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基于纳米抗体的可再生免疫亲和柱结合高效液相色谱-串联质谱法测定玉米中的黄曲霉毒素B_(1) 被引量:2
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作者 李志强 黄雅涓 +3 位作者 张文 张奇 李培武 唐晓倩 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第3期174-182,共9页
目的研究黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxinB_(1),AFB_(1))纳米抗体的表达产量的影响因素,开发具有可再生性的AFB_(1)免疫亲和柱,构建免疫亲和处理-高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,... 目的研究黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxinB_(1),AFB_(1))纳米抗体的表达产量的影响因素,开发具有可再生性的AFB_(1)免疫亲和柱,构建免疫亲和处理-高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)测定玉米中AFB_(1)污染的分析方法。方法研究诱导温度、诱导时间和诱导剂浓度等对AFB_(1)纳米抗体表达量的影响,比对验证AFB_(1)纳米抗体可再生免疫亲和柱的耐受性和可再生使用次数。使用70%甲醇水溶液提取玉米样品中AFB_(1),提取液通过免疫亲和柱净化富集后进行HPLC-MS/MS检测,最后进行方法学验证并应用到实际样品检测。结果诱导AFB_(1)纳米抗体表达的最优条件分别为诱导温度16℃、诱导剂异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷浓度0.5 mmol/L、诱导时间14 h,在最优条件下产量可达7.8 mg/L。AFB_(1)纳米抗体具有良好灵敏度、亲和性、特异性和甲醇耐受性,制备的AFB_(1)免疫亲和柱具有极好的可再生性,重复使用150次以上,对AFB_(1)回收率仍可达80%以上。同时,建立的免疫亲和处理-HPLC-MS/MS,在0.1~100.0μg/L范围内呈现良好的线性关系,检出限为0.014μg/L,定量限为0.047μg/L。在3个不同加标浓度下,回收率在92.0%~104.1%,变异系数小于3.9%。结论本研究开发的AFB_(1)纳米抗体免疫亲和柱表现出优秀的再生性和高特异性,节约了检测成本,建立的免疫亲和处理-HPLC-MS/MS检测方法操作简便、回收率高、结果准确,适用于实际玉米样品中AFB_(1)的含量测定。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B_(1) 纳米抗体 可再生免疫亲和柱 高效液相色谱-串联质谱法 玉米
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基于壳聚糖微球的黄曲霉毒素B_(1)免疫亲和柱开发制备
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作者 顾一丹 马悦 +5 位作者 陈金男 蒋欣容 曹珊珊 刘畅 孔德昭 张歆炎 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第7期217-224,共8页
目的基于壳聚糖微球制备用于黄曲霉毒素B_(1)检测前处理的免疫亲和柱。方法通过优化化学交联法的反应条件,包括壳聚糖分子量、氨基和醛基摩尔比、壳聚糖浓度和水相油相比,制备粒径大小合适且均一的壳聚糖微球,并以此为载体偶联黄曲霉毒... 目的基于壳聚糖微球制备用于黄曲霉毒素B_(1)检测前处理的免疫亲和柱。方法通过优化化学交联法的反应条件,包括壳聚糖分子量、氨基和醛基摩尔比、壳聚糖浓度和水相油相比,制备粒径大小合适且均一的壳聚糖微球,并以此为载体偶联黄曲霉毒素B_(1)的单克隆抗体制备免疫亲和柱。对亲和柱性能进行分析,使用阳性实际样品对亲和柱使用效果进行验证。结果在最佳制备条件下免疫亲和柱非特异性吸附率为5.26%,对单克隆抗体偶联率为90.90%,柱容量为2.69μg AFB_(1)/mL壳聚糖微球,检测回收率为92.12%~98.62%,相对标准偏差为0.61%~2.53%。用于实际样品检测回收率为87.90%~96.37%。结论本研究建立的免疫亲和柱制备过程简单、成本低,为黄曲霉毒素B_(1)痕量检测前处理提供一种新的方案。 展开更多
关键词 壳聚糖微球 黄曲霉毒素B_(1) 免疫亲和柱
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复合免疫亲和柱净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定衢枳壳中5种真菌毒素的含量
