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转基因玉米MON87427梯度含量基体标准物质的研制
1
作者 李俊 单露英 +6 位作者 肖芳 李允静 高鸿飞 翟杉杉 吴刚 张秀杰 武玉花 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1444-1455,共12页
【目的】转基因检测标准物质是转基因生物安全监管、标识制度实施的物质基础,是实验室内检测数据溯源、实验室间检测数据可比的保证。中国于2017年批准进口转基因玉米MON87427用作加工原料,其安全监管和检测急需研制有证标准物质。【方... 【目的】转基因检测标准物质是转基因生物安全监管、标识制度实施的物质基础,是实验室内检测数据溯源、实验室间检测数据可比的保证。中国于2017年批准进口转基因玉米MON87427用作加工原料,其安全监管和检测急需研制有证标准物质。【方法】以开发商提供的转基因玉米MON87427杂合种子和非转基因受体种子为原材料,对转基因玉米MON87427和其受体种子分别清洗、干燥、冷冻研磨、粒径及含水量检测,按质量分数(以干基计)称量配制得到质量分数分别为60.0、99.5和1000.0 mg·g^(-1)的转基因玉米MON87427基体标准物质MON87427a、MON87427b和MON87427c。运用实时荧光定量PCR进行粉末的均匀性初检,初检合格后分装。用MON87427/zSSIIb二重微滴数字PCR(ddPCR)方法进行标准物质均匀性、稳定性评估和8家实验室联合定值。根据《标准物质定值的通用原则及统计学原理》(JJF 1343)进行标准物质均匀性评估、稳定性评估、联合定值数据的处理及不确定度评定。【结果】本批标准物质有MON87427a、MON87427b、MON87427c 3个浓度,粒径小于200μm的粉末大于80%,含水量低于5%。用棕色玻璃瓶分装,不低于1.0 g/瓶,充氮后轧盖,3个浓度的标准物质各分装400瓶。3种标准物质均匀性检验的F值均小于临界值F0.05(14,30)(2.04),在瓶内和瓶间具有良好的均匀性,使用时,最小取样量为100 mg。标准物质在25℃、37℃和60℃条件下可稳定储存14 d,表明在常温下运输14 d标准物质特性量值不发生趋势性变化;在4℃和-20℃条件下长期稳定性达到12个月;开盖取样5次,标准物质特性量值未发生显著偏离。8家实验室联合测定的标准物质拷贝数比值无异常值、呈正态分布、且等精度,标准物质MON87427a、MON87427b、MON87427c的标准值及扩展不确定度分别为(2.92±0.44)%、(4.89±0.57)%、(52.1±3.4)%。【结论】研制的转基因玉米MON87427梯度含量基体标准物质均匀性良好,可稳定运输和储存,满足转基因玉米MON87427定性、定量检测需求,为转基因玉米MON87427的安全监管、定量标识制度的实施提供了可靠的有证标准物质。 展开更多
关键词 转基因玉米mon87427 基体标准物质 二重微滴数字PCR 特性量值 不确定度
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转基因耐除草剂玉米MON87419品系特异性定性PCR检测方法的建立 被引量：1
2
作者 李凌燕 肖冰 +5 位作者 张旭冬 陈子言 王颢潜 张秀杰 陈红 梁晋刚 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第1期50-57,共8页
转基因耐除草剂玉米MON87419是由孟山都远东有限公司研发的玉米转化体,能够耐受麦草畏和草铵膦2种除草剂,已向我国申请进口用作加工原料的转基因生物安全证书。本文旨在建立转基因耐除草剂玉米MON87419转化体的特异性定性检测方法,以MON... 转基因耐除草剂玉米MON87419是由孟山都远东有限公司研发的玉米转化体,能够耐受麦草畏和草铵膦2种除草剂,已向我国申请进口用作加工原料的转基因生物安全证书。本文旨在建立转基因耐除草剂玉米MON87419转化体的特异性定性检测方法,以MON87419转化体特异性序列为靶标,设计一系列特异性引物,进行引物筛选、特异性测试、反应条件优化、灵敏度测试、检出限测试和再现性测试等试验。结果表明,本特异性检测方法的主要技术参数全部符合相关转基因分子检测标准的要求,特异性片段大小为216 bp,品系特异性高,灵敏度低至0.05%,检出限达到0.1%,具有良好的再现性和重复性。本方法的建立可为该转基因品系及其衍生产品的检测和安全监管提供有效技术支撑。 展开更多
关键词 转基因耐除草剂玉米 mon87419 定性PCR 转基因监管 特异性检测
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转基因玉米MON87419实时荧光PCR定性检测方法的建立
