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RAD测序技术及其在水生生物研究中的应用 被引量:7
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作者 胡景杰 任红艳 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期125-132,共8页
RAD测序技术是利用限制性内切酶消化降低基因组的复杂度,对特定的酶切片段进行高通量测序,实现基因分型的技术。RAD测序技术操作简便,能够不依赖参考基因组序列进行大规模SNP位点的开发,成为非模式生物尤其是水生生物最为有效、经济的SN... RAD测序技术是利用限制性内切酶消化降低基因组的复杂度,对特定的酶切片段进行高通量测序,实现基因分型的技术。RAD测序技术操作简便,能够不依赖参考基因组序列进行大规模SNP位点的开发,成为非模式生物尤其是水生生物最为有效、经济的SNP开发方法,RAD测序技术已经应用于群体进化、遗传图谱构建、QTL定位、性状关联和系统发生分析等研究领域,提供了解析重要的复杂性状分子机制的有效途径。 展开更多
关键词 rad测序技术 SNP标记 水生生物
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RAD测序法用于鸡双向选择家系群体遗传差异分析 被引量:2
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作者 翟正晓 赵文静 +3 位作者 刘书云 赵乐乐 何川 孟和 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2014年第2期89-94,共6页
SNPs遗传标记已成为群体遗传学和数量遗传学研究重要工具。RAD测序法是基于新一代高通量测序技术进行SNPs开发最为有效、经济的方法之一。研究以针对脂肪性状进行双向选择的髙脂-低脂鸡家系和针对体重性状进行双向选择的高体重鸡-低体... SNPs遗传标记已成为群体遗传学和数量遗传学研究重要工具。RAD测序法是基于新一代高通量测序技术进行SNPs开发最为有效、经济的方法之一。研究以针对脂肪性状进行双向选择的髙脂-低脂鸡家系和针对体重性状进行双向选择的高体重鸡-低体重鸡家系为对象,利用RAD测序法进行简化基因组测序及群体遗传差异分析。测序和分析结果显示,实验共获得57.88 M reads,平均每个个体检测到98 671个SNPs。群体pairwise Fst结果发现,在高脂-低脂鸡双向选择家系中,许多位点存在差异性,其中部分位点与前人研究结果相一致。在高脂-低脂双向选择家系中,例如5号染色体上的NOVA1区域呈现显著差异,表明该区域可能与鸡脂类代谢和腹脂沉积有重要关联;在高体重-低体重鸡双向选择家系中,存在一些群体差异缺失标签,例如高体重鸡的13号染色体上SH3RF2除第一个外显子以外区域基因信息的缺失,导致鸡体重显著增加,推测这种结构缺失变异可能与高强度人工选择有关。研究表明,RAD测序法不仅能够快速、准确地获得高通量SNPs遗传标记,而且具有较高分辨率,能够适用于诸如双向选择家系这种存在微小遗传差异群体间的遗传检测和分析。 展开更多
关键词 rad测序 双向选择家系 SNPS 遗传分析 下一代技术
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基于RAD测序技术的瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachellii)微卫星标记的开发 被引量:4
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作者 王青云 郭稳杰 +3 位作者 成为为 邓国乔 徐洪亮 夏儒龙 《水产科技情报》 2021年第5期250-254,共5页
采用RAD测序技术对瓦氏黄颡鱼进行简化基因组测序,利用MISA软件对拼接的数据进行SSR搜索。结果共获得2275778条contig序列,共检测到466983个SSR位点,其中二碱基重复位点最多,有335095个,占总数的71.8%。随机挑选碱基重复次数较多的微卫... 采用RAD测序技术对瓦氏黄颡鱼进行简化基因组测序,利用MISA软件对拼接的数据进行SSR搜索。结果共获得2275778条contig序列,共检测到466983个SSR位点,其中二碱基重复位点最多,有335095个,占总数的71.8%。随机挑选碱基重复次数较多的微卫星引物25对进行合成,有19对引物通过PCR扩增可以获得目的片段。用长江武汉段30个瓦氏黄颡鱼样本进行多态性验证,其中13个SSR验证为高多态性标记。这些高多态性瓦氏黄颡鱼标记可应用于其群体遗传学、亲子鉴定、分子标记辅助育种等方面的研究。 展开更多
关键词 瓦氏黄颡鱼 微卫星标记 rad测序 多态性
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基于RAD高通量测序探讨中国85种杜鹃花属植物的分类 被引量:14
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作者 李云飞 李世明 +8 位作者 金鑫 程书 王松波 侯军亮 刘家劲 段肖霞 马宏 马永鹏 张耕耘 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2019年第3期1-8,共8页
