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PTD-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的表达及活性分析
被引量：
2
1
作者
智庆文
王淑豪
+2 位作者
张凤英
李仕贵
孙曼霁
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期589-592,共4页
为获得hEGF在大肠杆菌中的高效表达,构建了pPTD-hEGF原核表达载体。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经0.3mmol/LIPTG诱导,PTD-hEGF融合蛋白进行了有效表达,表达产物主要形成了包涵体。经Ni2+-NTA亲和层析纯化,融合蛋白的纯度达99.5%。MALDI-...
为获得hEGF在大肠杆菌中的高效表达,构建了pPTD-hEGF原核表达载体。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经0.3mmol/LIPTG诱导,PTD-hEGF融合蛋白进行了有效表达,表达产物主要形成了包涵体。经Ni2+-NTA亲和层析纯化,融合蛋白的纯度达99.5%。MALDI-TOF-MS分析证明表达的融合蛋白氨基酸序列完全正确。PTD-hEGF融合蛋白能明显促进HEK-293细胞的分裂和生长。
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关键词
ptd
—hEGF
融合
蛋白
原核表达
HEK-293细胞
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职称材料
hCu,Zn-SOD-TAT PTD的融合表达及其跨膜转运性质的初步研究
被引量：
5
2
作者
汪飞鹏
桂向东
宋礼华
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2004年第1期11-15,共5页
HIV I反式激活蛋白TAT中的一段富含碱性氨基酸的短序列具有独特的跨膜转运能力 ,被称为TAT蛋白转导结构域 (proteintransductiondomain ,PTD)。从人肺cDNA文库中PCR扩增hCu ,Zn SOD基因 ,插入pUC19测序 ;以测序质粒为模板 ,再用含TATPT...
HIV I反式激活蛋白TAT中的一段富含碱性氨基酸的短序列具有独特的跨膜转运能力 ,被称为TAT蛋白转导结构域 (proteintransductiondomain ,PTD)。从人肺cDNA文库中PCR扩增hCu ,Zn SOD基因 ,插入pUC19测序 ;以测序质粒为模板 ,再用含TATPTD编码序列的 3’引物PCR扩增得hCu ,Zn SOD TATPTD融合基因 ,并插入 pUC19。将SOD基因和SOD TATPTD融合基因分别亚克隆至温控表达载体 pJW 2 ,转化大肠杆菌DH5α。SDS PAGE和Westernblot结果表明 ,热击诱导 4h后 ,分别在 19ku和 2 2ku处出现SOD和SOD TATPTD目标表达条带 ,表达蛋白以包含体形式存在。分别提取SOD和SOD TATPTD包含体 ,复性纯化后SOD和SOD PTD重组蛋白均具有特异的SOD酶活性 ,其比活性分别为 12× 10 3 NU/mg和 9.9× 10 3 NU/mg。细胞试验结果表明 ,与SOD相比较 ,SOD TATPTD融合蛋白能显著提高细胞内SOD酶活力。
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关键词
SOD-TAT
ptd融合蛋白
原核表达
蛋白
转导
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职称材料
BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型的建立与治疗
被引量：
1
3
作者
刘晓雯
王娇
+1 位作者
袁萍
孙军
《巴楚医学》
2018年第2期1-5,共5页
目的:通过建立BALB/c小鼠原位瘤模型,模拟临床肿瘤环境,为观察PTD4-apoptin融合蛋白的抗肿瘤效应提供实验基础。方法:采用两种方法建立BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型,以PTD4-apoptin融合蛋白进行21天的短期治疗。TUNEL检测PTD4-apoptin融...
