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Nucleostemin下调联合雷帕霉素对HL-60细胞自噬与凋亡影响的初步研究 被引量：1
1
作者 王亚奇 高晓娟 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1629-1634,共6页
目的:研究Nucleostemin(NS)下调联合雷帕霉素对HL-60细胞自噬和凋亡的影响并探讨其在HL-60细胞中的作用。方法:通过NS-RNAi-GV248重组慢病毒载体转染HL-60细胞后检测NS蛋白的表达。采用流式细胞术检测沉默NS和/或雷帕霉素处理24、48 h后... 目的:研究Nucleostemin(NS)下调联合雷帕霉素对HL-60细胞自噬和凋亡的影响并探讨其在HL-60细胞中的作用。方法:通过NS-RNAi-GV248重组慢病毒载体转染HL-60细胞后检测NS蛋白的表达。采用流式细胞术检测沉默NS和/或雷帕霉素处理24、48 h后HL-60细胞的凋亡变化;采用Western blot技术检测各组细胞中NS、LC3、p62、BCL-2、Bax蛋白的表达。结果:重组慢病毒载体成功下调HL-60细胞NS表达。经雷帕霉素处理后,细胞凋亡率均明显增加(P<0.05),且48 h凋亡更明显。与NS敲低组、雷帕霉素组相比,NS下调联合雷帕霉素组处理48 h后,其凋亡明显增加(P<0.05),LC3-II/LC3-I比值显著增加(P<0.05),p62蛋白表达下降更显著(P<0.05),并且BCL-2/Bax比值减低更明显(P<0.05)。结论:NS下调联合雷帕霉素可增强HL-60细胞的凋亡和自噬,并且其诱导HL-60细胞的凋亡可能与BCL-2、Bax蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 核干细胞因子 HL-60细胞 雷帕霉素 自噬 凋亡
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Nucleostemin基因特异性RNA干扰对胃癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：6
2
作者 郑学芝 胡静 +3 位作者 孙卫 刘桂莲 刘晓霓 蔡子微 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期203-205,224,共4页
目的探讨应用RNA干扰技术抑制nucleostemin(NS)基因表达对胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响。方法阳离子脂质体法将构建好的NS-siRNA表达载体转染胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测试各组细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测各组细胞NS基因表... 目的探讨应用RNA干扰技术抑制nucleostemin(NS)基因表达对胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响。方法阳离子脂质体法将构建好的NS-siRNA表达载体转染胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测试各组细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测各组细胞NS基因表达情况,流式细胞术检测细胞周期,Annexin-V-FITC/PI法检测细胞凋亡率。结果与对照组相比,S组细胞的增殖减慢,24、48、72 h细胞增殖抑制率分别为53.21%、71.54%、87.47%;NS基因表达量下降,G0/G1期细胞百分率显著升高(58.34%),S期细胞减少(20.68%),细胞凋亡率增加(26.85%)。结论RNA干扰技术可抑制胃癌SGC-7901细胞株NS基因的表达,使细胞增殖减慢,细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率增加。 展开更多
关键词 RNA干扰 nucleostemin 胃癌 细胞增殖 凋亡
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RNA干扰Nucleostemin基因对人食管癌Eca-109细胞株增殖影响的实验研究 被引量：5
3
作者 郑学芝 刘桂莲 +4 位作者 李丽 孙卫 念红 胡静 蔡子微 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期103-105,共3页
