半枝莲多糖通过Hippo通路介导人卵巢癌OVCAR3细胞铁死亡的作用机制

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作者 许静 付小玲 袁爽 《中医研究》 2024年第8期79-84,共6页

目的:研究半枝莲多糖对人卵巢癌OVCAR3细胞铁死亡的调控作用及其作用机制。方法:采用噻唑蓝法检测不同质量分数(0、10、20、40、80 mg/L)半枝莲多糖作用24、48和72 h对OVCAR3细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术和蛋白质印迹法检测其对... 目的:研究半枝莲多糖对人卵巢癌OVCAR3细胞铁死亡的调控作用及其作用机制。方法:采用噻唑蓝法检测不同质量分数(0、10、20、40、80 mg/L)半枝莲多糖作用24、48和72 h对OVCAR3细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术和蛋白质印迹法检测其对细胞凋亡的影响,实时荧光定量法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,最后评估10μmol/L维替泊芬[Yes相关蛋白(yes associated protein,YAP)抑制剂]和80 mg/L半枝莲多糖两者单用或联用对铁死亡相关分子长链脂酰辅酶A合成酶4(long-chain acyl-CoA synthetase 4,ACSL4)和转铁蛋白受体(transferrin receptor,TFRC)、Hippo通路中磷酸化YAP(phosphorylation YAP,p-YAP)和YAP蛋白表达的影响。结果:半枝莲多糖可提高OVCAR3细胞增殖抑制率和凋亡率(P<0.05);可上调Bax、下调Bcl-2的蛋白表达水平(P<0.05);可上调OVCAR3细胞中E-cadherin mRNA的表达,下调N-cadherin和Vimentin mRNA的表达(P<0.05);可抑制ACSL4和TFRC mRNA的表达(P<0.05),降低p-YAP/YAP比值(P<0.05)。结论:半枝莲多糖可抑制OVCAR3细胞的增殖和上皮细胞-间充质转化,促进细胞凋亡和铁死亡,这可能与半枝莲多糖对Hippo通路的抑制有关。 展开更多

关键词 半枝莲多糖 卵巢癌 ovcar3细胞 铁死亡 Hippo通路

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HDAC2 siRNA转染对卵巢癌ovcar3细胞中p53和乙酰化p53k320表达的影响 被引量：3

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作者 张敏 赵书君 +5 位作者 朱海 胡晓静 余亚南 韩会会 曹蒙 李红雨 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第3期372-375,共4页

目的:探讨靶向沉默组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)对人卵巢癌ovcar3细胞中p53乙酰化位点k320表达的影响。方法:将ovcar3细胞随机分为空白组、对照组和实验组3组,实验组以HDAC2 siRNA转染细胞,对照组转染对照siRNA,空白组不处理,分别采用实时... 目的:探讨靶向沉默组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)对人卵巢癌ovcar3细胞中p53乙酰化位点k320表达的影响。方法:将ovcar3细胞随机分为空白组、对照组和实验组3组,实验组以HDAC2 siRNA转染细胞,对照组转染对照siRNA,空白组不处理,分别采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测3组细胞中HDAC2 mRNA和蛋白的表达,Western blot检测3组细胞中p53、乙酰化p53k320蛋白的表达。结果:与空白组及对照组相比,实验组HDAC2 mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),p53蛋白和乙酰化p53k320蛋白表达均升高(P<0.05)。结论:下调HDAC2的表达可使p53和乙酰化p53k320表达增加。 展开更多

关键词 组蛋白去乙酰化酶2 P53 乙酰化p53k320 ovcar3细胞株 卵巢肿瘤

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PELP1对人卵巢癌OVCAR3细胞株侵袭能力及MMP-2、MMP-9表达的影响 被引量：4

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作者 石福英 王文霞 《山东医药》 CAS 北大核心 2015年第27期32-33,共2页

目的观察脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)对人卵巢癌OVCAR3细胞株侵袭能力及MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养OVCAR3细胞,分为对照组与实验组。对照组转染Flag空载,实验组转染Flag-PELP1。转染24 h后检测转染情况... 目的观察脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(PELP1)对人卵巢癌OVCAR3细胞株侵袭能力及MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达的影响。方法体外培养OVCAR3细胞,分为对照组与实验组。对照组转染Flag空载,实验组转染Flag-PELP1。转染24 h后检测转染情况;采用real-time PCR法检测OVCAR3细胞中的MMP-2、MMP-9mRNA,Western blotting法检测其蛋白;Transwell小室侵袭实验检测OVCAR3细胞侵袭能力。结果 OVCAR3细胞中瞬时转染Flag-PELP1,PELP1蛋白表达明显增加。实验组MMP-2、MMP-9 mRNA表达量分别为2.804 8、2.466 6,对照组分别为1、1;实验组MMP-2、MMP-9蛋白表达量分别为0.599 2、0.654 6,对照组分别为0.260 7、0.121 6;实验组与对照组MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达量相比,P均<0.05。实验组与对照组自Transwell小室上层移至下层的细胞数分别为774、1 203,两组相比,P<0.05。结论 PELP1可增强人卵巢癌OVCAR3细胞株的侵袭能力,并上调MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白的表达。 展开更多

