PDS基因突变与前庭水管扩大综合征 被引量：2

1

作者 雷雳 韩德民 《国外医学（耳鼻咽喉科学分册）》 2003年第4期198-201,共4页

前庭水管扩大综合征是一种以先天性前庭水管扩大伴感音神经性聋、耳鸣、眩晕为主要特征的疾病、随着高分辨率CT的临床应用,其检出率明显增高,但病因及其发病机制不详。最近研究表明,前庭水管扩大综合征具有家族遗传倾向,遗传基因与Pend... 前庭水管扩大综合征是一种以先天性前庭水管扩大伴感音神经性聋、耳鸣、眩晕为主要特征的疾病、随着高分辨率CT的临床应用,其检出率明显增高,但病因及其发病机制不详。最近研究表明,前庭水管扩大综合征具有家族遗传倾向,遗传基因与Pendred综合征致病基因PDS位置重叠,并可检测出相关基因突变位点。本文就有关的主要研究进行综述。 展开更多

关键词 前庭水管扩大综合征 pds基因 基因突变 定位克隆 遗传基因 高分辨率CT 临床应用

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PDS基因检测—诊断大前庭水管综合征的新方法 被引量：19

2

作者 戴朴 黄德亮 +9 位作者 王嘉陵 冯勃 翟所强 康东洋 张昕 刘新 曹菊阳 李梅 刘丽贤 袁慧军 《中华耳科学杂志》 CSCD 2005年第4期241-244,共4页

目的探讨利用基因诊断方法先于颞骨CT诊断大前庭水管的可行性和优越性。方法两个家庭各有两个子女患神经性耳聋,家庭1后代为姐妹,家庭2后代为姐弟。所有患者和父母均采集外周血并提取DNA,以试剂盒方法检测PDS基因IVS7-2位点的A-G突变情... 目的探讨利用基因诊断方法先于颞骨CT诊断大前庭水管的可行性和优越性。方法两个家庭各有两个子女患神经性耳聋,家庭1后代为姐妹,家庭2后代为姐弟。所有患者和父母均采集外周血并提取DNA,以试剂盒方法检测PDS基因IVS7-2位点的A-G突变情况,并以序列分析方法分析外显子7+8和19的序列,两个家庭的耳聋患者均行颞骨CT检查。结果两个家系的共同特点为父母非近亲结婚,听力均正常,父母双方家族内无其他成员发生耳聋,但两个家庭均有两个子女患病,患者临床特征为有一定的残余听力,交流良好但发音略含混。试剂盒方法发现家庭1中两个患儿和其父母均见异常条带,Exon7+8序列分析结果显示家系1两个患儿均具有IVS7-2A-G纯合突变,其父母均携带IVS7-2A-G杂合突变,建议两个患儿行颞骨CT检查,报告均为前庭水管扩大。试剂盒方法发现家庭2中一个患儿和其母见异常条带,Exon7+8序列分析结果显示家系2具有异常条带患儿及其母具有IVS7-2A-G杂合突变,进一步的序列分析见此患儿及其父携带PDS2168A-G杂合突变,即此患儿具有PDS的复合杂合突变,随后的颞骨CT检查发现具有异常条带的患儿为前庭水管扩大,而病例4不具有PDS的复合突变,CT显示无前庭水管扩大。结论PDS基因诊断技术在具有PDSIVS7-2A-G热点突变的病例中可以成为颞骨CT的替代诊断工具首先诊断大前庭水管综合征,此项技术在常规耳聋病因学诊断、大规模耳聋患者的病因学筛查和远程医疗诊断方面有较好的应用前景。 展开更多

关键词 大前庭水管综合征 pds(SLC26A4)基因 诊断工具 计算机断层扫描

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姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)下调Wnt5a表达抑制A549人肺癌细胞增殖

3

作者 马丽 马童童 +3 位作者 周文静 李娟 李玉云 徐慧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期15-20,共6页