3
作者 李凌燕 肖冰 +4 位作者 王颢潜 乌兰 邓志峰 陈红 梁晋刚 《种子》 北大核心 2023年第8期16-20,共5页
转基因玉米MON87419是孟山都远东有限公司研发的转化体,转入了dom和pat基因,能够耐受麦草畏和草铵膦两种除草剂。本研究以转基因耐除草剂玉米MON874193′端特异性序列为靶标设计引物和探针,经特异性测试、体系优化、灵敏度测试及检出限(... 转基因玉米MON87419是孟山都远东有限公司研发的转化体,转入了dom和pat基因,能够耐受麦草畏和草铵膦两种除草剂。本研究以转基因耐除草剂玉米MON874193′端特异性序列为靶标设计引物和探针,经特异性测试、体系优化、灵敏度测试及检出限(LOD)测试,建立了MON87419的实时荧光PCR定性检测方法。结果表明,该方法能检测出转基因耐除草剂玉米MON87419转化体成分,具有稳定性好、特异性强、灵敏度高的特点,检出限可达0.05%。该方法主要技术参数全部符合相关标准的要求,可为转基因玉米的安全监管提供有效的技术支撑。 展开更多
关键词 耐除草剂玉米 mon87419 定性PCR 实时荧光PCR 安全监管
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转基因抗虫耐除草剂玉米MON87411精准定量检测方法的建立
4
作者 李凌燕 张旭冬 +6 位作者 陈子言 王颢潜 乌兰 田锦 张秀杰 陈红 梁晋刚 《生物安全学报》 CSCD 北大核心 2023年第1期38-45,共8页
【目的】抗虫耐除草剂玉米MON87411是孟山都远东有限公司利用农杆菌介导方法研发的玉米转化体,已获得我国进口用作加工原料的农业转基因生物安全证书。为满足生物安全监管的要求,亟需建立该转化体的定量检测方法。【方法】根据抗虫耐除... 【目的】抗虫耐除草剂玉米MON87411是孟山都远东有限公司利用农杆菌介导方法研发的玉米转化体,已获得我国进口用作加工原料的农业转基因生物安全证书。为满足生物安全监管的要求,亟需建立该转化体的定量检测方法。【方法】根据抗虫耐除草剂玉米MON87411的两端旁侧序列信息设计引物和Taqman探针,进行引物筛选、特异性检测、PCR体系优化、标准曲线建立、正确度及精密度检测、检出限及定量限测试、微滴数字PCR方法验证等。【结果】该方法能特异、定量地检测出抗虫耐除草剂玉米MON87411转化体成分,检出限低至10拷贝,定量限为40拷贝。对测试样品定值准确,经微滴数字PCR方法验证结果一致。【结论】本方法为该新品种转基因玉米品系的精准定量提供了一种新的检测方法,为生物安全监管提供了有效的技术支撑。 展开更多
关键词 转基因玉米 mon87411 抗虫耐除草剂 实时荧光PCR 微滴数字PCR 精准定量
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15Cr16Ni2MoN新型马氏体热强钢热变形行为研究
5
作者 任路浩 王立民 郭菁 《塑性工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期146-153,共8页
利用Gleeble-3800热模拟试验机在变形温度为950~1150℃、应变速率为0.1~10 s^(-1),最大变形量为50%的条件下对15Cr16Ni2MoN钢进行了单道次热压缩试验。根据应变硬化速率θ-应力σ曲线的拐点以及-dθ/dσ-σ曲线计算得到临界动态再结晶(D... 利用Gleeble-3800热模拟试验机在变形温度为950~1150℃、应变速率为0.1~10 s^(-1),最大变形量为50%的条件下对15Cr16Ni2MoN钢进行了单道次热压缩试验。根据应变硬化速率θ-应力σ曲线的拐点以及-dθ/dσ-σ曲线计算得到临界动态再结晶(DRX)的临界应力σc与温度T的关系。结果表明,在高应变速率(1和10 s^(-1))下观察到较为稳定的流动行为,在低应变速率0.1 s^(-1)时,DRX程度更充分并显著改变了真应力-应变曲线变化趋势。DRX发生需要的临界应力σc随温度的升高而逐渐降低,随应变速率的增加逐渐提升。基于Arrhenius模型预测了合金钢的组织演化规律,绘制了在不同应变量下的热加工图,确定最佳热加工区间为变形温度为1030~1070℃,应变速率为0.10~0.22 s^(-1),并通过金相显微组织观察予以验证。 展开更多
关键词 15Cr16Ni2mon钢 动态再结晶 热加工图 Arrhenius模型
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沉积偏压对MoN涂层结构和柴油中摩擦学性能的影响
6
作者 龚小红 蔡立昕 +2 位作者 苏永要 余伟杰 马育铖 《表面技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第7期158-166,共9页
