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伤寒杆菌耐药质粒pRST98介导细菌毒力的研究 被引量：18
1
作者 黄瑞 吴淑燕 闻玉梅 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期302-306,共5页
目的　研究伤寒杆菌耐药质粒pRST98能否介导细菌毒力。方法　将pRST98导入鼠伤寒杆菌低毒株RIA ,经口和腹腔感染小鼠 ,测定半数致死量 (LD50 ) ;口饲细菌后检测在体内播散、繁殖及引起脏器的组织学改变 ;在体外对其进行细胞的粘附和侵... 目的　研究伤寒杆菌耐药质粒pRST98能否介导细菌毒力。方法　将pRST98导入鼠伤寒杆菌低毒株RIA ,经口和腹腔感染小鼠 ,测定半数致死量 (LD50 ) ;口饲细菌后检测在体内播散、繁殖及引起脏器的组织学改变 ;在体外对其进行细胞的粘附和侵袭试验。分别用含pRST98的野生伤寒杆菌、消除pRST98的突变体菌株及pRST98再重新导入突变体的菌株 ,研究对人、兔及豚鼠血清杀菌的抵抗力。结果　导入pRST98的鼠伤寒杆菌口服和腹腔注射组LD50 比阴性对照分别降低约 70 0倍和75倍 ;在小鼠肠系膜淋巴结、脾和肝脏内增殖 (P <0 .0 5 )并引起脏器严重病变 ;但在体外不影响鼠伤寒杆菌对HEp 2、CHO和HeLa细胞的粘附和侵袭。携带pRST98的伤寒杆菌在血清中的抵抗力显著高于无此质粒的菌株 (P <0 .0 5 )。结论　伤寒杆菌耐药质粒pRST98不但介导对药物的抗性 ,同时还能使宿主菌的毒力增强。 展开更多
关键词 伤寒杆菌 耐药质粒 细菌毒力 prst98 抗生素
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中西药消除耐药质粒pR_(ST98)的研究 被引量：8
2
作者 祁汝峰 黄瑞 祁小飞 《中国血液流变学杂志》 CAS 2004年第1期46-47,132,共3页
目的　用SouthernBlot杂交法检测中、西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pRST98的结果。方法　用氧氟沙星和中药双黄连对携带pRST98的伤寒杆菌、大肠杆菌和鼠伤寒杆菌进行亚抑菌浓度的质粒消除试验 ;用地高辛标记的氨苄青霉素和四环... 目的　用SouthernBlot杂交法检测中、西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pRST98的结果。方法　用氧氟沙星和中药双黄连对携带pRST98的伤寒杆菌、大肠杆菌和鼠伤寒杆菌进行亚抑菌浓度的质粒消除试验 ;用地高辛标记的氨苄青霉素和四环素耐药基因探针进行SouthernBlot。结果　SouthernBlot杂交结果显示两种药物作用后pRST98上的耐药基因并未丢失 ,但同一质粒耐药基因在不同宿主菌中表达不同 ,导致最小抑菌浓度 (MIC)变化有明显差异。结论　氧氟沙星和双黄连能降低pRST98宿主菌的耐药性。 展开更多
关键词 中药 西药 耐药质粒 prst98 细菌耐药 形成机制
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药物在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒pR_(ST98)的研究 被引量：3
3
作者 刘晓颖 黄瑞 +1 位作者 陆明 杨珠英 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 2002年第3期252-254,257,共4页
目的　探讨用中西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒 pRST98的可能性。方法　将原存在于伤寒杆菌中的耐药质粒 pRST98经接合转移分别导入大肠杆菌和鼠伤寒杆菌 ,选用双黄连和氧氟沙星对上述 3种细菌进行亚抑菌浓度的消除试验 ,并对实... 目的　探讨用中西药在体外消除肠道杆菌携带的耐药质粒 pRST98的可能性。方法　将原存在于伤寒杆菌中的耐药质粒 pRST98经接合转移分别导入大肠杆菌和鼠伤寒杆菌 ,选用双黄连和氧氟沙星对上述 3种细菌进行亚抑菌浓度的消除试验 ,并对实验前后的受试菌分别进行K -B纸片扩散法和最小抑菌浓度法 (MIC)药敏试验及质粒电泳检测。结果　两种药物在体外未能将受试菌携带的 pRST98消除 ;但该质粒编码的耐药标志减少 ;部分菌株对原有药物的耐药程度明显下降。结论　双黄连和氧氟沙星能降低pRST98宿主菌的耐药性 ,但药物作用后同一质粒在不同宿主菌中耐药性变化的差异 ,显示该质粒表达的多样性和复杂性。 展开更多
关键词 质粒prst98 伤寒杆菌 耐药质粒 中西药结合 体外灭
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伤寒沙门菌质粒pR_(ST98)的限制性核酸内切酶分析 被引量：1
