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Nm23-H1/NDPK-A基因在大肠杆菌中的高效表达及产物纯化的研究 被引量：19
1
作者 侯宇 赵利淦 +5 位作者 张美英 何丽容 边六交 张玲 杨瑞仪 林剑 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第6期655-660,共6页
利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增人二磷酸核苷激酶Ａ亚基（ＮＤＰＫ－Ａ）基因，即ｎｍ２３－Ｈ１／ＮＤＰＫ－Ｋ基因的编码序列，经序列分析后，定向克隆于表达质粒载体ｐＢＶ２２０，在大肠杆菌ＤＨ５α中高效表达出重组人ＮＤＰ... 利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增人二磷酸核苷激酶Ａ亚基（ＮＤＰＫ－Ａ）基因，即ｎｍ２３－Ｈ１／ＮＤＰＫ－Ｋ基因的编码序列，经序列分析后，定向克隆于表达质粒载体ｐＢＶ２２０，在大肠杆菌ＤＨ５α中高效表达出重组人ＮＤＰＫ－Ａ．表达产物为可溶性的非融合蛋白，占菌体总蛋白４２％．斑点ＥＬＩＳＡ法鉴定表明表达产物与ＮＤＰＫ－Ａ标准抗血清呈阳性反应．以ＤＥＡＥ纤维素弱阴离子交换层析、ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅ染料亲和层析结合高效液相排阻色谱技术纯化ｒＮＤＰＫ－Ａ，得纯度为９６．７％的目标蛋白．以反相高效液相色谱法进行酶活性分析，表明纯化的ｒＮＤＰＫ－Ａ能催化ＡＴＰ＋ＵＤＰ＝ＡＤＰ＋ＵＴＰ的反应，比活性为８００Ｕ／ｍｇ蛋白． 展开更多
关键词 nm23-h1/ndpk-a 基因表达 分离纯化
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重组人Nm23-H1/NDPK-A蛋白抗血清的制备与鉴定 被引量：4
2
作者 王一飞 李海燕 +3 位作者 刘洁生 张美英 黄立 钱垂文 《中国卫生检验杂志》 CAS 2003年第1期22-23,共2页
[目的 ]通过实验 ,制备出NDPK -A蛋白的抗血清 ,为国内NDPK -A的诊断试剂盒的研究开发提供基础条件。[方法 ]重组人肿瘤转移相关蛋白Nm2 3 -H1/NDPK -A蛋白经Macro -prepDEAE阴离子交换柱层析和CibacronBlue亲和层析 ,得到了电泳纯的NDP... [目的 ]通过实验 ,制备出NDPK -A蛋白的抗血清 ,为国内NDPK -A的诊断试剂盒的研究开发提供基础条件。[方法 ]重组人肿瘤转移相关蛋白Nm2 3 -H1/NDPK -A蛋白经Macro -prepDEAE阴离子交换柱层析和CibacronBlue亲和层析 ,得到了电泳纯的NDPK -A蛋白 ,以此制备抗原 ,免疫新西兰纯种兔 ,进而得到NDPK -A蛋白的抗血清。 [结果 ]ELISA法检测所制备的抗体的反应效价为 :1:40 0— 80 0。 [结论 ]westernblot试验结果证实 ,该抗血清具备较好的特异性 ,能与NDPK -A蛋白发生反应 ,可应用于NDPK -A蛋白的实验检测利临床检测。 展开更多
关键词 重组人nm23-h1/ndpk-a蛋白 抗血清 制备 鉴定 WESTERN印迹
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rNM23-H1/NDPK-A中试纯化工艺研究 被引量：7
3
作者 钱垂文 罗勇 +2 位作者 张美英 林锋 王一飞 《生物技术》 CAS CSCD 2002年第1期23-24,共2页
为比较 3种DEAE填料对rNM2 3-H1/NDPK -A的纯化效果 ,利用同一批中试发酵样品在相同的条件下进行离子交换层析 ,分别收集P0 2 和P1 0 两个洗脱峰。通过对洗脱峰中蛋白质含量、目标蛋白相对含量以及酶比活的测定 ,计算得出MatrexCellufi... 为比较 3种DEAE填料对rNM2 3-H1/NDPK -A的纯化效果 ,利用同一批中试发酵样品在相同的条件下进行离子交换层析 ,分别收集P0 2 和P1 0 两个洗脱峰。通过对洗脱峰中蛋白质含量、目标蛋白相对含量以及酶比活的测定 ,计算得出MatrexCellufineA - 2 0 0 ,DEAESephadexA - 2 5 ,Macro -PrepDEAESupport三种填料相对应的NDPK -A得率及纯化倍数分别为 74 5 %、40 8%、92 6 %、,2 4、1 9、3 1倍。综合分析表明Macro -PrepDEAESupport填料对rNM2 3-H1/NDPK -A的纯化效果最好。 展开更多
关键词 rnm23-h1/ndpk-a 填料 纯化工艺 目标蛋白 抑癌基因
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胃癌中nm23-h1/NDPK-A蛋白的表达 被引量：2
4
作者 朱峰 祁小平 +3 位作者 刘福坤 黎介寿 汪志明 富小志 《江苏医药》 CAS CSCD 2000年第7期509-511,共3页
