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题名贵阳腐霉Pr2蛋白酶cDNA片段的克隆与分析
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作者
段斯亮
于声
苏晓庆
唐荣兰
申海光
马新博
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机构
柳州医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室
柳州医学高等专科学校检验教研室
贵阳医学院生物学教研室
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出处
《广西医学》
CAS
2011年第12期1554-1556,共3页
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基金
广西教育科学研究基金资助项目(200810MS026)
柳州医学高等专科学校硕士研究生科研启动项目(2007Y01)
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文摘
目的克隆贵阳腐霉、Pr2蛋白酶的cDNA片段,改造贵阳腐霉基因。方法用几丁质诱导培养基培养贵阳腐霉24 h,然后抽提菌丝的总RNA,反转录合成cDNA第1链,根据Pr2蛋白酶的氨基酸保守序列设计合成简并引物,以cDNA第1链为模板,采用降落PCR技术扩增,将扩增的产物纯化、连入pGEM-T载体,转化大肠杆菌DH5α,送阳性克隆子测序。结果所获片段中,1个215 bp的cDNA片段与trypsin样蛋白酶家族基因有较高的相似性,其中与亚洲玉米螟的类胰蛋白酶基因相似性最大(52.8%)。结论这一DNA片段可能是贵阳腐霉Pr2蛋白酶的1条cDNA片段,更进一步的工作是设法获得全长cDNA片段,并加以证实。
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关键词
贵阳腐霉
pr2蛋白酶
CDNA片段
克隆
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Keywords
Pythium guiyangense
pr2
cDNA fragment
Clone
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分类号
R394.3
[医药卫生—医学遗传学]
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题名贵阳腐霉类胰蛋白酶纯化的初步研究
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作者
段斯亮
于声
苏晓庆
唐荣兰
申海光
马新博
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机构
柳州医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室
柳州医学高等专科学校检验教研室
贵阳医学院生物学教研室
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出处
《右江民族医学院学报》
2011年第5期603-605,共3页
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基金
广西教育厅科研项目(NO.200810MS026)
柳州医学高等专科学校硕士研究生科研启动项目经费资助(NO.2007Y01)
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文摘
目的对贵阳腐霉(Pythium guiyangense)类胰蛋白酶(trypsin-like protease,Pr2)进行初步的分离、纯化。方法将该菌诱导24h后获得的粗酶液,经过PEG20000的包埋浓缩、透析,和两次SephadexG-100凝胶层析后,进行SDS-PAGE电泳检测和分子量测定。结果纯化的Pr2蛋白酶经SDS-PAGE考马斯亮蓝染色显示为单一条带,分子量为31.5kDa。结论本研究初步纯化了贵阳腐霉Pr2蛋白酶,测得分子量为31.5kDa,为针对贵阳腐霉Pr2蛋白酶的进一步研究有重要意义。
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关键词
贵阳腐霉
pr2蛋白酶
分子量
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Keywords
Pythium guiyangense
trypsin-like protease
molecular weight
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分类号
Q936
[生物学—微生物学]
Q55
[生物学—生物化学]
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