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NDRG2通过BRD4/c-Myc通路抑制黏液表皮样癌细胞增殖及迁移侵袭的机制研究
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作者 魏欣欣 封琳 +2 位作者 卜歆 申亮亮 李德超 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期318-322,共5页
目的:研究NDRG2基因抑制人黏液表皮样癌细胞增殖及迁移侵袭的调控机制。方法:建立MC3细胞过表达NDRG2和MEC1细胞敲降NDRG2模型,用Westernblot和Real-timePCR检测c-Myc蛋白和mRNA的表达;荧光素酶报告基因实验检测c-Myc启动子活性;染色质... 目的:研究NDRG2基因抑制人黏液表皮样癌细胞增殖及迁移侵袭的调控机制。方法:建立MC3细胞过表达NDRG2和MEC1细胞敲降NDRG2模型,用Westernblot和Real-timePCR检测c-Myc蛋白和mRNA的表达;荧光素酶报告基因实验检测c-Myc启动子活性;染色质免疫共沉淀(ChIP)检测BRD4与c-Myc启动子结合活性;CCK-8试剂盒检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移侵袭。结果:过表达NDRG2的MC3细胞中c-MycmRNA和蛋白表达减少、c-Myc启动子活性降低、BRD4与c-Myc启动子结合活性降低;敲降NDRG2的MEC1细胞中c-MycmRNA和蛋白表达增加、c-Myc启动子活性升高、BRD4与c-Myc启动子结合活性升高;过表达NDRG2的MC3细胞增殖和转移能力降低,而同时过表达c-Myc后细胞活力恢复,敲降NDRG2的MEC1细胞增殖和转移能力增加,而同时敲降c-Myc表达后细胞活力被抑制。结论:NDRG2通过抑制BRD4与c-Myc结合抑制c-Myc表达,抑制黏液表皮样癌细胞的增殖和迁移侵袭能力。 展开更多
关键词 人黏液表皮样癌 ndrg2 C-MYC BRD4 转录调控 启动子
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肺腺癌中NDRG2与上皮-间质转化的关系
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作者 何淼钦 田林 《诊断病理学杂志》 2023年第12期1080-1083,1088,共5页
目的探究肺腺癌中N-myc下游调节因子2(NDRG2)与上皮-间质转化(EMT)的关系及临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测104例肺腺癌癌组织及癌旁组织中NDRG2及EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin的表达,分析NDRG2与EMT相关蛋白的相关性,及N... 目的探究肺腺癌中N-myc下游调节因子2(NDRG2)与上皮-间质转化(EMT)的关系及临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测104例肺腺癌癌组织及癌旁组织中NDRG2及EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin的表达,分析NDRG2与EMT相关蛋白的相关性,及NDRG2与肺腺癌临床病理特征的关系。结果肺腺癌组织中NDRG2、E-cadherin低表达率与癌旁组织差异显著(P<0.001)。肺腺癌组织Vimentin高表达率与癌旁组织差异显著(P<0.001)。NDRG2低表达与肺腺癌分化程度、pTNM分期、脉管及神经侵犯及淋巴结转移显著相关(P<0.05),Spearman相关性分析结果显示,NDRG2与E-cadherin的表达呈正相关(r=0.361,P<0.001),与Vimentin的表达呈负相关(r=-0.243,P<0.001)。结论肺腺癌组织中NDRG2低表达,且与肺腺癌中EMT相关蛋白表达呈负相关,肺腺癌中NDRG2表达缺失或下调可能导致EMT的发生发展从而促进肿瘤转移。 展开更多
关键词 肺腺癌 ndrg2 上皮-间质转化 免疫组织化学
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Ndrg2基因及NDRG2蛋白的生物信息学分析 被引量:9
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作者 张文红 刘新平 +2 位作者 王琰 韩月恒 药立波 《第四军医大学学报》 北大核心 2003年第17期1537-1539,共3页