目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测... 目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测细胞迁移的情况;Western blot法检测A549细胞PDS5B及无翅基因5a(Wnt5a)的蛋白表达;共同转染PDS5B小干涉RNA(siRNA)及Wnt5a siRNA,TranswellTM检测细胞迁移的情况。结果与转染阴性对照组相比,转染PDS5B siRNA后,PDS5B蛋白表达明显下降且A549细胞增殖能力、细胞集落形成率、迁移能力均明显提高,Wnt5a的表达升高;过表达PDS5B后,则结果相反;共转实验显示Wnt5a可以抵抗PDS5B对A549细胞的抑制作用。结论PDS5B通过下调Wnt5a表达抑制肺癌细胞增殖。 展开更多

关键词 姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(pds5B) A549肺癌细胞 无翅基因5a(Wnt5a) 癌细胞生物学

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中国水仙八氢番茄红素脱氢酶基因(PDS)的克隆及表达分析 被引量：22

4

作者 陈段芬 彭镇华 高志民 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第3期574-578,共5页

八氢番茄红素脱氢酶(PDS)是影响类胡萝卜素合成的一个重要限速酶,在植物花色发育过程中起着重要作用。采用RT-PCR技术从中国水仙(Narcissustazetta var.chinensis)幼嫩花蕾中分离到一个新的水仙花色发育相关的PDS基因,命名为NTPDS1(GenB... 八氢番茄红素脱氢酶(PDS)是影响类胡萝卜素合成的一个重要限速酶,在植物花色发育过程中起着重要作用。采用RT-PCR技术从中国水仙(Narcissustazetta var.chinensis)幼嫩花蕾中分离到一个新的水仙花色发育相关的PDS基因,命名为NTPDS1(GenBank登记号:EU138883)。该基因长1719bp,具有一个1713bp的完整开放读码框(ORF),编码570个氨基酸。序列分析表明,NTPDS1编码的氨基酸序列与其它植物的PDS蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示,NTPDS1与喇叭水仙亲缘关系最近。利用半定量PCR技术进行组织表达模式分析发现,该基因在中国水仙的花、叶片和根中均有表达,但以花器官中表达量最高;在花瓣和副冠中的表达量高于雄蕊和雌蕊。 展开更多

关键词 中国水仙 pds基因 序列分析 半定量PCR

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家族性大前庭水管患者的PDS基因型分析 被引量：11

5

作者 戴朴 韩东一 +10 位作者 曹菊阳 翟所强 康东洋 刘新 袁慧军 张昕 李梅 刘丽贤 冯博 杨伟炎 吴柏林 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2006年第4期147-150,共4页

目的：分析2个大前庭水管家系中患者的临床表现及基因型。方法：应用PDS（SLC26A4）基因检测方法进行2个家系成员的基因型分析。所有患者和父母均采集外周血，以试剂盒方法提取DNA。先行Exon7＋8序列分析，未见突变后再扩增其余17个片... 目的：分析2个大前庭水管家系中患者的临床表现及基因型。方法：应用PDS（SLC26A4）基因检测方法进行2个家系成员的基因型分析。所有患者和父母均采集外周血，以试剂盒方法提取DNA。先行Exon7＋8序列分析，未见突变后再扩增其余17个片段，以覆盖PDS基因全部cDNA序列及每个外显子前后的剪切区序列，以变性高效液相色谱仪分析每个扩增子，如待测标本与对照组标本的混合物的过柱波形与对照组相比有前移、后移或有明显的波形畸变，特别是出现2～4个波峰，则判定为待测标本的扩增片段内可能存在序列变异，将此待测标本的扩增子进行全自动序列分析。结果：2个家系的共同特点为父母非近亲结婚，听力均正常，父母双方家族内无其他成员发生耳聋；但2个家系均有2个子女患病，患者临床特征为听力进行性下降，交流良好，但发声略含糊。家系1孪生姐妹在2年内3次纯音测听呈现听阈进行性增高；Exon7＋8序列分析结果显示孪生姐妹均具有IVS7—2A—G纯合突变，其父母均携带IVS7—2A—G杂合突变。家系2先证者发现DHPLC异常波形2个，分别分布在外显子2和外显子10，序列分析发现先证者的外显子10存在T410M和1199ins T复合突变，其兄具有同样的复合突变。结论：家族性大前庭水管综合征是典型的遗传性疾病，单个家族内患病个体具有相似的临床表现和相同的变异基因型。 展开更多

