期刊文献+
共找到927篇文章
< 1 2 47 >
每页显示 20 50 100
新型PCV2衣壳融合蛋白在HEK293F细胞瞬时表达研究
1
作者 罗清平 彭妍 +2 位作者 ALI Mohsin 庄英萍 郭美锦 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期62-70,共9页
猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)衣壳(Capsid)蛋白是制备抗猪圆环2型病毒亚单位疫苗的有效免疫抗原,能在大肠杆菌及杆状病毒/昆虫细胞表达系统中获得表达,然而在哺乳细胞中的表达研究仍然缺乏。瞬时表达条件考察结果显示... 猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus type 2,PCV2)衣壳(Capsid)蛋白是制备抗猪圆环2型病毒亚单位疫苗的有效免疫抗原,能在大肠杆菌及杆状病毒/昆虫细胞表达系统中获得表达,然而在哺乳细胞中的表达研究仍然缺乏。瞬时表达条件考察结果显示,采用宿主HEK293F细胞及PEI-40kDa转染试剂能获得35%病毒PCV2 Capsid基因细胞转染效率。转染试剂PEI(Polyethylenimine)与DNA比例差异会影响复合物形成大小及形态,复合物形成15~80 nm颗粒有利于转染效率的提高。实验以免疫逃逸型猪圆环病毒2b型NDSU41513病毒株,设计了新型PCV2 Capsid (△1-41aa)-Fc(pig) protein(PCFP)分子。在3 L反应器中成功实现了HEK293F细胞瞬时表达PCFP,表达水平达到3.8 mg/L。PCFP蛋白能够自主装形成约为41 nm类病毒颗粒,诱导小鼠机体内产生强烈的体液免疫反应,具有很高的应用潜力。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 瞬时表达 HEK293F 类病毒颗粒 疫苗
下载PDF
一株高病毒载量PCV2毒株的基因组特征及序列分析
2
作者 常鑫 蒋智勇 +4 位作者 卞志标 徐民生 杨冬霞 杨傲冰 翟少伦 《广东农业科学》 CAS 2024年第3期124-135,共12页
【目的】了解广东省某猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的遗传进化情况,丰富PCV2分子流行病学数据,为当地PCV2疫苗候选株的选用和研发提供参考。【方法】使用qPCR方法对疑似PCV2的样品进行检测,发现1株具... 【目的】了解广东省某猪群中猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)流行毒株的遗传进化情况,丰富PCV2分子流行病学数据,为当地PCV2疫苗候选株的选用和研发提供参考。【方法】使用qPCR方法对疑似PCV2的样品进行检测,发现1株具有高病毒载量的PCV2毒株,命名为GD222858。通过PCR方法进行全基因组分子克隆及遗传进化分析。使用MegAlign软件将该毒株ORF1、ORF2基因编码的氨基酸序列与PCV2同亚型参考毒株进行比对,分析氨基酸序列的相似性;采用DNAStar预测该毒株的Cap蛋白二级结构及B细胞表位,并与4株疫苗株DBN-SX07-2(HM641752)、LG(HM038034)、SH(HM038027)、ZJ(AY686764)的Cap蛋白抗原指数进行比对分析。【结果】GD222858毒株基因组长度为1767 bp。遗传进化分析表明该毒株属于PCV2d亚型。与国内外82株参考毒株的核苷酸相似性为91.4%~99.6%,与越南毒株Han8(GenBank登录号:JQ181600)的亲缘关系最近。在ORF1编码的Rep蛋白处发现多个特异性突变位点F70Y、F77L、W202R、N256S;ORF2编码的Cap蛋白相对保守。Protean预测Cap蛋白的氨基酸第5~18、24~25、39~41、48~49、57~65、99、101、112~114、139~140、145~150、162~165、175~181、188~189、205~211、227~232位置处均可能存在潜在的B细胞表位。GD222858毒株的Cap蛋白抗原指数与4株疫苗株均有差异,在氨基酸45~57、124~132、223~233位置处抗原指数明显高于4株疫苗株,且与疫苗株HM038034差异最大。【结论】GD222858毒株感染猪群的原因可能是Rep蛋白多个位点发生特异性突变及疫苗株选用不当所致。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(pcv2) 遗传进化分析 ORF1基因 ORF2基因 B细胞表位 抗原指数
