N6-甲基腺苷修饰在呼吸系统疾病中的研究进展 被引量：1

1

作者 韩永康 杜毓锋 +3 位作者 钱力 李丹 孙梓越 刘学军 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第1期136-139,144,共5页

慢性呼吸系统疾病已成为影响我国居民健康的重要因素,给患者、社会带来沉重的经济负担。表观遗传因素在呼吸系统疾病的发生发展中有重要作用,RNA甲基化是重要表观遗传修饰方式之一,其中6-甲基腺嘌呤(m6A)作为一种转录后修饰方式在真核... 慢性呼吸系统疾病已成为影响我国居民健康的重要因素,给患者、社会带来沉重的经济负担。表观遗传因素在呼吸系统疾病的发生发展中有重要作用,RNA甲基化是重要表观遗传修饰方式之一,其中6-甲基腺嘌呤(m6A)作为一种转录后修饰方式在真核生物中广泛存在。关注m6A修饰在肺部疾病中的功能,对深入理解m6A表观遗传学调控规律,阐明肺部疾病的发病机制,提供药物治疗靶点,指导临床诊治具有重要意义。将对RNA m6A修饰在呼吸系统疾病中的研究进展作一综述。 展开更多

关键词 肺部疾病 RnA甲基化 n6-甲基腺苷修饰 甲基化转移酶 去甲基化酶 甲基化阅读蛋白

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基于N6-甲基腺苷修饰与免疫细胞浸润的结直肠癌预后模型构建及验证

2

作者 杨菁菁 郭怀娟 +4 位作者 茅静贤 王佳欣 王颖 严雪冰 潘晓萍 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第7期1-8,共8页

目的探讨N6-甲基腺苷(m^(6)A)修饰相关基因和免疫细胞浸润在结直肠癌(CRC)中的预后价值并构建相应风险模型预测患者临床结局。方法从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)下载CRC患者的肿瘤组织转录组数据及匹配临床信息,通... 目的探讨N6-甲基腺苷(m^(6)A)修饰相关基因和免疫细胞浸润在结直肠癌(CRC)中的预后价值并构建相应风险模型预测患者临床结局。方法从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合数据库(GEO)下载CRC患者的肿瘤组织转录组数据及匹配临床信息,通过共识聚类及单样本基因组富集分析明确m^(6)A修饰相关基因及免疫细胞浸润在CRC中的预后价值。基于加权基因共表达网络分析(WGCNA)筛选与两者相关的预后基因,运用Lasso回归分析构建多基因风险模型,并在基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库中对筛选出的预后基因进行表达差异分析。通过Kaplan-Meier生存分析明确风险模型在不同亚组及外部验证队列中的预测效能。结果基于21个m^(6)A修饰相关基因及24个免疫细胞浸润的特征表型均可以显著区分TCGA队列中CRC患者预后。CRC组织中多数m^(6)A修饰相关基因与免疫细胞浸润显著相关。WGCNA及Lasso回归分析筛选出4个预后基因,分别为内凝集蛋白1、淋巴细胞抗原6复合位点G6D、无调性同族体1和基质金属蛋白酶28。在结直肠癌组织中,淋巴细胞抗原6复合位点G6D和基质金属蛋白酶28的表达与癌旁组织比较,差异有统计学意义(P<0.05)。基于上述预后基因构建的风险模型能够在TCGA队列的不同临床亚组及GEO验证队列中有效识别预后不良的潜在风险人群。结论基于m^(6)A修饰及免疫细胞浸润构建风险模型能够有效预测CRC患者的临床结局,相关预后基因有望成为抗CRC的潜在分子靶点。 展开更多

关键词 结直肠癌 n6-甲基腺苷修饰相关基因 免疫细胞浸润 生物标志物 预后

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N6甲基腺苷修饰在非编码RNA中的研究进展 被引量：2

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作者 肖鹏 郎庆赋 裴铁民 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2171-2177,共7页

N6甲基腺苷(m6A)作为真核生物RNA修饰的关键位点,近年来已成为表观遗传学研究的热点。对m6A甲基化修饰的广泛研究表明,m6A影响RNA剪接、转运、翻译和稳定性等多种生物功能,这一过程也直接或间接地受到非编码RNA调控。大量的非编码RNA,例... N6甲基腺苷(m6A)作为真核生物RNA修饰的关键位点,近年来已成为表观遗传学研究的热点。对m6A甲基化修饰的广泛研究表明,m6A影响RNA剪接、转运、翻译和稳定性等多种生物功能,这一过程也直接或间接地受到非编码RNA调控。大量的非编码RNA,例如microRNAs、long non coding RNAs、circular RNAs、small nuclear RNAs和核糖体RNAs,也被m6A高度修饰,进而实现它们的生命活动和生物功能。在这里,我们将对m6A修饰与非编码RNA之间的相互作用进行综述。 展开更多

关键词 n6甲基腺苷修饰 非编码RnA 癌症

原文传递

补肾中药调控骨髓间充质干细胞成骨分化的RNA m6A修饰作用研究

4

作者 李沂霖 王花欣 +3 位作者 田硕 王洁 董仁超 刘艳秋 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第2期261-266,共6页

骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一种成体干细胞,具有成骨细胞分化能力。BMSCs成骨分化能力减弱易导致骨质疏松等多种骨相关疾病。中医学认为“肾主骨生髓”,补肾中药是治疗骨质疏松的常用药物,具有调控BMSCs成骨分化作用。腺苷N6位甲基化修... 骨髓间充质干细胞(BMSCs)是一种成体干细胞,具有成骨细胞分化能力。BMSCs成骨分化能力减弱易导致骨质疏松等多种骨相关疾病。中医学认为“肾主骨生髓”,补肾中药是治疗骨质疏松的常用药物,具有调控BMSCs成骨分化作用。腺苷N6位甲基化修饰(m6A)是真核生物RNA的转录后修饰,是BMSCs成骨分化的关键因素。探讨m6A动态修饰与BMSCs成骨分化的关系,分析补肾中药调控m6A修饰的可能作用及靶点,能够为补肾中药治疗骨质疏松提供新靶点,为中医肾藏象理论的科学阐释提供思路。 展开更多

关键词 骨间充质干细胞 n6甲基腺苷修饰 补肾中药 成骨分化 骨质疏松 靶点 作用机制 肾藏象

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乳腺癌组织中整体m6A修饰水平与YTHDF3基因的表达

5

作者 孙婷婷 方文 +2 位作者 熊伟 王伟 邵春燕 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第10期1447-1454,共8页

目的探讨乳腺癌组织中mRNA整体N6-甲基腺苷(m6A)修饰水平和甲基化阅读蛋白关键基因YTHDF3基因在乳腺癌组织和癌旁组织中的表达。方法通过生物信息学对YTHDF3基因在乳腺癌组织与癌旁组织中的表达差异及乳腺癌患者生存率进行分析;收集乳... 目的探讨乳腺癌组织中mRNA整体N6-甲基腺苷(m6A)修饰水平和甲基化阅读蛋白关键基因YTHDF3基因在乳腺癌组织和癌旁组织中的表达。方法通过生物信息学对YTHDF3基因在乳腺癌组织与癌旁组织中的表达差异及乳腺癌患者生存率进行分析;收集乳腺外科手术切除的25例乳腺癌组织和20例癌旁组织(作为对照),利用液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)方法分析乳腺癌组织与癌旁组织组中mRNA的整体甲基化水平,通过实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot实验检测YTHDF3基因在乳腺癌组织和癌旁组织中的相对表达量。结果生物信息数据库结果显示,YTHDF3基因在乳腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.001),与癌旁组织比较,YTHDF3基因只有在和81~100岁年龄段表达差异具有统计学意义(P<0.05),乳腺癌旁组织中YTHDF3基因的表达量明显低于Luminal分型的乳腺癌(P<0.01),利用受试者工作特征(ROC)曲线验证乳腺癌5年生存率和10年生存率曲线下面积(AUC)>0.56、0.60,高表达YTHDF3基因的乳腺癌患者比低表达的患者存活率低((P<0.05);LC-MS/MS结果显示,乳腺癌分子分型中Luminal型的mRNA的整体甲基化水平高于癌旁组织、差异有统计学意义(P<0.05),HER-2过表达型(HER-2 positive)与癌旁组织的整体甲基化水平差异无统计学意义(P>0.05);qPCR检测结果显示,YTHDF3基因的表达量在乳腺癌分子Luminal亚型、HER-2 positive亚型中均高于癌旁组织(P<0.05);Western blot结果显示,乳腺癌中YTHDF3蛋白水平高于癌旁组织(P<0.05)。结论乳腺癌组织中mRNA的甲基化水平高于癌旁组织,并且甲基化阅读蛋白关键基因YTHDF3基因在乳腺癌组织中表达上调。 展开更多

关键词 乳腺癌 n6-甲基腺苷修饰 液相色谱串联质谱 YTHDF3基因 实时荧光定量PCR

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FTO介导m6A修饰的PRKD2调节SIRT1/HIF-1α通路抑制糖尿病肾病足细胞损伤的机制研究 被引量：1

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作者 李亚宁 李成乾 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第1期5-9,22,共6页

