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血液和骨髓标本中常见PCR反应抑制物的探究与分析 被引量:12
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作者 沈克锋 杨默 江千里 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期842-846,共5页
PCR反应具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、高效安全及对标本要求低的特点,是检测标本中DNA或mRNA的首选方法,大量应用于临床和科研。近年来逆转录荧光定量PCR技术(real-time reverse transcription PCR,qRT-PCR)取得了飞速发展,检测... PCR反应具有特异性强、灵敏度高、方便快捷、高效安全及对标本要求低的特点,是检测标本中DNA或mRNA的首选方法,大量应用于临床和科研。近年来逆转录荧光定量PCR技术(real-time reverse transcription PCR,qRT-PCR)取得了飞速发展,检测灵敏度不断提高,有的甚至可以检测低于10个拷贝数的基因。技术的进步必然会对标本提出更高的要求,因此有必要重新审视血液和骨髓液中可能存在的PCR反应抑制物。本文总结了血液和骨髓液中常见的PCR反应抑制物及其可能存在的抑制机制和解决措施,重点阐述了抗凝剂肝素的使用对于PCR反应的影响。本文可在一定程度上指导对PCR(特别是qRT-PCR)检测结果的评估,如对于某些低表达基因定量检测结果临床意义的判断,或者排除标本中PCR抑制成分所导致的假阴性等。 展开更多
关键词 血液 骨髓标本 qRT—pcr pcr抑制物
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生物检材中的PCR抑制物及其处理技术 被引量:8
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作者 胡清清 刘宇轩 +3 位作者 何仕霞 马丽莉 马红杜 黄代新 《中国法医学杂志》 CSCD 2014年第3期243-246,共4页
DNA分型技术在刑事案件的侦破中已得到广泛应用,但不同来源的各种生物检材往往含有PCR抑制物,其对扩增反应的影响不容忽视。因此,DNA样本扩增前预处理就显得尤为重要。本文主要就PCR抑制物种类及其对PCR的抑制机制、PCR抑制物应对技术... DNA分型技术在刑事案件的侦破中已得到广泛应用,但不同来源的各种生物检材往往含有PCR抑制物,其对扩增反应的影响不容忽视。因此,DNA样本扩增前预处理就显得尤为重要。本文主要就PCR抑制物种类及其对PCR的抑制机制、PCR抑制物应对技术等相关研究进展进行简要综述,旨在为相关研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 法医证学 检材 pcr抑制物
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两种国产磁珠试剂盒对常见PCR抑制物去除效果比较 被引量:4
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作者 胡清清 何仕霞 +3 位作者 刘宇轩 周凤蕾 贾雲舒 黄代新 《中国法医学杂志》 CSCD 2015年第2期171-174,共4页
目的比较国产博坤磁珠试剂盒和Wawasye磁珠试剂盒对法医学常见PCR抑制物的去除效果。方法选择6种常见PCR抑制物,胆汁酸盐、胶原质、腐殖酸、血红素、黑色素和尿素,分别将其与K562 DNA混合后,采用Identifiler试剂盒进行分型,以恰好抑制K5... 目的比较国产博坤磁珠试剂盒和Wawasye磁珠试剂盒对法医学常见PCR抑制物的去除效果。方法选择6种常见PCR抑制物,胆汁酸盐、胶原质、腐殖酸、血红素、黑色素和尿素,分别将其与K562 DNA混合后,采用Identifiler试剂盒进行分型,以恰好抑制K562 DNA所有26个不同等位基因的抑制物浓度为标准添加浓度,在此基础上提高每种PCR抑制物的浓度,分别采用两种磁珠试剂盒对混有抑制物的标准品DNA进行纯化处理后,再进行PCR扩增和STR分型检测,统计STR基因座等位基因检出个数。结果分别混有1×、2×和4×标准添加浓度各种抑制物的K562 DNA经博坤磁珠试剂盒纯化后,均可检出所有STR基因座的全部等位基因;经Wawasye磁珠试剂盒纯化后,混有胆汁酸盐、胶原质、血红素和尿素的DNA均可检出所有STR基因座的全部等位基因,而混有腐殖酸和黑色素的DNA未检出任何等位基因。结论除Wawasye磁珠试剂盒无法有效去除腐殖酸和黑色素外,两种国产磁珠试剂盒对大多数PCR抑制物均具有良好去除效果。 展开更多
关键词 法医证学 国产磁珠 pcr抑制物 STR分型
