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静注人免疫球蛋白中IgG二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响
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作者 雷婷婷 张巍 +3 位作者 李长清 叶生亮 杜晞 马莉 《中国输血杂志》 CAS 2023年第2期125-129,共5页
目的研究静注人免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)中免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响。方法利用蛋白纯化技术和高效液相色谱(HPLC)技术,制备不同浓度的IgG二聚体,... 目的研究静注人免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)中免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响。方法利用蛋白纯化技术和高效液相色谱(HPLC)技术,制备不同浓度的IgG二聚体,然后采用直接添加的方式,制备得到含有不同浓度IgG二聚体的IVIG。最后利用本实验室已建立的IgG Fc段与THP-1细胞表面Fc段受体结合能力的检测方法,考察IgG二聚体含量对IgG Fc段与细胞表面受体结合能力的影响。结果当IVIG中IgG二聚体含量为1.11%~10.30%时,其与THP-1细胞表面Fc段受体的结合能力为97.67%~135.33%,且这种结合能力与IgG二聚体的含量呈正相关。当IgG二聚体含量超过13.22%时,IgG Fc段与THP-1细胞表面受体的结合能力与IgG二聚体含量则没有相关性。结论一定浓度的IgG二聚体对IVIG中IgG Fc段与THP-1细胞表面受体的结合能力具有促进作用,但尚需动物实验和临床数据进一步验证。 展开更多
关键词 静注人免疫球蛋白(IVIG) igg二聚体 igg fc THP-1细胞 受体结合能力
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人MR1/IgG1Fc二聚体融合蛋白的构建、表达及功能检测
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作者 赵桂华 龚业莉 翁秀芳 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期649-655,共7页
目的构建MR1/IgG1Fc融合蛋白杆状病毒表达载体并使其在昆虫细胞内表达获得MR1/IgG1Fc二聚体,制备人工抗原提呈细胞用于黏膜相关恒定T细胞(MAIT)反应性代谢物及MAIT细胞功能调控研究。方法从人外周血单个核细胞中扩增β2m编码基因。商业... 目的构建MR1/IgG1Fc融合蛋白杆状病毒表达载体并使其在昆虫细胞内表达获得MR1/IgG1Fc二聚体,制备人工抗原提呈细胞用于黏膜相关恒定T细胞(MAIT)反应性代谢物及MAIT细胞功能调控研究。方法从人外周血单个核细胞中扩增β2m编码基因。商业化合成MR1胞外段和IgG1Fc融合基因的全序列基因MR1/IgG1Fc,与β2m基因重组构建pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]表达载体;利用Bac-to-Bac昆虫表达系统表达MR1/IgG1Fc二聚体融合蛋白,并通过双抗体夹心ELISA、Western blot及流式细胞术进行检测。建立MR1/IgG1Fc二聚体加载的人工抗原提呈细胞(artificial antigen presenting cells,aAPCs),即MR1aAPCs,提呈大肠埃希菌(DH5α)来源的代谢物,与人外周血单个核细胞共培养,检测MAIT细胞的活化和增殖水平。结果经PCR及测序鉴定证实pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]载体中MR1/IgG1Fc与β2m具有正确序列。ELISA、Western blot及流式细胞术检测结果表明MR1/IgG1Fc二聚体在重组杆粒感染的Sf9细胞培养上清富集,具有正确构象。加载DH5α来源代谢物的MR1aAPCs能够促进MAIT细胞活化和增殖。结论成功构建pFastBac^(TM)Dual+[β2m+MR1/IgG1Fc]重组质粒,并在Sf9细胞中表达MR1/IgG1Fc二聚体,制备获得MR1aAPCs,为研究MAIT细胞反应性代谢物及MAIT细胞功能提供了新的工具。 展开更多
关键词 黏膜相关恒定T细胞 mr1/igg1fc二聚体 人工抗原提呈细胞 反应性代谢物
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TPO模拟肽与人IgG1 Fc片段的融合表达及其生物学特性研究 被引量:6
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作者 李越希 李朝 +3 位作者 陶开华 贾向红 程度胜 黄培堂 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期424-430,共7页
依据本室获得的人TPO模拟肽序列 ,合成了该模拟肽的DNA序列 ,分别连接至 4种不同长度的人IgG1Fc基因片段的 5′端 ,并克隆至质粒表达载体pET2 8a(+) ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,筛选获得了 4种重组工程菌 ,其中3种分别高效表达了 3种不... 依据本室获得的人TPO模拟肽序列 ,合成了该模拟肽的DNA序列 ,分别连接至 4种不同长度的人IgG1Fc基因片段的 5′端 ,并克隆至质粒表达载体pET2 8a(+) ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,筛选获得了 4种重组工程菌 ,其中3种分别高效表达了 3种不同长度的融合蛋白 ,而第 4种工程菌未表达。表达的 3种融合蛋白的分子量分别约为2 8kD、12kD和 12kD ,表达量约占菌体蛋白总量的 30 %左右 ,纯化获得了 3种TPO模拟肽融合蛋白。 3种融合蛋白均有较好的体外活性 ,维持TPO依赖细胞Ba F3-mp1生长的EC5 0分别为 :13、10、10nmol L。用血小板减少症小鼠动物模型 ,测定了它们的体内活性 ,3种融合蛋白均有升高血小板和缩短血小板恢复时间的功能 ,分别比TPO模拟肽活性提高了 18、8、8倍 ;而对白细胞及红细胞无显著影响。分别用 3种融合蛋白免疫BALB c小鼠 ,均未刺激小鼠产生抗TPO模拟肽抗体 ,并显示了较好的应用潜力。 展开更多
