目的探讨神经毒素6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞的帕金森(PD)模型中GRP78的表达。方法在建立6-OHDA诱导PC12细胞帕金森模型的基础上,MTT法测细胞存活率和Hoechst33342染色检测细胞凋亡。分别提取6-OHDA处理组和对照组细胞总蛋白,应...目的探讨神经毒素6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞的帕金森(PD)模型中GRP78的表达。方法在建立6-OHDA诱导PC12细胞帕金森模型的基础上,MTT法测细胞存活率和Hoechst33342染色检测细胞凋亡。分别提取6-OHDA处理组和对照组细胞总蛋白,应用荧光差异凝胶电泳(Differentia Gel Electrophoresis,DIGE)技术获得蛋白点的差异表达信息,运用MALDI-TOF质谱鉴定出差异蛋白质。结果实验组细胞存活率为60%±4.8%,与对照组比较显著下降(P<0.05)。荧光染色可见细胞核呈固缩状或碎裂状的典型的凋亡形态学改变。DIGE分析发现6-OHDA组表达明显增高的一个蛋白质点,经质谱分析鉴定确认为GRP78。结论6-OHDA能够诱导PC12细胞凋亡,凋亡过程中GRP78表达增高,提示GRP78增高可能与PD的发病机制有关。展开更多
文摘目的探讨神经毒素6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导PC12细胞的帕金森(PD)模型中GRP78的表达。方法在建立6-OHDA诱导PC12细胞帕金森模型的基础上,MTT法测细胞存活率和Hoechst33342染色检测细胞凋亡。分别提取6-OHDA处理组和对照组细胞总蛋白,应用荧光差异凝胶电泳(Differentia Gel Electrophoresis,DIGE)技术获得蛋白点的差异表达信息,运用MALDI-TOF质谱鉴定出差异蛋白质。结果实验组细胞存活率为60%±4.8%,与对照组比较显著下降(P<0.05)。荧光染色可见细胞核呈固缩状或碎裂状的典型的凋亡形态学改变。DIGE分析发现6-OHDA组表达明显增高的一个蛋白质点,经质谱分析鉴定确认为GRP78。结论6-OHDA能够诱导PC12细胞凋亡,凋亡过程中GRP78表达增高,提示GRP78增高可能与PD的发病机制有关。