关键词 大前庭水管综合征 基因 pds基因型

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海南粗榧PDS基因克隆与茉莉酸甲酯诱导表达分析 被引量：2

6

作者 乔飞 徐子健 +2 位作者 龙娅丽 丛汉卿 江雪飞 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期129-135,共7页

八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因是类胡萝卜素生物合成途径中关键基因,它参与叶绿体光保护、脱落酸合成等多种生物代谢,同时也是VIGS技术中常用的指示基因。本研究利用同源克隆技术克隆并分析了海南粗榧八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因,结果表... 八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因是类胡萝卜素生物合成途径中关键基因,它参与叶绿体光保护、脱落酸合成等多种生物代谢,同时也是VIGS技术中常用的指示基因。本研究利用同源克隆技术克隆并分析了海南粗榧八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因,结果表明:海南粗榧PDS基因,c DNA全长1 758 bp,命名为Cm PDS(Gen Bank登录号:KX766035),其编码585个氨基酸的开放阅读框。预测该基因编码蛋白质分子量为64.99 k D,其等电位为7.11,是理化性质稳定的亲水蛋白。经过氨基酸序列比对,发现海南粗榧中的PDS和红掌、中国水仙的PDS同源性最高,为85%;与其他作物的PDS同源性也都在70%以上,并且包含一个明显的保守结构域。此外,通过施加茉莉酸甲酯来模拟逆境信号,发现Cm PDS基因表达量呈现了先快速下降,然后逐步恢复到正常表达水平的趋势。暗示茉莉酸信号启动的抗性机制会抑制植物的光保护机制。同时本研究也为利用VIGS技术鉴定和挖掘海南粗榧抗癌生物碱合成酶相关基因奠定基础。 展开更多

关键词 海南粗榧 pds基因 序列分析 茉莉酸甲酯

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番茄八氢番茄红素脱饱和酶基因(Pds)启动子的克隆

7

作者 万群 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第8期84-86,共3页

为研究具有果实特异性特点的启动子Pds(八氢番茄红素脱饱和酶基因)启动子的功能,根据GenBank中番茄八氢番茄红素脱饱和酶基因(Phytoene desaturase. Pds)的启动子序列(U46919),设计特异引物,通过巢式PCR从番茄基因组中分离了一段长1790b... 为研究具有果实特异性特点的启动子Pds(八氢番茄红素脱饱和酶基因)启动子的功能,根据GenBank中番茄八氢番茄红素脱饱和酶基因(Phytoene desaturase. Pds)的启动子序列(U46919),设计特异引物,通过巢式PCR从番茄基因组中分离了一段长1790bp的Pds启动子序列。将该片段插入到克隆载体pMD18-T中,转化大肠杆菌后,获得的阳性克隆经测序,结果表明所获得的序列和GenBank(U46919)中登录的序列完全一致,为研究Pds启动子的功能奠定了坚实的基础。 展开更多

关键词 番茄 pds基因 启动子

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盐藻PDS基因的同源克隆及在大肠杆菌中的表达 被引量：2

8

作者 周峰 黄非 白林含 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期149-155,共7页

【目的】八氢番茄红素脱氢酶PDS为真核膜结合蛋白,我们通过更换不同的表达策略,探索在大肠杆菌中表达真核膜结合蛋白的方式。【方法】利用RACE的方法克隆盐藻PDS的全长c DNA序列。利用原核表达载体p ET-28a构建p ET-28a-PDS表达载体;使... 【目的】八氢番茄红素脱氢酶PDS为真核膜结合蛋白,我们通过更换不同的表达策略,探索在大肠杆菌中表达真核膜结合蛋白的方式。【方法】利用RACE的方法克隆盐藻PDS的全长c DNA序列。利用原核表达载体p ET-28a构建p ET-28a-PDS表达载体;使用PLtac启动子替换T7启动子构建p ET-PLtacPDS表达载体;合成Mistic序列融合入p ET-28 a中构建了p ET-Mistic-PDS融合表达载体。分别转化入大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达。【结果】获得了盐藻PDS基因的全长c DNA序列2237 bp,开放阅读框为1749 bp,共编码582个氨基酸(NCBI登录号为GQ923693.1)。利用p ET-28a-PDS和p ET-PLtacPDS表达的PDS蛋白表达量低,并以包涵体形式存在;利用p ET-Mistic-PDS载体表达的PDS蛋白表达量明显提高,且大部分以可溶蛋白形式存在,具有脱氢酶活性。【结论】实验结果表明Mistic作为促溶标签能促进膜蛋白的正确折叠,提高蛋白的可溶性。蛋白酶活测定结果证明了Mistic的融合可以保持蛋白的天然活性。 展开更多

