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题名棉花杜松烯合成酶基因的克隆及其表达分析
被引量：1
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作者
周婷
郭三堆
张锐
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机构
中国农业科学院生物技术研究所国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程
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出处
《生物技术进展》
2011年第3期207-213,共7页
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基金
国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08005-004)资助
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文摘
杜松烯合成酶是棉酚合成途径中的关键酶,催化(E,E)-法呢基焦磷酸(FPP)环化形成(+)-δ-杜松烯。从陆地棉Y18R中克隆分离了杜松烯合成酶基因(GhCdn),该基因的基因组序列为2700bp,具有6个内含子,剪切后其ORF为1665bp,编码554个氨基酸,该基因属于杜松烯合成酶C亚家族。应用Overlap PCR方法将其上的2个HindⅢ酶切位点钝化后,将GhCdn基因连接到表达载体pBI121上,构建出分别由组成型启动子CaMV 35S和绿色组织高效启动子Psbp驱动的2个植物表达载体pGBI-CaMV 35S-GhCdn和pGBI-Psbp-GhCdn。通过农杆菌介导法转化棉花下胚轴并进行组织培养,获得了9个35S转基因阳性愈伤系和2个P转基因阳性愈伤系。经检测,阳性愈伤组织中GhCdn基因的mRNA表达量和棉酚含量均有所增加,但35S系普遍高于P系。本研究为通过基因工程手段提高棉花组织器官中的棉酚含量提供了依据。
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关键词
杜松烯合成酶基因
表达载体
CaMV
35S启动子
psbp启动子
棉酚
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Keywords
cadinene synthase gene
expression vector
CaMV 35S promoter
psbp promoter
gossypol
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分类号
S562
[农业科学—作物学]
Q943.2
[生物学—植物学]
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