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基于PCI2的网红旅游景区游客满意度差异研究——以重庆洪崖洞为例 被引量:7
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作者 王文静 杨晓霞 陶春梅 《资源开发与市场》 CAS 2020年第8期895-902,928,共9页
以典型"网红景区"重庆洪崖洞为例,研究其游客满意度水平,并引入第二代潜在冲突指数(PCI2)对游客满意度的内部差异进行研究。结果表明:网红景区洪崖洞的游客满意度水平较高,旅游景观、旅游餐饮等是游客满意度较高的要素,而旅... 以典型"网红景区"重庆洪崖洞为例,研究其游客满意度水平,并引入第二代潜在冲突指数(PCI2)对游客满意度的内部差异进行研究。结果表明:网红景区洪崖洞的游客满意度水平较高,旅游景观、旅游餐饮等是游客满意度较高的要素,而旅游服务与管理的满意度最低;游客在旅游服务与管理、其他旅游基础设施、景区环境等方面的满意度存在着较大的内部差异,而在旅游景观方面的差异最小。根据研究结果,提出洪崖洞景区未来发展建议。 展开更多
关键词 网红景区 游客满意度 第二代潜在冲突指数(pci2) 洪崖洞
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远志抗抑郁有效部位中寡糖酯单体的分离及活性研究 被引量:29
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作者 涂海华 刘屏 +4 位作者 马亮 廖红波 谢婷婷 穆丽华 刘耀明 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1278-1280,共3页
目的:研究远志的抗抑郁活性成分。方法:用色谱法分离远志的化学成分,根据波谱学分析鉴定了化合物的结构,用MTT法评价其细胞毒活性。结果从远志分离得到8个化合物,分别鉴定为:西伯利亚远志糖A1(sibiricose A1,1),西伯利亚远志糖A5(sibiri... 目的:研究远志的抗抑郁活性成分。方法:用色谱法分离远志的化学成分,根据波谱学分析鉴定了化合物的结构,用MTT法评价其细胞毒活性。结果从远志分离得到8个化合物,分别鉴定为:西伯利亚远志糖A1(sibiricose A1,1),西伯利亚远志糖A5(sibiricose A5,2),tenuifoliside A(3),西伯利亚远志糖A6(sibiricose A6,4),3,4,5-三甲氧基肉桂酸甲酯(3,4,5-trimethoxycinnamate,5),远志酮Ⅲ(polygalaxanthoneⅢ,6),tenuifolioses A(7),tenuifolioses H(8)。结论:化合物1为首次从远志中分离得到,远志中的寡糖酯类成分对谷氨酸造成的PC12细胞损伤均有一定的保护作用。 展开更多
关键词 远志 寡糖酯 pci2细胞 抗抑郁
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β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响 被引量:14
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作者 陈奕芝 方永奇 +2 位作者 王绮雯 谢宇辉 匡忠生 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期317-321,共5页
目的:观察β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响。方法:用免疫细胞化学方法检测皮层神经细胞特异性标志物NSE、GFAP的表达;在体外将不同浓度β-细辛醚与PC12细胞和皮层神经细胞各作用24 h,用相差显微镜观察细... 目的:观察β-细辛醚对PC12细胞和乳鼠皮层神经细胞形态学及细胞活力的影响。方法:用免疫细胞化学方法检测皮层神经细胞特异性标志物NSE、GFAP的表达;在体外将不同浓度β-细辛醚与PC12细胞和皮层神经细胞各作用24 h,用相差显微镜观察细胞形态的改变,并用MTT比色法检测细胞活力的变化。结果:原代培养的乳鼠皮层神经细胞大多数NSE呈阳性表达,少量GFAP呈阳性表达;β-细辛醚与PC12细胞作用24 h,低浓度β-细辛醚(7.5、15、30、60μg/ml)有促增殖作用,高浓度β-细辛醚(120、140、2480μg/ml)则可抑制其增殖,且随药物浓度的增加而增强;β-细辛醚与皮层神经细胞作用24 h,7.5、15、30、60、120μg/mlβ-细辛醚对其细胞形态和活力无明显影响,240μg/mlβ-细辛醚对其有促增殖作用,而480μg/mlβ-细辛醚对其则有损伤作用。结论:β-细辛醚可能有抗肿瘤和保护神经细胞的作用。 展开更多
关键词 pci2细胞 皮层神经细胞 MTT法 Β-细辛醚 石菖蒲
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远志皂苷对H_2O_2诱导的PC12细胞损伤的保护作用 被引量:26
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作者 孙桂波 邓响潮 李楚华 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期991-993,共3页
