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血清miR-372、miR-125b、miR-592表达水平对口腔癌的临床诊断价值 被引量：1
1
作者 陶冶 赵丽 肖锋 《齐齐哈尔医学院学报》 2024年第12期1108-1112,共5页
目的探讨血清miR-372、miR-125b、miR-592表达水平对口腔癌的临床诊断价值。方法选择2021年7月—2023年10月安徽医科大学第一附属医院和安徽医科大学第二附属医院收治的218例口腔病患者为研究对象,按口腔病是否发生癌病变分为口腔癌组(... 目的探讨血清miR-372、miR-125b、miR-592表达水平对口腔癌的临床诊断价值。方法选择2021年7月—2023年10月安徽医科大学第一附属医院和安徽医科大学第二附属医院收治的218例口腔病患者为研究对象,按口腔病是否发生癌病变分为口腔癌组(103例)和癌前病变组(115例)两组,实时荧光定量PCR检测血清miR-372、miR-125b、miR-592;多因素Logistic回归模型分析口腔癌发生的影响因素;ROC曲线分析血清miR-372、miR-125b、miR-592对口腔癌的诊断价值。结果口腔癌组患者的血清miR-372和miR-125b水平高于癌前病变组,而血清miR-592低于癌前病变组,差异有统计学意义(P<0.05);口腔癌组患者血清血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA125)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-8)水平显著高于癌前病变组,差异有统计学意义(P<0.05);口腔癌患者临床分期、分化程度与miR-372表达有关(χ^(2)=7.009、8.786,P<0.05);临床分期、淋巴结转移与miR-125b、miR-592表达有关(χ^(2)=10.310、9.993、5.946、9.062,P<0.05)。多因素分析显示,miR-372(OR=1.316)、miR-125b(OR=1.258)、miR-592(OR=0.907)、CEA(OR=1.792)、CA125(OR=1.854)、TNF-α(OR=1.539)和IL-8(OR=1.445)均为口腔癌发生的影响因素(P<0.05)。ROC结果显示,血清miR-372、miR-125b、miR-592诊断口腔癌的AUC分别为0.789、0.790、0.808,三者联合诊断口腔癌的敏感度为90.29%,特异度为83.48%,AUC为0.880,显著高于miR-372(Z=2.285,P=0.022)、miR-125b(Z=2.114,P=0.035)、miR-592(Z=1.870,P=0.042)单独诊断的AUC。结论口腔癌患者血清miR-372和miR-125b水平较高,miR-592水平较低,血清miR-372、miR-125b、miR-592对口腔癌诊断价值较高。 展开更多
关键词 口腔癌 mir-372 mir-125b mir-592 诊断价值
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多模态MRI联合血清miR-125b对乳腺癌新辅助化疗疗效的预测价值 被引量：1
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作者 邓勋伟 黄波 +1 位作者 汪鹏 陶洁 《放射学实践》 CSCD 北大核心 2024年第3期371-376,共6页
目的:探讨乳腺癌治疗前多模态MRI联合血清miR-125b水平预测新辅助化疗疗效的价值。方法:研究对象为于我院首次接受全程新辅助化疗并行手术切除治疗的90例女性乳腺癌患者。治疗前对患者进行乳腺MRI检查,记录病灶直径、边缘、形状、平扫T_... 目的:探讨乳腺癌治疗前多模态MRI联合血清miR-125b水平预测新辅助化疗疗效的价值。方法:研究对象为于我院首次接受全程新辅助化疗并行手术切除治疗的90例女性乳腺癌患者。治疗前对患者进行乳腺MRI检查,记录病灶直径、边缘、形状、平扫T_(2)WI图像上病灶内是否高信号和时间信号强度曲线(TIC)类型、表观扩散系数(ADC)、单纯扩散系数(D)、伪扩散系数(D*)及灌注分数(f)。依据Miller-Payne分级标准对病理学反应进行评估,分为病理反应不佳(NR)组和病理反应良好(R)组。结果:乳腺癌患者新辅助化疗后R组52例(57.78%),NR组38例(42.22%),两组的年龄、临床分期、病理类型、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。R组中Ki-67>14%的比例显著高于NR组(P<0.05)。R组与NR组的肿瘤直径、边缘、形状、T_(2)WI信号、D值和D*值差异均无统计学意义(P>0.05)。R组的TIC类型为Ⅲ型的比例显著高于NR组,ADC值显著低于NR组,f值显著高于NR组(P<0.05)。R组的血清miR-125b相对表达量显著低于NR组(t=-11.007,P<0.001)。二元Logistic回归分析结果显示,较高的ADC值、血清miR-125b水平和较低的f值是乳腺癌新辅助化疗后疗效为NR的独立危险因素(P<0.05)。ADC值、f值、血清miR-125b水平及三者联合预测乳腺癌新辅助化疗疗效的AUC分别为0.863(95%CI:0.799~0.927,P<0.001)、0.819(95%CI:0.744~0.893,P<0.001)、0.832(95%CI:0.755~0.908,P<0.001)和0.958(95%CI:0.929~0.988,P<0.001)。结论:治疗前多模态MRI联合血清miR-125b水平对乳腺癌患者新辅助化疗疗效具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 磁共振成像 血清mir-125b 新辅助化疗
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miR-125b通过Wnt/β-catenin信号通路促进胃癌细胞上皮间质转化和转移
3
作者 常帅 赵耀 +4 位作者 李顺乐 张迪 张立 翟宏军 吉鸿 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期718-725,共8页
目的探讨miR-125b促进胃癌细胞侵袭、转移以及上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法应用qRT-PCR检测miR-125b在胃癌组织及其相应的癌旁组织中的表达;胃癌细胞在上调或下调miR-125b时,Western blotting检测DKK3和SERPINA4的蛋白表达,双荧... 目的探讨miR-125b促进胃癌细胞侵袭、转移以及上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法应用qRT-PCR检测miR-125b在胃癌组织及其相应的癌旁组织中的表达;胃癌细胞在上调或下调miR-125b时,Western blotting检测DKK3和SERPINA4的蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-125b能否与DKK3、SERPINA4靶向结合,MKN45细胞共转染miR-125b抑制物和靶基因siRNA,用迁移、侵袭实验观察miR-125b能否通过DKK3、SERPINA4调节MKN45细胞的生物学功能,并观察EMT相关转录因子表达;进一步通过慢病毒转染胃癌细胞上调或下调血清反应因子(SRF)表达并经尾静脉注射裸鼠后观察体内实验中肺转移瘤的数目,探讨SRF对胃癌细胞转移的影响。结果qRT-PCR结果显示miR-125b在胃癌组织的表达上调,且与临床分期和淋巴结转移相关。双荧光素酶报告实验显示DKK3和SERPINA4是miR-125b在胃癌细胞中的直接靶点,并激活Wnt/β-catenin信号通路,进而促进EMT相关转录因子Twist1和Slug的转录,诱导EMT的发生,促进胃癌转移。体内体外实验证实转录因子SRF通过正向调节miR-125b的表达促进胃癌细胞的侵袭转移。结论SRF/miR-125b轴促进了胃癌细胞的EMT和转移,这些调节因子有望成为胃癌新的潜在治疗靶点或生物标志物。 展开更多
