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蒲公英提取物对MKN-45胃癌细胞株P53和Ki67表达的影响 被引量：8
1
作者 詹锋 刘晓颖 +2 位作者 荣卡彬 王昌俊 杨素清 《现代医院》 2012年第5期20-21,共2页
目的检测蒲公英提取物对MKN45胃癌细胞的P53、Ki67两种蛋白的表达的影响,探求中草药蒲公英抗癌作用的依据。方法以小鼠血清药物学方法配制蒲公英提取物药液,对MKN45胃癌细胞进行培养传代,取处于对数生长期的同一代细胞加入药液血清,应... 目的检测蒲公英提取物对MKN45胃癌细胞的P53、Ki67两种蛋白的表达的影响,探求中草药蒲公英抗癌作用的依据。方法以小鼠血清药物学方法配制蒲公英提取物药液,对MKN45胃癌细胞进行培养传代,取处于对数生长期的同一代细胞加入药液血清,应用免疫组化(S-P法)检测p53、Ki67的表达状况。结果 4组中p53的表达分别为100%(5/5)、60%(3/5)、80%(4/5)和60%(3/5),所有含药组合并后其P53阳性表达率与对照组之间具有显著性差异(p<0.05),各含药组的Ki67阳性表达率均高于对照组,分别为87%、96%、97%、92%,但目前尚未发现它们之间具有显著性差异(p>0.05)。结论蒲公英可能有降低胃癌细胞p53的阳性表达的作用。 展开更多
关键词 蒲公英提取物 mkn-45胃癌细胞 P53表达 KI67表达
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PPARγ激动剂对MKN-45胃癌细胞系增殖及MMP-7基因表达的影响
2
作者 江洁 刘顺英 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2005年第4期247-249,共3页
目的:研究过氧化物酶增殖因子激活受体γ(peroxisomeproliferatorsactivatedreceptorγ,PPARγ)激活剂罗格列酮对人胃癌细胞系MKN45增殖和MMP7基因表达的影响。方法:不同浓度罗格列酮干预细胞后,用台盼蓝拒染法检测胃癌细胞株增殖活性,... 目的:研究过氧化物酶增殖因子激活受体γ(peroxisomeproliferatorsactivatedreceptorγ,PPARγ)激活剂罗格列酮对人胃癌细胞系MKN45增殖和MMP7基因表达的影响。方法:不同浓度罗格列酮干预细胞后,用台盼蓝拒染法检测胃癌细胞株增殖活性,用RTPCR法检测MMP7基因表达情况。结果:罗格列酮作用24h明显降低MKN45细胞的存活率,与对照组比较有显著差异(P<0.05),细胞存活率随着药物浓度增加而降低;MMP7基因表达随着药物浓度增加而下降。结论:在胃癌细胞株MKN45中,罗格列酮与PPARγ作用而激活下级信号传导,抑制胃癌细胞的增殖,且下调MMP7基因的表达。 展开更多
关键词 噻唑类 过氧化物酶类 细胞系 肿瘤 mkn-45细胞 MMP-7基因
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MAPK通路在红托竹荪多糖诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡中的作用机制研究 被引量：1
3
作者 杨茜 卢海洋 +1 位作者 胡露 王忠元 《中国医院用药评价与分析》 2023年第10期1185-1189,共5页
目的:研究红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响,并基于丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组,红托竹荪多糖低、中及高剂量组,采用终浓度分别为0、4、6及8 mg/mL的... 目的:研究红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响,并基于丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组,红托竹荪多糖低、中及高剂量组,采用终浓度分别为0、4、6及8 mg/mL的红托竹荪多糖作用于细胞48 h后,采用细胞计数法检测红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响;采用倒置显微镜观察不同浓度的红托竹荪多糖作用于人胃癌MKN-45细胞48 h后细胞形态学的变化。设立实验组的红托竹荪多糖终浓度为8 mg/mL,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染色流式细胞技术检测细胞的凋亡率;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白质印迹法检测红托竹荪多糖作用胃癌细胞后p38蛋白激酶(p38)、磷酸化p38蛋白激酶(p-p38)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、C-JUN氨基末端激酶(JNK)、磷酸化C-JUN氨基末端激酶(p-JNK)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)和活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白的表达,即与3-磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH)灰度值比值。