关键词 TPO模拟肽 igg1fc片段 融合表达 生物学特性
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CD80-IgG1Fc段融合蛋白真核表达载体的构建及表达 被引量:3
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作者 李和军 李频 +1 位作者 周小玲 郑祥雄 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期40-42,46,共4页
目的构建人CD80-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在CHO细胞中进行表达。方法应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建人CD80膜外段-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并将其转染入CHO细胞株... 目的构建人CD80-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在CHO细胞中进行表达。方法应用T-A克隆技术和亚克隆技术,构建人CD80膜外段-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并将其转染入CHO细胞株并筛选,进行稳定表达。通过Western blot及ELISA法,检测融合蛋白的表达。结果成功地构建了真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcD-NA3.1(+),并建立CHO细胞稳定表达株。Western blot及ELISA法检测到细胞培养上清中有融合蛋白的表达。结论成功地构建了人CD80膜外段-IgG1Fc段融合蛋白的真核表达载体CD80-IgG1Fc/pcDNA3.1(+),并在CHO细胞中稳定表达,为下一步抗肿瘤的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 CD80 igg1 fc 融合蛋白 基因克隆 真核表达
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BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白真核表达体系构建 被引量:3
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作者 王佩茹 王明悦 +1 位作者 朱学骏 陈喜雪 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第9期797-800,共4页
目的构建BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白的真核表达体系。方法①以逆转录PCR(reverse transcrip-tion-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法从表皮组织提取总RNA中扩增编码人BP180NC16A的cDNA,与包含编码人免疫球蛋白IgG1Fc段恒定区基因... 目的构建BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白的真核表达体系。方法①以逆转录PCR(reverse transcrip-tion-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法从表皮组织提取总RNA中扩增编码人BP180NC16A的cDNA,与包含编码人免疫球蛋白IgG1Fc段恒定区基因的质粒pFUSE-hIgG1e4-Fc2融合,形成重组pFUSE-hIgG1e4-Fc2-BP180NC16A质粒。②重组质粒转染真核HEK293T细胞,48h后收集细胞培养上清。③通过免疫印迹的方法鉴定转染细胞上清中分泌的BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白。结果构建了pFUSE-hIgG1e4-Fc2-BP180NC16A真核表达质粒并在HEK293T细胞成功表达BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白。结论 BP180NC16A-IgG1Fc融合蛋白能够成功真核表达。 展开更多
关键词 BP180NC16A igg1fc 融合蛋白 真核表达
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人IgG1FccDNA的克隆与鉴定
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作者 安云庆 柯岩 陈金栋 《首都医科大学学报》 CAS 2000年第2期93-96,共4页
根据编码人IgG1Fc(Fcγ1 )的基因序列 ,设计合成 1对与之相匹配的引物。采用RT PCR法 ,从正常人白细胞mRNA中扩增获得预期目的基因Fcγ1 70 0bp基因片段 ,成功构建PUC1 8 Fcγ1 70 0 重组克隆载体 ,酶切、酶谱分析与预期结果相符 ;DNA... 根据编码人IgG1Fc(Fcγ1 )的基因序列 ,设计合成 1对与之相匹配的引物。采用RT PCR法 ,从正常人白细胞mRNA中扩增获得预期目的基因Fcγ1 70 0bp基因片段 ,成功构建PUC1 8 Fcγ1 70 0 重组克隆载体 ,酶切、酶谱分析与预期结果相符 ;DNA测序结果与GenBank报道一致。 展开更多
关键词 igg1Fe(fcγ1) RT-PCR 克隆 鉴定
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pSLX-CMV/TβRII-IgG1Fc载体的构建