目的:观察远志皂苷(Tenuigenin TEN)对过氧化氢(H2O2)所致PC12细胞损伤的保护作用。方法:以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞存活率;采用紫外分光光度法测定LDH漏出量,观察细胞的损伤程度;硫代巴比妥酸法测定MDA含量,... 目的:观察远志皂苷(Tenuigenin TEN)对过氧化氢(H2O2)所致PC12细胞损伤的保护作用。方法:以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤模型,MTT法检测细胞存活率;采用紫外分光光度法测定LDH漏出量,观察细胞的损伤程度;硫代巴比妥酸法测定MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。结果:TEN能明显改善H2O2导致的细胞损伤,与H2O2处理组相比,20、10 mg/L组可使细胞存活率升高,LDH漏出量明显降低,降低MDA含量,提高SOD活性。结论:TEN对H2O2诱导的PC12细胞损伤具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 远志皂苷 H2O2 pci2 细胞损伤 阿尔茨海默病
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抗霉素A抑制PC12细胞线粒体COⅡ基因表达 被引量:6
5
作者 邱小忠 欧阳钧 +5 位作者 余磊 张黎声 陆云涛 陈瑗 周玫 钟世镇 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期167-170,共4页
采用不同浓度的抗霉素 A(一种能提高线粒体内活性氧水平的线粒体抑制剂 )处理 PC12细胞 ,利用血细胞计数、台盼蓝排除法以及 MTT法进行细胞活性检测。实验证明 ,当抗霉素 A的浓度达到 15 0 μmol/L时 ,PC12细胞开始出现损伤 ;进一步采用... 采用不同浓度的抗霉素 A(一种能提高线粒体内活性氧水平的线粒体抑制剂 )处理 PC12细胞 ,利用血细胞计数、台盼蓝排除法以及 MTT法进行细胞活性检测。实验证明 ,当抗霉素 A的浓度达到 15 0 μmol/L时 ,PC12细胞开始出现损伤 ;进一步采用 RNA斑点杂交和 RT-PCR技术分析发现抗霉素 A所致的细胞损伤和线粒体内细胞色素 C氧化酶亚基 (CO )基因表达下降有关。本研究证实线粒体介导的活性氧的产生能早期诱导线粒体细胞色素氧化酶的活性的改变 ,逐步引起 展开更多
关键词 抗霉素A pci2细胞 线粒体 COⅡ 基因表达 细胞色素C氧化酶亚基Ⅱ 活性氧 损伤
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氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制 被引量:6
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作者 曾季平 王立祥 +5 位作者 胡晓燕 杨玲玲 孔峰 吴伟芳 陈蔚文 崔行 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期193-195,共3页
目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT... 目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。 展开更多
关键词 氯化钴 pci2细胞 细胞凋亡 活性氧 基因bcl-xl
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蒺藜总皂苷对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用 被引量:7
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作者 姜恩平 李红 +1 位作者 纪影实 杨世杰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期183-186,共4页
目的:探讨蒺藜总皂苷(GSTT)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的保护作用及其机制。方法:PC12细胞分为对照组、模型组及蒺藜总皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组。用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细... 目的:探讨蒺藜总皂苷(GSTT)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)凋亡的保护作用及其机制。方法:PC12细胞分为对照组、模型组及蒺藜总皂苷高(GSTT1)、低(GSTT2)剂量组。用H2O2刺激PC12细胞使其发生凋亡,MTT法检测PC12细胞活性,流式细胞仪检测PC12细胞亚二倍体峰比率及线粒体膜电位的变化,免疫组织化学方法检测与凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax。结果:与模型组比较,蒺藜总皂苷组随着剂量的增加PC12细胞存活率提高(P<0.001),凋亡比率下降(P<0.01),线粒体膜电位回升(P<0.01),Bcl-2表达增加(P<0.05),而Bax的表达降低(P<0.05)。结论:蒺藜总皂苷可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与抑制线粒体途径的细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 蒺藜总皂苷 pci2细胞 细胞凋亡