关键词 胃癌 上皮间质转化(EMT) 转移 mir-125b WNT/Β-CATENIN
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牦牛“海绵吸附”bta-miR-125b的lncRNA筛选验证及慢病毒载体构建
4
作者 贺鸿世 姚一龙 +5 位作者 索朗斯珠 孟朝轶 孔庆辉 席广银 郭敏 徐业芬 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第9期1-8,共8页
旨在筛选在牦牛卵泡发育过程中可能吸附bta-miR-125b的长链非编码RNA(lncRNA),并构建双荧光素酶载体与慢病毒过表达载体,为研究调控牦牛生殖相关lncRNA的功能及机制提供基础。利用miRanda与RNAhybrid数据库预测可能靶向牦牛bta-miR-125b... 旨在筛选在牦牛卵泡发育过程中可能吸附bta-miR-125b的长链非编码RNA(lncRNA),并构建双荧光素酶载体与慢病毒过表达载体,为研究调控牦牛生殖相关lncRNA的功能及机制提供基础。利用miRanda与RNAhybrid数据库预测可能靶向牦牛bta-miR-125b的lncRNAs,筛选出bta-miR-125b具有“海绵吸附”作用的lncRNAs,由RNAhybrid进行结合位点预测,筛选出最优的lncRNA;采集牦牛卵巢分离卵泡并提取总RNA构建cDNA池,以RT-PCR技术扩增筛选所得lncRNA;在此基础上利用pmir-GLO载体构建技术构建该lncRNA野生型及突变型双荧光素酶报告载体,并将其与bta-miR-125b mimics共转染至293T细胞,检测双荧光素酶活性;最后利用慢病毒载体构建技术将测序正确的lncRNA与pHBLV-CMV-MCS-EF1-ZsGreen-T2A-puro载体同源区的片段同源重组,通过慢病毒包装系统(psPAX2:pMD2G)包装后感染293T细胞,计算感染效率及滴度。结果:两个数据库中的lncRNA-ARS-UCD1.2与bta-miR-125b存在紧密结合位点,扩增出lncRNA-ARS-UCD1.2的序列全长为1552 bp;双荧光素酶活性检测表明牦牛lncRNA-ARS-UCD1.2与bta-miR-125b mimic具有靶向关系(P<0.01);同源重组后经酶切鉴定及测序验证表明成功构建了重组质粒,感染效率达(61.520±0.875)%,感染滴度为4×10^(8)TU/mL,表明lncRNA-ARS-UCD1.2过表达慢病毒载体成功构建。综上,本试验筛选出牦牛“海绵吸附”bta-miR-125b的lncRNA,并验证了两者的靶向结合关系,同时成功构建了该lncRNA的过表达慢病毒载体,为下一步深入研究lncRNA在细胞中的功能机制奠定了基础。 展开更多
关键词 牦牛 长链非编码RNA bta-mir-125b 海绵吸附 慢病毒载体
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急性心肌梗死合并收缩功能障碍患者血清miR-125b与依普利酮抗纤维化反应的关系
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作者 安彦君 吴建玮 +1 位作者 王晨 任晓军 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2024年第8期981-986,共6页
目的探讨血清miR-125b对依普利酮抗纤维化治疗反应评估的价值。方法前瞻性纳入2020年8月9日—2021年4月1日在太原市急救中心心内科接受依普利酮治疗的89例急性心肌梗死(AMI)伴或不伴ST段抬高且伴有左心室收缩功能障碍患者。采集受试者... 目的探讨血清miR-125b对依普利酮抗纤维化治疗反应评估的价值。方法前瞻性纳入2020年8月9日—2021年4月1日在太原市急救中心心内科接受依普利酮治疗的89例急性心肌梗死(AMI)伴或不伴ST段抬高且伴有左心室收缩功能障碍患者。采集受试者依普利酮治疗前和治疗6个月后的外周血浆样本。二维超声心动和多普勒超声心动图评估心脏收缩功能。采用实时荧光定量PCR法检测血浆中循环miR-125b表达水平;采用放射免疫测定法和酶联免疫吸附法分别检测血清Ⅲ型胶原氨基末端前肽(PⅢNP)和Ⅰ型胶原羧基末端前肽(PⅠCP)水平,计算基线至第6个月血清PⅢNP(?PⅢNP)和PⅠCP(?PⅠCP)水平变化。并记录依普利酮治疗6个月期间患者的主要不良心血管事件(MACEs)。结果依普利酮治疗6个月后,AMI患者收缩压与超声心动图参数较基线值显著改善(P<0.05),收缩压、血清PⅢNP和PⅠCP水平降低(P<0.05),但同时血钾和血钠浓度有所升高(P<0.05)。其中50例患者第6个月时血清PⅢNP水平值较基线值绝对减少,纳入PⅢNP降低亚组,其他39例患者?PⅢNP≤0,被纳入PⅢNP稳定/增加亚组。Logistic回归分析显示,女性、经皮冠状动脉介入治疗、血清miR-125b是PⅢNP降低的独立预测因子(P<0.05)。Spearman等级相关系数分析显示,PⅢNP降低的患者基线血清miR-125b与?PⅢNP(rs=-0.566,P<0.001)和?PⅠCP(rs=-0.524,P<0.001)存在负相关关系。进一步校正危险因素后,基线血清miR-125b仍是影响血清PⅢNP和PⅠCP降低程度的独立负相关因素(P<0.05)。此外,在AMI患者中,PⅢNP降低的患者累积MACEs发生率更低(调整后HR=0.431,95%CI:0.129~1.440,P=0.171),同样血清miR-125b水平>2.23患者无MACEs事件累积生存率更低(Log rank=32.568,P<0.001)。结论血清miR-125b高表达水平有助于识别依普利酮抗纤维化作用更显著的AMI患者。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 血清mir-125b 依普利酮 抗纤维化
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Linc-smad7通过靶向miR-125b/SIRT1轴促进胰腺癌细胞迁移和侵袭
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作者 韩丽丽 段文姣 +1 位作者 周维肖 张淑群 《西安交通大学学报（医学版）》 CSCD 北大核心 2024年第1期112-118,共7页
