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棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质
被引量:
20
1
作者
黄小红
陈清西
+2 位作者
尤民生
王君
关雄
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期498-502,共5页
以棉铃虫Helicoverpa armigera蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、Sephadex G-200分子筛柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为2 678.79 U/mg.以对硝基苯-N-乙...
以棉铃虫Helicoverpa armigera蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、Sephadex G-200分子筛柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为2 678.79 U/mg.以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学.结果表明:酶的最适pH为5.63,最适温度为55℃.该酶在pH 4~8区域较稳定,而在pH>8时能迅速失去活力;在50℃以下处理30 min,酶活力仍保持稳定,高于50℃,酶很快失去活力.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.16 mmol/L,最大反应速度Vm为10.73 μmol·L-1·min-1.酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为66.24 kJ/mol.
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关键词
棉铃虫
n.乙酰.p.d.氨基葡萄糖苷酶
分离纯化
动力学
稳定性
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职称材料
题名
棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质
被引量:
20
1
作者
黄小红
陈清西
尤民生
王君
关雄
机构
福建农林大学动物科学学院
厦门大学生命科学学院
出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第4期498-502,共5页
基金
国家高技术研究发展计划项目(2002AA245011)
福建省重大项目(2002N004)
文摘
以棉铃虫Helicoverpa armigera蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、Sephadex G-200分子筛柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂.纯酶的比活力为2 678.79 U/mg.以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-β-D-GlcNAc)为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学.结果表明:酶的最适pH为5.63,最适温度为55℃.该酶在pH 4~8区域较稳定,而在pH>8时能迅速失去活力;在50℃以下处理30 min,酶活力仍保持稳定,高于50℃,酶很快失去活力.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为0.16 mmol/L,最大反应速度Vm为10.73 μmol·L-1·min-1.酶催化pNP-β-D-GlcNAc反应的活化能为66.24 kJ/mol.
关键词
棉铃虫
n.乙酰.p.d.氨基葡萄糖苷酶
分离纯化
动力学
稳定性
Keywords
Helicover
p
a armigera
β-
n
-acetyl-
d
-glucosami
n
i
d
ase
isolatio
n
a
n
d
p
urificatio
n
ki
n
etics
stability
分类号
Q965 [生物学—昆虫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
棉铃虫N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质
黄小红
陈清西
尤民生
王君
关雄
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
20
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