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五味子乙素和五味子醇甲对PC12细胞氧化损伤的保护作用 被引量:36
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作者 王蕾 唐勇 黄山 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第47期64-67,F0003,共5页
目的:观察五味子乙素和五味子醇甲对过氧化氢(H2O2)PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法:实验于2005-08/2006-07在首都医科大学附属北京中医医院中心实验室完成。①PC12细胞培养在RPMI1640培养液中,加入2.5,5,10,20μmol/L等不同浓度的五... 目的:观察五味子乙素和五味子醇甲对过氧化氢(H2O2)PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法:实验于2005-08/2006-07在首都医科大学附属北京中医医院中心实验室完成。①PC12细胞培养在RPMI1640培养液中,加入2.5,5,10,20μmol/L等不同浓度的五味子乙素和五味子醇甲,与细胞培养24h,然后加入0.1,0.2,0.3,0.5mmol/L不同浓度过氧化氢(H2O2)溶液,37℃作用30min。模型组细胞只加入H2O2;正常对照组只加入等量的培养基。②采用倒置显微镜观察PC12细胞形态学变化,四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞生存率,用自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶的活性,按试剂盒说明书用慧星法测定细胞内DNA损伤。结果:①五味子乙素及五味子醇甲对PC12细胞形态学的影响:倒置相差显微镜观察到PC12细胞被H2O2损伤后,细胞形态学发生变化,表现为胞体肿胀、突起断裂、细胞膜溶解等。经五味子乙素及五味子醇甲处理后细胞,状态明显改善,细胞数目较多,而且细胞形态较完整。②五味子乙素及五味子醇甲对细胞生存率的影响:PC12细胞经0.1,0.2,0.3,0.5mmol/L不同浓度H2O2处理30min后,与正常对照组相比,四甲基偶氮唑盐法测定其生存率,分别降低了4%,13%,40%,57%,(P<0.05或P<0.01)。不同浓度的五味子乙素及五味子醇甲(2.5~20μmol/L)均能提高细胞的生存率,并呈浓度依赖关系,浓度为5,10,20μmol/L时,与模型组比较,具有明显的差异(P<0.05或P<0.01),特别是10μmol/L五味子乙素及五味子醇甲的作用较强。③五味子乙素及五味子醇甲对细胞内乳酸脱氢酶和DNA损伤的影响:用0.3mmol/LH2O2处理细胞后细胞内乳酸脱氢酶漏出率高于正常对照组(P<0.01)。大量的DNA被损伤,与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。细胞与10.0μmol/L五味子乙素及五味子醇甲作用后发现细胞内乳酸脱氢酶漏出率低于模型组(P均<0.01)。DNA损伤明显抑制,与模型组比较,差异有显著性(P均<0.01)。结论:五味子乙素及五味子醇甲均能有效地减轻H2O2对神经细胞的氧化损伤作用。推测保护作用机制是通过清除氧自由基,减轻其对DNA的损伤等方面实现的。 展开更多
关键词 五味子素 五味子 pci2细胞/药物作用 过氧化氢
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芥子碱对PC12细胞内游离钙升高的影响 被引量:4
9
作者 何玲 刘丽芳 +4 位作者 李海涛 郭胜伟 邱嘉斌 李富 蔡宝昌 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1679-1683,共5页
目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopia-zonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PC12细胞内游离钙升高的影响。方法:PC12细胞用终浓度为5μmo.lL-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避... 目的:考察芥子碱对高钾除极和谷氨酸引起细胞外钙内流以及咖啡因和环匹阿尼酸(cyclopia-zonic acid,CPA)引起细胞内钙释放所导致的PC12细胞内游离钙升高的影响。方法:PC12细胞用终浓度为5μmo.lL-1的钙离子荧光指示剂Fluo-3/AM于37℃避光负载孵育。细胞内游离钙([Ca2+]i)用VictorⅡ1420多功能标记分析仪检测,以荧光强度(FI)表示。结果:当有外钙存在时,PC12细胞静息[Ca2+]i的FI值为(1 188±163),75 mmol.L-1KCl和10 mmol.L-1谷氨酸引起细胞外钙内流,使[Ca2+]i增高,FI峰值分别增至(4 270±982)和(3 096±402)。