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作者 高巍 周永兴 +1 位作者 张惠中 聂青和 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2005年第3期230-234,共5页
目的构建表达人TGFβ1II型受体细胞外结合区和人IgG1Fc的融合蛋白逆转录病毒载体,为进一步肝纤维化的基因治疗奠定实验基础。方法以RTPCR方法扩增目的基因TβRIIIgG1Fc,扩增产物纯化后克隆至测序载体pGEMTEasy,挑取阳性克隆酶切鉴定后测... 目的构建表达人TGFβ1II型受体细胞外结合区和人IgG1Fc的融合蛋白逆转录病毒载体,为进一步肝纤维化的基因治疗奠定实验基础。方法以RTPCR方法扩增目的基因TβRIIIgG1Fc,扩增产物纯化后克隆至测序载体pGEMTEasy,挑取阳性克隆酶切鉴定后测序;利用重组DNA技术,将TβRIIIgG1Fc基因亚克隆至逆转录病毒载体pSLXCMV中,重组质粒pSLXCMV/TβRIIIgG1Fc在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,测定病毒滴度。结果经测序、限制性酶切分析及PCR方法鉴定,载体插入基因序列、大小、位置均正确无误,并用PA317细胞进行包装、病毒滴度测定、筛选,建立具有较高滴度的感染性重组病毒产生细胞系。结论成功构建了重组质粒pSLXCMV/TβRIIIgG1Fc,可望为肝纤维化的基因治疗提供有效途径。 展开更多
关键词 fc 逆转录病毒载体 RT-PCR方法 重组DNA技术 PA317细胞 病毒滴度测定 基因治疗 肝纤维化 重组质粒 igg1 TGF-β 脂质体介导 限制性酶切 1型受体 构建表达 融合蛋白 目的基因 产物纯化 酶切鉴定 阳性克隆 包装细胞 抗性克隆
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鸡传染性支气管炎病毒S1基因与猪IgGFc基因在HeLa细胞中的融合表达 被引量:1
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作者 张明富 陈汉阳 +3 位作者 彭博 佟铁俦 陈焕春 郭爱珍 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1145-1149,共5页
根据GenBank中发表的猪的IgG Fc段基因及鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模板扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41S基因的质粒为模板扩增出IBVS1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV... 根据GenBank中发表的猪的IgG Fc段基因及鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模板扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41S基因的质粒为模板扩增出IBVS1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5kb,IgG Fc大小为1kb,序列正确。将IBVS1与IgG Fc基因串连,插入含有人组织型纤维蛋白溶酶原激活物分泌信号肽序列(tPA)的真核表达载体pcD-NA3.1-tPA上,在HeLa细胞上进行瞬时融合表达。经免疫光和斑点杂交检测,表达产物同时具有IBV S1蛋白和IgG Fc活性。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 S1基因 igg fc基因 真核表达 融合表达
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鸡传染性支气管炎病毒S1基因与猪IgG Fc基因在HeLa细胞中的融合表达
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作者 张明富 陈汉阳 +3 位作者 彭博 佟铁俦 陈焕春 郭爱珍 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第S1期276-281,共6页
根据Genbank中发表的猪IgG Fc段基因及IBV S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41 S基因的质粒为模板扩增出IBV S1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5 kb,IgG... 根据Genbank中发表的猪IgG Fc段基因及IBV S1基因序列,设计并合成引物。以猪肝组织总RNA为模扩增出猪IgG Fc基因,以含全长IBV M41 S基因的质粒为模板扩增出IBV S1基因,分别克隆至T载体。DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5 kb,IgG Fc大小为1kb,序列正确。将IBV S1与IgG Fc基因串连,插入含有人组织型纤维蛋白溶酶原激活物分泌信号肽序列(tPA)真核表达载体pcDNA3.1-tPA上,在HeLa细胞上进行瞬时融合表达。经免疫荧光和斑点杂交检测,表达产物同时具有IBV S1蛋白和IgG Fc活性。 展开更多
关键词 禽传染性支气管炎病毒 S1基因 igg fc基因 真核表达 融合表达
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Human IgG Fc promotes expression, secretion and immunogenicity of enterovirus 71 VP1 protein 被引量:4
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作者 Juan Xu Chunhua Zhang 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2016年第3期209-216,共8页