关键词 盐藻pds基因 同源克隆 原核表达 PLtac启动子 Mistic序列

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甜瓜果实八氢番茄红素脱氢酶基因(CmPDS)的克隆与表达 被引量：2

9

作者 赵军林 丛红滋 +2 位作者 苏长跃 于喜艳 王秀峰 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 2015年第4期481-486,共6页

以甜瓜自交系‘M01-3’果实cDNA 为模板,采用RT-PCR 和RACE 技术,克隆了甜瓜果实八氢番茄红素脱氢酶（PDS）基因cDNA 全长序列,命名为CmPDS（基因注册号：KC507802）.序列分析表明,该基因有开放阅读框1731 bp,编码576 个氨基酸,与其他植... 以甜瓜自交系‘M01-3’果实cDNA 为模板,采用RT-PCR 和RACE 技术,克隆了甜瓜果实八氢番茄红素脱氢酶（PDS）基因cDNA 全长序列,命名为CmPDS（基因注册号：KC507802）.序列分析表明,该基因有开放阅读框1731 bp,编码576 个氨基酸,与其他植物PDS 氨基酸序列具有较高的同源性,尤其与黄瓜、南瓜、苦瓜PDS 氨基酸序列高达92.6% - 87.8%.荧光定量分析表明,该基因在甜瓜不同器官中均有表达,在叶片和授粉后25 d 的果实中表达量较高,在根中表达量最低;随果实发育成熟,该基因表达量呈现先升高后降低趋势. 展开更多

关键词 甜瓜 pds基因 克隆 表达

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BSMV-sg系统介导的大麦基因编辑体系的建立

10

作者 刘永菊 姜燕燕 +4 位作者 薛瑞莹 刘光瑞 曹东 刘宝龙 李云 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期281-288,共8页

基因编辑元件递送系统是基因编辑技术在大麦中广泛应用的制约因素之一,建立无需遗传转化的基因编辑元件递送系统,对于进一步提高大麦基因编辑技术的利用效率,加快大麦育种进程具有重要意义。本研究利用大麦条纹花叶病毒(BSMV)作为八氢... 基因编辑元件递送系统是基因编辑技术在大麦中广泛应用的制约因素之一,建立无需遗传转化的基因编辑元件递送系统,对于进一步提高大麦基因编辑技术的利用效率,加快大麦育种进程具有重要意义。本研究利用大麦条纹花叶病毒(BSMV)作为八氢番茄红素脱氢酶基因PDS的sgRNA的递送系统,侵染烟草并接种大麦Cas9过表达株系的叶片,分析了大麦叶片中BSMV的侵染效果和PDS基因的编辑效率。结果表明,接种大麦植株的主茎新生叶片和分蘖叶片均含有BSMV,BSMV-sg能够在大麦体内复制并移动。接种大麦植株的主茎新生叶片和分蘖叶片呈现不同程度的白化表型,15份叶片的PDS基因在靶点区域存在着1个或多个变异,包括碱基的插入、缺失或替换,为体细胞编辑,第3分蘖具有更高比例的PDS等位变异。在150个M1子代植株中,筛选到1株纯合编辑植株。本研究在大麦中建立了基于BSMV的可遗传的基因编辑系统,为大麦基因组编辑提供了一种方便、高效的方法。 展开更多

关键词 基因编辑 pds基因 大麦条纹花叶病毒 大麦遗传转化

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玉林地区 G6PD 基因突变与新生儿病理性黄疸的相关性研究