目的筛选NS基因特异性siRNA阳性细胞克隆,研究NS基因特异性RNA干扰对Eca-109细胞株体外增殖能力的影响。方法用脂质体法将NS特异性siRNA表达载体转染Eca-109细胞,Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定阳性克隆;MTT法检测各组细胞的生长... 目的筛选NS基因特异性siRNA阳性细胞克隆,研究NS基因特异性RNA干扰对Eca-109细胞株体外增殖能力的影响。方法用脂质体法将NS特异性siRNA表达载体转染Eca-109细胞,Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定阳性克隆;MTT法检测各组细胞的生长增殖情况,RT-PCR方法检测NS基因表达量的变化情况。结果与对照组比较,silencer组肿瘤细胞趋于分化,细胞增殖抑制率超过80%(P<0.01),差异具有显著性;NS基因表达量下降。结论NS基因特异性RNA干扰抑制人食管癌Eca-109细胞株体外增殖,使NS基因表达量下降。 展开更多
关键词 nucleostemin(NS) RNA干扰 食管癌 基因表达 细胞增殖
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Nucleostemin特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖能力的影响 被引量：14
4
作者 蔡子微 刘思金 +1 位作者 孙丽秋 劳为德 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1331-1335,共5页
目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响。方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northernblot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞,观察转染的HeLa细胞(简称NS-si... 目的:检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达,研究NS特异性RNA干扰对HeLa细胞体内外增殖的影响。方法:提取6种肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR和Northernblot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染HeLa细胞,观察转染的HeLa细胞(简称NS-siRNA-HeLa细胞)体内外增殖的变化。结果:6种肿瘤细胞中NS明显高表达。体外培养的NS-siRNA-HeLa细胞中NS表达显著低于对照组,G0/G1期细胞百分率显著升高。体内致瘤实验显示,NS-siRNA-HeLa细胞在裸鼠体内增殖显著低于对照组。结论:NS在肿瘤细胞中高表达具有普遍性。NS特异性RNA干扰使HeLa细胞进入S期受阻,并可明显降低HeLa细胞体内外的增殖能力。 展开更多
关键词 nucleostemin 干细胞 HELA细胞 细胞周期
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胃癌组织和SGC-7901细胞中nucleostemin基因表达的实验研究 被引量：6
5
作者 郑学芝 张承玉 +2 位作者 孙卫 徐秋玲 蔡子微 《中国全科医学》 CAS CSCD 2008年第16期1461-1463,共3页
目的检测nucleostemin(NS)基因在胃癌组织和胃癌SGC-7901细胞中的表达情况。方法21例胃癌手术标本,提取胃癌组织和胃癌SGC-7901细胞株总RNA,用半定量RT-PCR方法检测胃癌组织和SGC-7901中NS基因的表达情况。用脂质体法将PCDNA4/C-NS-sile... 目的检测nucleostemin(NS)基因在胃癌组织和胃癌SGC-7901细胞中的表达情况。方法21例胃癌手术标本,提取胃癌组织和胃癌SGC-7901细胞株总RNA,用半定量RT-PCR方法检测胃癌组织和SGC-7901中NS基因的表达情况。用脂质体法将PCDNA4/C-NS-silencer质粒及空载体PCDNA4/C-vector质粒分别转染SGC-7901细胞,分别命名为silencer组和vector组,未转染的SGC-7901细胞记为normal组,RT-PCR方法检测NS基因表达量。用MTT法检测3组细胞的生长增殖情况。结果胃癌组织和SGC-7901细胞中皆有NS基因表达。定性分析显示,与vector组和normal组比较,silencer组细胞趋于分化,NS基因表达量下降。细胞培养24 h、48 h、72 h后,si-lencer组和vector组细胞增殖抑制率间差别均有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌组织和SGC-7901细胞中有NS基因表达;NS基因特异性RNA干扰使NS基因表达量下降,抑制SGC-7901细胞株体外增殖。 展开更多
