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Strain Pseudomonas putida PAO-1 Isolate with Polyphosphate Accumulating and Elongation Ability
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作者 DONG Xuetong TIAN Qing +3 位作者 ZHU Yanbin LI Fang YANG Bo LIU Yanbiao 《Journal of Donghua University(English Edition)》 CAS 2021年第6期539-548,共10页
Filamentous bacteria(FB)overgrowth is an important cause of sludge bulking in wastewater treatment plants(WWTPs).However,to date,methods for the cultivation and preservation of isolated FB in the laboratory have not b... Filamentous bacteria(FB)overgrowth is an important cause of sludge bulking in wastewater treatment plants(WWTPs).However,to date,methods for the cultivation and preservation of isolated FB in the laboratory have not been completely described.Furthermore,research on whether FB can function as phosphorus accumulating organisms(PAOs)is limited.In this study,a pure strain,a Pseudomonas putida PAO-1(P.putida PAO-1)isolate with phosphorus removal functions was isolated from the biofilm of an alternating anaerobic/aerobic biofilter(AABF),and its physiological characteristics were studied.Nitrate or nitrite could be used by the strain P.putida PAO-1 as electron acceptors for denitrification during phosphorus anoxic uptake,and 0.63 mg NO-3-N was consumed to reduce 1 mg soluble orthophosphate(SOP)by P.putida PAO-1.The strain P.putida PAO-1 consumed phosphorus within the optimal pH range of 6 to 8 and the temperature range of 25℃to 35℃.Cell deformity was a main morphological trait of the strain P.putida PAO-1,and it could elongate(with an elongation rate of 300%-500%)when it was subjected to oligotrophic or high-salt stress(15 g·L-1 NaCl).The findings in this study provide a microbiological reference for understanding the special characteristics of a denitrifying PAO. 展开更多
关键词 pseudomonas putida pAO-1 isolate(p.putida pAO-1) ELONGATION ACCLIMATION denitrification phosphorus accumulating organism(pAO)
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Statistical optimization of process variables by response surface methodology to enhance phenol degradation by Pseudomonas putida (NCIM 2102)
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作者 Velluru Sridevi M. V. V Chandana Lakshmi +1 位作者 A. V. N Swamy M Narasimha Rao 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2011年第4期175-181,共7页