目的　探讨nm2 3 h1与胃癌之间的关系。方法　对 5 8例外科切除胃癌标本的肿瘤原发灶和淋巴结转移灶进行nm2 3 h1/NDPK A免疫组化染色 ,并用计算机图象分析仪测定其着色的灰度。结果　T1N1 2 M0 组肿瘤原发灶与T1N0 M0 组肿瘤灶之间存... 目的　探讨nm2 3 h1与胃癌之间的关系。方法　对 5 8例外科切除胃癌标本的肿瘤原发灶和淋巴结转移灶进行nm2 3 h1/NDPK A免疫组化染色 ,并用计算机图象分析仪测定其着色的灰度。结果　T1N1 2 M0 组肿瘤原发灶与T1N0 M0 组肿瘤灶之间存在显著差异 (P <0 0 5 ) ,T1N1 2 M0 组淋巴结转移灶较T1N0 M0 组肿瘤灶下调非常显著 (P <0 0 1)。T1N0 M0 组与T2 3 N0 M0 组肿瘤灶的nm2 3 h1/NDPK A蛋白表达水平之间无明显差异 (P >0 0 5 )。结论　nm2 3 h1/NDPK A蛋白表达水平与胃癌淋巴结转移程度呈负相关 。 展开更多
关键词 胃癌 nm23-h1 图象分析 ndpk-a蛋白 表达
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表达NM23-H1/NDPK-A工程菌的遗传稳定性研究 被引量：4
5
作者 钱垂文 黄立 +3 位作者 王一飞 熊盛 张美英 李雪玲 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期35-38,共4页
目的:研究重组工程菌的遗传稳定性。方法:利用重组表达质粒pBVNM-H1转化宿主菌E.coli DH5α,筛选重组工程菌DH5α-pBVNM-H1。将新构建好的重组工程菌在无选择压力的条件下进行连续传代培养,比较菌落在LB(-)和LB(+)培养基上的生长状况,... 目的:研究重组工程菌的遗传稳定性。方法:利用重组表达质粒pBVNM-H1转化宿主菌E.coli DH5α,筛选重组工程菌DH5α-pBVNM-H1。将新构建好的重组工程菌在无选择压力的条件下进行连续传代培养,比较菌落在LB(-)和LB(+)培养基上的生长状况,并对传代菌株目标蛋白的表达情况以及质粒数量和目的基因DNA进行电泳鉴定。结果:重组工程菌连续传代50次中,在LB(-)和LB(+)培养基上的生长状况相同,目标蛋白表达量无显著差异,质粒数量及目的基因DNA结构稳定。结论:重组工程菌DH5α-pBVNM-H1具有良好的遗传稳定性。 展开更多
关键词 DH5Α 蛋白表达 nm23-h1 质粒 目的基因 菌落 连续传代 重组工程 工程菌 遗传稳定性
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VEGFR-3、MMP-9、nm23-H1蛋白在口腔癌组织中的表达及其临床价值研究
6
作者 李冬雅 周婷婷 葛殿奎 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第11期1558-1561,1566,共5页
目的:探讨血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、nm23-H1蛋白在口腔癌组织中的表达及其临床价值。方法:选取行手术治疗的口腔鳞状细胞癌患者70例,收集癌组织标本。另选取同期体检健康者70例,采集口腔黏膜组织。采... 目的:探讨血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、nm23-H1蛋白在口腔癌组织中的表达及其临床价值。方法:选取行手术治疗的口腔鳞状细胞癌患者70例,收集癌组织标本。另选取同期体检健康者70例,采集口腔黏膜组织。采用免疫组织化学染色法检测样本组织VEGFR-3、MMP-9、nm23-H1蛋白表达,分析其与患者临床病理特征的相关性。术后随访5年,记录患者生存情况。分析VEGFR-3、MMP-9、nm23-H1蛋白表达与患者术后5年预后的关系。结果:口腔癌组织VEGFR-3、MMP-9蛋白阳性表达率高于口腔黏膜组织,nm23-H1蛋白阳性表达率低于口腔黏膜组织(均P<0.05)。VEGFR-3、MMP-9蛋白阳性表达患者淋巴结转移比例较高(均P<0.05)。nm23-H1蛋白阳性表达患者淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期-Ⅳ期及肿瘤浸润深度>5 mm比例较低(均P<0.05)。口腔癌组织VEGFR-3、MMP-9蛋白表达与淋巴结转移呈正相关(均P<0.05)。m23-H1蛋白表达与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤浸润深度呈负相关(均P<0.05)。VEGFR-3、MMP-9蛋白阳性表达患者5年生存率低于阴性表达患者(均P<0.05)。m23-H1蛋白阳性表达患者5年生存率高于阴性表达患者(P<0.05)。结论:口腔癌组织VEGFR-3、MMP-9蛋白高表达,nm23-H1蛋白低表达,三者与淋巴结转移以及口腔癌患者预后有关。 展开更多
关键词 口腔癌 血管内皮生长因子受体3 基质金属蛋白酶-9 nm23-h1 临床病理特征 预后
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nm23-H1、p53、PCNA表达与大肠癌浸润转移的关系 被引量：24
7