目的 :对ndrg2 (n mycdownsreamregulatorgene 2 )基因调控区和NDRG2蛋白序列进行生物信息学分析 ,从结构上预测其功能 .方法 :运用internet网络上的数据库及程序 ,对ndrg2基因的调控区和NDRG2蛋白的二级结构进行生物信息学分析 .结果 :... 目的 :对ndrg2 (n mycdownsreamregulatorgene 2 )基因调控区和NDRG2蛋白序列进行生物信息学分析 ,从结构上预测其功能 .方法 :运用internet网络上的数据库及程序 ,对ndrg2基因的调控区和NDRG2蛋白的二级结构进行生物信息学分析 .结果 :ndrg2基因调控区存在多种转录因子结合位点 ,功能主要涉及组织特异性表达调控 ,细胞生长发育相关基因和应激反应基因的表达调控等 ;NDRG2蛋白的结构属于α/β水解酶类折叠 ,其分类预测表明与细菌环氧化物水解酶的二级结构极为相似 .结论 :生物信息学分析提示NDRG2蛋白具有一定的酶活性 ,可能参与细胞抗氧化应激反应 ,内外源有毒物质的代谢 。 展开更多
关键词 ndrg2基因 ndrg2蛋白 生物信息学分析 α/β水解酶
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用比较基因组学方法分析人NDRG2的生物学功能 被引量:3
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作者 江宁 刘学武 +1 位作者 刘文超 刘新平 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第18期1821-1824,共4页
目的:预测NDRG2的功能,为进一步进行实验研究提供线索.方法:用比较基因组学分析ndrg2的转录调控,搜索其同源蛋白以及理解NDRG2的空间结构.结果:人ndrg2有两个转录起始位点,长转录起始位点与牛ndrg2的转录起始点相似;短转录起始点与小鼠n... 目的:预测NDRG2的功能,为进一步进行实验研究提供线索.方法:用比较基因组学分析ndrg2的转录调控,搜索其同源蛋白以及理解NDRG2的空间结构.结果:人ndrg2有两个转录起始位点,长转录起始位点与牛ndrg2的转录起始点相似;短转录起始点与小鼠ndrg2的转录起始点相似.发现了许多物种中NDRG2的同源蛋白,其中MESK2为NDRG2在果蝇中的同源蛋白.许多NDRG2的结构邻居被找到.NDRG2蛋白中水解酶的关键氨基酸已发生改变.结论:ndrg2在人中有两种不同的转录调节方式,两个转录起始点之间可能存在一个微小启动子;NDRG2同源蛋白只存在于后生生物层,在原核生物层中不存在,这些同源蛋白参与了细胞的分化;NDRG2在空间结构上属于α/β水解酶超家族,但由于关键氨基酸的缺失,其可能没有水解酶活性. 展开更多
关键词 ndrg2基因 ndrg2蛋白 比较基因组学 生物信息学 α/β水解酶
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NDRG2对肝癌细胞HepG2凋亡的诱导作用 被引量:21
5
作者 吴国强 刘新平 +6 位作者 王立峰 张文红 张健 李开宗 窦科峰 张雪峰 药立波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期357-360,共4页
目的 :探讨NDRG2对肝癌细胞HepG2凋亡的诱导作用。方法 :用RT PCR获取NDRG2基因。测序判断正确后 ,将其克隆入含绿色荧光蛋白 (GFP)基因的真核表达载体pIRES2 EGFP中 ,并转染NDRG2表达阴性的HepG2细胞。用光镜观察转染细胞的形态变化 ... 目的 :探讨NDRG2对肝癌细胞HepG2凋亡的诱导作用。方法 :用RT PCR获取NDRG2基因。测序判断正确后 ,将其克隆入含绿色荧光蛋白 (GFP)基因的真核表达载体pIRES2 EGFP中 ,并转染NDRG2表达阴性的HepG2细胞。用光镜观察转染细胞的形态变化 ;荧光显微镜观察NDRG2蛋白的定位 ;流式细胞仪分析细胞周期的改变 ;透射电镜进一步观察细胞超微结构的改变。结果 :获得了NDRG2基因 ,成功地构建了 pIRES2 EGFP NDRG2真核表达载体。转染HepG2细胞后 ,细胞生长受抑 ,结构破坏并死亡。荧光显微镜观察到NDRG2在胞质中表达 ,流式细胞仪检测出现G1期阻滞和凋亡峰 ,透射电镜观察到典型的细胞凋亡特征。结论 :NDRG2基因具有诱导HepG2细胞凋亡的作用 。 展开更多
关键词 ndrg2 HEPG2 GFP 细胞凋亡
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Ndrg2基因表达对胃癌细胞增殖调控及其机理的研究 被引量:12
6
