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意大利OLMA自动钣金生产线国产化改造
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作者 赵俊涛 陈艳 《设备管理与维修》 2005年第S1期243-245,共3页
意大利 OLMA 公司自动钣金生产线,经过长时间使用后,各方面的毛病随之而来。设备废品率一度曾达到30%,设备定位经常被挤坏,铜瓦、丝杠、齿轮易磨损等等,严重制约了生产的正常进行。为了能更好地保证生产,借鉴其它设备的优点,对其进行优... 意大利 OLMA 公司自动钣金生产线,经过长时间使用后,各方面的毛病随之而来。设备废品率一度曾达到30%,设备定位经常被挤坏,铜瓦、丝杠、齿轮易磨损等等,严重制约了生产的正常进行。为了能更好地保证生产,借鉴其它设备的优点,对其进行优化改造。对设备改造的同时,充分了解到该设备机械、液压系统、润滑系统、位移检测系统以及机械的磨损情况以及液压单向阀、磁伴开关的工作原理及使用方法。 展开更多
关键词 折弯机 液控 废品率 olma 铜瓦 钣金生产线 单向阀 止回阀 送料机构 保压回路 意大利 南欧
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Deletion analysis of oligomycin PKS genes (olmA) in Streptomyces avermitilis 被引量:6
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作者 ZHANGXiaolin CHENZhi ZHAOJinlei SONGYuan WENYing LIJilun 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2004年第4期350-354,共5页
Gene deletion vector pXL05(pKC1139∷△olmA1 +△olmA4) was used to disrupt oligomycin PKS en-coding genes (olmA) in Streptomyces avermitilis CZ8-73, the producer of anthelmintic avermectins B and the cell growth inhibi... Gene deletion vector pXL05(pKC1139∷△olmA1 +△olmA4) was used to disrupt oligomycin PKS en-coding genes (olmA) in Streptomyces avermitilis CZ8-73, the producer of anthelmintic avermectins B and the cell growth inhibitor oligomycin. olmA gene cluster in the chromosome was displaced by deletion allele on the plasmid via double crossover. Four of disruptants were confirmed by Southern blotting. Shaking flask experiments and HPLC analyses showed that the four mutants no longer produced the toxic oligomycin, but only made four components of avermectins B, which were avermectin B1a, B1b, B2a, B2b. The yields of avermectins B in these mutants were separately equal to those in CZ8-73. This revealed that olmA genes deletion did not affect the biosynthesis of avermectins. The deletion mu-tants were proved to be genetically stable, and thus might be promising strains in industrial production of avermectins B. 展开更多
关键词 寡霉素 PKS基因 链球菌 杀虫剂 农作物保护
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通过番茄红素环化酶的优化构建β-胡萝卜素高产菌株 被引量:4
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作者 金应福 韩莉 +3 位作者 张莎莎 李世忠 刘伟丰 陶勇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1814-1826,共13页
目标产物的合成途径往往需要对关键酶的来源、表达水平等因素进行系统性优化才能实现代谢通量的最大化。β-胡萝卜素是一类具有重要应用价值的萜类化合物,其中番茄红素环化酶(Lycopene cyclase,CrtY)是β-胡萝卜素合成途径中的关键酶,... 目标产物的合成途径往往需要对关键酶的来源、表达水平等因素进行系统性优化才能实现代谢通量的最大化。β-胡萝卜素是一类具有重要应用价值的萜类化合物,其中番茄红素环化酶(Lycopene cyclase,CrtY)是β-胡萝卜素合成途径中的关键酶,能够催化FAD依赖的环化反应将番茄红素转化合成β-胡萝卜素。本研究通过对CrtY的系统优化提高β-胡萝卜素的合成水平,并确定CrtY的表达对代谢通路的影响。在大肠杆菌中以番茄红素合成模块为基础,通过引入番茄红素环化酶基因crt Y构建了β-胡萝卜素合成模块。并进一步利用寡聚接头介导的DNA组装方法 (Oligo-linker mediated assembly method,OLMA)引入一系列不同强度的人工设计的核糖体结合位点(Ribosome-binding site,RBS),对CrtY的表达强度、基因来源等因素进行高通量的优化。通过OLMA文库构建和平板筛选,获得了5株高产β-胡萝卜素的工程菌株。在摇瓶中,5株工程菌株的β-胡萝卜素产量可达15.79-18.90 mg/g DCW(Dry cell weight),比优化前提高了65%。进一步选取了其中的CP12菌株,在5 L发酵罐上,利用高密度培养技术验证工程菌株合成β-胡萝卜素的能力。最终β-胡萝卜素产量可达1.9 g/L。RBS强度分析及代谢中间体分析表明,适当地降低CrtY表达强度能够有利于β-胡萝卜素模块相关基因之间协同发挥作用。以上结果为β-胡萝卜素合成途径的优化规律提供了理论指导。 展开更多
关键词 番茄红素环化酶(CrtY) 大肠杆菌 β-胡萝卜紊 寡聚接头介导的DNA组装(olma) 代谢工程
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