关键词 nucleostemin 胃癌 RNA干扰 细胞增殖
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姜黄素对胃癌SGC-7901细胞Nucleostemin基因表达的影响及意义 被引量：8
6
作者 郑学芝 周冬云 +3 位作者 徐秋玲 张绪东 念红 李丽 《中国药师》 CAS 2010年第3期355-357,共3页
目的:研究姜黄素对胃癌SGC-7901细胞株NS基因表达的影响及凋亡诱导作用,探讨姜黄素抗肿瘤机制。方法:不同浓度姜黄素(0,10,20,40μmol·L^(-1))和不同时间(12,24,48 h)点处理细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测姜黄... 目的:研究姜黄素对胃癌SGC-7901细胞株NS基因表达的影响及凋亡诱导作用,探讨姜黄素抗肿瘤机制。方法:不同浓度姜黄素(0,10,20,40μmol·L^(-1))和不同时间(12,24,48 h)点处理细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR法检测姜黄素作用前后NS基因表达量的变化,TUNEL试剂盒法、流式细胞仪法检测细胞凋亡情况。结果:20μmol·L^(-1)以上浓度的姜黄素对体外培养的胃癌SGC-7901细胞株生长具有抑制作用并呈量效和时效关系;与对照组相比,姜黄素处理组NS基因表达量明显下降,细胞凋亡明显增加(凋亡指数>26.61%,P<0.05)。结论:姜黄素使胃癌SGC-7901细胞增殖减慢,凋亡增加,NS基因表达下降,可能是姜黄素抗肿瘤机制之一。 展开更多
关键词 nucleostemin 姜黄素 胃癌 细胞凋亡
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Nucleostemin基因沉默对食管癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3
7
作者 郑学芝 孙卫 +3 位作者 张绪东 李丽 徐秋玲 周冬云 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期3121-3123,共3页
目的探讨RNA干扰沉默Nucleostemin(NS)基因后对食管癌Eca-109细胞株增殖和凋亡的影响。方法用NS基因特异性siRNA表达载体转染食管癌Eca-109细胞株,通过绘制细胞生长曲线和克隆形成实验检测细胞增殖能力;CCK-8法测试细胞增殖抑制率;RT-PC... 目的探讨RNA干扰沉默Nucleostemin(NS)基因后对食管癌Eca-109细胞株增殖和凋亡的影响。方法用NS基因特异性siRNA表达载体转染食管癌Eca-109细胞株,通过绘制细胞生长曲线和克隆形成实验检测细胞增殖能力;CCK-8法测试细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测NS基因表达量的变化,TUNEL法和DNA Ladder检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,S组细胞的增殖速率降低,24、48及72h细胞增殖抑制率分别为60.32%、72.29%和86.00%;NS基因表达量下降;细胞凋亡指数增加(18.28%),可见梯状DNA降解带。结论 NS基因沉默导致食管癌Eca-109细胞株增殖抑制,凋亡增加。 展开更多
关键词 nucleostemin RNA干扰 食管癌 细胞增殖 细胞凋亡
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乳腺肿瘤组织nucleostemin基因表达与临床病理表现的关系 被引量：13
8
作者 蔡子微 郑学芝 胡静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期2191-2194,共4页
目的:研究nucleostemin(NS)基因在人类乳腺肿瘤组织中的表达及其与恶性程度、组织类型和TNM分期的关系。方法:提取肿瘤组织RNA,用电泳与半定量RT-PCR方法检测肿瘤组织中NS基因的表达及表达量;比较NS基因表达量与乳腺肿瘤恶性程度、组织... 目的:研究nucleostemin(NS)基因在人类乳腺肿瘤组织中的表达及其与恶性程度、组织类型和TNM分期的关系。方法:提取肿瘤组织RNA,用电泳与半定量RT-PCR方法检测肿瘤组织中NS基因的表达及表达量;比较NS基因表达量与乳腺肿瘤恶性程度、组织类型和TNM分期的关系。结果:正常组织中未检测到NS基因表达,良性乳腺肿瘤组织NS基因的表达量低于恶性肿瘤(P<0.01),乳腺恶性肿瘤分级越高,NS基因的表达量越高(P<0.01);TNM分期越高,NS基因的表达量越高(P<0.01);NS基因的表达量高低与乳腺肿瘤组织类型无关(P>0.05)。结论:NS基因表达量与乳腺肿瘤组织类型无关,而与肿瘤分级、TNM分期有关,随着肿瘤分级的提高、TNM分期的提高,NS基因表达量也提高。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 基因 nucleostemin 基因表达