Removal efficiency of phenol from aqueous solutions was determined using Pseudomonas putida (NCIM 2102). Experiments were made as a function of pH (4 - 9), temperature (28 - 36oC), and agitation speed (100 - 200 rpm).... Removal efficiency of phenol from aqueous solutions was determined using Pseudomonas putida (NCIM 2102). Experiments were made as a function of pH (4 - 9), temperature (28 - 36oC), and agitation speed (100 - 200 rpm). Optimization of these three process parameters for phenol degradation was studied. Statistically designed experiments using response surface methodology was used to get more information about the significant effects and the interactions between these three parameters. A 23 full-factorial central composite design was employed for experimental design and for analysis of the results. A second order polynomial regression model, has been developed using the experimental data. It was found that the degrading potential of P.putida (NCIM 2102) was strongly affected by the variations in pH, temperature and agitation speed. The experimental values were in good agreement with the predicted values and the correlation coefficient was found to be 0.9871. The optimum process conditions for maximizing phenol degradation were recognized as follows: pH (7.49), temperature (29.99oC), and agitation speed (138.89) rpm. 展开更多
关键词 BIODEGRADATION of pHENOL p.putida (NCIM 2102) Central Composite Design Correlation COEFFICIENT
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低能N^+离子注入Spj0104菌株的诱变选育研究
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作者 马英 莫章桦 +2 位作者 刘友全 张斌 李志辉 《湖南环境生物职业技术学院学报》 CAS 2007年第2期4-7,共4页
利用低能N+离子注入对Spj0104菌株进行诱变育种,作了多梯度能量和剂量实验,通过对注入后诱变菌株的摇瓶发酵检测,得出适合的能量为30 KeV,剂量为6.0×1015ions/cm2.在合适的能量和剂量基础上对能量、剂量、脉冲和间隔时间进行了正... 利用低能N+离子注入对Spj0104菌株进行诱变育种,作了多梯度能量和剂量实验,通过对注入后诱变菌株的摇瓶发酵检测,得出适合的能量为30 KeV,剂量为6.0×1015ions/cm2.在合适的能量和剂量基础上对能量、剂量、脉冲和间隔时间进行了正交实验,确定出最佳注入条件为能量20 KeV,剂量4.0×1015ions/cm2,脉冲时间15 s,间隔时间15 s.并在此条件下对一次离子注入后获得的优良菌株Spi03做了二次离子诱变,筛选到一株菌株酶活较出发菌株提高了174.98%的高产菌株Sp208.图2,表5,参8. 展开更多
关键词 离子注入 假单胞菌Spj0104 诱变选育 D-对羟基苯甘氨酸
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恶臭假单胞菌DLL-E4对硝基苯酚降解途径关键基因pnpC的突变分析 被引量:2
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作者 沈文静 张静 +1 位作者 曹慧 崔中利 《生态与农村环境学报》 CAS CSSCI CSCD 北大核心 2008年第4期77-82,共6页
通过同源重组成功地敲除了恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)DLL-E4菌株的偏三苯酚1,2-双加氧酶基因(pnpC)。pnpC插入失活菌株DLL-ΔpnpC1失去了降解对硝基苯酚(PNP)和对苯二酚(HQ)的能力,而pnpC敲除菌株DLL-ΔpnpC恢复了利用PNP和HQ的... 通过同源重组成功地敲除了恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)DLL-E4菌株的偏三苯酚1,2-双加氧酶基因(pnpC)。pnpC插入失活菌株DLL-ΔpnpC1失去了降解对硝基苯酚(PNP)和对苯二酚(HQ)的能力,而pnpC敲除菌株DLL-ΔpnpC恢复了利用PNP和HQ的能力,但是降解速率降低。在不同硫酸铵分级梯度下PNP和邻苯二酚分别诱导的DLL-E4和DLL-ΔpnpC粗酶液对邻苯二酚的降解活性存在明显差异,表明恶臭假单胞菌DLL-E4中除pnpC参与PNP降解代谢过程外,还存在另一个双加氧酶替代了敲除的pnpC的功能,使得DLL-ΔpnpC代谢PNP的过程得以继续。 展开更多