下载PDF
血凝试验和反向间接血凝试验定量检测PCV2 Cap抗原的研究
3
作者 李晶梅 谢红玲 +8 位作者 薛霜 李文静 黄涛 王焕君 刘项羽 张飞雁 朱薇 李婷婷 石宝兰 《中国兽药杂志》 2024年第1期1-5,共5页
为研究能否用血凝和反向间接血凝方法定量检测重组杆状病毒表达的PCV2 Cap抗原,分别使用不同稀释液和不同的动物红细胞测定PCV2Cap抗原的凝集效价,同时使用PCV2Cap单抗致敏绵羊红细胞,检测PCV2Cap抗原、空杆状病毒、CSFV等的反向间接血... 为研究能否用血凝和反向间接血凝方法定量检测重组杆状病毒表达的PCV2 Cap抗原,分别使用不同稀释液和不同的动物红细胞测定PCV2Cap抗原的凝集效价,同时使用PCV2Cap单抗致敏绵羊红细胞,检测PCV2Cap抗原、空杆状病毒、CSFV等的反向间接血凝效价(RIHA效价)。结果显示,用猪、鸡、绵羊红细胞在不同稀释液条件下测得的同一批次PCV2Cap抗原凝集效价为3log2~9log2,说明PCV2Cap抗原可凝集猪、鸡、绵羊红细胞,但红细胞不同、稀释液不同,测得的PCV2Cap抗原凝集效价也不同。使用PCV2Cap单抗致敏绵羊红细胞,测得的PCV2Cap抗原RIHA效价为14log2,且纯化后和未纯化的PCV2Cap抗原的RIHA效价均与ELISA定量检测结果有平行关系;空杆状病毒、CSFV、PRRSV、PRV、PEDV、TCEV的RIHA效价均小于1log2。说明反向间接血凝方法可定量检测重组杆状病毒表达的PCV2Cap抗原,该方法敏感、特异,适用于疫苗生产中的PCV2Cap抗原的定量检测。 展开更多
关键词 pcv2 Cap抗原 反向间接血凝 血凝 红细胞
下载PDF
四川地区一株PCV2的分离鉴定及基因组序列分析
4
作者 陈劲松 郭紫晶 +2 位作者 黄雄挺 张志东 李彦敏 《四川畜牧兽医》 2024年第2期23-27,共5页
为了解猪圆环病毒2型(PCV2)当前流行分离株的基因型和进化特征,本研究对PCV2阳性临床样品进行分离鉴定,并对分离毒株进行全基因组序列扩增、测序及遗传进化分析,利用MegAlign7.0和DNAstar软件对分离株ORF2基因编码的Cap蛋白进行氨基酸... 为了解猪圆环病毒2型(PCV2)当前流行分离株的基因型和进化特征,本研究对PCV2阳性临床样品进行分离鉴定,并对分离毒株进行全基因组序列扩增、测序及遗传进化分析,利用MegAlign7.0和DNAstar软件对分离株ORF2基因编码的Cap蛋白进行氨基酸变异分析和抗原指数预测分析。测序结果显示,PCV2分离株(SMU-2022)的全基因组序列长度为1 767 nt。全基因组和Cap蛋白的遗传进化树结果均显示分离株属于PCV2d基因型,与国内外46株参考毒株的相似性在91.8%~99.1%之间,其中与QZ1410毒株的相似性最高,亲缘关系最接近。关键氨基酸位点变异分析表明,在Cap蛋白上有2个氨基酸特异性突变位点,分别是V30L和T232K。抗原指数分析发现,分离株的Cap蛋白抗原指数与4株疫苗株相比差异较大,主要集中在第20-30、40-75、90-100、130-140、195-205、210-220位氨基酸这6个区域。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(pcv2) ORF2基因型 CAP蛋白 抗原指数 遗传进化分析
下载PDF
猪圆环病毒2型灭活疫苗及其亚单位疫苗对PCV2d流行毒株攻毒保护试验
5
作者 夏伟 王石 +5 位作者 宋松林 廉维 边少国 王富猛 张建磊 何玉友 《畜牧兽医科技信息》 2023年第10期40-43,共4页
为了评价商品化猪圆环病毒2型(PCV2)全病毒灭活疫苗与PCV2-Cap亚单位疫苗对PCV2d亚型流行毒株的保护情况。选用5周龄PCV2抗原和抗体均为阴性仔猪15头,随机分成3组,每组5头,其中两组分别进行PCV2全病毒灭活疫苗和PCV2-Cap亚单位疫苗免疫... 为了评价商品化猪圆环病毒2型(PCV2)全病毒灭活疫苗与PCV2-Cap亚单位疫苗对PCV2d亚型流行毒株的保护情况。选用5周龄PCV2抗原和抗体均为阴性仔猪15头,随机分成3组,每组5头,其中两组分别进行PCV2全病毒灭活疫苗和PCV2-Cap亚单位疫苗免疫,首次免疫1mL,间隔21d以相同剂量和途径重复免疫1mL。二次免疫14d采血分离血清,采用IPMA法检测抗体,PCV2全病毒灭活疫苗于免疫第2周抗体转阳,第5周抗体效价达到均不低于800倍,其中PCV2-Cap重组亚单位病毒样颗粒疫苗免疫组试验猪抗体效价为最高,可达到1:3200。以PCV2d流行毒株进行攻毒,免疫组试验猪的相对增重率显著高于对照组,病理组织学观察显示,免疫组试验猪均未见明显的病理变化,攻毒对照试验猪腹股沟淋巴结出现一定程度的病理损伤。PCV2全病毒灭活疫苗与PCV2-Cap亚单位疫苗均可获得完全保护。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(pcv2) pcv2d基因亚型毒株 免疫保护