结果:作用48 h后,不同浓度的红托竹荪多糖(4、6及8 mg/mL)对人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制率分别为(8.27±5.99)%、(21.83±5.77)%和(56.95±5.21)%;在检测的浓度范围下,随着浓度的升高,红托竹荪多糖对MKN-45细胞增殖的抑制率逐渐升高。倒置显微镜下显示,经8 mg/mL的红托竹荪多糖作用48 h后,MKN-45细胞密度与对照组相比明显减少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,实验组人胃癌MKN-45细胞凋亡率显著升高(P<0.05);细胞周期结果显示,实验组G_(1)期细胞比例明显减少(P<0.05),G_(2)期细胞比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05);蛋白质印迹法结果显示,与对照组相比,实验组MKN-45细胞中cleaved Caspase-3的表达有升高趋势(P<0.05),Bcl-2的表达有降低趋势(P<0.05),p-P38/P38比值、p-ERK/ERK比值与p-JNK/JNK比值均低于对照组(P<0.05),上述差异均有统计学意义。结论:红托竹荪多糖在体外能抑制人胃癌MKN-45细胞增殖并诱导细胞凋亡,使肿瘤细胞阻滞在G_(2)/M期,其作用可能通过调控MAPK信号通路实现。 展开更多
关键词 竹荪多糖 人胃癌mkn-45细胞 细胞凋亡 细胞周期 MAPK信号通路 B淋巴细胞瘤-2蛋白 半胱氨酸蛋白酶-3
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密点麻蜥调控SLC7A11/GPX4通路诱导胃癌MKN45细胞铁死亡的作用及机制
4
作者 程翻娥 李铮 +2 位作者 刘彩月 师小茜 李卫强 《中药材》 CAS 北大核心 2024年第1期196-201,共6页
目的:基于SLC7A11/GPX4信号通路探讨密点麻蜥对人胃癌MKN45细胞发生铁死亡的影响。方法:选择SD大鼠制备含药血清,将MKN45细胞随机分为空白对照组(10%空白血清)、5-FU含药血清(10%)阳性对照组、密点麻蜥含药血清低(5%)、中(10%)、高(20%... 目的:基于SLC7A11/GPX4信号通路探讨密点麻蜥对人胃癌MKN45细胞发生铁死亡的影响。方法:选择SD大鼠制备含药血清,将MKN45细胞随机分为空白对照组(10%空白血清)、5-FU含药血清(10%)阳性对照组、密点麻蜥含药血清低(5%)、中(10%)、高(20%)浓度组。CCK-8法检测MKN45细胞的存活率;Transwell法检测MKN45细胞的迁移及侵袭能力;激光共聚焦检测细胞内二价铁离子(Fe^(2+))水平;试剂盒检测细胞内LPO水平;流式细胞术检测细胞内ROS水平;qPCR法检测密点麻蜥对MKN45细胞中SLC7A11、GPX4、P53 mRNA表达的影响;Western Blotting检测密点麻蜥对MKN45细胞中SLC7A11、GPX4、P53蛋白表达的影响。结果:与空白对照组比较,密点麻蜥含药血清中、高浓度组MKN45细胞存活率、迁移及侵袭能力显著降低,Fe^(2+)、ROS水平显著升高,P53、SLC7A11、GPX4 mRNA及蛋白表达显著降低,高浓度组LPO水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:密点麻蜥可能通过抑制SLC7A11/GPX4信号通路,同时促进细胞内Fe~(2+)、LPO的积累,从而诱导MKN45细胞发生铁死亡,抑制其增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 密点麻蜥 胃癌 铁死亡 SLC7A11/GPX4通路 MKN45细胞
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藤梨根提取物对人胃癌MKN-45细胞增殖及凋亡的影响 被引量：28
5
作者 附舰 陈光伟 +3 位作者 刘理礼 闵婕 王宏 张贺龙 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第1期20-22,共3页
目的:探讨太白山藤梨根提取物(Radix Actinidiae extractive,RAE)在体外对胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响。方法:用0.01-100μg/ml浓度范围内的RAE和胃癌MKN-45细胞共培养24、48、72、96小时,采用MTT法检测RAE对MKN-45细胞增殖的影响;... 目的:探讨太白山藤梨根提取物(Radix Actinidiae extractive,RAE)在体外对胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响。方法:用0.01-100μg/ml浓度范围内的RAE和胃癌MKN-45细胞共培养24、48、72、96小时,采用MTT法检测RAE对MKN-45细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测其对MKN-45细胞凋亡及细胞周期分布的影响;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:RAE在体外能够显著抑制胃癌MKN-45细胞的增殖,且呈现浓度和时间依赖性;RAE对胃癌细胞的作用表现为周期特异性,使细胞阻滞于G0/G1期,进一步诱导细胞凋亡。