目的研究沉积偏压对MoN涂层微观结构、性能,以及在柴油介质中摩擦学行为的影响机制。方法采用磁控溅射技术在304不锈钢基体上沉积MoN涂层。利用X射线衍射仪、X射线光电子能谱仪、X射线能谱仪、原子力显微镜、纳米压痕仪、薄膜应力测试... 目的研究沉积偏压对MoN涂层微观结构、性能,以及在柴油介质中摩擦学行为的影响机制。方法采用磁控溅射技术在304不锈钢基体上沉积MoN涂层。利用X射线衍射仪、X射线光电子能谱仪、X射线能谱仪、原子力显微镜、纳米压痕仪、薄膜应力测试仪和电化学工作站研究MoN涂层的微观结构、成分、表面粗糙度、力学性能、耐腐蚀性能。利用球-盘式摩擦实验机和激光拉曼光谱仪对MoN涂层在0号柴油中的摩擦学行为及机制进行研究。结果随着偏压的增加,涂层的厚度和膜-基结合力均呈先增大后减小的趋势;涂层的表面粗糙度、内应力和硬度呈先升高后降低的趋势。在偏压为-120 V时,沉积的γ-Mo2N涂层组织致密、表面光滑(Sa 7.78 nm)、硬度高(18.02 GPa)、膜-基结合力高(253 m N)。随着偏压的增加,涂层的摩擦因数呈先减小后增加的趋势。在偏压为-120 V时,沉积的γ-Mo_(2)N涂层的摩擦因数和磨损率均最小,分别为0.10和1.8×10^(-7)mm^(3)/(N·m)。拉曼光谱分析结果表明,在摩擦催化作用下,柴油在磨痕表面产生了碳基膜。此外,通过电化学腐蚀分析发现,在偏压-120V下沉积的γ-Mo_(2)N涂层具有优异的耐腐蚀性能。结论MoN涂层结构、性能受到偏压的影响显著。柴油在摩擦催化作用下发生了降解,形成了碳基膜,这有利于降低MoN涂层的摩擦因数和磨损率。 展开更多
关键词 磁控溅射 mon涂层 偏压 摩擦磨损 柴油
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MONTBLANC 深入冰川 溯源冒险精神
7
作者 Chaos 《钟表》 2023年第2期36-37,共2页
2023年3月14日至16日,MONTBLANC万宝龙携2023年腕表力作来到中国西南之巅的云南明永冰川,开启了一场全新的探索之旅。万宝龙全球首席执行官柏瑞麒(Nicolas Baretzki)和腕表部门董事总经理Laurent Lecamp虽然未能亲赴现场,却也通过云端... 2023年3月14日至16日,MONTBLANC万宝龙携2023年腕表力作来到中国西南之巅的云南明永冰川,开启了一场全新的探索之旅。万宝龙全球首席执行官柏瑞麒(Nicolas Baretzki)和腕表部门董事总经理Laurent Lecamp虽然未能亲赴现场,却也通过云端连线的方式分享了品牌的新年展望以及卓越的高级制表传统和革新理念。 展开更多
关键词 首席执行官 冒险精神 万宝龙 TBL 腕表 明永冰川 ANC mon
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转基因玉米MON88017旁侧序列分析及定性PCR检测 被引量：18
8
作者 袁磊 孙红炜 +3 位作者 杨崇良 尚佑芬 路兴波 赵蕾 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期361-364,共4页
采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引... 采用基因组步移法和巢式PCR方法研究转基因玉米MON88017外源基因插入位点旁侧序列特征,获得了外源基因插入位点的左边界旁侧序列504bp,包括336bp的插入载体序列和168bp的玉米基因组序列。根据此旁侧序列,设计MON88017转化事件特异性引物并进行定性PCR扩增,扩增片段为446bp,建立了转基因玉米MON88017转化体特异性检测方法。该方法特异性强、灵敏度高(0.1%),为转基因玉米品种MON88017进出口检测和标识检测提供了技术基础。 展开更多
关键词 转基因生物 事件特异性检测 定性PCR mon88017转化事件 左边界旁侧序列
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环介导等温扩增法检测转基因玉米MON89034 被引量：16
9
作者 张隽 李志勇 +5 位作者 叶宇鑫 黄韵 刘津 余以刚 高东微 石磊 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2012年第4期469-472,共4页