目的探究脂肪含量和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)和丝氨酸-苏氨酸激酶蛋白激酶D2(serine-threonine kinase protein kinase D2,PRKD2)在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)进展中的调控作用和调节... 目的探究脂肪含量和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)和丝氨酸-苏氨酸激酶蛋白激酶D2(serine-threonine kinase protein kinase D2,PRKD2)在糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)进展中的调控作用和调节机制。方法采用35 mmol/L葡萄糖对足细胞(MPC5细胞)进行高糖刺激24h构建DKD体外模型。采用FTO过表达载体(pcDNA-FTO)和PRKD2过表达载体(pcDNA-PRKD2),或空载体(vector)转染高糖诱导的MPC5细胞。通过RT-qPCR检测FTO和PRKD2过表达效率;MeRIP检测PRKD2 mRNA的N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰水平;ELISA检测Caspase-3活性、IL-6,TNF-α和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)分泌量;流式细胞术分析细胞凋亡率;Western blot评估FTO和PRKD2蛋白水平,以及SIRT1/HIF-1α通路关键蛋白表达水平;Pearson分析FTO和PRKD2水平的相关性。结果与无高糖诱导对照组比较,高糖诱导的足细胞中FTO蛋白(0.51±0.04 vs 1.00±0.03)和PRKD2蛋白(0.45±0.03 vs 1.01±0.04)水平显著下调,差异具有统计学意义(t=13.17,16.76,均P<0.001)。高糖诱导的足细胞中FTO蛋白水平和PRKD2蛋白水平呈正相关(r2=0.7051,P<0.001)。与vector组相比,pcDNA-FTO组PRKD2 mRNA的m6A水平(0.56±0.09 vs1.01±0.13)降低,PRKD2 mRNA水平(3.16±0.14 vs 1.03±0.02)显著升高,差异具有统计学意义(t=51.37,11.82,均P<0.001)。与control组(IL-6:512.76±61.85 pg/ml,TNF-α:28.17±2.83 pg/ml,MCP-1:157.31±17.69 pg/ml)和vector组(IL-6:498.41±87.51 pg/ml,TNF-α:26.35±5.47 pg/ml,MCP-1:165.52±16.87 pg/ml)比较,pcDNA-PRKD2组IL-6(301.86±21.85 pg/ml),TNF-α(11.06±4.12 pg/ml),MCP-1分泌量(81.45±9.03pg/ml)显著减少,差异具有统计学意义(F=7.51,10.47,61.97,均P<0.01)。与control组(Caspase-3:689.65±79.5U/L,细胞凋亡率:22.31%±2.69%)和vector组(Caspase-3:715.91±113.58 U/L,细胞凋亡率:21.07%±3.28%)比较,pcDNA-PRKD2组Caspase-3活性(437.64±104.76 U/L)和细胞凋亡率(8.41%±3.15%)下降,差异具有统计学意义(F=2.35,79.13,均P<0.01)。与control组(SIRT1:1.01±0.05,HIF-1α:1.03±0.07)和vector组(SIRT1:0.97±0.05,HIF-1α:1.02±0.03)相比,pcDNA-PRKD2组SIRT1蛋白(3.51±0.15)水平升高,HIF-1α蛋白(0.37±0.07)水平降低,差异具有统计学意义(F=31.54,8.31,均P<0.01)。结论FTO介导m6A修饰的PRKD2通过SIRT1/HIF-1α通路抑制高糖诱导的足细胞炎症反应和细胞凋亡。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 足细胞 n6甲基腺苷修饰 脂肪和肥胖相关蛋白 丝氨酸-苏氨酸激酶蛋白激酶D2

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METTL3介导的m^(6)A甲基化修饰经Notch通路调控血管内皮细胞生物学活性 被引量：2

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作者 唐韵 陈思 +4 位作者 叶巍 王文喆 高颖 葛轶睿 黄振平 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2023年第5期723-730,共8页

目的:探索甲基转移酶3(METTL3)介导的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰在脉络膜新生血管发病中对血管内皮细胞生物学活性的调控作用及机制。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为:对照组(正常培养)、低密度脂蛋白(LDL)组、荧光标记L... 目的:探索甲基转移酶3(METTL3)介导的N6-甲基腺苷(m6A)甲基化修饰在脉络膜新生血管发病中对血管内皮细胞生物学活性的调控作用及机制。方法:将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为:对照组(正常培养)、低密度脂蛋白(LDL)组、荧光标记LDL(Dil-LDL)组、12.5μg/mL、25μg/mL氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)组、12.5μg/mL、25μg/mL荧光标记ox-LDL(Dil-ox-LDL)组、DMSO组、STM2457(METTL3抑制剂)组、DAPT组;将体外培养的猴视网膜-脉络膜内皮细胞(RF/6A)分为:对照组、DMSO组、12.5μg/mL ox-LDL组、DAPT组。荧光显微镜观察细胞内吞脂蛋白水平,dot blot检测m6A甲基化水平,Western blot检测METTL3及血管形成相关蛋白的表达水平,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测METTL3及血管形成相关标志物的mRNA表达水平,免疫荧光检测METTL3表达水平及定位,transwell实验检测细胞迁移能力,体外成管实验检测细胞血管形成能力。结果:与对照组相比,Dil-LDL组、12.5μg/mL、25μg/mL Dil-ox-LDL组细胞内荧光标记的脂蛋白含量显著升高,12.5μg/mL、25μg/mL ox-LDL组m6A甲基化水平显著升高(均P<0.05),METTL3蛋白表达水平显著升高(均P<0.01),细胞迁移及血管形成能力显著上升(均P<0.01),12.5μg/mL ox-LDL组METTL3 mRNA表达水平显著上调(P<0.05);与DMSO组相比,STM2457组m6A甲基化水平显著降低(P<0.05),METTL3的蛋白及mRNA表达水平无显著差异(均P>0.05),血管内皮生长因子(VEGF)等血管形成相关标志物表达水平显著下降(均P<0.05),细胞迁移及血管形成能力显著下降(均P<0.01),NICD表达水平显著下降(P<0.05);与DMSO组相比,DAPT组NICD、VEGF表达水平显著下降(均P<0.05),HUVEC及RF/6A细胞迁移及血管形成能力显著下降(均P<0.01)。结论:METTL3介导的m6A甲基化修饰在脉络膜新生血管发病中可经Notch通路促进血管内皮细胞的血管形成。 展开更多

关键词 脉络膜新生血管 n6-甲基腺苷(m_(6)A)甲基化修饰 甲基转移酶3(METTL3)

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WTAP通过调节BMI1 mRNA的m6A修饰促进胶质瘤细胞增殖和有氧糖酵解

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作者 刁新峰 李新茂 +1 位作者 候亮 魏志玄 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期655-663,共9页

