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MicroRNA-450a-3p通过抑制Bub1基因的表达调控小鼠细胞增殖和胚胎发育
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作者 刘晨 杨丹丹 +5 位作者 蒋凤兵 白慧丽 李宝林 罗敏 湛晓琴 施琼 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1651-1657,共7页
目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western b... 目的:探讨microRNA-450a-3p(miR-450a-3p)对小鼠细胞增殖和胚胎发育的调控是否通过抑制Bub1基因的表达实现。方法:用萤光素酶报告基因实验检测miR-450a-3p能否特异性结合于Bub1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR检测miR-450a-3p对Bub1蛋白和mRNA表达;分别通过MTT、Hoechst染色、流式细胞术等分析miR-450a-3p对小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)增殖、凋亡和细胞周期等生物学功能的调控;利用染色体核型分析技术检测miR-450a-3p对MEFs染色体数目的影响。结果:miR-450a-3p能与靶基因Bub1的3’-UTR结合,在翻译水平抑制MEFs中Bub1的表达,然而其转录水平的表达却不受影响。miR-450a-3p通过下调靶基因Bub1的表达,抑制MEFs的增殖,促进细胞的凋亡;而且miR-450a-3p还能使大多数细胞停滞在G1/G0期,使细胞分裂受阻,导致细胞染色体数目异常。结论:miR-450a-3p能够调控靶基因Bub1的表达,抑制MEFs增殖,并最终影响小鼠胚胎的发育。 展开更多
关键词 microrna-450a-3p 小鼠胚胎成纤维细胞 基因 Bub1 胚胎
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血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系
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作者 张丽 凌晨 沈轶骊 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第5期1-6,共6页
目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访1... 目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。 展开更多
关键词 结直肠癌 手术 预后 microrna-21 microrna-193a-3p
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Urinary exosomal microRNA-145-5p and microRNA-27a-3p act as noninvasive diagnostic biomarkers for diabetic kidney disease 被引量:2
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作者 Lu-Lu Han Sheng-Hai Wang +1 位作者 Ming-Yan Yao Hong Zhou 《World Journal of Diabetes》 SCIE 2024年第1期92-104,共13页
BACKGROUND Diabetic kidney disease(DKD),characterized by increased urinary microalbumin levels and decreased renal function,is the primary cause of end-stage renal di-sease.Its pathological mechanisms are complicated ... BACKGROUND Diabetic kidney disease(DKD),characterized by increased urinary microalbumin levels and decreased renal function,is the primary cause of end-stage renal di-sease.Its pathological mechanisms are complicated and multifactorial;Therefore,sensitive and specific biomarkers are needed.Urinary exosome originate from diverse renal cells in nephron segments and partially mirror the pathological changes in the kidney.The microRNAs(miRNAs)in urinary exosome are remark-ably stable and highly tissue-specific for the kidney.METHODS Type 2 diabetic mellitus(T2DM)patients were recruited from the Second Hospital of Hebei Medical University and were divided into two groups:DM,diabetic pa-tients without albuminuria[urinary albumin to creatinine ratio(UACR)<30 mg/g]and DKD,diabetic patients with albuminuria(UACR≥30 mg/g).Healthy subjects were the normal control(NC)group.Urinary exosomal miR-145-5p,miR-27a-3p,and miR-29c-3p,were detected using real-time quantitative polymerase chain reaction.The correlation between exosomal miRNAs and the clinical in-dexes was evaluated.The diagnostic values of exosomal miR-145-5p and miR-27a-3p in DKD were determined using receiver operating characteristic(ROC)analysis.Biological functions of miR-145-5p were investigated by performing RESULTS Urinary exosomal expression of miR-145-5p and miR-27a-3p was more upregulated in the DKD group than in the DM group(miR-145-5p:4.54±1.45 