[目的]探讨RAD-seq技术在中国杜鹃花复杂类群分类与物种界定方面的优势。[方法]本研究对杜鹃花属85个种进行了RAD-seq测序,评估了数据的基本特征;同时,以马缨杜鹃基因组作为参考,获得高质量SNP位点,并进一步通过ADMIXTURE、PCA、GCTA及F... [目的]探讨RAD-seq技术在中国杜鹃花复杂类群分类与物种界定方面的优势。[方法]本研究对杜鹃花属85个种进行了RAD-seq测序,评估了数据的基本特征;同时,以马缨杜鹃基因组作为参考,获得高质量SNP位点,并进一步通过ADMIXTURE、PCA、GCTA及FastTree软件对其进行基因分型、聚类与系统树构建。[结果]本研究中85份材料比对至马缨杜鹃的平均比对率87.52%,在参考基因组上的平均覆盖度为5.21%,最终获得了620371个SNP位点。基于PCA、Structure聚类及系统发育树的分析结果,本研究支持目前在亚属水平(杜鹃亚属、常绿杜鹃亚属、马银花亚属、羊踯躅亚属、映山红亚属和长蕊杜鹃亚属)的形态学分类处理,并突出了鳞片在杜鹃属植物分类中的重要作用。[结论]RAD-seq数据产生的大量SNP位点可区分杜鹃花亚属和组内的大部分物种,说明其在复杂类群分类与物种界定方面具有可行性。 展开更多
关键词 rad测序 杜鹃花 单核苷酸多态性 资源利用
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RAD标记测序及其在分子育种中的应用 被引量:7
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作者 王冠杰 周波 李玉花 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期797-803,共7页
基于限制位点相关的DNA(restriction site associated DNA,RAD)标记的测序方法是一种新型的测序技术.其优点是不仅节省传统测序的试验成本,而且能快速准确的定位出数以千计的基因标记,从而更加适合分子辅助育种的应用.该方法可应用于寻... 基于限制位点相关的DNA(restriction site associated DNA,RAD)标记的测序方法是一种新型的测序技术.其优点是不仅节省传统测序的试验成本,而且能快速准确的定位出数以千计的基因标记,从而更加适合分子辅助育种的应用.该方法可应用于寻找DNA多态性,鉴别SNP,构建未知基因组序列生物的遗传图谱,定位目的性状基因等.本文主要综述了RAD标记和RAD测序的研究进展及其在分子育种中的应用. 展开更多
关键词 限制位点相关的DNA(rad)标记 rad测序 遗传图谱
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分子标记及RAD测序辅助选择改造两系不育系水稻粒型 被引量:3
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作者 侯军亮 席杏媛 +13 位作者 李世明 李泽桦 李刚 伏琦 李云飞 鄢阳天 杨麒生 喻涵 夏秋菊 刘宝龙 李勇 张耕耘 赵山岑 倪雪梅 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期2552-2558,共7页
长粒型稻米具有垩白度低,直链淀粉含量高,蒸煮后坚韧蓬松的优点。为了改良水稻粒型,本研究以‘R15’为长粒型基因供体材料,‘Y58S’光温敏两系不育系作为轮回亲本进行改良,开发出了与控制粒型的qGL7紧密连锁的分子标记R072774。利用该... 长粒型稻米具有垩白度低,直链淀粉含量高,蒸煮后坚韧蓬松的优点。为了改良水稻粒型,本研究以‘R15’为长粒型基因供体材料,‘Y58S’光温敏两系不育系作为轮回亲本进行改良,开发出了与控制粒型的qGL7紧密连锁的分子标记R072774。利用该分子标记在每一代选出含有长粒型基因的株系进行建库测序,利用RAD重测序数据进行基因组选择,选择含有长粒型基因且基因组背景最接近轮回亲本‘Y58S’的个体。从F2代开始进行回交,经过4代回交和1代自交,F2代及回交后代与‘Y58S’遗传背景平均相似率为F2(37.07%)<BC1F1(53.03%)<BC2F1(97.89%)。最终得到的新品系系‘深华香15S’总共有356 920 821 bp的片段与轮回亲本‘Y58S’一致,占基因组的95.62%。7号染色体22 482 655~29 697 621 bp区间被‘R15S’替换,使得新品系携带有长粒型基因。与亲本‘Y58S’相比,‘深华香15S’籽粒长度增加29%,长宽比增加了51.7%,成功培育出长粒型水稻不育系。本研究为快速选择、培育长粒型水稻提供了理论和实践参考。 展开更多
关键词 分子标记辅助选择 rad测序 qGL7 光温敏两系不育系
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基于RAD测序技术开发鸦片罂粟地域(品种)特异性SNP位点 被引量:2
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作者 王白石 宋炳轲 +8 位作者 高珊 聂昊 杨宇晨 付钶钶 王德兰 徐小玉 张瑾 张颖 丛斌 《中国法医学杂志》 CSCD 2022年第3期232-237,共6页
