Msi1基因沉默对人肝癌HepG2细胞的影响 被引量：4

1

作者 王燕 章建国 +2 位作者 张曙 靳钦 卞婷婷 《交通医学》 2014年第2期115-118,共4页

目的:探讨siRNA沉默Msi1基因表达后,人肝癌HepG2细胞的增殖与凋亡的情况。方法:设计合成针对Msi1 mRNA序列的siRNA多条序列,分别转染人肝癌HepG2细胞。使用RT–PCR方法检测各组细胞Msi1基因表达情况;Western blot法检测survivin蛋白、ca... 目的:探讨siRNA沉默Msi1基因表达后,人肝癌HepG2细胞的增殖与凋亡的情况。方法:设计合成针对Msi1 mRNA序列的siRNA多条序列,分别转染人肝癌HepG2细胞。使用RT–PCR方法检测各组细胞Msi1基因表达情况;Western blot法检测survivin蛋白、caspase3蛋白表达情况;MTT法、平皿克隆实验检测HepG2细胞增殖情况;流式细胞术检测各组HepG2细胞凋亡情况。结果:(1)RT-PCR结果:转染后24 h后,序列a,b,c转染效率分别为65%,64%及62%。其抑制率分别是Msi1 siRNAa(68%)、Msi1 siRNAb(56%)、Msi1 siRNAc(35%)。(2)流式细胞术检测各组细胞凋亡:空白组、阴性组、脂质体组、Msi1 siRNAa组凋亡率分别为(4.14±0.26)%、(4.51±0.78)%、(4.19±1.21)%,(16.8±0.26)%,Msi1 siRNAa组与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(3)Msi1 siRNAa最能有效抑制肝癌HepG2细胞中Msi1表达,与空白对照组比较,Msi1 siRNAa组HepG2细胞生长、增殖速度明显减缓(P<0.05);survivin蛋白表达水平显著下调(P<0.05),而caspase3蛋白表达水平上调(P<0.05);Msi1 siRNAa组凋亡率增高(P<0.05)。结论:沉默Msi1可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 原发性肝癌 msi1基因 凋亡 增殖 HepG2细胞 逆转录聚合酶链反应 Western BLOT检测 流式细胞术 msi1 REVERSE Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) Flow Cytometry(FCM)

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Msi1 siRNA对人结肠癌SW-480细胞增殖的影响 被引量：5

2

作者 魏建国 赵芳 孙爱静 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期124-127,共4页

目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人结肠癌SW-480细胞增殖的影响。方法针对Msi1 mRNA序列设计合成siRNA,转染SW-480细胞;采用RT-PCR法检测Msi1基因表达;MTT比色实验、群体倍增时间及平皿克隆形成实验分析Msi1siRNA对人结肠癌SW-480细胞... 目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人结肠癌SW-480细胞增殖的影响。方法针对Msi1 mRNA序列设计合成siRNA,转染SW-480细胞;采用RT-PCR法检测Msi1基因表达;MTT比色实验、群体倍增时间及平皿克隆形成实验分析Msi1siRNA对人结肠癌SW-480细胞的生长抑制效应,流式细胞术检测Msi1 siRNA对其细胞周期的影响。结果 Msi1 siRNA能有效抑制人结肠癌SW-480细胞中Msi1基因的表达;Msi1 siRNA转染SW-480细胞24、48、72 h后,与其它各组比较,其吸光度值明显降低,Msi1 siRNA组SW-480细胞生长、增殖速度明显减缓(P<0.05);空白对照组的SW-480细胞群体倍增时间为22.15h,而Msi1 siRNA处理后的细胞,群体倍增时间延长至37.76 h(P<0.05);平皿克隆形成实验结果发现,Msi1 siRNA处理后的细胞与其它各组相比,细胞生长明显减慢。流式细胞术表明Msi1 siRNA可导致SW-480细胞G0/G1期阻滞,S期细胞减少。结论沉默Msi1基因对人结肠癌SW-480细胞增殖有负性调节作用。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 msi1 RNAI

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RNA干扰沉默MSI1表达对人脑胶质瘤细胞化疗敏感度的影响 被引量：1

3

作者 刘细国 付锴 +1 位作者 江普查 宫睿 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期754-757,共4页