vs 1.95±0.93,P<0.001;miR-27a-3p:2.33±0.79 vs 1.71±0.76,P<0.05)and the NC group(miR-145-5p:4.54±1.45 vs 1.55±0.83,P<0.001;miR-27a-3p:2.33±0.79 vs 1.10±0.51,P<0.001).The exosomal miR-145-5p and miR-27a-3p positively correlated with albuminuria and serum creatinine and negatively correlated with the estimated glomerular filtration rate.miR-27a-3p was also closely related to blood glucose,gly-cosylated hemoglobin A1c,and low-density lipoprotein cholesterol.ROC analysis revealed that miR-145-5p had a better area under the curve of 0.88[95%confidence interval(CI):0.784-0.985,P<0.0001]in diagnosing DKD than miR-27a-3p with 0.71(95%CI:0.547-0.871,P=0.0239).Bioinformatics analysis revealed that the target genes of miR-145-5p were located in the actin filament,cytoskeleton,and extracellular exosome and were involved in the pathological processes of DKD,including apoptosis,inflammation,and fibrosis.CONCLUSION Urinary exosomal miR-145-5p and miR-27a-3p may serve as novel noninvasive diagnostic biomarkers or promising therapeutic targets for DKD. 展开更多
关键词 Urinary exosome microrna-145-5p microrna-27a-3p Diabetic kidney disease Diagnostic biomarkers
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miR-103a-3P调控PFK-2对结直肠癌细胞增殖及糖酵解的作用机制
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作者 冯盼盼 王恒 王晓霞 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第2期454-459,共6页
目的探究微小RNA(miR)-103a-3P调控6-磷酸果糖激酶(PFK)-2对结直肠癌细胞增殖及糖酵解的作用机制研究。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测正常结肠上皮细胞及4种结直肠癌细胞系中miR-103a-3p、PFK-2表达水平,将阴性对照、miR-103a-3... 目的探究微小RNA(miR)-103a-3P调控6-磷酸果糖激酶(PFK)-2对结直肠癌细胞增殖及糖酵解的作用机制研究。方法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测正常结肠上皮细胞及4种结直肠癌细胞系中miR-103a-3p、PFK-2表达水平,将阴性对照、miR-103a-3P、PFK-2类似物转染至结直肠癌细胞中,EdU法检测细胞增殖,葡萄糖检测试剂盒和乳酸检测试剂盒检测糖酵解相关指标,双荧光素酶报告实验证实miR-103a-3P和PFK-2的相互作用。结果结直肠癌细胞系中的miR-103a-3P、PFK-2 mRNA表达量显著高于正常结直肠癌上皮细胞系NCM460(P<0.05),其中HCT116的miR-103a-3P、PFK-2 mRNA升高最大(P<0.05),选其备用。与CC组相比,MN组及PN组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量无统计学差异(P>0.05),MI组、PI组、MP组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显降低(P<0.05)。与MN组相比,MM组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显升高(P<0.05)。与MM组相比,MI组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显降低(P<0.05)。与PN组相比,PM组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显升高(P<0.05)。与PM组相比,PI组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显降低(P<0.05);MI组与PI组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量无统计学差异(P>0.05)。与PI组相比,MP组细胞增殖及葡萄糖摄取水平、乳酸含量明显降低(P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示,转染miR-103a-3P后可显著促进PFK-2-3′-UTR-WT的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变基因无显著影响(P>0.05),且PFK-2与miR-103a-3P呈正相关。结论抑制miR-103a-3P表达可降低结直肠癌细胞增殖,并有效改善糖酵解,其作用机制可能与抑制PFK-2有关。 展开更多
关键词 microrna-103a-3p 6-磷酸果糖激酶(pFK)-2 结直肠癌 细胞增殖 糖酵解
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MicroRNA-29a-3p Prevents Drug-Induced Acute Liver Failure through Inflammation-Related Pyroptosis Inhibition 被引量:1
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作者 Dan-dan XIANG Jing-tao LIU +5 位作者 Zi-biao ZHONG Yan XIONG Hong-yan KONG Hai-jing YU Ting PENG Jia-quan HUANG 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2023年第3期456-468,共13页
