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miR-29a-3p抑制非小细胞肺癌增殖和迁移
1
作者 朱俊 姜云 +1 位作者 徐莹莹 刘剑 《交通医学》 2023年第1期28-32,共5页
目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)中miR-29a-3p的表达及其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:选取12例手术切除的NSCLC组织标本及NSCLC细胞株H1299和A549,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NSCLC组织及细胞株中miR-29a-3p的表达... 目的:研究非小细胞肺癌(NSCLC)中miR-29a-3p的表达及其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响。方法:选取12例手术切除的NSCLC组织标本及NSCLC细胞株H1299和A549,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测NSCLC组织及细胞株中miR-29a-3p的表达。通过转染H1299和A549过表达miR-29a-3p,采用CCK-8和EDU实验检测miR-29a-3p过表达对NSCLC细胞增殖的影响,划痕实验检测miR-29a-3p过表达对NSCLC细胞迁移的影响。通过miRDB、RNA22、TarBase和TargetScan数据库预测miR-29a-3p靶基因,Gene Ontology(GO)富集分析探究miR-29a-3p可能的生物学通路。结果:NSCLC组织和细胞中miR-29a-3p表达水平明显降低,过表达miR-29a-3p能抑制NSCLC细胞增殖和迁移。miR-29a-3p靶基因GO富集分析显示miR-29a-3p主要与细胞外基质结构成分、内质网腔、多肽赖氨酸修饰等通路密切相关。结论:NSCLC中miR-29a-3p显著低表达,miR-29a-3p能抑制NSCLC细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 mir-29a-3p 非小细胞肺癌 增殖 迁移
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黄芪注射液通过miR-29a-3p/COL1A1信号轴干预肺纤维化的机制研究 被引量：1
2
作者 周飘 杜婧 +4 位作者 吴程 周芮 安丽萍 王飞 杜全宇 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2023年第3期107-110,I0026,共5页
目的探究黄芪注射液对肺纤维化的干预作用及可能机制。方法利用TargetScanHuman网站预测miR-29a-3p的靶基因。气管内注入博来霉素以构建肺纤维化大鼠模型。大鼠随机分为假手术组、博来霉素组、吡非尼酮组、黄芪注射液低剂量组和高剂量组... 目的探究黄芪注射液对肺纤维化的干预作用及可能机制。方法利用TargetScanHuman网站预测miR-29a-3p的靶基因。气管内注入博来霉素以构建肺纤维化大鼠模型。大鼠随机分为假手术组、博来霉素组、吡非尼酮组、黄芪注射液低剂量组和高剂量组,分别予生理盐水腹腔注射、吡非尼酮灌胃、黄芪注射液低剂量和高剂量腹腔注射。连续给药28 d后,用肺功能仪测定肺通气指标,Masson染色和天狼猩红染色观察肺组织镜下胶原沉积情况,实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肺组织miR-29a-3p和Ⅰ型胶原α1链基因(type I alpha 1 chain collagen gene,COL1A1)mRNA表达量。结果miR-29a-3p与COL1A1之间具有良好的靶向调控关系。与假手术组相比,博来霉素组大鼠肺动态顺应性(Cydn)显著下降,而吸气相气道阻力(RL)、呼气相气道阻力(Re)显著提高,肺组织COL1A1 mRNA表达显著提高且镜下胶原沉积明显增多(P<0.01)。与博来霉素组相比,各给药组Cydn显著提高,而RL、Re显著下降(P<0.01),黄芪低、高剂量组用力肺活量(FVC)显著提高(P<0.05,P<0.01),各给药组肺组织miR-29a-3p表达均有上升趋势,但仅黄芪低剂量组与博来霉素组比较差异有显著统计学意义(P<0.01),各给药组肺组织COL1A1 mRNA表达显著下降且镜下胶原沉积明显减少(P<0.01)。结论黄芪注射液能够通过miR-29a-3p/COL1A1信号轴减少肺内胶原沉积并改善博来霉素诱导的肺纤维化大鼠模型的肺通气障碍。 展开更多
关键词 黄芪注射液 肺纤维化 mir-29a-3p COL1A1 胶原沉积
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miR-29a-3p通过靶向Bak1参与高糖诱导的心肌细胞凋亡
3
作者 王晓燕 孟建辉 +1 位作者 刘志红 张晓华 《山西医科大学学报》 CAS 2023年第6期747-753,共7页
目的探讨miR-29a-3p通过靶向Bak1参与调控高糖诱导的心肌细胞凋亡的作用机制。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,分为正常葡萄糖组(NG)、高糖组(HG)、高糖+miR-29a-3p模拟物组(HG+miR-29a-3p mimics)、高糖+模拟物阴性对照组(HG+NC mimics)... 目的探讨miR-29a-3p通过靶向Bak1参与调控高糖诱导的心肌细胞凋亡的作用机制。方法体外培养大鼠H9c2心肌细胞,分为正常葡萄糖组(NG)、高糖组(HG)、高糖+miR-29a-3p模拟物组(HG+miR-29a-3p mimics)、高糖+模拟物阴性对照组(HG+NC mimics)。qRT-PCR检测miR-29a-3p的表达,流式细胞术检测细胞凋亡水平。蛋白印迹法检测凋亡相关因子Bcl-2、Mcl-1、Bax、Caspase-3和Bak1的表达水平。双荧光素酶报告基因试验检测miR-29a-3p和Bak1的靶向关系。结果与NG组比较,HG组miR-29a-3p表达水平降低,心肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与HG+NC mimics比较,HG+miR-29a-3p mimics组心肌细胞凋亡水平明显降低(P<0.05),心肌细胞凋亡蛋白Bax、Caspase-3、Bak1的表达显著降低(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达明显增加(P<0.05)。双荧光素酶报告基因技术验证了Bak1是miR-29a-3p的直接靶基因。结论高糖能够诱导心肌细胞凋亡,过表达miR-29a-3p可能通过靶向调控Bak1减轻高糖诱导的心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 mir-29a-3p 心肌细胞 凋亡 Bak1 高血糖