11

作者 庞大志 刘燕萍 +2 位作者 李明强 梁毅 谭烈明 《中国科技期刊数据库 医药》 2023年第7期0193-0196,共4页

研究玉林地区葡萄糖6磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)基因突变与新生儿病理性黄疸的相关性。 方法 选择玉林市第一人民医院,玉林市妇幼保健院,玉林市红十字医院三家三甲级医院2019年1月-2022年1月期间收入的452例... 研究玉林地区葡萄糖6磷酸脱氢酶(Glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)基因突变与新生儿病理性黄疸的相关性。 方法 选择玉林市第一人民医院,玉林市妇幼保健院,玉林市红十字医院三家三甲级医院2019年1月-2022年1月期间收入的452例新生儿,研究患儿均参与G6PD缺乏症基因检测中,分析其与病理性黄疸发生相关性。结果 452例新生儿中,G6PD正常组男143例,女142例,G6PD缺乏组男83例,女84例;其中在男女差异上并无差异,P>0.05。G6PD正常组病理性黄疸111例,无病理性黄疸174例,G6PD缺乏组病理性黄疸102例,无病理性黄疸65例。基因突变类型为A95G(8例)、G392T(1例)、G871A(5例)、G1376T(29例)、G1388A(23例)。 结论 G6PD缺乏症是新生儿病理性黄疸发生的重要原因,及时进行新生儿G6PD筛查及G6PD缺乏症基因检测,能够准确对新生儿病理性黄疸进行诊断治疗,并做好指导干预工作。 展开更多

关键词 玉林地区 G6pd基因突变 新生儿 病理性黄疸

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115462例新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症筛查及基因突变分析

12

作者 张禾璇 杨雪 +4 位作者 王侣金 李林洁 张晓怡 刘兴宇 余蕾 《罕少疾病杂志》 2024年第2期115-117,共3页

目的了解贵阳地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症发病情况和基因突变特点,为贵阳地区G6PD缺乏症的防治提供科学参考。方法募集该地区2020年8月至2023年1月出生的新生儿,应用荧光分析法对其血斑样... 目的了解贵阳地区葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD)缺乏症发病情况和基因突变特点,为贵阳地区G6PD缺乏症的防治提供科学参考。方法募集该地区2020年8月至2023年1月出生的新生儿,应用荧光分析法对其血斑样本进行G6PD酶活性筛查,召回初筛阳性儿,完成G6PD酶活性诊断及多色探针荧光PCR熔解曲线法(Multicolor probe melting curve analysis method,MMCA)基因突变分析。结果共募集115462例新生儿,G6PD酶活性筛查血斑样本共筛出阳性1606例,筛查阳性率为1.39%(1606/115462),其中男性为1.83%(1130/61801)、女性0.89%(476/53661),男女新生儿G6PD酶活性初筛阳性率差异有统计学意义(P<0.01);召回初筛阳性患儿,G6PD基因突变检出率87.07%(909/1044),其中男性为90.09%(764/848),女性为73.98%(145/196),男女间G6PD基因突变检出率差异有统计学意义(P<0.01)。本研究共检出13种类型G6PD基因单一突变型(c.1024 G>T、c.1388 G>A、c.95 A>G、c.1376 G>T、c.592C>T、c.871 G>A、c.519 C>T、c.392G>T、c.493 A>G、c.1004C>A、c.1360C>T、c.383T>C、c.517T>C)和6种复合突变型(c.1376 G>T杂合复合c.95A>G杂合突变、c.1024 G>T杂合复合c.95A>G杂合突变、c.1024 C>T杂合复合c.1388 G>A杂合突变、c.1024 C>T杂合复合c.519C>T杂合突变、c.1376 G>T杂合复合c.1024 C>T杂合突变、c.95A>G杂合复合c.1388 G>A杂合突变)。贵阳地区G6PD缺乏症基因突变类型复杂多样,G6PD突变常见类型为c.1024 C>T、c.1388G>A、c.95 A>G、c.1376G>T这四种类型。结论贵阳地区G6PD基因突变位点具有明显地域性特征,开展G6PD酶活性筛查及相关诊断检测,有利于本地区G6PD缺乏症的筛查、确诊、治疗和防控,有效提高出生人口素质。 展开更多

