穴位埋线调控NOD样受体热蛋白结构域3/半胱氨酸蛋白酶-1信号通路抗溃疡性结肠炎损伤的机制研究 被引量：4

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作者 谢超群 陈凯 +2 位作者 孙豪娴 董慧 朱莹 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期625-634,共10页

目的:观察穴位埋线对“虚、瘀”状态下溃疡性结肠炎(UC)大鼠的治疗作用及对NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路的调控作用,探讨穴位埋线治疗UC的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组10只和造模组48只... 目的:观察穴位埋线对“虚、瘀”状态下溃疡性结肠炎(UC)大鼠的治疗作用及对NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)信号通路的调控作用,探讨穴位埋线治疗UC的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组10只和造模组48只,采用腺嘌呤、番泻叶分阶段灌胃,再予2,4,6-三硝基苯磺酸与乙醇复合物灌肠复制“虚、瘀”状态下UC大鼠模型。造模成功的大鼠按体质量随机分为模型组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组、非穴位埋线组和穴位埋线组,每组11只。穴位埋线组选“足三里”“天枢”“肾俞”等穴进行穴位埋线治疗,非穴位埋线组于大鼠臀部肌肉丰厚处进行埋线治疗,每14 d治疗1次,共治疗3次;SASP组予SASP溶液(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))灌胃,每日1次,共治疗42 d。观察大鼠一般情况,计算大鼠疾病活动指数(DAI);测量各组大鼠结肠长度;肉眼评估结肠黏膜大体病理学改变,并进行结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;HE染色评估结肠组织病理学改变,进行结肠病理损伤(TDI)评分;ELISA法检测各组大鼠血清NLRP3、白细胞介素(IL)-1β和IL-18含量;荧光定量PCR法检测各组大鼠结肠组织NLRP3、Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、IL-1β及IL-18 mRNA水平;Western blot法检测各组大鼠结肠组织NLRP3、Caspase-1蛋白表达水平;免疫组织化学染色法检测结肠组织ASC阳性表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量降低(P<0.01),结肠长度明显缩短(P<0.01),结肠黏膜形成明显溃疡面,隐窝破坏明显,大量炎性细胞浸润,DAI、CMDI及TDI评分升高(P<0.01),血清中NLRP3、IL-1β及IL-18含量升高(P<0.01),结肠组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA水平和Caspase-1、ASC、NLRP3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组比较,穴位埋线组和SASP组体质量升高(P<0.01),大鼠结肠长度增长(P<0.01),结肠黏膜病理损伤明显减轻,DAI、CMDI及TDI评分显著降低(P<0.01),血清中NLRP3、IL-1β及IL-18含量显著降低(P<0.01),结肠组织内NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA和Caspase-1、ASC、NLRP3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。穴位埋线组各指标较非穴位埋线组均有明显改善(P<0.01)。结论:穴位埋线可通过调控NLRP3/Caspase-1信号通路抑制炎性小体活化,缓解UC大鼠的炎性反应。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 穴位埋线 nod样受体热蛋白结构域3/半胱氨酸蛋白酶-1信号通路 凋亡相关斑点样蛋白 炎性反应

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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路探讨苓桂气化方改善射血分数保留心力衰竭早期舒张功能的分子机制 被引量：1

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作者 杨晨光 石玉姣 +6 位作者 乔文博 刘永成 刘思雨 梁小雨 李知轩 张贺 董国菊 《环球中医药》 CAS 2024年第6期999-1006,共8页

目的观察苓桂气化方对射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)早期模型大鼠心脏舒张功能的干预效应,基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NOD-like receptor thermal protein domain associated pr... 目的观察苓桂气化方对射血分数保留心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction,HFpEF)早期模型大鼠心脏舒张功能的干预效应,基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)/胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteine-containing aspartate-specific proteases-1,Caspase-1)/消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)通路探讨其潜在的分子作用机制。方法40只自发性高血压大鼠高盐高脂高糖饮食联合腹腔注射链脲佐菌素溶液建立HFpEF早期大鼠模型,分为HFpEF组、恩格列净组(1.8 mg/kg)、苓桂气化方低剂量组(4.96 g/kg)、苓桂气化方高剂量组(9.92 g/kg),予相应药物灌胃;正常血压组、空白组予等剂量生理盐水灌胃,连续干预9周。采用超声心动图检测大鼠左心房内径(left atrial diameter,LAD)、舒张早期二尖瓣血流速度(left ventricular early diastolic filling peak velocity,E)与舒张晚期二尖瓣血流速度(atrial systolic left ventricular filling peak velocity,A)比值、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF);酶联免疫吸附测定法检测血清心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide,ANP)含量;苏木精—伊红染色观察心肌组织病理变化;蛋白质印迹(Western Blot,WB)法检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD和白介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的表达。结果与正常血压组相比,HFpEF组LAD和E/A增加(P<0.05),LVEF无明显变化(P>0.05);血清ANP含量升高(P<0.05);病理观察显示心肌炎症浸润;WB结果示NLRP3、Caspase-1、GSDMD和IL-1β蛋白含量升高(P<0.05),表明建模成功。与HFpEF组比,恩格列净组和苓桂气化方低、高剂量组的LAD和E/A减小(P<0.05),血清ANP含量降低(P<0.05),病理观察显示心肌炎症浸润减轻,WB结果示恩格列净组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),苓桂气化方低剂量组NLRP3、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),苓桂气化方高剂量组NLRP3、GSDMD、IL-1β蛋白含量降低(P<0.05),其余蛋白含量有下降趋势。结论苓桂气化方能改善HFpEF早期模型大鼠心脏舒张功能,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路、减轻心肌炎症浸润、抑制心房重构相关。 展开更多

关键词 射血分数保留心力衰竭 前临床心衰 射血分数保留心力衰竭早期 核苷酸结合寡聚化结构域样受体3/胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1/消皮素d信号通路 苓桂气化方

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瑞马唑仑调节NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路对LPS诱导的神经元焦亡的影响

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作者 耿长振 王利 叶兰 《检验医学与临床》 CAS 2024年第16期2436-2441,共6页