Objective Little is known about the role of microRNA-29a-3p(miR-29a-3p)in inflammation-related pyroptosis,especially in drug-induced acute liver failure(DIALF).This study aimed to identify the relationship between miR... Objective Little is known about the role of microRNA-29a-3p(miR-29a-3p)in inflammation-related pyroptosis,especially in drug-induced acute liver failure(DIALF).This study aimed to identify the relationship between miR-29a-3p and inflammation-related pyroptosis in DIALF and confirm its underlying mechanisms.Methods Thioacetamide(TAA)-and acetaminophen(APAP)-induced ALF mouse models were established,and human samples were collected.The expression levels of miR-29a-3p and inflammation and pyroptosis markers were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction(qRT-PCR),Western blotting,or immunochemical staining in miR-29a-3p knock-in transgenic mouse(MIR29A(KI/KI))DIALF models.In addition,RNA sequencing was conducted to explore the mechanisms.Results MiR-29a-3p levels were decreased in TAA-and APAP-induced DIALF models.MiR-29a-3p prevented DIALF caused by TAA and APAP.RNA sequencing and further experiments showed that the protective effect of miR-29a-3p on DIALF was mainly achieved through inhibition of inflammation-related pyroptosis,and the inhibition was dependent on activation of the PI3K/AKT pathway.In addition,miR-29a-3p levels were reduced,and pyroptosis was activated in both peripheral blood mononuclear cells and liver tissues of DIALF patients.Conclusion The study supports the idea that miR-29a-3p inhibits pyroptosis by activating the PI3K/AKT pathway to prevent DIALF.MiR-29a-3p may be a promising therapeutic target for DIALF. 展开更多
关键词 acute liver failure microrna-29a-3p pYROpTOSIS INFLAMMATION
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尿道癌相关基因1通过微小RNA-513a-3p/细胞色素P_(450)1B1生物学轴促进人胃癌细胞增殖和迁移的机制研究
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作者 韩莹 焦璐 刘晓丹 《肿瘤基础与临床》 2023年第3期195-199,共5页
目的研究长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)在人胃癌细胞中的表达,并探讨UCA1通过微小RNA-513a-3p(miR-513a-3p)/细胞色素P_(450)1B1(CYP1B1)生物学轴对胃癌细胞增殖和迁移的影响及机制。方法分别向人胃癌细胞中转入UCA1小... 目的研究长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)在人胃癌细胞中的表达,并探讨UCA1通过微小RNA-513a-3p(miR-513a-3p)/细胞色素P_(450)1B1(CYP1B1)生物学轴对胃癌细胞增殖和迁移的影响及机制。方法分别向人胃癌细胞中转入UCA1小干扰RNA(siRNA)、miR-513a-3p模拟物和miR-513a-3p抑制剂以抑制UCA1、上调miR-513a-3p和抑制miR-513a-3p表达。通过定量PCR检测不同细胞UCA1、miR-513a-3p和CYP1B1 mRNA的表达,CCK8试剂盒检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞迁移。结果与GES-1细胞相比,UCA1在人胃癌细胞HGC-27、SNU-5、AGS、SGC-7901中表达均升高(t=11.106,P<0.001;t=10.872,P<0.001;t=12.134,P<0.001;t=16.178,P<0.001),细胞增殖活性(t=7.252,P<0.001;t=8.964,P<0.001;t=8.666,P=0.003;t=8.697,P<0.001)和细胞迁移能力(t=4.040,P=0.010;t=7.079,P<0.001;t=6.833,P=0.003;t=7.527,P<0.001)均升高。双荧素酶基因报告实验显示miR-513a-3p与UCA1和CYP1B1靶向结合。与NC siRNA组相比,UCA1 siRNA显著下调UCA1和上调miR-513a-3p在SGC-7901细胞中的表达(t=7.895,P<0.001;t=12.911,P<0.001);miR-513a-3p表达上调显著抑制SGC-7901细胞中UCA1和CYP1B1 mRNA表达(t=7.224,P<0.001;t=5.645,P=0.002),而抑制miR-513a-3p则显著上调SGC-7901细胞中UCA1和CYP1B1 mRNA表达(t=9.628,P<0.001;t=11.665,P<0.001)。与单独UCA1敲低的SGC-7901细胞相比,UCA1和miR-513a-3p共同敲低的SGC-7901细胞CYP1B1 mRNA表达、细胞增殖活性和细胞迁移能力均升高(t=3.695,P=0.014;t=4.198,P=0.009;t=3.602,P=0.016)。结论UCA1通过miR-513a-3p/CYP1B1生物学轴促进人胃癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 胃癌 尿路上皮癌胚抗原1 微小RNa-513a-3p 细胞色素p_(450)1B1
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lncRNA CASC9通过调节miR-125a-3p/VEGF对口腔鳞癌CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:5