4
作者 黄瑞 吴淑燕 +2 位作者 刘晓颖 顾冠彬 万海燕 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 2002年第3期249-251,共3页
目的　以我国特有的多重耐药伤寒沙门菌中分离的质粒pRST98为研究对象 ,对其除编码细菌抗药性外还能使宿主菌毒力增强这一独特性状产生的分子基础 ,用限制性核酸内切酶进行核酸酶谱分析。方法　将质粒pRST98用QIAGEN试剂盒提纯并精确定... 目的　以我国特有的多重耐药伤寒沙门菌中分离的质粒pRST98为研究对象 ,对其除编码细菌抗药性外还能使宿主菌毒力增强这一独特性状产生的分子基础 ,用限制性核酸内切酶进行核酸酶谱分析。方法　将质粒pRST98用QIAGEN试剂盒提纯并精确定量后 ,选用常用的 9种限制性核酸内切酶消化 ,制作该质粒的酶切图谱。结果　用试剂盒提纯质粒 ,再用限制性内切酶消化后得到了清晰、准确的质粒酶切图谱 ,其中BglⅡ、EcoRⅤ、PstⅠ和SacⅡ是对该质粒进行分子生物学和分子流行病学研究的理想工具。结论　伤寒沙门菌多效性质粒 pRST98限制性核酸内切酶谱的建立 ,为分析该质粒的遗传特征、流行病学追踪和基因功能定位奠定了基础。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 质粒prst98 限制性核酸内切酶 分子生物学 耐药性
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伤寒杆菌耐药质粒pR_(ST98)与细菌外膜泡的关系
5
作者 吴淑燕 黄瑞 +2 位作者 王响英 李苏安 毛棣华 《苏州大学学报（医学版）》 CAS 2002年第6期644-646,共3页
目的　研究伤寒杆菌耐药质粒 pRST98与细菌外膜泡 (OMV)形成的关系。方法　将 ( 1)携带 pRST98的野生型耐药伤寒杆菌———ST1及ST2 ;( 2 )不含 pRST98的野生型敏感伤寒杆菌———ST3及ST4 ;( 3 )不含质粒的大肠杆菌———E .coliK12 W1... 目的　研究伤寒杆菌耐药质粒 pRST98与细菌外膜泡 (OMV)形成的关系。方法　将 ( 1)携带 pRST98的野生型耐药伤寒杆菌———ST1及ST2 ;( 2 )不含 pRST98的野生型敏感伤寒杆菌———ST3及ST4 ;( 3 )不含质粒的大肠杆菌———E .coliK12 W14 85;( 4)用十二烷基硫酸钠消除 pRST98的突变体菌株———ST1(R-)及ST2 (R-) ;和 ( 5 )经接合转移将pRST98导入敏感型伤寒杆菌及大肠杆菌的接合子———pRST98/ST3、pRST98/ST4 及pRST98/E .coliK12 W14 85用于实验 ,用透射电镜观测细菌在有无 pRST98时 ,OMV形成的差异。结果　携带 pRST98的耐药伤寒杆菌消除 pRST98前后 ,不含 pRST98的敏感伤寒杆菌和大肠杆菌在导入该质粒前后 ,细菌形成OMV的数量和形态均无明显变化。 展开更多
关键词 伤寒杆菌 耐药质粒 prst98 细胞外膜泡
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伤寒沙门菌质粒pR_(ST98)对细菌生物膜形成能力及毒力的影响 被引量：2
6
作者 刘珍 阙凤霞 +2 位作者 李嫄渊 吴淑燕 黄瑞 《检验医学》 CAS 2015年第10期1033-1038,共6页
目的探讨伤寒沙门菌质粒pRST98对鼠伤寒沙门菌和大肠埃希菌生物膜形成能力及毒力的影响。方法将伤寒沙门菌质粒pRST98接合转移导入鼠伤寒沙门菌和大肠埃希菌,制备单个游离悬浮状态下的细菌菌液;将接合导入质粒pRST98前、后的受试菌分别... 目的探讨伤寒沙门菌质粒pRST98对鼠伤寒沙门菌和大肠埃希菌生物膜形成能力及毒力的影响。方法将伤寒沙门菌质粒pRST98接合转移导入鼠伤寒沙门菌和大肠埃希菌,制备单个游离悬浮状态下的细菌菌液;将接合导入质粒pRST98前、后的受试菌分别在相同条件下形成生物膜,制备生物膜状态下的菌液。浮游细菌与生物膜形成细菌调节至同一浓度后分别与CT26细胞进行黏附侵袭、血清杀菌以及抗巨噬细胞吞噬实验,比较不同状态下受试菌毒力的差异。结果伤寒沙门菌质粒pRST98能够促进鼠伤寒沙门菌和大肠埃希菌形成生物膜;黏附实验显示除大肠埃希菌外,鼠伤寒沙门菌在生物膜状态下对CT26细胞的黏附力明显增强,形成生物膜的细菌对CT26细胞的侵袭力明显下降;生物膜状态的鼠伤寒沙门菌和大肠埃希菌在兔血清和豚鼠血清中的存活率均高于浮游状态;生物膜状态下的鼠伤寒沙门菌在巨噬细胞内的存活率明显高于浮游状态下的细菌。结论质粒pRST98能够促进鼠伤寒沙门菌和大肠埃希菌形成生物膜;生物膜的形成能促进细菌对细胞的黏附,同时抑制细菌对细胞的侵袭力;增强细菌抵抗血清杀菌及巨噬细胞吞噬的能力。 展开更多