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作者 张萌萌 雷美康 +3 位作者 庞明利 王莹莹 周垄芳 蒋永祥 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1061-1066,共6页
提出了题示方法测定衢枳壳样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A的含量。样品经过体积比79∶20∶1的乙腈-水-乙酸混合溶液超声提取,离心,上清液用p H 7.0磷酸盐缓冲液稀释,用复合免疫亲和柱净化,过滤,滤液中的目标物在XDB C18... 提出了题示方法测定衢枳壳样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A的含量。样品经过体积比79∶20∶1的乙腈-水-乙酸混合溶液超声提取,离心,上清液用p H 7.0磷酸盐缓冲液稀释,用复合免疫亲和柱净化,过滤,滤液中的目标物在XDB C18色谱柱上用不同体积比的体积比1∶9的甲醇-5 mmol·L^(-1)乙酸铵混合溶液和体积比9∶1的甲醇-5 mmol·L^(-1)乙酸铵混合溶液的混合溶液分离,电喷雾离子源正离子(ESI+)和多反应监测(MRM)模式检测,同位素内标法定量。结果显示:5种真菌毒素与其同位素内标质量浓度比和对应的峰面积比在一定范围内呈线性关系,检出限为0.05~0.20μg·kg^(-1)。3个加标浓度水平下阴性样品中5种真菌毒素的回收率为82.7%~97.3%,测定值的相对标准偏差(n=6)为5.2%~12%。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 赭曲霉毒素A 复合免疫亲和柱 超高效液相色谱-串联质谱法 衢枳壳
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超声萃取-免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生高效液相色谱法同时测定蜂房药材中4种黄曲霉毒素 被引量:5
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作者 马彧 李正刚 +2 位作者 程焱 王丹彧 王路宏 《化学分析计量》 CAS 2023年第2期20-23,56,共5页
建立超声萃取-免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生高效液相色谱同时测定蜂房药材中黄曲霉毒素B_(1)、黄曲霉毒素B_(2)、黄曲霉毒素G_(1)、黄曲霉毒素G_(2)含量的分析方法。样品经粉碎,过孔径为120μm筛后,采用70%甲醇溶液超声处理30 min,经... 建立超声萃取-免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生高效液相色谱同时测定蜂房药材中黄曲霉毒素B_(1)、黄曲霉毒素B_(2)、黄曲霉毒素G_(1)、黄曲霉毒素G_(2)含量的分析方法。样品经粉碎,过孔径为120μm筛后,采用70%甲醇溶液超声处理30 min,经免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生,通过荧光检测器测定4种黄曲霉毒素的含量。黄曲霉毒素B_(1)的线性范围为0.0104~0.0520 ng,相关系数为0.9999;黄曲霉毒素B_(2)的线性范围为0.0038~0.0190 ng,相关系数为0.9998;黄曲霉毒素G_(1)的线性范围为0.0108~0.0540 ng,相关系数为0.9998;黄曲霉毒素G_(2)的线性范围为0.0038~0.0190 ng,相关系数为0.9998。4种黄曲霉毒素检出限分别为0.42、0.15、0.43、0.15μg/kg,测定结果的相对标准偏差不大于2.5%(n=6),样品加标回收率为92.9%~96.9%。该方法操作简便,灵敏度高,可用于蜂房中黄曲霉毒素含量的测定。 展开更多
关键词 超声提取 免疫亲和柱 光化学衍生 黄曲霉毒素 蜂房 高效液相色谱法
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全自动免疫亲和柱净化-液相色谱串联质谱法同时测定饼粕类饲料原料中黄曲霉毒素 被引量:1
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作者 王石 索德成 +4 位作者 肖志明 张君超 田秀梅 徐秀玲 樊霞 《饲料工业》 CAS 北大核心 2023年第7期105-112,共8页
