间质表皮转化因子通过PI3K/AKT/MMPs信号通路促进肺腺癌细胞的侵袭转移 被引量：15

1

作者 林祥博 石文静 +5 位作者 杨志一 张丽萍 周丹丹 郑荃 尹崇高 李洪利 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期648-654,共7页

间质表皮转化因子(mesenchymal to epithelial transition factor,MET)在多种癌症中异常表达,影响肿瘤的发生发展,但MET影响肺腺癌的分子机制并不明确。本研究收集3例淋巴结转移的肺腺癌组织(lung adenocarcinoma tissues,LAD)和3例无... 间质表皮转化因子(mesenchymal to epithelial transition factor,MET)在多种癌症中异常表达,影响肿瘤的发生发展,但MET影响肺腺癌的分子机制并不明确。本研究收集3例淋巴结转移的肺腺癌组织(lung adenocarcinoma tissues,LAD)和3例无淋巴结转移的肺腺癌组织,用于微阵列基因芯片分析。结果显示,与无淋巴结转移的肺腺癌组织相比,有淋巴结转移的肺腺癌组织中有1 314条mRNAs表达上调,400条mRNAs表达下调。其中,MET在有淋巴结转移的肺腺癌组织中表达显著升高。随机选取8个差异表达基因,对收集的潍坊医学院附属医院2014年2月至2017年2月间有淋巴结转移的肺腺癌组织和无淋巴结转移的肺腺癌组织各30例通过qRT-PCR实验进行微阵列基因芯片验证。结果显示,所选mRNAs的表达与微阵列结果一致,验证了微阵列基因芯片结果的准确性。通过Western印迹进一步检测MET的表达。结果显示,相较于正常肺上皮细胞,肺腺癌细胞中MET的表达显著升高。利用质粒转染,敲减肺腺癌细胞A549中的MET,Transwell侵袭实验结果显示,敲减MET后肺腺癌细胞的侵袭能力明显降低;对各细胞组进行EGF(epidermal growth factor)处理并检测PI3K/AKT/MMPs信号通路,Western印迹检测结果显示,敲减MET后,肺腺癌细胞中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和MMP-9的表达显著下降,AKT的磷酸化水平也显著下降。上述结果表明,MET可通过激活PI3K/AKT信号通路进而增加MMPs的表达促进肺腺癌的侵袭转移。 展开更多

关键词 肺腺癌 基因芯片 间质表皮转化因子 pi3k/akt/mmps信号通路

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miR-125a-5p通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭与转移 被引量：14

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作者 杨玉玲 王照岩 +3 位作者 杨志一 李洪利 尹崇高 刘雨清 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1145-1149,共5页

目的探讨miR-125a-5p抑制乳腺癌细胞侵袭与转移的潜在机制。方法采用实时荧光定量PCR检测组织及细胞中miR-125a-5p的表达量;利用瞬时转染技术将过表达质粒转染到MDA231中,Transwell侵袭实验检测miR-125a-5p对各组细胞侵袭的影响;Western... 目的探讨miR-125a-5p抑制乳腺癌细胞侵袭与转移的潜在机制。方法采用实时荧光定量PCR检测组织及细胞中miR-125a-5p的表达量;利用瞬时转染技术将过表达质粒转染到MDA231中,Transwell侵袭实验检测miR-125a-5p对各组细胞侵袭的影响;Western blot检测各组细胞Akt的磷酸化情况,以及基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9的表达量。结果通过临床标本的相关检测发现,miR-125a-5p在乳腺癌组织中的表达量明显低于癌旁相对正常组织,并且与淋巴结转移等有关。体外细胞培养实验发现,过表达miR-125a-5p细胞组的侵袭能力明显降低,Akt的磷酸化明显减弱,并且MMP-2和MMP-9表达量下降;而同时过表达GRB相关蛋白2(GRB-associated binding protein2,GAB2)和miR-125a-5p细胞组的侵袭能力明显增强,Akt的磷酸化明显增强,并且MMP-2和MMP-9表达量明显升高,揭示了GAB2和miR-125a-5p共同通过PI3K/Akt通路影响MMP-2和MMP-9的表达。结论 miR-125a-5p能够通过PI3K/Akt/MMP信号通路,抑制乳腺癌细胞的侵袭与转移。 展开更多