目的探讨RNA干扰沉默MSI1表达对人脑胶质瘤细胞化疗药物敏感度的影响。方法构建针对MSI1 mRNA的小分子RNA干扰(siRNA)重组质粒p SIREN-MSI1,转染人脑胶质瘤U-87MG细胞;Western blot检测U-87MG细胞内MSI1蛋白的表达;CCK-8法观察U-87MG细... 目的探讨RNA干扰沉默MSI1表达对人脑胶质瘤细胞化疗药物敏感度的影响。方法构建针对MSI1 mRNA的小分子RNA干扰(siRNA)重组质粒p SIREN-MSI1,转染人脑胶质瘤U-87MG细胞;Western blot检测U-87MG细胞内MSI1蛋白的表达;CCK-8法观察U-87MG细胞对化疗药物替莫唑胺(TMZ)敏感度的改变;流式细胞仪(FCM)检测p SIREN-MSI1转染后对U-87MG细胞凋亡的影响。结果成功构建了重组质粒p SIREN-MSI1,并成功转染U-87MG细胞;Western blot结果显示p SIREN-MSI1抑制U-87MG细胞中MSI1蛋白的表达(P<0.01);CCK-8结果显示在替莫唑胺作用下,pSIREN-MSI1组U-87MG细胞的存活率明显下降(P<0.01);FCM结果表明pSIREN-MSI1转染后明显提高U-87MG细胞的凋亡率(P<0.01)。结论 MSI1 si RNA能特异性抑制人脑胶质瘤细胞U-87MG细胞中MSI1的表达,增强人脑胶质瘤U-87MG细胞对化疗药物的敏感度,并促进细胞的凋亡。 展开更多

关键词 msi1 RNA干扰 胶质瘤 药物敏感度

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Msi1 siRNA对人结肠癌SW-480细胞迁移和侵袭能力的影响 被引量：3

4

作者 魏建国 孙爱静 赵芳 《医学研究杂志》 2012年第12期73-76,共4页

目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人结肠癌SW-480细胞迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法设计合成特异性Msi1 siRNA序列,转染人结肠癌SW-480细胞;利用Western blotting检测Msi1和MMP-9蛋白的表达;细胞免疫化学检测MMP-9蛋白的表达... 目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人结肠癌SW-480细胞迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法设计合成特异性Msi1 siRNA序列,转染人结肠癌SW-480细胞;利用Western blotting检测Msi1和MMP-9蛋白的表达;细胞免疫化学检测MMP-9蛋白的表达;划痕实验观察Msi1 siRNA对细胞迁移能力的影响;Transwell实验观察其对细胞侵袭能力的影响。结果 Msi1 siRNA能有效抑制人结肠癌SW-480细胞中Msi1蛋白的表达;并且使其迁移和侵袭能力明显下降,和对照组相比有统计学意义(P<0.05),同时MMP-9在蛋白表达水平明显降低。结论沉默Msi1基因后可以显著抑制人结肠癌SW-480细胞的迁移和侵袭能力,MMP-9基因表达下降可能参与这一过程。 展开更多

关键词 结肠癌 msi1 RNAI 迁移 侵袭

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Msi1基因在结肠癌中的临床意义及生物功能研究

5

作者 高超 田彦明 +4 位作者 张翼 丁博月 田华 巨英超 俞啟遥 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第1期72-76,共5页

目的目前Msi1(Musashi1)在结肠癌中的临床意义及生物功能仍不十分明确,因此全面了解Msi1在结肠癌中的表达及作用,具有重要的临床意义和理论意义。文章旨在探讨Msi1基因在结肠癌中的临床意义,并运用慢病毒干扰结肠癌SW480细胞Msi1基因表... 目的目前Msi1(Musashi1)在结肠癌中的临床意义及生物功能仍不十分明确,因此全面了解Msi1在结肠癌中的表达及作用,具有重要的临床意义和理论意义。文章旨在探讨Msi1基因在结肠癌中的临床意义,并运用慢病毒干扰结肠癌SW480细胞Msi1基因表达,观察其在结肠癌细胞中的生物功能。方法收集2013年10月至2014年5月河北医科大学第四医院外二科手术切除的20份结肠癌标本。每份标本分别取癌组织及癌旁肠壁组织。Western blot检测Msi1蛋白在结肠癌组织及癌旁组织中的表达,分析Msi1表达与结肠癌患者临床特征的关系。通过慢病毒载体构建稳定低表达Msi1的SW480细胞株,将包含有shMsi1-1、shMsi1-2干扰序列慢病毒分别转染该细胞,将结肠癌细胞分为空白组(未做任何处理)、shMsi1-1组(转染shMsi1-1)和shMsi1-2组(转染shMsi1-2)。Western blot检测2种慢病毒沉默效果。CCK-8实验检测细胞增殖,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果结肠癌患者癌组织中Msi1蛋白相对表达量(0.863±0.208)明显高于癌旁组织(0.272±0.078),差异有统计学意义(P<0.001)。shMsi1-1组、shMsi1-2组Msi1蛋白相对表达量(0.299±0.111、0.207±0.087)较空白组(1.000±0.149)明显降低(P<0.001)。shMsi1-1组、shMsi1-2组在48 h和72 h的增殖速度均明显低于空白组(P<0.01)。与空白组细胞形成集落数(296.33±64.04)比较,shMsi1-1组(92.00±43.31)、shMsi1-2组(78.67±32.87)明显降低(P<0.01)。与空白组细胞凋亡率[(4.01±0.26)%]比较,shMsi1-1组、shMsi1-2组[(10.22±1.04)%、(10.87±1.27)%]显著增高(P<0.001)。结论干扰Msi1基因表达可抑制结肠癌SW480细胞增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,为临床治疗结肠癌提供了一个新的干预靶点。 展开更多