背景与目的:甲基转移酶Wilms瘤1-相关蛋白(Wilms’tumor 1-associating protein,WTAP)被证实在肿瘤中发挥重要作用,本研究旨在从N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰的角度探讨WTAP在胶质瘤发生、发展过程中的作用及其机制。方法:... 背景与目的:甲基转移酶Wilms瘤1-相关蛋白(Wilms’tumor 1-associating protein,WTAP)被证实在肿瘤中发挥重要作用,本研究旨在从N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰的角度探讨WTAP在胶质瘤发生、发展过程中的作用及其机制。方法:通过芯片筛选胶质瘤中差异表达的m6A调节因子,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)评估WTAP/B细胞特异性莫洛尼氏鼠白血病病毒整合位点1(B cell-specific Moloney murine leukemia virus integration site 1,BMI1)在胶质瘤组织和细胞系中的表达。借助四甲基偶氮唑盐(methyl thiazoyl terazolium,MTT)探究WTAP/BMI1对胶质瘤细胞增殖的作用。采用细胞外酸化率(extracellular acidification rate,ECAR)试剂盒、葡萄糖消耗及乳酸生成检测试剂盒评估胶质瘤细胞有氧糖酵解情况。结果:相对于正常组织,WTAP、BMI1在胶质瘤组织中表达上调。此外,相对于HEB细胞中的WTAP(1.01±0.13)和BMI1(1.02±0.11)表达,U251细胞中的WTAP(2.38±0.17)、BMI1(2.25±0.14)表达增强(P均<0.05)。敲减WTAP在体外能抑制细胞增殖和糖酵解能力,而过表达WTAP则显示相反效果。过表达WTAP对胶质瘤细胞增殖、糖酵解的作用能被敲减BMI1部分挽救(P均<0.05)。在机制上,WTAP促进BMI1的m6A甲基化修饰,使BMI1 mRNA的稳定性增强(P均<0.05)。结论:WTAP能以m6A甲基化依赖方式促进BMI1表达,从而促进胶质瘤细胞增殖和有氧糖酵解,靶向WTAP的分子治疗手段可能为改善胶质瘤治疗效果提供新方向。 展开更多

关键词 胶质瘤 n6-甲基腺苷修饰 有氧糖酵解 甲基转移酶

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类甲基转移酶3通过促进叉头框蛋白O3的N6-甲基腺苷修饰及其表达参与糖尿病诱导的内皮细胞凋亡

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作者 唐珑佳 胡珂昕 +3 位作者 张红甜 章辉 陈晓婷 武晓泓 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期535-542,共8页

目的探讨类甲基转移酶3(METTL3)通过促进叉头框蛋白O(FOXO)3的N6-甲基腺苷修饰(m6A)及其表达参与糖尿病诱导的内皮细胞凋亡的机制。方法构建晚期糖基化终末产物(AGE)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤模型,将HAEC分为6组:细胞对照组、细... 目的探讨类甲基转移酶3(METTL3)通过促进叉头框蛋白O(FOXO)3的N6-甲基腺苷修饰(m6A)及其表达参与糖尿病诱导的内皮细胞凋亡的机制。方法构建晚期糖基化终末产物(AGE)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤模型,将HAEC分为6组:细胞对照组、细胞AGE组、细胞对照+阴性对照小干扰RNA(siRNA)组、细胞AGE+阴性对照siRNA组、细胞AGE+FOXO3 siRNA组、细胞AGE+METTL3 siRNA组,每组设置3个平行组。采用甲基化RNA免疫沉淀测序(MeRIP-Seq)及生物信息学技术检测并分析其m6A修饰谱,采用RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)检测FOXO3 mRNA的m6A修饰水平,采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测FOXO3 mRNA表达水平,Western blotting法检测FOXO3和METTL3蛋白水平。6只6周龄载脂蛋白E基因敲除雄性小鼠按随机数字表法分为单纯动脉粥样硬化组和糖尿病动脉粥样硬化组,每组均为3只。通过Western blotting检测小鼠FOXO3、METTL3蛋白表达,采用免疫荧光共定位检测小鼠FOXO3、METTL3在内皮细胞中的表达。采用两独立样本t检验进行组间比较。结果与细胞对照组相比,细胞AGE组的总m6A修饰及FOXO3的m6A修饰显著升高(P<0.001),FOXO3和METTL3的蛋白表达显著升高(P<0.05)。与单纯动脉粥样硬化组相比,糖尿病动脉粥样硬化组小鼠主动脉斑块区域内皮细胞的FOXO3和METTL3的蛋白表达显著升高(P<0.05)。与细胞AGE+阴性对照siRNA组相比,细胞AGE+FOXO3 siRNA组的凋亡显著降低(P<0.01)。与细胞AGE+阴性对照siRNA组相比,细胞AGE+METTL3 siRNA组FOXO3的m6A修饰(P<0.001)及FOXO3蛋白表达均显著下降(P<0.05),且凋亡显著降低(P<0.001)。结论AGE诱导的HAEC中m6A修饰发生了显著变化,METTL3通过促进FOXO3 mRNA的m6A修饰并调控其表达,从而参与糖尿病诱导的血管内皮细胞凋亡。 展开更多

关键词 n6-甲基腺苷修饰 晚期糖基化终末产物 人主动脉内皮细胞 类甲基转移酶3 叉头框蛋白O3

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N6-甲基腺苷修饰及其在胃癌化疗耐药作用中的研究进展

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作者 尉戎戎 付兆媛 +2 位作者 苏海霞 高永泽 赫子娇 《肿瘤学杂志》 CAS 2023年第10期828-833,共6页