下载PDF
CRISPR/Cas9系统介导的猪MRC1修饰基因降低PCV2复制的研究 被引量:1
6
作者 费晓钰 石超群 +2 位作者 刘雪明 苏峰 姜运良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期934-946,共13页
旨在获得MRC1基因修饰的PCV2靶细胞并在体外验证该细胞对PCV2的抑制作用,为后续基因编辑猪的生产提供理论基础。本研究:1)首先利用基因工程技术建立了慢病毒介导的高效同源重组载体和CRISPR/Cas9基因靶向系统;2)通过细胞和分子生物学技... 旨在获得MRC1基因修饰的PCV2靶细胞并在体外验证该细胞对PCV2的抑制作用,为后续基因编辑猪的生产提供理论基础。本研究:1)首先利用基因工程技术建立了慢病毒介导的高效同源重组载体和CRISPR/Cas9基因靶向系统;2)通过细胞和分子生物学技术筛选了定点整合表达MRC1的PK15细胞系;3)随后通过细胞试验和PCV2的攻毒试验对其抗PCV2的作用进行了相关验证。结果:1)成功构建了含有红色荧光标记基因、嘌呤霉素标记基因、同向LoxP序列和多克隆位点的pLV-LoxP-mCherry-puro-LoxP载体,同时根据不同猪品种间MRC1基因启动子差异序列设计同源臂,成功构建同源重组载体和靶向同源臂的CRISPR/Cas9基因靶向载体;2)通过病毒包装和共转染的方法,利用嘌呤霉素筛选并验证了MRC1启动子基因编辑的PK15细胞株,成功将MRC1基因转录起始位点上游多出的14 bp敲入到PK15细胞中;3)随后对基因编辑的PK15细胞系进行抗病毒验证,MRC1基因编辑的PK15细胞株MRC1的蛋白表达量显著增高(P<0.05),同时显著降低了PCV2的复制(P<0.05)。MRC1启动子编辑的PK15细胞中MRC1蛋白表达量显著增高,该位点可以用于抗PCV2猪的制备。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 Cre-LoxP系统 pcv2 MRC1
下载PDF
PCV2-HPS二联亚单位疫苗对小鼠免疫保护效果的评价
7
作者 栾慧 龚俊 +6 位作者 赵馨雨 危艳武 李刚 刘长明 刘思国 张万江 王春来 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期65-71,共7页
为评价猪圆环病毒2型-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗(以下简称二联苗)对小鼠的免疫保护效果,本研究将猪圆环病毒2型(PCV2)cap基因克隆至pMAL-c5X载体中,并通过原核系统表达了重组Cap蛋白(rCap)。通过western blot检测显示原核表达的rCap与... 为评价猪圆环病毒2型-副猪嗜血杆菌二联亚单位疫苗(以下简称二联苗)对小鼠的免疫保护效果,本研究将猪圆环病毒2型(PCV2)cap基因克隆至pMAL-c5X载体中,并通过原核系统表达了重组Cap蛋白(rCap)。通过western blot检测显示原核表达的rCap与PCV2单克隆抗体发生特异性结合,表明rCap具有良好的反应原性。利用本研究室已经纯化并保存的副猪嗜血杆菌(HPS)重组蛋白rCdtB、rAfua和rOPPA,与rCap蛋白以及佐剂ISA201VG混合乳化后制成PCV2-HPS二联亚单位疫苗,疫苗中各蛋白(rCdtB、rAfua、rOPPA、rCap)浓度均为50μg/300μL。将60只6周龄BALB/c小鼠随机均分成免疫组和对照组,采用背部多点注射方式免疫,首免后间隔14 d二免。一免后以及二免后的14 d分别通过颌下采血方法采血,通过间接ELISA方法检测各组小鼠血清中的特异性抗体,结果显示,二免后14 d,免疫组小鼠血清中CdtB、OPPA、Afua抗体水平分别与PBS+ISA201VG对照组和免疫之前比较均极显著提高(P<0.0001);利用PCV2免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)抗体检测试剂盒检测各组小鼠血清抗体,结果显示在攻毒前PBS组均未检测到PCV2抗体,免疫组二免后14 d抗体水平为1∶800。二免后14 d,将免疫组和PBS组各随机分为3组(每组10只小鼠)进行攻毒保护试验,结果显示二联苗对PCV2攻毒组小鼠的免疫保护率为80%,对HPS5型HN10株攻毒组小鼠的免疫保护率为70%,与对照组比较差异极显著(P<0.01);对HPS13型ZD12株攻毒组小鼠的免疫保护率为80%,与对照组比较差异极显著(P<0.001)。上述结果首次表明,原核表达的rCap具有良好的免疫原性,PCV2-HPS二联亚单位疫苗对小鼠具有一定的保护效果,为后续PCV2-HPS二联亚单位疫苗的研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 pcv2 副猪嗜血杆菌 亚单位疫苗 小鼠免疫效果