目的 探讨瑞马唑仑(REM)调节Nod样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的神经元焦亡的影响。方法 将对数期小鼠海马神经元HT22细胞随机分为正常对照组(Ctrl组)、LPS诱导... 目的 探讨瑞马唑仑(REM)调节Nod样受体蛋白3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的神经元焦亡的影响。方法 将对数期小鼠海马神经元HT22细胞随机分为正常对照组(Ctrl组)、LPS诱导组(LPS组,10 mg/L LPS)、低浓度REM组(REM-低组,160μmol/L REM)、高浓度REM组(REM-高组,320μmol/L REM)和REM-高+NLRP3激活剂尼日利亚菌素组(REM-高+尼日利亚菌素组,320μmol/L REM+10μmol/L尼日利亚菌素)。除Ctrl组外,其余各组HT22细胞均使用LPS进行诱导。各组加药处理后,采用细胞计数试剂盒8测定HT22细胞的吸光度(A值)。采用Hoechst33342/碘化吡啶(PI)染色检测HT22细胞焦亡率。采用酶联免疫吸附试验检测HT22细胞上清液中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测HT22细胞中NLRP3信使RNA(mRNA)、Caspase-1 mRNA、GSDMD mRNA表达水平。采用蛋白质印迹法检测HT22细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达水平。结果 LPS组HT22细胞48、72 h的A_(450)值显著低于Ctrl组(P<0.05),而细胞焦亡率、上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,以及NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白表达水平、ASC蛋白表达水平均显著高于Ctrl组(P<0.05)。REM-低组和REM-高组HT22细胞48、72 h的A_(450)值显著高于LPS组,且REM-高组高于REM-低组,差异均有统计学意义(P<0.05),而REM-低组和REM-高组HT22细胞焦亡率、上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,以及NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白表达水平、ASC蛋白表达水平显著低于LPS组,且REM-高组低于REM-低组,差异均有统计学意义(P<0.05)。REM-高+尼日利亚菌素组HT22细胞48、72 h的A_(450)值显著低于REM-高组(P<0.05),而细胞焦亡率、上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α水平,以及NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白表达水平、ASC蛋白表达水平均显著高于REM-高组(P<0.05)。结论 REM可能通过下调NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路减轻LPS诱导的神经元焦亡。 展开更多

关键词 瑞马唑仑 nod样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1/消皮素d信号通路 脂多糖 神经元 焦亡

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芪地糖肾方调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导高糖刺激肾小球内皮细胞焦亡的研究 被引量：1

4

作者 史扬 董昭熙 +5 位作者 周盈 谢惠迪 郭燕 宿家铭 郑毅成 柳红芳 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第1期1-7,共7页

目的 探究芪地糖肾方通过NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1/消皮素D蛋白(NLRP3/Caspase-1/GSDMD)通路介导高糖刺激的肾小球内皮细胞焦亡的作用。方法 将肾小球内皮细胞分为正常组、高糖组、芪地糖肾方组,... 目的 探究芪地糖肾方通过NOD样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1/消皮素D蛋白(NLRP3/Caspase-1/GSDMD)通路介导高糖刺激的肾小球内皮细胞焦亡的作用。方法 将肾小球内皮细胞分为正常组、高糖组、芪地糖肾方组,分别予完全培养基、30 mmol/L高糖培养基、30 mmol/L高糖培养基+芪地糖肾方100μg/mL培养48 h,采用细胞免疫荧光染色法观察细胞中NLRP3表达情况及细胞骨架情况,采用Western blot法检测细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、消皮素D蛋白(GSDMD)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)表达情况。结果 与正常组比较,高糖组细胞中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、ASC、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),NLRP3荧光表达信号增强,细胞骨架损伤明显;与高糖组比较,芪地糖肾方组NLRP3、Caspase-1、GSDMD、ASC、IL-18、IL-1β蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),NLRP3荧光表达信号减弱,细胞骨架损伤状态改善。结论 芪地糖肾方可通过抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡相关通路激活改善高糖诱导的肾小球内皮细胞损伤。 展开更多

关键词 糖尿病肾脏病 肾小球内皮细胞 芪地糖肾方 焦亡 nod样受体家族热蛋白结构域相关蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 消皮素d蛋白

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松果菊苷抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路减轻大鼠口腔溃疡黏膜损伤和炎症反应

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作者 李霞 关景平 李玲 《免疫学杂志》 CSCD 2024年第12期888-892,共5页

目的探讨松果菊苷(Ech)对口腔溃疡大鼠口腔黏膜和炎症反应的影响及其潜在的作用机制。方法30只Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC group)、口腔溃疡模型组(Model group)、Ech组(Ech group)、口炎清颗粒治疗组(KG group)和Ech+NLRP3激活剂... 目的探讨松果菊苷(Ech)对口腔溃疡大鼠口腔黏膜和炎症反应的影响及其潜在的作用机制。方法30只Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC group)、口腔溃疡模型组(Model group)、Ech组(Ech group)、口炎清颗粒治疗组(KG group)和Ech+NLRP3激活剂组(Ech+NLRP3 group),每组6只。各组大鼠进行相应的处理后,比较各组大鼠口腔溃疡面积的变化情况;ELISA检测各组大鼠炎症反应;HE染色分析各组大鼠口腔黏膜的病理变化;Western blot检测各组大鼠口腔黏膜组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1/白细胞介素-1β(NLRP3/Caspase-1/IL-1β)信号通路相关蛋白的表达情况。结果口腔溃疡模型大鼠的口腔溃疡面积增大,口腔黏膜病理学损伤评分升高;炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α水平和NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白水平均上调(P<0.05)。Ech和口炎清颗粒治疗后可明显缩小口腔溃疡面积,降低口腔黏膜病理学损伤程度;下调IL-6、IL-1β、TNF-α水平和NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白水平(P<0.05)。而NLRP3激活剂可部分逆转Ech治疗对口腔溃疡大鼠口腔黏膜和炎症反应的保护作用(P<0.05)。结论Ech可通过抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路,保护口腔溃疡大鼠免受口腔黏膜损伤和炎症反应。 展开更多