作者 刘新平 邓艳春 +4 位作者 韩炯 李剑 王吉村 李莹 药立波 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期116-121,共6页
为研究Ndrg2基因在人类肿瘤发生发展中的作用 ,以不表达Ndrg2基因的胃癌细胞系HGC 2 7和表达Ndrg2基因的胃癌细胞系SGC 790 1作为对比材料 ,以Ndrg2基因转染HGC 2 7胃癌细胞系 ,以及用Ndrg2的反义寡核苷酸封闭SGC 790 1胃癌细胞系中Ndrg... 为研究Ndrg2基因在人类肿瘤发生发展中的作用 ,以不表达Ndrg2基因的胃癌细胞系HGC 2 7和表达Ndrg2基因的胃癌细胞系SGC 790 1作为对比材料 ,以Ndrg2基因转染HGC 2 7胃癌细胞系 ,以及用Ndrg2的反义寡核苷酸封闭SGC 790 1胃癌细胞系中Ndrg2基因的表达 .发现Ndrg2可以抑制HGC 2 7胃癌细胞的软琼脂集落形成 ,有一定诱导细胞凋亡的作用 ,对细胞周期蛋白E的表达有明显下调作用 .当封闭了SGC 790 1胃癌细胞中Ndrg2基因表达的软琼脂集落形成受到抑制 ,流式细胞仪检测发现此时的SGC 790 1细胞周期被阻滞在G1期 ,细胞周期蛋白D1和E表达下调 .Ndrg2基因对两种肿瘤细胞中的细胞外信号调节激酶 (ERK)和P38的表达也有不同的影响 . 展开更多
关键词 ndrg2基因 胃癌细胞增殖 调控 机理 细胞周期蛋白
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NDRG2在人胚胎组织中的表达分布特点 被引量:12
7
作者 胡晓兰 药立波 +2 位作者 张远强 邓艳春 刘新平 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期331-336,共6页
本文旨在研究NDRG2在不同胎龄人胚胎组织中的表达水平及细胞定位。利用RT-PCR和Western blot研究NDRG2 mRNA和蛋白在胎心、肺、肝和肾中的表达水平,免疫组织化学分析NDRG2蛋白在多种胚胎组织中的分布特点。结果表明,NDRG2在胚胎组织中... 本文旨在研究NDRG2在不同胎龄人胚胎组织中的表达水平及细胞定位。利用RT-PCR和Western blot研究NDRG2 mRNA和蛋白在胎心、肺、肝和肾中的表达水平,免疫组织化学分析NDRG2蛋白在多种胚胎组织中的分布特点。结果表明,NDRG2在胚胎组织中的表达随胚龄的延长而增加。NDRG2 mRNA和蛋白在胎心和肺中的变化一致;在胎肝中mRNA表达低而蛋白表达高,在胎肾中则相反。NDRG2蛋白阳性反应产物存在于细胞胞浆,见于小肠绒毛上皮细胞、结肠上皮细胞、皮肤表层细胞及毛囊、肺内小气道内衬上皮细胞、肝细胞、心肌细胞、胸腺小体、肾小管上皮细胞。结果提示,NDRG2蛋白可能不是一个组织特异性蛋白,并在组织和器官的形成中起作用。 展开更多
关键词 ndrg2 胚胎 组织分布
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抑癌候选基因NDRG2在乳腺肿瘤组织及乳腺癌细胞系中的表达分析 被引量:15
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作者 刘娜 刘新平 +3 位作者 王立峰 张健 王晓斌 药立波 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第12期1065-1068,共4页
目的 :分析抑癌候选基因NDRG2在人类乳腺肿瘤组织及乳腺癌细胞系中的表达情况 .方法 :收集 4种乳腺癌细胞系及 2 1例乳腺肿瘤组织及其癌旁组织 ,提取总RNA ,应用半定量RT PCR及RNA斑点杂交的方法检测NDRG2mRNA的表达水平 .为进一步分析N... 目的 :分析抑癌候选基因NDRG2在人类乳腺肿瘤组织及乳腺癌细胞系中的表达情况 .方法 :收集 4种乳腺癌细胞系及 2 1例乳腺肿瘤组织及其癌旁组织 ,提取总RNA ,应用半定量RT PCR及RNA斑点杂交的方法检测NDRG2mRNA的表达水平 .为进一步分析Ndrg2蛋白质的表达水平 ,分别提取 2 1例组织及细胞系的总蛋白 ,应用蛋白印迹技术检测其Ndrg2的蛋白表达水平 ,同时运用免疫组化的方法检测 4种乳腺癌细胞系中Ndrg2的表达情况 .结果 :RT PCR结果显示 ,4种乳腺癌细胞系中 ,有 3种NDRG2mRNA水平明显降低 .2 1例乳腺肿瘤组织中 ,有 5例NDRG2的mRNA水平明显降低 .蛋白印迹结果显示 ,筛选出的 3种低表达NDRG2mRNA乳腺癌细胞系中 2种Ndrg2的蛋白表达明显降低 ,而有 1种Ndrg2的蛋白表达没有变化 .2 1例乳腺肿瘤组织中发现 5例Ndrg2的蛋白水平明显下降 ,与RT PCR检测结果一致 .免疫组化结果显示 ,4种乳腺癌细胞系中 ,2种细胞系Ndrg2的表达水平明显降低 ,1种细胞系Ndrg2表达水平没有明显变化 ,与蛋白印迹结果一致 .结论 :Ndrg2在某些乳腺肿瘤组织和乳腺癌细胞系中呈低表达 ,提示其可能对乳腺肿瘤的发生或发展有重要作用 ,这不仅为研究乳腺癌的发病机制进一步提供了线索 。 展开更多