下载PDF
PCV2 Cap蛋白原核表达、纯化及多克隆抗体的制备
8
作者 李钰昌 郑亮 +3 位作者 张华 吴志军 肖莉杰 曹宏伟 《黑龙江八一农垦大学学报》 2023年第1期78-83,130,共7页
猪圆环病毒2型是一种常见的猪感染性病毒,Cap蛋白为猪圆环病毒2型的核衣壳蛋白,也是该病毒最主要的结构蛋白,是目前猪圆环病毒2型基因工程疫苗研制的关键蛋白。研究构建了Cap蛋白原核表达质粒pET28a-His-Cap,转化Transetta(DE3)表达菌株... 猪圆环病毒2型是一种常见的猪感染性病毒,Cap蛋白为猪圆环病毒2型的核衣壳蛋白,也是该病毒最主要的结构蛋白,是目前猪圆环病毒2型基因工程疫苗研制的关键蛋白。研究构建了Cap蛋白原核表达质粒pET28a-His-Cap,转化Transetta(DE3)表达菌株,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE及蛋白免疫印迹试验验证,重组蛋白主要以可溶性形式表达,少数为包涵体蛋白。以Ni-NTA树脂进行蛋白纯化,纯化后蛋白浓度为629μg·mL^(-1),采用透析袋浓缩将重组蛋白浓缩,浓缩后蛋白终浓度为1.8 mg·mL^(-1)。将重组蛋白与弗氏佐剂等体积混合,充分乳化后制备抗原,免疫兔子采集全血,分离血清。经蛋白免疫印迹试验,该多抗与重组蛋白存在免疫反应性,ELISA检测抗体效价可达1∶32000,IFA试验证明该多抗能够特异性识别猪圆环病毒2型。Cap蛋白多克隆抗体的成功制备,为后续猪圆环病毒2型基因工程疫苗制备过程中验证Cap体外蛋白表达提供了材料。 展开更多
关键词 pcv2 Cap蛋白 原核表达 多克隆抗体
下载PDF
PRRS和PCV2共感染对猪场的影响及免疫策略
9
作者 汪志恒 向金梅 +5 位作者 陈文钦 杨茂春 于福来 赖庆光 张苗苗 万春云 《猪业科学》 2023年第11期67-70,共4页
猪圆环病毒2型(PCV2)和猪蓝耳病(PRRS)已经在世界范围内广泛流行,在我国流行趋势更加复杂,即使在养猪很少的区域,也容易看到这两个疾病的存在或共感染的情况,香港地区生猪保有量很低,有学者统计了香港特别行政区(HKSAR)PRRSV和PCV2的流... 猪圆环病毒2型(PCV2)和猪蓝耳病(PRRS)已经在世界范围内广泛流行,在我国流行趋势更加复杂,即使在养猪很少的区域,也容易看到这两个疾病的存在或共感染的情况,香港地区生猪保有量很低,有学者统计了香港特别行政区(HKSAR)PRRSV和PCV2的流行病学数据,从2020年2月3日至2021年3月11日,对香港特别行政区40个猪场中的29个进行了一项调查,用实时PCR检测了来自7个年龄组(代表关键生产阶段)的猪只。 展开更多
关键词 共感染 pcv2 猪蓝耳病 PRRS 流行病学数据 实时PCR 香港特别行政区 免疫策略
下载PDF
槲皮苷对PCV2感染猪肺泡巨噬细胞吞噬活性的影响
10
作者 易首利 韦玉衡 +3 位作者 赵怡 匡娜 曹永强 胡庭俊 《现代畜牧兽医》 2023年第2期1-4,共4页
试验旨在研究槲皮苷(QUE)对正常3D4/2细胞吞噬活性及对感染猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的3D4/2细胞吞噬活性的影响。试验设置细胞对照组、0.05%DMSO对照组和不同浓度的槲皮苷药物QUE组(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0μmol/L),采用中... 试验旨在研究槲皮苷(QUE)对正常3D4/2细胞吞噬活性及对感染猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的3D4/2细胞吞噬活性的影响。试验设置细胞对照组、0.05%DMSO对照组和不同浓度的槲皮苷药物QUE组(12.5、25.0、50.0、100.0、200.0、400.0μmol/L),采用中性红法测定QUE在36 h内对3D4/2细胞吞噬活性及对感染PCV2的3D4/2细胞吞噬活性的影响。