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Miro1蛋白在帕金森病发病中的作用
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作者 王睿 王洪财 《临床神经病学杂志》 CAS 2023年第2期151-154,共4页
帕金森病(PD)的关键调控机制如线粒体功能障碍、α-突触核蛋白异常聚集等与受损的细胞内钙稳态和线粒体动力学有关。调控线粒体稳态和细胞凋亡的蛋白Miro1可通过影响线粒体自噬、钙离子失衡、线粒体转运等,最终导致神经细胞变性死亡。Mi... 帕金森病(PD)的关键调控机制如线粒体功能障碍、α-突触核蛋白异常聚集等与受损的细胞内钙稳态和线粒体动力学有关。调控线粒体稳态和细胞凋亡的蛋白Miro1可通过影响线粒体自噬、钙离子失衡、线粒体转运等,最终导致神经细胞变性死亡。Miro1蛋白缺陷可能是PD病理生理机制的共同通路。因此,Miro1蛋白在PD发病机制中起关键作用。本文对Miro1蛋白参与调控PD发病进行综述。 展开更多
关键词 帕金森病 miro1蛋白 线粒体
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过表达Miro1慢病毒载体的构建及Miro1高表达间充质干细胞稳定转染细胞株的建立与鉴定
2
作者 陈镜伊 赵玲萍 +2 位作者 刘雯丽 习佳飞 梁志欣 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2023年第4期408-416,共9页
背景线粒体转移是干细胞发挥免疫修复功能的重要机制之一,Miro1是线粒体转移过程的关键蛋白,但其动力学研究欠缺研究模型。目的构建过表达Miro1的间充质干细胞稳转细胞株,为线粒体动力学研究间充质干细胞的抗炎修复机制提供细胞模型。... 背景线粒体转移是干细胞发挥免疫修复功能的重要机制之一,Miro1是线粒体转移过程的关键蛋白,但其动力学研究欠缺研究模型。目的构建过表达Miro1的间充质干细胞稳转细胞株,为线粒体动力学研究间充质干细胞的抗炎修复机制提供细胞模型。方法通过PCR扩增目的基因后进行Gibson反应、转化及Gateway等方法构建载体,并对载体进行酶切鉴定。慢病毒感染间充质干细胞后,使用嘌呤霉素进行药物筛选获得稳转细胞株。后续分为三组进行相关鉴定。(1)BMSC组:正常间充质干细胞;(2)Con-BMSC组:慢病毒空载体感染的间充质干细胞;(3)Miro^(Hi)-BMSC组:过表达Miro1的慢病毒载体感染的间充质干细胞。通过RT-qPCR、Western blot检测上述三组细胞Miro1的表达水平,并进行划痕试验、水平迁移实验、成骨及成脂诱导分化以鉴定干细胞特性。结果所构建的载体完成酶切鉴定,并成功获得过表达Miro1重组慢病毒载体pLV-EGFP:T2A:Puro-EF1A>mRhot1/HA。经m RNA和蛋白水平检测,Miro^(Hi)-BMSC组的Miro1表达高于BMSC组和Con-BMSC组(P<0.05),干细胞水平、垂直迁移能力三组间差异无统计学意义(P>0.05),三组干细胞均可成功进行成脂及成骨诱导分化。结论通过慢病毒载体成功构建Miro1Hi-BMSCs稳转细胞株,且该稳转株仍保留干细胞特性,可用于间充质干细胞调控线粒体转移的相关研究。 展开更多
关键词 miro1蛋白 慢病毒载体 间充质干细胞 线粒体 细胞接触依赖性转移
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