Enterovirus (EV71) can cause severe neurological diseases, but the underlying pathogenesis remains unclear. The capsid protein, viral protein 1 (VP1), plays a critical role in the pathogenicity of EVT1. High level... Enterovirus (EV71) can cause severe neurological diseases, but the underlying pathogenesis remains unclear. The capsid protein, viral protein 1 (VP1), plays a critical role in the pathogenicity of EVT1. High level expression and secretion ofVP 1 protein are necessary for structure, function and immunogenicity in its natural conformation. In our previous studies, 5 codon-optimized VP 1 DNA vaccines, including wt-VP 1, tPA-VP 1, VP l-d, VP 1-hFc and VP 1 - mFc, were constructed and analyzed. They expressed VP1 protein, but the levels of secretion and immunogenicity of these VP1 constructs were significantly different (P〈0.05). In this study, we further investigated the protein lev- els of these constructs and determined that all of these constructs expressed VP1 protein. The secretion level was increased by including a tPA leader sequence, which was further increased by fusing human IgG Fc (hFc) to VP1. VP 1-hFc demonstrated the most potent immunogenicity in mice. Furthermore, hFc domain could be used to purify VPI-hFc protein for additional studies. 展开更多
关键词 enterovirus 71 VP1 DNA vaccine human igg fc IMMUNOGENICITY
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融合表达小鼠IgG2b-Fc可增强人类免疫缺陷病毒1型Gag DNA疫苗的免疫原性
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作者 陈沁韵 万延民 +3 位作者 丁相卿 任艳琴 肖健 徐建青 《微生物与感染》 2016年第2期87-93,共7页
为阐明小鼠IgG2b-Fc对DNA疫苗免疫原性的增强作用,首先构建表达人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)CN54Gag基因的DNA疫苗及表达Gag与小鼠IgG2b-Fc融合基因的DNA疫苗,限制性酶切和DNA测序结果表明这两个疫... 为阐明小鼠IgG2b-Fc对DNA疫苗免疫原性的增强作用,首先构建表达人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)CN54Gag基因的DNA疫苗及表达Gag与小鼠IgG2b-Fc融合基因的DNA疫苗,限制性酶切和DNA测序结果表明这两个疫苗均构建成功,蛋白免疫印迹结果也显示其正确表达。然后,利用上述DNA疫苗接种C57BL/6小鼠,比较两个DNA疫苗所诱导的特异性体液免疫反应和特异性细胞免疫反应。结果显示,融合表达小鼠IgG2b-Fc对特异性细胞免疫和体液免疫反应均有增强作用,但只有对特异性体液免疫反应的增强作用有统计学意义。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒1 人类免疫缺陷病毒疫苗 GAG igg-fc
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Universal chimeric Fcγreceptor T cells with appropriate affinity for IgG1 antibody exhibit optimal antitumor efficacy
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作者 Wen Zhu Yang Wang +6 位作者 Liangyin Lv Hui Wang Wenqiang Shi Zexin Liu Mingzhe Zhou Jianwei Zhu Huili Lu 《Acta Pharmaceutica Sinica B》 SCIE CAS CSCD 2023年第5期2071-2085,共15页