对照组凋亡率为0.53%,1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml浓度的RAE干预胃癌细胞48小时后均出现凋亡峰,细胞凋亡率分别为3.27%、8.97%、12.6%。DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,不同浓度RAE处理的细胞样品中均可看到梯形凋亡条带,并呈现浓度依赖性。结论:RAE在体外对人胃癌MKN-45细胞有显著的抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡作用,其作用机制可能是使胃癌细胞周期阻滞于G0/G1期。 展开更多
关键词 藤梨根提取物 mkn-45胃癌细胞 细胞周期 细胞凋亡
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胃泌素调控Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响 被引量：1
6
作者 崔光锐 杨维忠 +1 位作者 邱坚 林文会 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期1193-1197,共5页
目的 研究胃泌素调控Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法 传代培养人胃癌细胞MKN45,采用噻唑蓝(MMT)法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,流式细胞仪检测细胞凋亡能力... 目的 研究胃泌素调控Wnt/β-catenin信号通路对胃癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法 传代培养人胃癌细胞MKN45,采用噻唑蓝(MMT)法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力,流式细胞仪检测细胞凋亡能力,Western印迹检测相关通路蛋白表达水平。结果 与对照组相比,胃泌素组细胞增殖能力、人胃癌细胞MKN45迁移能力、细胞侵袭能力及c-myc、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平明显升高,细胞凋亡能力明显降低(P<0.05);丙谷胺组细胞增殖能力、人胃癌细胞MKN45迁移能力、细胞侵袭能力及c-myc、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平明显降低,细胞凋亡能力明显升高(P<0.05);胃泌素联合丙谷胺组细胞增殖能力、人胃癌细胞MKN45迁移能力、细胞侵袭能力及c-myc、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平明显升高,细胞的凋亡能力明显降低(P<0.05);与胃泌素组相比,丙谷胺组细胞增殖能力、人胃癌细胞MKN45迁移能力、细胞侵袭能力及c-myc、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平明显降低,细胞凋亡能力明显升高(P<0.05);胃泌素联合丙谷胺组细胞增殖能力、人胃癌细胞MKN45迁移能力、细胞侵袭能力及c-myc、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平明显降低,细胞凋亡能力明显升高(P<0.05);与丙谷胺组相比,胃泌素联合丙谷胺组细胞增殖能力、人胃癌细胞MKN45迁移能力、细胞侵袭能力及c-myc、Wnt3a、β-catenin蛋白表达水平明显升高,细胞凋亡能力明显降低(P<0.05)。结论 胃泌素通过Wnt/β-catenin信号通路上调c-myc、Wnt3a、β-catenin蛋白的表达水平促进胃癌细胞增殖、侵袭及转移能力。 展开更多
关键词 胃泌素 WNT/Β-CATENIN信号通路 人胃癌细胞MKN45 增殖 侵袭 转移
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天花粉蛋白诱导胃癌细胞MKN-45凋亡的研究 被引量：22
7
作者 涂水平 江石湖 +5 位作者 乔敏敏 王立夫 张曙 袁耀宗 吴云林 吴裕忻 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1105-1108,共4页
目的 :研究天花粉蛋白（ trichosanthin,TCS）对胃癌细胞的作用，探讨其治疗胃癌的可能作用机制。方法 :采用生长曲线、集落形成实验、 MTT法、电镜、 TUNEL染色和流式细胞仪等技术，研究 TCS对胃癌细胞 MKN－ 45的增殖抑制和诱导凋亡... 目的 :研究天花粉蛋白（ trichosanthin,TCS）对胃癌细胞的作用，探讨其治疗胃癌的可能作用机制。方法 :采用生长曲线、集落形成实验、 MTT法、电镜、 TUNEL染色和流式细胞仪等技术，研究 TCS对胃癌细胞 MKN－ 45的增殖抑制和诱导凋亡作用。结果： TCS能够明显抑制胃癌细胞 MKN－ 45的生长和集落形成， 1μ g/ml和 0.1μ g/ml TCS作用 MKN－ 45后，细胞集落形成率分别为 (6.63± 1.31)％和 (14.68± 1.27)％，明显低于对照组的 (23.67± 2.76)％ 展开更多