关键词 卵巢癌 ovcar3细胞株 脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1 基质金属蛋白酶

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姜黄素类似物L50H8对卵巢癌OVCAR3细胞增殖、侵袭与凋亡的影响及其机制研究

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作者 邱扬 陈龙飞 +1 位作者 王晓玉 林绍强 《新中医》 CAS 2022年第1期134-140,共7页

目的:研究姜黄素类似物L50H8对卵巢癌OVCAR3细胞增殖、侵袭与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:MTT法检测L50H8对细胞增殖的影响;Annexin V/PI双染色流式细胞法检测L50H8对细胞凋亡的影响;Transwell法检测L50H8对细胞侵袭力的影响;Wes... 目的:研究姜黄素类似物L50H8对卵巢癌OVCAR3细胞增殖、侵袭与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:MTT法检测L50H8对细胞增殖的影响;Annexin V/PI双染色流式细胞法检测L50H8对细胞凋亡的影响;Transwell法检测L50H8对细胞侵袭力的影响;Western blot法探讨L50H8影响细胞侵袭的机制:检测其对细胞侵袭相关因子细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响;探讨其诱导细胞凋亡的机制:检测其对内质网应激(ERS)启动因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及前凋亡因子C/EBP-同源蛋白(CHOP)表达的影响。结果:L50H8能显著抑制OVCAR3细胞增殖,24 h的IC_(50)为(3.08±0.08)μmol/L。L50H8能诱导OVCAR3细胞凋亡,其凋亡诱导效应强于姜黄素。Western blot法发现L50H8能下调CD147、MMP2、MMP9及VEGF的表达,上调GRP78及CHOP的表达。结论:L50H8能显著抑制OVCAR3细胞增殖,通过下调CD147、MMP2、MMP9及VEGF降低细胞侵袭力,引发ERS诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 姜黄素类似物 L50H8 卵巢癌 ovcar3细胞 细胞侵袭 细胞凋亡 内质网应激

原文传递

临床常用中药制剂对OVCAR3细胞的药效学比较

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作者 隗雅姿 袁庆东 +3 位作者 肖向茜 杨怡姝 李劲涛 盛望 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期244-249,共6页

目的比较临床常用中药制剂对OVCAR3细胞OVCAR3的药效学。方法以采用实时无标记细胞分析(RTCA)检测榄香烯注射液、参芪扶正注射液、艾迪注射液、复方苦参注射液、消癌平注射液、康艾注射液、康莱特注射液对OVCAR3细胞增殖、迁移、侵袭的... 目的比较临床常用中药制剂对OVCAR3细胞OVCAR3的药效学。方法以采用实时无标记细胞分析(RTCA)检测榄香烯注射液、参芪扶正注射液、艾迪注射液、复方苦参注射液、消癌平注射液、康艾注射液、康莱特注射液对OVCAR3细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用,JC-1检测上述药物对肿瘤细胞线粒体膜电位的影响,CCK8法检测它们对正常细胞系MRC-5的毒性作用。结果榄香烯注射液、消癌平注射液、复方苦参注射液、艾迪注射液抑制OVCAR3细胞增殖的IC_(50)值分别为(44.98±0.13)μg/mL、(258.78±6.53)mg/mL、(121.73±1.23)mg/mL、(51.73±0.51)mg/mL,中、高剂量榄香烯注射液有明显抑制OVCAR3细胞迁移的作用;除康莱特注射液外,其他药物都有一定程度抑制OVCAR3细胞侵袭的作用。榄香烯注射液、消癌平注射液在IC_(50)剂量下作用24 h后,可检测到线粒体膜电位的改变。榄香烯注射液、艾迪注射液IC_(50(MRC⁃5))/IC_(50(OVCAR3))均大于1。结论以OVCAR3细胞为对象时,榄香烯注射液抗肿瘤作用最好,其次是艾迪注射液。 展开更多

关键词 中药制剂 卵巢癌细胞ovcar3 抗肿瘤作用 实时无标记细胞分析(RTCA)

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顺铂处理卵巢癌细胞系OVCAR3引起Survivin表达差异的研究 被引量：5

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作者 黄春芳 刘东远 +2 位作者 沈铿 徐卫华 詹永乐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期629-633,共5页