作者 刘勇 李启明 +2 位作者 路名芝 王夷黎 胡志坤 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期21-24,共4页
目的：研究大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３、ＰＣＮＡ的表达与浸润转移的关系。方法：应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法检测７４例大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３、ＰＣＮＡ和Ⅳ型原的表达。结果：大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３和ＰＣ... 目的：研究大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３、ＰＣＮＡ的表达与浸润转移的关系。方法：应用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法检测７４例大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３、ＰＣＮＡ和Ⅳ型原的表达。结果：大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１、ｐ５３和ＰＣＮＡ的阳性率分别为７１．６％、５２．７％和８１．１％。大肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１低表达与淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０２５），ｎｍ２３－Ｈ１的表达在Ⅳ型胶原表达不同的肠癌中无明显差异（Ｐ＞０．０５）；ｐ５３和ＰＣＮＡ过表达与浸润程度和淋巴结转移有关（Ｐ＜０．０５），ｐ５３和ＰＣＮＡ的表达在Ⅳ型胶原表达不同的肠癌中有非常显著的差异（Ｐ＜０．００５）；大肠癌中ｐ５３过表达与ｎｍ２３－Ｈ１低表达有关（Ｐ＜０．０１）。结论：实验结果揭示ｐ５３基因突变对于ｎｍ２３－Ｈ１基因的失活有一定影响，其作用机制有待深入研究。ｎｍ２３－Ｈ１低表达可能仅在大肠癌转移过程中发挥作用，ｐ５３过表达可在大肠癌浸润转移过程及细胞增殖中起重要作用。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 基因表达 nm23-h1 P53 PCNA
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Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1在结直肠癌中的表达及临床意义 被引量：12
8
作者 陈中皓 王学志 +2 位作者 徐铭 杨华 黄忠华 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期290-293,共4页
背景与目的:近年来的研究表明,多种生物学指标与结直肠癌发生、发展以及手术后的复发转移、预后有关。本研究旨在探讨人结直肠癌组织中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1的表达与各临床病理参数及预后的关系及临床意义。方法... 背景与目的:近年来的研究表明,多种生物学指标与结直肠癌发生、发展以及手术后的复发转移、预后有关。本研究旨在探讨人结直肠癌组织中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1的表达与各临床病理参数及预后的关系及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法,检测72例结直肠癌组织及其对照癌旁正常黏膜组织中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1表达的状况,分析其与临床病理参数及复发转移的关系。结果:在结直肠癌中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1的表达率分别为62.5%(45/72)、66.7%(48/72)、55.5%(40/72)、61.1%(44/72)、79.2%(57/72),均显著高于对照癌旁正常黏膜组织(P<0.01)。Survivin表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及术后复发转移有关;MMP-2表达与淋巴结转移、TNM分期、术后复发转移有关;nm23-H1表达与淋巴结转移、TNM分期相关;VEGF表达与浸润深度、TNM分期及术后复发转移有关;而受体Flt-1表达与临床病理及预后因素均无关。结论:Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF与结直肠癌的发生、发展密切相关,联合检测多个相关基因的表达能更准确地判断结直肠癌的生物学特征及预后判断。 展开更多
关键词 结直肠癌 SURVIVIN MMP-2 nm23-h1 VEGF FLT-1