关键词 天花粉蛋白 细胞凋亡 胃癌细胞 mkn-45
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金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞凋亡的影响 被引量：13
8
作者 余志红 魏品康 +4 位作者 许玲 秦志丰 施俊 肖艳 林晖明 《中西医结合学报》 CAS 2006年第3期275-280,共6页
目的：评价金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植入胃癌MKN-45细胞的抑制作用.方法：50只裸鼠建立原位移植人胃癌MKN-45细胞模型,随机分为模型组,金龙蛇颗粒高、中、低剂量组和5-FU干预组.各组裸鼠予以相应药物实施干预.观察各组荷瘤裸鼠一般情况,... 目的：评价金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植入胃癌MKN-45细胞的抑制作用.方法：50只裸鼠建立原位移植人胃癌MKN-45细胞模型,随机分为模型组,金龙蛇颗粒高、中、低剂量组和5-FU干预组.各组裸鼠予以相应药物实施干预.观察各组荷瘤裸鼠一般情况,肿瘤生长情况及抑瘤率.流式细胞仪检测肿瘤细胞周期分布及细胞凋亡情况.采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶（Annexin V-fluorescein isothiocyanate/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI）双标记染色法鉴别早期凋亡细胞、晚期凋亡细胞和坏死细胞.电镜下观察肿瘤细胞的超微结构变化.结果：金龙蛇颗粒高、中、低剂量组的抑瘤率分别为68.13%、55.94%和50.31%,呈剂量依赖效应,与5-FU干预组抑瘤率比较,差异无统计学意义.金龙蛇颗粒各剂量组肿瘤细胞凋亡率为22.81%～38.54%,亦呈剂量依赖效应,且肿瘤细胞主要被阻滞于G0/G1期.AnnexinV-FITC/PI双标记染色结果显示,金龙蛇颗粒各剂量组以早期凋亡细胞居多,5-FU干预组则以晚期凋亡细胞和坏死细胞居多.结论：金龙蛇颗粒对裸鼠原位移植人胃癌MKN-45细胞具有较好的抑制作用,促进MKN-45细胞凋亡可能是其抗肿瘤治疗的主要作用机制之一. 展开更多
关键词 金龙蛇颗粒 胃肿瘤 原位移植 细胞周期 细胞凋亡 中医药 裸鼠 人胃癌细胞系mkn-45
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不同浓度苦参碱、大蒜素对人胃癌细胞株MKN-45杀伤作用的实验研究 被引量：10
9
作者 佘玉清 陈昱倩 +3 位作者 颜延凤 鞠娟 李芳 韩康生 《江苏中医药》 CAS 2014年第11期82-83,共2页
目的:观察不同浓度苦参碱、大蒜素对人胃癌细胞株MKN-45体外生长的影响。方法:体外培养人胃癌细胞株MKN-45,分别用不同浓度的苦参碱、大蒜素处理,采用CCK-8法检测MKN-45细胞的生长情况。结果:不同浓度的苦参碱及大蒜素作用于MKN-45细胞... 目的:观察不同浓度苦参碱、大蒜素对人胃癌细胞株MKN-45体外生长的影响。方法:体外培养人胃癌细胞株MKN-45,分别用不同浓度的苦参碱、大蒜素处理,采用CCK-8法检测MKN-45细胞的生长情况。结果:不同浓度的苦参碱及大蒜素作用于MKN-45细胞后,对其增殖均表现出了明显的抑制作用,并表现出浓度与作用时长的依赖性,最高抑制值分别达到了96.82%和93.44%。结论:苦参碱及大蒜素可以抑制胃癌MKN-45细胞的增殖,且与作用时间、剂量呈正相关。 展开更多
关键词 苦参碱 大蒜素 胃癌mkn-45细胞 实验研究
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Smac基因过表达对胃癌细胞株MKN-45化疗敏感性的影响 被引量：11
10
作者 郑丽端 童强松 +2 位作者 陶凯雄 汪良 张波 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期361-366,共6页
背景与目的:细胞凋亡异常是肿瘤细胞产生耐药性的关键因素之一。Smac(secondmitochondria-derivedactivatorofcaspases,Smac或称DIABLO)是新近发现的一种凋亡调节基因,在介导化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡中起重要作用。本研究旨在观察Smac... 背景与目的:细胞凋亡异常是肿瘤细胞产生耐药性的关键因素之一。Smac(secondmitochondria-derivedactivatorofcaspases,Smac或称DIABLO)是新近发现的一种凋亡调节基因,在介导化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡中起重要作用。本研究旨在观察Smac基因过表达对胃癌细胞株化疗敏感性的影响。