关键词 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症 G6pd基因型 基因突变 多色探针熔解曲线分析法

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利用VIGS技术在本氏烟中沉默枸杞PDS同源基因的研究 被引量：1

13

作者 曲玲 李彦龙 +6 位作者 焦恩宁 赵建华 秦垦 尹跃 周旋 安巍 曹有龙 《宁夏农林科技》 2021年第2期25-30,F0002,共7页

【目的】本项研究旨在通过建立一个异源VIGS体系,为枸杞重要性状相关基因的功能鉴定提供前期信息。【方法】从枸杞叶片中克隆获得409 bp长的八氢番茄红素脱饱和酶基因(phytoene desaturase,PDS)的编码区片段,构建入基于烟草脆裂病毒的V... 【目的】本项研究旨在通过建立一个异源VIGS体系,为枸杞重要性状相关基因的功能鉴定提供前期信息。【方法】从枸杞叶片中克隆获得409 bp长的八氢番茄红素脱饱和酶基因(phytoene desaturase,PDS)的编码区片段,构建入基于烟草脆裂病毒的VIGS空载体中,通过农杆菌介导的侵润接种,将重组的病毒沉默载体pTRV2-PDS转入本氏烟中。【结果】本氏烟幼苗被侵染接种后,沉默处理植株的叶片呈现整叶白化的表型,而阴性对照植株叶片一直未出现变白的症状,qRT-PCR检测表明,接种17 d后,与阴性对照植株相比,沉默处理植株PDS基因的表达显著地被抑制(P<0.05),说明枸杞PDS基因的同源基因在本氏烟中得到了有效沉默。【结论】该VIGS体系的构建,可用于对枸杞部分基因功能的快速初步鉴定和筛选,旨在提高枸杞基因功能研究的效率。 展开更多

关键词 枸杞 八氢番茄红素脱饱和酶基因(pds) 病毒诱导基因沉默(VIGS) 本氏烟

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云南彝族人群G6PD基因C1311T突变及单体型研究 被引量：5

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作者 何永蜀 李清 +3 位作者 杨芳 罗兰 龙榕 朱月春 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第18期16-20,共5页

目的研究云南彝族G6PD缺乏症患者及健康人群G6PD基因c DNAC1311T突变及复合IVS11T93C突变的单体型,探讨两种突变之间的连锁关系。方法应用SNa Pshot技术检测82例G6PD缺乏症患者、67例健康对照个体G6PD基因C1311T及IVS11T93C突变,用直接... 目的研究云南彝族G6PD缺乏症患者及健康人群G6PD基因c DNAC1311T突变及复合IVS11T93C突变的单体型,探讨两种突变之间的连锁关系。方法应用SNa Pshot技术检测82例G6PD缺乏症患者、67例健康对照个体G6PD基因C1311T及IVS11T93C突变,用直接计数法计算C1311T突变的基因频率及单体型频率,χ2检验进行两组间比较并统计学分析。结果云南彝族G6PD缺乏症患者和健康对照组1311T突变基因频率分别为0.13和0.15,1311C基因频率分别为0.87和0.85。1311T突变在彝族G6PD缺乏症患者和健康人群间比较差异无统计学意义(P>0.05)。发现c DNAC1311T突变与IVS11T93C突变紧密连锁。男性中存在三种单体型93C/1311T、93C/1311C、93T/1311C,女性中存在四种单体型93T/1311C、93CT/1311CT,单体型93C/1311C未见文献报道,两组人群各单体型分布统计学分析差异无统计学意义(P>0.05)。结论 G6PD基因1311T突变在彝族健康人群和G6PD缺乏症患者中普遍分布,1311T基因频率低于已报道的南亚和东南亚地区的频率,高于中国广东人群突变频率。C1311T与IVS11T93C是紧密连锁的突变位点,在彝族人群中常复合突变,其与G6PD酶活性的关系有待进一步研究。SNPshot方法在G6PD基因分型中有快速、灵敏的特点,并有利于女性杂合子的检出,本研究有助于理解云南省少数民族G6PD基因的遗传多态现象。 展开更多