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肾细胞癌组织中lncRNA CRNDE、miR-29a-3p表达及临床意义
4
作者 王晨宇 郭峰 +1 位作者 赵建华 罗勇 《疑难病杂志》 CAS 2023年第7期702-707,718,共7页
目的分析肾细胞癌(RCC)组织中长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(lncRNA CRNDE)、微小RNA-29a-3p(miR-29a-3p)表达与临床病理特征和预后的关系。方法选取2018年1月—2019年11月新疆维吾尔自治区人民医院泌尿外科收治RCC患者92例,qPC... 目的分析肾细胞癌(RCC)组织中长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因(lncRNA CRNDE)、微小RNA-29a-3p(miR-29a-3p)表达与临床病理特征和预后的关系。方法选取2018年1月—2019年11月新疆维吾尔自治区人民医院泌尿外科收治RCC患者92例,qPCR检测RCC组织和癌旁组织中lncRNA CRNDE、miR-29a-3p表达,分析二者的相关性及与临床病理特征的关系。采用K-M法绘制不同lncRNA CRNDE、miR-29a-3p表达RCC患者生存曲线,采用多因素Cox回归分析RCC患者死亡的影响因素。结果与癌旁组织比较,RCC癌组织中lncRNA CRNDE表达升高,miR-29a-3p表达降低(t=16.050、21.147,P均<0.001)。Pearson相关性分析显示,RCC癌组织中lncRNA CRNDE与miR-29a-3p表达呈负相关(r/P=-0.739/<0.001)。RCC癌组织中lncRNA CRNDE在WHO/ISUP分级3~4级、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移中高于WHO/ISUP分级1~2级、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移者(t/P=3.041/0.003、3.183/0.002、3.598/0.001),而miR-29a-3p表达低于WHO/ISUP分级1~2级、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移(t/P=3.197/0.002、2.962/0.004、3.421/0.001)。随访3年,92例RCC患者累积生存率为81.52%(75/92)。K-M生存曲线分析显示,lncRNA CRNDE高表达组累积生存率低于lncRNA CRNDE低表达组,miR-29a-3p高表达组累积生存率高于miR-29a-3p低表达组(χ^(2)/P=4.346/0.037、5.773/0.016)。多因Cox回归分析显示,WHO/ISUP分级3~4级、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移、lncRNA CRNDE高为RCC患者死亡的独立危险因素,miR-29a-3p高为独立保护因素[HR(95%CI)=4.112(1.676~10.088)、4.664(1.696~12.825)、5.806(1.881~17.919)、1.552(1.144~2.105)、0.524(0.312~0.883)]。结论RCC组织中lncRNA CRNDE高表达和miR-29a-3p低表达,与WHO/ISUP分级、TNM分期、淋巴结转移和预后有关,可能成为RCC诊治的新靶点。 展开更多
关键词 肾细胞癌 长链非编码RNA 结直肠肿瘤差异表达基因 微小RNa-29a-3p 临床病理特征 预后
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骨髓间充质干细胞来源的外泌体miR-29a-3p减轻UV照射诱导的皮肤成纤维细胞光老化
5
作者 严婷婷 颜韵灵 +3 位作者 陶旌晶 黄莉宁 钟益萍 王晓华 《皮肤科学通报》 2023年第5期564-573,共10页
目的间充质干细胞衍生的外泌体(msc-exo)被发现可以减少光老化。本研究的目的是探讨来自骨髓msc-exo(BMSCs-exo)的microRN A(miR)-29a-3p在光老化中的潜在作用。方法从骨髓间质干细胞中分离外泌体并进行western blot验证。UVB照射人真... 目的间充质干细胞衍生的外泌体(msc-exo)被发现可以减少光老化。本研究的目的是探讨来自骨髓msc-exo(BMSCs-exo)的microRN A(miR)-29a-3p在光老化中的潜在作用。方法从骨髓间质干细胞中分离外泌体并进行western blot验证。UVB照射人真皮成纤维细胞(HDFs)构建体外光老化细胞模型。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-29a-3p、Ⅰ型胶原蛋白和基质金属蛋白酶(MMPs)mRNA水平。CCK-8、Transwe ll和流式细胞术检测细胞活力、迁移和凋亡。用于测量氧化应激指标水平的商用试剂盒。最后,采用双荧光素酶报告基因检测来验证miR-29a-3p的靶标。结果提取的外泌体HSP70和CD9阳性。HDFs的存活率以外泌体浓度依赖的方式增加。与对照组相比,UVB照射抑制miR-29a-3p水平,但BMSCs-exo治疗恢复miR-29a-3p水平(P<0.05)。此外,BMSCs-exo-miR-29a-3p逆转了UVB照射对HDFs迁移和氧化应激的抑制,以及促进细胞凋亡。然而,这种逆转通过抑制miR-29a-3p而减弱(P<0.05)。此外,BMSCs-exo-miR-29a-3p也抑制了Ⅰ型胶原的降解和光老化过程中MMPs的产生,并且它们也被减少的miR-29a-3p所消除。最后,MMP-2是miR-29a-3p的靶基因。结论我们的研究提出了BMSCs-exo-miR-29a-3p在改善皮肤光老化功能中的新作用,这些发现可能为皮肤光老化的靶向治疗提供新的见解。 展开更多
关键词 光老化 BMSC-exo mir-29a-3p UVB照射
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肺癌组织miR-29a-3p、TRIB2水平及其与患者病理特征、预后的关系 被引量：2
6
作者 易宣洪 黄晓智 +2 位作者 王静 李志梁 熊伟 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2023年第3期405-411,共7页