目的探讨长链非编码RNA smad7(long non-coding RNA smad7,Linc-smad7)对胰腺癌(pancreatic cancer,PC)细胞侵袭、迁移的作用及其作用机制。方法qRT-PCR检测PC组织及细胞系中Linc-smad7的表达;Transwell小室观察过表达Linc-smad7对PaCa-... 目的探讨长链非编码RNA smad7(long non-coding RNA smad7,Linc-smad7)对胰腺癌(pancreatic cancer,PC)细胞侵袭、迁移的作用及其作用机制。方法qRT-PCR检测PC组织及细胞系中Linc-smad7的表达;Transwell小室观察过表达Linc-smad7对PaCa-2细胞迁移、侵袭能力的影响;荧光素酶报告基因检测Linc-smad7对miR-125b,以及miR-125b对沉默调节蛋白1(Sirtuin1,SIRT1)的结合作用;qRT-PCR检测Linc-smad7在PaCa-2细胞中对miR-125b表达的调控作用,qRT-PCR、Western blotting检测miR-125b对SIRT1表达的调控作用。结果Linc-smad7在PC组织及细胞系中明显升高;Linc-smad7表达上调的PaCa-2细胞迁移、侵袭能力增强,miR-125b表达下降;miR-125b表达上调后,SIRT1表达显著下降;荧光素酶报告基因结果提示Linc-smad7直接靶向结合miR-125b,miR-125b直接结合SIRT1;过表达Linc-smad7或是下调miR-125b表达可逆转SIRT1沉默对PaCa-2细胞侵袭、迁移能力的影响。结论Linc-smad7通过miR-125b/SIRT1轴促进PaCa-2细胞侵袭和迁移。 展开更多
关键词 胰腺癌 长链非编码RNA smad7(Linc-smad7) mir-125b 迁移 侵袭
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miR-125b、miR-140联合超声造影在肝脏占位性病变良恶性诊断中的应用
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作者 吴侠 范智慧 黄玮 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2024年第9期821-825,共5页
目的:研究miR-125b、miR-140联合超声造影技术在肝占位性病变良恶性诊断中的效能及价值。方法:连续纳入并回顾分析2022年6月至2023年6月本院收治的肝脏占位性病变患者共125例,根据病理活检结果,将患者分为良性组(n=65)及恶性组(n=60),... 目的:研究miR-125b、miR-140联合超声造影技术在肝占位性病变良恶性诊断中的效能及价值。方法:连续纳入并回顾分析2022年6月至2023年6月本院收治的肝脏占位性病变患者共125例,根据病理活检结果,将患者分为良性组(n=65)及恶性组(n=60),并选取同期的健康体检者作为对照组(n=56),通过qRT-PCR实验检测血清miR-125b,miR-140的相对表达水平,受试者进行超声造影检查。收集并分析受试者临床基本资料,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-125b,miR-140联合超声造影技术对肝脏占位性病变患者的诊断价值。结果:与对照组相比,肝占位性病变组患者的血清miR-125b、miR-140水平显著降低(P<0.05),且与良性组相比,恶性组患者的血清miR-125b、miR-140水平也显著降低(P<0.05)。超声造影结果诊断发现良性病变患者68例,恶性病变患者57例,进一步分析超声造影特征发现,恶性病变组患者早增强、高增强和快消退比例显著高于良性病变组(P<0.05)。临床基本资料分析发现:恶性组患者的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)均显著高于良性组(P<0.05),并且两组患者的肿瘤直径及病理类型具有显著统计学差异(P<0.05),两组患者的年龄、性别无统计学差异(P>0.05)。绘制ROC曲线发现血清miR-125b、miR-140以及两者联合诊断的AUC分别为0.768、0.841、0.903,且血清miR-125b、miR-140与超声造影联合诊断的特异性及预测准确率均高于miR-125b、miR-140、超声造影单独检测。结论:血清miR-125b、miR-140联合超声造影在肝占位性病变良恶性诊断中具有较高的临床价值,可为临床应用提供参考。 展开更多
关键词 肝脏占位性病变 超声造影 mir-125b mir-140
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肺癌患者miR-125b、miR-145、miR-146a表达与肺部感染的关系探讨
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作者 朱磊 曹建伟 《医学检验与临床》 2024年第1期66-70,共5页
目的:探讨肺癌患者miR-125b、miR-145、miR-146a表达与肺部感染的关系。方法:选取2021年1月-2023年4月于我院进行手术治疗的163例肺癌患者为研究对象,根据术后3d是否发生肺部感染将患者分为感染组(28例)和未感染组(135例)。比较2组术后... 目的:探讨肺癌患者miR-125b、miR-145、miR-146a表达与肺部感染的关系。方法:选取2021年1月-2023年4月于我院进行手术治疗的163例肺癌患者为研究对象,根据术后3d是否发生肺部感染将患者分为感染组(28例)和未感染组(135例)。比较2组术后24h血清miR-125b、miR-145、miR-146a水平,分析术后24h血清各指标水平与临床有差异指标的相关性,Logistic回归分析术后发生肺部感染的危险因素,ROC分析术后24h血清各指标联合检测对术后发生肺部感染的预测价值。结果:2组合并糖尿病、合并慢性阻塞性肺疾病(COPD)、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分比较,差异显著(P<0.05);术后24h感染组血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达水平高于未感染组,且各指标水平与合并糖尿病、合并COPD、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分均呈正相关(P<0.05);合并糖尿病、合并COPD、手术时间、术后24hAPACHEⅡ评分、术后24h血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达水平为肺癌患者术后发生肺部感染的危险因素,且血清各指标联合预测术后发生肺部感染的AUC为0.817,大于各单项指标(P<0.05)。结论:肺癌患者术后并发肺部感染人群血清miR-125b、miR-145、miR-146a表达上调,其联合检测可作为早期预测术后是否发生肺部感染的有效指标。 展开更多
关键词 肺癌 mir-125b mir-145 mir-146A 肺部感染
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脓毒症患者外周血miR-125b、miR-150表达及其临床意义