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HL-60细胞Nucleostemin表达下调对PI3K/AKT/mTOR通路相关分子的影响 被引量：3
9
作者 贾宇 魏园玉 +3 位作者 张帆 李曌博 刘帅 岳保红 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期25-29,共5页
本研究旨在探讨白血病细胞中nucleostemin(NS)基因下调对其非依赖p53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR的相关分子表达的影响。通过重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至p53缺失型HL-60细胞以干扰NS基因的表达。用Real-time PCR技术评价转... 本研究旨在探讨白血病细胞中nucleostemin(NS)基因下调对其非依赖p53通路的候选途径PI3K/AKT/mTOR的相关分子表达的影响。通过重组慢病毒表达载体NS-RNAi-GV248转染至p53缺失型HL-60细胞以干扰NS基因的表达。用Real-time PCR技术评价转染后HL-60细胞NS基因的表达情况并检测干扰前后PI3K/AKT/mTOR信号通路中相关分子水平表达的变化。结果表明:重组慢病毒载体NS-RNAi-GV248成功感染了HL-60细胞,在荧光显微镜下可见GFP荧光水平较高,大于80%。Real-time PCR结果显示,NS基因mRNA的抑制率在HL-60细胞中为56.5%;干扰NS的表达后PI3K、AKT和GβL基因mRNA表达量分别为0.491±0.084、0.398±0.164、0.472±0.097,下调明显,与空白对照组(分别为1.002±0.171、1.000±0.411、1.001±0.206)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在HL-60细胞中PI3K/AKT/mTOR通路相关分子的变化与NS基因的下调呈正相关,两者的关联性为证明PI3K/AKT/mTOR信号通路可能是NS的一种非依赖p53作用途径提供了依据。 展开更多
关键词 nucleostemin PI3K AKT MTOR信号通路 HL-60细胞 p53缺失型
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不同病理分级和临床分期的肾癌组织中nucleostemin mRNA的表达 被引量：3
10
作者 张昊 徐卫丽 +3 位作者 武玉东 张凯 岳俊敏 魏金星 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第3期437-438,共2页
Nucleostemin蛋白是定位在肿瘤细胞核和干细胞核内的一种P53结合蛋白,可能负责对肿瘤细胞和干细胞的增殖进行相应的调控,进而阻止其分化为成熟细胞并保持细胞的扩增状态[1-3]。研究[4]发现nuleostemin基因在肾癌组织中呈现高表达状态,... Nucleostemin蛋白是定位在肿瘤细胞核和干细胞核内的一种P53结合蛋白,可能负责对肿瘤细胞和干细胞的增殖进行相应的调控,进而阻止其分化为成熟细胞并保持细胞的扩增状态[1-3]。研究[4]发现nuleostemin基因在肾癌组织中呈现高表达状态,而在正常肾组织中未发现其表达。作者采用RTPCR法对不同临床分期及不同病理分级的肾癌组织中nucleostemin mRNA的表达进行了检测,进一步探讨nucleostemin基因在肾癌进展中的意义。 展开更多
关键词 nucleostemin基因 肾癌
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RNAi对结肠癌SW480细胞Nucleostemin基因表达的影响 被引量：1
11
作者 潘振国 王园园 +3 位作者 范里 钱伟 宋宇虎 朱良如 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2012年第1期70-73,共4页