研究旨在建立全自动免疫亲和柱净化-液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)同时测定饼粕类饲料原料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2(AFB1、AFB2、AFG1、AFG2)含量的分析方法。通过比较不同提取条件和净化方式对黄曲霉毒素(AFs)检测结果的影响,确定较... 研究旨在建立全自动免疫亲和柱净化-液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)同时测定饼粕类饲料原料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2(AFB1、AFB2、AFG1、AFG2)含量的分析方法。通过比较不同提取条件和净化方式对黄曲霉毒素(AFs)检测结果的影响,确定较佳前处理方法。样品经40%乙腈提取、磷酸盐缓冲液稀释,采用自动免疫亲和柱净化,得到的样品溶液使用LC-MS/MS进行定量分析。基于上述方法对花生粕、豆粕、棉籽粕等饲料原料样品进行分析测定,结果表明:AFs在0.02~10.00 ng/mL范围内线性关系良好(R2≥0.9950),方法定量限为0.1μg/kg,平均回收率为82.2%~109.8%,RSD≤8.9%。该方法可批量自动化处理样品,提高工作效率,避免因人员操作导致的结果偏差,适合于饲料原料中多种AFs的精准测定。 展开更多
关键词 饲料原料 饼粕 黄曲霉毒素 全自动免疫亲和柱净化 液相色谱串联质谱
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免疫亲和柱-高效液相色谱法测定炒僵蚕中黄曲霉毒素
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作者 崔业波 张亦萌 +2 位作者 马晓静 王丹彧 马彧 《中国医药导刊》 2023年第5期506-509,共4页
目的:采用免疫亲和柱-高效液相色谱法,对炒僵蚕饮片中的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的残留量进行分析,旨在为炒僵蚕饮片质量标准的完善及其市场监管提供依据。方法:样品经过高速匀浆处理,经免疫亲和柱净化,采用高效液相色谱-... 目的:采用免疫亲和柱-高效液相色谱法,对炒僵蚕饮片中的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的残留量进行分析,旨在为炒僵蚕饮片质量标准的完善及其市场监管提供依据。方法:样品经过高速匀浆处理,经免疫亲和柱净化,采用高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定。采用YMC-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-水(32∶18∶50)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为30℃,荧光检测器激发波长为360 nm,发射波长为450 nm,对7批炒僵蚕进行分析。结果:本研究采用的黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)检测方法的线性关系、精密度、回收率良好,黄曲霉霉毒素G_(2)在多批样品检出,检出率为86%,有1批样品中黄曲霉霉毒素G_(1)含量较高,参照《中华人民共和国药典》(2020年版)黄曲霉毒素的限量标准,其黄曲霉毒素B_(2)、G_(1)和G_(2)总量超出限度规定。结论:本研究为首次采用免疫亲和柱-高效液相色谱法对炒僵蚕中黄曲霉素进行筛查,明确其存在安全风险,为炒僵蚕饮片中黄曲霉素的质控提供参考。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素 炒僵蚕 免疫亲和柱-高效液相色谱法
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免疫亲和柱净化柱后光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法同时测定制马肾中4种黄曲霉毒素
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作者 孙艳杰 赵磊 +1 位作者 李正刚 王路宏 《中国民族民间医药》 2023年第23期19-22,共4页
目的:建立免疫亲和柱净化柱后光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法同时测定制马肾中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的含量。方法:样品采用70%甲醇作为提取溶剂,经免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生后,通过荧光检... 目的:建立免疫亲和柱净化柱后光化学衍生高效液相色谱-荧光检测法同时测定制马肾中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的含量。方法:样品采用70%甲醇作为提取溶剂,经免疫亲和柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生后,通过荧光检测器测定其中黄曲霉毒素的含量。结果:黄曲霉毒素B_(1)的线性范围为0.0104~0.0520 ng(r=0.9999)、黄曲霉毒素B_(2)的线性范围为0.0038~0.0190 ng(r=0.9998)、黄曲霉毒素G_(1)的线性范围为0.0108~0.0540 ng(r=0.9998)、黄曲霉毒素G_(2)的线性范围为0.0038~0.0190 ng(r=0.9998),线性关系良好,回收率在89.68%~101.44%之间,RSD≤3.5%。结论:该方法操作简便,灵敏度高、重复性好、结果准确,可用于制马肾中黄曲霉毒素的测定。 展开更多