关键词 ndrg2 乳腺肿瘤 逆转录聚合酶链反应 印迹法 蛋白质
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NDRG2上调PTEN表达抑制乳腺癌细胞迁移的实验 被引量:6
9
作者 周晓雷 朱重悦 +3 位作者 张世光 周志艳 李海潮 邹卫 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期5-10,共6页
目的利用具有相同遗传背景但不同转移能力的乳腺癌细胞模型MCF-7、LM-MCF-7以及MDA-MB-231细胞,研究NDRG2调控乳腺癌细胞迁移的作用及机制。方法利用RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测MCF-7、LM-MCF-7以及MDA-MB-231细胞中NDRG2和PTEN mRNA和... 目的利用具有相同遗传背景但不同转移能力的乳腺癌细胞模型MCF-7、LM-MCF-7以及MDA-MB-231细胞,研究NDRG2调控乳腺癌细胞迁移的作用及机制。方法利用RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测MCF-7、LM-MCF-7以及MDA-MB-231细胞中NDRG2和PTEN mRNA和蛋白表达水平;构建pCMV-NDRG2和pCMV-PTEN表达载体以及设计合成NDRG2和PTEN siRNA,通过转染过表达或沉默NDRG2和PTEN表达,Transwell迁移实验检测转染后细胞迁移能力改变,Western blot检测NDRG2和PTEN表达调控关系。结果 MCF-7细胞中NDRG2和PTEN mRNA水平和蛋白表达水平显著高于LM-MCF-7和MDA-MB-231细胞(P<0.05);在LM-MCF-7和MDA-MB-231中上调NDRG2表达可降低细胞迁移能力至13.02%和26.33%(P<0.01);在MCF-7细胞中沉默NDRG2表达可增强细胞迁移能力至354.62%(P<0.01);蛋白免疫印迹检测显示PTEN表达受NDRG2调控;沉默(或过表达)NDRG2表达,同时过表达(或沉默)PTEN,MCF-7(或LM-MCF-7)细胞迁移能力未发生显著变化(P>0.05)。结论乳腺癌细胞中,NDRG2的表达下调,导致PTEN表达下降,解除了对乳腺癌细胞迁移的抑制作用。NDRG2/PTEN信号途径的沉默是乳腺癌细胞获得高迁移能力的重要机制。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 ndrg2 PTEN 细胞迁移
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重组人NDRG2蛋白对肿瘤细胞抑制作用研究 被引量:5
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作者 张翊 陈杰 +3 位作者 裴德宁 饶春明 药立波 王军志 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第3期204-207,共4页
目的:考察原核表达的重组人NDRG2蛋白对肿瘤细胞的作用。方法:通过设置不同浓度的蛋白剂量并设置对照 组,采用细胞MTT比色法和细胞计数检测NDRG2蛋白对7901、HHCC细胞的抑制效果,流式细胞仪检测细胞周期的变化,体 内实验采用裸鼠抑瘤试... 目的:考察原核表达的重组人NDRG2蛋白对肿瘤细胞的作用。方法:通过设置不同浓度的蛋白剂量并设置对照 组,采用细胞MTT比色法和细胞计数检测NDRG2蛋白对7901、HHCC细胞的抑制效果,流式细胞仪检测细胞周期的变化,体 内实验采用裸鼠抑瘤试验。结果:重组人NDRG2对肿瘤细胞生长有较强的抑制作用,约50μg/ml浓度时对肿瘤细胞生长的 抑制作用明显,流式细胞术结果显示肿瘤细胞G1期变化,体外能抑制裸鼠肿瘤的生成。结论:重组人NDRG2蛋白在体内体 外具有一定的抑制肿瘤细胞生长作用,在肿瘤治疗方面将具有一定的意义。 展开更多
关键词 ndrg2 HHCC细胞 7901细胞 肿瘤抑制
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ndrg2 mRNA在人胎脑组织中表达的时空特点 被引量:4
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作者 侯双兴 王立峰 +3 位作者 邓艳春 刘新平 张健 刘娜 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期43-47,共5页
