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miR-145通过Notch通路调节免疫功能及炎症反应介导创伤性脑损伤的神经保护
1
作者 胡德献 孙衍昶 +1 位作者 冯基高 莫业和 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期497-502,共6页
目的:探讨miR-145对创伤性脑损伤(TBI)后炎症反应和免疫调节的作用。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(TBI)、TBI+NC agomir组、TBI+miR-145 agomir组。改良神经损伤严重程度评分(mNSS)用于评估创伤后神经功能;MW... 目的:探讨miR-145对创伤性脑损伤(TBI)后炎症反应和免疫调节的作用。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(TBI)、TBI+NC agomir组、TBI+miR-145 agomir组。改良神经损伤严重程度评分(mNSS)用于评估创伤后神经功能;MWM测试评估TBI后小鼠的神经认知功能;流式细胞术检测各组小鼠脑组织中Tregs数量;ELISA检测各组小鼠海马中炎症细胞因子表达;免疫组化检测各组小鼠海马中活化的小胶质细胞/巨噬细胞Iba-1表达;RT-qPCR检测M1/M2小胶质细胞/巨噬细胞标志物基因iNOS、CD11b、CD206和Arg1表达;TUNEL染色和神经元细胞核免疫荧光标记(NeuN)的双重染色检测神经元凋亡。结果:与Sham组比较,TBI组小鼠海马组织中miR-145表达显著降低,神经功能损伤增加,脑组织中Tregs在CD4+T细胞群中百分比降低,海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10和TGF-β表达显著升高,活化的小胶质细胞/巨噬细胞Iba-1数量增多,iNOS、CD11b、CD206和Arg1表达水平显著升高,神经元凋亡升高,Notch1、p21和Hes1 mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05);与TBI+NC agomir组比较,TBI+miR-145 agomir组小鼠海马中miR-145表达显著升高,神经功能损伤减轻,脑组织中Tregs在CD4+T细胞群中的百分比显著升高,海马中促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达显著降低,抗炎因子IL-4、IL-10和TGF-β表达显著升高,活化的小胶质细胞/巨噬细胞Iba-1数量显著减少,iNOS和CD11b表达降低,CD206和Arg1表达水平显著升高,神经元凋亡减少,Notch1、p21和Hes1 mRNA和蛋白水平均显著降低(均P<0.05)。结论:miR-145过表达通过提高Tregs水平,促进小胶质细胞M2极化,调节创伤后神经炎症反应及改善行为功能障碍,这一机制可能通过Notch信号通路介导。 展开更多
关键词 mir-145 创伤性脑损伤 炎症 免疫调节 NOTCH信号通路
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miR-145-5p调控Survivin通过凋亡通路对食管癌生物学行为的影响
2
作者 郑竞雄 杨阳 +4 位作者 孙光蕊 赵宝山 侯继申 梁宗英 王敏 《河北医学》 CAS 2024年第3期386-392,共7页
目的:探讨miR-145-5p靶向调控Survivin及凋亡信号通路对食管癌凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测食管癌组织和细胞系中miR-145-5p、Survivin mRNA相对表达量。双荧光素酶报告基因分析验证miR-145... 目的:探讨miR-145-5p靶向调控Survivin及凋亡信号通路对食管癌凋亡、侵袭和迁移的影响。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测食管癌组织和细胞系中miR-145-5p、Survivin mRNA相对表达量。双荧光素酶报告基因分析验证miR-145-5p和Survivin的靶向调控关系。通过RT-qPCR法测定细胞转染后miR-145-5p和Survivin mRNA的相对表达量。Western blot检测凋亡通路中BCL2、MDM2和Caspase-3蛋白的表达。通过MTT、流式细胞术、划痕愈合实验及Transwell小室实验检测TE-1细胞存活能力、凋亡率、迁移率及侵袭能力。结果:与癌旁组织相比,miR-145-5p在癌组织中表达低,而Survivin表达高(P<0.05)。与正常食管黏膜上皮HEEC细胞相比,食管癌TE-1细胞中miR-145-5p低表达,Survivin高表达(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-145-5p和Survivin间存在靶向调控关系。与未转染和转染miR-145-5p对照物的TE-1细胞相比,转染miR-145-5p模拟物后可显著增加miR-145-5p的表达,抑制Survivin mRNA的表达,同时BCL2和MDM2蛋白的表达下降,Caspase-3表达上升,促进细胞凋亡,抑制了细胞活性、侵袭和迁移能力(P<0.05)。结论:通过miR-145-5p的负向调控,Survivin表达被抑制,凋亡通路被激活,从而促进细胞凋亡,抑制食管癌细胞存活,侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 mir-145-5p SURVIVIN MIRNA 食管癌 凋亡通路
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子宫内膜癌患者血清miR-145、miR-200a及miR-181c表达水平及其临床意义
3
作者 潘淑敏 王艳虹 +2 位作者 姚志芹 郭子楠 刘弘扬 《实用癌症杂志》 2024年第5期749-752,共4页
目的观察子宫内膜癌患者血清miR-145、miR-200a、miR-181c表达变化,探讨其临床意义。方法选取84例子宫内膜癌患者为研究组,同期收治的51例子宫肌瘤患者为对照组。检测两组血清miR-145、miR-200a、miR-181c表达,分析miR-145、miR-200a、m... 目的观察子宫内膜癌患者血清miR-145、miR-200a、miR-181c表达变化,探讨其临床意义。方法选取84例子宫内膜癌患者为研究组,同期收治的51例子宫肌瘤患者为对照组。检测两组血清miR-145、miR-200a、miR-181c表达,分析miR-145、miR-200a、miR-181c表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-145、miR-200a、miR-181c对子宫内膜癌的诊断效能。结果研究组血清miR-145、miR-181c水平低于对照组,miR-200a水平高于对照组(P<0.05);血清miR-145、miR-200a、miR-181c表达与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,miR-145、miR-200a、miR-181c诊断子宫内膜癌的AUC分别为0.954、0.987、0.908。结论子宫内膜癌患者血清miR-145、miR-181c表达下调,miR-200a表达上调,且三者均与淋巴结转移、临床分期有关,可能作为子宫内膜癌诊断的辅助指标。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 mir-145 mir-200a mir-181c 诊断