关键词 松果菊苷 口腔溃疡 nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1信号通路 炎症

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杨梅素调节NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路对肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞焦亡的影响

6

作者 王永梅 蒋燕 +1 位作者 黄嘉阳 王香红 《标记免疫分析与临床》 CAS 2024年第9期1704-1710,共7页

目的探讨杨梅素(myricetin,MYR)调节NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain,leucine-rich repeat and pyrin domain-containing 3,NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)信... 目的探讨杨梅素(myricetin,MYR)调节NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain,leucine-rich repeat and pyrin domain-containing 3,NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路对肺炎链球菌诱导肺泡上皮细胞焦亡的影响。方法将人II型肺泡上皮细胞(human type II alveolar epithelial cells,AT II)随机分为5组:对照组、模型组、L-MYR组(20μg/mL)、M-MYR组(40μg/mL)、H-MYR组(80μg/mL)、ATP组(80μg/mL MYR+2 mmol/L NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路激活剂ATP),且除对照组正常培养,其余各组以肺炎链球菌感染建立损伤模型。采用MTT和平板克隆实验检测细胞增殖;TUNEL检测细胞焦亡;ELISA检测细胞中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)水平;Western blotting检测细胞中NLRP3、cleaved caspase-1、焦孔素D(gasdermin D,GSDMD)、IL-1β蛋白表达。结果与对照组相比,模型组细胞的A 490、克隆数降低,细胞焦亡率、IL-1β、IL-18、LDH、NLRP3、cleaved caspase-1、GSDMD、IL-1β表达升高(P<0.05);与模型组相比,L-MYR组、M-MYR组、H-MYR组细胞的A 490、克隆数升高,细胞焦亡率、IL-1β、IL-18、LDH、NLRP3、cleaved caspase-1、GSDMD、IL-1β表达较低(P<0.05);与H-MYR组相比,ATP组细胞的A 490、克隆数降低,细胞焦亡率、IL-1β、IL-18、LDH、NLRP3、cleaved caspase-1、GSDMD、IL-1β表达升高(P<0.05)。结论MYR可能通过抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路,减轻肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞炎症反应,抑制细胞焦亡。 展开更多

关键词 杨梅素 nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸蛋白酶-1/白细胞介素-1β信号通路 肺炎链球菌感染 细胞焦亡

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清热消癥方对db/db糖尿病肾脏病小鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡通路的影响

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作者 高亚斌 王峥 +3 位作者 曹博宁 李丹婷 王耀献 王珍 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第1期159-163,共5页

目的:研究清热消癥方对db/db糖尿病肾脏病小鼠NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)焦亡通路的影响。方法:7周龄雄性db/db小鼠20只按体质量随机分为模型组及清热消癥方组,每组10只;另取雄... 目的:研究清热消癥方对db/db糖尿病肾脏病小鼠NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)焦亡通路的影响。方法:7周龄雄性db/db小鼠20只按体质量随机分为模型组及清热消癥方组,每组10只;另取雄性db/m小鼠8只为正常组。连续灌胃8周,监测小鼠体质量、血糖,ELISA法检测尿液尿微量白蛋白及肾损伤分子1(KIM-1)、血总胆固醇(TC)、血甘油三酯(TG)、血游离脂肪酸(NEFA)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、血谷丙转氨酶(ALT)及血谷草转氨酶(AST);肾脏切片行HE及PAS染色;Western Blot及免疫组化检测肾组织NLRP3、GSDMD-N、Cleaved-Caspase1、IL-18及IL-1β蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组血糖、体质量、8 h尿微量白蛋白定量、尿KIM-1、TC、TG、NEFA、Scr、ALT及AST均显著升高(P<0.01,P<0.05),肾脏病理表现为肾小球体积增大,系膜细胞增加及系膜基质增多,肾小管出现空泡变性及扩张,肾脏NLRP3、Cleaved-Caspase1及GSDMD-N蛋白表达均显著升高(P<0.01),免疫组化提示肾脏NLRP3、IL-18及IL-1β蛋白表达显著增加(P<0.01)。与模型组比较,清热消癥方组8 h尿微量白蛋白定量、KIM-1、TC、TG及NEFA均显著降低(P<0.05),肾脏病理损伤改善,NLRP3、Cleaved-Caspase1及GSDMD-N蛋白表达均显著下降(P<0.05),免疫组化提示NLRP3、IL-18及IL-1β蛋白表达均显著减少(P<0.05)。结论:清热消癥方可减轻db/db糖尿病肾脏病小鼠肾损伤,其机制可能与抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡通路相关。 展开更多

关键词 清热消癥方 糖尿病肾脏病 nod样受体热蛋白结构域3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 消皮素d 细胞焦亡

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弱精子症患者精浆炎症相关细胞因子Chemerin、Caspase-1、NLRP3、IL-18及IL-1β水平变化观察

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作者 赵莹 韩泽平 +3 位作者 谢芳梅 何琨仪 陈婉媚 何金花 《山东医药》 CAS 2024年第30期73-76,共4页

目的观察弱精子症(AS)患者精浆炎症相关细胞因子趋化素(Chemerin)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-18的水平变化。方法81例AS患者根据病情严重程度分为轻度AS... 目的观察弱精子症(AS)患者精浆炎症相关细胞因子趋化素(Chemerin)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-18的水平变化。方法81例AS患者根据病情严重程度分为轻度AS组36例、中度AS组25例和重度AS组20例,另选择46例健康体检者为对照组,留取各组精液标本,采用ELISA法检测精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-1β及IL-18采用Pearson相关分析或Spearman相关分析法分析精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-1β及IL-18水平与精液质量的相关性,采用单因素及二元Logistic多因素回归分析法分析AS发生的危险因素。结果与对照组相比,轻中重AS组患者精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β水平高(P均<0.05)。与轻度AS相比,中度AS患者精浆Chemerin、Caspase-1、IL-18水平(P均<0.05)与中度AS者相比,重度AS患者精浆Chemerin及NLRP3水平高(P均<0.05)。精浆中Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β水平与AS患者前向运动精子比例(PR)及精子总活力呈负相关(P均<0.05)。精浆中Chemerin、Caspase-1、IL-18及IL-1β水平升高是AS发生的危险因素(P均<0.05)。结论AS患者精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β升高,且随病情加重,精浆Chemerin、NLRP3、Caspase-1、IL-18及IL-1β升高更明显。精浆Chemerin、Caspase-1、IL-18及IL-1β水平升高可能促进AS的发生发展。 展开更多