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nm23-H1基因逆转人高转移大细胞肺癌细胞L9981转移表型的分子机制 被引量：11
9
作者 车国卫 周清华 +6 位作者 朱文 王艳萍 覃杨 刘伦旭 陈晓禾 孙艺琳 孙泽芳 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第3期278-284,共7页
背景与目的:nm23-H1基因已被证明是转移抑制基因,转染野生型nm23-H1基因可以逆转肿瘤的恶性转移表型,但是nm23-H1基因抑制或逆转肺癌转移的分子机制却知之甚少,我们在建立转nm23-H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1的基础上... 背景与目的:nm23-H1基因已被证明是转移抑制基因,转染野生型nm23-H1基因可以逆转肿瘤的恶性转移表型,但是nm23-H1基因抑制或逆转肺癌转移的分子机制却知之甚少,我们在建立转nm23-H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-nm23-H1的基础上,进一步探讨nm23-H1基因抑制肺癌转移的分子机制。方法:应用MTT法和改良的Boyden小室法分析转基因前后细胞的体外增殖能力及体外侵袭力的变化,体内实验分析转基因前后细胞在裸鼠体内的成瘤性及肺转移能力的改变,同时应用RT-PCR和Westernblot分别检测各组细胞中转移相关基因β-catenin、E-Cadherin、CD44S、CD44V6、MMP-2、TIMP-1、VEGF、基因mRNA及蛋白表达水平。结果:(1)转基因细胞株L9981-nm23-H1的体外增殖能力[(0%vs.(19.5±2.9)%]、克隆形成能力(10.3±0.7vs.21.7±1.3)及侵袭力显著低于L9981细胞(31.0±3.0vs.151.0±6.3)(P<0.01);(2)nm23-H1基因在裸鼠体内的抑瘤率显著增高(82.6%vs.0%),且转染nm23-H1基因的L9981细胞裸鼠体内移植瘤肺转移显著降低(0%vs.100%)(P<0.01);(3)nm23-H1基因能够上调β-catenin、E-Cadherin、TIMP-1基因mRNA及蛋白表达,下调VEGF、CD44V6和MMP-2基因mRNA及蛋白表达(P<0.01);(4)nm23-H1表达上调CD44S基因mRNA表达(P<0.01),而对其蛋白表达? 展开更多
关键词 nm23-h1基因 转移表型 肿瘤转移相关基因 肺肿瘤
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利用定点突变技术构建突变nm23-H_1和EGFP融合基因 被引量：7
10
作者 朱大兴 周清华 +3 位作者 王艳萍 朱文 陈小禾 孙芝琳 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第2期117-122,共6页
背景与目的以前的研究已经证明nm23H1基因是肿瘤转移抑制基因,但其抑制肿瘤转移的分子机制目前还不完全清楚。基因定点突变技术可以精确地改变基因的特定碱基序列,获得突变蛋白质。本研究的目的是应用基因定点突变技术构建突变型nm23H1... 背景与目的以前的研究已经证明nm23H1基因是肿瘤转移抑制基因,但其抑制肿瘤转移的分子机制目前还不完全清楚。基因定点突变技术可以精确地改变基因的特定碱基序列,获得突变蛋白质。本研究的目的是应用基因定点突变技术构建突变型nm23H1增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合基因,为进一步研究肿瘤抑制基因nm23H1的功能、生化作用机制提供理论基础和实验依据。方法以逆转录病毒PLXSN野生型nm23H1EGFP质粒为突变模板,应用QuikChangeTM定点突变方法,简单、快速、高效地引入nm23H1S44A、nm23H1P96S、nm23H1H118F、nm23H1S120G四个点突变和一个联合位点突变nm23H1P96SS120G,构建了突变型nm23H1EGFP融合基因。结果成功构建了nm23H1S44AEGFP、nm23H1P96SEGFP、nm23H1H118FEGFP、nm23H1S120GEGFP、nm23H1P96SS120GEGFP五个突变型nm23H1EGFP融合基因,经DNA序列分析突变的碱基序列与实验设计完全一致。结论成功构建了五个具有不同突变位点的突变型nm23H1EGFP融合基因。QuikChangeTM定点突变技术是一种简单、快速、高效的基因定点突变方法。 展开更多
关键词 定点突变 nm23-h1 EGFP 突变型nm23-h1-GFP融合基因
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PTEN、nm23-H1和Syk在大肠癌中的表达及意义 被引量：14
11
作者 董华承 范丽昕 +3 位作者 朴正爱 王晓鸿 王海 王丽双 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2013年第5期403-407,共5页