的 探讨顺铂(DDP)处理卵巢癌细胞系时Sur-vivin表达是否有变化,进而探讨Survivin表达与肿瘤细胞耐药之间的关系及其在肿瘤细胞获得性耐药及细胞凋亡耐受所起的重要作用。方法 以卵巢癌细胞系OVCAR3为材料,用MTT比色法检测细胞活性,流式... 的 探讨顺铂(DDP)处理卵巢癌细胞系时Sur-vivin表达是否有变化,进而探讨Survivin表达与肿瘤细胞耐药之间的关系及其在肿瘤细胞获得性耐药及细胞凋亡耐受所起的重要作用。方法 以卵巢癌细胞系OVCAR3为材料,用MTT比色法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。RT-PCR检测Survivin mRNA表达差异,Western blot检测Survivin蛋白表达变化。结果 顺铂抑制卵巢癌细胞生长,具有时间和浓度依赖效应,即随时间延长和浓度增加,细胞生长抑制越强,细胞凋亡率也有同样的趋势,最高达31.6％。1mg·L^(-1)DDP处理卵巢癌细胞,Survivin mRNA及蛋白表达随作用时间的增长,分别在8 h和12 h达最高,随后又降低。结论 抗凋亡蛋白Survivin在卵巢癌细胞系中呈高表达,顺铂处理卵巢癌细胞,Survivin mRNA表达随作用时间延长而增加,这可能是卵巢癌细胞对化疗药物产生耐药性的重要因素之一。 展开更多

关键词 顺铂 ovcar3细胞 凋亡 SURVIVIN

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卵巢癌OVCAR3细胞中CD133^＋细胞群的分离及其特性 被引量：2

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作者 吴秋华 王沂峰 +5 位作者 郭蓉姣 林琼燕 陈高文 林敏 周兵 吕晓刚 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期546-548,共3页

卵巢癌的病死率居妇科恶性肿瘤之首，5年生存率不足30％，其发生、发展机制尚不清楚。肿瘤干细胞理论认为，肿瘤中存在一小群具有自我更新和多向分化潜能的细胞，即肿瘤干细胞，可能是肿瘤转移和复发的根源。

关键词 ovcar3细胞 细胞群 卵巢癌 妇科恶性肿瘤 分离 多向分化潜能 5年生存率 干细胞理论

原文传递

自噬在拓扑替康诱导卵巢癌细胞OVCAR3死亡中的作用 被引量：4

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作者 沈扬 梁立治 吴强 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2011年第11期974-978,共5页

目的研究自噬在拓扑替康诱导卵巢癌OVCAR3细胞死亡中的作用。方法采用不同浓度的拓扑替康处理卵巢癌OVCAR3细胞,MTT法测定拓扑替康对OVCAR3细胞增殖的抑制作用,单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察给药后OVCAR3细胞的自噬征象,LDH漏出率法检... 目的研究自噬在拓扑替康诱导卵巢癌OVCAR3细胞死亡中的作用。方法采用不同浓度的拓扑替康处理卵巢癌OVCAR3细胞,MTT法测定拓扑替康对OVCAR3细胞增殖的抑制作用,单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色观察给药后OVCAR3细胞的自噬征象,LDH漏出率法检测拓扑替康联合自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对拓扑替康诱导OVCAR3细胞毒性的影响,MTT法测定拓扑替康联合自噬诱导剂雷帕霉素对OVCAR3细胞增殖抑制的影响,金氏公式分析联合作用效果。结果拓扑替康对OVCAR3细胞的生长有显著的抑制作用,呈明显的剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为0.057μg/ml。MDC荧光染色显示拓扑替康可诱导OVCAR3细胞产生自噬囊泡,3-MA可以抑制拓扑替康诱导的自噬产生,雷帕霉素可以增强拓扑替康诱导的细胞自噬。细胞培养24h后,拓扑替康组LDH漏出率为22.5%,3-MA+拓扑替康组为16.8%;48h后拓扑替康组LDH漏出率为47.4%,3-MA+拓扑替康组为32.6%。雷帕霉素联合各浓度拓扑替康用药组的抑制率较拓扑替康单药组增加,按金氏公式计算,除最高浓度组(拓扑替康0.2μg/ml)外,其他各组q值均>1.15。结论拓扑替康对OVCAR3细胞有显著抑制作用并能够诱导其发生自噬,诱导自噬性细胞死亡可以提高拓扑替康对OVCAR3细胞的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 自噬 卵巢肿瘤 卵巢癌ovcar3细胞株 拓扑替康 化学治疗

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促性腺激素释放激素对人卵巢癌细胞系OVCAR3体外生长调控作用的研究 被引量：1

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作者 陈红 巫巧雄 陈文萍 《现代医院》 2010年第11期30-31,共2页