目的:探讨微小RNA-29a-3p(miR-29a-3p)、tribbles同源蛋白2(TRIB2)在肺癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取2017年7月至2018年10月在本院进行手术治疗的80例肺癌患者的癌组织及其癌旁组织(距癌组织>... 目的:探讨微小RNA-29a-3p(miR-29a-3p)、tribbles同源蛋白2(TRIB2)在肺癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征和预后的关系。方法:选取2017年7月至2018年10月在本院进行手术治疗的80例肺癌患者的癌组织及其癌旁组织(距癌组织>5 cm)样本进行研究。采用实时荧光定量PCR技术检测肺癌组织及癌旁组织中miR-29a-3p、TRIB2 mRNA表达情况;采用Pearson相关性分析miR-29a-3p和TRIB2之间的相关性;收集肺癌患者临床病理特征,分析miR-29a-3p和TRIB2表达水平与临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier法分析miR-29a-3p和TRIB2表达水平与肺癌患者3年生存率的关系,采用多因素Cox回归分析肺癌患者预后影响因素。结果:肺癌组织miR-29a-3p表达低于癌旁组织,TRIB2 mRNA表达高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05);肺癌组织miR-29a-3p和TRIB2 mRNA表达与肺癌患者TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关(P<0.05);肺癌组织miR-29a-3p与TRIB2 mRNA表达呈负相关(r=-0.566,P<0.05);miR-29a-3p高表达组患者3年生存率(88.00%)高于低表达组患者(33.33%),TRIB2低表达组患者3年生存率(87.76%)高于高表达组患者(35.48%),差异具有统计学意义(P<0.05);肺癌患者TNM分期、分化程度、淋巴结转移、miR-29a-3p和TRIB2 mRNA水平均为患者预后影响因素(P<0.05)。结论:肺癌组织中miR-29a-3p表达下调,TRIB2 mRNA表达上调,与肺癌患者TNM分期、分化程度和淋巴结转移有关,二者表达水平可能与患者预后情况密切相关。 展开更多
关键词 肺癌 微小RNa-29a-3p tribbles同源蛋白2 预后
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孕妇早期血清miR-29a-3p和VEGFA表达水平及其对子痫前期预测价值研究 被引量：2
7
作者 康会贤 张蕾 +1 位作者 马夕锐 崔照领 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第2期32-36,共5页
目的研究微小核糖核酸(micro RNA,miR)-29a-3p和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)在子痫前期患者血清中的表达及意义。方法前瞻性选取2018年1月~2021年1月在石家庄市妇幼保健院行产检的600例孕妇为研究对... 目的研究微小核糖核酸(micro RNA,miR)-29a-3p和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)在子痫前期患者血清中的表达及意义。方法前瞻性选取2018年1月~2021年1月在石家庄市妇幼保健院行产检的600例孕妇为研究对象,对孕妇随访至分娩结束,根据孕妇是否患子痫前期,分为子痫前期组(n=60)和非子痫前期组(n=540)。实时荧光定量PCR法检测在孕10~14周入院产检时血清中miR-29a-3p的水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清VEGFA水平;采用Pearson法分析miR-29a-3p水平与VEGFA的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-29a-3p和VEGFA以及二者联合检测预测子痫前期的价值。结果子痫前期组miR-29a-3p(2.05±0.54)水平高于非子痫前期组(1.04±0.29),VEGFA水平(34.38±9.25 ng/L)低于非子痫前期组(69.49±19.57 ng/L),差异具有统计学意义(t=22.951,13.824,均P<0.05)。重度组血清中VEGFA水平(24.05±6.41 ng/L)显著低于轻度组(38.81±10.47 ng/L),miR-29a-3p(2.45±0.61)水平显著高于轻度组(1.88±0.51),差异均有统计学意义(t=5.537,3.738,均P<0.05)。Pearson分析显示,子痫前期患者血清中miR-29a-3p与VEGFA呈负相关(r=-0.601,P<0.05)。ROC曲线显示,血清中miR-29a-3p和VEGFA水平预测子痫前期的曲线下面积(AUC)分别为0.904,0.882;两者联合预测子痫前期的AUC为0.937,其灵敏度和特异度分别为80.00%,95.20%。结论子痫前期患者血清中miR-29a-3p表达上升,而VEGFA表达下降,血清miR-29a-3p和VEGFA对子痫前期具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 子痫前期 微小核糖核酸-29a-3p 血管内皮生长因子A
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miR-29a-3p和miR-144a-3p下调人非小细胞肺癌细胞COL11A1表达并抑制其增殖、迁移和侵袭 被引量：5
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作者 赵田甜 左玮 淦鑫 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1696-1703,共8页
目的探讨XI型胶原α1(collagen type XI alpha 1,COL11A1)、miR-29a-3p和miR-144a-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用和它们之间的内在联系。方法用RT-qPCR法检测NSCLC组织和细胞中COL11A1 mRNA和与COL11A1... 目的探讨XI型胶原α1(collagen type XI alpha 1,COL11A1)、miR-29a-3p和miR-144a-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用和它们之间的内在联系。方法用RT-qPCR法检测NSCLC组织和细胞中COL11A1 mRNA和与COL11A1具有可能靶向关系的miRNAs的表达水平。COL11A1 siRNA、miR-29a-3p mimic或miR-144a-3p mimic转入H520细胞后,CCK-8法检测细胞活性,EdU法检测细胞增殖,Transwells法检测细胞迁移和侵袭,Western blot法检测COL11A1、Ki67和MMP-2的蛋白表达水平。