结果表明,与对照组相比,25.0μmol/L和50.0μmol/L的QUE处理后显著提高了3D4/2细胞的吞噬指数(P<0.05);100.0~400.0μmol/L的QUE处理后极显著提高3D4/2细胞的吞噬指数(P<0.01)。与PCV2阳性对照组相比,不同浓度的QUE (12.5~400.0μmol/L)处理36 h后均能够极显著提高PCV2感染3D4/2细胞的吞噬指数(P<0.01)。与对照组相比,100.0、200.0、400.0μmol/L的QUE极显著提高了细胞吞噬指数(P<0.01)。研究表明,QUE对3D4/2细胞具有一定的保护作用与免疫调节作用,对其吞噬活性具有良好的促进作用。 展开更多
关键词 槲皮苷 pcv2 吞噬活性
下载PDF
AIM2炎症小体在PCV2诱导巨噬细胞炎症反应中的作用
11
作者 王丹 宋江伟 +1 位作者 王菁 全荣 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期36-41,共6页
猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)感染引起的猪圆环病毒病(PCVD)严重危害世界养猪业,PCV2能够引起仔猪免疫抑制,其具体机制仍需要进一步探索。巨噬细胞是重要的免疫细胞,探索PCV2对巨噬细胞活化炎症小体的调控能够帮助进一步阐... 猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)感染引起的猪圆环病毒病(PCVD)严重危害世界养猪业,PCV2能够引起仔猪免疫抑制,其具体机制仍需要进一步探索。巨噬细胞是重要的免疫细胞,探索PCV2对巨噬细胞活化炎症小体的调控能够帮助进一步阐明PCV2致病机制。论文主要探讨PCV2感染对炎症小体活化的调控。分析了PCV2感染巨噬细胞对炎症小体通路的影响,用荧光定量PCR方法检测感染不同时期AIM2、caspase-1、IL-1β等的mRNA表达水平,利用蛋白免疫印迹法和ELISA法检测IL-1β蛋白水平的表达和上清的分泌,还检测了抑制AIM2表达对病毒感染介导炎性细胞因子产生的影响。通过上述研究发现,PCV2感染激活了AIM2炎症小体通路引发炎症细胞因子大量释放,推测其可能是PCV2引发过度炎症反应的机制。 展开更多
关键词 猪2型圆环病毒 黑色素瘤缺乏因子2 炎症小体 白介素1Β
下载PDF
猪PRRSV和PCV2混合感染的诊断及全基因组遗传进化分析
12
作者 蔡雨函 刘小琬 +2 位作者 张霞 王雪涛 周远成 《四川畜牧兽医》 2023年第4期26-28,共3页
为查明某猪场病猪的死亡原因,对该场的典型病死猪进行病理剖检,无菌采集肺脏、肾脏、脾脏和淋巴结病料,提取核酸,进行荧光定量PCR检测和高通量测序,最后确诊该猪场的发病原因为PRRSV和PCV2的混合感染。对PRRSV和PCV2全基因组进行遗传进... 为查明某猪场病猪的死亡原因,对该场的典型病死猪进行病理剖检,无菌采集肺脏、肾脏、脾脏和淋巴结病料,提取核酸,进行荧光定量PCR检测和高通量测序,最后确诊该猪场的发病原因为PRRSV和PCV2的混合感染。对PRRSV和PCV2全基因组进行遗传进化分析,发现检测到的PRRSV属于VR2332-like亚群,与国内外26株参考毒株的核苷酸同源性为61.7%~99.8%;PCV2属于PCV2d基因型,与国内外31株参考毒株的同源性为54.7%~99.7%。 展开更多
关键词 PRRSV pcv2 高通量测序 遗传进化分析
下载PDF
山豆根多糖通过JAK-STAT/NF-κB信号通路干预PCV2感染免疫细胞炎性反应及免疫抑制的研究
13
作者 陈奇 柏晶晶 +2 位作者 谢小东 赵怡 胡庭俊 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第23期67-73,共7页
试验旨在探究山豆根多糖(SSP)对猪圆环病毒2型(PCV2)感染小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)炎性反应及免疫抑制的调节作用。SSP (100、200、400 mg/L)处理PCV2感染RAW264.7细胞16 h后,测定信号转导与转录激活子1、2 (STAT1、STAT2)... 试验旨在探究山豆根多糖(SSP)对猪圆环病毒2型(PCV2)感染小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)炎性反应及免疫抑制的调节作用。