在我国,鸦片罂粟的违法种植是境内阿片类毒品的主要来源。利用新型、高效的分子标记对鸦片罂粟进行溯源推断可以从源头上对毒品进行铲除,对涉毒案件的侦破具有重要意义。但是,由于地域特异性分子标记的缺乏,我国法庭科学中鸦片罂粟DNA... 在我国,鸦片罂粟的违法种植是境内阿片类毒品的主要来源。利用新型、高效的分子标记对鸦片罂粟进行溯源推断可以从源头上对毒品进行铲除,对涉毒案件的侦破具有重要意义。但是,由于地域特异性分子标记的缺乏,我国法庭科学中鸦片罂粟DNA溯源推断方法及体系一直处于空白阶段。基于此,本研究应用RAD简化测序技术对国内3个地区鸦片罂粟植株及1个特殊的蒂巴因品种进行了群体简化测序和组装,并对其SNP位点进行了开发和特异性检测。鸦片罂粟各地域(品种)间的特异性SNP位点结果分别为:甘肃品种(bai)1988个,蒂巴因品种(T)9959个,郑州品种(ZZ)12080个;武汉品种(WH)3110个。本研究获得的一系列罂粟地域(品种)特异性SNP位点,为今后罂粟溯源体系的构建提供了充足的分子标记支持。RAD简化测序技术更是为毒品原植物溯源体系的构建提供了一种理想的特异性位点获取方法,对于涉毒案件中及时发现、铲除毒品源头具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 罂粟 rad简化 分子标记 SNP位点
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RAD-seq技术研究鹅掌楸属种源遗传多样性和遗传结构 被引量:3
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作者 潘文婷 孙建军 +3 位作者 原勤勤 张利利 邓康桥 厉月桥 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第4期74-81,共8页
【目的】揭示鹅掌楸属遗传结构和地理变异特点,为鹅掌楸属遗传资源的保存、利用及改良提供依据。【方法】以9个鹅掌楸种源97份样本和4个北美鹅掌楸种源46份样本为材料,采用RAD-seq测序鉴定各样本SNP标记,计算观测杂合度(Ho)、期望杂合度... 【目的】揭示鹅掌楸属遗传结构和地理变异特点,为鹅掌楸属遗传资源的保存、利用及改良提供依据。【方法】以9个鹅掌楸种源97份样本和4个北美鹅掌楸种源46份样本为材料,采用RAD-seq测序鉴定各样本SNP标记,计算观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、核苷酸多样性(π)和基因分化系数(Gst)等遗传统计量指标,分析鹅掌楸属种源遗传多样性和遗传结构。【结果】在143份鹅掌楸属样本中共鉴定出4454个高质量的SNP标记;鹅掌楸种源之间存在较大的遗传分化以及中水平的基因流(Gst=0.2419、Nm=0.8051),北美鹅掌楸种源之间存在很大的的遗传分化以及低水平的基因流(Gst=0.3886>0.25、Nm=0.3970);通过结构分析将13个鹅掌楸属种源分为3个类群,其中9个中国的鹅掌楸种源被分为东部种源群(即类群2)和西部种源群(即类群1),类群3均为北美鹅掌楸,遗传多样性顺序为:类群3>类群1>类群2。【结论】鹅掌楸属遗传结构的形成与其地理隔离和片段化分布有关,且存在由于小群体效应和片段化影响导致的濒危现象,本研究开发的SNP标记可为鹅掌楸属分子鉴定、种质创新及种质资源收集与保存提供参考。 展开更多
关键词 鹅掌楸属 rad测序 遗传多样性 遗传结构
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RAD-seq技术在基因组研究中的现状及展望 被引量:47
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作者 王洋坤 胡艳 张天真 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期41-49,共9页
Restriction-site associated DNA sequencing(RAD-seq)技术是在二代测序基础上发展起来的一项基于全基因组酶切位点的简化基因组测序技术。该方法技术流程简单,不受有无参考基因组的限制,可大大简化基因组的复杂性,减少实验费用,通过... Restriction-site associated DNA sequencing(RAD-seq)技术是在二代测序基础上发展起来的一项基于全基因组酶切位点的简化基因组测序技术。该方法技术流程简单,不受有无参考基因组的限制,可大大简化基因组的复杂性,减少实验费用,通过一次测序就可以获得数以万计的多态性标记。目前,RAD-seq技术已成功应用于超高密度遗传图谱的构建、重要性状的精细定位、辅助基因组序列组装、群体基因组学以及系统发生学等基因组研究热点领域。文章主要介绍了RAD-seq的技术原理、技术发展及其在基因组研究中的广泛应用。鉴于RAD-seq方法的独特性,该技术必将在复杂基因组研究领域具有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 rad-seq 基因组 遗传图谱 SNP 双酶系统的rad(ddrad)
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Genomics and introgression: Discovery and mapping of thousands of species-diagnostic SNPs using RAD sequencing 被引量:1