方法:采用脂质体GeneSHUTTLE-40介导的方法,将Smac基因转入胃癌细胞MKN-45,RT-PCR和Westernblot法检测癌细胞中Smac的表达;选用顺铂(1、5、10μg/ml)、丝裂霉素(0.1、1、10μg/ml)和姜黄素(10、20、40μmol/L)分别处理转染前后的胃癌细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性,倒置显微镜下观察细胞形态变化并摄影,AnnexinV-FITC和碘化丙啶双染色,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:同未转染对照组比较,转染外源性Smac基因后MKN-45细胞SmacmRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.01);各浓度顺铂、丝裂霉素和姜黄素处理24h后,细胞生长抑制率分别增加10.10%～23.80%(P<0.01)、10.01%～15.86%(P<0.01)、11.28%～22.12%(P<0.01),细胞明显变圆、折光增强、漂浮细胞增多,细胞凋亡率分别增加6.7%～20.2%(P<0.01)、5.4%～13.2%(P<0.01)、10.6%～20.1%(P<0.01)。结论:转染外源性Smac基因并使其在胃癌细胞中过表达。 展开更多
关键词 SMAC基因 基因表达 胃癌 癌细胞株mkn-45 化疗 肿瘤细胞
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参芪抑瘤方药物血清对胃癌MKN-45细胞周期阻滞及抗侵袭转移的影响 被引量：11
11
作者 马春林 吴红彦 +2 位作者 李海龙 陈杰 张宣 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2016年第4期64-67,共4页
目的 探讨不同浓度参芪抑瘤方药物血清对胃癌MKN-45 细胞周期阻滞及抗侵袭转移作用的相关机制.方法 60 只SPF 级Wistar 大鼠,随机分为对照组和参芪抑瘤方低、中、高剂量组,每组15 只.参芪抑瘤方低、中、高剂量组分别给予0.25、0.50、1.0... 目的 探讨不同浓度参芪抑瘤方药物血清对胃癌MKN-45 细胞周期阻滞及抗侵袭转移作用的相关机制.方法 60 只SPF 级Wistar 大鼠,随机分为对照组和参芪抑瘤方低、中、高剂量组,每组15 只.参芪抑瘤方低、中、高剂量组分别给予0.25、0.50、1.00 g 原药材/mL 药液灌胃,空白组给予等量饮用水灌胃,每日2 次,连续7 d,末次灌胃2 h 后取血,分离血清.MKN-45 细胞经不同浓度药物血清处理后,流式细胞术检测细胞周期,免疫组化检测COX-2、PTEN 蛋白表达.结果 药物血清干预后细胞G0～G1 期比例增加,S 期比例减少;药物血清可降低MKN-45 细胞COX-2 蛋白阳性表达率,升高PTEN 蛋白阳性表达率（P〈0.05）.结论 参芪抑瘤方药物血清阻滞细胞周期及抗侵袭转移作用可能与影响COX-2、PTEN 蛋白表达有关. 展开更多
关键词 参芪抑瘤方 胃癌 mkn-45细胞 细胞周期 COX-2蛋白 PTEN蛋白 大鼠
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丹参酮IIa诱导人胃癌细胞MKN-45凋亡及对端粒酶活性的影响 被引量：8
12
作者 王亚明 张桂东 +2 位作者 尹清臣 朱建平 王静 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期43-47,50,共5页
目的考察丹参酮IIa(tanshinone IIa,Tan IIa)诱导人胃癌细胞的凋亡作用,以及对端粒酶活性的影响。方法不同浓度TanⅡa处理人胃癌细胞株MKN-45后,显微镜下观察胃癌细胞形态变化,应用Annexin V/PI双重染色方法检测细胞凋亡比例,并用凋亡... 目的考察丹参酮IIa(tanshinone IIa,Tan IIa)诱导人胃癌细胞的凋亡作用,以及对端粒酶活性的影响。方法不同浓度TanⅡa处理人胃癌细胞株MKN-45后,显微镜下观察胃癌细胞形态变化,应用Annexin V/PI双重染色方法检测细胞凋亡比例,并用凋亡相关抗体检测通路情况,用RT-PCR以及TRAP-PCR法分别对胃癌细胞端粒酶基因hTert和端粒酶活性进行检测。结果TanⅡa处理胃癌细胞后,DAPI染色显示,细胞核内染色质聚缩,细胞核碎裂并有凋亡小体产生,提示TanⅡa诱导胃癌MKN-45细胞凋亡。Annexin V/PI双染结果显示,凋亡比例随化合物浓度提高而增加,40μM下晚期凋亡比例达到(45.02±6.48)%。凋亡相关蛋白的检测显示,PARP和Caspase-3活化,细胞色素C水平增加,而Caspase-8则无显著变化。同时TRAP-PCR结果显示,Tan IIa在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调,并在40μM下显著抑制hTert基因的表达。结论 TanⅡa对人胃癌细胞具有明显诱导细胞凋亡作用,且可能通过激活内源性途径引起细胞凋亡。TanⅡa还可抑制端粒酶活性和hTERT基因表达,这些可能是其发挥抗癌作用的重要机制之一。 展开更多
关键词 丹参酮Ⅱa 胃癌 mkn-45 凋亡 端粒酶
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天花粉蛋白诱导胃癌细胞MKN-45凋亡中P53、Bcl-2、c-myc蛋白表达变化 被引量：12
13