SSP (100、200、400 mg/L)处理PCV2感染RAW264.7细胞16 h后,测定信号转导与转录激活子1、2 (STAT1、STAT2)、Janus激酶1 (JAK1)、酪氨酸激酶2 (TYK2)、趋化因子C-C配体3 (Ccl3)、趋化因子C-X-C配体2 (CXCL2)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、REL原癌基因(REL proto-oncogene)、NF-κB亚基(Rel)、B细胞增强剂κ轻链基因增强剂α、δ核因子抑制因子(Nfκbia、Nfκbid)和B细胞增强剂κ轻链基因增强剂ζ核因子抑制因子(Nfκbiz)的mRNA表达。测定细胞中磷酸化前后信号转导与转录激活子1、2 (Stat1、Stat2、p-Stat1、p-Stat2)、磷酸化前后核因子κB抑制因子(IκB、p-IκB)、磷酸化前后核因子κB亚单位p65 (p65、p-p65)、CXCL2,磷酸化前后的Janus激酶1 (JAK1、p-JAK1)和TYK2的蛋白表达水平。测定细胞上清白细胞介素-1β (IL-1β)、干扰素-α (IFN-α)、干扰素-β (IFN-β)和TNF-α的水平。结果显示,PCV2感染RAW264.7细胞16 h后,STAT1、STAT2、JAK1、TYK2和Nfκbia的mRNA表达水平显著上调(P<0.05),Ccl3、CXCL2、TNF-α、Rel、Nfκbid和Nfκbiz的mRNA表达水平显著下调(P<0.05);Stat1、p-Stat1、Stat2、p-Stat2、JAK1、p-JAK1和Tyk2的蛋白表达水平显著上调(P<0.05),IκB、p-IκB、p65、p-p65和CXCL2的蛋白表达水平显著下调(P<0.05),200 mg/L SSP可以显著干预上述因子表达水平的异常表达(P<0.05)。研究表明,SSP通过Janus激酶-信号传导及转录激活因子/核因子激活的B细胞的κ-轻链增强(JAKSTAT/NFκB)信号通路调节PCV2感染诱导的炎性反应和免疫抑制。 展开更多
关键词 山豆根多糖 猪圆环病毒2型 炎性反应 免疫抑制 信号通路
原文传递
黄芪多糖对PCV2阳性猪外周血免疫细胞及相关细胞因子的影响 被引量:18
14
作者 赵娟 刘凤华 +5 位作者 邱河辉 王安如 朱晓宇 程桂林 王伟 许剑琴 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2010年第3期3-5,共3页
检测外周血T淋巴细胞、嗜中性粒细胞、CD4+、CD8+细胞百分数及IL-2、IL-4和IFN-γ含量的变化,研究黄芪多糖(APS)对PCV2阳性猪免疫功能的调节作用。结果显示,APS能显著增加外周血T淋巴细胞、NBT阳性细胞、CD4+T细胞百分数及IL-2、IL-4、I... 检测外周血T淋巴细胞、嗜中性粒细胞、CD4+、CD8+细胞百分数及IL-2、IL-4和IFN-γ含量的变化,研究黄芪多糖(APS)对PCV2阳性猪免疫功能的调节作用。结果显示,APS能显著增加外周血T淋巴细胞、NBT阳性细胞、CD4+T细胞百分数及IL-2、IL-4、IFN-γ含量,显著降低CD8+T细胞百分数,推测APS通过上调CD4+细胞百分数、CD4+/CD8+及Th1反应恢复正常免疫机能。 展开更多
关键词 pcv2阳性猪 黄芪多糖 免疫细胞 IL-2 IL-4 IFN-γ
下载PDF
PRRSV与PCV2体外共感染对猪肺泡巨噬细胞免疫学功能的影响 被引量:12
15
作者 冯志新 姜平 +1 位作者 王先炜 李玉峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期950-955,共6页
制备猪肺泡巨噬细胞,分别接种PCV2、PRRSV、PCV2+PRRSV(先接种PCV2,12h后接种PRRSV)、PRRSV+PCV2(先接种PRRSV,12h后接种PCV2)、PRRSV/PCV2(同时接种)和对照组。接种后不同时间观察细胞病变(CPE),并用real-time PCR和IFA方法检测PRRSV和... 制备猪肺泡巨噬细胞,分别接种PCV2、PRRSV、PCV2+PRRSV(先接种PCV2,12h后接种PRRSV)、PRRSV+PCV2(先接种PRRSV,12h后接种PCV2)、PRRSV/PCV2(同时接种)和对照组。接种后不同时间观察细胞病变(CPE),并用real-time PCR和IFA方法检测PRRSV和PCV2滴度,INF-α、INF-γ、TNF-α、IL-8和IL-10的mRNA。结果为:①PRRSV能在PAM中增殖,有CPE;PCV2在PAM中感染率较低,无CPE。②PRRSV对PCV2增殖无明显影响。PCV2先于或同时与PRRSV感染对PRRSV的复制具有抑制作用,而PCV2后于PPRSV感染,可促进PRRSV增殖。③PCV2单独感染PAM后能促进INF-α、INF-γ、IL-8和IL-10的大量表达,对TNF-α的表达量影响不大。④PCV2与PRRSV混合感染,尤其是PCV2后于PRRSV感染后,TNF-α、IL-8和IL-10的表达量与单感染组相比明显增加,而INF-γ的表达量明显受到抑制。实验结果表明,PCV2感染时间对PRRSV的增殖影响不同,PRRSV感染后如果再感染PCV2,可以明显促进PRRSV病毒增殖;两种病毒共同刺激了TNF-α、IL-8和IL-10的大量表达,抑制了抗病毒因子INF-γ的表达,从而可能抑制体液免疫和细胞免疫,加重了病理学免疫应答。 展开更多