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作者 李亚萍 谢春 +1 位作者 谌东明 程小翠 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期166-172,共7页
目的:探究长链非编码RNA癌症易感性候选基因9(lncRNA CASC9)对口腔鳞癌(OSCC)CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的调控机制。方法:构建lncRNA CASC9敲低的CAL-27细胞,并在lncRNA CASC9敲低细胞系中进行microRNA-125a-3p(miR-125a-3p)的回复。... 目的:探究长链非编码RNA癌症易感性候选基因9(lncRNA CASC9)对口腔鳞癌(OSCC)CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的调控机制。方法:构建lncRNA CASC9敲低的CAL-27细胞,并在lncRNA CASC9敲低细胞系中进行microRNA-125a-3p(miR-125a-3p)的回复。检测细胞中lncRNA CASC9、miR-125a-3p和VEGF mRNA水平,检测细胞增殖、迁移及侵袭能力以及细胞中VEGF蛋白表达。结果:敲低lncRNA CASC9表达后,CAL-27细胞增殖活性、迁移与侵袭能力、VEGF mRNA和蛋白水平降低(P<0.05),miR-125a-3p水平升高(P<0.05)。敲低lncRNA CASC9可显著抑制细胞在体内移植瘤生长和血管生成(P<0.05)。下调miR-125a-3p表达可减弱lncRNA CASC9敲低对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭以及对体内移植瘤生长和血管生成的抑制作用(P<0.05)。结论:lncRNA CASC9可能通过调节miR-125a-3p/VEGF促进OSCC细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 lncRNA CASC9 microrna-125a-3p VEGF 增殖 迁移 侵袭
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MicroRNA-122-5p、microRNA-33a-3p在胃癌患者中的表达及与临床病理特征和预后的关系 被引量:4
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作者 张伟 蔡振花 +5 位作者 周瑞轻 刘小慧 江麒麟 刘红波 董永杰 冯运章 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第13期17-22,共6页
目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反... 目的探究胃癌患者血清microRNA-122-5p(miR-122-5p)、microRNA-133a-3p(miR-133a-3p)mRNA相对表达量与临床病理特征及预后的关系。方法采集胃癌患者血清标本94例,以相同例数的健康体检者的血清样本作为对照。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)技术检测血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量,同时分析两者与胃癌患者临床病理特征的关系;绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析miR-122-5p、miR-133a-3p的表达与胃癌患者预后的关系。结果胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量低于健康体检者(P<0.05);有淋巴结转移、分化程度低、浸润至浆膜层的患者血清miR-122-5p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度、浸润至黏膜下各层的患者(P<0.05);有淋巴结转移、低分化程度、浸润至浆膜层、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的患者血清miR-133a-3p mRNA相对表达量低于无淋巴结转移,中、高分化程度,浸润至黏膜下各层,TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者(P<0.05);Kaplan-Meier生存曲线结果显示,miR-122-5p低表达胃癌患者5年生存率低于miR-122-5p高表达胃癌患者(P<0.05);miR-133a-3p低表达胃癌患者的5年生存率低于miR-133a-3p高表达胃癌患者(P<0.05)。结论胃癌患者血清miR-122-5p、miR-133a-3p mRNA相对表达量呈低表达,并且两者与胃癌的恶性程度和患者不良预后密切相关,血清miR-122-5p、miR-133a-3p可能成为胃癌患者预后预测的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 胃肿瘤 microrna-122-5p microrna-133a-3p 临床病理特征 预后
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MicroRNA-199a-3p对人骨肉瘤细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 朱楠 张积森 +2 位作者 荆珏华 钱军 仇汪宝 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期159-163,共5页
目的:探讨microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆... 目的:探讨microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响。方法:用合成的成熟miR-199a-3p序列模拟物(miR-199a-3p mimics)转染人骨肉瘤细胞(U2-OS),以阴性对照物序列(NC mimics)转染细胞作为阴性对照。转染后应用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞miR-199a-3p的表达量,Western blot法检测各组细胞中髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白的表达水平及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的剪切情况,利用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,并对实验结果进行统计学分析。结果:与对照组相比,转染miR-199a-3p mimics的实验组细胞中,miR-199a-3p的表达量明显升高,MCL-1蛋白的表达降低,PARP蛋白的剪切水平增加,细胞的凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-199a-3p可以有效促进骨肉瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤 凋亡 microrna-199a-3p 转染