关键词 恶臭假单胞菌DLL-E4 偏三苯酚1 2-双加氧酶基因 对硝基苯酚 基因敲除 降解
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丙酸杆菌代谢物对恶臭假单胞菌抑制活性 被引量:10
5
作者 冯晗 荣邵丰 +3 位作者 贾彩凤 常忠义 高红亮 马悦培 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期58-62,共5页
以化学防腐剂山梨酸钾作对照,对天然防腐剂丙酸杆菌代谢物的对恶臭假单胞菌的抑菌特性进行了研究.对比了SLB、脱脂奶粉和葡萄糖碳源培养基3种不同成分的培养基培养得到丙酸杆菌代谢物的抑菌活性,4~8 d的葡萄糖培养基的代谢物抑菌效果很... 以化学防腐剂山梨酸钾作对照,对天然防腐剂丙酸杆菌代谢物的对恶臭假单胞菌的抑菌特性进行了研究.对比了SLB、脱脂奶粉和葡萄糖碳源培养基3种不同成分的培养基培养得到丙酸杆菌代谢物的抑菌活性,4~8 d的葡萄糖培养基的代谢物抑菌效果很好,第8天达到最大值25.2 AU/mL.从抑菌效果和生产成本考虑,葡萄糖培养基均优于其他两种培养基.研究结果表明:pH值越低丙酸杆菌代谢物抑菌活性越高.在pH 5.5时,丙酸杆菌代谢物的抑菌活性最高,为26.9 AU/mL. 展开更多
关键词 丙酸杆菌 丙酸杆菌代谢物 恶臭假单胞菌
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假单胞菌海因酶基因在大肠杆菌中的高效表达(英文) 被引量:4
6
作者 李志强 胡卓逸 刘景晶 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期145-150,共6页
为实现利用生物酶转化法进行D 对羟基苯甘氨酸的工业化生产 ,构建了 3株海因酶基因工程菌 .利用PCR技术从恶臭假单胞菌 (Pseudomonasputida)CPU 980 1染色体DNA中扩增得到长约1.8kb的含编码区和自身启动子的海因酶全基因 .通过将海因酶... 为实现利用生物酶转化法进行D 对羟基苯甘氨酸的工业化生产 ,构建了 3株海因酶基因工程菌 .利用PCR技术从恶臭假单胞菌 (Pseudomonasputida)CPU 980 1染色体DNA中扩增得到长约1.8kb的含编码区和自身启动子的海因酶全基因 .通过将海因酶全基因插入pMD18 T质粒、海因酶基因的编码区与pET 17 b质粒重组、海因酶基因编码区和T7强启动子一起插入pMD18 T质粒分别得到重组质粒pMD dht、pET dht和pMD T7 dht.将上述重组质粒分别转化大肠杆菌 (Escherichiacoli) ,通过地高辛标记菌落原位杂交和海因酶活力测定两种方法 ,筛选出具有海因酶活力的阳性转化子 .结果表明 ,大肠杆菌的RNA聚合酶能够识别和结合来自恶臭假单胞菌海因酶基因的自身启动子 ,该启动子在大肠杆菌中能够工作 .基因工程菌E .coliBL2 1 pMD dht、E .coliBL2 1 pET dht和E .coliBL2 1 pMD T7 dht的海因酶活力分别为 170 0U L、190 0U L和 2 5 0 0U L ,比野生菌P .putidaCPU 980 1的海因酶活力分别提高了 8倍、9倍和 12倍 .薄层扫描结果显示 ,这些工程菌的海因酶表达量分别约占菌体总可溶性蛋白质的 2 0 %、31%和 5 7%.SDS PAGE显示 ,海因酶的单体分子量约为 5 0kD .经工程菌E .coliBL2 1 pMD T7 dht催化 ,底物对羟基苯海因的转化率在 13h内可达到 展开更多
关键词 假单胞菌 海因酶基因 大肠杆菌 高效表达
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一种具有立体选择性新酯酶的菌种筛选和基因克隆
7
作者 陈少欣 史炳照 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期452-455,共4页
从土样分离到一株产生具有立体选择性酯水解酶的恶臭假单孢菌(Pseudomonas putida NH33)。构建P.putida NH33的基因组文库,并在E.coli中进行酯酶活性筛选,得到一个含有4.7kb插入片段的阳性克隆。对这个克隆的DNA片段进行序列分析,表明... 从土样分离到一株产生具有立体选择性酯水解酶的恶臭假单孢菌(Pseudomonas putida NH33)。构建P.putida NH33的基因组文库,并在E.coli中进行酯酶活性筛选,得到一个含有4.7kb插入片段的阳性克隆。对这个克隆的DNA片段进行序列分析,表明它含有一个1142个碱基的开放阅读框,为编码381个氨基酸的酯酶。推测的酯酶氨基酸序列与其它丝氨酸酯水解酶具有共同的保守基序GXSXG。把该蛋白在E.coli BL21(DE3)中进行表达,并用金属亲和层析纯化至单一条带。利用纯化的酶水解2-芳基丙酸乙酯制备2-芳基丙酸的S型异构体,产物的光学纯度eep>99%,说明此酶可8用于手性药物的合成。该酯酶是一个新酶,其基因序列已递交GenBank,登记号为AY896293。 展开更多
关键词 酯酶 p. putida NH33 克隆 序列