关键词 PRRSV pcv2 共感染 猪肺泡巨噬细胞 免疫学功能
下载PDF
猪PRRSV单独感染及与PCV2混合感染的免疫病理学研究 被引量:27
16
作者 王天户 娄忠子 刘思当 《西南农业学报》 CSCD 2008年第1期187-190,共4页
通过人工感染40日龄断奶仔猪建立PRRSV单独感染以及与PCV2混合感染病理模型,对两种感染所致猪免疫器官组织和外周血淋巴细胞的病理变化进行比较研究。结果表明PRRSV单独感染以及与PCV2混合感染均能引起猪的淋巴结指数升高,混感组多处淋... 通过人工感染40日龄断奶仔猪建立PRRSV单独感染以及与PCV2混合感染病理模型,对两种感染所致猪免疫器官组织和外周血淋巴细胞的病理变化进行比较研究。结果表明PRRSV单独感染以及与PCV2混合感染均能引起猪的淋巴结指数升高,混感组多处淋巴结指数显著高于PRRSV单独感染组,病理组织学观察表明,指数升高并非缘于淋巴组织增生,而是急性渗出性或慢性特殊肉芽肿性炎症所致。PRRSV单独感染能引起免疫器官以淋巴细胞及巨噬细胞变性坏死为特征的急性炎症,而混合感染不但加重了上述病变,后期还造成脾脏严重的淋巴滤泡缺失和淋巴结肉芽肿性炎症。两种感染均可诱发不同程度的淋巴细胞和巨噬细胞凋亡,但混合感染时细胞凋亡更加严重且持续时间更长。凋亡主要见于早期,后期则主要表现坏死性病变。早期淋巴细胞凋亡以及后期淋巴组织坏死是造成免疫器官实质细胞缺失,机体出现免疫抑制的主要原因之一。 展开更多
关键词 断奶仔猪 PRRSV pcv2 混合感染 病理变化 细胞凋亡
下载PDF
PCV2a-ORF3基因缺失株感染性克隆的构建 被引量:7
17
作者 湛洋 胡意 +2 位作者 王东亮 蔡杰 邓治邦 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期351-355,共5页
为构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的感染性克隆及其ORF3缺失的感染性克隆,本研究通过比较分析Gen Bank中8种亚型的PCV2基因组序列(各3株),设计了PCV2基因全长克隆引物,以从江西省萍乡市某猪场疑似感染断奶仔猪多系统衰竭综合征病死猪的病料... 为构建猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的感染性克隆及其ORF3缺失的感染性克隆,本研究通过比较分析Gen Bank中8种亚型的PCV2基因组序列(各3株),设计了PCV2基因全长克隆引物,以从江西省萍乡市某猪场疑似感染断奶仔猪多系统衰竭综合征病死猪的病料中提取的DNA为模板,利用PCR方法扩增PCV2全长基因序列并进行测序。利用分子生物学软件对测序结果分析,结果表明所获得的克隆为PCV2a-2A基因型。采用重叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增病毒全长基因组DNA,克隆于p SP72载体中构建野生型PCV2a病毒株感染性克隆。此外,采用SOE-PCR方法,缺失野生型PCV2a感染性克隆中的阅读框3(ORF3),并将这两种重组质粒分别转染PK15细胞,盲传6代后经PCR和间接免疫荧光方法检测显示,构建的PCV2a病毒株与PCV2a-ORF3突变株克隆均具有感染性。本研究为进一步探究ORF3基因对PCV2致病机理和免疫原性的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 pcv2 ORF3基因 基因缺失 重叠延伸PCR
下载PDF
PCV2疫苗免疫效力评价体系的构思 被引量:9
18
作者 庞培 董伟 +3 位作者 刘沅 毛玉 李进军 邓治邦 《经济动物学报》 CAS 2016年第2期118-124,共7页