目的检测PTEN、nm23-H1和Syk蛋白在大肠癌中的表达,探讨其与大肠癌发生、发展、浸润和转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例大肠癌组织及30例正常大肠黏膜中PTEN、nm23-H1和Syk的表达,分析三者与大肠癌临床病理特征的关系。结果正... 目的检测PTEN、nm23-H1和Syk蛋白在大肠癌中的表达,探讨其与大肠癌发生、发展、浸润和转移的关系。方法采用免疫组化SP法检测60例大肠癌组织及30例正常大肠黏膜中PTEN、nm23-H1和Syk的表达,分析三者与大肠癌临床病理特征的关系。结果正常大肠黏膜中PTEN、nm23-H1和Syk的阳性表达率分别为90.0%(27/30)、93.3%(28/30)和96.7%(29/30),而在大肠癌组织中分别为36.7%(22/60)、41.7%(25/60)和31.7%(19/60),差异均有统计学意义(P<0.01)。大肠癌中3种蛋白的表达与年龄、性别、肿瘤大小和发生部位均无关(P>0.05),PTEN、Syk表达与大肠癌的浸润程度、淋巴结转移、分化程度及Duke's分期有关,nm23-H1表达与浸润程度、淋巴结转移及Duke's分期有关。大肠癌中3种蛋白表达两两呈正相关。结论 PTEN、nm23-H1和Syk表达与大肠癌发生、发展、浸润及转移密切相关,联合检测是判断大肠癌生物学行为的重要指标。 展开更多
关键词 大肠癌 抑癌基因 PTEN nm23-h1 SYK 免疫组织化学
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胃癌及区域淋巴结CD44v6、nm23-H1表达与其病理特征及预后关系的研究 被引量：9
12
作者 张景华 李勇 +3 位作者 王晓玲 曹月敏 邝刚 王力利 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期256-258,共3页
目的:探讨胃癌及其区域淋巴结CD44V6、nm23-H1表达与胃癌病理特征及预后的关系。方法:本研究采用SP免疫组织化学方法对110例胃癌及613枚区域淋巴结组织中的CD44V6、nm23-H1的表达进行检测。结果:在胃癌原发灶和在淋巴结转移灶,CD44V6阳... 目的:探讨胃癌及其区域淋巴结CD44V6、nm23-H1表达与胃癌病理特征及预后的关系。方法:本研究采用SP免疫组织化学方法对110例胃癌及613枚区域淋巴结组织中的CD44V6、nm23-H1的表达进行检测。结果:在胃癌原发灶和在淋巴结转移灶,CD44V6阳性表达率分别为65.5%和89.4%,nm23-H1阳性表达率分别为39.1%和16.8%。CD44V6、nm23-H1表达率与胃癌的组织学类型、浸润深度、淋巴结转移密切相关。胃癌原发灶CD44V6阳性表达组5年生存率显著低于阴性表达组(P<0.01);nm23-H1阳性表达组5年生存率显著高于阴性表达组(P<0.01)。结论:对胃癌组织进行CD44V6、nm23-H1蛋白的检测,有助于预测胃癌进程和淋巴结转移的诊断,以及评估胃癌患者的预后。 展开更多
关键词 胃癌 CD44V6蛋白 nm23-h1 蛋白 免疫组织化学
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nm23-H1基因对口腔癌Acc-M细胞株的转移能力及化疗敏感性影响的体外研究 被引量：6
13
作者 陈绍维 廖湘凌 +3 位作者 潘剑 杨凯 华成舸 温玉明 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期628-630,726,共4页
目的　通过 nm2 3- H1的转化及导入 Acc- M细胞株 ,建立稳定、高效、低毒的转染方法 ,观察 nm2 3- H1对 Acc- M细胞株侵袭转移能力及化疗敏感性的影响。方法　采用基因转化技术 ,制备高纯度的 nm2 3- H1真核表达质粒。用阳离子脂质体介... 目的　通过 nm2 3- H1的转化及导入 Acc- M细胞株 ,建立稳定、高效、低毒的转染方法 ,观察 nm2 3- H1对 Acc- M细胞株侵袭转移能力及化疗敏感性的影响。方法　采用基因转化技术 ,制备高纯度的 nm2 3- H1真核表达质粒。用阳离子脂质体介导的转染技术 ,将 nm2 3- H1基因转染到口腔腺样囊性癌 Acc- M细胞株。用免疫组化技术检测转染前后的 nm2 3- H1的表达。并用 transwell小室和冲刷实验 ,观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。采用 MTT法观察 nm 2 3- H1对 Acc- M化疗敏感性影响。结果　 1使用重组的 p CMV - Neo- Bam的真核表达载体 ,将 nm 2 3- H 1转染口腔癌细胞 ,并获得稳定表达。 2 Acc- M细胞株 nm2 3- H 1基因的转染前后表达水平有明显差异。 3转染后的 Acc- M细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低。 4转染前后使用 C- DDP的 L D50 分别为2 .6 4± 0 .4 7,1.85± 0 .4 1(P<0 .0 1)。结论　 nm2 3- H1对 Acc- M细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用 。 展开更多