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水-有机相在制备D-对羟基苯甘氨酸中的应用 被引量:2
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作者 刘森林 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS 2004年第3期262-265,共4页
利用水 水溶性有机溶剂体系,研究了来源于恶臭假单胞菌的海因酶催化DL 对羟基苯海因合成N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸,以制备D 对羟基苯甘氨酸,并就培养基的筛选、有机溶剂的选择和有机溶剂质量分数的优化作了探讨.结果发现,适量的有机... 利用水 水溶性有机溶剂体系,研究了来源于恶臭假单胞菌的海因酶催化DL 对羟基苯海因合成N 氨基甲酰 D 对羟基苯甘氨酸,以制备D 对羟基苯甘氨酸,并就培养基的筛选、有机溶剂的选择和有机溶剂质量分数的优化作了探讨.结果发现,适量的有机溶剂可增加底物的溶解度,进而显著增加酶反应速度.培养基以质量分数为1%的甘油、1%的酵母膏、0 2%的K2HPO4·3H2O、0 3%的NaCl、0 05%的MgSO4·7H2O和0 1%的诱导剂为佳;有机溶剂以二甲亚砜为宜,其质量分数以10%左右为佳.在此优化反应条件下,水 水溶性有机溶剂体系中酶反应的速度较水相中提高近4倍. 展开更多
关键词 水-水溶性有机溶剂体系 恶臭假单胞菌 海因酶 D-对羟基苯甘氨酸
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假单胞菌引起罗氏沼虾黄鳃、黑鳃病的研究 被引量:21
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作者 陶保华 石和荣 +1 位作者 黄俊文 王刚 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第z1期255-259,共5页
对高密度养殖条件下患细菌病的罗氏沼虾 (Macrobrachiumrosenbergii)作了初步研究 ,病虾症状为 :食欲下降 ,黄鳃或黑鳃、断须、断腿 ,有的甲壳上有黄色或黑色的斑块 ,取上述典型症状的病虾鳃部和肝胰腺组织进行细菌分离、纯化和保种 ,... 对高密度养殖条件下患细菌病的罗氏沼虾 (Macrobrachiumrosenbergii)作了初步研究 ,病虾症状为 :食欲下降 ,黄鳃或黑鳃、断须、断腿 ,有的甲壳上有黄色或黑色的斑块 ,取上述典型症状的病虾鳃部和肝胰腺组织进行细菌分离、纯化和保种 ,经鉴定 ,该病原菌为恶臭假单胞菌和铜绿假单胞菌 .将分离菌进行回接感染 ,发现有很强的致病作用 ,且产生与自然发病相似的症状 ,从再感染的病虾体内分离的细菌经鉴定也为恶臭假单胞菌 (P putida)和铜绿假单胞菌(P aeruginosa) ,由此可认为它们是此次发病的病原菌 .药敏实验发现 ,铜绿假单胞菌对环丙沙星、氟哌酸氯和庆大霉素的敏感性较强 :恶臭假单胞菌对庆大霉素 ,环丙沙星、卡那霉素、强力霉素和新生霉素较为敏感 . 展开更多
关键词 罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii) 症状 黄鳃或黑鳃 病原 恶臭假单胞菌(p.putida) 铜绿假单胞菌(p.aeruginosa)
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一株耐盐对硝基苯酚降解菌的分离及其降解机理研究 被引量:3
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作者 任磊 刘斌 +4 位作者 蔺中 甄珍 刘月廉 胡汉桥 闫艳春 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期184-193,共10页
旨在分离获得可高效降解对硝基苯酚的海洋细菌,并系统阐明菌株对对硝基苯酚的降解机理。通过唯一碳源法进行富集、驯化和分离获得可降解对硝基苯酚的海洋微生物,通过单因素试验对菌株的环境适应性进行研究,基于代谢中间产物的质谱分析... 旨在分离获得可高效降解对硝基苯酚的海洋细菌,并系统阐明菌株对对硝基苯酚的降解机理。通过唯一碳源法进行富集、驯化和分离获得可降解对硝基苯酚的海洋微生物,通过单因素试验对菌株的环境适应性进行研究,基于代谢中间产物的质谱分析推测菌株降解对硝基苯酚的代谢途径,通过基因克隆获得参与对硝基苯酚降解的基因。分离获得一株可高效降解对硝基苯酚的海洋细菌 RL-JY1,该菌 72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚的降解率为 100%。基于形态学、生理生化特征与 16S rRNA 基因序列分析,确定菌株 RL-JY1 为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。菌株 RL-JY1 在温度为 20、30 和 40℃时,72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚降解率分别为 97.2%、100%和 100%;在初始 pH 为 6.0、7.0、8.0 和 9.0 时,72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚降解率分别为 64.7%、100%、97.2%和 84.2%;在 NaCl 浓度为 0-8%(W/V)之间,72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚的降解率均为 100%,在NaCl 浓度为 10%和 12%时, 72 h 内对 100 mg/L 对硝基苯酚的降解率分别为 81.3%和 50.6%。通过代谢中间产物的质谱分析与鉴定,推测了菌株 RL-JY1 对对硝基苯酚的代谢途径为典型的偏苯三酚途径。基于已有报道对硝基苯酚降解相关基因设计引物,从菌株RL-JY1 基因组中克隆获得参与对硝基苯酚向马来酰乙酸转化的基因 pnpABC,序列比对结果表明所获得的 pnpABC 基因与 P. putidaDLL-E4 所报道的序列相似性在 99%以上。对硝基苯酚降解菌 RL-JY1 为恶臭假单胞菌(P. putida),该菌对环境温度、pH 及盐离子浓度具有较好的耐受能力,且通过偏苯三酚途径对对硝基苯酚进行降解,菌株基因组中含有参与对硝基苯酚降解的 pnpABC 基因。 展开更多