关键词 结肠癌 msi1 增殖 凋亡

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siRNA干扰Msi1对人胃癌SGC-7901细胞的影响 被引量：1

6

作者 楚艳娥 朱建思 +1 位作者 魏建国 周建国 《南华大学学报（医学版）》 2010年第2期151-154,共4页

目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、侵袭与转移的影响。方法针对Msi1 mRNA序列设计合成siRNA,转染SGC-7901细胞。RT-PCR法检测Msi1基因表达;Westernblot检测survivin、caspase3及MMP-9表达;MTT法检测SGC-7... 目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、侵袭与转移的影响。方法针对Msi1 mRNA序列设计合成siRNA,转染SGC-7901细胞。RT-PCR法检测Msi1基因表达;Westernblot检测survivin、caspase3及MMP-9表达;MTT法检测SGC-7901细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果Msi1 siRNA能有效抑制胃癌SGC-7901细胞中Msi1的表达,与空白对照组比较,Msi1 siRNA组SGC-7901细胞生长、增殖速度减缓(P<0.05);survivin、MMP9蛋白表达水平显著下调(P<0.05),而caspase3蛋白表达水平上调(P<0.05);Msi1 siRNA组凋亡率增高。结论沉默Msi1对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、侵袭与转移有负性调节作用。 展开更多

关键词 msi1 RNAI 胃癌 SGC-7901细胞

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金钗石斛DnMSI1-like基因的克隆和表达分析 被引量：1

7

作者 陈莉莉 郭无瑕 +4 位作者 潘婷 刘小如 曹孟艳 王亚琴 梁山 《华南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2015年第2期96-101,共6页

MSIL(MSI1-like)是一类在真核生物中保守的蛋白质,在动物和植物的发育过程中具有多种的功能.本研究从金钗石斛花芽中分离了一个MSIL蛋白的c DNA序列,长度为1 640 bp,含有一个长度为1 206 bp的开放阅读框;预测其编码的蛋白质在序列、结... MSIL(MSI1-like)是一类在真核生物中保守的蛋白质,在动物和植物的发育过程中具有多种的功能.本研究从金钗石斛花芽中分离了一个MSIL蛋白的c DNA序列,长度为1 640 bp,含有一个长度为1 206 bp的开放阅读框;预测其编码的蛋白质在序列、结构域组织和空间结构上均与拟南芥At MSI1蛋白相似,故命名为Dn MSI1-like.Dn MSI1-like基因的表达具有明显的组织差异性,在金钗石斛的根、花和腋芽中表达较高,但在叶和假鳞茎中表达较低;低温处理时,花芽中Dn MSI1-like的表达急剧升高.研究结果为深入探索金钗石斛的生长发育如低温相关的开花调控机制提供基础. 展开更多

关键词 msi1 金钗石斛 发育调控 基因表达

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siRNA沉默Msi1表达对宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量：2

8

作者 赵芳 许春伟 +3 位作者 魏建国 梁文清 吴芬英 王宁 《浙江医学》 CAS 2018年第12期1307-1311,1415,共6页

目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法针对Msi1基因mRNA序列设计合成siRNA,转染人宫颈癌Hela细胞;实验分Msi1 siRNA组、空白对照组、脂质体组及阴性对照组;通过RT-PCR法检测Msi1基因在m RNA水... 目的探讨siRNA沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法针对Msi1基因mRNA序列设计合成siRNA,转染人宫颈癌Hela细胞;实验分Msi1 siRNA组、空白对照组、脂质体组及阴性对照组;通过RT-PCR法检测Msi1基因在m RNA水平的表达;分别利用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色试验、群体倍增时间及平皿克隆实验分析干扰Msi1基因对人宫颈癌Hela细胞的生长抑制效应;通过细胞划痕实验观察干扰Msi1对细胞迁移能力的影响;利用Transwell小室实验观察干扰Msi1对细胞侵袭能力的影响。结果 Msi1 siRNA能有效抑制人宫颈癌Hela细胞中Msi1基因的表达;Msi1 siRNA转染Hela细胞24、48、72h后,与其他各组比较,Msi1 siRNA组Hela细胞的生长、增殖速度明显减缓(均P<0.05)。空白对照组Hela细胞群体倍增时间为(20.18±0.01)h,而干扰Msi1基因处理后的Hela细胞,群体倍增时间延长至(35.68±0.04)h(P<0.05);同时平皿克隆实验结果发现,Msi1 siRNA处理后的Hela细胞与其他各组相比,Hela细胞生长明显减慢(均P<0.05);细胞划痕实验和Transwell小室实验分别显示处理后的Hela细胞其迁移和侵袭能力均明显下降,与其他各组相比差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论沉默Msi1基因表达对人宫颈癌Hela细胞的增殖、迁移及侵袭有负性调节作用。 展开更多

