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题名一种具有立体选择性新酯酶的菌种筛选和基因克隆
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作者
陈少欣
史炳照
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机构
上海医药工业研究院生物部
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出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期452-455,共4页
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基金
上海医药工业研究院创新资金~~
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文摘
从土样分离到一株产生具有立体选择性酯水解酶的恶臭假单孢菌(Pseudomonas putida NH33)。构建P.putida NH33的基因组文库,并在E.coli中进行酯酶活性筛选,得到一个含有4.7kb插入片段的阳性克隆。对这个克隆的DNA片段进行序列分析,表明它含有一个1142个碱基的开放阅读框,为编码381个氨基酸的酯酶。推测的酯酶氨基酸序列与其它丝氨酸酯水解酶具有共同的保守基序GXSXG。把该蛋白在E.coli BL21(DE3)中进行表达,并用金属亲和层析纯化至单一条带。利用纯化的酶水解2-芳基丙酸乙酯制备2-芳基丙酸的S型异构体,产物的光学纯度eep>99%,说明此酶可8用于手性药物的合成。该酯酶是一个新酶,其基因序列已递交GenBank,登记号为AY896293。
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关键词
酯酶
P.
PUTIDA
nh33
克隆
序列
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Keywords
Esterase, P. putida nh33, Cloning, sequence
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分类号
Q93
[生物学—微生物学]
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