关键词 趋化素 nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3 半胱天冬氨酸蛋白酶-1 白细胞介素-1β 白细胞介素-18 弱精子症

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艾司洛尔通过阻断NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路抑制早期脓毒症大鼠心脏炎症反应及焦亡 被引量：8

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作者 李盼 张欣桐 +2 位作者 刘景卓 马德胜 马莉 《中国急救医学》 CAS CSCD 2021年第9期790-796,共7页

目的研究艾司洛尔(Esmolol,ES)是否可通过抑制焦亡的经典通路进而发挥心脏保护作用。方法 72只大鼠随机分为假手术(sham operation,Sham)组、盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)组和ES组,每组24只。每组随机抽取8只大鼠观... 目的研究艾司洛尔(Esmolol,ES)是否可通过抑制焦亡的经典通路进而发挥心脏保护作用。方法 72只大鼠随机分为假手术(sham operation,Sham)组、盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)组和ES组,每组24只。每组随机抽取8只大鼠观察生存情况,剩余16只大鼠根据处理时间分为6 h和24 h两个亚组,每组8只。Sham组仅给予开腹,翻动盲肠处理;CLP组和ES组采用CLP法建立脓毒症大鼠模型。Sham组、CLP组持续经大鼠左颈内静脉泵入生理盐水6 h;ES组持续泵入艾司洛尔稀释液6 h。分别于相应时间点处死大鼠,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清IL-1β、IL-18水平,采用免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织NLRP3、Caspase-1及GSDMD蛋白表达水平;光学显微镜下观察心肌病理改变;荧光显微镜下观察心肌细胞焦亡情况。结果 (1)ELISA结果显示,与各时间点的Sham组比较,ES组大鼠血清IL-1β及IL-18水平均明显升高,24 h组最高;而与CLP组比较,上述因子水平在6 h与24 h均明显下降(P <0.05)。(2)Western blot结果显示,术后各时间点,大鼠心肌组织中焦亡经典通路相关蛋白[NOD样受体蛋白3(nucleotide-binding domain(NOD)-like receptor protein 3,NLRP3)、天冬氨酸蛋白水解酶-1 (cysteinyl aspartate-specific proteases-1,Caspase-1)、消皮素D(Gasdermin D,GSDMD)]在CLP组均显示出高表达状态,较Sham组明显升高(P <0.05),24 h组表达量最高,而ES组各时间点上述蛋白表达水平均较CLP组有所减少,且差异统计学意义(P <0.05)。(3)病理结果显示,Sham组大鼠心肌组织可见轻微的病理损伤,CLP组心肌细胞损伤最重,ES组大鼠的心肌细胞破坏较CLP组减轻程度多,各组24 h损伤程度均较6 h重。(4)24 h Tunel与DAPI染色显示,与Sham组可见的少量阳性细胞比较,CLP组可见大量被染色的阳性细胞,且差异有统计学意义(P <0.05);而与CLP组比较,ES组心肌细胞阳性染色数量明显减少(P <0.05)。(5) 7 d生存分析显示,CLP组大鼠死亡率最高,ES组大鼠生存天数较CLP组明显延长,差异有统计学意义(P <0.01)。结论 ES能减轻心肌损伤,提高脓毒症大鼠生存率,其机制可能与抑制焦亡经典通路中NLRP3/Caspase-1/GSDMD蛋白表达及减少炎症因子释放有关。 展开更多

关键词 脓毒症 心功能障碍 艾司洛尔(ES) 细胞焦亡 信号通路 消皮素d(GSdMd) 天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1) nod样受体蛋白3(NLRP3)

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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨木犀草素对LPS/ATP诱导的细胞焦亡的保护机制

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作者 刘双慧 张衍坤 +1 位作者 赵毅 贺常亮 《中草药》 北大核心 2025年第6期1989-1998,共10页

目的基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Caspase-1)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)通路研究木犀草素对... 目的基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Caspase-1)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)通路研究木犀草素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合三磷腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导的小鼠单核巨噬细胞J774A.1焦亡的作用及其机制。方法利用分子对接技术预测木犀草素与焦亡相关蛋白结合的可能性。将对数生长期的小鼠单核巨噬细胞J774A.1细胞分为对照组、LPS+ATP组、木犀草素(8μmol/L)组和木犀草素低、中、高(2、4、8μmol/L)+LPS+ATP组。采用LPS+ATP诱导J774A.1细胞焦亡,采用木犀草素预防治疗12 h。通过碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放和细胞计数(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力和细胞膜损伤,利用ELISA法测定白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-18的水平。采用Western blotting检测细胞中NLRP3、凋亡相关颗粒样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、Caspase-1、GSDMD的蛋白表达。同时,将ICR雄性小鼠随机分为对照组、LPS(50 mg/kg)组、木犀草素(80 mg/kg)组和木犀草素低、中、高剂量(40、60、80 mg/kg)+LPS(50 mg/kg)组,进行木犀草素干预LPS诱导小鼠脾脏细胞焦亡的体内实验,检测血清中IL-1β、IL-18的水平和脾脏中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD的表达。结果分子对接结果表明,木犀草素与细胞焦亡相关蛋白Caspase-1、NLRP3、ASC、GSDMD的结合良好,结合能均小于−5 kcal/mol。体外实验表明,经过木犀草素预处理(2~8μmol/L)12 h能显著提高LPS+ATP诱导的J774A.1细胞活力(P<0.05),显著减少PI染色阳性率和LDH释放(P<0.05),显著降低IL-1β和IL-18水平(P<0.01),并显著下调NLRP3、Caspase-1 p10及GSDMD p30的蛋白表达(P<0.01)。体内实验表明,木犀草素可以显著降低小鼠血清中IL-1β和IL-18水平(P<0.01),并显著下调NLRP3、Caspase-1 p20及GSDMD p30的蛋白表达(P<0.01)。结论木犀草素能够显著改善LPS+ATP诱导的J774A.1细胞焦亡模型的形态学损伤,抑制促炎性细胞因子IL-1β和IL-18的释放,并通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路抑制细胞焦亡的发生。 展开更多