关键词 宫颈癌 msi1 SIRNA 增殖 迁移 侵袭

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沉默Msi1对食管鳞癌TE7细胞CCL2分泌及单核细胞趋化的影响

9

作者 王金金 秦国慧 +1 位作者 杨黎 张毅 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第3期332-336,共5页

目的:研究沉默Msi1对食管鳞癌TE7细胞CCL2分泌及单核细胞趋化的影响。方法:利用脂质体转染法将靶向Msi1的siRNA(siMsi1#1、#2)转入TE7细胞中,以转染阴性对照siRNA(siNC)的TE7细胞作为对照,采用CBA法检测细胞培养上清液中13种趋化因子的... 目的:研究沉默Msi1对食管鳞癌TE7细胞CCL2分泌及单核细胞趋化的影响。方法:利用脂质体转染法将靶向Msi1的siRNA(siMsi1#1、#2)转入TE7细胞中,以转染阴性对照siRNA(siNC)的TE7细胞作为对照,采用CBA法检测细胞培养上清液中13种趋化因子的改变,ELISA法检测细胞培养上清中CCL2质量浓度,采用Transwell实验观察细胞培养上清液对单核细胞趋化的影响。结果:与对照组相比,siMsi1#1组TE7细胞Msi1 mRNA的表达降低(P <0. 05),细胞培养上清液中CCL2的质量浓度降低(P <0. 05),趋化的单核细胞数量减少(P <0. 05)。结论:Msi1基因可能通过调控CCL2的分泌来影响食管鳞癌TE7细胞趋化单核细胞的能力。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 msi1 CCL2

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龙眼MEE70/MSI1基因DlMEE70-1a及其可变剪接体DlMEE70-1b的分离及其在体胚发生过程中的表达分析 被引量：1

10

作者 卢秉国 练从龙 赖钟雄 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期59-67,共9页

MEE70/MSI1是拟南芥母性效应胚胎滞育基因,在植物胚胎发生过程中具有重要作用。采用RACE技术获得龙眼MEE70-1a(登录号KC492117)及其可变剪接体MEE70-1b(登录号KC492118)c DNA序列,克隆MSI1g DNA(登录号KC492126)序列。生物信息学分析预... MEE70/MSI1是拟南芥母性效应胚胎滞育基因,在植物胚胎发生过程中具有重要作用。采用RACE技术获得龙眼MEE70-1a(登录号KC492117)及其可变剪接体MEE70-1b(登录号KC492118)c DNA序列,克隆MSI1g DNA(登录号KC492126)序列。生物信息学分析预测Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b均为亲水不稳定的酸性蛋白,主要定位于过氧化物酶体和细胞核,各含有4和1个WD-repeat结构域。MEE70-1a和MEE70-1b在体细胞胚胎发生过程实时荧光定量PCR分析结果表明,Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b表达趋势以心形胚为界,除了Dl MEE70-1b的不完全胚型紧实结构(ICp EC)到球形胚(GE)阶段之间,都表现出先降后升的趋势;胚性愈伤组织(EC)时期两者表达量一致且最高;心形胚(HE)时期,两者表达量一致且最低,另Dl MEE70-1b在不完全胚性紧实结构(ICp EC)表达量与心形胚基本一致。这2个表达剂量是胚胎发生的重要保障,心形胚(HE)后,Dl MEE70-1a被再次激活转录促进胚胎正常发育。从Dl MEE70-1a和Dl MEE70-1b的理化性质、WD重复结构域数量、亚细胞定位以及表达量和趋势,可以推测Dl MEE70-1a需要Dl MEE70-1b的协同来调控龙眼胚胎发育。 展开更多

关键词 龙眼 体胚发生 MEE70/MSI 母性效应 可变剪接 qPCR

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Msi1过表达对宫颈癌细胞增殖及干性维持的影响及其机制

11

作者 刘宪 张燕茹 +2 位作者 陈茜 冯倩 崔南 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第11期1403-1410,共8页