原文传递
MicroRNA-200a-3p通过靶点蛋白ZEB2和e钙粘蛋白对膀胱癌细胞的生物学影响 被引量:1
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作者 卢毅 俞凌 +3 位作者 俞鹏奎 林建喜 张晓 孟宏舟 《浙江创伤外科》 2021年第6期1013-1016,共4页
目的分析miR-200a-3p在膀胱癌中的生物学作用。方法选取于2018年3月至2020年3月在本院行膀胱部分切除术或根治性膀胱切除术的9例膀胱癌患者,采用qPCR检测膀胱癌组织中miR-200a-3p水平、组织学分析肿瘤形态、WB法测定蛋白表达情况。结果m... 目的分析miR-200a-3p在膀胱癌中的生物学作用。方法选取于2018年3月至2020年3月在本院行膀胱部分切除术或根治性膀胱切除术的9例膀胱癌患者,采用qPCR检测膀胱癌组织中miR-200a-3p水平、组织学分析肿瘤形态、WB法测定蛋白表达情况。结果miR-200a-3p在膀胱癌组织中显著下调。组织学分析结果显示膀胱癌黏膜坏死与肉芽组织增生、多核巨噬细胞聚集和浸润性尿路上皮癌有关。蛋白表达结果显示E-钙粘蛋白显著上调、ZEB2蛋白显著下调。推测miR-200a-3p可与E-cadherin和ZEB2相关调控膀胱癌的侵袭和迁移。结论miR-200a-3p可以作为靶向ZEB2的生物标志物,负调控ZEB2的表达,这些发现将有助于寻找新的膀胱癌治疗靶点。 展开更多
关键词 microrna-200a-3p E-钙粘蛋白 ZEB2 膀胱癌
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MicroRNA-34a-5p在肝纤维化中的表达及作用 被引量:2
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作者 朱海东 胡东坡 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2019年第5期859-865,共7页
目的:探讨大鼠肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平及其在肝纤维化中的作用。方法:建立肝纤维化大鼠模型,转化生长因子-β1(TGF-β1)活化肝星状细胞,采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,采用RT-PCR测定大鼠肝组织和活化... 目的:探讨大鼠肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平及其在肝纤维化中的作用。方法:建立肝纤维化大鼠模型,转化生长因子-β1(TGF-β1)活化肝星状细胞,采用HE染色观察肝脏组织形态学变化,采用RT-PCR测定大鼠肝组织和活化肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和MicroRNA-34a-5p水平。将肝纤维化模型大鼠根据随机数字表法分为空白对照组、阴性转染对照组和MicroRNA-34a-5p组;将TGF-β1活化的HSC-T6细胞分为空白对照组、阴性转染对照组和MicroRNA-34a-5p组。采用RT-PCR和蛋白质印迹法测定3组大鼠肝组织和肝星状细胞中α-SMA、I型胶原蛋白(collagenI)、沉默调节蛋白1(SIRT1)、分泌型糖蛋白-3α(Wnt-3α)、分泌型糖蛋白-5α(Wnt-5α)和β-波链蛋白(β-catenin)的水平。结果:与对照组比较,肝纤维化组大鼠肝组织和活化肝星状细胞中α-SMA水平升高(P<0.05),MicroRNA-34a-5p水平降低(P<0.05)。与空白对照组和阴性转染对照组比较,MicroRNA-34a-5p转染组大鼠肝组织和活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平升高(P<0.05),而α-SMA、collagenI、SIRT1、Wnt-3α、Wnt-5α和β-catenin的mRNA和蛋白水平均下降(P<0.05),空白对照组和阴性转染对照组间大鼠肝组织和活化肝星状细胞中各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肝纤维化组织及活化肝星状细胞中MicroRNA-34a-5p水平降低,可能通过靶向SIRT1而抑制Wnt/β-catenin信号通路,从而发挥抗肝纤维化的作用。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 microrna-34a-5p Ⅰ型胶原蛋白 沉默调节蛋白1 分泌型糖蛋白-3α 分泌型糖蛋白-5α β-波链蛋白 大鼠
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慢病毒载体对MDA-MB-231细胞中microRNA-18a-3P表达的影响
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作者 王立斌 王丹妮 +5 位作者 马荣 张旭 田进海 李晓菡 冯惠敏 马芳 《中国现代医学杂志》 CAS 2020年第2期14-21,共8页
目的构建人microRNA-18a-3P(miR-18a-3P)过表达及干扰慢病毒载体,研究病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的步骤和方法。方法 PCR技术扩增相应目的基因片段并进行酶切,回收后与目的基因连接,产物转化细菌感受态细胞,对阳性克隆测序行对... 目的构建人microRNA-18a-3P(miR-18a-3P)过表达及干扰慢病毒载体,研究病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的步骤和方法。方法 PCR技术扩增相应目的基因片段并进行酶切,回收后与目的基因连接,产物转化细菌感受态细胞,对阳性克隆测序行对比分析,构建miR-18a-3P过表达及干扰慢病毒载体,荧光法测定病毒滴定;倒置荧光显微镜观察人乳腺癌细胞MDA-MB-231转染及筛选过程的转染效率,筛选最佳MOI值;qRT-PCR检测慢病毒转染后MDA-MB-231细胞内miR-18a-3P的表达。结果测序分析证实重组慢病毒构建正确;过表达及干扰慢病毒滴度分别为2×10~9和1×10~9 TU/ml;加Polybrene较未加Polybrene转染效率升高,当感染复数为10 TU/ml,Polybrene浓度为1μg/ml时,转染效率最佳;miR-18a-3P转染组过表达miR-18a-3P的相对表达量较空白对照组、阴性对照组高(P<0.05),miR-18a-3P转染组干扰表达miR-18a-3P的相对表达量较空白对照组、阴性对照组低(P<0.05)。结论成功构建了miR-18a-3P过表达及干扰慢病毒表达载体,对人乳腺癌细胞MDA-MB-231进行转染和筛选后,可快速高效率获得所需目的细胞。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 microrna-18a-3p/微RNAs 慢病毒感染
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MicroRNA-199a-3p在肾癌中的表达及作用 被引量:8