9
作者 张瑞英 李缺缺 苏丽 《中国急救复苏与灾害医学杂志》 2024年第2期194-198,共5页
目的 探讨脓毒症患者外周血微小核糖核酸-125b(miR-125b)、微小核糖核酸-150(miR-150)表达及其临床意义。方法 选取邢台市中心医院收治的103例脓毒症患者为研究组,另选取体检健康者82例为健康组,均测定外周血miR-125b、miR-150表达及血... 目的 探讨脓毒症患者外周血微小核糖核酸-125b(miR-125b)、微小核糖核酸-150(miR-150)表达及其临床意义。方法 选取邢台市中心医院收治的103例脓毒症患者为研究组,另选取体检健康者82例为健康组,均测定外周血miR-125b、miR-150表达及血清白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平。对比研究组、健康组各指标水平,采用Pearson相关性分析法分析脓毒症患者miR-125b、miR-150表达与IL-6、CRP、PCT水平的关系;比较不同严重程度脓毒症患者及不同预后患者的miR-125b、miR-150表达;采用多因素Logistic回归分析法分析miR-125b、miR-150表达与预后的关系;通过受试者工作特征曲线分析miR-125b、miR-150表达对脓毒症预后的预测价值。结果 研究组外周血miR-125b表达与IL-6、CRP、PCT水平分别为(2.43±0.35)、(159.42±26.81)pg/mL、(115.47±20.38)mg/L、(10.57±2.03)ng/mL,均高于健康组(t=31.012、52.149、48.978、46.945,均P=0.000),miR-150表达(0.21±0.04)低于健康组(t=52.008,P=0.000);经Pearson相关性分析,脓毒症患者外周血miR-125b表达与IL-6(r=0.706,P=0.016)、CRP(r=0.711,P=0.013)、PCT(r=0.759,P=0.001)水平均呈正相关,miR-150与IL-6(r=-0.702,P=0.018)、CRP(r=-0.709,P=0.015)、PCT(r=-0.728,P=0.006)水平均呈负相关;脓毒症者外周血miR-125b表达(2.16±0.43)低于严重脓毒症者(2.82±0.27)(t=8.815,P=0.000),脓毒症者外周血miR-150表达(0.24±0.02)高于严重脓毒症者(0.16±0.03)(t=16.248,P=0.000);入院28 d生存者外周血miR-125b表达(2.25±0.41)低于死亡者(3.13±0.36)(t=8.982,P=0.000),生存者外周血miR-150表达(0.23±0.04)高于死亡者(0.13±0.02)(t=11.078,P=0.000);年龄、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、疾病严重程度及外周血miR-125b表达均是脓毒症患者预后的危险因素(OR=2.438、2.689、2.866、2.824,P=0.036、0.012、0.000、0.005),miR-150表达是其保护因素(OR=0.390,P=0.003);外周血miR-125b、miR-150表达预测脓毒症预后的最佳截断点分别为2.854、0.179,灵敏度分别为76.19%、80.95%,特异度分别为79.27%、75.61%,曲线下面积分别为0.861、0.843。结论 与健康人群比较,脓毒症患者外周血miR-125b表达升高,而miR-150表达降低,且miR-125b、miR-150表达均与炎症因子水平、疾病严重程度及预后相关,并对预后具有一定的预测价值,可作为临床判断病情严重程度及预后的指标。 展开更多
关键词 脓毒症 微小核糖核酸-125b(mir-125b) 微小核糖核酸-150(mir-150) 严重程度 预后
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血清miR-873、miR-125b-2表达水平联合检测对早期异位妊娠诊断与治疗效果的评估价值 被引量：2
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作者 马汇 李利荣 李光 《海南医学》 CAS 2023年第20期2976-2980,共5页
目的 探索早期异位妊娠(EP)孕妇的血清miR-873、miR-125b-2表达水平,及两者联合检测对患者诊断与治疗效果的评估价值。方法 选取2019年1月至2021年1月榆林市第一医院收治的110例EP患者作为观察组,其中治疗后有效组90例,无效组20例,另选... 目的 探索早期异位妊娠(EP)孕妇的血清miR-873、miR-125b-2表达水平,及两者联合检测对患者诊断与治疗效果的评估价值。方法 选取2019年1月至2021年1月榆林市第一医院收治的110例EP患者作为观察组,其中治疗后有效组90例,无效组20例,另选取100例同时期来我院体检正常妊娠孕妇作为对照组。检测并比较观察组孕妇治疗前和对照组的血清miR-873、miR-125b-2水平,同时比较有效组和无效组患者的血清miR-873、miR-125b-2水平。采用Pearson相关性分析血清miR-873与miR-125b-2水平的相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-873、miR-125b-2及两者联合诊断EP和评估治疗效果的价值。结果 观察组患者治疗前的血清miR-873、miR-125b-2的相对表达量分别为0.46±0.14、2.10±0.58,明显低于对照组的0.82±0.22、4.14±0.83,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,有效组患者的血清miR-873、miR-125b-2的相对表达量分别为0.76±0.20、3.71±0.64,明显高于无效组的0.50±0.21、1.72±0.51,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson相关性分析结果显示,血清miR-873与miR-125b-2水平呈正相关(r=0.573,P<0.05);经ROC分析结果显示,miR-873以0.59为截断值时诊断EP的灵敏度为80.45%,特异度为78.13%,ROC曲线下面积为0.884 (95%CI:0.843~0.933,P=0.001);miR-125b-2以2.86为截断值时诊断EP的灵敏度为85.91%,特异度为82.08%,ROC曲线下面积为0.892 (95%CI:0.854~0.939,P=0.001);两者联合诊断的灵敏度为93.36%,特异度为89.25%,ROC曲线下面积为0.943 (95%CI:0.902~0.971,P=0.001),明显高于miR-873或miR-125b-2单独检测(P<0.05)。结论 miR-873与miR-125b-2在EP患者血清中表达水平显著降低,两者联合检测可提高对EP患者诊断和治疗效果的评估价值。 展开更多
关键词 异位妊娠 mir-873 mir-125b-2 诊断 疗效 评估价值
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miR-125b调控动物肌肉生长发育的研究进展 被引量：2