目的探讨Msi1通过Wnt/β-catenin通路促进宫颈癌细胞增殖及干细胞样特性的作用机制。方法取制备成功的Msi1稳定过表达的SiHa、HeLa细胞株及相应的对照细胞株,其中Msi1稳定过表达的SiHa细胞及其对照细胞分别命名为SiHa-Msi1组、SiHa-EGFP... 目的探讨Msi1通过Wnt/β-catenin通路促进宫颈癌细胞增殖及干细胞样特性的作用机制。方法取制备成功的Msi1稳定过表达的SiHa、HeLa细胞株及相应的对照细胞株,其中Msi1稳定过表达的SiHa细胞及其对照细胞分别命名为SiHa-Msi1组、SiHa-EGFP组,Msi1稳定过表达的HeLa细胞及其对照细胞分别命名为HeLa-Msi1组、HeLa-EGFP组。采用裸鼠成瘤检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及其相应对照组体内肿瘤形成能力;细胞计数、软琼脂克隆形成实验检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞的体外增殖能力;肿瘤细胞成球及连续成球实验检测SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞的肿瘤干细胞样特性;在SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组及相应对照组细胞中,采用报告基因分析(TOP-Flash/FOP-Flash)检测Wnt/β-catenin通路活性的变化,采用real-time PCR检测干细胞相关因子Klf4、Sox2、Oct4、Aldh的表达,采用Western blot检测Wnt信号通路中的β-catenin、SOX2蛋白的表达。结果与相应对照组相比,SiHa-Msi1组和HeLa-Msi1组体内形成肿瘤体积和质量显著增加(P<0.05),体外细胞增殖数量、软琼脂形成的单克隆数量均显著增加(P<0.05),肿瘤细胞连续成球后成球数目及直径均显著增加(P<0.05);SiHa-Msi1组、HeLa-Msi1组Wnt通路活性显著增加(P<0.05),干细胞相关因子Sox2、Oct4、Aldh的RNA表达水平显著上调(P<0.05),Wnt通路中的β-catenin和SOX2蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论Msi1过表达促进了宫颈癌细胞增殖并维持其干细胞样特性,可能通过激活Wnt/β-catenin信号通路,上调SOX2在宫颈癌细胞中的表达,从而发挥了促进宫颈癌进展的作用。 展开更多

关键词 宫颈癌 msi1 肿瘤增殖 肿瘤干细胞样特性 WNT/Β-CATENIN通路

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Msi1通过靶向调节p21对结直肠癌细胞放疗敏感性的影响 被引量：2

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作者 高超 韩春 +4 位作者 王澜 刘树堂 丁博月 田彦明 张翼 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2020年第15期1209-1217,共9页

目的放射治疗是结直肠癌综合治疗的重要组成部分,尤其是对于中晚期和术前放疗患者,目前结直肠癌对放疗敏感性较差,急需新的增敏靶点。本研究旨在探讨沉默Msi1(Musashi1)通过靶向调节p21对结直肠癌细胞放疗敏感性影响。方法蛋白质印迹法... 目的放射治疗是结直肠癌综合治疗的重要组成部分,尤其是对于中晚期和术前放疗患者,目前结直肠癌对放疗敏感性较差,急需新的增敏靶点。本研究旨在探讨沉默Msi1(Musashi1)通过靶向调节p21对结直肠癌细胞放疗敏感性影响。方法蛋白质印迹法检测结直肠癌HT29、HCT116细胞及正常肠上皮细胞CCD841中Msi1蛋白表达,选择Msi1高表达的细胞系作为后续研究的靶细胞,将含有2种不同干扰序列慢病毒分别转染该细胞后,用qRT-PCR筛选出沉默效果最好的细胞株作为沉默组。实验中将结肠癌细胞分为空白组(Blank)、阴性对照组(NC)、沉默组1(Msi1-shRNA1)和沉默组2(Msi1-shRNA2)。克隆形成实验检测沉默Msi1基因对结直肠癌细胞放射敏感性的影响。MTS法检测6Gy X射线照射后结直肠癌细胞增殖情况,并计算抑制率。流式细胞术检测6Gy X射线照射后细胞凋亡情况。蛋白质印迹法检测沉默Msi1后p21蛋白表达水平,双荧光素酶实验证实Msi1与下游基因p213′-UTR相互作用。结果结直肠癌HT29、HCT116细胞中Msi1蛋白表达水平高于正常肠上皮细胞CCD841,分别为(1.000±0.181)、(1.102±0.219)和(0.106±0.051),符合正态分布,其中HCT116细胞中Msi1蛋白表达量最高(F=32.42,P=0.0006),因此选择HCT116细胞作为靶细胞进入后续实验。Msi1-shRNA1组的沉默效果优于Msi1-shRNA2组,F=68.37,P<0.001。克隆形成实验显示,经0~8Gy X射线照射后,沉默Msi1后HCT116细胞存活曲线下降,相对于空白组和阴性对照组放射增敏比SER分别为1.56和1.47,Blank组与NC组差异无统计学意义,t=2.088,P=0.1050。MTS实验结果显示,与未照射组相比,给予6Gy照射后的24、48和72h,各组细胞的增殖速度降低,并随着时间增加抑制率逐渐增加(F照射=62.16,P<0.001),Msi1-shRNA1组细胞在各时间点的抑制率均高于另外2组细胞,F时间=71.36,P<0.001。流式细胞术显示,经过6Gy照射后Msi1-shRNA1组细胞凋亡率(28.04±5.49)%高于Blank组(13.99±3.21)%和NC组(12.42±2.29)%,F=14.57,P=0.0050。辐射后各组细胞凋亡比例均增加,但Msi1-shRNA1组增加更加明显,F=8.795,P=0.0165。Msi1-shRNA1组p21蛋白表达明显高于Blank组和NC组,分别为(1.000±0.175)、(1.040±0.130)和(2.210±0.247),F=39.15,P=0.0004。双荧光素酶实验证实Msi1-shRNA1组p213′-UTR野生型的荧光素酶活性显著上升(F=102.5,P<0.0001),而3组细胞p213′-UTR突变型的荧光素酶活性差异无统计学意义,P>0.05。结论沉默结直肠癌Msi1基因,可能通过靶向上调p21,诱导辐射后细胞凋亡,抑制放疗后肿瘤细胞增殖,从而增加放疗敏感性。 展开更多