关键词 乳腺癌 miR-125a-5p pi3k/akt mmp-2 mmp-9 侵袭 转移

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桦褐孔菌多糖通过PI3K/Akt/NF-κB/MMP-9抑制哮喘小鼠气道重构 被引量：10

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作者 车楠 李莉 +1 位作者 李良昌 赵洪伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1654-1657,共4页

目的:探讨桦褐孔菌多糖(PIO)对哮喘气道重构的作用以及可能的作用机制。方法:40只雌性BALB/c小鼠随机分成对照组、模型组、桦褐孔菌多糖低剂量组(PIO-100)、桦褐孔菌多糖高剂量组(PIO-200)。体外卵清蛋白(OVA)诱导建立哮喘小鼠模型,支... 目的:探讨桦褐孔菌多糖(PIO)对哮喘气道重构的作用以及可能的作用机制。方法:40只雌性BALB/c小鼠随机分成对照组、模型组、桦褐孔菌多糖低剂量组(PIO-100)、桦褐孔菌多糖高剂量组(PIO-200)。体外卵清蛋白(OVA)诱导建立哮喘小鼠模型,支气管肺泡灌洗液(BALF)内细胞Diff-quik染色后观察细胞总数和各分类细胞数。肺组织切片HE染色和Masson染色观察肺部炎症情况。末次激发后检测小鼠气道高反应性,ELISA方法检测PIO对BALF中白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13和MMP-9表达的影响。Western blot方法检测PI3K、Akt、NF-κB以及MMP-9表达水平的变化。结果:与对照组相比,模型组中炎症细胞计数、IL-4、IL-5和IL-13表达升高,p-PI3K、p-Akt和MMP-9的表达以及NF-κB p65核转位增高(P<0. 05); PIO干预后,炎症细胞数、IL-4、IL-5和IL-13的表达明显下降,p-PI3K、p-Akt和MMP-9的表达以及NF-κB p65核转位明显降低(P<0. 05)。结论:PIO通过调控PI3K/Akt/NF-κB/MMP-9信号通路发挥对哮喘小鼠气道重构的抑制作用。 展开更多

关键词 桦褐孔菌多糖 气道重构 pi3k/akt NF-ΚB mmp-9

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二氢杨梅素对绒癌JAR细胞MMP-2、PI3K和Akt表达的影响 被引量：4

4

作者 雷贇涛 刘镭 +2 位作者 许倩 李玉红 崔莹 《承德医学院学报》 2018年第3期181-183,共3页

目的:研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对绒癌JAR细胞基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)mRNA、细胞磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)mRNA和蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)mRNA表达的影响。... 目的:研究二氢杨梅素(dihydromyricetin,DMY)对绒癌JAR细胞基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase2,MMP-2)mRNA、细胞磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol3-kinase,PI3K)mRNA和蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)mRNA表达的影响。方法:采用实时荧光定量PCR法检测浓度为60μg/ml的二氢杨梅素作用36h,绒癌JAR细胞MMP-2 mRNA、PI3K mRNA、Akt mRNA表达的变化,并分析JAR细胞MMP-2 mRNA表达水平与PI3K mRNA、Akt mRNA表达水平的相关性。结果:与对照组相比,浓度为60μg/ml的二氢杨梅素作用36h,JAR细胞MMP-2 mRNA、PI3K mRNA、Akt mRNA的表达水平明显降低(P<0.05);并且,JAR细胞MMP-2 mRNA表达水平与PI3K mRNA、Akt mRNA表达水平呈正相关关系(r=0.957、0.953,P<0.05)。结论:二氢杨梅素可能通过下调绒癌JAR细胞MMP-2基因的表达影响JAR细胞的侵袭和转移,其机制可能与影响PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多

关键词 二氢杨梅素 绒癌 mmp-2 pi3k akt

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异硫氰酸苯乙酯通过PI3K-NF-κB-MMP-9途径抑制结肠癌SW480细胞的迁移和侵袭 被引量：4