关键词 细胞焦亡 木犀草素 nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 消皮素d

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氟、铝单独及联合暴露对NG108-15细胞焦亡及NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路的影响

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作者 夏娅 蒋鸿霜 +1 位作者 钱晓玲 谢春 《中华地方病学杂志》 2025年第4期272-278,共7页

目的探讨氟、铝单独及联合暴露对NG108-15细胞焦亡及NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)信号通路... 目的探讨氟、铝单独及联合暴露对NG108-15细胞焦亡及NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)/消皮素D(gasdermin D,GSDMD)信号通路的影响。方法采用析因设计,将体外培养的NG108-15细胞按照氟化钠(sodium fluoride,NaF)和三氯化铝(aluminium trichloride,AlCl 3)浓度分为对照组(0 mg/L NaF+0 mg/L AlCl 3)、氟组(40 mg/L NaF+0 mg/L AlCl 3)、铝组(0 mg/L NaF+160 mg/L AlCl 3)和氟+铝组(40 mg/L NaF+160 mg/L AlCl 3),培养24 h后收集细胞用于后续实验。采用免疫荧光法检测各组细胞焦亡指标GSDMD的荧光强度;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis associated speck-like protein,ASC)、Caspase-1及GSDMD mRNA表达水平;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、消皮素D氮端(gasdermin D N-terminus,GSDMD-N)及白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)蛋白表达水平。结果免疫荧光结果显示,与对照组(1.00±0.02)比较,氟、铝、氟+铝组GSDMD荧光强度(1.49±0.02、1.22±0.04、1.25±0.03)均较高(均P<0.05)。qRT-PCR结果显示,与对照组(1.00±0.02、1.00±0.01、1.00±0.08、1.00±0.06)比较,氟、铝、氟+铝组NLRP3(1.21±0.06、1.60±0.07、1.42±0.02)、ASC(2.61±0.07、1.53±0.01、2.12±0.03)、Caspase-1(1.32±0.05、1.53±0.04、2.07±0.05)及GSDMD(1.60±0.03、1.65±0.04、2.23±0.05)mRNA表达水平均较高(均P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组(1.00±0.04、1.00±0.08、1.00±0.05、1.00±0.02、1.00±0.03、1.00±0.06)比较,氟、铝、氟+铝组NLRP3(1.55±0.06、1.40±0.07、1.24±0.05)、ASC(1.66±0.05、1.48±0.06、1.32±0.06)、Caspase-1(1.51±0.02、1.40±0.01、1.28±0.03)、GSDMD(1.24±0.03、1.31±0.06、1.18±0.03)、GSDMD-N(1.18±0.04、1.27±0.03、1.27±0.03)及IL-1β(1.81±0.03、1.70±0.08、1.52±0.05)蛋白表达水平均较高(均P<0.05)。结论氟、铝单独及联合暴露均可引起NG108-15细胞焦亡,其机制可能与上调NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路相关分子的表达有关。 展开更多

关键词 氟 铝 NG108-15细胞 细胞焦亡 nod样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1/消皮素d信号通路

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探讨延胡索乙素调控miR-22介导NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路对老年急性胃炎大鼠炎症及胃黏膜的影响

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作者 徐燕 张平英 +2 位作者 陈静 邓润钧 毕宏伟 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第20期5031-5035,共5页

目的研究延胡索乙素(THP)调控微小RNA(miR)-22介导NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-1/消皮素(GSDM)D细胞焦亡通路对老年急性胃炎大鼠炎症及胃黏膜的影响。方法将40只大鼠随机分为空白对照(NC... 目的研究延胡索乙素(THP)调控微小RNA(miR)-22介导NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白(NLRP)3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-1/消皮素(GSDM)D细胞焦亡通路对老年急性胃炎大鼠炎症及胃黏膜的影响。方法将40只大鼠随机分为空白对照(NC)组、模型(Model)组、THP(20 mg/kg THP)组、THP+miR-22 inhibitor组,每组10只。除NC组外,其余各组采用乙醇、水杨酸混合液灌胃法构建急性胃炎模型。记录胃炎发生计分及溃疡指数;苏木素-伊红(HE)染色法观察胃组织病理学状态;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、表皮生长因子(EGF)水平;硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)水平;实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-qPCR)检测miR-22 mRNA表达水平;荧光原位杂交(FISH)检测miR-22表达水平;Western印迹检测NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平。结果NC组胃组织结构正常;与NC组相比,Model组可见胃黏膜部分上皮坏死脱落、固有层腺体部分消失、炎性细胞浸润等病理损伤、胃炎发生计分、溃疡指数、炎症分子TNF-α、IL-1β水平及氧化应激因子MDA、EGF含量、NLRP3、Caspase-1和GSDMD蛋白表达水平明显升高,SOD、NO含量及miR-22表达水平明显降低(P<0.05);与Model组相比,THP组胃组织病理损伤程度均减轻、胃炎发生计分、溃疡指数、TNF-α、IL-1β水平及MDA、EGF含量、NLRP3、Caspase-1和GSDMD蛋白表达水平明显降低,SOD、NO含量及miR-22表达水平明显升高(P<0.05);与THP组相比,THP+miR-22 inhibitor组MDA、EGF含量、NLRP3、Caspase-1和GSDMD蛋白表达水平明显升高,SOD、NO含量明显降低(P<0.05)。结论THP能够减轻急性胃炎老年大鼠的胃黏膜损伤,抑制炎症反应和氧化应激反应,可能与其调控miR-22介导NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路有关。 展开更多

关键词 急性胃炎 延胡索乙素 微小RNA-22 细胞焦亡 nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1/消皮素d信号通路

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银杏素对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜病变及NLRP3/caspase-1/GSDMD焦亡通路的影响