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miR-145-5p对口腔鳞癌细胞增殖的调控作用及其机制
4
作者 赵微 李润滋 +6 位作者 张雨 张雨馨 沈千会 李嘉琪 罗菲 李敏惠 杨平 《成都医学院学报》 CAS 2024年第2期225-230,共6页
目的 探究miR-145-5p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及其机制。方法 利用GEO数据库构建OSCC的miRNA差异表达谱;通过生物信息学技术预测miR-145-5p靶基因并对其进行GO、KEGG及PPI分析;以人OSCC细胞株(HSC-3)为实验对象,将实... 目的 探究miR-145-5p对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖的调控作用及其机制。方法 利用GEO数据库构建OSCC的miRNA差异表达谱;通过生物信息学技术预测miR-145-5p靶基因并对其进行GO、KEGG及PPI分析;以人OSCC细胞株(HSC-3)为实验对象,将实验分为CN组(未做处理)、NC组(转染mimic NC)和miR-145-5p组(转染miR-145-5p mimic),通过CCK-8法检测不同剂量(50、100、200 nmol/L)miR-145-5p对HSC-3细胞增殖的影响;JC-1和Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测miR-145-5p对HSC-3细胞的凋亡诱导情况;RT-qPCR检测miR-145-5p调控神经母细胞瘤鼠肉瘤同系物(NRAS)、C-JUN氨基端激酶(C-JUN)、信号转导和转录激活因子1(STAT1)的表达情况。结果 miRNA差异表达谱显示,miR-145-5p在OSCC中表达下调(P<0.05);GO和KEGG分析显示,miR-145-5p靶基因主要调控MAPK信号通路;PPI蛋白互作显示,NRAS是miR-145-5p的关键靶基因之一;CCK-8结果显示,50、100、200 nmol/L的miR-145-5p转染HSC-3细胞后,细胞活力较CN组降低(P<0.05);JC-1染色结果显示,miR-145-5p组HSC-3细胞线粒体膜电位低于CN组(P<0.05);Annexin V-FITC/PI染色结果显示,miR-145-5p组HSC-3细胞凋亡率较CN组明显增加(P<0.05);RT-qPCR结果显示,与CN组比较,miR-145-5p组NRAS表达降低(P<0.05),而MAPK信号通路关键转录因子C-JUN和STAT1表达升高(P<0.05)。结论 miR-145-5p可通过靶向NRAS,并经过MAPK信号通路诱导细胞凋亡,从而抑制OSCC细胞增殖。 展开更多
关键词 mir-145-5p 口腔鳞状细胞癌 神经母细胞瘤鼠肉瘤同系物 MAPK信号通路 凋亡
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miR-145基因多态性与脑梗死的关系及对miR-145水平的影响
5
作者 黄艳云 陆青兰 +2 位作者 韦必晓 杨丽娜 黄荣透 《检验医学与临床》 2024年第6期775-779,共5页
目的探讨miR-145基因rs41291957、rs353291位点多态性与脑梗死(IS)的关系及对miR-145水平的影响。方法收集2021年1-12月百色市人民医院收治的253例IS患者(IS组)及同期在该院体检中心体检的275例健康者(对照组)血液标本,采用TaqMan探针法... 目的探讨miR-145基因rs41291957、rs353291位点多态性与脑梗死(IS)的关系及对miR-145水平的影响。方法收集2021年1-12月百色市人民医院收治的253例IS患者(IS组)及同期在该院体检中心体检的275例健康者(对照组)血液标本,采用TaqMan探针法SNP分型技术检测rs41291957、rs353291多态性,采用SYBR Green实时荧光定量PCR检测miR-145水平。比较两组miR-145水平,以及rs41291957、rs353291多态性分布情况,分析rs41291957、rs353291位点不同基因型患者miR-145水平差异。结果miR-145基因rs41291957、rs353291位点在IS组和对照组中均存在AA、AG、GG 3种基因型,且这两个位点在IS组和对照组中的基因型分布频率均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(均P>0.05),具有群体代表性。miR-145基因rs41291957、rs353291位点的基因型和等位基因在IS组与对照组中的分布频率比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。IS组患者外周血单个核细胞中miR-145水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。但无论是IS组或对照组,组内rs41291957、rs353291位点不同基因型之间的miR-145水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论miR-145基因的rs41291957、rs353291位点多态性与IS易感性无关。虽然IS患者的外周血单个核细胞中miR-145水平明显升高,但是rs41291957、rs353291位点多态性对miR-145水平不具有调节性。 展开更多
关键词 mir-145 基因多态性 rs41291957 rs353291 脑梗死
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circ-0030042通过miR-145/PTEN轴调控对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及迁移的影响
6
作者 张毓姣 郭智辉 +3 位作者 孟艳斌 高亚丽 段鹏 郝振明 《中国美容医学》 CAS 2024年第1期49-53,共5页