目的观察GnRH受体在人卵巢癌细胞系OVCAR3中的表达,并研究促性腺激素释放激素激动剂(Triptorelin)对卵巢癌细胞体外生长调控作用。方法采用免疫组化SP法检测卵巢癌细胞系OVCAR3 GnRH I受体的表达;分别应用不同浓度Triptorelin作用于细胞... 目的观察GnRH受体在人卵巢癌细胞系OVCAR3中的表达,并研究促性腺激素释放激素激动剂(Triptorelin)对卵巢癌细胞体外生长调控作用。方法采用免疫组化SP法检测卵巢癌细胞系OVCAR3 GnRH I受体的表达;分别应用不同浓度Triptorelin作用于细胞,MTT法检测细胞生长抑制率。结果人卵巢癌细胞系OVCAR3表达GnRH I受体,Triptorelin可明显抑制GnRH I受体阳性的OVCAR3细胞生长。结论促性腺激素释放激素激动剂Triptorelin通过与人卵巢癌OVCAR3细胞株GnRH I受体结合,发挥抗增殖的作用。 展开更多

关键词 促性腺激素释放激素激动剂 ovcar3细胞株 GNRH I受体

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卵巢癌细胞系OVCAR3过表达SND1稳定株的构建 被引量：1

10

作者 杨扬 白虹 辛灵彪 《天津医科大学学报》 2018年第1期7-9,13,共4页

目的:通过慢病毒载体构建过表达SND1的OVCAR3稳定的表达株。方法:重组的pLVX-FLAG-SND1表达载体与包装质粒共同转染293T细胞,获得携带FLAG-SND1的重组慢病毒。病毒感染的OVCAR3细胞经Hygromycin B筛选出稳定表达株。用Western blot方法... 目的:通过慢病毒载体构建过表达SND1的OVCAR3稳定的表达株。方法:重组的pLVX-FLAG-SND1表达载体与包装质粒共同转染293T细胞,获得携带FLAG-SND1的重组慢病毒。病毒感染的OVCAR3细胞经Hygromycin B筛选出稳定表达株。用Western blot方法检测SND1蛋白表达。结果:用病毒感染OVCAR3细胞,药物筛选后获得的过表达稳定株中SND1蛋白表达水平明显增高。结论:利用慢病毒表达载体pLVX-FLAG-SND1成功感染并筛选出稳定表达SND1的OVCAR3细胞株,为进一步研究SND1在卵巢癌中的作用提供了体外细胞系模型。 展开更多

关键词 SND1 慢病毒载体 ovcar3细胞 卵巢癌

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Survivin shRNA增强人卵巢癌耐药细胞OVCAR3对泰素敏感性的研究 被引量：11

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作者 颜笑健 梁立治 +2 位作者 曾宗渊 石智 符立梧 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第4期398-403,共6页

背景与目的:耐药是目前恶性肿瘤治疗急需解决的难题。最近研究显示,卵巢癌组织及细胞中均有Survivin高表达,可能与其抑癌耐药有关。本研究探讨Survivin的短发夹状RNA(shorthairpinRNA,shRNA)对人卵巢癌耐药细胞OVCAR3Survivin基因表达... 背景与目的:耐药是目前恶性肿瘤治疗急需解决的难题。最近研究显示,卵巢癌组织及细胞中均有Survivin高表达,可能与其抑癌耐药有关。本研究探讨Survivin的短发夹状RNA(shorthairpinRNA,shRNA)对人卵巢癌耐药细胞OVCAR3Survivin基因表达、凋亡及其对泰素、顺铂敏感性的影响。方法:脂质体介导SurvivinshRNA转染OVCAR3。转染空载体或脂质体的细胞及未转染细胞作为对照。逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测SurvivinmRNA的表达,流式细胞仪分析Survivin蛋白的表达及细胞凋亡率。四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)测定SurvivinshRNA转染后OVCAR3细胞对泰素的敏感性。结果:与未转染组、空脂质体组、空载体组相比较,SurvivinshRNA处理24h后细胞SurvivinmRNA及蛋白表达水平均明显下调。SurvivinshRNA转染12、24、36、48h后的细胞凋亡率分别为20.7%、31.9%、39.0%、46.7%,呈时间依赖性。MTT结果显示,泰素对未转染组、空脂质体组、空载体组、转染组OVCAR3细胞的IC50分别为(0.305±0.032)μmol/L、(0.157±0.031)μmol/L、(0.175±0.010)μmol/L、(0.019±0.001)μmol/L;顺铂对4组OVCAR3细胞的IC50依次为(9.410±0.796)μmol/L、(6.675±1.739)μmol/L、(6.930±1.273)μmol/L、(7.862±0.081)μmol/L,SurvivinshRNA使OVCAR3对泰素的敏感性提高16倍(P<0.01),但是对顺铂的影响不大(P>0.05)。结论:靶向Survivin的序列特异性shRNA可有效抑制OVCAR3细胞中Survivin基因的表达,同时可以增强OVCAR3对泰素的敏感性,但不增加其对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 耐药细胞ovcar3 SURVIVIN RNA干扰 短发夹RNA 凋亡 泰素 抑瘤作用