根据MON89034外源插入片段与植物基因组序列设计特异性引物,筛选最佳引物并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米MON89034转化体特异性LAMP检测方法。对该方法进行了特异性、灵敏度、稳定性和重复性测试。结果表明:该方法... 根据MON89034外源插入片段与植物基因组序列设计特异性引物,筛选最佳引物并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米MON89034转化体特异性LAMP检测方法。对该方法进行了特异性、灵敏度、稳定性和重复性测试。结果表明:该方法能够特异性检测出MON89034玉米;检测其灵敏度达到1 pg;以转基因玉米MON89034 DNA标准品质量分数为1.00%,0.10%,0.05%的样品为模板,其稳定性好、重复性高,假阴性率为0。本试验设计的LAMP方法适用于特异性检测转基因玉米MON89034。 展开更多
关键词 环介导等温扩增法 转基因玉米mon 89034 检测
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以实时荧光定量PCR技术检测转基因玉米MON88017 被引量：12
10
作者 袁磊 孙红炜 +3 位作者 李凡 李宁 赵蕾 路兴波 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2117-2121,共5页
根据转基因玉米MON88017的左侧侧翼序列和玉米内标基因（zSSIIb）分别设计特异性引物及Taqman探针,通过实时荧光PCR技术建立MON88017的定量特异性检测方法。利用含有内标基因和侧翼序列的标准质粒分子,建立了玉米内标基因和侧翼序列的... 根据转基因玉米MON88017的左侧侧翼序列和玉米内标基因（zSSIIb）分别设计特异性引物及Taqman探针,通过实时荧光PCR技术建立MON88017的定量特异性检测方法。利用含有内标基因和侧翼序列的标准质粒分子,建立了玉米内标基因和侧翼序列的标准曲线。检测了5个已知MON88017含量（0.01%、0.05%、0.10%、0.50%和1.00%）的混合样品中的转基因含量,结果表明检测底限可以达到19~30个阳性拷贝。该研究建立的实时荧光定量PCR技术灵敏度高、特异性强。 展开更多
关键词 转基因生物 实时荧光定量PCR mon88017 标准分子
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转基因大豆MON89788双重数字PCR通用定量检测方法的建立 被引量：16
11
作者 刘津 李婷 +3 位作者 冼钰茵 吴希阳 凌莉 高东微 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第4期312-319,共8页
建立一种特异、稳定、灵敏、通用的转基因大豆MON89788品系双重数字聚合酶链式反应(digital polymerase chain reaction,d PCR)定量检测方法,在一个体系内同时进行内外源基因的定量检测,适用于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR... 建立一种特异、稳定、灵敏、通用的转基因大豆MON89788品系双重数字聚合酶链式反应(digital polymerase chain reaction,d PCR)定量检测方法,在一个体系内同时进行内外源基因的定量检测,适用于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)和芯片式数字PCR(chip digital PCR,cd PCR)平台,并通过了食品分析能力评价体系国际能力验证项目的盲样检测评价。dd PCR平台对大豆MON89788品系和内源Lectin的绝对定量限分别为8.0 copies/μL和8.2 copies/μL;cd PCR平台对大豆MON89788品系和内源Lectin的绝对定量限分别为7.443 copies/μL和7.646 copies/μL;dd PCR和cd PCR对转基因大豆MON89788品系成分相对含量的相对定量限均为0.1%。 展开更多
关键词 微滴式数字PCR 芯片式数字PCR 转基因大豆mon89788品系 定量检测
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渗氮活塞环表面磁控溅射MoN涂层的摩擦学性能 被引量：11
12
作者 马亚军 李生华 +3 位作者 潘国顺 金元生 王玉琮 TUNG S C 《摩擦学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期308-312,共5页