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作者 李彬彬 李少君 +3 位作者 陈贵尚 唐薇 胡莉群 刘锦荣 《中国老年学杂志》 北大核心 2024年第20期5054-5058,共5页

目的探究银杏素对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜病变及NOD样受体蛋白(NLRP)3/半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase)-1/消皮素(GSDM)D焦亡通路的影响。方法将SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、DR模型(DR)组、低剂量银杏素组(50 mg/kg银杏素)、... 目的探究银杏素对糖尿病视网膜病变(DR)大鼠视网膜病变及NOD样受体蛋白(NLRP)3/半胱氨酸天冬氨酸酶(caspase)-1/消皮素(GSDM)D焦亡通路的影响。方法将SPF级SD雄性大鼠随机分为正常组、DR模型(DR)组、低剂量银杏素组(50 mg/kg银杏素)、高剂量银杏素组(100 mg/kg银杏素)和高剂量银杏素+NLRP3激活剂二乙基二硫代氨基甲酸酯(DDC)组(100 mg/kg银杏素+30 mg/kg DDC)各15只。高脂饲料诱导合并腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建大鼠DR模型,苏木素-伊红(HE)染色观察DR大鼠视网膜病理学变化。伊文斯蓝(EB)试验检测视网膜组织血管渗漏。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠视网膜组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)表达和血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平。TUNEL染色观察视网膜组织神经节细胞焦亡。Western印迹检测视网膜组织NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路相关蛋白表达。结果与正常组比较,DR组玻璃体EB含量、视网膜组织MDA水平、血清IL-1β、IL-18水平、视网膜组织神经节细胞焦亡率及NLRP3、caspase-1、GSDMD-N蛋白相对表达显著上升,视网膜组织SOD、GSH-Px水平显著降低(P<0.05),视网膜组织细胞排列紊乱疏松,出现水肿等严重病理学损伤。低、高剂量银杏素组较DR组各指标变化与上述相反(P<0.05),视网膜组织细胞均有不同程度的结构恢复,水肿等病理损伤有所减轻。DDC减弱了银杏素对DR大鼠视网膜细胞焦亡和病变的抑制作用。结论银杏素可能通过下调NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路抑制焦亡,减轻DR大鼠的视网膜病变。 展开更多

关键词 银杏素 nod样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸酶-1/消皮素d焦亡通路 焦亡 视网膜病变 糖尿病

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金香丹抑制NLRP3/IL-1β/Caspase-1信号通路缓解大鼠心肌缺血再灌注损伤 被引量：13

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作者 萧闵 向晶晶 +1 位作者 王威 王朝阳 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期87-94,共8页

目的:观察金香丹预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠模型心肌组织NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路的影响,探讨金香丹对MIRI的保护作用及其机制。方法:50只雄... 目的:观察金香丹预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠模型心肌组织NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路的影响,探讨金香丹对MIRI的保护作用及其机制。方法:50只雄性SD大鼠随机分成假手术组,模型组,金香丹高、低剂量组及地奥心血康组,每组10只。造模前7 d开始,金香丹组给予金香丹片高、低剂量(0.72,0.18 g·kg^(-1))灌胃;假手术组和模型组每天给予等体积生理盐水灌胃;地奥心血康组给予地奥心血康(1.29 g·kg^(-1))灌胃。末次灌胃12 h后,结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注60 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。心电图检测ST段升高评价模型;比色法检测心脏组织肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织损伤情况,DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织NLRP3,Caspase-1和IL-1β蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测心肌组织中NLRP3,Caspase-1和IL-1βmRNA的表达。结果:与假手术组比较,模型组心电图ST段显著升高(P<0.01),心肌组织CK和LDH活性显著增加(P<0.01),心肌组织凋亡细胞显著增加(P<0.01),NLRP3,IL-1β,Caspase-1蛋白和mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,金香丹高、低剂量组及地奥心血康组心电图ST明显降低(P<0.05,P<0.01),心肌组织CK和LDH活性明显降低(P<0.05,P<0.01),心肌细胞凋亡明显改善(P<0.05,P<0.01),降低NLRP3,IL-1β,Caspase-1蛋白和mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01);与地奥心血康组比较,金香丹低剂量组心电图ST段明显升高(P<0.05),金香丹高剂量组明显降低(P<0.05),金香丹高、低剂量组和地奥心血康组心肌组织绿色荧光强度明显降低(P<0.05,P<0.01),金香丹高剂量NLRP3,IL-1β,Caspase-1蛋白和mRNA表达均明显降低(P<0.05)。结论:金香丹可以降低心肌缺血再灌注损伤,其可能机制为抑制炎症小体NLRP3,降低IL-1β表达,抑制心肌细胞凋亡,缓解心肌缺血再灌注损伤。 展开更多

关键词 心肌缺血再灌注损伤 金香丹 nod样受体热蛋白结构域3(NLRP3) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1) 细胞凋亡

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阿司匹林调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路介导的焦亡途径减轻脂多糖诱导的急性肺损伤研究 被引量：5

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作者 杨迪 郭越 +2 位作者 张鹏 刘琦 任明芬 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期347-355,共9页

目的探究阿司匹林(aspirin)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时细胞焦亡的影响及机制。方法动物实验将SD大鼠分为对照组(control)、模型组(model)、模型+阿司匹林组(model+aspirin),每组各10只。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS... 目的探究阿司匹林(aspirin)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时细胞焦亡的影响及机制。方法动物实验将SD大鼠分为对照组(control)、模型组(model)、模型+阿司匹林组(model+aspirin),每组各10只。采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)腹腔注射复制ALI大鼠模型。细胞实验将人支气管上皮细胞(BEAS-2B)分为control组、LPS组及LPS+aspirin组。HE染色观察肺组织形态、测定肺湿/干质量比(W/D)、酶联免疫吸附法(ELISA)测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)含量、碘化丙啶(PI)染色检测细胞焦亡率、Western blot检测NLRP3/caspase-1/GSDMD通路蛋白表达。利用Lipofectamine®2000构建NLRP3过表达,检测过表达对aspirin抑制LPS诱导BEAS-2B细胞焦亡及NLRP3/caspase-1/GSDMD通路的影响。结果与control组相比,model组大鼠肺组织出现明显病理损伤,W/D,IL-1β、IL-18含量以及NLRP3、cleaved-caspase-1、GSDMD-N蛋白表达均明显增加。Aspirin处理后能够改善ALI大鼠肺组织损伤,降低上述指标。与动物实验结果一致,LPS能够激活NLRP3/caspase-1/GSDMD通路诱导的BEAS-2B焦亡。Aspirin处理后能够抑制LPS对BEAS-2B细胞焦亡作用。与LPS+aspirin组相比,过表达NLRP3能够逆转aspirin对LPS诱导BEAS-2B细胞焦亡作用,促进NLRP3、cleaved-caspase-1、GSDMD-N蛋白表达。结论Aspirin能够通过调控NLRP3/caspase-1/GSDMD通路并抑制LPS诱导的ALI细胞焦亡,改善肺损伤。 展开更多