关键词 结直肠癌 msi1 放疗敏感性 P21 凋亡

原文传递

人RNA结合蛋白MSI1 RNA干扰慢病毒载体的构建及对人脑胶质瘤细胞生物学活性的影响 被引量：1

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作者 付锴 宫睿 王伟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期2084-2087,共4页

目的 构建针对MSI1基因的小分子RNA干扰慢病毒表达载体,检测其在人脑胶质瘤U-87MG细胞中的表达效率及对细胞生物学行为的影响.方法 构建针对MSI1短发卡RNA（shRNA）的慢病毒载体pGCL-绿色荧光蛋白（GFP）-MSI1,用293T工具细胞包装后,转... 目的 构建针对MSI1基因的小分子RNA干扰慢病毒表达载体,检测其在人脑胶质瘤U-87MG细胞中的表达效率及对细胞生物学行为的影响.方法 构建针对MSI1短发卡RNA（shRNA）的慢病毒载体pGCL-绿色荧光蛋白（GFP）-MSI1,用293T工具细胞包装后,转染人脑胶质瘤U-87MG细胞,实验分为3组：（1）空白组;（2）阴性对照组;（3）pGCL-GFP-MSI组.荧光显微镜下检测转染72 h后pGCL-GFP-MSI1的转染效率;Western blot检测U-87MG细胞内MSI1蛋白和肿瘤干细胞标记蛋白HES1的表达;噻唑蓝（MTT）法检测pGCL-GFP-MSI1转染后U-87MG细胞1-7 d的增殖活性;平板克隆形成实验检测U-87 MG细胞的克隆形成能力;Transwell实验检测U-87MG细胞体外侵袭能力;流式细胞仪（FCM）检测pGCL-GFP-MSI1转染后对U-87MG细胞凋亡的影响.结果 成功构建pGCL-GFP-MSI1慢病毒载体,并成功转染U-87MG细胞,荧光显微镜显示转染效率达80％以上;Western blot结果显示pGCL-GFP-MSI1抑制U-87MG细胞中MSI1蛋白（31.64％）和HES1蛋白（37.25％）的表达（P＜0.01）;MTT结果显示转染pGCL-GFP-MSI1后第3天起U-87MG细胞的增殖活性明显下降（P＜0.01）;平板克隆形成实验结果显示转染pGCL-GFP-MSI1后U-87MG细胞的克隆形成数明显下降（27.24±2.52,P＜0.0l）;Transwell实验结果显示pGCL-GFP-MSI1转染后U-87MG细胞的侵袭细胞数明显下降（18.24 ±3.52,P＜0.01）;FCM结果表明pGCL-GFP-MSI1转染后明显提高U-87MG细胞的凋亡率（22.81％,P＜0.01）.结论 MSIl-小干扰RNA（siRNA）慢病毒载体能特异性下调人脑胶质瘤U-87MG细胞中MSI1的表达,通过降低肿瘤干细胞信号通路中相关因子的活性来抑制人脑胶质瘤U-87MG细胞的增殖活性及侵袭能力,并促进细胞的凋亡。 展开更多

关键词 msi1 RNA干扰 慢病毒载体 胶质瘤

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Msi1调控恶性肿瘤生长的研究进展 被引量：2

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作者 惠丽娜 徐忠法 范开席 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第22期1787-1790,共4页

目的总结国内外对Musashi homolog 1(简称Msi1)与各种恶性肿瘤发生发展的关系及作用机制的研究现状。方法应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,检索2010-06-2015-6文献,以"Msi1、MSI-1、Musashi-1和肿瘤"等为关键词,共检... 目的总结国内外对Musashi homolog 1(简称Msi1)与各种恶性肿瘤发生发展的关系及作用机制的研究现状。方法应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,检索2010-06-2015-6文献,以"Msi1、MSI-1、Musashi-1和肿瘤"等为关键词,共检索到英文文献211条,中文文献180条。纳入标准:1)Msi1的研究进程;2)Msi1与肿瘤之间的关系;3)发表年限较近的文献。剔除标准:1)与肿瘤不相关;2)年代久远;3)重复性。根据上述标准纳入分析文献33篇。结果 Msi1是通过调节转录后的翻译过程来保持干细胞处于未分化的状态,通过调节Notch,Wnt/β-catenin信号通路直接或间接地影响干细胞细胞增殖和细胞命运的决定以及肿瘤形成的发展。Msi1基因在各种恶性肿瘤中高表达,其作用是参与影响肿瘤有关信号通路、细胞增殖及其凋亡等;降低Msi1基因的表达水平可有效诱导癌症细胞凋亡,阻止有丝分裂和细胞周期进程,抑制肿瘤细胞增殖并导致肿瘤消退。结论 Msi1通过对多种基因的转录后调控参与了肿瘤的发生发展和转移等过程,且与肿瘤的预后及治疗有关联。Msi1的研究将对临床肿瘤疾病基因层面的深入研究和诊断治疗提供新途径,有望成为肿瘤诊疗及靶向药物研究的新靶点,但仍需要进一步的研究证实。 展开更多