目的:探求RNA技术干扰人结肠癌SW480细胞Nucleostemin(NS)基因后,结肠癌SW480细胞NucleosteminmRNA和蛋白水平的表达,及细胞增殖情况变化.方法:构建Nucleostemin特异性真核表达载体,和脂质体共同转染SW480细胞后,采用Real-timePCR和West... 目的:探求RNA技术干扰人结肠癌SW480细胞Nucleostemin(NS)基因后,结肠癌SW480细胞NucleosteminmRNA和蛋白水平的表达,及细胞增殖情况变化.方法:构建Nucleostemin特异性真核表达载体,和脂质体共同转染SW480细胞后,采用Real-timePCR和Westernblot方法检测NS基因mRNA和蛋白变化,MTT法检测细胞的增殖情况.结果:与对照组相比较,RNAi干扰细胞后NSmRNA表达明显下降;NS蛋白表达亦明显下降(1.069±0.368,1.003±0.313,1.901±0.817,P<0.05;1.069±0.368,1.003±0.313,2.035±0.665,P<0.05),空白对照组(仅加入脂质体)和阴性对照组(RNAi错义序列)间无显著差异(2.035±0.665,1.9001±0.817,P>0.05).MTT显示RNA干扰后细胞增殖明显受到抑制.结论:通过特异性RNA干扰NS基因后,结肠癌SW480细胞增殖受到抑制. 展开更多
关键词 nucleostemin RNA干扰 SW480结肠癌细 胞系 增殖
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干细胞及肿瘤细胞中nucleostemin基因的研究进展 被引量：2
12
作者 韩崇旭 许文荣 孙艳 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期514-517,共4页
Nucleostemin(NS)基因在干细胞中高表达,在干细胞分化时迅速减少,参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控,维持干细胞扩增并抑制其向成熟细胞分化,从而阻止细胞凋亡。NS基因在肿瘤细胞干细胞特性维持中也起重要作用。NS蛋白以依赖于GTP的形式... Nucleostemin(NS)基因在干细胞中高表达,在干细胞分化时迅速减少,参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控,维持干细胞扩增并抑制其向成熟细胞分化,从而阻止细胞凋亡。NS基因在肿瘤细胞干细胞特性维持中也起重要作用。NS蛋白以依赖于GTP的形式穿梭于核仁和核质之间,参与核糖体特别是前核糖体rRNA的装配过程。NS基因与肿瘤发生关系密切,或可作为靶向治疗的候选基因。 展开更多
关键词 nucleostemin基因 干细胞 肿瘤
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Nucleostemin特异性RNA干扰联合化疗药物对人食管癌细胞株Eca-109的作用 被引量：1
13
作者 胡静 冯玉宽 +1 位作者 郑学芝 蔡子微 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期730-733,共4页
目的:探讨Nucleostemin(NS)特异性RNA干扰(RNAi)联合4种化疗药物对人食管癌细胞株Eca-109生长的影响。方法:NS特异性RNAi表达载体转染Eca-109细胞;实验分为沉默组、正常组、单纯用药组和联合用药组,提取各组肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR方法... 目的:探讨Nucleostemin(NS)特异性RNA干扰(RNAi)联合4种化疗药物对人食管癌细胞株Eca-109生长的影响。方法:NS特异性RNAi表达载体转染Eca-109细胞;实验分为沉默组、正常组、单纯用药组和联合用药组,提取各组肿瘤细胞总RNA,用RT-PCR方法检测NS的表达;利用镜下细胞形态观察和MTT法检测各组细胞的增殖情况。结果:联合用药各组NS基因表达量低于单纯用药各组,细胞增殖速率明显低于单纯用药各组,而细胞增殖抑制率明显高于单纯用药各组。结论:4种化疗药物与NS特异性RNAi联合对Eca-109细胞具有一定的协同抑制作用。 展开更多
关键词 nucleostemin RNA干扰 肿瘤细胞 联合 细胞周期
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荧光定量PCR法检测多种肿瘤组织和细胞株中nucleostemin基因的表达 被引量：1
14
作者 王胜 袁志诚 +1 位作者 马珪 许文荣 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期447-448,452,共3页