荧光素酶报告基因分析检测COL11A1是否是miR-29a-3p和miR-144a-3p在NSCLC细胞中的靶点。结果在NSCLC肿瘤组织和细胞中,CoL11A1的表达水平均明显上调(P<0.01),miR-29a-3p和miR-144a-3p的表达水平均明显下调(P<0.01)。敲低COL11A1或过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p均能抑制H520细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05或P <0.01),且过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p均能抑制COL11A1表达。荧光素酶报告基因实验证实miR-29a-3p和miR-144a-3p均可直接靶向COL11A1。结论过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p可通过直接下调COL11A1表达来抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 CoL11A1 mir-29a-3p mir-144a-3p 非小细胞肺癌 细胞增殖 迁移 侵袭
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LncRNA CRNDE通过靶向miR-29a-3p对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤的影响及其机制 被引量：3
9
作者 孙定军 梁中书 +2 位作者 邢波 陈漠水 张福伟 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第20期4477-4482,共6页
目的探讨LncRNA CRNDE对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞EVC-304损伤的影响及作用机制。方法EVC-304细胞分为空白对照组(Con组)、ox-LDL组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-CRNDE组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-29a-3p组,qR... 目的探讨LncRNA CRNDE对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞EVC-304损伤的影响及作用机制。方法EVC-304细胞分为空白对照组(Con组)、ox-LDL组、ox-LDL+si-NC组、ox-LDL+si-CRNDE组、ox-LDL+miR-NC组、ox-LDL+miR-29a-3p组,qRT-PCR检测EVC-304细胞中CRNDE和miR-29a-3p水平,酶联免疫吸附试验检测丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹检测B淋巴细胞瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证CRNDE与miR-29a-3p靶向关系。结果与Con组比较,ox-LDL组CRNDE和MDA水平、EVC-304细胞凋亡率、Bax蛋白水平显著升高(P<0.05),miR-29a-3p水平、SOD和GSH-Px活力、Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05)。与ox-LDL+si-NC组或ox-LDL+miR-NC组比较,ox-LDL+si-CRNDE组、ox-LDL+miR-29a-3p组MDA水平、EVC-304细胞凋亡率、Bax蛋白水平显著降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活力、Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05)。CRNDE在EVC-304细胞中靶向负调控miR-29a-3p表达,抑制miR-29a-3p表达逆转了沉默CRNDE表达对EVC-304细胞MDA、SOD和GSH-Px活力、凋亡率及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结论沉默CRNDE表达可抑制ox-LDL诱导的血管内皮细胞EVC-304氧化应激和凋亡,其作用机制与靶向负调控miR-29a-3p有关。 展开更多
关键词 LncRNA CRNDE mir-29a-3p 氧化型低密度脂蛋白 血管内皮细胞 氧化应激 凋亡
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miR-29a-3p调控COL1A1参与喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡过程研究 被引量：7
10
作者 黄非 王建洪 +2 位作者 毛贺娟 冯玲 李俊毅 《临床和实验医学杂志》 2017年第19期1911-1914,共4页
目的研究miR-29a-3p是否调控COL1A1参与喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡过程。方法前瞻性选取人喉癌Hep-2细胞,分为对照组、实验组1(miR-29a-3p过表达组)、实验组2(miR-29a-3p抑制组),对照组未进行任何处理,实验组1转染miR-29a-3p模拟剂,实验组... 目的研究miR-29a-3p是否调控COL1A1参与喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡过程。方法前瞻性选取人喉癌Hep-2细胞,分为对照组、实验组1(miR-29a-3p过表达组)、实验组2(miR-29a-3p抑制组),对照组未进行任何处理,实验组1转染miR-29a-3p模拟剂,实验组2转染miR-29a-3p抑制剂。通过qRT-PCR法检测三组细胞miR-29a-3p及COL1A1基因表达,通过western blotting法检测三组细胞COL1A1蛋白表达。采用双荧光素酶报告基因分析法验证COL1A1是否是miR-29a-3p靶基因。采用MTT比色法检测三组细胞增殖能力,采用流式细胞术检测三组细胞凋亡情况。结果 miR-29a-3p模拟剂转染Hep-2细胞后miR-29a-3p表达升高,COL1A1表达降低;miR-29a-3p抑制剂转染Hep-2细胞后miR-29a-3p表达降低,COL1A1表达升高。双荧光素酶报告基因分析法证实COL1A1是miR-29a-3p靶基因。miR-29a-3p过表达能抑制Hep-2细胞增殖,增加细胞凋亡;miR-29a-3p抑制表达能增强Hep-2细胞增殖,抑制细胞凋亡。结论 miR-29a-3p调控COL1A1参与喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡过程。 展开更多