关键词 nm23-h1 ACC-M 转移 化疗敏感性 口腔癌
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nm23-H1 基因产物在人鼻咽癌中的表达及其临床意义 被引量：9
14
作者 郭翔 闵华庆 +1 位作者 邵建永 侯景辉 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第2期119-122,共4页
目的：ｎｍ２３是一种肿瘤转移抑制基因。它在某些人类肿瘤包括乳腺癌、结肠癌、胃癌、肝癌、膀胱癌等中的表达水平与肿瘤转移呈负相关。本研究检测ｎｍ２３－Ｈ１基因产物在鼻咽癌中的表达，探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因的表达与鼻咽癌转移... 目的：ｎｍ２３是一种肿瘤转移抑制基因。它在某些人类肿瘤包括乳腺癌、结肠癌、胃癌、肝癌、膀胱癌等中的表达水平与肿瘤转移呈负相关。本研究检测ｎｍ２３－Ｈ１基因产物在鼻咽癌中的表达，探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因的表达与鼻咽癌转移和预后的关系。方法：用ｎｍ２３－Ｈ１单克隆抗体通过免疫组化ＬＳＡＢ法，对９５例鼻咽低分化鳞癌蜡块标本进行研究，用Ｌｏｇｒａｎｋ检验分析ｎｍ２３－Ｈ１基因的表达与鼻咽癌转移、复发和预后的关系。Ｃｏｘ＇ｓ回归模型作多因素预后分析。结果：ｎｍ２３表达阴性组淋巴结转移率（８６．７％）比表达阳性组高（４８．６％，Ｐ＜０．０１），ｎｍ２３表达阴性组放疗后复发、远处转移较表达阳性组高（Ｐ＜０．０５），ｎｍ２３－Ｈ１基因产物的表达与鼻咽癌患者的预后呈正相关（Ｐ＜０．０１）。Ｃｏｘ＇ｓ回归模型多因素分析显示ｎｍ２３－Ｈ１是影响鼻咽癌预后的一个指标（Ｐ＜０．０５）。结论：本研究的结果提示ｎｍ２３－Ｈ１的阴性表达与鼻咽癌的淋巴结转移、复发、远处转移显著相关，ｎｍ２３－Ｈ１可作为预测鼻咽癌预后的一个重要指标。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 nm23-h1基因 基因表达 淋巴结转移
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nm23-H_1基因对人肺癌细胞中细胞外信号调节激酶活性的影响 被引量：7
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作者 李印 周清华 +6 位作者 孙芝琳 覃扬 朱文 王艳萍 刘伦旭 陈小禾 孙泽芳 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第1期8-11,共4页
目的　探讨肿瘤转移抑制基因nm2 3 H1 对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2活性的影响。方法　应用特异性识别总ERK1/2 ( p44 /4 2MAPkinase)和双磷酸化ERK1/2( phospho p44 /4 2MAPkinase)的抗体及蛋白印迹法 ... 目的　探讨肿瘤转移抑制基因nm2 3 H1 对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中细胞外信号调节激酶ERK1/2活性的影响。方法　应用特异性识别总ERK1/2 ( p44 /4 2MAPkinase)和双磷酸化ERK1/2( phospho p44 /4 2MAPkinase)的抗体及蛋白印迹法 (Westernblot) ,检测L9981(缺失nm2 3 H1 基因的原代肺癌细胞株 )、L9981 nm 2 3 H1 (转染了nm 2 3 H1 基因的L9981细胞株 )、L9981 PLXSN (转染了空载体的L9981细胞株 )中总ERK1/2和磷酸化ERK1/2的水平。磷酸化ERK 1/2活性应用非放射性免疫沉淀和Westernblot法以及 p44 /4 2MAPkinase分析试剂盒予以检测。 结果　L9981 nm2 3 H1 细胞株中磷酸化ERK 1/2的水平 ,以及ERK1/2活性均显著低于L9981细胞株和L9981 PLXSN细胞株 (P <0 .0 1) ,L9981和L9981 PLXSN细胞株间磷酸化ERK 1/2水平和ERK 1/2活性比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。三个细胞株间总ERK1/2水平比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　nm2 3 H1 基因可明显靶向地抑制人高转移肺癌细胞株L9981中ERK 1/2的转录表达和ERK 1/2的活性。推测nm2 3 H1 基因的作用机制可能与其抑制了MAPK/ERK信号传导通路有关。 展开更多
关键词 nm23-h1基因 肺癌 癌细胞 细胞外信号调节激酶活性 检测 信号传导通路
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nm23-H1基因在大肠癌中的表达与肝转移及预后的关系 被引量：6