关键词 G6pd基因 C1311T突变 SNPshot 彝族 云南省

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模拟微重力条件下昆明小鼠早期胚胎体外发育及其G6PD基因表达 被引量：2

15

作者 吴嫦丽 高淑静 +4 位作者 江青艳 冯定远 田秀春 杨向中 张守全 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期340-344,共5页

目的研究模拟微重力条件下培养的小鼠早期胚胎体外发育与1g重力条件下体外发育的差异。方法检测葡萄糖代谢关键酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)在昆明小鼠早期胚胎体外不同重力条件下培养各个时期基因的转录与表达。结果模拟微重力培养条件... 目的研究模拟微重力条件下培养的小鼠早期胚胎体外发育与1g重力条件下体外发育的差异。方法检测葡萄糖代谢关键酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)在昆明小鼠早期胚胎体外不同重力条件下培养各个时期基因的转录与表达。结果模拟微重力培养条件下,胚胎体外发育受到明显的抑制,模拟微重力不利于小鼠胚胎的体外发育。用CZB+10%FCS进行培养,2-细胞期培养的囊胚率为零,显著低于常规培养的23.92%;4-细胞期培养的囊胚率为18.44%,显著低于常规培养的80.12%。利用G6PD的内、外两对引物,检测昆明小鼠早期胚胎体外发育各个阶段的G6PD基因的转录与表达。从2-细胞期开始体外常规培养的胚胎,发育至4-、8-细胞胚胎、桑椹胚、囊胚及退化囊胚都有G6PD基因的转录与表达。在模拟微重力条件下,从2-细胞期开始培养的胚胎,发育至4-细胞期、桑椹期、囊胚期胚胎和退化桑椹胚皆有G6PD基因的转录和表达,而退化的2-细胞胚胎没有检测到G6PD基因的转录与表达。结论两种培养方式之间,G6PD基因的转录与表达不存在差异,说明早期胚胎都存在磷酸戊糖途径。 展开更多

关键词 模拟微重力 早期胚胎 G6pd基因 基因表达

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应用ARMS法检测中国人中两种常见G6PD基因突变型 被引量：6

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作者 任晓琴 杜传书 +1 位作者 陈路明 蒋玮莹 《中山医科大学学报》 CSCD 1997年第4期319-319,共1页

应用ＡＲＭＳ法检测中国人中两种常见Ｇ６ＰＤ基因突变型任晓琴杜传书陈路明蒋玮莹（中山医科大学医学遗传教研室；广州，５１００８９）主题词葡糖磷酸脱氢酶／遗传学；基因；突变；基因扩增中图号Ｒ３９４目前用于葡萄糖６磷酸脱... 应用ＡＲＭＳ法检测中国人中两种常见Ｇ６ＰＤ基因突变型任晓琴杜传书陈路明蒋玮莹（中山医科大学医学遗传教研室；广州，５１００８９）主题词葡糖磷酸脱氢酶／遗传学；基因；突变；基因扩增中图号Ｒ３９４目前用于葡萄糖６磷酸脱氢酶（ｇｌｕｃｏｓｅ６ｐｈｏｓ... 展开更多

关键词 葡糖磷酸脱氢酶 G6pd基因 突变型 G6pd缺乏症

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植物防御素PD5基因在毕赤酵母中的分泌表达 被引量：2

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作者 龙良鲲 邓名荣 +1 位作者 曲新勇 朱红惠 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期65-69,共5页

将植物防御素PD5基因克隆到载体pPIC9的XholⅠ和EcoRⅠ位点之间,得到重组载体pPIC9/PD5。pPIC9/PD5经BglⅡ线性化,电转化法转入PichiapastorisGS115,MD和MM平板筛选表型为His+MutS的转化子,PCR鉴定阳性转化子。转化子D24用BMGY培养至OD... 将植物防御素PD5基因克隆到载体pPIC9的XholⅠ和EcoRⅠ位点之间,得到重组载体pPIC9/PD5。pPIC9/PD5经BglⅡ线性化,电转化法转入PichiapastorisGS115,MD和MM平板筛选表型为His+MutS的转化子,PCR鉴定阳性转化子。转化子D24用BMGY培养至OD600为6·0时,经BMM诱导,上清液用Tricien-SDS-PAGE可检测到目标条带。同时经平板抑菌试验显示,D24的诱导发酵上清液可很好的抑制香蕉枯萎菌(Fusariumoxysporumf·sp·Cubense)及甘蓝黑腐菌Xanthomonacampestris(Smith)Dovosen的生长。植物防御素PD5基因在毕赤酵母中得到表达。 展开更多