猪2型圆环病毒(PCV2)的发现和不断地演变,造成养猪业严重的经济损失,养猪业对该病毒及其疾病继续保持着重要关切,而疫苗是控制该疫情的关键。由于圆环病毒病(PCVAD)病情比较复杂,造成的危害无法用很直观的数据来描述疫苗免疫效果,需要... 猪2型圆环病毒(PCV2)的发现和不断地演变,造成养猪业严重的经济损失,养猪业对该病毒及其疾病继续保持着重要关切,而疫苗是控制该疫情的关键。由于圆环病毒病(PCVAD)病情比较复杂,造成的危害无法用很直观的数据来描述疫苗免疫效果,需要进行长期跟踪临床试验来确定其效力;各生产厂家有不同的评价标准和不同的针对性;母源抗体的存在对疫苗效果产生较大的影响;抗体水平与保护力不成正比等因素,需要对PCV2疫苗免疫效力进行综合性评价。文中从动物模型的选择、临床的观察、免疫学、病原学、病理学五方面综合评价不同类型疫苗免疫效力水平,为PCV2疫苗免疫效力的评价提供系统化的思路,以期为正确评价疫苗效力提供参考。 展开更多
关键词 pcv2 疫苗 免疫效力 评价
下载PDF
PCV2和PCV3双重纳米PCR方法的建立及初步应用 被引量:6
19
作者 梁琳 逄春华 +5 位作者 罗亚坤 周灵 王静 刘畅 刘琪 崔尚金 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3440-3445,共6页
本研究旨在建立一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重纳米PCR(nanodPCR)方法,同时应用该方法对PCV2和PCV3进行检测。参考GenBank中登录的PCV2和PCV3型基因序列分别设计特异性引物,对nano-dPCR的反应条件进行优化... 本研究旨在建立一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的双重纳米PCR(nanodPCR)方法,同时应用该方法对PCV2和PCV3进行检测。参考GenBank中登录的PCV2和PCV3型基因序列分别设计特异性引物,对nano-dPCR的反应条件进行优化;同时考察所建立的nano-dPCR检测方法的特异性和敏感性。结果显示,所建方法的特异性和敏感性良好,对PCV2和PCV3两种病毒的最低核酸检测量分别为93.2和91.6拷贝/μL,其敏感性比普通PCR高100倍。应用该方法对送检的265份临床样本进行检测,结果显示,PCV2和PCV3在猪群中存在普遍感染,PCV3和PCV2的阳性率分别为16.6%和14.7%,混合感染阳性率为6.8%。临床样品的检测结果表明,本试验建立的nano-dPCR方法为PCV2和PCV3早期感染进行快速、敏感鉴别诊断提供了新方法。 展开更多
关键词 双重纳米PCR 猪圆环病毒2型(pcv2) 猪圆环病毒3型(PCV3) 病原检测
下载PDF
5株PCV2四川株全基因组的克隆与遗传进化分析 被引量:4
20
作者 杨泽晓 马玉峰 +6 位作者 汪开毓 王印 赵希仑 姚学萍 任冉阳 陈平 胡凌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第4期1-9,16,共10页
[目的] 了解目前四川省猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学特征和遗传变异情况,探讨PCV2感染的控制对策。[方法] 根据GenBank中发表的PCV2基因组序列设计2对特异性引物,对2012-2014年临床送检的PCV2感染病例材料中的5株PCV2全基因组... [目的] 了解目前四川省猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学特征和遗传变异情况,探讨PCV2感染的控制对策。[方法] 根据GenBank中发表的PCV2基因组序列设计2对特异性引物,对2012-2014年临床送检的PCV2感染病例材料中的5株PCV2全基因组序列进行扩增测序,并利用DNAStar等生物信息分析软件对获得的PCV2基因组序列进行分子特性与遗传演变分析。[结果] 5株PCV2四川株全基因组序列长度都为1 767bp,均具有滚环复制起点(ORC)典型结构。序列比对和进化分析显示,5株PCV2四川株的基因序列同源性很高,基因组核苷酸序列及ORF1、ORF2和ORF3基因序列同源性分别为98.4%~99.9%,97.5%~99.6%,99.4%~100%和96.2%~100%,ORF1、ORF2和ORF3基因推导氨基酸序列同源性分别为98.4%~99%,99.6%和91.5%~100%;与47条参比PCV2毒株核苷酸序列的同源性比较发现,5株PCV2与国内一些新出现的PCV2毒株亲缘关系较近,且均属于PCV2d基因型毒株。[结论] 5株PCV2四川株之间尽管存在着不同程度的基因变异,但遗传进化相对较稳定。 展开更多
关键词 pcv2 基因克隆 遗传进化分析
下载PDF
上一页 1 2 47 下一页 到第
使用帮助 返回顶部