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伪狂犬病病毒Ea株UL54基因的克隆与序列分析
被引量：
9
1
作者
方六荣
陈焕春
+2 位作者
肖少波
徐引娣
何启盖
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期103-106,共4页
根据伪狂犬病病毒国外Ka株UL5 4基因核苷酸序列 ,设计一对包含UL5 4基因完整编码区的引物 ,以伪狂犬病病毒国内地方分离株Ea株细胞感染物为模板 ,PCR扩增出大小约 1.1kb特异性带。将纯化的扩增产物克隆到pBluescriptⅡsk +中 ,酶切分析...
根据伪狂犬病病毒国外Ka株UL5 4基因核苷酸序列 ,设计一对包含UL5 4基因完整编码区的引物 ,以伪狂犬病病毒国内地方分离株Ea株细胞感染物为模板 ,PCR扩增出大小约 1.1kb特异性带。将纯化的扩增产物克隆到pBluescriptⅡsk +中 ,酶切分析证实后经双脱氧末端终止法进行全序列测定 ,序列分析结果表明Ea株UL5 4基因全长 10 86bp ,可编码 36 1个氨基酸。由二级结构预测数据推断C 末端具有典型的锌指结构域。运用Blast软件与Ka株UL5 4基因进行同源比较 ,发现Ea株UL5 4基因在核苷酸和氨基酸水平上均存在多处点突变 ,但无插入或缺失突变 ;将Ea株UL5 4氨基酸序列同其它 4种α 疱疹病毒 (HSV 1、HSV 2、VZV、EHV 1)进行同源比较 ,同源性分别为 47%、36 %、36 %和 44 %。
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关键词
伪狂犬病病毒
ea
株
UL54基因
克隆
序列分析
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职称材料
抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
被引量：
4
2
作者
汪招雄
何启盖
+2 位作者
黄红亮
刘正飞
陈焕春
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期222-225,共4页
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1...
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。
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关键词
伪狂犬病毒
ea
株
单克隆抗体
间接免疫荧光试验
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职称材料
Bartha K61株活疫苗对猪伪狂犬变异毒株和传统毒株的免疫保护效力分析
被引量：
15
3
作者
严伟东
李畅
+2 位作者
于学祥
何启盖
杨汉春
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2020年第7期15-18,23,I0001,共6页
为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用P...
为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用PRV-EA株和流行变异PRV-XT株攻毒,观察仔猪的临床症状和病理变化,检测鼻腔排毒情况。结果显示,Bartha K61株活疫苗可对经典PRV-EA株攻毒提供良好的免疫保护,但对变异毒株PRV-XT仅能提供部分保护。PRV-EA株攻毒组所有猪只未出现明显临床症状,而PRV-XT攻毒组出现较为明显的临床症状。表明Bartha K61株活疫苗对传统毒株有良好保护效果,而对流行变异毒株不能提供完全保护。
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关键词
猪伪狂犬病
Bartha
K61株活疫苗
prv
-
ea
株
变异强毒
prv
-XT株
攻毒保护试验
下载PDF
职称材料
题名
伪狂犬病病毒Ea株UL54基因的克隆与序列分析
被引量：
9
1
作者
方六荣
陈焕春
肖少波
徐引娣
何启盖
机构
华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒实验室
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第2期103-106,共4页
基金
国家自然科学基金! (39970 5 5 9)资助项目
文摘
根据伪狂犬病病毒国外Ka株UL5 4基因核苷酸序列 ,设计一对包含UL5 4基因完整编码区的引物 ,以伪狂犬病病毒国内地方分离株Ea株细胞感染物为模板 ,PCR扩增出大小约 1.1kb特异性带。将纯化的扩增产物克隆到pBluescriptⅡsk +中 ,酶切分析证实后经双脱氧末端终止法进行全序列测定 ,序列分析结果表明Ea株UL5 4基因全长 10 86bp ,可编码 36 1个氨基酸。由二级结构预测数据推断C 末端具有典型的锌指结构域。运用Blast软件与Ka株UL5 4基因进行同源比较 ,发现Ea株UL5 4基因在核苷酸和氨基酸水平上均存在多处点突变 ,但无插入或缺失突变 ;将Ea株UL5 4氨基酸序列同其它 4种α 疱疹病毒 (HSV 1、HSV 2、VZV、EHV 1)进行同源比较 ,同源性分别为 47%、36 %、36 %和 44 %。
关键词
伪狂犬病病毒
ea
株
UL54基因
克隆
序列分析
Keywords
pseudorabies virus(
prv
),
ea
strain
,UL54 gene,cloning,sequence analysis
分类号
S852.659.1 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
被引量：
4
2
作者
汪招雄
何启盖
黄红亮
刘正飞
陈焕春
机构
华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室农业微生物学国家重点实验室
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期222-225,共4页
基金
国家"十.五"重大科技攻关专项-食品安全关键技术项目(2002BA514A-18)资助
文摘
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。
关键词
伪狂犬病毒
ea
株
单克隆抗体
间接免疫荧光试验
Keywords
prv ea strain
monoclonal antibodies (MAbs)
indirect immunofluorescence assay (IFA)
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q813 [生物学—生物工程]
下载PDF
职称材料
题名
Bartha K61株活疫苗对猪伪狂犬变异毒株和传统毒株的免疫保护效力分析
被引量：
15
3
作者
严伟东
李畅
于学祥
何启盖
杨汉春
机构
中国农业大学动物医学院
华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
华中农业大学动物医学院
出处
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2020年第7期15-18,23,I0001,共6页
基金
国家生猪产业技术体系资助项目(CARS-35)。
文摘
为了分析猪伪狂犬病活疫苗Bartha K61株预防流行变异毒株的效力。以经典PRV-EA株和变异PRV-XT株为攻毒毒株,评价Bartha K61活疫苗免疫仔猪对伪狂犬病病毒变异株的保护效力。用Bartha K61株活疫苗免疫4~5周龄断奶仔猪,免疫28 d后,分别用PRV-EA株和流行变异PRV-XT株攻毒,观察仔猪的临床症状和病理变化,检测鼻腔排毒情况。结果显示,Bartha K61株活疫苗可对经典PRV-EA株攻毒提供良好的免疫保护,但对变异毒株PRV-XT仅能提供部分保护。PRV-EA株攻毒组所有猪只未出现明显临床症状,而PRV-XT攻毒组出现较为明显的临床症状。表明Bartha K61株活疫苗对传统毒株有良好保护效果,而对流行变异毒株不能提供完全保护。
关键词
猪伪狂犬病
Bartha
K61株活疫苗
prv
-
ea
株
变异强毒
prv
-XT株
攻毒保护试验
Keywords
pseudorabies
Bartha K61 live vaccine
prv
-
ea
strain
virulent
strain
prv
-XT
challenge protection experiment
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
伪狂犬病病毒Ea株UL54基因的克隆与序列分析
方六荣
陈焕春
肖少波
徐引娣
何启盖
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
9
下载PDF
职称材料
2
抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
汪招雄
何启盖
黄红亮
刘正飞
陈焕春
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
4
下载PDF
职称材料
3
Bartha K61株活疫苗对猪伪狂犬变异毒株和传统毒株的免疫保护效力分析
严伟东
李畅
于学祥
何启盖
杨汉春
《中国兽医杂志》
CAS
北大核心
2020
15
下载PDF
职称材料
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