关键词 制马肾 免疫亲和柱 光化学衍生 高效液相色谱-荧光检测器 黄曲霉毒素
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免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中8种霉菌毒素 被引量:4
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作者 李益丰 张秋云 +3 位作者 杨洪生 朱晓华 沈美芳 陈慧敏 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第7期294-300,共7页
目的:建立免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定水产品中8种霉菌毒素残留。方法:样品经乙腈水溶液(84:16,V:V)提取,多毒素免疫亲和柱净化。色谱柱为Agilent Proshell 120 SB·C_(18)(2.1 mm×100 mm,2.7μm),... 目的:建立免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定水产品中8种霉菌毒素残留。方法:样品经乙腈水溶液(84:16,V:V)提取,多毒素免疫亲和柱净化。色谱柱为Agilent Proshell 120 SB·C_(18)(2.1 mm×100 mm,2.7μm),流动相为甲醇-5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸),梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温为40℃。采用电喷雾离子源正负离子同时扫描,多反应监测模式(MRM)进行质谱检测。结果:8种霉菌毒素在1.0~50.0 ng/mL范围内线性关系良好(R2>0.992),方法检出限在0.05~0.50μg/kg之间,定量限在0.17~1.65μg/kg之间;8种霉菌毒素加标回收率在75.6%~106.3%之间,相对标准偏差(RSD)为3.5%~9.3%。结论:该方法操作便捷、灵敏度高、准确可靠,能满足水产品中多种霉菌毒素残留快速检测需求。 展开更多
关键词 霉菌毒素 水产品 液相色谱-串联质谱法 免疫亲和柱
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免疫亲和柱净化-高效液相色谱-串联质谱法测定母乳中的五氯苯酚 被引量:3
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作者 韩沐珂 尹杰 +1 位作者 温凯 邵兵 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第7期235-240,共6页
目的 构建复合免疫亲和柱净化,高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)测定母乳中五氯苯酚残留的分析方法。方法 母乳样品用5%三乙胺乙腈水(7:3, V/V)提取,经免疫亲和... 目的 构建复合免疫亲和柱净化,高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, HPLC-MS/MS)测定母乳中五氯苯酚残留的分析方法。方法 母乳样品用5%三乙胺乙腈水(7:3, V/V)提取,经免疫亲和柱特异性净化,以含0.05%氟化铵的甲醇和含0.05%氟化铵的超纯水为流动相,梯度洗脱, ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱分离,多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式检测,内标法定量分析。结果 五氯苯酚在0.02~20.00μg/L范围内呈现良好线性关系,相关系数达0.9998;在低、中、高3个不同加标浓度下,回收率在98.72%~106.95%之间,相对标准偏差小于6.09%,基质效应在94.45%~101.61%之间;方法的检出限为0.008μg/L,定量限为0.02μg/L。免疫亲和柱在该实验条件下至少可重复使用8次,降低87%以上的实验成本。结论 本方法基于免疫亲和柱对样品进行特异性净化,重现性好、准确度高,能够有效地分离和检测母乳中的五氯苯酚残留,可应用于母乳样品中五氯苯酚的定性定量检测。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱法 五氯苯酚 免疫亲和柱 母乳