利用磁控溅射方法在渗氮活塞环基体上沉积了厚约4μm的MoN涂层;以GF-3等级的全配方发动机油作为润滑剂,采用SRV型高温摩擦磨损试验机对比考察了沉积MoN涂层前后渗氮活塞环的摩擦学性能.结果表明,沉积MoN涂层后摩擦系数较低且较快达到稳... 利用磁控溅射方法在渗氮活塞环基体上沉积了厚约4μm的MoN涂层;以GF-3等级的全配方发动机油作为润滑剂,采用SRV型高温摩擦磨损试验机对比考察了沉积MoN涂层前后渗氮活塞环的摩擦学性能.结果表明,沉积MoN涂层后摩擦系数较低且较快达到稳定状态;与此同时,活塞环和缸套磨损大幅减小.其原因在于硬度很高的MoN涂层不易产生磨粒,且同缸套试样具有良好的匹配性能. 展开更多
关键词 渗氮活塞环 磁控溅射 mon涂层 摩擦磨损性能
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转基因大豆MON89788转化体特异性定性PCR检测 被引量：16
13
作者 李飞武 李葱葱 +2 位作者 董立明 邢珍娟 张明 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第13期6679-6682,共4页
[目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计特异性引物进行PCR检测,并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1142bp的3′端旁侧序列;依据该... [目的]建立MON89788大豆转化体特异性定性PCR检测方法。[方法]利用TAIL-PCR技术分离MON89788大豆的3′端旁侧序列,据此序列设计特异性引物进行PCR检测,并对该方法的特异性和灵敏度进行测试。[结果]获得了1142bp的3′端旁侧序列;依据该序列建立的PCR检测方法能特异性从MON89788大豆中扩增出170bp的产物,检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝。[结论]该研究建立的方法特异性强、灵敏度高,可适用于MON89788大豆检测。 展开更多
关键词 转基因大豆 mon89788转化体 定性PCR
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实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度 被引量：17
14
作者 宋君 雷绍荣 +6 位作者 刘勇 向冰 王东 尹全 张富丽 刘文娟 常丽娟 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第33期20312-20315,共4页
[目的]对实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度进行评定。[方法]使用转基因玉米MON863结构特异实时定量PCR方法测定含量为1%的转基因玉米MON863样品(CRM)中结构特异片段的含量,并从扩增反应、数据处理以及微... [目的]对实时荧光定量PCR检测转基因玉米MON863结构特异基因的测量不确定度进行评定。[方法]使用转基因玉米MON863结构特异实时定量PCR方法测定含量为1%的转基因玉米MON863样品(CRM)中结构特异片段的含量,并从扩增反应、数据处理以及微量移液器等不确定度来源,评定测量的不确定度。[结果]研究得到uA=1.7×10-2,uB=9.0×10-4,uC=1.7×10-2,U95=0.036,测量结果为1.08%±0.036。[结论]转基因玉米MON863结构特异实时定量PCR方法检测结果的主要不确定度来自检验过程中的随机效应。 展开更多
关键词 转基因玉米mon863 结构特异基因含量 不确定度
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LAMP实时浊度法快速检测转基因玉米MON810 被引量：6
15
作者 王小玉 邝筱珊 +5 位作者 胡松楠 余以刚 成晓维 冯家望 张璜 肖性龙 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第12期3002-3005,3069,共5页
LAMP实时浊度法是采用环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术通过实时浊度仪实时检测反应过程中所产生的白色沉淀,从而实现对扩增全过程的监控,弥补了显色法只能观看反应终点的缺陷,使引物筛选和反应体系的... LAMP实时浊度法是采用环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术通过实时浊度仪实时检测反应过程中所产生的白色沉淀,从而实现对扩增全过程的监控,弥补了显色法只能观看反应终点的缺陷,使引物筛选和反应体系的优化有数据可依。本研究以转基因玉米MON810为研究对象,针对外源基因苏云金芽孢杆菌杀虫毒蛋白CryIA(b)与内源基因边界序列设计6条特异性引物,通过实时浊度法在63℃的恒温条件下完成检测,对检测的灵敏度、特异性、稳定性进行了评价。建立了转基因玉米MON810的LAMP实时浊度检测方法,该方法最低检出限为0.5%,与LAMP显色法和实时荧光PCR法进行结果比对,符合率为100%,经评价具有特异性高、稳定性强、准确简便等优点,非常适合转基因玉米MON810的快速检测,有较好的应用价值。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 实时浊度仪 转基因玉米 mon810 检测