本研究利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测了ndrg2 mRNA在人胎脑组织中表达的时空特点,为进一步研究其功能提供实验依据。收集正常引产16~28周人胎脑组织标本,进行总RNA提取,应用RT-PCR方法半定量分析ndrg2基因在上述人胎脑组织中... 本研究利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测了ndrg2 mRNA在人胎脑组织中表达的时空特点,为进一步研究其功能提供实验依据。收集正常引产16~28周人胎脑组织标本,进行总RNA提取,应用RT-PCR方法半定量分析ndrg2基因在上述人胎脑组织中的表达水平和变化规律。RT-PCR结果显示:ndrg2 mRNA在正常人胎脑16、20、24和28周的各脑功能区均有表达,但随着发育,其表达水平有差别。在小脑、延髓和海马等部位,ndrg2 mRNA的表达水平在16周胎脑中较高。而在额叶和顶叶等部位,ndrg2 mRNA的表达水平在28周胎脑中达到高峰。以上结果表明,在人胚脑发育过程中ndrg2 mRNA从16~28周均有表达,但在不同脑后其表达存在一定差异,提示ndrg2基因对中枢神经系统的发育和成熟可能有重要影响。 展开更多
关键词 ndrg2 RT-PCR 胎脑
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质粒介导的NDRG2 shRNA抑制其在人肿瘤细胞HHCC中的表达 被引量:2
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作者 张翊 裴德宁 +2 位作者 饶春明 药立波 王军志 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第5期267-269,286,共4页
目的 构建含有针对NDRG2的shRNA的质粒 ,抑制NDRG2在HHCC细胞中的表达。方法 用PCR方法从人基因组DNA中扩增出 336bp的U6 启动子 ,与 2 9bp的NDRG2靶序列的反向重复序列和pSNAV质粒相连。连接后的pSNAVU6 质粒转染入HHCC细胞 ,检测它... 目的 构建含有针对NDRG2的shRNA的质粒 ,抑制NDRG2在HHCC细胞中的表达。方法 用PCR方法从人基因组DNA中扩增出 336bp的U6 启动子 ,与 2 9bp的NDRG2靶序列的反向重复序列和pSNAV质粒相连。连接后的pSNAVU6 质粒转染入HHCC细胞 ,检测它们对NDRG2表达的影响。结果 pSNAVU6 重组质粒能抑制NDRG2的表达。 展开更多
关键词 RNA干扰 质粒 肿瘤细胞 转录后基因沉默 表达 ndrg2
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应用shRNA技术研究NDRG2在人胃癌细胞SGC7901增殖中的作用 被引量:4
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作者 裴德宁 张翊 +1 位作者 饶春明 王军志 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1021-1025,共5页
目的:构建针对人 N-myc 下游调节基因2(NDRG2)的短发夹 RNA(shRNA)表达载体 pSNAV-shRNA,观察其在SGC7901细胞中对 NDRG2的抑制作用以及 NDRG2被抑制后细胞增殖能力的变化。方法:PCR 扩增针对 NDRG2的 shRNA 表达框架,构建 pSNAV-shRNA... 目的:构建针对人 N-myc 下游调节基因2(NDRG2)的短发夹 RNA(shRNA)表达载体 pSNAV-shRNA,观察其在SGC7901细胞中对 NDRG2的抑制作用以及 NDRG2被抑制后细胞增殖能力的变化。方法:PCR 扩增针对 NDRG2的 shRNA 表达框架,构建 pSNAV-shRNA 质粒,转染 SGC7901细胞,通过 RT-PCR,免疫印迹试验检测其对 NDRG2表达的影响;通过细胞周期分析,软琼脂集落形成试验检测细胞增殖能力的变化。结果:将构建好的 pSNAV-shRNA 质粒转染 SGC7901细胞后,NDRG2的表达受到明显的抑制,细胞周期 G1期阻滞,集落形成能力降低。结论:构建的 pSNAV-shRNA 质粒能够有效抑制NDRG2在 SGC7901细胞中的表达,降低 SGC7901细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 RNA干扰 短发夹RNA(shRNA) 人N-myc下游调节基因2(ndrg2) 胃肿瘤