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作者 徐永杰 陈诺 +2 位作者 陈佳佳 于树龙 程晓芳 《信阳师范学院学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第2期321-329,共9页
miR-125b属于miR-125家族,是一种小的、高度保守的ncRNA,在多种生物学功能中发挥关键作用。miR-125b对动物肌肉组织(包括骨骼肌、心肌和平滑肌)发育的调控受到广泛关注。对miR-125b的生物起源和生物学功能以及在动物肌肉组织发育的调控... miR-125b属于miR-125家族,是一种小的、高度保守的ncRNA,在多种生物学功能中发挥关键作用。miR-125b对动物肌肉组织(包括骨骼肌、心肌和平滑肌)发育的调控受到广泛关注。对miR-125b的生物起源和生物学功能以及在动物肌肉组织发育的调控进行了总结,并着重关注其对动物骨骼肌、心肌、平滑肌细胞发育过程及疾病的分子机制研究,为miR-125b在肌肉疾病的治疗和畜禽产肉性能的分子改良提供新的参考依据。 展开更多
关键词 mir-125b 肌肉 生长发育 疾病
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miR-125b-5p通过负调控RAB3D基因表达抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移 被引量：2
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作者 谈秋瑜 吴旭 +2 位作者 纪方 吴少云 颜亮 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期68-75,共8页
目的 探讨miR-125b-5p调控RAB3D在骨肉瘤增殖与迁移中的作用机制。方法 通过qRT-PCR检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达水平。骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过EDU和Tra... 目的 探讨miR-125b-5p调控RAB3D在骨肉瘤增殖与迁移中的作用机制。方法 通过qRT-PCR检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达水平。骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化;通过生物信息学软件预测miR-125b-5p可能调控的靶基因为RAB3D;通过Western blot检测正常骨细胞h FOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中RAB3D的表达水平;骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过Western blot及qRT-PCR实验检测骨肉瘤细胞中RAB3D mRNA及蛋白表达水平;并在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染升高或降低RAB3D的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤增殖和迁移的变化;随后在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染同时升高miR-125b-5p和RAB3D的表达量,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化。结果 qRT-PCR结果表明在骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达明显下调(P<0.05)。3种生物信息学软件预测RAB3D是miR-125b-5p可能调控的靶基因。qRT-PCR、Western blot结果显示,miR-125b-5p表达量升高,骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中RAB3D的蛋白表达量下降(P<0.05);miR-125b-5p表达量降低,骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中RAB3D的蛋白表达量下降(P<0.05),而RAB3D的mRNA水平没有发生变化。细胞增殖及迁移实验结果显示,miR-125b-5p与RAB3D对细胞增殖及迁移的影响相反,而同时在骨肉瘤细胞内升高miR-125b-5p与RAB3D的表达量,RAB3D对骨肉瘤细胞增殖及迁移的影响在重新升高miR-125b-5p表达量时被阻断(P<0.05)。结论 miR-125b-5p在转录后水平通过调控RAB3D的表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 mir-125b-5p RAb3D 骨肉瘤细胞 细胞增殖 细胞迁移
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miR-125b通过靶向B7-H4对再生障碍性贫血T细胞活化的影响
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作者 刘晓 王学霞 +3 位作者 孙洪坤 高娜 刘增艳 刘晓丹 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1797-1803,共7页
目的:探讨miR-125b在再生障碍性贫血(AA)患者T细胞活化中的作用及分子机制。方法:纳入山东省滨州医学院附属医院从2018年1月至2021年10月30例AA患者,15名健康个体作为健康对照(HC)组,分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-q PCR检测PBMC中miR-... 目的:探讨miR-125b在再生障碍性贫血(AA)患者T细胞活化中的作用及分子机制。方法:纳入山东省滨州医学院附属医院从2018年1月至2021年10月30例AA患者,15名健康个体作为健康对照(HC)组,分离外周血单个核细胞(PBMC),RT-q PCR检测PBMC中miR-125b、B7-H4 mRNA的水平。免疫磁珠分选AA患者和健康对照者naive T细胞和non-naive T细胞,检测miR-125b、B7-H4 mRNA的水平。转染慢病毒LV-NC inhibitor、LV-miR-125b inhibitor至细胞中,流式细胞术检测T细胞活化。双荧光素酶报告基因实验检测miR-125b和B7-H4之间的靶向关系。RT-q PCR和Western blot检测miR-125b、CD40L、ICOS、IL-10 mRNA和B7-H4蛋白的水平。结果:与HC组比较,AA患者PBMC中miR-125b表达上调(P<0.05),B7-H4 mRNA表达下调(P<0.05),CD4+CD69+T细胞和CD8+CD69+T细胞比例较高(P<0.05)。AA患者的naive T细胞和non-naive T细胞中miR-125b的表达均显著上调,B7-H4 mRNA表达下调(P<0.05),且non-naive T细胞较naive T细胞更明显(P<0.05)。与NC inhibitor组比较,miR-125b inhibitor组中miR-125b的表达显著降低(P<0.05),PBMC中CD4+和CD8+T细胞上CD69的表达水平显著降低(P<0.05),miR-125b inhibitor和B7-H4-3′UTR-WT共转染后荧光素酶活性显著升高(P<0.05)。与NC inhibitor组比较,miR-125b inhibitor组细胞中B7-H4 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05)。与miR-125b inhibitor+shRNA组比较,miR-125b inhibitor+sh-B7-H4组CD4+和CD8+T细胞上的CD69表达水平显著升高(P<0.05),CD40L、ICOS和IL-10mRNA水平亦显著升高(P<0.05)。结论:miR-125b可能通过靶向B7-H4促进AA患者T细胞活化。 展开更多