Developing universal CARs with improved flexible targeting and controllable activities is urgently needed.While several studies have suggested the potential of CD16a in tandem with monoclonal antibodies to construct u... Developing universal CARs with improved flexible targeting and controllable activities is urgently needed.While several studies have suggested the potential of CD16a in tandem with monoclonal antibodies to construct universal CAR-T cells,the weak affinity between them is one of the limiting factors for efficacy.Herein,we systematically investigated the impact of Fcγreceptor(FcγR)affinity on CAR-T cells properties by constructing universal CARs using Fcγreceptors with different affinities for IgG1 antibodies,namely CD16a,CD32a,and CD64.We demonstrated that the activities of these universal CAR-T cells on tumor cells could be redirected and regulated by IgG1 antibodies.In xenografted mice,64CAR chimeric Jurkat cells with the highest affinity showed significant antitumor effects in combination with herceptin in the HER2 low expression U251 MG model.However,in the CD20 high expression Raji model,64CAR caused excessive activation of CAR-T cells,which resulted in cytokine release syndrome(CRS)and the decline of antitumor activity,and 32CAR with a moderate affinity brought the best efficacy.Our work extended the knowledge about FcγR-based universal CAR-T cells and suggested that only the FcγRCAR with an appropriate affinity can offer the optimal antitumor advantages of CAR-T cells. 展开更多
关键词 Universal CAR-T cells fcγreceptor CD16a CD32a CD64 AFFINITY igg1 antibody CRS
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肺炎支原体肺炎患儿血清FCGBP、SAA1、CXCL10水平及其与预后的关系 被引量:2
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作者 姜晓华 董九伟 +1 位作者 任杰 刘竹云 《中国医师杂志》 CAS 2023年第5期719-723,728,共6页
目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清IgG结合蛋白的Fc片段(FCGBP)、淀粉样蛋白A1(SAA1)及CXC趋化因子配体10(CXCL10)水平及其与预后的关系。方法前瞻性选取自2019年1月至2021年12月期间中国人民解放军联勤保障部队第九七〇医院儿科收治... 目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清IgG结合蛋白的Fc片段(FCGBP)、淀粉样蛋白A1(SAA1)及CXC趋化因子配体10(CXCL10)水平及其与预后的关系。方法前瞻性选取自2019年1月至2021年12月期间中国人民解放军联勤保障部队第九七〇医院儿科收治的122例MPP患儿作为研究对象。根据MPP病情严重程度及预后,分为轻症组和重症组,预后良好组和预后不良组。以同期健康查体的健康儿童40例作为对照组。采用酶联免疫吸附法检测各受试者血清FCGBP、SAA1及CXCL10水平,比较各组血清FCGBP、SAA1及CXCL10水平的差异。多因素logistic回归分析MPP患儿不良预后的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清降钙素原(PCT)、FCGBP、SAA1及CXCL10单独及联合检测对MPP患儿不良预后的诊断价值。结果重症MPP组血清FCGBP[(115.68±10.57)ng/ml,(78.41±6.73)ng/ml,(12.55±3.25)ng/ml]、SAA1[(34.18±3.72)mg/L,(25.54±2.63)mg/L,(6.74±0.82)mg/L]及CXCL10[(714.26±55.64)ng/L,(353.74±42.67)ng/L,(106.25±12.92)ng/L]水平显著高于轻症MPP组和对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。预后不良组患儿WBC、中性粒细胞百分比、CRP、ESR、PCT、LDH、D-D、FCGBP、SAA1、CXCL10明显高于预后良好组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示PCT(OR=1.603,95%CI:1.190~2.160)、FCGBP(OR=1.757,95%CI:1.115~2.770)、SAA1(OR=1.900,95%CI:1.327~2.720)及CXCL10(OR=1.704,95%CI:1.212~2.397)升高是MPP患儿不良预后的独立危险因素(均P<0.05)。血清PCT、FCGBP、SAA1、CXCL10联合检测对MPP患儿预后不良风险的诊断价值明显高于单个指标检测。结论MPP患儿血清FCGBP、SAA1及CXCL10水平升高,并且与MPP病情严重程度有关,是MPP患儿不良预后的独立危险因素。 展开更多