目的建立实时荧光定量PCR技术检测nucleostemin(NS)基因在多种肿瘤组织及细胞株中的表达。方法构建NS基因和内参基因β-actin标准品,用RT-PCR和实时荧光定量PCR检测NS基因在胃癌、结肠癌和直肠癌组织以及胃癌细胞株(BGC-823)、肺腺癌细... 目的建立实时荧光定量PCR技术检测nucleostemin(NS)基因在多种肿瘤组织及细胞株中的表达。方法构建NS基因和内参基因β-actin标准品,用RT-PCR和实时荧光定量PCR检测NS基因在胃癌、结肠癌和直肠癌组织以及胃癌细胞株(BGC-823)、肺腺癌细胞株(A549)、肺巨细胞癌细胞株(PLA801-D95)、结肠癌细胞株(SW620)、人白血病细胞株(K562)、前列腺癌细胞株(PC3)的表达。结果 NS基因在胃癌、结肠癌以及直肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P<0.05),且在BGC-823的表达显著高于其他细胞株(P<0.05)。结论 NS基因过表达可能在多种肿瘤,尤其在胃肠道肿瘤的发生、发展过程中起重要作用。 展开更多
关键词 nucleostemin 实时荧光定量PCR 胃癌 结肠癌 直肠癌
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Nucleostemin研究进展 被引量：3
15
作者 刘冉录 徐勇 《天津医科大学学报》 2007年第1期132-134,138,共4页
Nucleostemin是一种新的p53结合蛋白，定位于干细胞和肿瘤细胞的细胞核，能维持干细胞的扩增并抑制其向成熟细胞分化，并参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控。随着研究的深入，Nucleostemin在调节干细胞和肿瘤细胞的增殖和分化中的作用引... Nucleostemin是一种新的p53结合蛋白，定位于干细胞和肿瘤细胞的细胞核，能维持干细胞的扩增并抑制其向成熟细胞分化，并参与干细胞和肿瘤细胞的增殖调控。随着研究的深入，Nucleostemin在调节干细胞和肿瘤细胞的增殖和分化中的作用引起了愈来愈多的关注。 展开更多
关键词 nucleostemin P53 GTP 核蛋白
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食管癌Eca109细胞中Nucleostemin基因表达的实验研究 被引量：2
16
作者 郑学芝 金秀东 +6 位作者 张绪东 刘桂莲 孙卫 念红 李丽 徐秋玲 蔡子微 《牡丹江医学院学报》 2011年第1期3-5,共3页
目的:研究Nucleostemin(NS)基因在食管癌Eca109细胞中的表达及凋亡作用。方法:提取各组食管癌细胞总RNA,用半定量RT-PCR方法检测NS基因的表达情况;用CCK-8法检测3组细胞增殖抑制率;TUNEL试剂盒法检测细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,... 目的:研究Nucleostemin(NS)基因在食管癌Eca109细胞中的表达及凋亡作用。方法:提取各组食管癌细胞总RNA,用半定量RT-PCR方法检测NS基因的表达情况;用CCK-8法检测3组细胞增殖抑制率;TUNEL试剂盒法检测细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,实验组细胞NS基因表达量下降,细胞增殖抑制率>65%,细胞凋亡增加(凋亡指数为39.47%)差别具有统计学意义。结论:NS基因特异性RNA干扰使食管癌Eca109细胞中NS基因表达量下降,出现细胞增殖抑制,细胞凋亡增加。 展开更多
关键词 nucleostemin 食管癌 RNA干扰 凋亡
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Nucleostemin特异性RNA干扰对肿瘤细胞增殖能力的影响 被引量：2
17
作者 蔡子微 刘思金 +1 位作者 孙丽秋 劳为德 《牡丹江医学院学报》 2004年第3期1-6,共6页
目的 :检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达 ,研究NS特异性RNA干扰对Hela细胞体内外增殖的影响。方法 :提取 6种肿瘤细胞总RNA ,用RT -PCR和Northernblot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染Hela细胞 ,观察转染的Hela细胞 (... 目的 :检测肿瘤细胞Nucleostemin(NS)的表达 ,研究NS特异性RNA干扰对Hela细胞体内外增殖的影响。方法 :提取 6种肿瘤细胞总RNA ,用RT -PCR和Northernblot方法检测NS的表达。用NS特异性siRNA表达载体转染Hela细胞 ,观察转染的Hela细胞 (简称NS -SiRNA -Hela细胞 )体内外增殖的变化。结果 :6种肿瘤细胞中NS显高表达。体外培养的NS -siRNA -Hela细胞中NS表达显著降低 ,G0 /G1期细胞百分率显著升高。体内致瘤实验显示 ,NS -siRNA -Hela细胞在裸鼠体内增殖显著降低。结论 :NS在肿瘤细胞中高表达具有普遍性。NS特异性RNA干扰使Hela细胞进入S期受阻 。 展开更多