芥子碱(0.01,0.1,1.0,10,100μmol.L-1)对静息[Ca2+]i没有明显的影响,但浓度相关性地抑制高钾和谷氨酸诱发的[Ca2+]i增高,抑制率分别为10.2%,39.5%,53.7%,71.8%,88.4%和30.3%,55.7%,68.5%,79.2%,94.1%。当无外钙存在时,PC12细胞静息[Ca2+]i的FI值为(813±112)。咖啡因(40 mmol.L-1)和CPA(30μmol.L-1)分别引起Caffeine-ryanodine和三磷酸肌醇(InsP3)敏感型-钙池释放而使[Ca2+]i升高,FI值分别增至(2 944±371)和(1 844±332)。芥子碱(0.1,1.0,10,100μmol.L-1)浓度相关性地抑制咖啡因和CPA诱发的[Ca2+]i增高,抑制率分别为23.7%,61.9%,77.5%,88.2%和10.9%,23.8%,44.6%,68.3%。结论:芥子碱能显著抑制电压依赖性和受体依赖性钙通道开放所引起的外钙内流,且对受体依赖性钙通道的抑制作用更强。此外,芥子碱对Caffeine-ryan-odine受体和InsP3敏感型钙池的内钙释放也有明显抑制作用,且对Caffeine-ryanodine受体敏感型钙池的抑制作用更强。这提示芥子碱有望成为很有研发前景的新型钙阻滞剂。 展开更多
关键词 芥子碱 细胞内游离钙 pci2细胞 Fluo-3/AM 钙阻滞剂
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锰对PC12细胞毒性作用的研究 被引量:6
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作者 李妍 陈景元 +3 位作者 蔡同建 郑刚 杜可军 骆文静 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期4-6,共3页
目的研究不同剂量的锰(Mn)对PC12细胞生长增殖的影响。方法体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。以100,900μmol/LMnCl2染毒后进行四唑盐比色实验(MTT)观察MnCl2对细胞的抑制作用,TUNEL法观察细胞凋亡,Western blot检测α-共核蛋... 目的研究不同剂量的锰(Mn)对PC12细胞生长增殖的影响。方法体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。以100,900μmol/LMnCl2染毒后进行四唑盐比色实验(MTT)观察MnCl2对细胞的抑制作用,TUNEL法观察细胞凋亡,Western blot检测α-共核蛋白(α-SYN)表达情况。结果MTT结果显示100—900μmol/L MnCl2对细胞的生长增殖有显著的抑制作用(P〈0.01)。TUNEL染色结果显示MnCl2处理组TUNEL阳性细胞增多(P〈0.05)。Westem blot结果显示与对照组相比,100、300、500μmol/L MnCl2组α-SYN表达水平分别升高1.8、4.5、7.3倍(P〈0.05)。结论一定剂量的MnCl2对PCl2细胞的生长增殖有明显的抑制作用,这一作用可能是通过诱导胞内α-SYN表达增高实现的。提示预防、阻止α-SYN在细胞中的聚集可能会降低Mn对多巴胺能神经细胞的损伤。 展开更多
关键词 MnCl2 大鼠嗜铬细胞瘤pci2细胞 凋亡 Α-共核蛋白
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纳米氧化铜对大鼠海马神经元I_k电流和PC12细胞活性的影响 被引量:5
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作者 徐兰举 赵景霞 +3 位作者 刘仕昌 张涛 Guo-gang REN 杨卓 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期123-128,共6页
用全细胞膜片钳方法研究纳米氧化铜(nano CuO)颗粒对大鼠海马CA1区急性分离神经元延迟整流钾通道电流(Ik)的影响,并用MTT方法研究其对神经生长因子(NGF)诱导分化的PC12细胞活性的影响。结果显示5×10-5g/mLnanoCuO能够显著抑制海马... 用全细胞膜片钳方法研究纳米氧化铜(nano CuO)颗粒对大鼠海马CA1区急性分离神经元延迟整流钾通道电流(Ik)的影响,并用MTT方法研究其对神经生长因子(NGF)诱导分化的PC12细胞活性的影响。结果显示5×10-5g/mLnanoCuO能够显著抑制海马CA1区神经元的Ik,使其失活曲线和对照组相比向左偏移,但对其激活过程无明显影响。MTT方法的实验结果显示不同浓度的nanoCuO(5×10-4、5×10-5、5×10-6g/mL)对NGF诱导分化的PC12细胞均有损伤作用,随着浓度的增加,损伤更加明显,呈量效和时效依赖关系。 展开更多
关键词 纳米材料 延迟整流钾通道 海马神经元 pci2 生物效应
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灵孢多糖对MPP^+损伤PC12细胞的保护作用 被引量:5
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作者 杨海华 李毅 +4 位作者 张丹桃 徐评议 刘焯霖 朱雯 骆飞飞 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期393-396,共4页