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SCODA技术和磁珠法对法医生物检材抑制物去除效果比较 被引量:1
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作者 张敏 李甫 +2 位作者 彦萌 靳小攀 焦章平 《刑事技术》 2017年第6期463-466,共4页
目的比较SCODA技术和磁珠法对法医物证常见PCR抑制物腐植酸和黑色素的去除效果。方法将腐植酸溶液和黑色素溶液分别与两份直径为1mm的血片混合制成模拟DNA样本,采用Global Filer?试剂盒进行STR分析,比较添加较高浓度腐植酸(600μg)和黑... 目的比较SCODA技术和磁珠法对法医物证常见PCR抑制物腐植酸和黑色素的去除效果。方法将腐植酸溶液和黑色素溶液分别与两份直径为1mm的血片混合制成模拟DNA样本,采用Global Filer?试剂盒进行STR分析,比较添加较高浓度腐植酸(600μg)和黑色素(200μg)而分别经基于SCODA技术的Aurora核酸纯化系统和基于磁珠法的Auto Mate Express TM自动化提取仪纯化处理的两种方法的效果,通过检出STR分型的完整性进行评估。结果含有腐植酸(600μg)和黑色素(200μg)的模拟DNA样本,经Aurora核酸纯化系统纯化后可检出所有基因座的等位基因,而经Auto Mate Express TM自动化提取仪纯化后则未检出等位基因。结论SCODA技术对较高浓度的PCR抑制物腐植酸和黑色素具有更好的去除效果。 展开更多
关键词 法医证学 SCODA STR分型 pcr抑制物
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铁路线路犯罪案件常见接触性DNA检验效果研究 被引量:2
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作者 范光耀 陈昶旭 《铁道警察学院学报》 2017年第3期37-40,共4页
针对铁路线路犯罪案件中嫌疑人徒手接触铁路栅栏、钢轨、扣件等8个常见部件,采用棉签擦拭法分别采集各部件上潜在的接触性DNA,然后分别使用Chelex-100法提取DNA并进行STR分型,最后比较STR分型效果,可为铁路公安机关预判相关生物物证证... 针对铁路线路犯罪案件中嫌疑人徒手接触铁路栅栏、钢轨、扣件等8个常见部件,采用棉签擦拭法分别采集各部件上潜在的接触性DNA,然后分别使用Chelex-100法提取DNA并进行STR分型,最后比较STR分型效果,可为铁路公安机关预判相关生物物证证据价值并明确提取部位提供参考。 展开更多
关键词 铁路线路犯罪 pcr抑制物 接触性DNA STR分型
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MUTATION OF p53 GENE IN TRANSFORMED RAT TRACHEAL EPITHELIAL CELLS INDUCED BY RADIATION
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作者 赵永良 吴德昌 +1 位作者 刘国廉 项晓琼 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 1998年第3期158-160,共3页
The highly conserved domain (exon 5-8) of p53 gene in transformed rat tracheal epithelial (RTE) cells was analyzed by means of polymerase chain reaction and single strand con formation polymorphism (PCR-SSCP). T... The highly conserved domain (exon 5-8) of p53 gene in transformed rat tracheal epithelial (RTE) cells was analyzed by means of polymerase chain reaction and single strand con formation polymorphism (PCR-SSCP). The result showed that single strand of exon 8 gene had mobility shift in polyacrylamide nondenaturing gel. DNA sequencing proved the mutation was G→C transversion at condon 265. 展开更多
关键词 pcr-SSCP p^(53) mutation RADIATION
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