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全自动免疫磁珠法与免疫亲和柱法测定食用油中黄曲霉毒素B1的对比研究 被引量:3
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作者 曹晶晶 刘莹 +3 位作者 王雅楠 赵胜男 毋修远 高海军 《粮油食品科技》 CAS CSCD 2023年第3期153-158,共6页
采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对不同食用油中黄曲霉毒素B1进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明:全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化... 采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对不同食用油中黄曲霉毒素B1进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明:全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化测定植物油标准物质,结果分别为15.59μg/kg和14.64μg/kg,均在标准值范围内;对不同种类食用油添加不同量的黄曲霉毒素B1标准物质,加标回收率均在88%~110%之间,相对标准偏差均在5%以内。采用Bland-Altman法对全自动免疫磁珠净化法和免疫亲和柱净化法进行差异分析,结果显示这两种净化方法的差异在可接受范围内。两种方法在净化和富集食用油中黄曲霉毒素B1均可满足实验要求,可以互相代替使用。通过检测时间对比,全自动免疫磁珠净化搭配使用真菌毒素全自动净化仪前处理方法可同时处理多个样品,平均一个样品净化时间小于3 min,处理时间短、实验效率更高。 展开更多
关键词 全自动免疫磁珠 免疫亲和柱 超高效液相色谱法 黄曲霉毒素B1 食用油
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免疫亲和层析高效液相色谱法对小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定
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作者 荣明华 《食品安全导刊》 2024年第6期89-91,共3页
目的:建立测定小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的免疫亲和层析高效液相色谱法。方法:小麦粉经粉碎处理,用水提取,通过免疫亲和柱上样、净化和洗脱后,用高效液相色谱仪测定小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量。结果:在100~5 000 ng·m... 目的:建立测定小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的免疫亲和层析高效液相色谱法。方法:小麦粉经粉碎处理,用水提取,通过免疫亲和柱上样、净化和洗脱后,用高效液相色谱仪测定小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量。结果:在100~5 000 ng·mL^(-1),方法的线性关系良好,相关系数(R^(2))为0.999 8,检出限为48 ng·mL^(-1),回收率为90.1%~109.6%,相对标准偏差为1.49%~2.20%。结论:该方法操作步骤简便,特异性强,精密度高,可以作为大批量分析小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的处理方案。 展开更多
关键词 小麦粉 脱氧雪腐镰刀菌烯醇 免疫亲和柱
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免疫亲和柱净化-高效液相色谱技术检测食品中呕吐毒素的方法优化 被引量:1
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作者 胡云 邹勇平 +3 位作者 王帅 周元元 梁志春 周可欣 《食品安全导刊》 2023年第6期90-93,共4页