关键词 喉癌 HEp-2细胞 mir-29a-3p COL1A1 增殖 凋亡
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miR-29a-3p靶向组蛋白去乙酰化酶4对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响 被引量：2
11
作者 徐艳梅 黄杰 +5 位作者 熊艳 许琛 汪磊 赵夏 张璐璐 许传文 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期1283-1288,共6页
目的探讨微小RNA(miR)-29a-3p是否通过调控组蛋白去乙酰化酶(HDAC)4表达影响高糖诱导的小鼠足细胞损伤。方法体外培养小鼠肾脏足细胞系MPC5,饥饿处理后随机分为正常对照(NG)组、高糖刺激(HG)组,分别将miR-29a-3p mimic、miR-NC、HDAC4 s... 目的探讨微小RNA(miR)-29a-3p是否通过调控组蛋白去乙酰化酶(HDAC)4表达影响高糖诱导的小鼠足细胞损伤。方法体外培养小鼠肾脏足细胞系MPC5,饥饿处理后随机分为正常对照(NG)组、高糖刺激(HG)组,分别将miR-29a-3p mimic、miR-NC、HDAC4 siRNA及si-NC转染至HG组MPC5细胞中,采用qRT-PCR、Western印迹分别检测miR-29a-3p与HDAC4蛋白表达,采用流式细胞术检测MPC5细胞凋亡,采用Western印迹法检测足细胞损伤相关蛋白〔synaptopodin、结蛋白(desmin)〕及细胞凋亡蛋白(Bcl-2、Bax、酶切caspase-3)表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-29a-3p与HDAC4的靶向关系。通过将HDAC4过表达质粒与miR-29a-3p mimic共同转染入HG组MPC5细胞,用Western印迹法与流式细胞术分别检测足细胞损伤相关蛋白、细胞凋亡蛋白及细胞凋亡率。结果与NG组相比,HG组肾脏足细胞MPC5中miR-29a-3p表达水平、synaptopodin及Bcl-2蛋白表达均显著降低(均P<0.05),而HDAC4、desmin、Bax、酶切caspase-3蛋白表达水平及细胞凋亡率均明显升高(均P<0.05);转染miR-29a-3p mimic后,MPC5细胞中synaptopodin、Bcl-2蛋白表达均明显增加(均P<0.05),而desmin、Bax、酶切caspase-3蛋白表达及细胞凋亡率均明显降低(均P<0.05);抑制HDAC4表达可减轻高糖刺激肾脏足细胞MPC5损伤,抑制MPC5细胞凋亡;双荧光素酶报告基因验证HDAC4是miR-29a-3p的靶基因;转染HDAC4过表达后MPC5细胞凋亡率、desmin及促凋亡蛋白表达均明显升高(均P<0.05),synaptopodin及Bcl-2蛋白表达均明显降低(均P<0.05)。结论miR-29a-3p在高糖诱导的小鼠足细胞中表达水平降低,上调miR-29a-3p表达可通过抑制靶基因HDAC4表达进而抑制足细胞凋亡从而减轻高糖诱导的足细胞损伤。 展开更多
关键词 足细胞 高糖 mir-29a-3p HDAC4
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MiR-29a-3p通过调控MITOL参与带状疱疹后遗神经痛发生研究 被引量：1
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作者 涂涛 王劲 董蜀华 《西南国防医药》 CAS 2017年第8期784-787,共4页
[目的]研究miR-29a-3p是否调控MITOL参与带状疱疹后遗神经痛(PHN)的发生。方法 SD大鼠20只,左趾璞注射水痘带状疱疹病毒建立PHN动物模型。采用q RT-PCR法检测不同时间段大鼠脊髓背角组织miR-29a-3p及MITOL基因表达,采用Western blottin... [目的]研究miR-29a-3p是否调控MITOL参与带状疱疹后遗神经痛(PHN)的发生。方法 SD大鼠20只,左趾璞注射水痘带状疱疹病毒建立PHN动物模型。采用q RT-PCR法检测不同时间段大鼠脊髓背角组织miR-29a-3p及MITOL基因表达,采用Western blotting法检测不同时间段大鼠脊髓背角组织MITOL蛋白表达,采用双荧光素酶报告基因分析法,验证MITOL是否是miR-29a-3p靶基因。结果与建模前比较,建模3、7、14、21 d后,大鼠脊髓背角组织miR-29a-3p降低,MITOL基因及蛋白表达升高;双荧光素酶报告基因分析法证实,MITOL是miR-29a-3p靶基因。结论 miR-29a-3p通过调控MITOL参与PHN的发生。 展开更多
关键词 mir-29a-3p MITOL 带状疱疹后遗神经痛
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miR-29a-3p靶向C9ORF72调控阿尔茨海默病模型细胞凋亡的分子机制 被引量：1
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作者 冯晓敏 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期1929-1933,共5页
目的研究miR-29a-3p对阿尔茨海默病(AD)模型细胞凋亡的影响及其分子机制。方法建立AD细胞模型;将模型+miR-NC组(转染miR-NC)、模型+miR-29a-3p组(转染miR-29a-3p mimics)、模型+si-NC组(转染si-NC)、模型+si-9号染色体上开放阅读框72基... 目的研究miR-29a-3p对阿尔茨海默病(AD)模型细胞凋亡的影响及其分子机制。方法建立AD细胞模型;将模型+miR-NC组(转染miR-NC)、模型+miR-29a-3p组(转染miR-29a-3p mimics)、模型+si-NC组(转染si-NC)、模型+si-9号染色体上开放阅读框72基因(C9ORF72)组(转染si-C9ORF72)、模型+miR-29a-3p+pcDNA组(共转染miR-29a-3p mimics和pcDNA)、模型+miR-29a-3p+pcDNA-C9ORF72组(共转染miR-29a-3p mimics和pcDNA-C9ORF72)均用脂质体法转染至PC12细胞,再进行AD细胞模型制造。噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-29a-3p、C9ORF72表达;Western印迹检测细胞中C9ORF72蛋白表达;流式细胞术、双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞凋亡和荧光素酶活性。结果成功构建AD细胞模型;与对照组相比,模型组细胞中miR-29a-3p表达下调,C9ORF72表达上调;过表达miR-29a-3p、抑制C9ORF72均可促进模型组细胞的存活,抑制其凋亡;miR-29a-3p可抑制野生型C9ORF72的荧光活性;过表达C9ORF72可逆转miR-29a-3p对AD模型细胞存活和凋亡的影响。结论miR-29a-3p可提高AD模型细胞的存活,抑制凋亡,其机制与靶向C9ORF72有关,可为AD的治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 mir-29a-3p C9ORF72 阿尔茨海默病 凋亡