【目的】观察灵孢多糖(GLPS)对甲基-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导损伤的PC12细胞的保护作用。【方法】将MPP+或GLPS加入体外培养的PC12细胞中,建立多巴胺能神经元损伤模型,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活力的变化;以乳酸脱氢酶(LDH)检测... 【目的】观察灵孢多糖(GLPS)对甲基-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导损伤的PC12细胞的保护作用。【方法】将MPP+或GLPS加入体外培养的PC12细胞中,建立多巴胺能神经元损伤模型,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活力的变化;以乳酸脱氢酶(LDH)检测法检测培养上清液中LDH水平的改变;通过酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学法检测TH阳性细胞数及蛋白的表达。【结果】MPP+处理48h后,细胞活力降至对照组的52%,经GLPS(100、200、300!g/mL)预处理后,细胞活力明显提高,分别为65%,75%,79%(P<0.05)。MPP+处理48h后,上清液中LDH水平较对照组明显提高,经不同浓度的GLPS预处理后,上清中LDH水平有所下降(P<0.05),且TH阳性细胞数及表达强度明显高于MPP+组。【结论】灵孢多糖对MPP+诱导损伤的PC12细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 灵孢多糖 pci2细胞 帕金森病 1-甲基-4苯基吡啶离子
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神经再生素激活PC12细胞ERK1/2的实验研究 被引量:7
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作者 强亮 顾星星 丁斐 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期369-372,共4页
本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同... 本实验初步探讨了神经再生素 ( NRF)作用于 PC12细胞的信号传导途径。采用 MTT法检测 NRF对无血清培养的PC12细胞存活率的影响 ;用磷酸化的 Elk单克隆抗体 ,通过 Western blot法观察 NRF的不同浓度 ( 10、10 0、10 0 0 ng/ m l)及不同作用时间 ( 0 min、15 min、3 0 min、1h、2 h)对无血清培养的 PC12细胞 ERK1/ 2活性的影响 ;还运用 MEK1/ 2阻断剂 U0 12 6,观察NRF激活 ERK1/ 2是否需要其上游信号蛋白 MEK1/ 2的激活。结果表明 ,NRF作用于无血清培养的 PC12细胞 ,可以激活ERK1/ 2 ,存在明显的剂量效应关系和时间依赖作用 ,在 10 0 0 ng/ ml浓度下最大 ,作用 2 h时达峰值 ;U0 12 6作用后 ,可抑制 NRF作用于 PC12细胞引起的 ERK1/ 2的激活。由此可见 ,NRF对无血清培养的 PC12细胞具有保护作用 ,可能通过激活 ERK1/ 2磷酸化级联途径来介导这些作用。 展开更多
关键词 神经再生素 ERKl/2 U0126 pci2细胞 信号传导途径 细胞培养
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原花青素对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞周期紊乱的保护作用 被引量:3
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作者 谢朝阳 梅寒芳 +2 位作者 祝其锋 吴斌华 陈小芳 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1197-1200,共4页
目的观察原花青素(PAC)对β-淀粉样肽(25-35)(Aβ25-35)诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期紊乱与凋亡的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用血清饥饿培养使PC12细胞同步于G0期,PAC预处理后加入Aβ25-35,通过流式细胞仪分析细... 目的观察原花青素(PAC)对β-淀粉样肽(25-35)(Aβ25-35)诱导体外血清饥饿培养的PC12细胞周期紊乱与凋亡的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用血清饥饿培养使PC12细胞同步于G0期,PAC预处理后加入Aβ25-35,通过流式细胞仪分析细胞周期与凋亡,RT-PCR和Western印迹从mRNA及蛋白水平检测p21、Cyclin D1、pRb和E2F1基因表达的变化。结果与Aβ25-35诱导组比较,PAC保护组S期细胞百分率明显减少,凋亡率明显降低(P<0.05);p21 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05),Cyclin D1、E2F1 mRNA和Cyclin D1、pRb蛋白表达降低(P<0.05)。结论PAC对Aβ25-35诱导的PC12细胞周期紊乱与凋亡起保护作用,其机制可能与上调p21表达,下调Cyclin D1、pRb、E2F1表达有关。 展开更多