胃癌是我国最常见的消化系统恶性肿瘤,其化疗耐药问题日趋严重,导致治疗有效率下降。N6-甲基腺苷(m6A)修饰作为真核生物中最丰富的RNA内部修饰,影响RNA的加工、调节mRNA翻译效率和稳定性,在胃癌中调控肿瘤基因和蛋白的表达水平,导致肿... 胃癌是我国最常见的消化系统恶性肿瘤,其化疗耐药问题日趋严重,导致治疗有效率下降。N6-甲基腺苷(m6A)修饰作为真核生物中最丰富的RNA内部修饰,影响RNA的加工、调节mRNA翻译效率和稳定性,在胃癌中调控肿瘤基因和蛋白的表达水平,导致肿瘤细胞对化疗产生抵抗。m6A修饰在胃癌化疗耐药中的双重作用可为平衡机体获得耐药过程提供思路。全文对m6A修饰及其在胃癌化疗耐药中的功能和作用机制的研究进展等进行综述,以期为临床防治m6A修饰失衡引起的胃癌化疗耐药提供理论参考及依据。 展开更多

关键词 n6-甲基腺苷修饰 胃肿瘤 化疗耐药 小分子抑制剂

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m6A修饰在乳腺癌中的分子机制研究进展

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作者 郑仁靖 喻远航 +3 位作者 邓惠芳 吕莲秋 王涵 张波 《临床医学进展》 2022年第5期3844-3849,共6页

RNA的N6-甲基腺苷(m6A)修饰是参与肿瘤恶性进程的最广泛的表观遗传修饰。大量研究表明,m6A甲基化与乳腺癌的增殖、侵袭、转移和发展密切相关。近年来,随着m6A修饰及其相关调控蛋白在乳腺癌中的生物学功能和特异性分子机制研究的不断深入... RNA的N6-甲基腺苷(m6A)修饰是参与肿瘤恶性进程的最广泛的表观遗传修饰。大量研究表明,m6A甲基化与乳腺癌的增殖、侵袭、转移和发展密切相关。近年来,随着m6A修饰及其相关调控蛋白在乳腺癌中的生物学功能和特异性分子机制研究的不断深入,两者之间复杂的调控关系逐渐清晰。本文旨在探讨近年来m6A修饰在肿瘤学中的研究进展。此外,我们试图探讨m6A修饰的新型小分子药物在乳腺癌治疗中的前景和局限性。 展开更多

关键词 乳腺癌 n6-甲基腺苷修饰 靶向治疗

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M6A修饰调控成脂分化的研究进展 被引量：1

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作者 王静 闫爽 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2022年第6期894-898,共5页

N6-甲基腺苷(m6A)修饰是哺乳动物中最丰富、最普遍的mRNA表观遗传修饰,并在调节细胞过程和基因表达中起关键作用。目前发现m6A修饰可以通过调控脂肪分化的特异基因、脂肪生成关键酶等因子的表达,进而调控脂肪生成。作者就m6A相关酶和蛋... N6-甲基腺苷(m6A)修饰是哺乳动物中最丰富、最普遍的mRNA表观遗传修饰,并在调节细胞过程和基因表达中起关键作用。目前发现m6A修饰可以通过调控脂肪分化的特异基因、脂肪生成关键酶等因子的表达,进而调控脂肪生成。作者就m6A相关酶和蛋白在脂肪生成中的作用机制以及在脂肪生成的不同阶段是如何发挥作用的作一综述,旨在为更好地理解脂肪生成以及为肥胖症的治疗提供新靶点。 展开更多

关键词 n6-甲基腺苷修饰 脂肪细胞 脂肪生成 肥胖 文献综述

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METTL3及其在胃癌发生发展及治疗中作用的研究进展

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作者 尉戎戎 付兆媛 +2 位作者 苏海霞 高永泽 赫子娇 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第20期4010-4014,共5页

N6-甲基腺苷(N6-methyladensine,m6A)修饰在细胞分化、免疫和肿瘤发生发展中具有重要作用,也是近几年表观转录组学的研究热点。甲基转移酶3(methyltransferase-like 3,METTL3)是m6A甲基转移酶复合体(methyltransferase complex,MTC)中... N6-甲基腺苷(N6-methyladensine,m6A)修饰在细胞分化、免疫和肿瘤发生发展中具有重要作用,也是近几年表观转录组学的研究热点。甲基转移酶3(methyltransferase-like 3,METTL3)是m6A甲基转移酶复合体(methyltransferase complex,MTC)中的唯一催化亚基,其介导的m6A修饰在胃癌(gastric cancer,GC)发生发展中起着重要作用,因此可能成为新的肿瘤表观遗传调节剂。该文系统总结METTL3的结构基础、生物学功能,并阐述了METTL3在胃癌中的致癌功能及其潜在分子机制,以期为胃癌的治疗提供新的思路及方案。 展开更多

关键词 甲基转移酶样3 n6-甲基腺苷修饰 表观遗传修饰 胃癌

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METTL3介导的LncRNA MIR99AHG通过抑制miR-136-5p表达诱导卵巢颗粒细胞凋亡的机制研究

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作者 常建芳 孙延庆 《中国计划生育和妇产科》 2024年第6期58-64,共7页