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长链非编码RNA TUG1靶向miR-29a-3p调控高糖诱导的人足细胞损伤
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作者 任丽珏 魏翠英 +2 位作者 魏枫 张永红 张悦 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第24期5736-5740,共5页
目的探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因(TUG1)对高糖诱导的人足细胞损伤的影响及其机制。方法用终浓度为30 mmol/L的高糖溶液刺激HPCs作为高糖(HG)组,同时以终浓度为5 mmol/L的糖溶液处理HPCs作为对照组(Control);将pCDH-NC、pCDH-TUG1、... 目的探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因(TUG1)对高糖诱导的人足细胞损伤的影响及其机制。方法用终浓度为30 mmol/L的高糖溶液刺激HPCs作为高糖(HG)组,同时以终浓度为5 mmol/L的糖溶液处理HPCs作为对照组(Control);将pCDH-NC、pCDH-TUG1、si-NC、si-TUG1分别转染至正常HPCs中,记为pCDH-NC组、pCDH-TUG1组、si-NC组、si-TUG1组。将pCDH-NC、pCDH-TUG1、anti-NC、anti-miR-29a-3p转染至高糖处理的HPCs中,记为HG+pCDH-NC组、HG+pCDH-TUG1组、HG+anti-NC组和HG+anti-miR-29a-3p组。将pCDH-TUG1与miR-NC、miR-29a-3p分别共同转染至高糖处理的HPCs中,记为HG+pCDH-TUG1+miR-NC组、HG+pCDH-TUG1+miR-29a-3p组。qRT-PCR检测miR-29a-3p和TUG1 mRNA的表达水平;Western印迹检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果高糖处理的HPCs中podocin、nephrin、Bcl-2、TUG1表达水平降低;Bax、miR-29a-3p表达水平升高,细胞凋亡率升高。过表达TUG1和抑制miR-29a-3p表达可降低细胞凋亡率,保护高糖诱导的足细胞损伤。TUG1靶向调控miR-29a-3p,过表达miR-29a-3p能逆转TUG1过表达对高糖诱导足细胞损伤的保护作用。结论TUG1对高糖诱导的人足细胞损伤有保护作用,其机制可能与miR-29a-3p表达相关。 展开更多
关键词 牛磺酸上调基因(TUG)1 mir-29a-3p 高糖 足细胞损伤 凋亡
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抑制miR-29a-3p表达对小鼠巨噬细胞凋亡的影响及机制 被引量：4
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作者 李木楠 李双双 +3 位作者 孟凡爽 韩鹏 张文慧 张林波 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期64-69,共6页
【目的】研究miR-29a-3p下调表达对小鼠巨噬细胞凋亡及相关基因表达的影响,为探讨结核病发病机制、研发新的诊断与治疗方法提供依据。【方法】将重组抑制载体p EZX-AM02-miR-29a-3p转染RAW264.7细胞,24、36和48 h荧光显微镜观察转染效率... 【目的】研究miR-29a-3p下调表达对小鼠巨噬细胞凋亡及相关基因表达的影响,为探讨结核病发病机制、研发新的诊断与治疗方法提供依据。【方法】将重组抑制载体p EZX-AM02-miR-29a-3p转染RAW264.7细胞,24、36和48 h荧光显微镜观察转染效率,Real time-PCR法检测miR-29a-3p及凋亡相关基因caspase3、caspase7、caspase8、Bcl-2、Mcl-1和Bax的表达水平,流式细胞术检测RAW264.7细胞的凋亡率。【结果】重组抑制载体转染后,细胞内miR-29a-3p表达水平明显下降;而caspase7、caspase8、Bcl-2、Mcl-1和Bax等基因的表达出现不同程度的上调;流式细胞术分析发现随着转染时间延长,细胞凋亡率增加,且36 h凋亡率最高。【结论】p EZX-AM02-miR-29a-3p重组载体可抑制小鼠巨噬细胞中miR-29a-3p的表达,通过靶向上调caspase7、caspase8、Bcl-2和Mcl-1等基因的表达促进巨噬细胞的凋亡。 展开更多
关键词 mir-29a-3p 抑制载体 巨噬细胞 细胞凋亡 靶基因
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熟地黄水提液通过外泌体miR-29a-3p调节OVX大鼠的脂代谢 被引量：4
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作者 梁梓雯 胡雪灵 +9 位作者 钟文强 罗冰洁 潘琪 林青 李小云 王攀攀 朱晓峰 蔡宇 张荣华 杨丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期893-904,共12页
目的:探讨熟地黄(Rehmanniae Radix Praeparata,RR)水提液对双侧卵巢切除(ovariectomy,OVX)大鼠脂代谢紊乱的影响及作用机制。方法:将40只3月龄SD雌性大鼠随机分为5组,分别为假手术组、OVX组、RR水提液低剂量组、RR水提液中剂量组和RR... 目的:探讨熟地黄(Rehmanniae Radix Praeparata,RR)水提液对双侧卵巢切除(ovariectomy,OVX)大鼠脂代谢紊乱的影响及作用机制。方法:将40只3月龄SD雌性大鼠随机分为5组,分别为假手术组、OVX组、RR水提液低剂量组、RR水提液中剂量组和RR水提液高剂量组,对大鼠分别行假手术或OVX,药物灌胃12周后取材,测定大鼠的体重、腹围、血清雌二醇(estradiol,E2)、子宫重量、胰岛素(insulin,INS)和血脂四项;行肝脏HE染色和油红O染色观察脂质积累;行腹部脂肪HE染色观察脂肪体积;Western blot和RT-qPCR检测腹部脂肪过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin,IL-1β)的表达;RT-qPCR检测肥胖相关因子糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B(glycoprotein non-metastatic melanoma protein B,GPNMB)、血清外泌体miR-29a-3p、腹部脂肪miR-29a-3p及其靶基因核因子I A(nuclear factor I A,NFIA)的表达;Western blot检测腹部脂肪Wnt信号通路相关蛋白的表达。