关键词 对硝基苯酚 恶臭假单胞菌 生物降解 耐盐 分子机制
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海因酶产生菌的反应条件研究 被引量:2
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作者 吕彬峰 钱俊青 应雪肖 《浙江工业大学学报》 CAS 2007年第5期505-508,共4页
利用恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)作为酶源,研究海因酶催化DL-对羟基苯海因合成N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸,以制备D-对羟基苯甘氨酸,并就培养基的优化,反应条件的选择及酶活的影响作了探讨.研究表明,碱性条件下可显著增加酶反应... 利用恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)作为酶源,研究海因酶催化DL-对羟基苯海因合成N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸,以制备D-对羟基苯甘氨酸,并就培养基的优化,反应条件的选择及酶活的影响作了探讨.研究表明,碱性条件下可显著增加酶反应速度,温度对提高海因酶活力有重要影响.培养初始pH值为7.0,温度28℃下培养24 h产海因酶达最高;在最适pH9.0和最适温度55℃下,海因酶活力达到0.7 u/mL,比原基础培养条件下提高3.5倍. 展开更多
关键词 恶臭假单胞菌 海因酶 DL-对羟基苯海因 D-对羟基苯甘氨酸 N-氨基甲酰-D-对羟基苯甘氨酸
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注射用重组人干扰素α-2b(假单胞菌)雾化吸入佐治疱疹性咽峡炎的疗效观察 被引量:15
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作者 李东辉 李石志 李金凤 《中国医院用药评价与分析》 2016年第8期1053-1055,共3页
目的:探讨注射用重组人干扰素α-2b(假单胞菌)雾化吸入佐治疱疹性咽峡炎的疗效。方法:选取疱疹性咽峡炎患儿290例作为研究对象,以随机数字表法分为观察组135例和对照组155例。观察组患者给予利巴韦林静脉滴注,并联合注射用重组人干扰素... 目的:探讨注射用重组人干扰素α-2b(假单胞菌)雾化吸入佐治疱疹性咽峡炎的疗效。方法:选取疱疹性咽峡炎患儿290例作为研究对象,以随机数字表法分为观察组135例和对照组155例。观察组患者给予利巴韦林静脉滴注,并联合注射用重组人干扰素α-2b(假单胞菌)雾化吸入,对照组给予利巴韦林静脉滴注,观察2组患儿的疗效、退热及疱疹消失时间。结果:观察组患者的退热及疱疹消失时间均少于对照组,病程明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者的总有效率为96.30%(130/135),对照组为76.13%(118/155),2组的差异有统计学意义(P<0.05);2组患儿均未出现不良反应。结论:注射用重组人干扰素α-2b(假单胞菌)联合利巴韦林治疗疱疹性咽峡炎,可缩短病程,安全有效。 展开更多
关键词 疱疹性咽峡炎 注射用重组人干扰素α-2b(假单胞菌) 利巴韦林 雾化吸入
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Molecular level biodegradation of phenol and its derivatives through dmp operon of Pseudomonas putida:A bio-molecular modeling and docking analysis 被引量:1
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作者 Sujay Ray Arundhati Banerjee 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2015年第10期144-151,共8页