关键词 nucleostemin 特异性RNA干扰 肿瘤细胞 细胞增殖 检测 HELA细胞
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多种肿瘤组织中Nucleostemin基因表达的检测及意义 被引量：1
18
作者 郑学芝 孙卫 +1 位作者 徐秋玲 蔡子微 《牡丹江医学院学报》 2008年第2期3-5,共3页
目的:检测Nucleostemin(NS)基因在多种肿瘤组织中的表达情况。方法:收集包括乳腺癌、卵巢癌、食管癌、胃癌等十几种肿瘤标本,试剂盒法提取组织总RNA,以GAPDH作为内参基因,用半定量RT-PCR方法检测NS基因在肿瘤组织中的表达情况。结果:所... 目的:检测Nucleostemin(NS)基因在多种肿瘤组织中的表达情况。方法:收集包括乳腺癌、卵巢癌、食管癌、胃癌等十几种肿瘤标本,试剂盒法提取组织总RNA,以GAPDH作为内参基因,用半定量RT-PCR方法检测NS基因在肿瘤组织中的表达情况。结果:所有肿瘤组织中皆有NS基因表达。结论:NS基因表达在肿瘤组织中普遍表达,NS基因可能参与了肿瘤细胞的增殖调控。 展开更多
关键词 nucleostemin 肿瘤 基因表达 肿瘤增殖
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Nucleostemin特异性RNA干扰联合化疗药物对肿瘤细胞增殖抑制作用的体外实验研究 被引量：1
19
作者 胡静 郑学芝 +1 位作者 袁晓环 蔡子微 《牡丹江医学院学报》 2007年第5期25-28,共4页
目的:研究Nucleostemin特异性RNA干扰(RNAi)联合4种化疗药物对人食管癌细胞株Eca-109体外增殖的影响。方法:1.用NS特异性RNAi表达载体转染Eca-109细胞。2.实验分组:分为silencer组(S组)、normal组(N组)、单纯用药组和联合用药组。S组为... 目的:研究Nucleostemin特异性RNA干扰(RNAi)联合4种化疗药物对人食管癌细胞株Eca-109体外增殖的影响。方法:1.用NS特异性RNAi表达载体转染Eca-109细胞。2.实验分组:分为silencer组(S组)、normal组(N组)、单纯用药组和联合用药组。S组为转染NS特异性siRNA表达载体的Eca-109细胞;N组为正常Eca-109细胞;单纯用药组为单纯应用4种化疗药物作用于Eca-109细胞;联合用药组为转染NS特异性RNAi表达载体分别联合4种化疗药物作用于Eca-109细胞。3.利用细胞计数法、镜下细胞形态学观察和MTT法检测各组细胞的增殖情况。结果:联合用药各组增殖速率明显低于单纯用药各组,而增殖抑制率明显高于单纯用药各组,差异具有显著性(p<0.05)。结论:4种化疗药物与NS特异性RNAi联合对Eca-109细胞都具有一定的协同抑制作用。 展开更多
关键词 nucleostemin 肿瘤细胞 细胞培养 化疗药物
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Nucleostemin基因在乳腺肿瘤组织中的表达及意义
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作者 郑学芝 念红 +3 位作者 胡静 张承玉 徐秋玲 蔡子微 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第18期2651-2654,共4页
目的检测nucleostemin(NS)基因在人乳腺肿瘤组织中的表达情况,探讨NS基因与乳腺肿瘤恶性程度的关系。方法提取组织总RNA,用半定量RT-PCR方法检测NS基因在乳腺肿瘤中的表达情况,分析NS基因与乳腺肿瘤病理分级、组织学类型和转移的关系。... 目的检测nucleostemin(NS)基因在人乳腺肿瘤组织中的表达情况,探讨NS基因与乳腺肿瘤恶性程度的关系。方法提取组织总RNA,用半定量RT-PCR方法检测NS基因在乳腺肿瘤中的表达情况,分析NS基因与乳腺肿瘤病理分级、组织学类型和转移的关系。结果乳腺肿瘤组织中NS基因有不同程的表达,病理分级越高,NS基因的表达量越高(F=41.776,P=0.000),正常乳腺组织中没有NS基因的表达;转移组NS基因表达量高于无转移组(t=6.033,P=0.000),NS基因的表达量高低与乳腺肿瘤组织学类型无关(F=2.163,P=0.48)。结论乳腺肿瘤组织中有NS基因表达,NS基因的表达量高低与乳腺肿瘤病理分级和转移有关,与组织学类型无关。 展开更多
关键词 nucleostemin 乳腺肿瘤 基因表达 恶性程度
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