目的 研究LncRNA MIR99AHG(MIR99AHG)在化疗药物导致的卵巢颗粒细胞凋亡中的作用及其潜在的调节机制。方法 采集正常女性和卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)患者的卵泡液,检测MIR99AHG表达。将卵巢颗粒细胞KGN分为对照组、顺... 目的 研究LncRNA MIR99AHG(MIR99AHG)在化疗药物导致的卵巢颗粒细胞凋亡中的作用及其潜在的调节机制。方法 采集正常女性和卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)患者的卵泡液,检测MIR99AHG表达。将卵巢颗粒细胞KGN分为对照组、顺铂组、顺铂+NC shRNA组、顺铂+sh-MIR99AHG组、顺铂+vector组、顺铂+OE-METTL3组、顺铂+OE-METTL3+OE-MIR99AHG组、顺铂+OE-MIR99AHG组、顺铂+NC mimic组、顺铂+miR-136-5p mimic组及顺铂+sh-MIR99AHG+NC inhibitor组和顺铂+sh-MIR99AHG+miR-136-5p inhibitor组。KGN细胞经相应载体或质粒处理后,采用RIP分析MIR99AHG的m6A修饰水平;在线数据库预测MIR99AHG与miR-136-5p的结合位点,并通过荧光素酶报告基因分析进行验证;采用CCK-8和流式细胞术分析KGN细胞的活力和凋亡水平;ELISA检测Caspase-3酶活性;Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2和Bax表达水平。结果 与正常女性相比,POF患者卵泡液中MIR99AHG表达水平显著上调(P<0.001)。与对照组相比,顺铂处理组KGN细胞中MIR99AHG表达显著上调,METTL3表达及蛋白水平显著下调(P<0.05)。与对照组相比,顺铂处理组KGN细胞活力显著降低,细胞凋亡率显著升高(P<0.05);而与NC shRNA组相比,sh-MIR99AHG组KGN细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05)。RIP分析发现,Anti-m6A抗体下拉复合物中MIR99AHG显著富集。与vector组相比,OE-METTL3组MIR99AHG的m6A水平显著升高,MIR99AHG mRNA表达水平显著降低(P<0.05);OE-METTL3组KGN细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著降低(P<0.05);共转染OE-MIR99AHG可逆转OE-METTL3对KGN细胞活力、凋亡及相关蛋白表达的影响。miR-136-5p与MIR99AHGA存在结合位点,MIR99AHGA负调控miR-136-5p表达。与NC-mimic组相比,miR-136-5p mimic组细胞活力及BCL-2蛋白表达明显升高,细胞凋亡率、Caspase-3酶活性及Bax蛋白表达明显降低(P<0.05)。共转染miR-136-5p inhibitor逆转了sh-MIR99AHG对细胞KGN细胞活力、凋亡及相关蛋白表达的影响(P<0.05)。结论 顺铂诱导MIR99AHG在卵巢颗粒细胞中上调,METTL3通过m6A甲基化修饰抑制MIR99AHG表达,促进MIR99AHG靶标miR-136-5p的上调,从而抑制卵巢颗粒细胞凋亡,改善化疗药物顺铂介导的卵巢早衰。 展开更多

关键词 卵巢颗粒细胞 长链非编码mir-99a-let-7c簇宿主基因 n6-甲基腺苷修饰 n6腺苷甲基转移酶样3 微小核糖核酸-136-5p

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去甲基化酶ALKBH5高、低表达食管鳞癌细胞株的构建 被引量：1

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作者 方婷晓 翟坚学 +3 位作者 林桃燕 别亚男 肖东 蔡开灿 《山东医药》 CAS 2019年第12期37-40,共4页

目的构建高、低表达去甲基化酶ALKBH5的食管鳞癌(ESCC)细胞株。方法将生长状态良好的人源胚胎肾细胞293T于培养瓶内培养,分别记为A、B、a、b、c组,待细胞融合80%～90%后进行质粒转染,A组293T细胞转染高表达ALKBH5的质粒p LV-ALKBH5,B组2... 目的构建高、低表达去甲基化酶ALKBH5的食管鳞癌(ESCC)细胞株。方法将生长状态良好的人源胚胎肾细胞293T于培养瓶内培养,分别记为A、B、a、b、c组,待细胞融合80%～90%后进行质粒转染,A组293T细胞转染高表达ALKBH5的质粒p LV-ALKBH5,B组293T细胞转染对照质粒p LV-con,上述2个质粒中均带有GFP蛋白和Flag标签蛋白(用于后续感染细胞的筛选); a组293T细胞转染低表达ALKBH5的质粒p LKO-shALKBH5-1,b组293T细胞转染低表达ALKBH5的质粒p LKO-shALKBH5-2,c组293T细胞转染对照质粒p LKO-shSCR,上述3个质粒中均带有嘌呤霉素抗性(用于后续感染细胞的筛选)。上述各组293T细胞质粒转染72 h后,分别收集细胞上清液,离心后分装;用A、B组细胞上清液分别感染ESCC细胞株(Eca109细胞和Kyse510细胞),采用流式细胞术筛选GFP蛋白(+)的细胞待测;用a、b、c组细胞上清液分别感染ESCC细胞株(Eca109细胞和TE-13细胞),用嘌呤霉素筛选细胞待测。采用qRT-PCR法和Western blotting法分别检测感染高、低表达ALKBH5上清液的ESCC细胞中ALKBH5 mRNA和蛋白。结果感染A组细胞上清液的Eca109细胞、Kyse510细胞中ALKBH5 mRNA和蛋白的相对表达量均显著高于感染B组细胞上清液的Eca109细胞、Kyse510细胞(P均<0. 05),感染a、b组细胞上清液的Eca109细胞、TE-13细胞中ALKBH5 mRNA和蛋白的相对表达量均显著低于感染c组细胞上清液的Eca109细胞、TE-13细胞(P均<0. 05)。结论成功构建高、低表达ALKBH5的ESCC细胞株,为进一步探讨ALKBH5在ESCC发生发展中的作用提供了细胞模型。 展开更多