目的:探讨circ-0030042与人第10号染色体缺失的磷酸酶(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)的相互作用关系,并分析其在增生性瘢痕(Hypertrophic scar,HS)患者中对成纤维细胞增殖与迁移的影响及作用机制。方... 目的:探讨circ-0030042与人第10号染色体缺失的磷酸酶(Phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)的相互作用关系,并分析其在增生性瘢痕(Hypertrophic scar,HS)患者中对成纤维细胞增殖与迁移的影响及作用机制。方法:通过circRNA序列和定量聚合酶链反应(PCR技术)检测正常皮肤成纤维细胞(NSFBs)和增生性瘢痕患者成纤维细胞(HSFBs)中circ-0030042的表达。用CCK8检测法检测转染48 h后的HSFBs细胞增殖情况。利用stubRFP-sensGFP-LC3基因转染、流式细胞仪及电子显微镜观察circ-0030042对miR-145/PTEN轴调控VEGF水平的表达。利用生物信息学分析、RNA免疫沉淀、免疫荧光检测等方法,揭示circ-0030042介导HS患者成纤维细胞增殖与迁移的作用机制。结果:circ-0030042在增生性瘢痕中显著上调,过表达时作为VEGF海绵抑制miR-145诱导的成纤维细胞,维持体内稳定性。此外,circ-0030042通过海绵化VEGF水平并阻断其miR-145捕获转录因子(FOXO1)mRNA来影响自噬,而circ-0030042诱导FOXO1的抑制被VEGF水平过表达或circ-0030042结合减少所抵消。过表达circ-0030042对成纤维细胞的增殖抑制与VEGF表达的抑制作用被过表达miR-145部分抵消。结论:干扰circ-0030042通过靶向下调miR-145/PTEN轴进而抑制HSFBs细胞的增殖与迁移,进一步诱导恶性细胞凋亡。 展开更多
关键词 circ-0030042 mir-145/PTEN轴 增生性瘢痕 成纤维细胞 细胞迁移/增殖
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miR-145和miR-93对泌乳素腺瘤耐药的研究进展
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作者 李家琪 史信康 +2 位作者 周满鑫 唐涛 叶锋 《医药前沿》 2024年第4期39-41,共3页
泌乳素腺瘤是最常见的功能性垂体肿瘤,临床表现为高催乳素血症、肿瘤局部压迫症状、垂体卒中、多激素混合腺瘤.目前指南推荐,多巴胺激动剂(DA)是首选治疗药物,有效率为67%,但约20%的垂体泌乳素瘤会出现耐药现象.微小核糖核酸(miRNA)参... 泌乳素腺瘤是最常见的功能性垂体肿瘤,临床表现为高催乳素血症、肿瘤局部压迫症状、垂体卒中、多激素混合腺瘤.目前指南推荐,多巴胺激动剂(DA)是首选治疗药物,有效率为67%,但约20%的垂体泌乳素瘤会出现耐药现象.微小核糖核酸(miRNA)参与肿瘤的发生发展、侵袭以及药物抵抗等过程.近年来,miRNA在耐药溴隐亭催乳素瘤中的表达知之甚少.本文系统阐述miRNA的生物学特征、生物学功能以及CircOMA1-miR-145-5P-TPT_(1)轴和lncRNA H19-miR-93-ATG7轴在垂体腺瘤中耐药的调控网络,为基础研究及临床提供参考. 展开更多
关键词 垂体神经内分泌肿瘤 多巴胺受体激动剂 耐药性 mir-93 mir-145
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肺癌患者miR-125b、miR-145、miR-146a表达与肺部感染的关系探讨
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作者 朱磊 曹建伟 《医学检验与临床》 2024年第1期66-70,共5页
目的:探讨肺癌患者miR-125b、miR-145、miR-146a表达与肺部感染的关系。方法:选取2021年1月-2023年4月于我院进行手术治疗的163例肺癌患者为研究对象,根据术后3d是否发生肺部感染将患者分为感染组(28例)和未感染组(135例)。比较2组术后... 目的:探讨肺癌患者miR-125b、miR-145、miR-146a表达与肺部感染的关系。方法:选取2021年1月-2023年4月于我院进行手术治疗的163例肺癌患者为研究对象,根据术后3d是否发生肺部感染将患者分为感染组(28例)和未感染组(135例)。比较2组术后24h血清miR-125b、miR-145、miR-146a水平,分析术后24h血清各指标水平与临床有差异指标的相关性,Logistic回归分析术后发生肺部感染的危险因素,ROC分析术后24h血清各指标联合检测对术后发生肺部感染的预测价值。结果:2组合并糖尿病、合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分比较,差异显著(P<0.05);术后24h感染组血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达水平高于未感染组,且各指标水平与合并糖尿病、合并COPD、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分均呈正相关(P<0.05);合并糖尿病、合并COPD、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分、术后24h血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达水平为肺癌患者术后发生肺部感染的危险因素,且血清各指标联合预测术后发生肺部感染的AUC为0.817,大于各单项指标(P<0.05)。结论:肺癌患者术后并发肺部感染人群血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达上调,其联合检测可作为早期预测术后是否发生肺部感染的有效指标。 展开更多
关键词 肺癌 mir-125b mir-145 mir-146A 肺部感染
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子宫内膜异位症不孕患者miR-145与Fascin-1、OCT4的相关性及临床意义
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作者 卢煜婷 陈军平 孙瑶 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第3期454-458,共5页
目的 研究子宫内膜异位症(EMs)不孕患者miR-145与Fascin-1、OCT4的相关性及临床意义。方法 选择2020年1月至2022年1月于重庆高新区第一人民医院行腹腔镜手术的100例EMs不孕患者作为研究组,留取异位子宫内膜组织;另取同期因宫腔粘连行宫... 目的 研究子宫内膜异位症(EMs)不孕患者miR-145与Fascin-1、OCT4的相关性及临床意义。方法 选择2020年1月至2022年1月于重庆高新区第一人民医院行腹腔镜手术的100例EMs不孕患者作为研究组,留取异位子宫内膜组织;另取同期因宫腔粘连行宫腔镜手术的55例患者作为对照组,留取正常子宫内膜组织。检测两组以及EMs组中不同AFS分期患者内膜组织中miR-145、Fascin-1、OCT4的表达水平,分析EMs组中miR-145与Fascin-1、OCT4表达的相关性,随访EMs不孕患者术后1年的自然妊娠情况,比较EMs组中不同miR-145表达患者术后自然妊娠率。结果 EMs组子宫内膜组织中miR-145的表达水平及Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);EMs组中AFSⅢ~Ⅳ期患者子宫内膜组织中miR-145的表达水平及Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);EMs组患者子宫内膜组织中miR-145的表达水平与Fascin-1、OCT4的mRNA和蛋白表达水平均呈正相关(P<0.05);根据EMs组患者子宫内膜组织中miR-145表达水平的中位数分为miR-145高表达患者和低表达患者,miR-145高表达患者术后累积自然妊娠率低于miR-145低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EMs不孕患者子宫内膜组织中miR-145表达增加与Fascin-1、Oct4表达增加及术后自然妊娠率降低有关。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 不孕 mir-145 FASCIN-1 OCT4 自然妊娠