结果:RR水提液显著降低OVX大鼠的腹围、INS、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、肝脏脂质积累、腹部脂肪细胞扩张、PPARγ、TNF-α、IL-1β、GPNMB和NFIA的表达,显著升高OVX大鼠的血清E2、血清外泌体miR-29a-3p和腹部脂肪miR-29a-3p水平,激活腹部脂肪Wnt信号通路。结论:RR水提液可降低OVX大鼠的血清E2、INS、LDL-C和肝脏脂质积累,抑制腹部脂肪细胞扩张和炎症反应,其作用机制可能是与血清外泌体中miR-29a-3p和腹部脂肪中miR-29a-3p的含量增加后致NFIA表达量下降,从而激活腹部脂肪组织中Wnt信号通路有关。 展开更多
关键词 熟地黄水提液 mir-29a-3p 卵巢切除大鼠 脂代谢
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miR-29a-3p通过靶向HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴减轻哮喘患儿气道炎症的机制研究 被引量：2
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作者 蹇强 李丹 +1 位作者 程玮 唐甜甜 《国际检验医学杂志》 CAS 2022年第18期2201-2206,共6页
目的 探讨miR-29a-3p通过靶向高迁移率族蛋白1(HMGB1)/toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号轴减轻哮喘患儿气道炎症的机制。方法 收集52例哮喘患儿与50例健康对照儿童外周血,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测血浆miR-29a-3... 目的 探讨miR-29a-3p通过靶向高迁移率族蛋白1(HMGB1)/toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号轴减轻哮喘患儿气道炎症的机制。方法 收集52例哮喘患儿与50例健康对照儿童外周血,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测血浆miR-29a-3p表达情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中炎症因子水平。使用卵清蛋白构建哮喘大鼠模型,腹腔注射miR-29a-3p激动剂过表达miR-29a-3p,收集一侧支气管肺泡灌洗液(BALF),计数总白细胞与嗜酸性粒细胞并检测炎症因子水平,取另一侧肺组织行HE染色观察病理表现。采用双荧光素酶报告基因系统验证miR-29a-3p与HMGB1的靶向关系,并检测HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白表达情况。血小板激活因子(PAF)干预人支气管上皮细胞系16HBE模拟哮喘体外模型,通过转染过表达miR-29a-3p与HMGB1,检测细胞HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白与炎症因子表达情况。结果 与健康儿童比较,哮喘患儿血浆中miR-29a-3p表达水平显著降低(P<0.05),而炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平均升高(P<0.05),miR-29a-3p表达水平与TNF-α、IL-1β、IL-6水平均呈负相关(P<0.05)。过表达miR-29a-3p能改善哮喘模型大鼠支气管管腔变窄、管壁增厚、支气管及周围血管炎症细胞浸润的现象,显著降低肺组织炎症评分,减少BALF中的总白细胞数与嗜酸性粒细胞(EOS)计数,降低炎症因子水平(P<0.05)。经双荧光素酶报告基因系统证实miR-29a-3p能靶向抑制HMGB1,且HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白表达水平在哮喘模型中显著增加(P<0.05)。过表达miR-29a-3p可以减少PAF刺激细胞后HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白及其调控的炎症因子表达,但过表达HMGB1会抵消这种作用(P<0.05)。结论 miR-29a-3p在哮喘患儿中的表达水平显著降低,与气道炎症水平的升高密切相关,过表达miR-29a-3p可以通过靶向抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号轴的主要蛋白表达减轻炎症。 展开更多
关键词 mir-29a-3p 高迁移率族蛋白1 TOLL样受体4 核因子-κB 哮喘 气道炎症 儿童
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lncRNA BLACAT1靶向结合miR-29a-3p调控甲状腺癌细胞TPC-1的生物学行为 被引量：1
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作者 熊玉圆 王玲 +2 位作者 向高进 孟琳 王宏博 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第19期3355-3362,共8页
目的:探讨长链非编码RNA BLACAT1(lncRNA BLACAT1)调控microRNA-29a-3p(miR-29a-3p)对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的作用及其可能机制。方法:收集2018年06月至2019年03月在我院行甲状腺癌切除术的31例患者的肿瘤组织和相应的癌旁组织。... 目的:探讨长链非编码RNA BLACAT1(lncRNA BLACAT1)调控microRNA-29a-3p(miR-29a-3p)对甲状腺癌细胞恶性生物学行为的作用及其可能机制。方法:收集2018年06月至2019年03月在我院行甲状腺癌切除术的31例患者的肿瘤组织和相应的癌旁组织。采用qRT-PCR检测lncRNA BLACAT1、miR-29a-3p在甲状腺癌组织、癌旁组织、5种甲状腺癌细胞系(SW579、PDTC-1、HMGA1、TPC-1、KAT-5)及正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1中的表达水平;调控TPC-1甲状腺癌细胞系中lncRNA BLACAT1、miR-29a-3p的表达,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力。