关键词 再生障碍性贫血 T细胞活化 mir-125b b7-H4
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miR-125b对肝脏血管新生调控作用的实验研究
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作者 王佳慧 郑洋 +5 位作者 汪磊 黄艳青 段雪琳 刘艳芳 赵铁建 梁天坚 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2051-2057,共7页
目的探讨miR-125b对肝脏血管新生的调控作用,为肝纤维化的防治提供新的靶点。方法用miR-125b模拟物和抑制物对人肝窦内皮细胞进行转染,而后使用qRT-PCR和ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF)、分化抗原簇31(CD31)、血管性血友病因子(vWF)... 目的探讨miR-125b对肝脏血管新生的调控作用,为肝纤维化的防治提供新的靶点。方法用miR-125b模拟物和抑制物对人肝窦内皮细胞进行转染,而后使用qRT-PCR和ELISA检测血管内皮生长因子(VEGF)、分化抗原簇31(CD31)、血管性血友病因子(vWF)、Ⅳ型胶原(CollagenⅣ)、层粘连蛋白(LN)的mRNA和蛋白表达,荧光探针检测一氧化氮(NO)的表达;扫描电镜检测人肝窦内皮细胞表面窗孔的改变;血管形成实验观察各组血管新生情况;双荧光素酶报告基因实验验证miR-125b与VEGF的靶向关系。结果qRT-PCR和ELISA检测显示与阴性对照组相比,miR-125b模拟物转染后VEGF、CD31、vWF、CollagenⅣ、LN的mRNA和蛋白表达下降(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后VEGF、CD31、vWF、CollagenⅣ、LN的mRNA和蛋白表达增加(P<0.05);荧光探针检测显示与阴性对照组相比,miR-125b模拟物转染后NO平均荧光强度表达下降(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后NO平均荧光强度表达增加(P<0.05);电镜检测发现与阴性对照组相比,miR-125b模拟物转染后人肝窦内皮细胞表面窗孔数量增加(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后人肝窦内皮细胞表面窗孔数量下降(P<0.05);血管形成实验检测显示与阴性对照组相比,miR-125b模拟物转染后血管新生数量下降(P<0.05),而miR-125b抑制物转染后血管新生数量增加(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示与阴性对照组相比,VEGF野生型转染miR-125b模拟物相对荧光强度表达降低(P<0.05),而VEGF突变型转染miR-125b模拟物相对荧光强度表达降低(P>0.05)。结论miR-125b能够抑制肝脏血管新生,从而发挥抗肝纤维化的作用,为慢性肝病防治和新药研发提供新的参考。 展开更多
关键词 mir-125b 血管新生 肝纤维化 血管内皮生长因子 肝窦内皮细胞
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circVAPA通过miR-125b/HOXA7轴逆转口腔癌细胞化疗耐药的机制研究
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作者 吕飞飞 李昆珊 +1 位作者 胡燕 仇永乐 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第8期1398-1404,共7页
目的:探究circVAPA通过miR-125b/HOXA7轴逆转口腔癌细胞化疗耐药的机制研究。方法:将SCC9/DDP细胞分为SCC9/DDP组、si-NC组、si-VAPA组、miR-125b组、miR-NC组、pcDNA-VAPA组、miR-HOXA7组。qRT-PCR检测细胞中circVAPA和miR-125b表达,MT... 目的:探究circVAPA通过miR-125b/HOXA7轴逆转口腔癌细胞化疗耐药的机制研究。方法:将SCC9/DDP细胞分为SCC9/DDP组、si-NC组、si-VAPA组、miR-125b组、miR-NC组、pcDNA-VAPA组、miR-HOXA7组。qRT-PCR检测细胞中circVAPA和miR-125b表达,MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测细胞耐药、增殖、侵袭和凋亡,蛋白质印迹法检测细胞中HOXA7蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验验证VAPA、miR-125b和HOXA7的靶向关系。结果:和HOK相比,SCC9和SCC9/DDP细胞中circVAPA表达明显升高,miR-125b表达明显降低(P<0.05);且SCC9/DDP细胞中circVAPA表达明显高于SCC9细胞,miR-125b表达明显低于SCC9细胞(P<0.05)。和SCC9/DDP组相比,si-VAPA组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显降低,细胞凋亡能力明显增加(P<0.05)。和miR-NC组相比,miR-125b组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显降低,细胞凋亡能力明显增加(P<0.05)。靶向关系结果显示,miR-125b组荧光素酶活性明显低于miR-NC组(P<0.05);si-VAPA组细胞中miR-125b表达明显高于si-NC组(P<0.05),miR-125b组细胞中HOXA7表达明显低于miR-NC组(P<0.05)。和miR-125b组相比,pcDNA-VAPA组和miR-HOXA7组细胞IC 50浓度、细胞耐药指数、细胞侵袭能力和细胞中HOXA7蛋白表达明显升高,细胞凋亡能力明显降低(P<0.05)。结论:低表达circVAPA可通过调控miR-125b/HOXA7轴来逆转口腔癌细胞化疗耐药,抑制口腔癌化疗耐药细胞增殖、侵袭并诱导凋亡。 展开更多