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lncRNA UCA1靶向miR-145调控癫痫细胞炎症反应
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作者 樊丽霞 《中国医药指南》 2024年第2期5-8,共4页
目的探讨lncRNA UCA1靶向miR-145对癫痫细胞炎症反应的影响。方法体外培养经IL-1β处理过的CTX-TNA2细胞24 h,随机均分为NC组、过表达空载体组、pcDNA3.1-UCA1过表达组、干扰空载体组、sh-UCA1干扰组;CCK8检测细胞活性,应用RT-qPCR和EL... 目的探讨lncRNA UCA1靶向miR-145对癫痫细胞炎症反应的影响。方法体外培养经IL-1β处理过的CTX-TNA2细胞24 h,随机均分为NC组、过表达空载体组、pcDNA3.1-UCA1过表达组、干扰空载体组、sh-UCA1干扰组;CCK8检测细胞活性,应用RT-qPCR和ELISA检测炎症因子IL-2、IL-6、TNF-αmRNA和蛋白表达水平,过表达和沉默UCA1,RT-qPCR检测miR-145表达;荧光素酶报告实验确定UCA1与miR-145的靶向关系。结果过表达UCA1可明显抑制miR-145表达(P<0.01),沉默UCA1可显著促进miR-145表达(P<0.01),过表达UCA1可抑制癫痫细胞炎症因子IL-2、IL-6、TNF-α的表达。结论过表达UCA1可靶向miR-145调节癫痫细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 mir-145 癫痫 炎症 白细胞介素 肿瘤坏死因子Α
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脂肪干细胞外泌体传递miR-145调控增生性瘢痕成纤维细胞生物学特性的实验研究 被引量：1
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作者 阿丽米热·伊力哈木 卡米力江·买买提明 +1 位作者 美尔瓦提 李朝阳 《中国美容医学》 CAS 2023年第1期67-73,共7页
目的:探究脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)来源的外泌体(Exosome,Exo)传递miR-145对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSF)生物学功能的影响。方法:从增生性瘢痕组织中分离培养HSF细胞,从脂肪组织中... 目的:探究脂肪干细胞(Adipose-derived stem cells,ADSCs)来源的外泌体(Exosome,Exo)传递miR-145对增生性瘢痕成纤维细胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSF)生物学功能的影响。方法:从增生性瘢痕组织中分离培养HSF细胞,从脂肪组织中分离培养ADSCs,流式细胞术检测其表面标记物表达情况;采用含miR-145过表达慢病毒及阴性对照miR-NC慢病毒感染ADSCs,实时荧光定量PCR测定转染效果,并提取各转染组ADSCs上清液中Exo,获得含miR-145过表达的ADSCs来源Exo,利用透射电镜观察其形态、纳米颗粒跟踪分析仪检测粒径分布以及Western blot检测表面标志性蛋白CD63、CD81、CD9和TSG101的表达情况对提取的外泌体进行鉴定;添加外泌体培养HSF细胞,具体分组包括对照组、Exo组、miR-NCExo组、miR-145-Exo组,PKH26荧光标记的ADSC来源的Exos与HSF细胞培养,共聚焦荧光显微镜观察外泌体能否被细胞摄取,EdU检测各组HSF细胞的增殖能力,AnnexinⅤ-FITC/PI法检测各组HSF细胞的凋亡水平,Western blot检测各组细胞内凋亡相关蛋白(cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2)及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原(COL-Ⅰ、COL-Ⅲ)的蛋白表达水平。结果:成功分离到ADSCs,其表面标志物CD44、CD90及CD105均呈阳性表达;经miR-145过表达的慢病毒转染的miR-145-ADSCs组细胞中miR-145相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。分离到直径约100 nm、呈双层膜结构的杯状或球状以及外泌体标志蛋白CD63、CD81、CD9和TSG101均为阳性表达的ADSCs来源Exo;将ADSCs来源Exo与HSF细胞共培养后,Exo可被HSF细胞摄取,miR-145过表达的ADSCs来源Exo能够明显抑制HSF细胞增殖(P<0.05),促进其凋亡(P<0.05),上调促凋亡蛋白cleavedcaspase-3和Bax的蛋白相对表达量(P<0.05),抑制抗凋亡蛋白Bcl-2及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ的蛋白相对表达量(P<0.05)。结论:脂肪干细胞来源的外泌体可通过传递miR-145抑制增生性瘢痕皮肤中成纤维细胞的增殖活性并促进其凋亡,其分子机制可能与上调cleaved-caspase-3和Bax的蛋白表达以及抑制Bcl-2、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ的蛋白表达有关。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 脂肪干细胞 外泌体 mir-145 成纤维细胞
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lncRNA SNHG1靶向miR-145-5p/PDCD4轴对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响