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作者 Brian K. HAND Tyler D. HETHER +8 位作者 Ryan P. KOVACH Clint C. MUHLFELD Stephen J. AMISH Matthew C. BOYER Sean M. O'ROURKE Michael R. MILLER Winsor H. LOWE Paul A. HOHENLOHE Gordon LUIKART 《Current Zoology》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期146-154,共9页
Invasive hybridization and introgression pose a serious threat to the persistence of many native species. Understand- ing the effects of hybridization on native populations (e.g., fitness consequences) requires nume... Invasive hybridization and introgression pose a serious threat to the persistence of many native species. Understand- ing the effects of hybridization on native populations (e.g., fitness consequences) requires numerous species-diagnostic loci dis- tributed genome-wide. Here we used RAD sequencing to discover thousands of single-nucleotide polymorphisms (SNPs) that are diagnostic between rainbow trout (RBT, Oncorhynchus mykiss), the world's most widely introduced fish, and native westslope cutthroat trout (WCT, (9. clarkii lewisi) in the northern Rocky Mountains, USA. We advanced previous work that identified 4,914 species-diagnostic loci by using longer sequence reads (100 bp vs. 60 bp) and a larger set of individuals (n = 84). We sequenced RAD libraries for individuals from diverse sampling sources, including native populations of WCT and hatchery broodstocks of WCT and RBT. We also took advantage of a newly released reference genome assembly for RBT to align our RAD loci. In total, we discovered 16,788 putatively diagnostic SNPs, 10,267 of which we mapped to anchored chromosome locations on the RBT genome. A small portion of previously discovered putative diagnostic loci (325 of 4,914) were no longer diagnostic (i.e., fixed between species) based on our wider survey of non-hybridized RBT and WCT individuals. Our study suggests that RAD loci mapped to a draft genome assembly could provide the marker density required to identify genes and chromosomal regions in- fluencing selection in admixed populations of conservation concern and evolutionary interest [Current Zoology 61 (1): 146-154, 2015]. 展开更多
关键词 Conservation genetics HYBRIDIZATION Invasive species Next generation sequencing Salmonid fish SNP discovery
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