目的:建立了基于优化的免疫亲和柱净化高效液相色谱技术的呕吐毒素检测方法。方法:优化的免疫亲和柱淋洗条件为将1.5 mL甲醇以0.5 mL·min^(-1)的流速分3次洗脱;优化的流动相为乙腈∶水=10∶90。结果:当呕吐毒素的载柱量在12.4~2504... 目的:建立了基于优化的免疫亲和柱净化高效液相色谱技术的呕吐毒素检测方法。方法:优化的免疫亲和柱淋洗条件为将1.5 mL甲醇以0.5 mL·min^(-1)的流速分3次洗脱;优化的流动相为乙腈∶水=10∶90。结果:当呕吐毒素的载柱量在12.4~2504.0 ng时,柱回收率为82.6%~103.2%;在98.6~4930.0 ng·mL^(-1)时,呕吐毒素的校正曲线为y=0.06335x-0.81590,相关系数为0.999921。以优化后的实验方法分析小麦粉、醋和黄酒中的呕吐毒素,检出限为1.2~4.2μg·kg^(-1),定量限为4~14μg·kg^(-1);3种食品中呕吐毒素的3水平平均加标回收率为84.3%~104.7%,实验室内变异系数为0.3%~5.5%;对特性值为1303μg·kg^(-1),特性值区间为1043~1563μg·kg^(-1)的小麦粉质控样品中呕吐毒素的含量进行检测,结果为1320μg·kg^(-1)。结论:优化后的检测方法灵敏、准确,适用于食品中呕吐毒素的检测。 展开更多
关键词 免疫亲和柱 高效液相色谱 呕吐毒素 优化
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全自动免疫磁珠法与免疫亲和柱法测定玉米粉中黄曲霉毒素B_(1)的对比研究
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作者 顾雨熹 刘金阳 +5 位作者 刘冬雨 张学峰 张宇冲 廖子龙 王锦 陈晋莹 《粮食储藏》 2023年第5期31-35,共5页
采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对玉米粉中黄曲霉毒素B_(1)进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明:对玉米粉中添加不同量的黄曲霉毒素B_(1... 采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对玉米粉中黄曲霉毒素B_(1)进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明:对玉米粉中添加不同量的黄曲霉毒素B_(1)标准物质,使用免疫亲和柱净化法的加标回收率在80.96%~100.42%之间,平均回收率为88.04%,标准偏差为0.052,变异系数为5.90%;使用全自动免疫磁珠净化法的加标回收率在90.00%~108.33%之间,平均回收率为100.20%,标准偏差为0.046,变异系数为4.57%。采用配对t检验评价两种净化方式对检测结果一致性的影响,结果显示t值小于理论t_(0.05(32))的值,P>0.05,结果显示这两种净化方法的差异在可接受范围内。两种方法在净化玉米粉中黄曲霉毒素B_(1)中可以满足实验要求。全自动免疫磁珠净化搭配使用真菌毒素全自动净化仪前处理方法可同时处理多个样品,平均一个样品净化时间小于3 min,处理时间短、实验效率更高。 展开更多
关键词 全自动免疫磁珠 免疫亲和柱 超高效液相色谱法 黄曲霉毒素B_(1) 玉米粉
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免疫亲和柱净化-亲水液相色谱串联质谱法测定牛奶中的三聚氰胺
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作者 尹玉云 曲凌玄 +3 位作者 王雅楠 张培毅 凡猛 陶健 《现代食品》 2023年第16期195-199,228,共6页
本文建立了牛奶中三聚氰胺的免疫亲和柱净化-亲水液相色谱串联质谱分析方法,样品经简单稀释即可经免疫亲和柱净化后用液相色谱串联质谱法检测,内标法定量。相关系数r~2为0.999 74,线性范围为1~100 ng/m L,最低检出限(LOD)为0.000 10 mg/... 本文建立了牛奶中三聚氰胺的免疫亲和柱净化-亲水液相色谱串联质谱分析方法,样品经简单稀释即可经免疫亲和柱净化后用液相色谱串联质谱法检测,内标法定量。相关系数r~2为0.999 74,线性范围为1~100 ng/m L,最低检出限(LOD)为0.000 10 mg/kg,定量限(LOQ)为0.000 24 mg/kg,回收率在97.4%~100.6%。结果表明,该方法具有较高的准确度和灵敏度,可满足实际样品检测需求。 展开更多
关键词 三聚氰胺 免疫亲和柱 液相色谱串联质谱法 内标法
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免疫亲和柱高效液相色谱法快速测定牛奶和奶粉中黄曲霉毒素M_1、B_1、B_2、G_1、G_2 被引量:26
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作者 李佐卿 章再婷 +2 位作者 谢东华 康继韬 孙大为 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期406-408,共3页