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腺病毒介导的NDRG2基因对前列腺癌细胞株DU145的影响 被引量:3
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作者 高磊 刘学武 +4 位作者 刘新平 王禾 于垂恭 赵毅 武国军 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第7期1097-1099,共3页
目的:探讨腺病毒介导的N-myc下游调节基因2(NDRG2)基因对前列腺癌细胞株DU145增殖抑制及诱导其凋亡的作用。方法:以携带人NDRG2基因的腺病毒载体转染体外培养的前列腺癌细胞株DU145。采用Western blot检测目的基因的表达,通过细胞生长... 目的:探讨腺病毒介导的N-myc下游调节基因2(NDRG2)基因对前列腺癌细胞株DU145增殖抑制及诱导其凋亡的作用。方法:以携带人NDRG2基因的腺病毒载体转染体外培养的前列腺癌细胞株DU145。采用Western blot检测目的基因的表达,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测NDRG2对DU145细胞增殖能力的影响。流式细胞仪检测转染前后细胞凋亡的情况;光镜观察细胞形态学的改变。结果:DU145细胞经腺病毒转染后Western blot检测有NDRG2蛋白(40kD)特异表达。MTT比色及平板克隆实验结果显示NDRG2对DU145细胞生长有明显抑制作用(P<0.05)。流式细胞检测结果显示Ad-NDRG2组凋亡率明显高于对照组及Ad-LacZ组,差异有显著性(P<0.05)。与对照组及Ad-LacZ组比较,光镜下观察可见Ad-NDRG2转染的细胞生长状态明显变差,细胞变圆,边缘模糊。结论:通过腺病毒载体使细胞表达NDRG2基因,可以明显抑制DU145细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 ndrg2基因 腺病毒科 凋亡
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NDRG2在非小细胞肺癌中的表达意义 被引量:4
15
作者 周勇安 李小飞 +5 位作者 李文海 赵晋波 邓迎春 黄立军 王英禹 张志培 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第7期1306-1309,共4页
目的:探讨NDRG2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其在病理分类、分级、TNM分期中的差异性,为进一步研究NDRG2在NSCLC中的作用及其机制提供依据。方法:采用免疫组化EnVinsion法检测NDRG2蛋白在155例非小细胞肺癌中的表达,统计学... 目的:探讨NDRG2蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其在病理分类、分级、TNM分期中的差异性,为进一步研究NDRG2在NSCLC中的作用及其机制提供依据。方法:采用免疫组化EnVinsion法检测NDRG2蛋白在155例非小细胞肺癌中的表达,统计学分析其病理分类、分级及临床TNM分期的差异性。结果:NDRG2阳性表达主要定位于胞质中和胞膜上,在癌和相应正常肺组织中总阳性率分别为63.23%、100%,两者相比差异性非常显著(P=0.0000),其中肺鳞癌和腺癌阳性率分别为54.65%、73.91%,与正常组织比差异性均非常显著(P=0.0000);鳞癌与腺癌间的阳性率和阳性强度差异性显著(P=0.0131),鳞癌高、中、低分化阳性率分别为87.10%、41.3%和11.11%,经Kruskal-Wallis H检验差异性显著(P=0.0000),腺癌的高、中、低分化的阳性率分别是100.0%、88.89%和31.58%,经检验差异性非常显著(P=0.0000);鳞癌、腺癌的TNM分期Ⅰ、Ⅱa、Ⅱb、Ⅲa、Ⅲb的阳性率有逐渐降低的趋势,经检验其差异性显著,P值分别为0.0005、0.0342。结论:NDRG2在NSCLC中低于相应正常组织中的表达,表达的高低与病理分级高低成正比、与TNM分期高低成反比,很可能对NSCLC发生、发展产生重要影响。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 ndrg2 免疫组化
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发育相关基因ndrg2在胎儿小脑发育早期的表达 被引量:4