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作者 陶良俊 秦超 +7 位作者 曹强 钱健 蔡宏宙 朱建 李普 邵鹏飞 孟小鑫 殷长军 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2012年第4期229-232,241,共5页
目的检测microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-PCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-1... 目的检测microRNA-199a-3p(miR-199a-3p)在肾癌细胞株和组织中的表达情况并探究miR-199a-3p在肾癌细胞中的作用。方法利用实时定量RT-PCR检测miR-199a-3p在肾癌细胞和组织中的表达水平;利用miR-199a-3p模拟物转染肾癌细胞786-0上调miR-199a-3p后,通过CCK-8、克隆形成、Transwell以及细胞周期检测来探究其在肾癌细胞中的作用。结果 miR-199a-3p在肾癌细胞中明显低表达,在78%(14/18)的肾癌组织中亦明显低表达;上调miR-199a-3p可显著抑制肾癌细胞的增殖、存活和侵袭并能诱导细胞周期G1期阻滞。结论我们的研究显示在肾癌中miR-199a-3p明显低表达并参与肾癌的发生、发展,这表明miR-199a-3p具有作为肾癌诊断和治疗靶点的潜能。 展开更多
关键词 microrna-199a-3p 抑癌基因 肾细胞癌
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MicroRNA-29a-3p调控转化生长因子β1诱导的人角膜基质细胞的肌成纤维细胞转化 被引量:5
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作者 李凌菡 郝朋 李轩 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期44-48,共5页
目的探讨MicroRNA-29a-3p对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人角膜基质细胞肌成纤维细胞转化的影响。方法本实验选用培养至2~4代的人角膜基质细胞,分别设置对照组、TGF-β1组、miR-29a过表达对照+TGF-β1组、miR-29a过表达+TGF-β1组、miR... 目的探讨MicroRNA-29a-3p对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人角膜基质细胞肌成纤维细胞转化的影响。方法本实验选用培养至2~4代的人角膜基质细胞,分别设置对照组、TGF-β1组、miR-29a过表达对照+TGF-β1组、miR-29a过表达+TGF-β1组、miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组及miR-29a抑制表达+TGF-β1组。采用TGF-β1体外诱导的人角膜基质细胞向肌成纤维细胞转化,细胞饥饿过夜之后,在无血清的条件下转染miR-29a 24 h;然后以浓度5 ng/mL加入TGF-β1,无血清培养48 h。采用CCK-8法检测细胞活力,采用细胞总RNA提取法提取细胞总RNA,逆转录成cDNA后采用实时荧光定量PCR法检测目的相应指标的表达情况,Western Blot法检测相应蛋白的表达。结果人角膜基质细胞呈多角形,树突状,排列规则。按实验设计处理完细胞之后,各组细胞活性差异无统计学意义(P>0.05),转染效果良好。与对照组比较,TGF-β1组平滑肌肌动蛋白α(αSMA)的mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);与miR-29a过表达对照+TGF-β1组比较,miR-29a过表达+TGF-β1组αSMA mRNA表达有明显下降,差异有统计学意义(P=0.001);与miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组比较,miR-29a抑制表达+TGF-β1组αSMAmRNA表达有明显上升,差异有统计学意义(P=0.019)。同时,αSMA在蛋白水平的表达结果可得,对照组与TGF-β1组相比,αSMA的相对表达量显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);miR-29a过表达+TGF-β1组与miR-29a过表达对照+TGF-β1组相比αSMA的相对表达量明显降低,差异有统计学意义(P=0.007);而该指标在miR-29a抑制表达+TGF-β1组与miR-29a抑制表达对照+TGF-β1组的比较中增高且差异有统计学意义(P=0.034)。结论MicroRNA-29a对TGF-β1诱导的人角膜基质细胞的肌成纤维细胞转化作用是负性的。 展开更多
关键词 角膜基质细胞 microrna-29a-3p 转化生长因子Β1 肌成纤维细胞转化 平滑肌肌动蛋白α
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miR-199a-3p对Eca109和KYSE450细胞周期和迁移的影响 被引量:1
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作者 刘襄艳 侯桂琴 +4 位作者 高盼 凡丞 张幸丽 师莹莹 鲁照明 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第6期668-672,共5页
目的:观察miR-199a-3p对食管鳞癌细胞周期及迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:常规培养Eca109和KYSE450细胞,分别转染miR-199a-3p mimics及miR-199a-3p mimics negative control(阴性对照)。采用qRT-PCR法检测3组细胞中miR-199a-3... 目的:观察miR-199a-3p对食管鳞癌细胞周期及迁移能力的影响,并探讨其分子机制。方法:常规培养Eca109和KYSE450细胞,分别转染miR-199a-3p mimics及miR-199a-3p mimics negative control(阴性对照)。采用qRT-PCR法检测3组细胞中miR-199a-3p的表达水平,并用流式细胞术及划痕实验分别检测细胞周期及细胞迁移能力,用Western blot检测细胞中m TORC2信号通路相关蛋白[m TOR、Rictor、PI3K、p-Akt(T308)、p-Akt(S473)]的表达。结果:与阴性对照相比,转染miR-199a-3p mimics后,Eca109和KYSE450细胞中miR-199a-3p表达量增加;G1期细胞增多,细胞相对迁移率降低,m TOR和Rictor蛋白的表达水平降低,而PI3K、p-Akt(T308)和p-Akt(S473)蛋白的表达水平升高(P均<0.05)。结论:miR-199a-3p可能通过调控m TORC2信号通路来影响食管鳞癌细胞周期进程及细胞迁移。 展开更多
关键词 miR-199a-3p 食管鳞癌 细胞周期 细胞迁移 ECA109 KYSE450
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参斛汤对前列腺癌患者术后病灶及血清microRNA-301a-3p水平的影响 被引量:1