采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提取黄曲霉毒素的特效手段,提取液挥干后,经衍生用HPLC荧光检测器测定。对鲜奶和高脂奶粉(脂肪含量25%)在0.01,0.05,0.1和0.1,0.5,1.0μg.L-1水平对黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2测定平... 采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提取黄曲霉毒素的特效手段,提取液挥干后,经衍生用HPLC荧光检测器测定。对鲜奶和高脂奶粉(脂肪含量25%)在0.01,0.05,0.1和0.1,0.5,1.0μg.L-1水平对黄曲霉毒素M1、B1、B2、G1、G2测定平均回收率(n=10)为66.0%~97.0%;相对标准偏差(n=10)为1.04%~14.0%。方法的检出限低于0.01μg.L-1(鲜奶),0.1μg.kg-1(奶粉)。 展开更多
关键词 HPLC 免疫亲和柱 黄曲霉毒素 测定
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免疫亲和柱HPLC荧光检测酒中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2 被引量:26
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作者 李佐卿 谢东华 +2 位作者 孙大为 康继韬 俞雪钧 《光谱实验室》 CAS CSCD 2001年第1期28-31,共4页
采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提纯黄曲霉毒素的特效手段 ,提取液挥发干后 ,经衍生用 HPLC荧光检测器测定。本法在样品中添加 2 .5μg/ kg黄曲霉毒素时进行 10次测定 ,平均回收率分别为 G173.8%、B197.3%、G2 6 1.7%... 采用单克隆抗体免疫亲和技术作为直接从样品中分离提纯黄曲霉毒素的特效手段 ,提取液挥发干后 ,经衍生用 HPLC荧光检测器测定。本法在样品中添加 2 .5μg/ kg黄曲霉毒素时进行 10次测定 ,平均回收率分别为 G173.8%、B197.3%、G2 6 1.7%、B2 90 .5% ;2 .5μg / kg 10次测定的精密度分别为 :G14.50 %、B13.80 %、G2 3.6 8%、B2 4 .77% ,本方法在 2 5— 12 50 pg范围内呈线性 ,相关系数分别为 G1:r=0 .9990、B1:r=0 .9994、G2 :r=0 .9995、B2 :r=0 .9992。测定的最低检出限为 6 .2 展开更多
关键词 免疫亲和柱 HPLC 黄曲霉毒素 测定
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免疫亲和柱净化/高效液相色谱法同时测定动物源性食品中16种磺胺类药物残留 被引量:21
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作者 袁中珍 张雷 +4 位作者 唐柏彬 郗存显 王国民 游丽娜 赵华 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期478-482,共5页
建立了免疫亲和柱净化/高效液相色谱法(IAC/HPLC)同时测定动物源性食品中16种磺胺类药物残留的分析方法。样品经80%乙醇提取,稀释后用磺胺类药物免疫亲和柱净化,高效液相色谱法检测。以Agi-lent Eclipse XDB-C18为分离色谱柱,甲醇-磷酸... 建立了免疫亲和柱净化/高效液相色谱法(IAC/HPLC)同时测定动物源性食品中16种磺胺类药物残留的分析方法。样品经80%乙醇提取,稀释后用磺胺类药物免疫亲和柱净化,高效液相色谱法检测。以Agi-lent Eclipse XDB-C18为分离色谱柱,甲醇-磷酸盐缓冲液(pH 3.5)为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样量为50μL,检测波长为270 nm,整个分析过程不超过42 min。实验结果表明,磺胺类药物在10~200μg/L范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999。在20、50、100μg/kg的加标水平下,16种磺胺类药物的平均回收率为62%~104%,相对标准偏差为0.9%~6.6%,检出限(S/N=3)为4~10μg/kg。该方法简便快速、灵敏度高、溶剂用量少且环保,适用于动物源性食品中磺胺类药物残留的测定。 展开更多
关键词 磺胺类药物 免疫亲和柱 高效液相色谱法
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免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法测定中药材中的14种真菌毒素 被引量:37
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作者 葛宝坤 赵孔祥 +1 位作者 王伟 宓捷波 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期495-500,共6页