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GnRH激动剂曲普瑞林对卵巢癌细胞OVCAR3生长的抑制作用及对GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达的影响 被引量：4

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作者 李敏 张艳赏 +1 位作者 张明明 闫萍 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第27期3119-3122,共4页

目的观察促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂曲普瑞林对卵巢癌细胞生长的抑制作用并探讨其对GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达的影响。方法选用不同浓度曲普瑞林刺激卵巢癌细胞OVCAR3后,采用MTT方法检测其对细胞的增殖活性的影响,并运用RT-PCR方... 目的观察促性腺激素释放激素(GnRH)激动剂曲普瑞林对卵巢癌细胞生长的抑制作用并探讨其对GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达的影响。方法选用不同浓度曲普瑞林刺激卵巢癌细胞OVCAR3后,采用MTT方法检测其对细胞的增殖活性的影响,并运用RT-PCR方法,检测曲普瑞林对卵巢癌细胞OVCAR3 GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达的影响。结果 10-7mol/L浓度的曲普瑞林作用细胞24 h后,其增殖抑制率为(41.07±0.43)%,随着浓度的增加(10-6 mol/L,10-5 mol/L,10-4 mol/L,10-3 mol/L,10-2 mol/L),抑制率逐渐增加,分别为(50.56±0.76)%、(69.86±1.05)%、(65.43±0.87)%、(62.09±1.24)%、(58.69±0.87)%;以10-5 mol/L浓度的曲普瑞林抑制率最高,有统计学意义(P<0.05);以10-5mol/L浓度的曲普瑞林作用于细胞24 h、48 h、72 h后,增殖抑制率分别是(69.86±1.08)%、(58.69±0.98)%、(48.56±1.02)%,最终是作用时间在24 h时抑制率最高,有统计学意义(P<0.05)。GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体的表达:在曲普瑞林10-5mol/L浓度作用于细胞24 h后最高。结论曲普瑞林对卵巢癌细胞OVCAR3生长有抑制作用,GnRHⅠ受体、GnRHⅡ受体表达变化与GnRH激动剂的作用机制有关。 展开更多

关键词 人卵巢癌细胞ovcar3 曲普瑞林 促性腺激素释放激素 促性腺激素释放激素Ⅰ受体 促性腺激素释放激素Ⅱ受体 聚合酶链反应

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CXCR4抑制剂AMD3100对人卵巢癌OVCAR3细胞凋亡的影响 被引量：2

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作者 龙芳 文芳 +5 位作者 聂蕾 张其柱 吴章颖 訾聃 张家龙 李谊 《重庆医学》 CAS 2018年第28期3629-3634,共6页

目的探讨CXCR4抑制剂AMD3100对卵巢癌细胞株OVCAR3凋亡水平及其相关蛋白表达水平的影响。方法采用免疫组织化学法检测人体卵巢癌恶性组标本中趋化因子受体4(CXCR4)、B淋巴细胞瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bax、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)... 目的探讨CXCR4抑制剂AMD3100对卵巢癌细胞株OVCAR3凋亡水平及其相关蛋白表达水平的影响。方法采用免疫组织化学法检测人体卵巢癌恶性组标本中趋化因子受体4(CXCR4)、B淋巴细胞瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、Bax、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的表达,分析其与临床病理特征的关系。不同浓度AMD3100处理OVCAR3细胞后,利用流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western blot检测CXCR4、Bcl-2、Bax及caspase-3的表达情况。结果人体卵巢癌组织(恶性组)标本中CXCR4、Bcl-2较良性对照组表达升高,Bax较良性对照组表达降低(均P<0.05),caspase-3在两组中表达差异无统计学意义(P>0.05),恶性组中CXCR4与Bcl-2的表达呈正相关,与caspase-3呈负相关(r=0.480,-0.475,均P<0.05),Bax、Bcl-2两者表达无相关性(P>0.05);不同浓度AMD3100作用OVCAR3细胞后,Bax、caspase-3的表达增加,CXCR4及Bcl-2的表达降低,细胞的凋亡率增加,与空白对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AMD3100抑制卵巢癌细胞株OVCAR3中CXCR4的表达,并能促进卵巢癌细胞的凋亡,其机制可能是通过阻断CXCR4后抑制凋亡相关蛋白Bcl-2的表达,同时促进Bax、caspase-3表达实现的。 展开更多

关键词 CXCR4抑制剂 AMD3100 卵巢肿瘤 ovcar3细胞株 细胞凋亡

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miRNA-221对卵巢癌细胞生物学行为的影响分析 被引量：4

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作者 朱小丹 姚馨怡 +3 位作者 赵蕴芝 陈超 陈燕 许文娟 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第12期1819-1821,共3页