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作者 杨静 李晓天 陈品金 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第22期39-43,共5页
目的探讨参斛汤对前列腺癌术后病灶进展及血清microRNA-301a-3p(miRNA-301a-3p)水平的影响。方法选取2020年2月—2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院的95例前列腺癌患者作为研究对象,按随机数表法分为对照组(47例)和研究组(48例)。患... 目的探讨参斛汤对前列腺癌术后病灶进展及血清microRNA-301a-3p(miRNA-301a-3p)水平的影响。方法选取2020年2月—2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院的95例前列腺癌患者作为研究对象,按随机数表法分为对照组(47例)和研究组(48例)。患者均接受经尿道前列腺癌根治术,对照组术后接受常规化学治疗,研究组在对照组基础上增加参斛汤辅助治疗。比较两组患者术后病灶进展情况、血清学指标[前列腺特异性抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原(f-PSA)、游离前列腺特异抗原百分率(FPSAR)、血清肿瘤相关物质(TAM)]、免疫功能、不良反应等。结果研究组局部病灶进展时间、远处转移时间较对照组长(P<0.05)。两组患者治疗前血清PSA、FPSAR、TAM、miR-301a-3p表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),研究组FPSAR高于对照组(P<0.05),PSA、TAM、miR-301a-3p低于对照组(P<0.05)。两组患者治疗前CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),研究组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较对照组高(P<0.05),CD8^(+)较对照组低(P<0.05)。两组患者不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论参斛汤用于前列腺癌术后辅助治疗可有效抑制病灶进展,提高患者免疫功能,抑制miR-301a-3p表达,但在减少术后化学治疗不良反应方面未见明显优势。 展开更多
关键词 前列腺癌 化学治疗 病灶进展 microrna-301a-3p
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MicroRNA-101a-3p mimic ameliorates spinal cord ischemia/reperfusion injury 被引量:3
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作者 Zai-Li Zhang Dan Wang Feng-Shou Chen 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2022年第9期2022-2028,共7页
miR-101a-3p is expressed in a variety of organs and tissues and plays a regulatory role in many diseases,but its role in spinal cord ischemia/reperfusion injury remains unclear.In this study,we established a rat model... miR-101a-3p is expressed in a variety of organs and tissues and plays a regulatory role in many diseases,but its role in spinal cord ischemia/reperfusion injury remains unclear.In this study,we established a rat model of spinal cord ischemia/reperfusion injury by clamping the aortic arch for 14 minutes followed by reperfusion for 24 hours.Results showed that miR-101a-3p expression in L4-L6 spinal cord was greatly decreased,whereas MYCN expression was greatly increased.Dual-luciferase reporter assay results showed that miR-101a-3p targeted MYCN.MYCN immunoreactivity,which was primarily colocalized with neurons in L4-L6 spinal tissue,greatly increased after spinal cord ischemia/reperfusion injury.However,intrathecal injection of an miR-101a-3p mimic within 24 hours before injury decreased MYCN,p53,caspase-9 and interleukin-1βexpression,reduced p53 immunoreactivity,reduced the number of MYCN/NeuN-positive cells and the number of necrotic cells in L4-L6 spinal tissue,and increased Tarlov scores.These findings suggest that the miR-101a-3p mimic improved spinal ischemia/reperfusion injury-induced nerve cell apoptosis and inflammation by inhibiting MYCN and the p53 signaling pathway.Therefore,miR-101a-3p mimic therapy may be a potential treatment option for spinal ischemia/reperfusion injury. 展开更多
关键词 apoptosis CASpASE-9 INFLAMMATION INTERLEUKIN-1Β microrna-101a-3p MYCN nerve cells p53 spinal cord ischemia/reperfusion injury
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热损伤/热习服大鼠血清中microRNA-193a-3p的表达及与相关细胞因子水平的相关性 被引量:1
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作者 龙曙萍 李腾达 +4 位作者 刘云 郭杰 张薇薇 谷明莉 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2018年第4期12-15,共4页