关键词 肺炎 支原体 igg结合蛋白的fc片段 血清淀粉样蛋白A1 趋化因子CXCL10
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GLP-1受体长效激动剂GLP-1-exendin-4/IgG4(Fc)融合蛋白的制备与生物效应 被引量:3
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作者 郑云程 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1668-1672,共5页
糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一种因胰岛素分泌不足及胰岛β-细胞功能缺陷引起的临床综合征,包括Ⅰ和Ⅱ型糖尿病。Ⅱ型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)属于胰岛素非依赖型糖尿病,是由于机体周边组织对胰岛素敏感性降低、... 糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一种因胰岛素分泌不足及胰岛β-细胞功能缺陷引起的临床综合征,包括Ⅰ和Ⅱ型糖尿病。Ⅱ型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)属于胰岛素非依赖型糖尿病,是由于机体周边组织对胰岛素敏感性降低、胰岛素分泌不足导致的。 展开更多
关键词 糖尿病 GLP-1-exendin-4/igg4(fc) 受体激动剂
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CD54和LFA-1的相互作用在6A8α-甘露糖苷酶表达抑制的JurkatT细胞的黏附性增强中的作用 被引量:1
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作者 曲莉 刘荣 +1 位作者 刘音 朱立平 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期433-437,共5页
目的研究CD54和LFA-1的相互作用在6A8α甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞(AS)的黏附性增强中的作用。方法用细胞凝集试验确证AS细胞间黏附的增强,用细胞与细胞间黏附分子1人IgG的Fc片段(ICAM1Fc)的黏附试验和阻断性抗CD11a抗体的阻断试... 目的研究CD54和LFA-1的相互作用在6A8α甘露糖苷酶表达抑制的Jurkat细胞(AS)的黏附性增强中的作用。方法用细胞凝集试验确证AS细胞间黏附的增强,用细胞与细胞间黏附分子1人IgG的Fc片段(ICAM1Fc)的黏附试验和阻断性抗CD11a抗体的阻断试验研究CD54LFA1的作用,用单克隆抗体MEM148检测AS细胞LFA-1亲和力的变化,用单克隆抗体NKIL16检测AS细胞LFA1亲合力的变化,用鬼笔环肽染色细胞骨架,用JurkatRaji细胞间的作用作模型研究6A8α甘露糖苷酶表达抑制对T和B细胞间黏附的影响,用ConA结合试验检测细胞中蛋白质N糖基化的变化。结果(1)AS细胞间的黏附性增强主要与CD54及CD11a表达的增强相关,也与LFA-1亲和力的增高相关;(2)AS细胞的细胞骨架发生重排;(3)AS细胞与Raji细胞间的黏附也增强;(4)ConA与AS细胞的结合增强。结论CD54和LFA-1的相互作用在ASJurkatT细胞的黏附性增强中起重要作用。细胞骨架重排也可能起作用。AS细胞的蛋白质发生了N-糖基化修饰。 展开更多
关键词 LFA-1 CD54 相互作用 表达抑制 黏附性 T细胞 强中 6A8α-甘露糖苷酶 Jurkat细胞 细胞间黏附分子 CD11A 单克隆抗体 N-糖基化 细胞凝集试验 细胞骨架重排 试验研究 fc片段 igg 结合试验 ConA Raji 亲和力 蛋白质 AS 阻断性
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肌内注射rAAV2/rTNFR:Fc对大鼠胶原性类风湿关节炎模型的治疗作用 被引量:4
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作者 周晓冰 高凯 +6 位作者 沈连忠 赵爱志 康禹 王刚 吴小兵 王军志 李波 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期507-511,共5页
目的观察肌肉注射2型重组腺相关病毒/肿瘤坏死因子受体:IgG1FC融合基因(rAAV2/rTNFR:Fc)对大鼠类风湿关节炎模型的治疗作用。方法皮内注射Ⅱ型胶原乳剂,诱发胶原性大鼠类风湿关节炎模型。将大鼠随机分为5组,每组10只,包括:正常对照组、... 目的观察肌肉注射2型重组腺相关病毒/肿瘤坏死因子受体:IgG1FC融合基因(rAAV2/rTNFR:Fc)对大鼠类风湿关节炎模型的治疗作用。方法皮内注射Ⅱ型胶原乳剂,诱发胶原性大鼠类风湿关节炎模型。将大鼠随机分为5组,每组10只,包括:正常对照组、模型对照组、载体对照组、地塞米松对照组和rAAV2/rTNFR:Fc肌肉注射给药组。观察各组大鼠的关节炎指数(AI)、关节肿胀程度、踝关节的X线变化、组织病理改变与动物血清肿瘤坏死因子(TNF)-α及其受体(TNFR)水平。结果与模型对照和载体对照组比较,肌肉注射rAAV2/rTNFR:Fc可使关节炎症明显减轻,AI降低、关节肿胀程度减轻;X线检查显示rAAV2/rTNFR:Fc给药组关节结构清晰,无明显骨质破坏。组织病理检查结果也表明,给药组关节腔内滑膜增生和炎性细胞浸润程度减轻,增生的血管翳肉芽组织减少;此外,与模型对照组和载体对照组比较,给药组血清中TNF-α水平显著下降(P<0.05),而TNFR水平明显上升(P<0.05)。结论肌肉注射给予rAAV2/rTNFR:Fc对大鼠胶原性类风湿关节炎模型具有明显的抗炎作用。 展开更多
关键词 2型重组腺相关病毒/肿瘤坏死因子受体:igg1fc融合基因 关节炎 类风湿 基因治疗 胶原性关节炎
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