关键词 原花青素 AΒ25-35 pci2细胞 细胞周期 基因表达
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6-羟基多巴胺诱导PC12细胞帕金森模型中GRP78表达的研究 被引量:3
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作者 徐卉 常明 +2 位作者 张磊 杜丹华 胡林森 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期154-156,共3页
目的探讨神经毒素6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞的帕金森(PD)模型中GRP78的表达。方法在建立6-OHDA诱导PC12细胞帕金森模型的基础上,MTT法测细胞存活率和Hoechst33342染色检测细胞凋亡。分别提取6-OHDA处理组和对照组细胞总蛋白,应... 目的探讨神经毒素6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞的帕金森(PD)模型中GRP78的表达。方法在建立6-OHDA诱导PC12细胞帕金森模型的基础上,MTT法测细胞存活率和Hoechst33342染色检测细胞凋亡。分别提取6-OHDA处理组和对照组细胞总蛋白,应用荧光差异凝胶电泳(Differentia Gel Electrophoresis,DIGE)技术获得蛋白点的差异表达信息,运用MALDI-TOF质谱鉴定出差异蛋白质。结果实验组细胞存活率为60%±4.8%,与对照组比较显著下降(P<0.05)。荧光染色可见细胞核呈固缩状或碎裂状的典型的凋亡形态学改变。DIGE分析发现6-OHDA组表达明显增高的一个蛋白质点,经质谱分析鉴定确认为GRP78。结论6-OHDA能够诱导PC12细胞凋亡,凋亡过程中GRP78表达增高,提示GRP78增高可能与PD的发病机制有关。 展开更多
关键词 pci2 6-OHDA GRP78 DIGE
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MPP^+诱导PC12细胞氧化应激损伤的实验研究 被引量:4
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作者 安丽凤 刘树民 +1 位作者 董杨 唐波 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2010年第11期2243-2245,共3页
目的:考察MPP+诱导PC12细胞氧化应激损伤作用,并探讨其机制。方法:以不同浓度、不同作用时间的MPP+作用于PC12细胞,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪测细胞凋亡率,紫外可见分光光度计测LDH、NO、NOS、MDA含量和SOD活性。结果:MPP+终浓度... 目的:考察MPP+诱导PC12细胞氧化应激损伤作用,并探讨其机制。方法:以不同浓度、不同作用时间的MPP+作用于PC12细胞,MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪测细胞凋亡率,紫外可见分光光度计测LDH、NO、NOS、MDA含量和SOD活性。结果:MPP+终浓度达到300μmol/L时,作用48h后可明显降低PC12细胞存活率(P<0.001),提高细胞凋亡率(P<0.01),增强LDH、NO、NOS、MDA的含量和降低SOD活性,有统计学意义(P<0.05)。结论:MPP+能诱导PC12细胞氧化应激损伤,其作用机制可能是通过增加PC12细胞NO和NOS含量,引起胞内SOD的活性降低,从而引起脂质过氧化物增加来损伤多巴胺能神经细胞的。 展开更多
关键词 MPP+ pci2细胞 氧化应激
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高粱不同溶剂提取物的抗氧化活性及抗细胞氧化应激作用 被引量:2
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作者 申迎宾 张晖 +4 位作者 程李琳 齐雅静 王立 钱海峰 齐希光 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第2期19-23,29,共6页
以红高粱为原料,采用测定清除DPPH·和ABTS^+·能力、总抗氧化能力3种方法比较了不同提取溶剂提取物的抗氧化活性,测定了总酚含量,并分析了总酚含量与抗氧化方法的相关性。并研究了高粱多酚对细胞氧化应激的影响。结果表明,60%... 以红高粱为原料,采用测定清除DPPH·和ABTS^+·能力、总抗氧化能力3种方法比较了不同提取溶剂提取物的抗氧化活性,测定了总酚含量,并分析了总酚含量与抗氧化方法的相关性。并研究了高粱多酚对细胞氧化应激的影响。结果表明,60%乙醇提取物中总酚含量最高,达到315.45 mg GAE/100 g DW。DPPH·清除能力达到89.88%,ABTS^+·清除能力达到89.9%,总抗氧化能力为15.93 mmol TEAC/100 g DW,其中ABTS^+·与总酚的相关系数最高,为0.80(P=0.193>0.05),但是不显著。高粱多酚质量浓度为2 mg/m L时,对H_2O_2诱导小鼠肝细胞产生MDA抑制率最高,为72.96%。在质量浓度为300μg/m L时,使得PC12细胞的存活率达到94.11%。由此可见,红高粱具有很强的体外抗氧化能力,并对细胞的氧化应激具有保护作用。 展开更多