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作者 李升平 王吉甫 +2 位作者 刘锦怀 杜洪 潘邦敏 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第1期38-40,F002,共4页
目的：探讨ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达与大肠癌肝转移及预后的关系。方法：对１０１例大肠癌存档石蜡块进行重新切片，采用ｎｍ２３－Ｈ１单克隆抗体进行免疫组化染色（ＬＳＡＢ法）。结果：ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小... 目的：探讨ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达与大肠癌肝转移及预后的关系。方法：对１０１例大肠癌存档石蜡块进行重新切片，采用ｎｍ２３－Ｈ１单克隆抗体进行免疫组化染色（ＬＳＡＢ法）。结果：ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达与年龄、性别、肿瘤大小、部位、组织类型、浆膜侵犯无关；与Ｄｕｋｅｓ分期、淋巴结转移有关；手术时有肝转移组较无肝转移组低，手术后有肝转移复发组较无肝转移复发组低（Ｐ＜００１）。Ｃｏｘ模型分析显示ｎｍ２３－Ｈ１是大肠癌预后的一个保护性指标。结论：ｎｍ２３－Ｈ１基因对大肠癌肝转移和预后具有重要作用。 展开更多
关键词 nm23-h1 预后 大肠肿瘤 肝转移
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nm23-H1表达预测大肠癌转移的价值研究 被引量：5
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作者 余保平 王伟岸 +2 位作者 于皆平 沈志祥 罗和生 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期103-104,共2页
目的　大肠癌预后取决于是否存在肿瘤转移 ,目前尚无肯定的观测大肠癌细胞恶性潜能的生物学指标。本研究目的在于探讨nm2 3 H1作为预测大肠癌转移指标的潜在价值。方法　采用免疫组织化学链霉菌亲合物素蛋白—生物素酶标 (SP)方法对 5 ... 目的　大肠癌预后取决于是否存在肿瘤转移 ,目前尚无肯定的观测大肠癌细胞恶性潜能的生物学指标。本研究目的在于探讨nm2 3 H1作为预测大肠癌转移指标的潜在价值。方法　采用免疫组织化学链霉菌亲合物素蛋白—生物素酶标 (SP)方法对 5 8例存档大肠癌标本进行nm2 3 H1蛋白表达检测 ,用SSPS统计软件包对nm H1表达与临床病理参数的关系进行分析。结果　正常大肠粘膜和大肠腺瘤nm2 3呈阳性表达 ,6 2 1%大肠癌组织阳性表达。nm2 3表达与肿瘤分级、淋巴结及肝转移负相关 (P值分别为 0 0 10 0 ,0 2 0 87,0 0 0 376 )。nm2 3阳性表达的大肠癌患者预后好(P =0 0 0 0 2 )。结论　nm2 3 展开更多
关键词 大肠癌 nm23-h1 肿瘤转移 预测
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nm23-H1基因对Tca8113的转移能力及化疗敏感性影响的实验研究 被引量：6
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作者 陈绍维 黄洪章 +5 位作者 潘剑 温玉明 廖湘凌 王昌美 李芃 杨凯 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期180-183,共4页
目的　通过nm2 3_H1的转化及导入Tca81 1 3细胞株 ,建立稳定、高效、低毒的转染方法 ,观察nm2 3_H1对Tca81 1 3细胞株侵袭转移能力的影响。方法　利用基因转化技术 ,制备高纯度的nm2 3_H1真核表达质粒。利用阳离子脂质体介导的转染技术 ... 目的　通过nm2 3_H1的转化及导入Tca81 1 3细胞株 ,建立稳定、高效、低毒的转染方法 ,观察nm2 3_H1对Tca81 1 3细胞株侵袭转移能力的影响。方法　利用基因转化技术 ,制备高纯度的nm2 3_H1真核表达质粒。利用阳离子脂质体介导的转染技术 ,完成转染方法的建立。利用免疫组化技术 ,检测转染前后的nm2 3_H1的蛋白产物核苷二磷酸激酶A (NDPKA)的表达。利用transwell小室和冲刷实验 ,观察转染前后细胞的侵袭、粘附、趋化运动能力的变化。MTT法观察nm2 3_H1对Tca81 1 3化疗敏感性影响。结果　使用重组的pCMV_Neo_Bam真核表达载体 ,将nm2 3_H1转染口腔癌细胞 ,并获得稳定表达。Tca81 1 3细胞株nm2 3_H1基因转染前后表达水平有明显差异 ,转染后Tca81 1 3细胞侵袭、粘附、趋化运动能力均显著降低 ,转染前后Tca81 1 3细胞株对阿霉素 (ADM)、5_氟尿嘧啶 (5_FU)、甲氨喋呤 (MTX)的化疗敏感性无显著差异 ,转染后Tca81 1 3细胞株对顺铂 (CDDP)明显增敏。结论　nm2 3_H1对Tca81 1 3细胞的侵袭转移能力具有显著抑制作用 ,nm2 展开更多