依次采用磷酸盐缓冲液(PBS)和甲醇-PBS溶液提取样品,以多功能免疫亲和柱净化,采用液相色谱-串联四极杆质谱检测,可同时测定中药材中的黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、伏马毒素B1、伏马毒素B2、T-2毒素、HT-2... 依次采用磷酸盐缓冲液(PBS)和甲醇-PBS溶液提取样品,以多功能免疫亲和柱净化,采用液相色谱-串联四极杆质谱检测,可同时测定中药材中的黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、伏马毒素B1、伏马毒素B2、T-2毒素、HT-2毒素、赭曲霉毒素A(OTA)、玉米赤霉烯酮等14种真菌毒素。优化条件下,真菌毒素的定量限(LOQ)为1~5μg/kg,4种中药材基质(人参、桔梗、板蓝根、麦门冬)中3个不同添加水平的平均回收率(n=6)为71.9%~99.7%,相对标准偏差(RSD)为4.8%~15.8%。该方法的检测速度快,中药材复杂基质的干扰较少,结果准确、可靠,定量限可满足国内外中药材真菌毒素相关限量的要求。 展开更多
关键词 免疫亲和柱净化 液相色谱-串联质谱 真菌毒素 中药材
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氯霉素免疫亲和柱的制备及在牛奶中痕量氯霉素残留分析中的应用 被引量:14
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作者 乔好 赵立杰 +3 位作者 张岩 徐蓓 王凤侠 王硕 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2008年第4期141-145,共5页
将氯霉素多克隆抗体与sepharose-4B偶联,制备了对氯霉素有特异性吸附的免疫亲和柱。采用紫外扫描鉴定偶联反应,利用直接竞争酶联免疫吸附法及高效液相色谱法对制备好的免疫亲合柱进行评价。通过纯化牛奶基质,对该免疫亲和柱的纯化能力... 将氯霉素多克隆抗体与sepharose-4B偶联,制备了对氯霉素有特异性吸附的免疫亲和柱。采用紫外扫描鉴定偶联反应,利用直接竞争酶联免疫吸附法及高效液相色谱法对制备好的免疫亲合柱进行评价。通过纯化牛奶基质,对该免疫亲和柱的纯化能力进行了研究。结果表明,12.84mg抗体与sepharose-4B的联接率为91.06%。以2%甲醇/水溶液预洗涤杂质,80%甲醇/水溶液洗脱分析物,可以消除牛奶基质对高效液相色谱分析氯霉素的影响。在牛奶中添加1.5μg/L~5μg/L氯霉素标品,测得其回收率为95.2%~105.9%,相对标准偏差为1.19%~4.18%。该亲和柱可以明显消除基质影响,提高检测的灵敏度。 展开更多
关键词 免疫亲和柱 氯霉素 牛奶 高效液相
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免疫亲和柱-高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物 被引量:21
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作者 姚佳 王昕 +6 位作者 张建新 李贤良 郗存显 王国民 王雄 里南 果旗 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第18期124-127,共4页
建立免疫亲和柱同时净化-高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的方法。样品经免疫亲和柱净化与富集后,用高效液... 建立免疫亲和柱同时净化-高效液相色谱法测定牛奶中氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物(α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮)残留量的方法。样品经免疫亲和柱净化与富集后,用高效液相色谱-紫外检测器检测。采用Cloversil-C18反相柱分离,流动相为乙腈-甲醇-水溶液,检测波长为265 nm。结果表明,牛奶中添加氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物的回收率在74%~101%,且相对标准偏差均小于7%。氯霉素的检出限为0.02 μg/L,玉米赤霉醇及其类似物的检出限分别为α-玉米赤霉醇0.03 μg/L、β-玉米赤霉醇0.03 μg/L、α-玉米赤霉烯醇0.03 μg/L、β-玉米赤霉烯醇0.03 μg/L、玉米赤霉酮0.04 μg/L和玉米赤霉烯酮0.05 μg/L。该方法灵敏度高、重复性好,提高了检测速率,可满足牛奶样品中痕量氯霉素和玉米赤霉醇及其类似物残留的测定。 展开更多
关键词 牛奶 氯霉素 玉米赤霉醇 免疫亲和柱 高效液相色谱
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