞，制备细胞核提取液，对其细胞核提取物中的甲状腺激素受体与激素（主要是T3）结合的动力学进行了Seatchard分析。MG-63细胞核内存... 建立人类成骨样细胞系MG-63中甲状腺激素受体的结合实验的方法，测定受体动力学参数。体外培养MG-63细胞，制备细胞核提取液，对其细胞核提取物中的甲状腺激素受体与激素（主要是T3）结合的动力学进行了Seatchard分析。MG-63细胞核内存在高亲和力（Ka为7．68×10^9L／mol）和有限结合容量的甲状腺激素受体，最大结合容量为（111．25±10．73）fmol／mg蛋白。建立了一个简易的自培养细胞制备纯净细胞核的方法，为进一步研究成骨样细胞及骨组织中的甲状腺激素受体奠定基础。 展开更多
关键词 甲状腺激素受体 人类成骨样细胞系mg-63 Scatchard分析
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