关键词 去甲基化酶 去甲基化酶ALKBH5 细胞株构建 RnA甲基化修饰 n6-甲基腺苷化修饰 食管鳞状细胞癌细胞

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氧化钕暴露引起人胚肺成纤维细胞m6A修饰的改变及其机制

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作者 赵钊 郑婧婧 +4 位作者 杨茗琁 王素华 史雪敏 杲淑雯 赵宇航 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1014-1023,共10页

[背景]职业和环境颗粒物可引起机体纤维化,并伴随RNA的m6A修饰改变,氧化钕(Nd2O3)可导致小鼠肺部发生纤维化,里面含有大量成纤维细胞。[目的]探讨Nd2O3引起人胚肺成纤维细胞(HELF细胞)纤维化过程中肿瘤坏死因子受体相关蛋白6/核因子-κB... [背景]职业和环境颗粒物可引起机体纤维化,并伴随RNA的m6A修饰改变,氧化钕(Nd2O3)可导致小鼠肺部发生纤维化,里面含有大量成纤维细胞。[目的]探讨Nd2O3引起人胚肺成纤维细胞(HELF细胞)纤维化过程中肿瘤坏死因子受体相关蛋白6/核因子-κB(TRAF6/NF-κB)信号通路的m6A修饰变化,并确定TRAF6的关键m6A修饰位点。[方法]不同浓度的Nd2O3(0、1.563、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200 mg·L^(-1))染毒HELF细胞24、48 h,检测细胞活力,确定染毒时间及剂量。检测纤维化指标[羟脯氨酸(HYP)、转化生长因子-β1(TGF-β1)]、m6A甲基化水平、甲基化转移酶(METTL3和METTL14)、去甲基化酶(FTO和ALKBH5)、阅读蛋白(YTHDC2和YTHDF2)、纤维化相关基因[Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)、波形蛋白(vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)]、信号通路相关蛋白(TRAF6、NFKB1、P65、P-P65)等蛋白和基因表达情况。采用RNA甲基化免疫共沉淀-实时荧光定量PCR(MeRIPqPCR)法检测TRAF6 mRNA中m6A的富集情况。[结果]通过检测细胞活力,确定实验染毒剂量为6.25、12.5、25 mg·L^(-1),染毒时间为48 h。暴露48 h后,相较于对照组,25 mg·L^(-1)Nd2O3组HYP的含量升高,6.25、12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3组TGF-β1的含量均升高(P<0.05);HELF细胞12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3组总体m6A甲基化的含量升高(P<0.05);在m RNA水平上,甲基化转移酶METTL3、METTL14(6.25、12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3组)的m RNA表达升高(P<0.05);阅读蛋白YTHDF2(6.25、12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3组)的mRNA表达升高(P<0.05),而YTHDC2(25 mg·L^(-1)Nd2O3组)的mRNA表达降低(P<0.05);去甲基化酶FTO(12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3组)和ALKBH5(25 mg·L^(-1)Nd2O3组)的mRNA表达降低(P<0.05);纤维化相关基因vimentin、α-SMA、collagen-Ⅰ(6.25、12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3)的mRNA表达升高(P<0.05);通路相关基因TRAF6(25 mg·L^(-1)Nd2O3组)、NFKB1(12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3组)的mRNA表达升高(P<0.05);在蛋白水平上,相比于对照组,甲基化转移酶METTL3(25 mg·L^(-1)Nd2O3组)和METTL14(12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3组)升高(P<0.05);阅读蛋白YTHDF2(12.5、25 mg·L^(-1)Nd2O3组)升高,而YTHDC2(25 mg·L^(-1)Nd2O3组)降低(均P<0.05);去甲基化酶FTO(25 mg·L^(-1)Nd2O3组)降低(P<0.05);纤维化相关蛋白vimentin在Nd2O3浓度为25 mg·L^(-1)时升高,α-SMA、collagen-Ⅰ的蛋白相对表达量在Nd2O3浓度为12.5、25 mg·L^(-1)时升高(均P<0.05);TRAF6和P-P65在Nd2O3浓度为25 mg·L^(-1)时升高(均P<0.05)。MeRIP-qPCR结果显示,相较于对照组,Nd2O3暴露组的m6A富集比例明显增加(P<0.05)。[结论]HELF暴露于Nd2O3后,细胞发生纤维化相关指标改变,使得部分m6A甲基化酶表达上升,去甲基化酶表达下降,从而使m6A甲基化上升,并可能通过激活TRAF6/NF-κB信号通路,促进纤维化的进展。 展开更多

关键词 氧化钕 纤维化 n6-甲基腺苷修饰 肺成纤维细胞 肿瘤坏死因子受体相关蛋白6/核因子-κB

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干扰RNA METTL14对大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的影响

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作者 杨书宁 方丽 张其超 《临床肺科杂志》 2024年第12期1832-1838,共7页