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作者 侯双兴 邓艳春 +4 位作者 王小木 段丽 刘新平 药立波 饶志仁 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2006年第4期321-324,共4页
目的为探索新基因ndrg2在胎儿小脑组织中表达分布的特点,进一步研究ndrg2功能提供实验依据。方法收集引产4、5个月胎脑组织标本,分别进行组织石蜡切片和总RNA提取,应用免疫组化方法和逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测ndrg2在蛋白... 目的为探索新基因ndrg2在胎儿小脑组织中表达分布的特点,进一步研究ndrg2功能提供实验依据。方法收集引产4、5个月胎脑组织标本,分别进行组织石蜡切片和总RNA提取,应用免疫组化方法和逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测ndrg2在蛋白质及mRNA表达水平变化规律。结果免疫组化结果表明,在上述胎儿小脑脑区神经元胞浆均有ndrg2蛋白不同程度的表达。RT-PCR结果显示,ndrg2mRNA在正常胎小脑均有表达,5个月胎儿小脑表达高于4个月胎儿小脑。结论随胎龄增加,ndrg2表达水平增高。 展开更多
关键词 ndrg2 胎儿小脑 免疫组织化学 逆转录酶-多聚酶链反应 表达
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腺病毒介导NDRG2在体外对人食管鳞癌细胞系Eca-109增殖和凋亡的影响 被引量:3
17
作者 江宁 刘文超 +3 位作者 刘学武 王江 刘新平 药立波 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第9期1673-1677,共5页
目的:研究抑癌候选基因NDRG2在体外对人食管鳞癌细胞系Eca-109增殖和凋亡的影响。方法:腺病毒介导NDRG2转染人食管鳞癌细胞系Eca-109,逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测NDRG2基因的mRNA和蛋白表达水平,甲基噻唑基... 目的:研究抑癌候选基因NDRG2在体外对人食管鳞癌细胞系Eca-109增殖和凋亡的影响。方法:腺病毒介导NDRG2转染人食管鳞癌细胞系Eca-109,逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测NDRG2基因的mRNA和蛋白表达水平,甲基噻唑基四唑法(MTT法)绘制细胞生长曲线,流式细胞仪(FCM)分别分析细胞周期和细胞凋亡。结果:腺病毒介导NDRG2转染人食管鳞癌细胞系Eca-109后,NDRG2的mRNA和蛋白表达水平明显上调,细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);流式细胞仪检测显示,与对照组相比,感染后48小时Eca-109细胞G2期细胞明显减少(P<0.01),S期细胞明显增多(P<0.01);转染后的Eca-109细胞中凋亡细胞明显增多,感染48h后达16.0%。结论:过表达NDRG2可明显抑制人食管鳞癌细胞Eca-109的增殖并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 ndrg2 食管鳞癌 增殖 凋亡 腺病毒
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NDRG2在热疗抗肝癌细胞作用中的影响 被引量:3
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作者 郭燕 刘文超 +2 位作者 马骥 王倩荣 张媛 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第2期259-264,共6页
目的:探讨NDRG2对热疗诱发的热应激抗肝癌细胞作用的影响。方法:分别给予肝癌HepG-2和Huh-7细胞37℃、39℃、41℃、43℃、45℃水浴30min的热刺激后,采用细胞划痕、Transwell和Western blot方法对各组细胞的迁移、侵袭能力和NDRG2、MMP-... 目的:探讨NDRG2对热疗诱发的热应激抗肝癌细胞作用的影响。方法:分别给予肝癌HepG-2和Huh-7细胞37℃、39℃、41℃、43℃、45℃水浴30min的热刺激后,采用细胞划痕、Transwell和Western blot方法对各组细胞的迁移、侵袭能力和NDRG2、MMP-2/9蛋白表达量进行检测,同时应用流式细胞技术检测肿瘤细胞的坏死和凋亡情况。结果:与37℃(对照组)相比,45℃组HepG2和Huh-7细胞的迁移和侵袭能力均有显著降低(P<0.05),细胞内MMP-2及MMP-9分泌量明显下降,同时伴随NDRG2表达量明显上升。通过比对NDRG2联合热作用对肝癌细胞的治疗效果,发现在正常表达NDRG2的对照组细胞(CherryHepG-2)的凋亡率会随着加热温度的增加而增加,同时坏死率显著增高(P<0.05)。然而,给予NDRG2过表达组细胞(NDRG2-HepG2)43℃热处理后,细胞凋亡率和抗细胞侵袭能力可高达45℃热作用于对照组细胞的水平,而细胞坏死率却没有增加。结论:45℃的热应激可明显抑制肝癌细胞的迁移和侵袭能力;NDRG2联合热作用可对肝癌细胞产生较好的促凋亡和抗侵袭效果。 展开更多