关键词 MSI-1 msi1 MUSASHI-1 调控 肿瘤生长 综述文献

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白及MSI1基因的序列分析及SSR多态性分析 被引量：2

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作者 黄恻隐 赵永彬 +3 位作者 陈荣辉 李林 闻伟锷 徐德林 《生物资源》 CAS 2021年第3期218-224,共7页

通过对白及(Bletilla striata(Thunb.)Rchb. f.)的IRA1多拷贝抑制子(multicopy suppressor of IRA1,MSI1)基因序列进行生物信息学分析,并根据其核苷酸序列设计简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)引物,进一步验证其在多个白及地... 通过对白及(Bletilla striata(Thunb.)Rchb. f.)的IRA1多拷贝抑制子(multicopy suppressor of IRA1,MSI1)基因序列进行生物信息学分析,并根据其核苷酸序列设计简单重复序列(simple sequence repeats,SSR)引物,进一步验证其在多个白及地方种中高度的保守性。运用Protparam、SOPMA、SWISS-MODEL等生物信息学软件分析白及MSI1蛋白的理化性质和结构域;DNAMAN、MEGA软件分别进行氨基酸多序列比对与系统进化分析;分析序列中的SSR位点并对多个白及品系进行PAGE检测和验证。结果显示,克隆得到的BSMSI1基因全长为3 700 bp,共编码了601个氨基酸残基,预测蛋白质分子量为65 309.75kg/moL,等电点为5.95,表现出高度的保守性,而且发现不同地区的白及BSMSI1基因在遗传上具有多样性。本研究拓展了对BSMSI1序列的认识,新开发标记能有效应用于MSI1基因的检测和育种鉴定,同时也可为其他物种的MSI1基因研究提供参考。 展开更多

关键词 白及 msi1基因 结构与功能 生物信息学分析 简单重复序列

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Musashi1正调控肝细胞癌细胞的生长并促进其增殖 被引量：6

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作者 李杰 闫堃 +3 位作者 杨屹 李华 王志东 徐心 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1436-1442,共7页

目的 Musashi1(MSI1)属于RNA结合蛋白(RBP)家族,可特异性地结合mRNA并对蛋白质的翻译起激活或抑制作用,但它在肝细胞癌(HCC)中的功能还未被深入探究。本课题主要探讨MSI1在HCC细胞生长及增殖中的作用及机制。方法构建MSI1过表达或敲除... 目的 Musashi1(MSI1)属于RNA结合蛋白(RBP)家族,可特异性地结合mRNA并对蛋白质的翻译起激活或抑制作用,但它在肝细胞癌(HCC)中的功能还未被深入探究。本课题主要探讨MSI1在HCC细胞生长及增殖中的作用及机制。方法构建MSI1过表达或敲除细胞系。采用免疫组化和Western blot技术检测MSI1在HCC组织中的表达。采用MTT、流式等方法探讨过表达或沉默MSI1对HCC细胞增殖、细胞活力及细胞周期分布的影响,同时检测细胞内PCNA、Cyclin D1以及Wnt/β-catenin通路关键分子APC和β-catenin的表达。结果 MSI1在HCC组织中的表达比非肿瘤的癌旁组织高。与对照细胞相比,HepG2细胞过表达MSI1不仅显著促进了其生长(7 d时的MTT值从0.52±0.12大幅增加至1.01±0.14,P<0.01),且处于G0/G1期的细胞比率也从(58.42±3.18)%降至(40.67±1.22)%,而S期细胞比率则从(28.51±1.93)%增加至(40.06±1.92)%(P<0.01)。与此同时,细胞PCNA和Cyclin D1蛋白的表达明显上调。反之,敲除MSI1使Huh7细胞的生长显著受抑,更多细胞停滞于G0/G1期(G0/G1)期细胞比率从(43.83±1.57)%增加至(62.84±1.22)%(P<0.01),同时细胞PCNA和Cyclin D1的表达则显著下调。MSI1的过表达可以降低Wnt/β-catenin信号通路分子APC但增加β-catenin的表达,反之MSI1的敲低却可以增加细胞内APC而降低β-catenin的表达。结论 MSI1可以通过正调控HCC细胞的生长及细胞周期的进程而加速HCC病程的进展,其作用可能是通过激活Wnt/β-catenin信号通路实现的。 展开更多