关键词 nm23-h1基因 TCA8113 肿瘤转移能力 化疗敏感性 实验研究 口腔癌 癌细胞
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转移抑制基因nm23-H_1在人非小细胞肺癌中的表达研究 被引量：18
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作者 陈晓峰 周清华 +8 位作者 石应康 张尚福 张声 成娘 杨俊杰 赵雍凡 蒋光亮 伍伫 杨振华 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS 1997年第2期80-82,共3页
目的探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因表达产物的表达水平与肺癌发生、发展和转移的关系。方法应用免疫组织化学法研究人非小细胞肺癌细胞中ｎｍ２３－Ｈ１基因表达产物的表达水平。结果ｎｍ２３－Ｈ１在肺癌组织中的表达水平（５４．０３％）明... 目的探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因表达产物的表达水平与肺癌发生、发展和转移的关系。方法应用免疫组织化学法研究人非小细胞肺癌细胞中ｎｍ２３－Ｈ１基因表达产物的表达水平。结果ｎｍ２３－Ｈ１在肺癌组织中的表达水平（５４．０３％）明显低于癌旁正常肺组织（７３．４８％，Ｐ＜０．０１）。有淋巴结转移的原发癌ｎｍ２３－Ｈ１表达水平明显低于无淋巴结转移的原发癌（Ｐ＜０．０１）；转移癌组织表达水平明显低于原发癌组织（Ｐ＜０．０１）；低分化肺癌明显低于中－高分化肺癌（Ｐ＜０．０１）。结论ｎｍ２３－Ｈ１基因可能参与肺癌的发生、发展和转移过程的调控，ｎｍ２３－Ｈ１基因表达水平降低，预示肺癌的转移和预后不良。 展开更多
关键词 nm23-h1基因 转移肺肿瘤 非小细胞肺癌
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nm23-H1基因转染对人高转移大细胞肺癌细胞株生物学行为的影响及作用机理 被引量：4
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作者 聂强 朱文 +6 位作者 刘伦旭 付军科 李定彪 李印 陈军 刘红雨 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第3期349-353,共5页
背景与目的nm23-H1基因已被证明是一个肿瘤转移抑制基因,但其相关作用机理仍不明确。本研究通过比较nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981生物学行为的变化,探讨nm23-H1基因影响人高转移大细胞肺癌细胞株生物学行为的可能... 背景与目的nm23-H1基因已被证明是一个肿瘤转移抑制基因,但其相关作用机理仍不明确。本研究通过比较nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981生物学行为的变化,探讨nm23-H1基因影响人高转移大细胞肺癌细胞株生物学行为的可能机理。方法应用细胞体外增殖活性检测(MTT法)和体外侵袭力检测(改良Boyden小室法)技术分别检测nm23-H1基因转染前后人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1肺癌细胞株体外增殖活性和侵袭力的变化;同时加入PKC特异抑制剂Calphostin C作用后,再次观察三株细胞株抑制剂作用前后细胞侵袭力、增殖力的变化。结果nm23-H1基因缺失的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981和L9981-pLXSN体外侵袭力和增殖活性明显高于转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1肺癌细胞株(P<0.001);L9981和L9981-pLXSN细胞间体外侵袭力和增殖活性则无统计学差异(P>0.05)。用PKC抑制剂Calphostin C处理L9981、L9981-pLXSN和L9981-nm23-H1肺癌细胞株后,细胞体外侵袭力和增殖活性下降(P<0.001),而转染nm23-H1基因的L9981-nm23-H1细胞体外侵袭力和增殖活性仍低于L9981和L9981-pLXSN(P<0.001),L9981和L9981-pLXSN细胞间则无统计学差异(P>0.05)。结论nm23-H1基因可明显抑制L9981肺癌细胞株的细胞增殖力和侵袭力。nm23-H1基因对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的生物学行为的影响可能与其抑制PKC信号传导有关。 展开更多
关键词 nm23-h1 蛋白PKC 肺肿瘤 侵袭 转移
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