关键词 伤寒沙门菌 质粒prst98 鼠伤寒沙门菌 大肠埃希菌 生物膜 毒力
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伤寒杆菌耐药质粒pR_(ST98)介导血清杀菌作用抗性的研究
7
作者 吴淑燕 黄瑞 林发榕 《苏州医学院学报》 1999年第9期964-966,共3页
将ｐ Ｒ Ｓ Ｔ９８ 导入不含质粒且对抗菌药物敏感的大肠杆菌、伤寒杆菌，并用十二烷基硫酸钠（ Ｓ Ｄ Ｓ） 消除耐药菌株的ｐ Ｒ Ｓ Ｔ９８ ，计算接合子及 Ｒ 质粒消除前后菌株在人、兔及豚鼠的不同浓度、不同成份血清中的存活率。ｐ ... 将ｐ Ｒ Ｓ Ｔ９８ 导入不含质粒且对抗菌药物敏感的大肠杆菌、伤寒杆菌，并用十二烷基硫酸钠（ Ｓ Ｄ Ｓ） 消除耐药菌株的ｐ Ｒ Ｓ Ｔ９８ ，计算接合子及 Ｒ 质粒消除前后菌株在人、兔及豚鼠的不同浓度、不同成份血清中的存活率。ｐ Ｒ Ｓ Ｔ９８ 介导其宿主菌对血清杀菌的抗性，但在不同宿主菌中抵抗力不同；补体经典途径及旁路途径均参与血清杀菌过程。ｐ Ｒ Ｓ Ｔ９ ８ 具有多效性，其广泛的宿主性在介导细菌多重耐药的同时，还赋予细菌抵抗血清的杀菌作用，使病原菌致病性增强。 展开更多
关键词 伤寒杆菌 耐药质粒 prst98 血清杀菌试验
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伤寒杆菌耐药质粒pR_(ST98)毒力基因的研究 被引量：15
8
作者 黄瑞 吴淑燕 张学光 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期393-396,共4页
目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属其他致病菌毒力质粒上的保守基因spv。方法　用QIAGEN试剂盒提取pRST98,精确定量后选用 8种限制性核酸内切酶消化 ,建立该质粒的酶切图谱。用spv特异引物的PCR扩增和spv探针... 目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属其他致病菌毒力质粒上的保守基因spv。方法　用QIAGEN试剂盒提取pRST98,精确定量后选用 8种限制性核酸内切酶消化 ,建立该质粒的酶切图谱。用spv特异引物的PCR扩增和spv探针Southernblot法分析pRST98的基因构成。结果　pRST98酶切图谱显示BglⅡ、PstⅠ和SacⅡ作用后片段均一 ,是对该质粒进行分子生物学和分子流行病学研究的理想工具。PCR和Southernblot结果显示 ,伤寒杆菌耐药质粒pRST98上存在其他沙门菌毒力质粒上高度保守基因spv的同源序列。结论　从基因水平首次证实伤寒杆菌耐药质粒pRST98具有多效性 ,是既编码抗药性又编码细菌毒力的“嵌合型”质粒。 展开更多
关键词 伤寒杆菌 耐药性 prst98 毒力基因
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伤寒沙门菌耐药质粒pR_(ST98) spv毒力基因的研究 被引量：2
9
作者 黄瑞 焦旸 +1 位作者 祁小飞 张学光 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期519-521,共3页
目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属中其他致病菌毒力质粒上的高度保守基因——spv,并对扩增的spv基因进行克隆及核酸序列测定。方法　对已确定能增强细菌毒力表型的耐药质粒pRST98,用spv基因特异引物进行PCR... 目的　研究多重耐药伤寒沙门菌耐药质粒pRST98是否具有沙门菌属中其他致病菌毒力质粒上的高度保守基因——spv,并对扩增的spv基因进行克隆及核酸序列测定。方法　对已确定能增强细菌毒力表型的耐药质粒pRST98,用spv基因特异引物进行PCR扩增和SPV探针的Southerblot分析,并将扩增到的spv基因片段装入克隆载体pGEM TEASY进行测序。结果　PCR和Southernblot结果显示,伤寒沙门菌耐药质粒pRST98上亦存在spv基因的同源序列spvR和spvB,其ORF分别为894bp和1 776bp,与鼠伤寒沙门菌毒力质粒上spv基因的同源性超过99%。结论　本研究从核酸水平首次证实伤寒沙门菌耐药质粒pRST98具有多效性,是既编码细菌抗药性又编码细菌毒力的“嵌合型”质粒。 展开更多
关键词 质粒prst98 毒力基因 Southern spv基因 pGEM-T 鼠伤寒沙门菌 毒力质粒 blot PCR扩增 细菌抗药性 保守基因 沙门菌属 多重耐药 序列测定 毒力表型 特异引物 克隆载体 基因片段 同源序列 核酸水平 细菌毒力 致病菌 SPV 同源性
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