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转基因棉花MON88913转化体特异性定性、定量PCR检测方法(英文) 被引量：9
16
作者 杨立桃 蒋玲曦 +4 位作者 沈凯琳 郭金超 饶军 李济琨 张大兵 《食品安全质量检测学报》 CAS 2009年第1期10-19,共10页
本文以我国批准商业化的转基因耐草甘膦棉花MON88913为研究对象,建立并验证了其转化体特异性定性、定量PCR检测方法。建立的定性PCR方法的检测极限是20个拷贝棉花单倍体基因组DNA,定量PCR方法的检测和定量极限分别是10和20个拷贝棉花单... 本文以我国批准商业化的转基因耐草甘膦棉花MON88913为研究对象,建立并验证了其转化体特异性定性、定量PCR检测方法。建立的定性PCR方法的检测极限是20个拷贝棉花单倍体基因组DNA,定量PCR方法的检测和定量极限分别是10和20个拷贝棉花单倍体基因组DNA。同时,我们组织了实验室5位研究人员对建立的定量PCR检测方法进行了协同验证。对5个盲样的定量分析结果显示与真实值的偏差介于1.59%和10.12%之间,完全满足国际标准25%偏差范围的要求,完全可用于转基因棉花MON88913的实际样品检测。 展开更多
关键词 转基因棉花 转化体特异性 mon88913 实验室内部验证
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转基因玉米MON863品系特异定量PCR方法的建立 被引量：9
17
作者 宋君 雷绍荣 +5 位作者 刘勇 尹全 王东 张富丽 刘文娟 常丽娟 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第24期5250-5253,共4页
根据转基因玉米MON863外源基因的旁侧序列,设计引物和TaqMan探针,建立了转基因玉米MON863品系特异定量PCR检测方法,并采用该法检测了1%含量的MON863玉米粉末(不确定度为10%)。结果显示,采用构建的方法获得的标准曲线斜率为-3.6～-3.1,... 根据转基因玉米MON863外源基因的旁侧序列,设计引物和TaqMan探针,建立了转基因玉米MON863品系特异定量PCR检测方法,并采用该法检测了1%含量的MON863玉米粉末(不确定度为10%)。结果显示,采用构建的方法获得的标准曲线斜率为-3.6～-3.1,相关系数大于0.99,扩增效率为102.2%,在90%～110%内。样品的定量检测结果1.113%接近已知含量1%(不确定度为10%),表明建立的转基因玉米MON863品系特异定量PCR检测方法的灵敏度和准确度高,可以在日常检验中推广应用。 展开更多
关键词 mon863 zSSⅡb 旁侧序列 定量检测
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实时荧光PCR定量检测加工产品中转基因玉米Mon810成分 被引量：9
18
作者 覃文 曹际娟 朱水芳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期132-134,共3页
采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法。实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成... 采用实时荧光PCR技术,建立了定量(性)鉴定检测加工产品中转基因玉米Mon810成分的方法。实验设计的可以扩增玉米自身基因和外源基因边界序列的引物和探针具有品种和品系特异性,特异性地检测出食品、饲料等加工产品中转基因玉米Mon810成分。某些检测样品不仅检出转基因玉米Mon810成分,还同时检出其它转基因玉米品系或其它转基因品种。本研究实验建立的转基因玉米Mon810品系鉴定检测方法,即可以用于加工产品中转基因成分的定量检测(检测低限为0.1%),也可以用于定性检测,或作为常规PCR定性检测后的确证实验方法。 展开更多
关键词 转基因玉米 实时荧光PCR技术 定量检测 食品 饲料 mon810成分
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