目的探究干扰RNA甲基转移酶样蛋白14(methyltransferase-like 14,METTL14)在转化因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转移中的作用。方法大鼠肺成纤维细胞中构建METTL14小干扰RNA(smal... 目的探究干扰RNA甲基转移酶样蛋白14(methyltransferase-like 14,METTL14)在转化因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)诱导的大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转移中的作用。方法大鼠肺成纤维细胞中构建METTL14小干扰RNA(small interfering RNA METTL14,si-METTL14)序列(si-METTL14-122、si-METTL14-300、si-METTL14-450)及对照siRNA(Negative control siRNA,si-NC)。建立TGF-β1(20 ng/mL)诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化模型,转染si-NC及si-METTL14序列至肺成纤维细胞,检测METTL14、肌成纤维细胞标志物Ⅰ型胶原蛋白α1(collagen typeⅠalpha 1,COL1A1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)及肌成纤维细胞转化负向调控因子Smad家族7号蛋白(Smad family member 7,Smad7)的mRNA和蛋白水平。结果si-METTL14有效沉默肺成纤维细胞METTL14表达水平。肌成纤维细胞转化模型组中METTL14表达显著升高(P<0.05)。与control组相比,TGF-β1诱导model组COLIA1、α-SMA表达显著升高,Smad7表达显著降低,转染si-METTL14抑制COLIA1、α-SMA表达,促进Smad7表达(P<0.05)。结论METTL14抑制TGF-β1诱导大鼠肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,且可能与METTL14上调Smad7表达有关。 展开更多

关键词 n6-甲基腺苷(m6A)修饰 甲基转移酶样蛋白14 肺纤维化 成纤维细胞分化

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m6A相关长链非编码RNA在黑色素瘤患者预后中的作用研究

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作者 张玉艳 黄亚鹏 +3 位作者 陈倩梅 龙惠 黄久遂 朱慧兰 《今日药学》 CAS 2022年第6期453-461,共9页

目的探讨N6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰相关的长链非编码RNA(lncRNA)在黑色素瘤预后中的作用以及可能的机制。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载黑色素瘤患者的测序和临床数据并进行整合,利用皮尔逊相关系数分析获得与m6A甲基化修饰... 目的探讨N6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰相关的长链非编码RNA(lncRNA)在黑色素瘤预后中的作用以及可能的机制。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载黑色素瘤患者的测序和临床数据并进行整合,利用皮尔逊相关系数分析获得与m6A甲基化修饰酶相关的lncRNA,并基于这些lncRNA在肿瘤患者中的表达通过一致性聚类分析确定黑色素瘤患者的不同分子亚型,进一步分析患者亚型之间肿瘤微环境的差异分布,筛选存在预后价值的lncRNA并进行基因评分(gene score=∑PC1i+∑PC2i),进而分析高/低评分患者之间的差异表达基因与分子通路。结果通过获取的468例黑色素瘤患者的基因测序结果和临床数据,筛选出453个与m6A甲基化修饰酶相关的lncRNA,并基于这些lncRNA在肿瘤患者中确定出两种分子亚型—cluster1与clueter2,其中cluster1的预后明显差于cluster2(P<0.001),而且亚型之间的肿瘤微环境存在明显差异,其中M2型巨噬细胞和滤泡辅助性T细胞在cluster1中表达明显高于cluster2(P<0.05),而静息性NK杀伤细胞、激活的记忆CD4T细胞及M1型巨噬细胞在cluster1中表达明显低于cluster2(P<0.05)。同时获得85个存在预测预后价值的m6A-lncRNA(P<0.05),基因评分高的情况下黑色素瘤患者预后更佳,且高评分患者中的浸润性免疫细胞更为活跃,对于应用PD1与CTLA4免疫抑制剂治疗的应答率更高,此外,高/低评分患者间存在大量差异表达基因,并富集在T细胞激活等免疫细胞调控通路。结论本研究显示m6A甲基转移酶相关lncRNAs与黑色素瘤的预后密切相关,m6A-lncRNAs可能在黑色素瘤肿瘤微环境分布中发挥着一定的调控功能,并可有效预测其对PD1与CTLA4免疫抑制剂治疗反应。 展开更多

关键词 黑色素瘤 n6甲基腺苷(m6A)甲基化修饰 长链非编码RnA 免疫调节 基因评分

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METTL3在心血管疾病中的作用机制研究进展 被引量：1

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作者 卢珊珊 刘晗琪 刘俊文 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2022年第5期369-374,共6页

近年来,由于RNA的甲基化修饰在基因转录后调控中发挥重要作用而引起人们高度关注。其中,RNA的N6甲基腺苷(m6A)修饰是mRNA中除5′帽子结构外含量最高的甲基化修饰。调控m6A修饰的酶分为三大类:RNA甲基转移酶、RNA去甲基化酶和RNA甲基化... 近年来,由于RNA的甲基化修饰在基因转录后调控中发挥重要作用而引起人们高度关注。其中,RNA的N6甲基腺苷(m6A)修饰是mRNA中除5′帽子结构外含量最高的甲基化修饰。调控m6A修饰的酶分为三大类:RNA甲基转移酶、RNA去甲基化酶和RNA甲基化识别酶,它们分别对RNA的N6-腺苷酸起着催化甲基化修饰、去除甲基化修饰及识别甲基化位点的作用,进而参与下游翻译、RNA降解、控制RNA出核速度等过程。在这些酶中,METTL3作为RNA的甲基转移酶核心成分,具有调控细胞RNA整体m6A修饰的作用。心血管疾病是一类受后天环境因素影响较大的疾病,而后天环境因素通常可以通过表观遗传学的相关机制影响疾病的发生发展,故以转录后调控为核心的表观遗传学在心血管疾病研究中成为热门话题。本综述旨在对近几年与METTL3在心血管疾病中的相关研究进行简单整理总结,有望帮助后续的基础科研和临床工作者了解RNA的m6A修饰在心血管疾病发生发展机制中的研究进展。 展开更多

关键词 n6-甲基腺苷修饰 RnA甲基转移酶 甲基转移酶3 心血管疾病

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