Participation of Pseudomonas putida-derived methyl phenol(dmp) operon and Dmp R protein in the biodegradation of phenol or other harmful, organic, toxic pollutants was investigated at a molecular level. Documentatio... Participation of Pseudomonas putida-derived methyl phenol(dmp) operon and Dmp R protein in the biodegradation of phenol or other harmful, organic, toxic pollutants was investigated at a molecular level. Documentation documents that P. putida has Dmp R protein which positively regulates dmp operon in the presence of inducers; like phenols. From the operon,phenol hydroxylase encoded by dmp N gene, participates in degrading phenols after dmp operon is expressed. For the purpose, the 3-D models of the four domains from Dmp R protein and of the DNA sequences from the two Upstream Activation Sequences(UAS)present at the promoter region of the operon were demonstrated using discrete molecular modeling techniques. The best modeled structures satisfying their stereo-chemical properties were selected in each of the cases. To stabilize the individual structures, energy optimization was performed. In the presence of inducers, probable interactions among domains and then the two independent DNA structures with the fourth domain were perused by manifold molecular docking simulations. The complex structures were made to be stable by minimizing their overall energy. Responsible amino acid residues, nucleotide bases and binding patterns for the biodegradation, were examined. In the presence of the inducers, the biodegradation process is initiated by the interaction of phe50 from the first protein domain with the inducers. Only after the interaction of the last domain with the DNA sequences individually, the operon is expressed. This novel residue level study is paramount for initiating transcription in the operon; thereby leading to expression of phenol hydroxylase followed by phenol biodegradation. 展开更多
关键词 Biodegradation dmp operon Docking simulations Modeling phenol p.putida
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对硝基酚降解菌的降解特性及动力学 被引量:1
14
作者 王宏 王呈玉 +2 位作者 卢振兰 韩笑 董玉侃 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期727-733,共7页
从某制药厂排污口附近采集的土样中分离筛选得到1株能够以对硝基酚为唯一碳源与能源的降解菌Y9。根据菌株的形态、生理生化鉴定及16S r DNA序列分析初步鉴定,该菌株为恶臭假单胞菌属(Pseudomonas putida)。测定了对硝基酚降解过程中亚... 从某制药厂排污口附近采集的土样中分离筛选得到1株能够以对硝基酚为唯一碳源与能源的降解菌Y9。根据菌株的形态、生理生化鉴定及16S r DNA序列分析初步鉴定,该菌株为恶臭假单胞菌属(Pseudomonas putida)。测定了对硝基酚降解过程中亚硝酸盐的产生量。考察了p H和Na Cl浓度对降解率的影响,并对其降解动力学方程进行了拟合分析。同时研究初始接种量与不同浓度对硝基酚降解过程之间的关系。当初始接种量为10%时,菌株Y9在p H 7~9,Na Cl浓度0. 6~10. 0 g/L能够高效降解对硝基酚。当对硝基酚浓度<350 mg/L时,菌株Y9对对硝基酚的降解符合一级动力学方程。通过对初始接种量的控制,500 mg/L对硝基酚在48 h内的降解率可达21. 7%。结果表明,初始接种量的增加可提高菌株Y9对对硝基酚的耐受性及降解率。 展开更多
关键词 对硝基酚 恶臭假单胞菌属 初始接种量 一级动力学
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