关键词 热应激 ndrg2 肝癌
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NDRG2在小鼠胚胎脑组织的表达特点 被引量:2
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作者 刘丽娟 史明 +3 位作者 侯双兴 王莉 杨丰 邓艳春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期522-524,共3页
目的:观察NDRG2 mRNA在小鼠胚胎脑组织的表达与分布。方法:采用胚胎期小鼠E10.5 d、E12.5 d、E16.5d和E18.5 d进行脑切片的原位杂交。结果:NDRG2 m RNA在小鼠胚胎发育各期均有持续性表达,主要定位于端脑、中脑、菱脑、间脑、眼原基、脊... 目的:观察NDRG2 mRNA在小鼠胚胎脑组织的表达与分布。方法:采用胚胎期小鼠E10.5 d、E12.5 d、E16.5d和E18.5 d进行脑切片的原位杂交。结果:NDRG2 m RNA在小鼠胚胎发育各期均有持续性表达,主要定位于端脑、中脑、菱脑、间脑、眼原基、脊髓、小脑原基、海马原基、丘脑、下丘脑和许多神经核团,神经细胞定位主要集中在细胞质中。结论:脑内NDRG2作用贯穿了整个脑的发育阶段,提示该基因在小鼠胚胎组织发育过程中有重要作用。 展开更多
关键词 ndrg2 MRNA 胚胎脑发育 原位杂交 小鼠
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ndrg2基因2种亚型重组腺病毒载体的构建 被引量:2
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作者 秦娜 邓艳春 +2 位作者 车红磊 牛锋 刘新平 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第9期771-774,共4页
目的:构建表达N-myc下游调节基因2(ndrg2)2种亚型的重组腺病毒载体,为与ndrg2相关肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:采用腺病毒表达系统ViraPowerTM Adenoviral Expression System构建腺病毒载体.首先将ndrg22种亚型(长短2种亚型分别命名为n... 目的:构建表达N-myc下游调节基因2(ndrg2)2种亚型的重组腺病毒载体,为与ndrg2相关肿瘤的基因治疗奠定基础.方法:采用腺病毒表达系统ViraPowerTM Adenoviral Expression System构建腺病毒载体.首先将ndrg22种亚型(长短2种亚型分别命名为ndrg2L,ndrg2S)利用酶切、连接、转化、扩增后提取质粒等方法克隆入入门载体pENTR2B以获得入门克隆pENTR2B-NDRG2L和pENTR2B-NDRG2S,经双酶切及PCR鉴定正确后,用重组酶LR ClonaseTMⅡ Enzyme Mix进行入门克隆与表达载体pAd-CMV/V5-DEST间的重组反应,以获得表达克隆pAd-CMV/V5-DEST-NDRG2L和pAd-CMV/V5-DEST-NDRG2S的质粒.表达克隆经PCR鉴定后用限制性内切酶PacⅠ线性化后转染HEK293A包装细胞得到重组腺病毒(分别命名为Ad-NDRG2L和Ad-NDRG2S),经过反复的感染扩增后,用半数组织培养感染剂量法(TCID50)检测病毒滴度,用Western Blot法检测重组病毒载体是否能正确表达NDRG2蛋白.结果:证实入门克隆pENTR2B-NDRG2L/S和表达克隆pAd-CMV/V5-DEST-NDRG2L/S经酶切鉴定和PCR鉴定质粒构建正确,转染HEK293A细胞并反复扩增后获得的病毒滴度分别为:Ad-NDRG2L,4.0×1012空斑形成单位(PFU)/L;Ad-NDRG2S,6.3×1012PFU/L.且这2个病毒能正确表达NDRG2蛋白.结论:成功构建了ndrg2基因长短2种亚型的重组腺病毒载体,并包装扩增病毒,可为肿瘤基因治疗的研究提供依据. 展开更多
关键词 ndrg2 重组腺病毒 基因治疗法 肿瘤治疗
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