目的研究热损伤/热习服大鼠血清中microRNA-193a-3p表达的变化及其与热休克蛋白(HSP70)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和转化生长因子-β((TGF-β)的相关性。方法随机选取45只体重、肛温、周龄基本一致的雄性大鼠并分为3组... 目的研究热损伤/热习服大鼠血清中microRNA-193a-3p表达的变化及其与热休克蛋白(HSP70)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和转化生长因子-β((TGF-β)的相关性。方法随机选取45只体重、肛温、周龄基本一致的雄性大鼠并分为3组:热休克损伤组(HS)、热习服组(HA)和对照组(HC)。在高温实验舱中建立热休克损伤和热习服大鼠模型,建模成功后采集大鼠心尖血并离心得到血清。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测大鼠血清中的microRNA-193a-3p的水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中HSP70和相关细胞因子IL-1β的蛋白水平。实验组与对照组之间的比较采用Dunnett-t检验,用Pearson相关性分析来比较HA组和HS组两变量之间的相关性。结果 MicroRNA-193a-3p在三组中的表达量分别为0.99±0.30(HS),1.13±0.33(HA)和2.15±0.35(HC),其在HA和HS组中的表达显著降低(P<0.05)。在HS组中,microRNA-193a-3p与HSP70,IL-1β和TNF-α呈负相关,差异具有统计学意义(r=-0.821,-0.839,-0.578,均P<0.05)。在HA组,microRNA-193a-3p与HSP70,IL-1β呈负相关,且具有统计学意义(r=-0.770,-0.766,均P<0.05)。结论 MicroRNA193a-3p在热损伤/热习服大鼠血清中表达减少,且可能参与热损伤/热习服的病理过程。 展开更多
关键词 microrna-193a-3p 热损伤 热习服 热休克蛋白70 细胞因子
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基于microRNA-92a-3p靶向SIRT1调控氧糖剥夺再灌注诱导脑微血管内皮细胞炎症反应的作用机制研究 被引量:1
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作者 林丽斌 魏伟 +6 位作者 陆璐 李永旭 李惠红 丁琳琳 周阳杰 卢陶陶 薛偕华 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第24期26-33,共8页
目的探讨基于microRNA-92a-3p(miR-92a-3p)靶向调控SIRT1氧糖剥夺再灌注(OGD/R)诱导小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)炎症反应的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定miR-92a-3p、SIRT1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介... 目的探讨基于microRNA-92a-3p(miR-92a-3p)靶向调控SIRT1氧糖剥夺再灌注(OGD/R)诱导小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)炎症反应的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)测定miR-92a-3p、SIRT1、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)mRNA的表达;Western blotting明确SIRT1、核转录因子-κB(NF-κB)p65、磷酸化NF-κB(p-NF-κB)p65、TNF-α和IL-1β蛋白的表达;双荧光素酶报告基因验证miR-92a-3p与SIRT1靶向关系;划痕实验检测bEnd.3细胞的迁移能力。结果OGD/R组miR-92a-3p相对表达量较对照组升高(P<0.05)。M_SIRT1 WT+mimics+TK组荧光素酶活性较M_SIRT1 WT+mimics NC+TK组低(P<0.05)。OGD/R组SIRT1蛋白和mRNA相对表达量较对照组降低(P<0.05),OGD+92a抑制剂组较OGD+92a抑制剂内参组升高(P<0.05)。miR-92a-3p模拟物组NF-κBp65/p-NF-κBp65蛋白较模拟物内参组高,SIRT1蛋白和mRNA表达较模拟物内参组低(P<0.05)。miR-92a-3p模拟物组IL-1β、TNF-α蛋白和mRNA相对表达量较模拟物内参组高(P<0.05)。miR-92a-3p模拟物组伤口愈合率较模拟物内参组低(P<0.05)。结论miR-92a-3p通过靶向抑制SIRT1表达,促进OGD/R诱导的脑微血管内皮细胞炎症反应。 展开更多
关键词 microrna-92a-3p 脑微血管内皮细胞 氧糖剥夺/再灌注 SIRT1 炎症反应 小鼠
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miR-125a-3p下调胃癌细胞NRG1表达并抑制细胞增殖 被引量:1
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作者 刘常浩 李铤 +1 位作者 韩亚楠 吴开春 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第5期972-976,共5页
目的:探讨microRNA-125a-3p(miR-125a-3p)在胃癌细胞恶性增殖中的作用及调控机制。方法:qRT-PCR法检测各肿瘤细胞系及正常对照细胞系中miR-125a-3p的表达,应用microRNA类似物(Mimic及Inhibitor)转染技术改变细胞内miR-125a-3p表达。West... 目的:探讨microRNA-125a-3p(miR-125a-3p)在胃癌细胞恶性增殖中的作用及调控机制。方法:qRT-PCR法检测各肿瘤细胞系及正常对照细胞系中miR-125a-3p的表达,应用microRNA类似物(Mimic及Inhibitor)转染技术改变细胞内miR-125a-3p表达。Western-blot检测NRG1蛋白表达水平的改变。XTT、平板克隆及裸鼠成瘤试验检测处理后胃癌细胞的增殖能力。流式细胞术检测细胞周期变化情况。结果:miR-125a-3p在多个胃癌细胞系中表达均低于永生化胃黏膜上皮细胞系(P<0.01)。利用类似物转染可以有效改变肿瘤细胞miR-125a-3p的表达(P<0.01)。miR-125a-3p过表达可以降低NRG1蛋白的表达、抑制细胞周期进展,并降低胃癌细胞系的体外和在体增殖能力,抑制miR-125a-3p表达可以见到相反结果。结论:miR-125a-3p可通过调控NRG1表达在胃癌中起到抑癌作用。miR-125a-3p可以抑制胃癌细胞的恶性增殖,因此具有成为胃癌治疗新策略候选靶点的可能。 展开更多
关键词 microrna-125a-3p NRG1 胃癌 细胞恶性增殖
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