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作者 李红英 张会军 +2 位作者 王军 穆秀娥 李红方 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期904-909,916,共7页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因1(SNHG1)靶向miR-145-5p/程序性细胞死亡因子4(PDCD4)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(NC组)、H/R组、si-NC组、si-SNHG1组、mimic NC组、miR-14... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核内小RNA宿主基因1(SNHG1)靶向miR-145-5p/程序性细胞死亡因子4(PDCD4)轴对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(NC组)、H/R组、si-NC组、si-SNHG1组、mimic NC组、miR-145-5p mimic组、si-SNHG1+inhibitor NC组、si-SNHG1+miR-145-5p inhibitor组。除NC组外,其他组H9c2细胞均需转染对应物质后构建H/R模型。实时定量PCR(qRT-PCR)检测H9c2细胞中SNHG1、miR-145-5p表达;CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡;试剂盒检测H9c2细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量;Western blotting检测H9c2细胞中PDCD4、caspase 3、Bcl-2、Bax蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证SNHG1与miR-145-5p、miR-145-5p与PDCD4的关系。结果沉默SNHG1或过表达miR-145-5p可促进H/R诱导的H9c2细胞中miR-145-5p表达和细胞增殖,抑制PDCD4蛋白表达、细胞凋亡和氧化应激。miR-145-5p inhibitor减弱了沉默SNHG1对H/R诱导的H9c2细胞中miR-145-5p表达和细胞增殖的促进作用,以及对PDCD4蛋白表达、细胞凋亡、氧化应激的抑制作用。SNHG1靶向调控miR-145-5p/PDCD4轴。结论沉默SNHG1可能通过调控miR-145-5p/PDCD4轴抑制H/R诱导的H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 核内小RNA宿主基因1 mir-145-5p 程序性细胞死亡因子4 凋亡 心肌细胞
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miR-145-3p通过调控CaMkkβ/AMPK/CREB通路对MPP^(+)诱导PD细胞模型线粒体自噬的影响
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作者 文晓东 罗宁 +4 位作者 周欣梅 卢建政 曾振 张艺 王春玲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第11期1846-1853,共8页
目的探讨miR-145-3p对1-甲基-4苯基吡啶离子(MPP^(+))诱导的帕金森病(PD)细胞模型线粒体自噬的影响及其机制。方法将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)分为对照组、模型组、模拟物(mimics)组、钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶β(CaMkkβ)抑制剂(S... 目的探讨miR-145-3p对1-甲基-4苯基吡啶离子(MPP^(+))诱导的帕金森病(PD)细胞模型线粒体自噬的影响及其机制。方法将人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)分为对照组、模型组、模拟物(mimics)组、钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶β(CaMkkβ)抑制剂(STO-609)组、mimics+STO-609组、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)抑制剂(KG-501)组、mimics+KG-501组和STO-609+KG-501组。流式细胞术检测细胞凋亡,透射电镜观察自噬体结构,Western blot检测凋亡、自噬和CaMkkβ/腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/CREB通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组细胞凋亡率、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和微管相关蛋白轻链3-I(LC3-Ⅰ)蛋白表达水平均升高(P<0.01),自噬体结构减少,B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、自噬基因(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3-II(LC3-Ⅱ)、磷酸化钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶β(p-CaMkkβ)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CREB)蛋白水平均降低(P<0.01);与模型组相比,mimics组细胞凋亡率、Bax、Caspase-3和LC3-Ⅰ蛋白表达水平降低(P<0.05),自噬体结构增多,Bcl-2、Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-CaMkkβ、p-AMPK、p-CREB蛋白水平升高(P<0.05),STO-609组和KG-501组趋势相同均与mimics组相反;与mimics组相比,mimics+STO-609组和mimics+KG-501组细胞凋亡率、Bax、Caspase-3和LC3-Ⅰ蛋白表达水平升高(P<0.01),自噬体结构减少,Bcl-2、Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-CaMkkβ、p-AMPK、p-CREB蛋白水平降低(P<0.01);与STO-609组相比,STO-609+KG-501组细胞凋亡率、Bax、Caspase-3和LC3-Ⅰ蛋白表达水平升高(P<0.01),自噬体结构减少,Bcl-2、Beclin-1、LC3-Ⅱ、p-CaMkkβ、p-AMPK、p-CREB蛋白水平降低(P<0.05)。结论miR-145-3p能够抑制MPP^(+)诱导的PD细胞模型的凋亡,促进线粒体自噬,其机制可能与促进CaMkkβ/AMPK/CREB通路的激活有关。 展开更多
关键词 mir-145-3p CaMkkβ/AMPK/CREB通路 帕金森病 线粒体自噬 细胞凋亡
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百令胶囊上调miR-145-5p逆转TGF-β_(1)/Smad3通路机制初探
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作者 冯平 姬泽萱 +1 位作者 陈丽萍 王布 《中国药业》 CAS 2023年第16期34-40,共7页