用生物信息分析和双荧光素酶报告基因法预测和验证lncRNA BLACAT1与miR-29a-3p的靶向关系。结果:与癌旁组织和正常甲状腺细胞相比,甲状腺癌组织和细胞系中lncRNA BLACAT1的表达水平显著上调,miR-29a-3p的表达水平显著下调(P<0.05);过表达lncRNA BLACAT1促进TPC-1细胞的增殖、迁移和侵袭;在甲状腺癌组织中lncRNA BLACAT1的表达水平与miR-29a-3p的表达水平呈负相关(r2=0.492,P<0.001);双荧光素酶分析证实lncRNA BLACAT1能特异性结合miR-29a-3p,并能降低其表达;过表达miR-29a-3p抑制TPC-1细胞的增殖、迁移和侵袭,且miR-29a-3p可以抑制由lncRNA BLACAT1过表达引起的TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的增强。结论:lncRNA BLACAT1通过靶向调控miR-29a-3p表达影响甲状腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,从而促进甲状腺癌的发展。 展开更多
关键词 lncRNA BLACAT1 mir-29a-3p 甲状腺癌 TpC-1
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miR-29a-3p对胃癌细胞增殖及凋亡能力的影响 被引量：2
19
作者 酒梦娜 白芳芸 +3 位作者 冯雅宁 辛瑞娟 刘小刚 白飞虎 《宁夏医科大学学报》 2016年第7期734-737,742,封4,共6页
目的探讨hsa-miR-29a-3p(miR-29a)对胃癌细胞增殖及凋亡能力的影响。方法采用qRTPCR验证miR-29a-3p在胃癌细胞系GC9811及其腹膜高转移细胞系GC9811-P中的表达;采用慢病毒转染的方法,构建高低表达miR-29a-3p的稳转细胞系;采用MTT比色试... 目的探讨hsa-miR-29a-3p(miR-29a)对胃癌细胞增殖及凋亡能力的影响。方法采用qRTPCR验证miR-29a-3p在胃癌细胞系GC9811及其腹膜高转移细胞系GC9811-P中的表达;采用慢病毒转染的方法,构建高低表达miR-29a-3p的稳转细胞系;采用MTT比色试验、平板克隆形成试验及流式细胞学技术分别验证其对胃癌细胞的增殖及凋亡能力的影响。结果 qRT-RCR结果显示miR-29a-3p在GC9811中的相对表达量为(1.00±0.06),高于GC9811-P中的(0.11±0.01)表达(P<0.01)。MTT比色法显示,从第3天起,上调组细胞增殖速率低于上调对照组,而下调组高于下调对照组(P<0.01)。平板克隆实验显示上调组的克隆形成数和克隆形成率分别为(286±27.91)个和57.2%,上调对照组为(334±31.85)个和66.8%(P均<0.05);下调组为(234±50.33)个和46.8%,下调对照组为(121±27.88)和24.2%(P均<0.01)。凋亡结果显示:上调组的凋亡率为(12.27±0.15)%,高于上调对照组(8.37±1.32)%;下调组为(4.53±0.91)%,低于下调对照组(9.83±1.75)%(P均<0.05)。结论 miR-29a-3p在胃癌腹膜高转移细胞系GC9811-P中低表达;miR-29a-3p可抑制胃癌细胞(GC9811、GC9811-P)的增殖能力而促进其凋亡能力。 展开更多
关键词 胃癌 增殖 凋亡 mir-29a-3p
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地锦草乙醇提取物通过circRHOT1/miR-29a-3p轴抑制结直肠癌SW480细胞的恶性生物学行为
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作者 樊红革 戴卫波 张学峰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期806-812,共7页
目的:探讨地锦草乙醇提取物(EEEH)对人结直肠癌SW480细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法:体外培养SW480细胞,实验分为Con组、EEEH-L组、EEEH-M组、EEEH-H组、si-NC组、si-circRHOT1组、EEEH-H+pcDNA组、EEEH-H+pcDNA-circRHOT1组,... 目的:探讨地锦草乙醇提取物(EEEH)对人结直肠癌SW480细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法:体外培养SW480细胞,实验分为Con组、EEEH-L组、EEEH-M组、EEEH-H组、si-NC组、si-circRHOT1组、EEEH-H+pcDNA组、EEEH-H+pcDNA-circRHOT1组,分别以si-NC、si-circRHOT1、pcDNA、pcDNA-circRHOT1转染SW480细胞,采用CCK-8法、细胞克隆形成实验、Transwell实验分别检测转染后各组细胞的增殖、迁移及侵袭能力,qPCR法检测转染后各组SW480细胞circRHOT1和miR-29a-3p的表达,WB法检测各组细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测circRHOT1与miR-29a-3p之间的靶向关系。结果:与Con组比较,EEEH-L组、EEEH-M组、EEEH-H组SW480细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达均明显降低(均P<0.05),circRHOT1的表达均降低(均P<0.05)而miR-29a-3p的表达均升高(均P<0.05)且呈剂量依赖性;细胞的存活率、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数均减少(均P<0.05)。circRHOT1可靶向负调控miR-29a-3p的表达。敲减circRHOT1可抑制SW480细胞的增殖、迁移及侵袭能力,而过表达circRHOT1则可减弱EEEH对SW480细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论:EEEH可通过调控circRHOT1/miR-29a-3p轴而抑制结直肠癌SW480细胞的增殖、迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 结直肠癌 SW480细胞 地锦草 乙醇提取物 circRHOT1 mir-29a-3p 增殖 迁移 侵袭
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