目的:探讨微小RNA-221(microRNA-221,miRNA-221)对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法:对人卵巢癌细胞系OVCAR3瞬时转染miR-221 mimics为实验组,转染miR-negative control mimics为阴性对照组,不进行任何转染为空白对照组,转染48 h后进... 目的:探讨微小RNA-221(microRNA-221,miRNA-221)对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法:对人卵巢癌细胞系OVCAR3瞬时转染miR-221 mimics为实验组,转染miR-negative control mimics为阴性对照组,不进行任何转染为空白对照组,转染48 h后进行四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法实验、流式细胞实验、Transwell迁移实验,观察卵巢癌细胞OVCAR3生长状况。结果:实时定量PCR(real-time PCR)检测显示实验组miR-221的表达水平较阴性对照组与空白对照组均有增高(P<0.05)。MTT检测显示,上调OVCAR3细胞内miR-221水平后,细胞增殖抑制率为(29.81±2.24)%,而阴性对照组与空白对照组分别为(2.49±0.28)%和(1.98±0.24)%,实验组与阴性对照组和空白对照组相比,细胞增殖抑制率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术检测显示实验组OVCAR3细胞凋亡率为(30.33±2.39)%,而阴性对照组与空白对照组分别为(8.13±0.71)%和(6.89±0.58)%,实验组与阴性对照组和空白对照组相比,细胞凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。Transwell迁移实验显示,转染miR-221 mimics后实验组、阴性对照组、空白对照组三组的细胞迁移能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论:瞬时转染miR-221 mimics的上皮性卵巢癌(EOC)细胞系,细胞增殖受到抑制而对细胞的迁移没有影响,表明miR-221可能参与了EOC细胞增殖和凋亡过程。 展开更多

关键词 miRNA-221 ovcar3细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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敲降HE4和PAX8基因对TC方案治疗上皮性卵巢癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量：14

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作者 唐海峰 李贤 刘蓓 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期757-761,共5页

目的:探讨敲降人附睾蛋白4(HE4)和配对盒基因8抗原(PAX8)基因后对紫杉醇药+铂类药(TC方案)治疗的上皮性卵巢癌OVCAR3细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:分别设计和合成敲降HE4和PAX8的单靶siRNA(HE4-siRNA或PAX8-siRNA)及双靶siRN... 目的:探讨敲降人附睾蛋白4(HE4)和配对盒基因8抗原(PAX8)基因后对紫杉醇药+铂类药(TC方案)治疗的上皮性卵巢癌OVCAR3细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:分别设计和合成敲降HE4和PAX8的单靶siRNA(HE4-siRNA或PAX8-siRNA)及双靶siRNA(HE4+PAX8-siRNA)和阴性siRNA序列,并与质粒载体pGCsi-H1相连形成重组质粒,分别转染人上皮性卵巢癌OVCAR3细胞形成HE4-siRNA组、PAX8-siRNA组、HE4+PAX8-siRNA组和siRNA-NC组,同时设立空白对照组(无任何处理)。用TC方案(紫杉醇3.13μg/ml+卡铂2.82μg/ml,)分别处理上述5组细胞后,用MTT法、划痕愈合实验、Transwell侵袭实验、流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡能力的变化。结果:敲降HE4和PAX8基因后,与siRNA-NC组和空白对照组比较,HE4-siRNA组、PAX8-siRNA组、HE4+PAX8-siRNA组卵巢癌OVCAR3细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著降低(均P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),尤以同时敲降HE4和PAX8基因的效果更佳。结论:敲降HE4和PAX8基因均可增强TC方案抑制上皮性卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭能力并促进其凋亡,尤以HE4和PAX8基因同时敲除的效果更好。 展开更多

关键词 上皮性卵巢癌 ovcar3细胞 人附睾蛋白4 配对盒基因8抗原 TC方案 增殖 迁移 侵袭 凋亡

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成纤维细胞激活蛋白对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：1

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作者 唐婷婷 《中国现代医生》 2019年第36期34-36,共3页

目的通过体外实验研究成纤维细胞激活蛋白(Fibroblast activation protein,FAP)对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人类卵巢癌细胞系0VCAR3,用不同浓度的FAP(0、0.0625、0.125、0.25、0.5及1μg/mL)处理24 h或48 h后,通过MTT... 目的通过体外实验研究成纤维细胞激活蛋白(Fibroblast activation protein,FAP)对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养人类卵巢癌细胞系0VCAR3,用不同浓度的FAP(0、0.0625、0.125、0.25、0.5及1μg/mL)处理24 h或48 h后,通过MTT法检测FAP对卵巢癌细胞增殖的影响。0VCAR3用不同浓度的FAP(0、0.0625、0.25及1μg/mL)处理48 h后,通过流式细胞术检测FAP对OVCAR3细胞凋亡的影响。结果MTT法示FAP可促进卵巢癌细胞OVCAR3增殖,其作用呈时间、剂量依赖性(P<0.05);流式细胞术示FAP对卵巢癌细胞系OVCAR3的细胞凋亡率并无明显影响(P>0.05)。结论FAP可促进卵巢癌细胞系OVCAR3的增殖,对其凋亡水平无明显影响。 展开更多