5

作者 魏付桥 谢文彪 +2 位作者 申清香 刘昌化 罗康宁 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第7期927-932,共6页

目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞SW480增殖侵袭的分子机制。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10,30和50μmol/L PEITC作用24 h,MTT法检测细胞的增殖;伤口愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响... 目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞SW480增殖侵袭的分子机制。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10,30和50μmol/L PEITC作用24 h,MTT法检测细胞的增殖;伤口愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响。荧光共振能量转移法检测基质金属蛋白酶9(MMP-9)的活性,RTPCR检测MMP-9 mRNA表达情况;Western blot检测PI3K和PTEN的表达和Akt、m TOR磷酸化,以及NF-κB核转位情况。荧光素酶报告基因分析NF-κB的活性。最后,建立裸鼠异种移植瘤动物模型,观察PEITC对异种移植瘤生长的抑制作用。结果 PEITC能在不影响细胞活性的条件下显著抑制SW480细胞侵袭和迁移(P<0.05),也能抑制MMP-9的酶活性以及mRNA表达(P<0.05)。同时PEITC能抑制PI3K的表达以及抑制Akt和m TOR磷酸化(P<0.05),上调PTEN表达。PEITC也能抑制NF-κB核转位,并能降低其活性(P<0.05)。此外,PEITC也能抑制裸鼠异种移植瘤的生长(P<0.05)。结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物,它可能通过影响PI3K/Akt和NF-κB通路发挥作用。 展开更多

关键词 异硫氰酸苯乙酯 SW480细胞 基质金属蛋白酶9 pi3k akt 核转录因子ΚB

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PEITC通过抑制结肠癌细胞PI3K/NF-κB活性而抑制MMP-9表达 被引量：2

6

作者 魏付桥 申清香 +3 位作者 刘昌化 罗康宁 谢文彪 胡军 《中南医学科学杂志》 CAS 2014年第4期351-354,366,共5页

目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其分子机制。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10、30、50μmol/L PEITC作用24 h,划痕愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响... 目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其分子机制。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10、30、50μmol/L PEITC作用24 h,划痕愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响。RT-PCR检测MMP-9 mRNA的表达;Western blot检测MMP-9蛋白表达和蛋白激酶B(Akt)磷酸化。荧光素酶报告基因分析核转录因子κB(NF-κB)和MMP-9的活性。结果划痕愈合实验和Transwell小室实验结果显示,PEITC能在不影响细胞活性的条件下对SW480细胞侵袭和迁移具有一定抑制作用。同时,Western blot和RT-PCR结果证实PEITC能抑制MMP-9蛋白及mRNA表达。PEITC能抑制Akt磷酸化以及NF-κB的转录活性。PI3K抑制剂LY294002处理后,NF-κB-luc活性以及MMP-9蛋白表达显著降低。此外,不同浓度PEITC处理能显著抑制MMP-9的启动子活性。结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物,它可能通过影响PI3K/NF-κB通路抑制MMP-9表达而发挥作用。 展开更多

关键词 异硫氰酸苯乙酯 SW480细胞 基质金属蛋白酶9 pi3k/akt 核转录因子ΚB

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华蟾酥毒基通过FAK/PI3K/Akt通路抑制食管癌Kyse-520细胞迁移和侵袭 被引量：11

7

作者 盛杰霞 邓旭 +3 位作者 包军 王志美 代二庆 邓全军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期139-145,共7页