作者 孙璟 涂水平 +1 位作者 吴裕 江石湖 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期292-294,F002,共4页
目的　选用对天花粉蛋白敏感的胃癌细胞株MKN 45 ,研究天花粉蛋白抗肿瘤机制。方法　免疫组化法测定凋亡相关基因 (P5 3、Bcl 2、c myc)的表达变化。 结果　胃癌细胞MKN 45经天花粉蛋白 (1μg/ml,2 4、48h)处理后 ,凋亡相关基因P5 3、Bc... 目的　选用对天花粉蛋白敏感的胃癌细胞株MKN 45 ,研究天花粉蛋白抗肿瘤机制。方法　免疫组化法测定凋亡相关基因 (P5 3、Bcl 2、c myc)的表达变化。 结果　胃癌细胞MKN 45经天花粉蛋白 (1μg/ml,2 4、48h)处理后 ,凋亡相关基因P5 3、Bcl 2、c myc表达未出现显著性改变。经 5 μg/ml的天花粉蛋白处理 2 4h后 ,得到相同结论。但当MKN 45细胞经 5 μg/ml的天花粉蛋白处理 48h后 ,发现野生型P5 3蛋白表达增加 ,而Bcl 2、c myc蛋白表达未出现显著性改变。 结论　天花粉蛋白可诱导MKN 45细胞凋亡 ,可能与上调野生型P5 3基因的表达有关。 展开更多
关键词 天花粉蛋白 细胞凋亡 胃癌细胞 P53 Bcl-2 C-MYC mkn-45
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过表达miR-26b抑制MKN-45人胃癌细胞的增殖 被引量：4
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作者 张向前 张敏 +6 位作者 张静 王艳梅 虎小毅 孙宏飞 童东东 熊晓蕃 赵正豪 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1078-1082,共5页
目的构建miR-26b过表达载体,观察其对MKN-45人胃癌细胞增殖的影响。方法合成miR-26b DNA寡聚核苷酸单链,经退火形成双链;用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ对pc DNATM6.2-GW-miR真核表达载体进行双酶切(大片段),纯化后与之前退火形成的DNA... 目的构建miR-26b过表达载体,观察其对MKN-45人胃癌细胞增殖的影响。方法合成miR-26b DNA寡聚核苷酸单链,经退火形成双链;用限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ对pc DNATM6.2-GW-miR真核表达载体进行双酶切(大片段),纯化后与之前退火形成的DNA双链连接,转化至大肠杆菌感受态细胞DH5α,扩增后提取质粒,经DNA测序和BLAST比对,验证其是否构建成功;将成功构建的pc DNATM6.2-GW-miR-26b载体瞬时转染MKN-45人胃癌细胞,采用实时定量PCR检测miR-26b的表达水平,Western blot法检测细胞分裂周期蛋白6(CDC6)蛋白,MTT法检测细胞增殖的变化。结果通过DNA测序BLAST比对结果显示成功构建了miR-26b的真核表达载体;瞬时转染MKN-45细胞后,实时定量PCR结果显示miR-26b的表达水平显著增加;Western blot结果表明过表达miR-26b明显抑制CDC6蛋白的表达,MTT法显示过表达miR-26b能显著抑制MKN-45细胞的增殖。结论过表达miR-26b可抑制MKN-45人胃癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 miR-26b 真核表达载体 胃癌 mkn-45细胞 细胞增殖
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人参皂甙Rg3刺激淋巴细胞CD4上调以及对胃癌细胞MKN-45的杀伤作用 被引量：9
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作者 胡银英 郭江梅 +5 位作者 黄艳琴 袁芳 戴志芳 袁佳蕾 杨淑华 袁铿 《实验与检验医学》 CAS 2011年第1期24-26,64,共4页
目的探讨人参皂甙Rg3对淋巴细胞的免疫刺激作用及其对胃癌细胞MKN-45的影响。方法采用梯度密度分离法分离正常人淋巴细胞,经人参皂甙Rg3刺激后流式细胞术检测人参皂甙Rg3对正常人淋巴细胞CD4表达的影响;用MTT法测定人参皂甙Rg3对MKN-45... 目的探讨人参皂甙Rg3对淋巴细胞的免疫刺激作用及其对胃癌细胞MKN-45的影响。方法采用梯度密度分离法分离正常人淋巴细胞,经人参皂甙Rg3刺激后流式细胞术检测人参皂甙Rg3对正常人淋巴细胞CD4表达的影响;用MTT法测定人参皂甙Rg3对MKN-45抑制作用;HE染色法观察人参皂甙Rg3诱导MKN-45的凋亡作用。结果人参皂甙Rg3促进正常人淋巴细胞CD4表达明显高于正常对照组(P<0.05);人参皂甙Rg3对MKN-45抑制率、凋亡率与正常对照组比较有显著性差异(P<0.05)。结论人参皂甙Rg3具有刺激淋巴细胞CD4上调的作用以及抑制MKN-45细胞生长的作用。 展开更多
关键词 人参皂甙RG3 胃癌细胞mkn-45
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5-氟尿嘧啶气雾对人胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡及周期的影响 被引量：4