关键词 成纤维细胞激活蛋白 卵巢癌细胞ovcar3 增殖 凋亡

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FANCF-shRNA质粒构建及其对卵巢癌细胞OVCAR3沉默效应的观察 被引量：3

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作者 郝俊莹 孙海刚 +7 位作者 李娜 余涧坤 唐宏涛 李艳琳 于兆进 赵琳 何苗 魏敏杰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2011年第10期741-745,共5页

目的:构建针对人FANCF基因的特异性shRNA真核表达载体,体外观察siRNA对卵巢癌OVCAR3细胞系FANCF基因的沉默效应。方法:采用基因克隆技术,将设计合成的能表达短发夹RNA的寡核苷酸序列插入真核表达质粒载体pSilencerTM4.1-CMV-neo,构建能... 目的:构建针对人FANCF基因的特异性shRNA真核表达载体,体外观察siRNA对卵巢癌OVCAR3细胞系FANCF基因的沉默效应。方法:采用基因克隆技术,将设计合成的能表达短发夹RNA的寡核苷酸序列插入真核表达质粒载体pSilencerTM4.1-CMV-neo,构建能表达FANCF-shRNA的真核表达载体;转染人卵巢癌OVCAR3细胞,提取总RNA和蛋白,RT-PCR验证mRNA表达的变化,蛋白质印迹法验证蛋白表达的变化。结果:质粒酶切和测序证实成功构建了FANCF-shRNA的真核表达载体。与野生型OVCAR3相比,脂质体法转染卵巢癌OVCAR3细胞后,FANCFmRNA 24、48和72 h的表达水平与阴性控制组比较均下调,抑制率分别为(23.91±6.58)%(、51.23±5.86)%和(47.42±7.52)%;FANCF蛋白在244、8和72 h的表达水平与阴性控制组比较亦下调,抑制率分别为(16.28±5.46)%(、24.42±6.85)%和(36.05±8.26)%。证实FANCF-shRNA具有沉默OVCAR3细胞FANCF基因表达的效应。结论:siRNA-FANCF干扰可引起卵巢癌OVCAR3细胞系FANCF基因沉默,可能为卵巢肿瘤基础和临床研究提供一种有效的方法。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 RNA干扰 ovcar3细胞 FANCF 细胞系 肿瘤 转染 印迹法 蛋白质

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miRNA-20a促进卵巢癌细胞OVCAR3的转移 被引量：3

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作者 韩喆 刘艳坤 +3 位作者 姜洁纯 刘民 李欣 汤华 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期297-301,共5页

目的检测miRNA．20a对卵巢癌细胞系OVCAR3转移能力的影响。方法通过实时定量RT-PCR验证反义寡核苷酸与小干扰RNA封闭与过表达的效果，然后利用MTF、软琼脂集落形成和transwell侵袭实验检测封闭和过表达miRNA．20a对OVCAR3细胞增殖及转... 目的检测miRNA．20a对卵巢癌细胞系OVCAR3转移能力的影响。方法通过实时定量RT-PCR验证反义寡核苷酸与小干扰RNA封闭与过表达的效果，然后利用MTF、软琼脂集落形成和transwell侵袭实验检测封闭和过表达miRNA．20a对OVCAR3细胞增殖及转移能力的影响。结果封闭内源性miRNA-20a后，细胞活性基本不受影响，但集落形成能力和细胞的转移能力明显降低。过表达miRNA-20a后，细胞活性基本不受影响，但集落形成能力和细胞的转移能力明显升高。结论miRNA-20a可能参与了卵巢癌细胞OVCAR3的转移。 展开更多

关键词 miR-20a 转移 ovcar3细胞 侵袭实验

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荷人卵巢上皮癌裸鼠冻融卵巢组织移植的效果评价 被引量：2

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作者 朱根海 王圣坦 +6 位作者 杨照新 蔡俊宏 陈春英 姚茂忠 洪澜 贺国丽 杨舒盈 《现代妇产科进展》 CSCD 2012年第11期838-842,共5页