目的探讨华蟾酥毒基抑制食管癌Kyse-520细胞迁移和侵袭的相关机制。方法 CCK-8法检测Kyse-520细胞经不同浓度华蟾酥毒基作用12、24、48 h后的增殖活性;划痕愈合实验和Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭过程;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分... 目的探讨华蟾酥毒基抑制食管癌Kyse-520细胞迁移和侵袭的相关机制。方法 CCK-8法检测Kyse-520细胞经不同浓度华蟾酥毒基作用12、24、48 h后的增殖活性;划痕愈合实验和Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭过程;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析Kyse-520细胞中FAK、Akt、PTEN、VEGF-A、MMP-2、MMP-9 mRNA的表达;Western blot检测FAK、p-FAK(Tyr397)、Akt、p-Akt(Ser473)、PTEN、VEGF-A、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平。结果 CCK-8结果显示,华蟾酥毒基可以抑制Kyse-520细胞增殖,呈现时间和浓度依赖性,划痕实验和Transwell小室实验结果表明,华蟾酥毒基可以抑制食管癌细胞迁移和侵袭;RT-qPCR和Western blot结果显示,华蟾酥毒基对FAK、Akt mRNA及总蛋白无明显影响,但可以下调p-FAK、p-Akt、VEGF-A、MMP-2、MMP-9表达,上调PTEN的表达。结论华蟾酥毒基通过诱导PTEN表达,下调FAK/PI3K/Akt信号通路,抑制食管癌Kyse-520细胞的迁移和侵袭。 展开更多

关键词 华蟾酥毒基 食管癌 kyse-520细胞 细胞迁移 细胞侵袭 FAk pi3k/akt mmpS

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基于PI3K/Akt/NF-κB途径探究补肾活血方治疗子宫内膜异位症的作用机制研究 被引量：6

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作者 马中岭 刘鑫 汪玉凤 《天津中医药》 CAS 2022年第6期771-777,共7页

[目的]探究补肾活血方(BSHXR)治疗子宫内膜异位症(EMS)的作用机制。[方法]采用自体子宫内膜移植术建立EMS大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、BSHXR高、中、低剂量组、LY294002(PI3K抑制剂)组,每组10只。给药28 d后,测定大鼠异... [目的]探究补肾活血方(BSHXR)治疗子宫内膜异位症(EMS)的作用机制。[方法]采用自体子宫内膜移植术建立EMS大鼠模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、BSHXR高、中、低剂量组、LY294002(PI3K抑制剂)组,每组10只。给药28 d后,测定大鼠异位子宫内膜病灶体积,苏木精-伊红(HE)染色观察异位子宫内膜组织病理变化,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的水平,免疫组化染色检测异位子宫内膜组织血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测异位子宫内膜组织血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA水平,Western blot法检测异位内膜组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/核因子κB(NF-κB)通路蛋白表达水平。[结果]与假手术组比较,EMS大鼠异位子宫内膜病灶体积显著增加,血清炎症因子水平升高,CD31阳性细胞数量增加,VEGF、MMP-9 mRNA水平升高,PI3K/Akt/NF-κB信号通路被活化(P<0.05)。与模型组比较,BSHXR可缩小大鼠异位子宫内膜病灶体积,降低血清炎症因子水平,减少CD31阳性细胞数量,降低VEGF、MMP-9 mRNA表达水平,抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路活化,其作用呈剂量依赖性(P<0.05)。[结论]BSHXR对大鼠EMS具有治疗作用,其作用机制与抑制PI3K/Akt/NF-κB信号通路活化有关。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 补肾活血方 pi3k/akt/NF-κB信号通路 炎症反应 CD31 VEGF mmp-9

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没食子酸对PI3K/AKT基因表达的影响及其对胃癌细胞的抗转移作用 被引量：2

9

作者 田衍 舒若 罗华友 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期884-889,共6页

为了调查在蔬菜中大量存在的酚酸(没食子酸(GA),咖啡酸(CA)和原儿茶酸(PCA))对胃腺癌(AGS)细胞转移的抑制作用,本研究在不同浓度的CA、PCA或GA中培养了AGS细胞24 h或48 h来检测AGS细胞活性对NF-κB、IκB、PI3K、AKT和小细胞GTPase表达... 为了调查在蔬菜中大量存在的酚酸(没食子酸(GA),咖啡酸(CA)和原儿茶酸(PCA))对胃腺癌(AGS)细胞转移的抑制作用,本研究在不同浓度的CA、PCA或GA中培养了AGS细胞24 h或48 h来检测AGS细胞活性对NF-κB、IκB、PI3K、AKT和小细胞GTPase表达和对细胞骨架F-肌动蛋白模式的影响。本研究发现,0.01 mmol/L GA诱导的细胞毒性与4.0 mmol/L PCA相同。GA对AGS细胞迁移有明显的抑制作用。AGS细胞的MMP-2/9表达被2.0μmol/L GA所抑制。GA对MMP-2/9的抑制作用有可能包括抑制NF-κB活性。多蛋白参与转移和细胞骨架重组信号通路,包括Ras、Cdc42、Rac1、RhoA、RhoB、PI3K和p38MAPK,也被GA所抑制。此外,细胞骨架F-肌动蛋白的免疫反应检测显示GA处理的显著抑制作用。本研究表明,GA有可能成为一种有效的预防和治疗胃癌转移的药物。 展开更多