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作者 林填 余江 +3 位作者 魏志刚 胡彦锋 王亚楠 李国新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1066-1068,共3页
目的通过体外模拟5-氟尿嘧啶(5-Fu)腹腔气雾化疗环境,评价5-Fu雾化对人胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡及周期的影响。方法运用自主研发的气雾化疗仪将5-Fu雾化,体外模拟腹腔气雾化疗环境,对胃癌细胞进行处理,维持气雾环境压力为8mmHg,作用时... 目的通过体外模拟5-氟尿嘧啶(5-Fu)腹腔气雾化疗环境,评价5-Fu雾化对人胃癌细胞MKN-45增殖、凋亡及周期的影响。方法运用自主研发的气雾化疗仪将5-Fu雾化,体外模拟腹腔气雾化疗环境,对胃癌细胞进行处理,维持气雾环境压力为8mmHg,作用时间为30min,并设生理盐水雾化作为对照,处理后用MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果 MTT结果显示,5-Fu气雾化疗组杀伤率显著高于生理盐水组[(31.13±3.51)%比(4.65±1.99)%,P<0.001];流式细胞结果显示,与生理盐水组相比,5-Fu气雾化疗组细胞凋亡率升高[(12.00±0.92)%比(2.65±0.52)%,P<0.001)],G1期细胞增多[(51.83±1.95)%比(36.41±2.33)%,P<0.001]、S期细胞减少[(16.72±2.36)%比(45.20±3.27)%,P<0.001],差异均有统计学意义。结论 5-Fu气雾能有效抑制胃癌细胞的增殖并诱导凋亡,使细胞阻滞于G1期,为气雾化疗的临床应用提供实验依据。 展开更多
关键词 5-氟尿嘧啶 腹腔气雾化疗 胃癌细胞 mkn-45 凋亡
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E2F-1基因真核表达载体的构建及其对胃癌细胞株MKN-45增殖的影响 被引量：5
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作者 王长青 肖强 +3 位作者 李雷 谢玉波 谭宁 宫志伟 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1064-1068,共5页
背景与目的:E2F-1基因在多种肿瘤细胞中过表达,并表现出抑制或促进肿瘤细胞增殖的不同特性。本研究通过构建E2F-1基因真核表达载体,分析E2F-1过表达对胃腺癌细胞株MKN-45的影响。方法:巢式聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)... 背景与目的:E2F-1基因在多种肿瘤细胞中过表达,并表现出抑制或促进肿瘤细胞增殖的不同特性。本研究通过构建E2F-1基因真核表达载体,分析E2F-1过表达对胃腺癌细胞株MKN-45的影响。方法:巢式聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增E2F-1基因片段,用pCMV-HA载体构建真核重组质粒,转染MKN-45细胞(转染COS-7细胞用以鉴定所构建的载体)。Western blot检测转染情况,并通过克隆形成实验、MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期,观察E2F-1过表达对MKN-45细胞的影响。结果:pCMV-E2F1-HA重组质粒成功转染MKN-45细胞。转染pCMV-E2F1-HA的MKN-45细胞形成的克隆数为4.7±1.8,明显少于转染空载体组的30.2±6.7(P<0.01)。转染pCMV-E2F1-HA的MKN-45细胞增殖随时间而减慢,第5、6、7天的细胞增殖率分别为73.5%、63.5%和56.1%,明显低于转染空载体组(P<0.01)。与转染空载体组相比,表达E2F-1基因的MKN-45细胞在G0/G1期所占比例明显提高(71.4%vs.59.7%,P<0.05),S期所占比例明显下降(18.7%vs.30.7%,P<0.05)。结论:成功构建E2F-1基因真核表达载体,E2F-1过表达可抑制MKN-45细胞的增殖。 展开更多
关键词 胃肿瘤 mkn-45细胞 E2F-1 转染 增殖
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盐酸伊利替康及氧化苦参碱对多耐药人胃癌细胞MKN-45的作用 被引量：3
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作者 朱金水 张卫平 +4 位作者 宋明全 李沁 达炜 孙群 陈国强 《中国临床医学》 北大核心 2007年第4期498-500,共3页