目的探讨百令胶囊(BLC)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺损伤的改善作用,以及对香烟烟雾提取物(CSE)作用下人支气管上皮细胞BEAS-2B生长的影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,灌胃生理盐水2 mL),模型组(B组,灌胃生理盐水2... 目的探讨百令胶囊(BLC)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺损伤的改善作用,以及对香烟烟雾提取物(CSE)作用下人支气管上皮细胞BEAS-2B生长的影响。方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组(A组,灌胃生理盐水2 mL),模型组(B组,灌胃生理盐水2 mL),BLC组(C组,灌胃BLC 5.5 mg/kg),miR-145-5p inhibitorNC组(D组,灌胃BLC 5.5 mg/kg+尾静脉注射miR-145-5p inhibitorNC 6μL),miR-145-5p inhibitor组(E组,灌胃BLC 5.5 mg/kg+尾静脉注射miR-145-5p inhibitor 6μL),各12只。以香烟烟雾吸入法复制大鼠COPD模型。建模成功后灌胃相应药物或生理盐水(每日1次),尾静脉注射相应药物(每周1次),连续8周。以0(空白对照),3%,5%,10%,20%CSE,以及加5%,10%,20%,40%的BLC药物血清(BLC-S)孵育细胞48 h。检测大鼠潮气量(TV)、呼气峰流量(PEF)、分钟通气量(MV)、用力肺活量(FVC)和第0.3秒用力呼气容积(FEV_(0.3));观察肺组织病理形态;免疫组化法检测Smad3表达水平,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定转化生长因子(TGF)-β_(1)表达水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-145-5p mRNA表达水平。采用CCK-8法检测细胞活力。结果与B组比较,C组及D组大鼠TV,PEF,MV,FVC,FEV0.3均显著升高;与D组比较,E组大鼠上述指标均显著降低(P<0.05)。与B组比较,C组及D组大鼠肺组织病理形态显著改善,平均肺泡数显著增加,肺泡直径显著减小;与D组比较,E组大鼠肺组织病理形态未改善,且平均肺泡数显著减少,肺泡直径显著增长(P<0.05)。与5%CSE条件比较,5%CSE+20%BLC-S条件下的细胞活力显著增强(P<0.05)。与B组比较,C组及D组大鼠肺组织中Smad3,TGF-β_(1)的表达水平均显著降低,miR-145-5p mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与D组比较,E组大鼠肺组织中Smad3,TGF-β_(1)的表达水平均显著升高,miR-145-5p mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。与5%CSE条件比较,5%CSE+20%BLC-S条件下细胞Smad3和TGF-β_(1)的表达水平均显著降低,miR-145-5p mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与5%CSE+20%BLC-S+inhibitor NC条件比较,同水平inhibitor条件下细胞Smad3及TGF-β_(1)表达水平均显著升高(P<0.05)。结论BLC在体内和体外均显示出对香烟诱导COPD的保护作用,其机制可能与上调miR-145-5p水平逆转香烟暴露激活的TGF-β_(1)/Smad3信号通路有关。 展开更多
关键词 百令胶囊 mir-145-5p 慢性阻塞性肺疾病 TGF-β_(1)/Smad3信号通路 大鼠 人支气管上皮细胞BEAS-2B
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莪术醇通过调节lncRNA NR2F1-AS1/miR-145-5p表达抑制前列腺癌细胞增殖及转移
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作者 汪洋 杨君 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期745-749,共5页
目的:探讨莪术醇对前列腺癌细胞增殖及转移的影响及其可能作用机制。方法:不同浓度的莪术醇处理人前列腺癌细胞LNCap,采用脂质体转染法将si-NC、si-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCap细胞,将pcDNA、pcDNA-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCa... 目的:探讨莪术醇对前列腺癌细胞增殖及转移的影响及其可能作用机制。方法:不同浓度的莪术醇处理人前列腺癌细胞LNCap,采用脂质体转染法将si-NC、si-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCap细胞,将pcDNA、pcDNA-lncRNA NR2F1-AS1分别转染至LNCap细胞后加入100μg/ml莪术醇处理;CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭;qRT-PCR检测lncRNA NR2F1-AS1、miR-145-5p表达量;双荧光素酶报告实验验证lncRNA NR2F1-AS1与miR-145-5p的靶向关系。结果:莪术醇可降低细胞存活率,并可降低lncRNA NR2F1-AS1表达量,克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而miR-145-5p表达量升高(P<0.05);lncRNA NR2F1-AS1可靶向调控miR-145-5p的表达(P<0.05);转染si-lncRNA NR2F1-AS1后细胞存活率降低(P<0.05),miR-145-5p表达量升高(P<0.05),克隆形成数、迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05);转染pcDNA-lncRNA NR2F1-AS1可降低莪术醇对LNCap细胞增殖及转移的作用。结论:莪术醇可通过调节lncRNA NR2F1-AS1/miR-145-5p表达,抑制前列腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 莪术醇 前列腺癌 lncRNA NR2F1-AS1 mir-145-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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不同强度运动预防高脂膳食大鼠心肌脂质沉积效果及对miR-145-5p、KLF5、PPARα表达的影响
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作者 吴卫东 王伟欢 +1 位作者 刘帅 何玉秀 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期589-599,共11页