目的:通过建立BALB/c小鼠原位瘤模型,模拟临床肿瘤环境,为观察PTD4-apoptin融合蛋白的抗肿瘤效应提供实验基础。方法:采用两种方法建立BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型,以PTD4-apoptin融合蛋白进行21天的短期治疗。TUNEL检测PTD4-apoptin融合蛋白的促凋亡效应,HE染色评估肿瘤的形态学变化。结果:与异体异位宫颈癌组织移植法相比,宫颈注射U14宫颈癌细胞悬液的成瘤效果更好。原位瘤给予PTD4-apoptin融合蛋白可显著抑制肿瘤生长,促进肿瘤细胞的凋亡。结论:小鼠宫颈注射U14宫颈癌细胞悬液可建立宫颈癌原位瘤模型,PTD4-apoptin融合蛋白可抑制该原位癌。
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关键词
ptd
4-apoptin
融合
蛋白
U14宫颈癌细胞
小鼠宫颈癌原位瘤模型
凋亡
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职称材料
题名
PTD-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的表达及活性分析
被引量：
2
1
作者
智庆文
王淑豪
张凤英
李仕贵
孙曼霁
机构
军事医学科学院毒物药物研究所
中国人民解放军防化指挥工程学院
四川农业大学教育部作物遗传资源和发展重点实验室
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期589-592,共4页
文摘
为获得hEGF在大肠杆菌中的高效表达,构建了pPTD-hEGF原核表达载体。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),经0.3mmol/LIPTG诱导,PTD-hEGF融合蛋白进行了有效表达,表达产物主要形成了包涵体。经Ni2+-NTA亲和层析纯化,融合蛋白的纯度达99.5%。MALDI-TOF-MS分析证明表达的融合蛋白氨基酸序列完全正确。PTD-hEGF融合蛋白能明显促进HEK-293细胞的分裂和生长。
关键词
ptd
—hEGF
融合
蛋白
原核表达
HEK-293细胞
Keywords
ptd
-hEGF fusion protein, prokaryocyte expression, HEK-293 cell
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
hCu,Zn-SOD-TAT PTD的融合表达及其跨膜转运性质的初步研究
被引量：
5
2
作者
汪飞鹏
桂向东
宋礼华
机构
安徽安科生物工程股份有限公司研究发展中心
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2004年第1期11-15,共5页
基金
安徽省 2 0 0 1年度优秀青年科技基金 (2 0 0 1 2 5)
文摘
HIV I反式激活蛋白TAT中的一段富含碱性氨基酸的短序列具有独特的跨膜转运能力 ,被称为TAT蛋白转导结构域 (proteintransductiondomain ,PTD)。从人肺cDNA文库中PCR扩增hCu ,Zn SOD基因 ,插入pUC19测序 ;以测序质粒为模板 ,再用含TATPTD编码序列的 3’引物PCR扩增得hCu ,Zn SOD TATPTD融合基因 ,并插入 pUC19。将SOD基因和SOD TATPTD融合基因分别亚克隆至温控表达载体 pJW 2 ,转化大肠杆菌DH5α。SDS PAGE和Westernblot结果表明 ,热击诱导 4h后 ,分别在 19ku和 2 2ku处出现SOD和SOD TATPTD目标表达条带 ,表达蛋白以包含体形式存在。分别提取SOD和SOD TATPTD包含体 ,复性纯化后SOD和SOD PTD重组蛋白均具有特异的SOD酶活性 ,其比活性分别为 12× 10 3 NU/mg和 9.9× 10 3 NU/mg。细胞试验结果表明 ,与SOD相比较 ,SOD TATPTD融合蛋白能显著提高细胞内SOD酶活力。
关键词
SOD-TAT
ptd融合蛋白
原核表达
蛋白
转导
Keywords
SOD-TAT
ptd
fusion protein, Expression in E. coli, Protein transduction
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型的建立与治疗
被引量：
1
3
作者
刘晓雯
王娇
袁萍
孙军
机构
三峡大学第一临床医学院(宜昌市中心人民医院)中心实验室&三峡大学心血管病研究所
华中科技大学同济医学院基础医学院生物化学与分子生物学系
出处
《巴楚医学》
2018年第2期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金项目(No:81402568
81472833)
+1 种基金
国家高科技研究与发展计划项目(863Program
No:2012AA020201)
文摘
目的:通过建立BALB/c小鼠原位瘤模型,模拟临床肿瘤环境,为观察PTD4-apoptin融合蛋白的抗肿瘤效应提供实验基础。方法:采用两种方法建立BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型,以PTD4-apoptin融合蛋白进行21天的短期治疗。TUNEL检测PTD4-apoptin融合蛋白的促凋亡效应,HE染色评估肿瘤的形态学变化。结果:与异体异位宫颈癌组织移植法相比,宫颈注射U14宫颈癌细胞悬液的成瘤效果更好。原位瘤给予PTD4-apoptin融合蛋白可显著抑制肿瘤生长,促进肿瘤细胞的凋亡。结论:小鼠宫颈注射U14宫颈癌细胞悬液可建立宫颈癌原位瘤模型,PTD4-apoptin融合蛋白可抑制该原位癌。
关键词
ptd
4-apoptin
融合
蛋白
U14宫颈癌细胞
小鼠宫颈癌原位瘤模型
凋亡
Keywords
ptd
4-apoptin
U14cervical carcinoma cell
mice model of cervical carcinoma in situ
apoptosis
分类号
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
R-332 [医药卫生]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
PTD-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的表达及活性分析
智庆文
王淑豪
张凤英
李仕贵
孙曼霁
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
下载PDF
职称材料
2
hCu,Zn-SOD-TAT PTD的融合表达及其跨膜转运性质的初步研究
汪飞鹏
桂向东
宋礼华
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2004
5
下载PDF
职称材料
3
BALB/c小鼠宫颈癌原位瘤模型的建立与治疗
刘晓雯
王娇
袁萍
孙军
《巴楚医学》
2018
1
下载PDF
职称材料
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