关键词 抗氧化活性 红高粱 DPPH· ABTs’· pci2 MTT
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阿魏酸钠对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用的探讨 被引量:10
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作者 曲喜英 祝其锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期553-556,共4页
目的 探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法 在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par ... 目的 探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法 在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par 4蛋白表达和Caspase 3P2 0活性片段 ,用比色法检测Caspase 3相对活性。 结果 不同剂量SF预处理 1h可提高PC12细胞的存活率 ,降低 par 4和cas pase 3的mRNA表达以及Par 4的蛋白表达 ,Caspase 3P2 0活性片段和Caspase 3相对活性减少 ,但变化不明显。结论 SF可剂量依赖性地对抗H2 O2 的神经毒性作用 ,其机制可能与凋亡基因 par 4表达有关 ,与Caspase 展开更多
关键词 阿魏酸钠 H2O2 pci2细胞 凋亡 PAR-4 CASPASE-3
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Tropic1808在PC12细胞中的表达 被引量:2
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作者 刘梅 张琦 +1 位作者 刘炎 丁斐 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期372-375,共4页
目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达以初步观察该基因的作用。方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Westernblot鉴定。采用RT-PCR,实时P... 目的构建稳定表达tropic1808基因的PC12细胞株,并通过观察稳定株中高分子量神经丝蛋白(NF-H)的表达以初步观察该基因的作用。方法构建重组真核表达载体pcDNA-HA-tropic1808,转染PC12细胞,经G418筛选、Westernblot鉴定。采用RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法观察tropic1808稳定株中NF-H的表达。结果Westernblot检测表明,tropic1808基因稳定表达,RT-PCR,实时PCR,Westernblot和细胞组织化学方法均观察到NF-H在tropic1808稳定株中的表达高于空载体对照。结论Tropic1808基因可以在PC12稳定表达且NF-H在tropic1808稳定株中表达上升。 展开更多
关键词 Tropicl808 pci2 真核表达 NF-H WESTERN BLOT RT-PCR 实时PCR
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14-3-3蛋白在PC12细胞的分布及MPP^+对其表达的影响 被引量:3
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作者 陈小武 孙圣刚 +2 位作者 程道宾 田有勇 王岚 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期399-401,I0001,共4页
目的探讨14-3-3蛋白在PC12细胞中的分布及其与MPP+诱导PC12细胞死亡的关系。方法用免疫荧光染色检测14-3-3蛋白的分布,并分别用免疫印迹技术与MTT法检测MPP+,对14-3-3蛋白表达及细胞活力的影响。结果PC12细胞中β、γ、ε、ζ、η和θ... 目的探讨14-3-3蛋白在PC12细胞中的分布及其与MPP+诱导PC12细胞死亡的关系。方法用免疫荧光染色检测14-3-3蛋白的分布,并分别用免疫印迹技术与MTT法检测MPP+,对14-3-3蛋白表达及细胞活力的影响。结果PC12细胞中β、γ、ε、ζ、η和θ亚型免疫反应阳性。14-3-3蛋白表达随着MPP+处理的时间延长呈下降趋势,在6h变化不明显,12h显著下降(P<0.05),到48h后14-3-3蛋白的减少极其显著(P<0.01)。PC12细胞的存活率也呈现同样的变化趋势。结论MPP+引起PC12细胞的死亡可能与细胞内14-3-3蛋白含量的下降有关。 展开更多
关键词 14—3—3蛋白 MPP^+ pci2细胞 帕金森病
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