关键词 急性肺损伤 阿司匹林 焦亡 nod样受体蛋白3/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1/消皮素d通路

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黄芪下瘀血汤合方对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的干预作用及机制

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作者 平键 金晋 +1 位作者 孙磊 成扬 《现代中西医结合杂志》 CAS 2024年第7期888-894,共7页

目的基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)通路探讨黄芪汤和下瘀血汤合方(黄芪下瘀血汤)对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的干预作用及其可能机制。方法取6周龄C5... 目的基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)通路探讨黄芪汤和下瘀血汤合方(黄芪下瘀血汤)对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的干预作用及其可能机制。方法取6周龄C57BL/6小鼠75只,随机选择15只作为正常组,其余小鼠腹腔注射15%四氯化碳橄榄油溶液(2 mL/kg体重,每周3次)造模。1周后,将造模小鼠随机分为模型组、黄芪汤组、下瘀血汤组和黄芪下瘀血汤组,每组15只。各用药组继续予四氯化碳造模的同时,每天给予相应药物进行灌胃,正常组和模型组灌胃等剂量双蒸水,连续灌胃5周。6周末处死各组小鼠,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,HE染色和天狼猩红染色观察肝组织炎症和胶原沉积情况,试剂盒检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)含量,Western blot法检测肝组织中胶原增生标志物层连蛋白(FN)、I型胶原(Col I)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达情况。结果黄芪汤、下瘀血汤、黄芪下瘀血汤均可明显降低肝纤维化模型小鼠肝功能和血清炎性细胞因子水平,上调肝组织SOD活性,降低MDA、Hyp含量,改善肝组织炎性损伤和胶原沉积,下调肝组织FN、Col I和α-SMA蛋白表达水平,且黄芪下瘀血汤较单用黄芪汤和下瘀血汤组有进一步增强的作用,尤其以肝组织胶原沉积和Hyp更为显著,差异均有统计学意义(P均<0.05)。黄芪下瘀血汤可下调肝组织NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达水平。结论黄芪下瘀血汤可有效改善四氯化碳诱导的肝纤维化小鼠的肝功能,减轻肝组织炎症,减少胶原纤维沉积,且防治肝纤维化的作用强于黄芪汤和下瘀血汤,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/IL-1β通路、抑制炎症及氧化应激反应有关。 展开更多

关键词 肝纤维化 黄芪下瘀血汤 nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3/含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1/白细胞介素-1β通路

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菝葜通过NLRP3通路对巴豆油诱发痔疮大鼠模型的改善作用 被引量：1

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作者 张艺嘉 余清华 +1 位作者 王宇 顾尽晖 《湖北中医药大学学报》 2024年第2期10-14,共5页

目的 探讨菝葜通过NLRP3通路对巴豆油诱发痔疮大鼠的改善作用及机制。方法 选取40只6周龄SPF级雌雄各半的SD大鼠,按随机数字表法分为对照组、模型组、菝葜低剂量组、菝葜高剂量组和地奥司明片组,每组8只。造模后菝葜低剂量组、高剂量组... 目的 探讨菝葜通过NLRP3通路对巴豆油诱发痔疮大鼠的改善作用及机制。方法 选取40只6周龄SPF级雌雄各半的SD大鼠,按随机数字表法分为对照组、模型组、菝葜低剂量组、菝葜高剂量组和地奥司明片组,每组8只。造模后菝葜低剂量组、高剂量组及地奥司明片组分别以1.58 g/kg、6.3 g/kg、0.122 g/kg灌胃,1次/d,连续1周。末次灌胃24 h后取大鼠直肠组织及血清,苏木精-伊红(HE)染色检测直肠组织病理变化;试剂盒检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-13(IL-13)和白细胞介素-18(IL-18)的含量;蛋白质印迹法(Western Blot)检测直肠组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶-1剪切体(Cleaved Caspase-1)和消皮素D(GSDMD)蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠直肠组织病理损伤加重,LDH、IL-1β、IL-18、NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD含量均明显升高(P<0.05),IL-10和IL-13含量则明显下降(P<0.05)。与模型组比较,菝葜低剂量组大鼠直肠组织病理损伤减轻,IL-18、NLRP3和GSDMD含量均明显下降(P<0.05),Cleaved Caspase-1、LDH、IL-1β、IL-10和IL-13含量无显著变化(P>0.05);与模型组比较,菝葜高剂量组大鼠的直肠组织病理损伤减轻,LDH、IL-1β、IL-18、NLRP3、Cleaved Caspase-1和GSDMD含量均明显下降(P<0.05),IL-10和IL-13含量无显著变化(P>0.05)。结论 菝葜对痔疮大鼠有较好的治疗效果,其具体机制可能与调节NLRP3通路有关。 展开更多

关键词 菝葜 痔 nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3 消皮素d 半胱氨酸蛋白酶1剪切体

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参白颗粒干预细胞焦亡降低人胃黏膜上皮细胞炎症的机制研究

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作者 李亚可 张忠绵 +4 位作者 张希颜 张丽菊 陶婧娜 王岚 李志红 《世界中医药》 北大核心 2024年第21期3311-3317,共7页