关键词 植物防御素 pd5基因 分泌表达 抑菌活性

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人PD1胞外段基因的克隆、蛋白表达及抗体制备 被引量：3

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作者 史继静 刘朝奇 +2 位作者 李斌 覃晓玲 任东明 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期23-25,共3页

目的:研究人PD1的生物学活性,制备人PD1胞外段区域及其特异性抗体。方法:用PCR方法扩增编码人PD1胞外段的基因序列(hPD1ecr),将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白用SDS-PAGE和Western blo... 目的:研究人PD1的生物学活性,制备人PD1胞外段区域及其特异性抗体。方法:用PCR方法扩增编码人PD1胞外段的基因序列(hPD1ecr),将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白用SDS-PAGE和Western blot鉴定。纯化目的蛋白免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA),流式细胞术检测抗体滴度及其特异性。结果:原核表达载体pET28a(+)-PD1ecr成功构建,并可在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,得到的PD1胞外区蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定正确。用纯化蛋白免疫日本大耳白兔,制备的多克隆抗体具有较强免疫特异性。结论:得到纯化的人PD1胞外蛋白,制备的多克隆抗体能够检测自然状态下人PD1蛋白,为进一步研究PD1功能奠定了实验基础。 展开更多

关键词 人pd1胞外段基因 原核表达 免疫原性 多克隆抗体

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佛山地区小儿G6PD基因突变型G1376T的检测

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作者 范联 丁艳 付涌水 《实用医学杂志》 CAS 2002年第6期654-655,共2页

目的 :探讨佛山地区小儿G6PD基因突变G1376T的检测方法 ,观察该基因突变患儿的临床症状。方法 :使用突变特异性扩增系统 (amplificationrefractorymutationsystem ,ARMS)检测 40例G6PD缺乏症患儿静脉血。结果 :40例G6PD缺乏症患儿标本... 目的 :探讨佛山地区小儿G6PD基因突变G1376T的检测方法 ,观察该基因突变患儿的临床症状。方法 :使用突变特异性扩增系统 (amplificationrefractorymutationsystem ,ARMS)检测 40例G6PD缺乏症患儿静脉血。结果 :40例G6PD缺乏症患儿标本中测出G1376T突变 10例 ,占 2 5 % ;10例基因突变患儿均存在黄疸等临床症状。结论 :ARMS方式简单 ,快速 ,准确 ;G1376T是佛山地区G6PD缺乏症基因突变的常见类型之一。 展开更多

关键词 佛山地区 小儿 G6pd基因突变型 G1376T 检测 葡糖磷酸脱氢酶缺乏 遗传病

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猪防御素PD基因表达载体的构建

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作者 罗刚 魏泓 《四川动物》 CSCD 2003年第1期11-14,共4页

目的 -构建猪防御素PD基因表达载体。方法 -化学合成经过适当改造的带有双酶切位点的PD基因 ,将该基因定向插入带有相同酶切位点的融合表达质粒PinPoinTMXa 3的多克隆位点构建表达质粒。结果 -构建的表达载体经双酶切电泳分析及插入基... 目的 -构建猪防御素PD基因表达载体。方法 -化学合成经过适当改造的带有双酶切位点的PD基因 ,将该基因定向插入带有相同酶切位点的融合表达质粒PinPoinTMXa 3的多克隆位点构建表达质粒。结果 -构建的表达载体经双酶切电泳分析及插入基因片断序列分析 ,表明PD基因表达载体构建成功。结论 -PD基因表达载体的构建 ,为进一步获得PD基因的表达产物 ,研究其抗菌活性、抗菌机理打下基础。 展开更多

关键词 抗菌肽 猪防御素pd基因 表达载体

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