目的:探讨盐酸伊利替康(CPT-11)及氧化苦参碱对裸鼠体内多药耐药人胃癌细胞MKN-45的抑制作用及其抗肿瘤作用的分子机制。方法:建立了多药耐药人胃癌MKN-45细胞的皮下移植瘤模型,随机分成0.9%氯化钠对照组、CPT-11治疗组、氧化苦参碱治... 目的:探讨盐酸伊利替康(CPT-11)及氧化苦参碱对裸鼠体内多药耐药人胃癌细胞MKN-45的抑制作用及其抗肿瘤作用的分子机制。方法:建立了多药耐药人胃癌MKN-45细胞的皮下移植瘤模型,随机分成0.9%氯化钠对照组、CPT-11治疗组、氧化苦参碱治疗组和CPT-11联合氧化苦参碱治疗组。每组裸鼠在胃癌组织移植7周后处死,并测算其肿瘤抑制率。采用末端脱氧核酸转移酶原位标记(TUNEL)和流式细胞仪法分析其凋亡指数。结果:CPT-11治疗组(10 mg.L^(-1)、20 mg.L^(-1))对多药耐药MKN-45细胞皮下移植瘤的抑制率显著增加,其凋亡率分别是(11.2±0.18)%和(12.2±1.65)%,两者比较无显著差异(P>0.05);氧化苦参碱联合CPT-11治疗组凋亡指数(AI)为(62.4±6.14)%,显著高于CPT-11治疗组和0.9%氯化钠时照组(1.27±0.11)%,(P<0.01)。结论:CPT-11可以增强氧化苦参碱对多药耐药细胞MKN-45的抑制作用,诱导裸鼠体内人胃癌细胞的凋亡;并能增强裸鼠体内胃癌对化疗的疗效和敏感性。 展开更多
关键词 CPT-11 胃癌 多药耐药细胞mkn-45 凋亡
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shRNA沉默干扰HMGA2基因对胃癌细胞株MKN-45的增殖与凋亡的影响 被引量：2
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作者 陈家庄 赖铭裕 韦丽秀 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第3期187-192,共6页
目的:观察小分子RNA(shRNA)沉默后HMG-A2基因在胃癌细胞株MKN-45的表达,并探讨HMGA2基因对胃癌细胞的增殖与凋亡的影响.方法:构建针对人HMGA2基因的shRNA真核表达载体,瞬时转染人胃癌细胞株MKN-45.用细胞免疫组化的方法观察转染72h后HM... 目的:观察小分子RNA(shRNA)沉默后HMG-A2基因在胃癌细胞株MKN-45的表达,并探讨HMGA2基因对胃癌细胞的增殖与凋亡的影响.方法:构建针对人HMGA2基因的shRNA真核表达载体,瞬时转染人胃癌细胞株MKN-45.用细胞免疫组化的方法观察转染72h后HMGA2的蛋白表达水平,以MTT比色法、流式细胞术检测转染后MKN-45细胞的生长增殖、凋亡的情况.结果:转染HMGA2-shRNA组的蛋白表达强度(171.34±19.61)明显弱于scrambled组(143.48±19.04)和空白对照组(141.79±18.09,P<0.05),较之scrambled组(5.66%±0.63%)和空白对照组,HMGA2-shRNA组(39.32%±2.37%)能明显抑制细胞的增殖(P<0.05),HMGA2-shRNA组的凋亡率(39.67%±2.35%)与scrambled组(4.29%±1.33%)和空白对照组(5.05%±1.84%)相比明显增加(P<0.05).结论:靶向HMGA2基因的shRNA可以有效抑制人胃癌MKN-45细胞的生长,并促进细胞的凋亡,HMGA2可能是胃癌治疗的一个潜在靶点. 展开更多
关键词 高迁移率蛋白A2 短发夹RNA 胃癌细胞株mkn-45 细胞增殖 细胞凋亡
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蜥蜴胃康方含药大鼠血清对人MKN-45胃癌细胞增殖及HHIP、Patched表达的影响 被引量：5
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作者 关芳 艾梦环 +1 位作者 王骄 李卫强 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期76-78,共3页
目的研究蜥蜴胃康方含药SD大鼠血清对人MKN-45胃癌细胞增殖及HHIP、Patched表达水平的影响,探讨该方抑制胃癌细胞增殖的作用及机制。方法 75只SPF级雄性SD大鼠随机分5组:生理盐水阴性对照组、蜥蜴胃康方高剂量组、中剂量组、低剂量组、... 目的研究蜥蜴胃康方含药SD大鼠血清对人MKN-45胃癌细胞增殖及HHIP、Patched表达水平的影响,探讨该方抑制胃癌细胞增殖的作用及机制。方法 75只SPF级雄性SD大鼠随机分5组:生理盐水阴性对照组、蜥蜴胃康方高剂量组、中剂量组、低剂量组、华蟾素片阳性对照组,每组15只。各组分别予相应药物干预1周后,于腹主动脉处取血,离心,制备含药血清,加入人MKN-485胃癌细胞培养24h, CCK-8法检测细胞增殖;RT-PCR检测胃癌细胞HHIP、Patched表达。结果 (1)各含药血清组吸光度(OD值)均小于生理盐水阴性对照组(P<0.05);蜥蜴胃康方各组OD值均小于华蟾素片阳性对照组(P<0.05);蜥蜴胃康方各组OD值比较,以高剂量组效果最优(P<0.05)。(2)各含药血清组HHIP、Patched蛋白表达均高于生理盐水阴性对照组(P<0.05);蜥蜴胃康方各组HHIP、Patched蛋白表达均高于华蟾素片阳性对照组(P<0.05);蜥蜴胃康方各组HHIP、Patched蛋白表达比较,以高剂量组表达最高(P<0.05)。结论蜥蜴胃康方可能通过影响HHIP、Patched蛋白表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,具有较好的抗癌作用。 展开更多
关键词 蜥蜴胃康方 含药血清 人胃癌细胞 mkn-45
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