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弓形虫MIC1蛋白在杆状病毒系统中的表达及活性分析
1
作者
李响
张小涵
+5 位作者
李美琪
陈冉
冯颖
李林
桑晓宇
杨娜
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期210-218,共9页
为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养...
为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养3代获得重组杆状病毒株。结果显示,Sf9细胞在感染后的第3天出现典型的细胞病变;间接免疫荧光和Western blot试验结果表明MIC1重组蛋白质在感染的Sf9细胞中成功可溶性表达;纯化的MIC1重组蛋白质不仅具有结合唾液酸乳糖的能力,同时能够刺激Balb/c小鼠产生较高水平的特异性抗体(>1∶25600)。以上结果表明,通过杆状病毒表达系统可获得具有生物学活性的弓形虫MIC1重组蛋白质。
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关键词
弓形虫
mic1蛋白
杆状病毒系统
活性分析
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职称材料
题名
弓形虫MIC1蛋白在杆状病毒系统中的表达及活性分析
1
作者
李响
张小涵
李美琪
陈冉
冯颖
李林
桑晓宇
杨娜
机构
沈阳农业大学动物科学与医学学院/重要家畜疫病研究教育部重点实验室
辽宁成大生物股份有限公司
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期210-218,共9页
基金
国家自然科学基金项目(31902297
31672546
+3 种基金
32072891)
辽宁省教育厅项目(LJKZ0673
LSNQN202003)
沈阳市中青年科技创新人才支持计划项目(RC 210291)。
文摘
为构建可溶性表达弓形虫MIC1蛋白质的重组杆状病毒株并分析重组蛋白质的活性,通过PCR扩增弓形虫mic1基因的编码序列并连接到pFastBac 1质粒中,将重组的转移质粒转化DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒,转染Sf9细胞后连续培养3代获得重组杆状病毒株。结果显示,Sf9细胞在感染后的第3天出现典型的细胞病变;间接免疫荧光和Western blot试验结果表明MIC1重组蛋白质在感染的Sf9细胞中成功可溶性表达;纯化的MIC1重组蛋白质不仅具有结合唾液酸乳糖的能力,同时能够刺激Balb/c小鼠产生较高水平的特异性抗体(>1∶25600)。以上结果表明,通过杆状病毒表达系统可获得具有生物学活性的弓形虫MIC1重组蛋白质。
关键词
弓形虫
mic1蛋白
杆状病毒系统
活性分析
Keywords
Toxoplasma gondii
mic
1
protein
baculovirus system
activity analysis
分类号
S852.7 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
弓形虫MIC1蛋白在杆状病毒系统中的表达及活性分析
李响
张小涵
李美琪
陈冉
冯颖
李林
桑晓宇
杨娜
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
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