目的:探究参白颗粒(SBKL)干预细胞焦亡通路降低人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症的机制。方法:通过脂多糖(LPS)诱导GES-1建立炎症模型。1)设置不同浓度梯度的LPS干预GES-1后,通过蛋白质印迹法(WB)检测各组NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3... 目的:探究参白颗粒(SBKL)干预细胞焦亡通路降低人胃黏膜上皮细胞(GES-1)炎症的机制。方法:通过脂多糖(LPS)诱导GES-1建立炎症模型。1)设置不同浓度梯度的LPS干预GES-1后,通过蛋白质印迹法(WB)检测各组NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)的表达,确定LPS造模的相对最佳浓度;2)设置不同浓度SBKL干预GES-1,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)验证SBKL对GES-1毒性并筛选最佳干预浓度;3)实验分为空白组、模型组和SBKL组,除空白组外,其余2组以LPS构建炎症模型,干预24 h后通过WB检测NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、剪切的半胱氨酸蛋白酶-1(Cleaved Caspase-1)、消皮素D(GSDMD)、剪切的消皮素D(Cleaved GSDMD)的表达;流式细胞术检测活性氧(ROS)、细胞焦亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素18(IL-18),白细胞介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。结果:1)LPS造模的相对最佳浓度为0.5μg/mL;2)CCK-8检测发现SBKL对于GES-1无毒性作用;3)与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、Cleaved Caspase-1、GSDMD、Cleaved GSDMD、ROS和焦亡率表达升高;与模型组比较,SBKL组上述指标表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:SBKL能够抑制细胞焦亡通路降低LPS诱导的GES-1炎症反应及氧化应激,减轻细胞焦亡。 展开更多

关键词 参白颗粒 慢性萎缩性胃炎 细胞焦亡 nod样受体热蛋白结构域蛋白3 炎症反应 半胱氨酸蛋白酶-1 消皮素d 人胃黏膜上皮细胞

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布托啡诺调节cGAS/STING信号通路对脊髓损伤大鼠神经细胞炎症的影响

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作者 邵恳 黄杨 +1 位作者 袁振武 郭小丽 《现代药物与临床》 CAS 2024年第5期1085-1091,共7页

目的探讨布托啡诺对脊髓损伤大鼠神经细胞炎症的影响及其机制。方法复制脊髓损伤大鼠模型,将大鼠分为假手术组、模型组、布托啡诺(100μg/kg)组、布托啡诺+2',3'-cGAMP(100μg/kg布托啡诺+500μg/kg 2',3'-cGAMP)组,对... 目的探讨布托啡诺对脊髓损伤大鼠神经细胞炎症的影响及其机制。方法复制脊髓损伤大鼠模型,将大鼠分为假手术组、模型组、布托啡诺(100μg/kg)组、布托啡诺+2',3'-cGAMP(100μg/kg布托啡诺+500μg/kg 2',3'-cGAMP)组,对大鼠进行运动功能评分,苏木精–伊红(HE)染色检测脊髓组织病理变化,TUNEL染色检测细胞凋亡,ELISA检测脊髓组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平,免疫荧光染色检测小胶质细胞,Western blotting检测脊髓组织环磷酸鸟苷-磷酸腺苷酸合成酶(c GAS)、干扰素基因刺激因子(STING)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、IL-1β蛋白表达。结果与模型组比较,布托啡诺组脊髓组织损伤减轻,炎症细胞减少,坏死细胞减少,Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分显著升高,脊髓组织细胞凋亡率、小胶质细胞及TNF-α、IL-1β、IL-18水平,c GAS、STING、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与布托啡诺组比较,布托啡诺+2',3'-cGAMP组脊髓组织损伤加重,细胞排列较为松散,炎性细胞增多,BBB评分显著降低,脊髓组织细胞凋亡率、小胶质细胞及TNF-α、IL-1β、IL-18水平,c GAS、STING、NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论布托啡诺通过抑制c GAS/STING信号通路激活,抑制小胶质细胞激活及炎症反应,改善大鼠脊髓损伤。 展开更多

关键词 布托啡诺 脊髓损伤 神经炎症 环磷酸鸟苷-磷酸腺苷酸合成酶/干扰素基因刺激因子信号通路 肿瘤坏死因子-α nod样受体蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1

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肺炎克雷伯菌肺炎对小鼠NLRP3炎症通路的影响 被引量：6

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作者 张国荣 刘楠 刘莉 《世界临床药物》 CAS 2019年第2期95-100,共6页

目的建立肺炎克雷伯菌肺炎小鼠模型,并探究肺炎克雷伯菌感染对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症通路的影响。方法给小鼠气管内接种肺炎克雷伯菌,观察小鼠死亡率;接种肺炎克雷伯菌48 h后,取小鼠肺部匀浆涂板检查菌落数;取... 目的建立肺炎克雷伯菌肺炎小鼠模型,并探究肺炎克雷伯菌感染对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症通路的影响。方法给小鼠气管内接种肺炎克雷伯菌,观察小鼠死亡率;接种肺炎克雷伯菌48 h后,取小鼠肺部匀浆涂板检查菌落数;取小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)离心,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测无细胞上清中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-6、趋化因子配体1(KC)的水平,迈格林华-姬姆萨染色计数细胞沉淀中的中性粒细胞数;取肺部病理切片并进行苏木精-伊红(HE)染色观察肺部病变;提取肺部总蛋白,蛋白质印迹法检测NLRP3、核因子(NF)-κB p65、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶(caspase-1)、人白介素-1β前体(pro-IL-1β)表达水平。结果成功建立肺炎克雷伯菌肺炎小鼠模型,小鼠在144 h内死亡率达到百分之百,肺部有大量细菌负载,肺部中性粒细胞浸润增加,支气管肺泡灌洗液中IL-1β、TNF-α、IL-6、KC分泌升高,肺组织IL-1β、p-p65表达升高。结论通过将肺炎克雷伯菌液接种到小鼠肺部的方法所建立的肺炎小鼠模型稳定性高、可重复性好,肺部NLRP3炎症通路反应强烈。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌肺炎 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症通路 核因子(NF)-κB P65 凋亡相关微粒蛋白 天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶 人白介素-1β前体

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