关键词 肝细胞癌 msi1 细胞增殖

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结直肠癌干细胞表面标志物和信号通路研究进展 被引量：4

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作者 丁博月 韩春 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第1期133-137,共5页

肠道干细胞分为两种,一个是表达Lgr5基底柱状干细胞,其表达与疾病分期有关,调控着细胞周期不断更替;另一个是+4干细胞,与肿瘤异质性有关,表达Bmi1使细胞周期停滞,此外还包括Msi1。多项研究表明在结直肠癌中以上标志物是高表达的,并可作... 肠道干细胞分为两种,一个是表达Lgr5基底柱状干细胞,其表达与疾病分期有关,调控着细胞周期不断更替;另一个是+4干细胞,与肿瘤异质性有关,表达Bmi1使细胞周期停滞,此外还包括Msi1。多项研究表明在结直肠癌中以上标志物是高表达的,并可作用于Notch和经典Wnt信号通路促进肿瘤的发生和进展。 展开更多

关键词 结直肠癌 LGR5 BMI1 msi1 WNT信号通路 NOTCH信号通路

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Musashi-1在恶性肿瘤中的研究进展

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作者 杨慧慧 王晓芳 +1 位作者 贾友超 臧爱民 《河北医药》 CAS 2021年第9期1399-1403,共5页

MSI1(Musashi-1)是最新研究的肿瘤干细胞潜在标志物,作为一种RNA结合蛋白,在维持干细胞特性及多种肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用,能够促进肿瘤生长,促进EMT过程,调节细胞周期,抑制凋亡的发生,可能作为肿瘤诊断及治疗的新型靶点,研... MSI1(Musashi-1)是最新研究的肿瘤干细胞潜在标志物,作为一种RNA结合蛋白,在维持干细胞特性及多种肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用,能够促进肿瘤生长,促进EMT过程,调节细胞周期,抑制凋亡的发生,可能作为肿瘤诊断及治疗的新型靶点,研究MSI1在肿瘤中的功能及作用机制,将为肿瘤干细胞标志物的研究提供基础,为肿瘤治疗提供新的靶点。 展开更多

关键词 肿瘤干细胞 msi1 WNT通路 NOTCH通路

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Musashi家族在肿瘤中作用的研究进展 被引量：2

19

作者 吴晗 金润森 李鹤成 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1465-1471,共7页

RNA结合蛋白(RNA binding protein,RBP)在基因调控过程中扮演着关键作用,参与RNA的合成、选择性剪接、修饰、转运和翻译等生命活动,所以研究RNA和RBP的相互作用是探索RNA功能的关键。RBP的表达变化与多种疾病有关。Musashi(MSI)家族是... RNA结合蛋白(RNA binding protein,RBP)在基因调控过程中扮演着关键作用,参与RNA的合成、选择性剪接、修饰、转运和翻译等生命活动,所以研究RNA和RBP的相互作用是探索RNA功能的关键。RBP的表达变化与多种疾病有关。Musashi(MSI)家族是一类进化保守的RBP,其家族成员MSI1和MSI2在肿瘤发生、发展和耐药等多个关键过程中发挥作用,在血液、神经、消化、呼吸等系统的多种肿瘤中过表达,且表达变化与预后相关。MSI与相关mRNA结合可调节mRNA翻译及mRNA稳定性。MSI可以维持肿瘤干细胞数量,并影响肿瘤的增殖、侵袭、转移及耐药。将MSI基因作为靶点指导肿瘤治疗的临床前研究目前取得了一些初步的成果。该文就MSI家族蛋白的生理功能及其在肿瘤发生发展中的作用、作为诊断标志物和治疗靶点等方面的最新研究进展进行综述。 展开更多

关键词 RNA结合蛋白 MUSASHI-1 musashi-2 肿瘤 小分子抑制剂

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Musashil和Notch信号通路在脑缺血后神经发生中的作用 被引量：1

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作者 刘学娟 杨金升 《国际脑血管病杂志》 北大核心 2011年第5期397-400,共4页

Musashil是一种进化保守的RNA结合蛋白，在维持干细胞状态、分化以及肿瘤发生方面起重要作用。Notch信号通路在脑缺血后神经干细胞的增殖中起重要作用。文章简要介绍Musashil和Notch的结构和分子生物学特征，并对Musashil和Notch信号通... Musashil是一种进化保守的RNA结合蛋白，在维持干细胞状态、分化以及肿瘤发生方面起重要作用。Notch信号通路在脑缺血后神经干细胞的增殖中起重要作用。文章简要介绍Musashil和Notch的结构和分子生物学特征，并对Musashil和Notch信号通路在脑缺血再灌注后神经发生中的相互作用进行了综述。 展开更多

关键词 神经组织蛋白 RNA结合蛋白 MSll蛋白 人 受体 NOTCH 脑缺血 神经再生

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