目的:观察12周中等强度持续运动(moderate-intensity continuous training,MICT)与高强度间歇运动(high intensity interval training,HIIT)预防高脂膳食大鼠心肌脂质沉积效果的异同,以及对miR-145-5p、KLF5、PPARα表达的影响,从而探... 目的:观察12周中等强度持续运动(moderate-intensity continuous training,MICT)与高强度间歇运动(high intensity interval training,HIIT)预防高脂膳食大鼠心肌脂质沉积效果的异同,以及对miR-145-5p、KLF5、PPARα表达的影响,从而探讨其可能机制。方法:5周龄雄性SD大鼠随机分为普通膳食安静组(C组)、高脂膳食安静组(F组)、高脂膳食MICT组(M组)、高脂膳食HIIT组(H组),每组8只。12周跑台训练干预结束后,超声心动图检测大鼠心脏结构与功能;光镜和透射电镜观察大鼠心肌脂质沉积;检测大鼠血清、心肌脂质含量;RT-PCR、Western Blot和免疫荧光双标记检测大鼠心肌miR-145-5p、KLF5、PPARα的表达情况。结果:(1)与C组比较,F组大鼠心肌结构、功能受损;心肌纤维松弛,脂质沉积增多;血清及心肌脂质含量增加(P<0.05);心肌组织miR-145-5P表达升高(P<0.05),KLF5、PPARαm RNA与蛋白表达水平降低(P<0.05);KLF5、PPARα阳性细胞数降低(P<0.01)。(2)与F组比较,M、H组大鼠心肌结构、功能均改善;心肌纤维紧密,脂质沉积减少;血清及心肌脂质含量减少(P<0.01);心肌组织miR-145-5P表达降低(P<0.05),KLF5、PPARαm RNA与蛋白表达水平增加(P<0.05);KLF5、PPARα阳性细胞数增加(P<0.01)。(3)与M组比较,H组大鼠心肌脂质沉积减少;血清HDL含量增加(P<0.01),心肌TG含量降低(P<0.05);KLF5、PPARα阳性细胞数增加(P<0.01)。结论:12周MICT与HIIT均能预防高脂膳食大鼠心肌脂质沉积,大鼠心肌miR-145-5p、KLF5、PPARα表达水平的变化可能是运动影响心肌脂质代谢的机制之一,HIIT预防效果较好,可能与该信号通路的活化程度有关。 展开更多
关键词 中等强度持续运动 高强度间歇运动 高脂膳食 心肌脂质沉积 mir-145-5p KLF5
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冠心病病人血清miR-34a、miR-145表达与冠状动脉病变程度的关系及相关机制研究 被引量：1
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作者 齐贵彬 高建步 +6 位作者 张明磊 张永杰 王星 彭小荷 董晓双 李京倡 刘琳 《中西医结合心脑血管病杂志》 2023年第7期1266-1270,共5页
目的:探讨冠心病病人中miR-34a、miR-145表达与冠状动脉病变程度的关系及相关机制。方法:选取2018年3月—2019年5月本院收治的冠心病病人60例作为冠心病组,健康志愿者60名作为对照组。对冠状动脉造影检查结果进行Gensini评分,根据分值... 目的:探讨冠心病病人中miR-34a、miR-145表达与冠状动脉病变程度的关系及相关机制。方法:选取2018年3月—2019年5月本院收治的冠心病病人60例作为冠心病组,健康志愿者60名作为对照组。对冠状动脉造影检查结果进行Gensini评分,根据分值差异将冠状动脉狭窄程度分为轻度组(<50分,29例)、中度组(50~90分,19例)、重度组(>90分,12例)。记录1年内心血管不良事件发生情况,并分为心血管不良事件组(13例)和非心血管不良事件组(47例)。纳入本研究后,采集次日清晨受试者外周静脉血4 mL,分离血浆,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测miR-34a、miR-145表达水平。常规培养人血管内皮细胞株,分为正常对照组、IL-6组、空载体转染组、miR-34a低表达组、miR-34a高表达组,检测沉默信息调节因子1(SIRT1)mRNA及蛋白表达水平。另将人血管内皮细胞株分为正常对照组、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组、空载体转染组、miR-145低表达组、miR-145高表达组,检测胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)mRNA及蛋白表达水平。结果:冠心病组miR-34a表达水平明显高于对照组,miR-145表达水平明显低于对照组(P<0.01)。重度组miR-34a表达水平明显高于中度组及轻度组,miR-145表达水平明显低于中度组及轻度组;中度组miR-34a表达水平明显高于轻度组,miR-145表达水平明显低于轻度组(P<0.05)。miR-34a表达水平与Gensini评分呈正相关,miR-145表达水平与Gensini评分呈负相关。冠心病病人中心血管不良事件组miR-34a表达水平明显高于非心血管不良事件组,miR-145表达水平明显低于非心血管不良事件组(P<0.01)。IL-6组、空载体转染组血管内皮细胞SIRT1 mRNA及蛋白表达水平明显低于正常对照组,miR-34a低表达组SIRT1 mRNA及蛋白表达水平明显高于IL-6组、空载体转染组,miR-34a高表达组SIRT1 mRNA及蛋白表达水平明显低于IL-6组、空载体转染组(P<0.05)。ox-LDL组、空载体转染组血管内皮细胞IGF-1R mRNA及蛋白表达水平明显高于正常对照组,miR-145低表达组IGF-1R mRNA及蛋白表达水平明显低于ox-LDL组、空载体转染组,miR-145高表达组IGF-1R mRNA及蛋白表达水平明显高于ox-LDL组、空载体转染组(P<0.05)。结论:miR-34a高表达可能通过降低内皮细胞中SIRT1表达水平,减弱了SIRT1炎症抑制作用,进而促进内皮细胞炎症反应,加重冠状动脉粥样硬化程度;miR-145低表达可能通过降低内皮细胞中IGF-1表达水平,减弱了IGF-1促进一氧化氮分泌的作用,加剧高脂性损伤对冠状动脉粥样硬化的影响。 展开更多
关键词 冠心病 冠状动脉粥样硬化 mir-34A mir-145 机制
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炭疽毒素受体2表达受miR-145-5p调控在胰腺癌的作用机制研究 被引量：1
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作者 马林 邓大炜 +4 位作者 兰川 刘胜 唐豪佑 黄孝彬 李建水 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期261-268,共8页