目的:获取人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤癌旁正常卵巢组织,经安全筛查并冻融后移植至去势裸鼠体内,探讨移植后效果,为临床应用提供依据。方法:将人卵巢上皮癌OVCAR3细胞种植于裸鼠皮下以获取瘤源,并进行卵巢原位移植,建立卵巢癌原位移植... 目的:获取人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤癌旁正常卵巢组织,经安全筛查并冻融后移植至去势裸鼠体内,探讨移植后效果,为临床应用提供依据。方法:将人卵巢上皮癌OVCAR3细胞种植于裸鼠皮下以获取瘤源,并进行卵巢原位移植,建立卵巢癌原位移植瘤模型,解剖裸鼠获取癌旁正常卵巢组织。癌旁组:取筛选后的癌旁卵巢组织进行玻璃化冷冻,复苏后分别进行皮下及原位移植,各20例;对照组:同龄正常裸鼠卵巢组织,皮下移植及原位移植各20例;去势裸鼠组:20只同龄去势裸鼠;正常卵巢组:20只同龄正常裸鼠。移植12周后,分析各组裸鼠卵巢组织内卵泡形态及激素分泌功能。结果:40只人卵巢上皮癌裸鼠原位移植瘤模型中共获取35份活检正常的癌旁卵巢组织,获取率87.5%(35/40)。玻璃化冷冻前后卵巢组织中卵泡形态及各级卵泡比例均无显著差异(P>0.05),癌旁冷冻组织和癌旁新鲜组织的异常卵泡比例差异无统计学意义(P>0.05),冷冻组织以初级卵泡及次级卵泡等窦前卵泡为主。癌旁组皮下移植组织存活率80%(16/20),对照组皮下移植组织存活率90%(18/20),癌旁组原位移植组织存活率90%(18/20),对照组原位移植组织存活率95%(19/20)。移植后组织内卵泡以次级卵泡及窦状卵泡为主,各级卵泡的形态及构成比和未移植的同龄正常裸鼠卵巢相似(P>0.05);癌旁组卵泡数明显低于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01);皮下移植和原位移植组织内的各级卵泡数差异无统计学意义(P>0.05)。癌旁组卵泡刺激素水平明显低于去势裸鼠组,而雌二醇水平明显高于去势裸鼠组(P<0.01);癌旁组卵泡刺激素水平明显高于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01),而雌二醇水平明显低于对照组(P<0.05)及正常卵巢组(P<0.01);皮下移植和原位移植的卵泡刺激素水平和雌二醇水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:癌旁卵巢组织冻融移植后有正常卵泡发育及激素分泌功能;皮下移植和原位移植均可取得较好的效果;癌旁卵巢组织冻融移植有望作为卵巢上皮癌患者治疗后恢复卵巢内分泌功能的有效手段。 展开更多

关键词 卵巢癌 卵巢冻存 移植 自体 雌性 BALB c裸鼠 ovcar3细胞株

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卵泡刺激素促进卵巢上皮癌移植瘤生长 被引量：2

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作者 刘东远 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第5期437-441,共5页

目的研究卵泡刺激素(folliclestimulatinghormone,FSH)在卵巢上皮癌发生、发展中的作用。方法卵巢上皮癌细胞系OVCAR3转染FSH受体表达质粒,得到FSH刺激敏感的FSH受体稳定表达细胞系OVCAR3-FSHR。部分裸鼠去势(切除双侧卵巢),分别将OVCAR... 目的研究卵泡刺激素(folliclestimulatinghormone,FSH)在卵巢上皮癌发生、发展中的作用。方法卵巢上皮癌细胞系OVCAR3转染FSH受体表达质粒,得到FSH刺激敏感的FSH受体稳定表达细胞系OVCAR3-FSHR。部分裸鼠去势(切除双侧卵巢),分别将OVCAR3及OVCAR3-FSHR接种到裸鼠皮下,测量肿瘤体积,免疫组化鉴定血管形成相关因子、细胞生长刺激及抑制因子受体在肿瘤组织中的表达。结果接种OVCAR3-FSHR细胞、并注射FSH的去势裸鼠(A组)移植瘤体积(302.69mm3±49.27mm3)明显大于去势、接种OVCAR3细胞(B组,130.34mm3±28.25mm3)、未去势分别接种OVCAR3-FSHR细胞(C组,76.83mm3±22.56mm3)和OVCAR3细胞(D组,32.38mm3±7.84mm3)者。A组中血管内皮细胞生长因子(VEGF)阳性细胞数明显高于其他各组,而转化生长因子β受体II(TGFβIIreceptor,TβRII)阳性细胞数低于其他各组。结论FSH可能通过促进肿瘤的血管形成、降低肿瘤细胞对生长抑制因子的反应等方式促进卵巢上皮癌细胞在移植裸鼠体内的生长。 展开更多

关键词 卵泡刺激素 血管内皮细胞生长因子(VEGF) 移植瘤生长 卵巢上皮癌 ovcar3细胞 receptor FSH受体 上皮癌细胞系 抑制因子受体 转化生长因子 生长抑制因子 血管形成 TGFβⅡ 表达质粒 稳定表达 刺激敏感 双侧卵巢 肿瘤体积

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