关键词 circVAPA mir-125b/HOXA7轴 口腔癌细胞 化疗耐药
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LncRNA-MALAT1/miR-125b-5p/PDCD4分子轴参与心力衰竭发生发展的机制研究
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作者 赖纪英 郭宗文 +3 位作者 岳霖琳 沈恩芳 欧阳松茂 朱宏泉 《中国医药指南》 2023年第28期70-73,共4页
目的 探讨LncRNA-MALAT1/miR-125b-5p/PDCD4分子轴参与心力衰竭发生发展的机制。方法 购置SD大鼠40只,随机取大鼠10只为对照组,剩余大鼠30只采用结扎大鼠左冠状动脉前降支造成心肌梗死后形成心肌梗死模型,于第14日取材组织并完成HE染色... 目的 探讨LncRNA-MALAT1/miR-125b-5p/PDCD4分子轴参与心力衰竭发生发展的机制。方法 购置SD大鼠40只,随机取大鼠10只为对照组,剩余大鼠30只采用结扎大鼠左冠状动脉前降支造成心肌梗死后形成心肌梗死模型,于第14日取材组织并完成HE染色;观察组随机分为模型组、空载组和MALAT1沉默组,利用慢病毒转染干扰LncRNA-MALAT1序列(LV-shMALAT1)及其空载(LV-Control)观察治疗大鼠的干预效果。采用实时荧光PCR法和Western Blot检测LncRNA MALAT1、miR-125b-5p和PDCD4表达水平;采用酶联免疫吸附试验测定炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)。结果 观察组EF及左室短轴缩短率低于对照组(P<0.05);MALAT1沉默组EF及左室短轴缩短率高于模型组及空载组(P<0.05);HE染色结果显示,模型组和空载组心肌纤维断裂,细胞核紊乱、肥大、间隙增宽、染色加深;MALAT1沉默组心肌纤维断裂有所改善,细胞排列相对整齐;MALAT1沉默组LncRNA MALAT1 mRNA、miR-125b-5p及蛋白表达低于模型组与空载组(P<0.05);PDCD4mRNA及蛋白表达高于模型组与空载组(P<0.05);模型组与空载组炎性因子TNF-α和IL-1β水平差异无统计学意义(P>0.05);MALAT1沉默组炎性因子TNF-α和IL-1β水平低于模型组与空载组(P<0.05)。结论 心力衰竭大鼠中LncRNA-MALAT1表达显著下调,能竞争性结合miR-125b-5p,使其解除对PDCD4的抑制,促进PDCD4表达,从而抑制炎性反应。 展开更多
关键词 心力衰竭 慢病毒转染 大鼠 LncRNA-MALAT1 mir-125b-5p PDCD4分子轴
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黄芩素经由miR-125b-5p/IRF4轴进而促进喉癌细胞死亡并抑制其侵袭的机制研究 被引量：1
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作者 王剑 孙永东 +4 位作者 周兴玮 刘雷 陈龙 童兴科 朱佳丽 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2023年第11期1209-1218,共10页
目的:探讨黄芩素诱导人喉癌细胞凋亡的机制。方法:选取AMC-HN-8细胞为研究对象,以不同浓度黄芩素(0、10、30、100、300μmol/L)作用于细胞,采用CCK-8法检测其半数抑制浓度(IC50);采用蛋白质印迹法(Western blot)检测Bax、cleaved-caspas... 目的:探讨黄芩素诱导人喉癌细胞凋亡的机制。方法:选取AMC-HN-8细胞为研究对象,以不同浓度黄芩素(0、10、30、100、300μmol/L)作用于细胞,采用CCK-8法检测其半数抑制浓度(IC50);采用蛋白质印迹法(Western blot)检测Bax、cleaved-caspase-3、Cyto-c、IRF4蛋白表达;RTqPCR检测miR-125b-5p和IRF4的表达;双荧光素酶报告基因验证Targetscan预测结果(miR-125b-5p与IRF4-3'UTR的结合);凋亡和坏死抑制剂探索黄芩素诱导喉癌细胞的死亡方式。再将AMCHN-8分为:空白组、黄芩素(IC50)、miR-125b-5p inhibitor组、黄芩素+inhibitor NC组、黄芩素+miR-125b-5p inhibitor组,细胞侵袭和克隆形成实验分别检测细胞的侵袭和增殖能力;采用流式细胞术检测细胞凋亡。结果:黄芩素以剂量依赖性方式抑制AMC-HN-8细胞的增殖,其IC50值为47.31μmol/L;与空白组相比,47.31μmol/L的黄芩素诱导了细胞凋亡和抑制了细胞侵袭,同时上调了miR-125b-5p的表达,抑制了IRF4的mRNA和蛋白的水平。荧光素酶结果表明,相对于NC模拟物(mimic)组,miR-125b-5p mimic能够抑制IRF4-3'UTR启动子的活性。黄芩素以凋亡的方式诱导喉癌细胞死亡。另外,47.31μmol/L的黄芩素与miR-125b-5p inhibitor联合影响AMC-HN-8细胞行为学的结果表明,与空白组比较,黄芩素组细胞克隆数减少,侵袭能力减弱,凋亡增加;miR-125b-5p inhibitor组细胞克隆数增加,侵袭能力加强,凋亡减少;黄芩素+inhibitor NC组则与黄芩素一致,inhibitor NC对细胞行为学没有显著影响;黄芩素+miR-125b-5p inhibitor组细胞克隆、侵袭、凋亡则介于黄芩素组与miR-125b-5p inhibitor组之间。结论:黄芩素能抑制AMC-HN-8细胞增殖,其机制可能与miR-125b-5p靶向抑制IRF4的表达,诱导促凋亡蛋白Bax、cleaved-caspase-3、Cyto-c,抑制凋亡抑制蛋白Bcl-2从而诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 喉癌细胞 黄芩素 细胞凋亡 mir-125b-5p IRF4
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Circ_LAS1L/miR-125b/Sfrp5通路抑制急性心肌梗死后心肌纤维化 被引量：1
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作者 马吉杰 李溪 《宁夏医科大学学报》 2023年第1期7-13,共7页