目的:探讨炭疽毒素受体2(anthrax toxin receptor 2,ANTXR2)在胰腺癌组织和细胞中的表达、临床意义和细胞功能,验证miR-145-5p在胰腺癌细胞中调控ANTXR2的作用机制。方法:分析GEO和TCGA数据库中胰腺癌的转录数据和临床数据。通过CCK-8... 目的:探讨炭疽毒素受体2(anthrax toxin receptor 2,ANTXR2)在胰腺癌组织和细胞中的表达、临床意义和细胞功能,验证miR-145-5p在胰腺癌细胞中调控ANTXR2的作用机制。方法:分析GEO和TCGA数据库中胰腺癌的转录数据和临床数据。通过CCK-8实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell实验进行细胞功能验证。采用miRNA靶点预测数据库反向预测可能通过ceRNA机制抑制ANTXR2表达的miRNA,并使用双荧光素酶报告实验进行验证。结果:ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中的表达均上调(均P<0.05),ANTXR2上调预示着原发肿瘤等级(P<0.05)、肿瘤细胞分化等级(P<0.05)和总体生存期(P<0.05,HR=1.72)均较差。ANTXR2可以促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭(均P<0.05)。ANTXR2是miR-145-5p下游的靶标(P<0.01),miR-145-5p可以通过抑制ANTXR2的表达抑制胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。结论:ANTXR2在胰腺癌组织和细胞中过表达,促进胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,且与患者预后有关。miR-145-5p通过调控ANTXR2的表达抑制其促癌作用。 展开更多
关键词 炭疽毒素受体2 mir-145-5p 增殖 迁移和侵袭 胰腺癌
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血清miR-17和miR-145的表达与心房颤动患者IL-6、TNF-α、TGF-β1、hs-CRP、VEGF水平的关系 被引量：1
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作者 范燕宾 陈丰毅 +2 位作者 李雪博 赵育洁 孙运 《河南医学研究》 CAS 2023年第7期1195-1199,共5页
目的探讨非瓣膜心房颤动患者血清miR-17、miR-145水平及其与白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的关系。方法选取2020年9月至2022年3月在郑... 目的探讨非瓣膜心房颤动患者血清miR-17、miR-145水平及其与白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的关系。方法选取2020年9月至2022年3月在郑州市心血管病医院就诊的106例心房颤动患者作为试验组。选取同期在医院体检的60例健康志愿者作为对照组。采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组受试者血清miR-17、miR-145水平。采用酶联免疫吸附测定法检测血清IL-6、TNF-α、TGF-β1、hs-CRP和VEGF水平。分析心房颤动患者miR-17和miR-145水平与血清IL-6、TNF-α、TGF-β1、hs-CRP、VEGF的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-17、miR-145在心房颤动中的诊断价值。结果试验组患者血清miRNA-17水平高于对照组,miRNA-145水平低于对照组(P<0.05),IL-6、TNF-α、TGF-β1、hs-CRP、VEGF水平高于对照组(P<0.05)。患者血清miR-17水平与IL-6、TNF-α、TGF-β1、hs-CRP、VEGF水平呈正相关(P<0.05)。血清miR-145水平与IL-6、TNF-α、TGF-β1、hs-CRP、VEGF水平呈负相关(P<0.05)。血清miR-17、miRNA-145在心房颤动诊断中均具有较好的价值(P<0.05)。结论非瓣膜心房颤动患者血清miRNA-17表达上调,miRNA-145表达下调,与心房颤动的发生密切相关,对心房颤动有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 非瓣膜心房颤动 mir-17 mir-145 转化生长因-β1 血管内皮生长因子 炎症因子
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miR-145-5p靶向IGF 1R介导AKT通路抑制猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化
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作者 员佳乐 刘畅 +10 位作者 黄晓宇 刘巧霞 史明月 李文霞 牛瑾 王首元 高鹏飞 郭晓红 李步高 路畅 曹果清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1893-1904,共12页
旨在探讨miR-145-5p对猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。本研究采用qRT-PCR检测miR-145-5p的组织表达谱和发育性表达规律;选用1 d晋汾白猪趾长伸肌进行骨骼肌卫星细胞的分离与培养,分别转染miR-145-5p模拟物(mimics)及其对照组(mimics... 旨在探讨miR-145-5p对猪骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。本研究采用qRT-PCR检测miR-145-5p的组织表达谱和发育性表达规律;选用1 d晋汾白猪趾长伸肌进行骨骼肌卫星细胞的分离与培养,分别转染miR-145-5p模拟物(mimics)及其对照组(mimics NC),miR-145-5p抑制剂(inhibitor)及其对照组(inhibitor NC),每个处理3个重复,利用qRT-PCR、EdU和CCK-8方法检测增殖相关基因表达量、EdU阳性细胞数和细胞增殖活性;待猪骨骼肌卫星细胞分化后利用qRT-PCR、Western blot和免疫荧光染色方法探究分化相关基因mRNA和蛋白水平及肌管形成情况;采用双荧光素酶试验、qRT-PCR和Western blot探究miR-145-5p对下游IGF 1R和AKT通路的影响。结果显示,miR-145-5p基因在肝和肺中表达量最高,心和皮下脂肪中次之(P<0.05);随着日龄的增加,miR-145-5p在猪背最长肌中的表达量持续升高(P<0.05)。在猪骨骼肌卫星细胞体外培养过程中,转染miR-145-5p mimics极显著下调Ki 67和CDK 1的表达(P<0.01),显著下调PCNA和CDK 4的表达(P<0.05),阳性细胞指数极显著降低(P<0.01),细胞活性显著低于对照组(P<0.05)。在分化方面,过表达miR-145-5p极显著下调MyOD、MyOG和Myf 5的表达量(P<0.01),MyOD蛋白水平显著降低(P<0.05),MyHC阳性肌管面积少于对照组;转染miR-145-5p inhibitor则出现相反的结果。过表达miR-145-5p显著降低IGF1R mRNA和蛋白的相对表达量(P<0.05),显著降低AKT蛋白的磷酸化水平;而干扰miR-145-5p能极显著上调IGF1R mRNA和蛋白的相对表达量(P<0.01),并能挽救转染si-IGF1R对p-AKT蛋白的抑制作用(P<0.01)。本研究结果表明,miR-145-5p通过负调控IGF1R mRNA和蛋白的相对表达水平,并影响AKT通路,抑制猪骨骼肌卫星细胞的增殖和分化,进而参与骨骼肌的发育过程。研究结果丰富了猪肌肉生长发育的分子网络,并为肌肉性状的分子育种提供了靶标。 展开更多
关键词 mir-145-5p IGF 1R AKT通路 增殖和分化 骨骼肌卫星细胞
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