关键词 胃癌 转移 酚酸 没食子酸 mmp-2/9 pi3k/akt

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miR-504靶向CHD1L抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制 被引量：5

10

作者 王照岩 杨志一 +5 位作者 林祥博 陈智凯 李洪利 尹崇高 牟青杰 刘雨清 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1302-1307,共6页

目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中m... 目的探讨miR-504靶向染色质解旋酶DNA结合蛋白(chromodomain helicase/ATPase DNA binding protein 1-like gene,CHD1L)抑制乳腺癌细胞侵袭的分子机制。方法 qRT-PCR检测人正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)与乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7)中miR-504的表达量,同时检测miR-504在MDA-MB-231细胞中的转染效率;双荧光素酶实验检测miR-504与CHD1L是否存在结合靶点;qRT-PCR及Western blot法检测CHD1L mRNA和蛋白的表达水平;Transwell侵袭实验检测MDAMB-231细胞的侵袭能力;Western blot法检测p-Akt、MMP-2和MMP-9的表达情况。结果乳腺癌细胞中miR-504的表达量明显低于人正常乳腺上皮细胞(P <0. 05);miR-504在MDA-MB-231/miR-504组中的表达水平明显增高(P <0. 05);双荧光素酶实验检测显示miR-504能与CHD1L mRNA的3'-UTR结合;此外,过表达miR-504后CHD1L mRNA的表达水平无显著变化,但CHD1L蛋白表达水平显著降低(P <0. 05);与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组侵袭能力明显降低,而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组侵袭能力比MDA-MB-231/miR-504+Con组明显增加;用表皮生长因子分别刺激转染不同质粒的MDA-MB-231细胞,与MDA-MB-231/NC组相比,MDA-MB-231/miR-504组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P <0. 05),而MDA-MB-231/miR-504+CHD1L组中p-Akt、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平与MDA-MB-231/miR-504+Con组相比明显增加(P <0. 05)。结论 miR-504靶向CHD1L通过PI3K/Akt/MMP信号通路抑制乳腺癌细胞的侵袭。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 miR-504 CHD1L pi3k/akt/mmp 侵袭

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异丙酚对食管癌细胞侵袭能力的影响及机制探讨

11

作者 王亭 《解放军预防医学杂志》 CAS 2018年第9期1181-1184,共4页

目的探讨异丙酚对食管癌细胞侵袭能力的影响及其机制。方法分别以30、60和120μg/ml异丙酚处理Eca109细胞,采用平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验检测细胞的克隆形成能力、侵袭和迁移能力,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2/9... 目的探讨异丙酚对食管癌细胞侵袭能力的影响及其机制。方法分别以30、60和120μg/ml异丙酚处理Eca109细胞,采用平板克隆实验、Transwell实验和划痕实验检测细胞的克隆形成能力、侵袭和迁移能力,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/9)、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白的表达情况。结果 30μg/ml异丙酚对Eca109细胞的克隆形成能力无显著影响,但60和120μg/ml异丙酚能够显著抑制Eca109细胞克隆形成能力;异丙酚能够呈浓度依赖性抑制Eca109细胞的侵袭和迁移,且抑制MMP-2、MMP-9、PI3K和p-AKT蛋白的表达。结论异丙酚能够抑制食管癌Eca109细胞的侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 食管癌 异丙酚 细胞侵袭 pi3k/akt通路信号通路 mmp-2 mmp-9

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