目的探讨circ_LAS1L/miR-125b/Sfrp5通路在心肌纤维化(MF)过程中的作用。方法心肌成纤维细胞转染后加入AngⅡ刺激培养;构建急性心肌梗死(AMI)小鼠模型后,尾静脉分别注射miR-125b antagomir、miR-125b antagomir加Sfrp5 siRNA、Sfrp5过... 目的探讨circ_LAS1L/miR-125b/Sfrp5通路在心肌纤维化(MF)过程中的作用。方法心肌成纤维细胞转染后加入AngⅡ刺激培养;构建急性心肌梗死(AMI)小鼠模型后,尾静脉分别注射miR-125b antagomir、miR-125b antagomir加Sfrp5 siRNA、Sfrp5过表达质粒。CCK-8检测细胞存活力,Transwell检测细胞迁移,荧光定量PCR、Western blot、ELISA和免疫组化检测相关因子的表达水平,Masson染色检测小鼠MF水平。结果AngⅡ抑制circ_LAS1L和Sfrp5的表达,而促进miR-125b、α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达(P均<0.05)。circ_LAS1L过表达、miR-125b inhibitors和Sfrp5过表达均能明显减弱AngⅡ的促存活、活化和迁移作用(P均<0.05)。miR-125b、α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ在AMI小鼠中的表达上调,而Sfrp5表达减少(P均<0.05)。抑制miR-125b表达和上调Sfrp5表达均能显著减少梗死面积和胶原纤维数量,并下调α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达;同时抑制miR-125b和Sfrp5表达时,梗死面积和纤维化水平并无改善(P均>0.05)。结论miR-125b/Sfrp5通路上调可抑制小鼠急性心肌梗死后纤维化。 展开更多
关键词 AngⅡ 急性心肌梗死 心肌纤维化 环状RNAs mir-125b 分泌型卷曲相关蛋白5
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miR-125b-2-3p表达对鼻咽癌细胞HNE1增殖和凋亡的影响
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作者 陶露 汤迎凯 +1 位作者 韦卓利 项平 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第9期1192-1199,共8页
目的探讨miR-125b-2-3p表达对鼻咽癌细胞HNE1增殖和凋亡的影响。方法荧光定量PCR检测miR-125b-2-3p在人永生化鼻咽上皮细胞NP69和鼻咽癌细胞中的表达。荧光定量PCR检测上调和下调miR-125b-2-3p表达转染效率。实验分为control组(未处理)... 目的探讨miR-125b-2-3p表达对鼻咽癌细胞HNE1增殖和凋亡的影响。方法荧光定量PCR检测miR-125b-2-3p在人永生化鼻咽上皮细胞NP69和鼻咽癌细胞中的表达。荧光定量PCR检测上调和下调miR-125b-2-3p表达转染效率。实验分为control组(未处理)、mimics NC组(Lip 2000+mimics NC)、miR-125b-2-3p mimics组(Lip 2000+miR-125b-2-3p mimics)、inhibitor NC组(Lip 2000+inhibitor NC)和miR-125b-2-3p inhibitor组(Lip 2000+miR-125b-2-3p inhibitor)。CCK-8实验、细胞集落形成实验和活细胞/死细胞双染色实验检测细胞增殖的情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;DAPI细胞核染色检测细胞核的形态变化;线粒体膜电位检测细胞早期凋亡情况。结果与人永生化鼻咽上皮细胞NP69相比,鼻咽癌细胞中miR-125b-2-3p的表达较高(P<0.05)。与control组和mimics NC组相比,miR-125b-2-3p mimics组miR-125b-2-3p表达上调(P<0.01);与control组和inhibitor NC组相比,miR-125b-2-3p inhibitor组miR-125b-2-3p表达下调(P<0.01)。与mimics NC组相比,miR-125b-2-3p mimics组细胞增殖能力较强(P<0.01),细胞凋亡能力较弱(P<0.01),线粒体膜电位较高(P<0.01);相较于inhibitor NC组,miR-125b-2-3p inhibitor组细胞增殖能力被抑制(P<0.01),细胞凋亡能力较强(P<0.01),核固缩核碎裂较多,线粒体膜电位较低(P<0.05)。结论下调miR-125b-2-3p能抑制鼻咽癌细胞HNE1的增殖,促进细胞的凋亡。 展开更多
关键词 mir-125b-2-3p 鼻咽癌 细胞增殖 细胞凋亡 HNE1
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BMSCs分泌的miR-125b通过外泌体途径对体外成骨分化的影响
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作者 陈超 李昊天 +3 位作者 王槐骏 杨城 李玮民 王春庆 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 CSCD 北大核心 2023年第4期345-353,共9页
目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分泌的miR-125b是否通过外泌体途径抑制其体外成骨分化。方法提取BMSCs原代,通过流式细胞仪进行其表面抗原(CD45、CD90)的鉴定来确定纯度,分别进行成骨诱导,茜素红... 目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分泌的miR-125b是否通过外泌体途径抑制其体外成骨分化。方法提取BMSCs原代,通过流式细胞仪进行其表面抗原(CD45、CD90)的鉴定来确定纯度,分别进行成骨诱导,茜素红染色检测成骨效果;成脂诱导,油红染色检测成脂效果。检测P3代上清液外泌体标志性蛋白CD9、CD63的表达量,电镜下观察确定外泌体提取成功。成骨诱导后的第0、7、14、21天进行qRT-PCR测定外泌体内miR-125b及细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runx2的mRNA的表达量。BMSCs侵染miR-125b模拟物及模拟物阴性对照剂,miR-125b抑制剂及其抑制物阴性对照剂,转染后验证转染效率。转染后五组(前四组+生理盐水空白对照组)细胞上清液外泌体提取,提取后与BMSCs共培养,继续成骨诱导48 h,qPCR及蛋白质免疫印迹(Western Blot)分别测定BMSCs细胞ALP、Runx2、miR-125b的表达量。结果(1)成功分离的BMSCs向成脂、成骨分化。(2)成骨诱导分化期间,P3代BMSCs的成骨标志基因ALP mRNA表达量明显增加,Runx2基因的表达趋势与其相同,而在上清液所提取的外泌体中,miR-125b趋势相反,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)转染后共培养组中模拟物组较模拟物阴性对照组其成骨标志基因ALP、Runx2 mRNA和ALP蛋白表达显著下降,而抑制组较抑制剂阴性对照组其成骨基因ALP、Runx2 mRNA和ALP蛋白表达显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论BMSCs来源miR-125b能通过外泌体途径抑制其体外成骨分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 外泌体 mir-125b 成骨分化
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