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骨质疏松环境下骨髓间充质干细胞外泌体通过OPG/RANKL调控破骨分化
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作者 杨楠 夏雨 +3 位作者 张岩 陈旭 来洁 梁莉 《口腔颌面修复学杂志》 2024年第2期81-87,共7页
目的:绝经后骨质疏松PMOP(postmenopause osteoporosis)是一种慢性炎症性疾病,破骨细胞的异常活化是发病的重要原因之一。病理环境下骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)外泌体对破骨细胞的作用及影响尚不明确... 目的:绝经后骨质疏松PMOP(postmenopause osteoporosis)是一种慢性炎症性疾病,破骨细胞的异常活化是发病的重要原因之一。病理环境下骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)外泌体对破骨细胞的作用及影响尚不明确。本研究分析了PMOP环境下,BMSCs外泌体(exosome,Exo)对破骨细胞分化的调控作用,对于明确骨质疏松的发病机制具有至关重要的意义。方法:分别从正常和绝经后骨质疏松患者骨髓中提取BMSCs,通过超速离心联合Exoquick试剂盒分别提取两种细胞的Exo,即正常BMSCs外泌体(healthyExo,H-Exo)和绝经后骨质疏松骨髓间充质干细胞外泌体(postmenopause osteoporosis-Exo,P-Exo),并通过透射电子显微镜(TEM),纳米颗粒示踪分析技术(NTA)、Western blot对分离的外泌体进行鉴定;两种不同的外泌体被引入RAW264.7细胞中,以便通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、Western blot分析和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色来评估RAW264.7细胞中破骨分化相关指标的表达。同时,使用Western blot和ELISA方法来测定这两种外泌体中OPG/RANKL蛋白的表达水平。实验数据通过SPSS 24.0软件进行统计分析。结果:对提取后的两种外泌体进行形态学比较发现,与H-Exo相比,P-Exo直径更大,P-Exo能够促进RAW264.7细胞破骨分化标志性基因NFATC1和Trap mRNA及蛋白的表达,Trap染色可见分化的破骨细胞,Western blot及ELISA检测两种外泌体OPG/RANKL的表达发现,与H-Exo相比,P-Exo内OPG的表达量下降,而RANKL表达量升高。结论:绝经后骨质疏松中骨吸收增加,可能是炎症微环境下,BMSCs外泌体通过传递RANKL,促进破骨细胞分化引起的。此项研究为深入研究骨质疏松病因的开辟了新的途径,并为骨质疏松的治疗提供了新的治疗靶点。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松 骨髓间充质干细胞 外泌体 骨保护素(OPG) rankl
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OPG/RANKL/RANK信号通路在脓毒症相关急性肾损伤小鼠中的研究
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作者 李辉 陈蔚霖 牛新荣 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第3期168-174,共7页
目的:探讨骨保护素(OPG)/核因子⁃κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子⁃κB受体激活因子(RANK)信号通路因子在脓毒症相关急性肾损伤(SA⁃AKI)小鼠中的改变及可能的作用,为SA⁃AKI的机制研究探索新的思路。方法:通过盲肠结扎穿孔手术(CLP)建... 目的:探讨骨保护素(OPG)/核因子⁃κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子⁃κB受体激活因子(RANK)信号通路因子在脓毒症相关急性肾损伤(SA⁃AKI)小鼠中的改变及可能的作用,为SA⁃AKI的机制研究探索新的思路。方法:通过盲肠结扎穿孔手术(CLP)建立SA⁃AKI模型组(CLP组),对照组为假手术组(Sham组),只行开腹不做盲肠结扎穿孔操作。术后24 h采血并处死留取小鼠肾脏组织,用试剂盒检测血清Scr、BUN水平,酶联免疫测定法(ELISA)检验血清中IL⁃6、TNF⁃α、IL⁃1β水平,苏木精⁃伊红染色(HE)观测肾组织病理学变化,聚合酶链反应(RT⁃qPCR)和蛋白质印迹实验(Western blotting)检验小鼠肾组织中OPG、RANKL、RANK的mRNA和蛋白水平。结果:与Sham组对比,CLP组Scr、BUN、IL⁃6、TNF⁃α、IL⁃1β水平显著升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Sham组对比,CLP组肾小球充血水肿,部分缺血皱缩,球囊间隙扩大,部分肾小管中可见坏死的上皮细胞,管腔扩大,肾间质水肿,少量炎性细胞浸润;与Sham组相比较,CLP组肾组织中OPG和RANK的mRNA表达显著上调,而RANKL的mRNA表达明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Sham组相比较,CLP组肾脏组织中OPG及RANK的蛋白表达均升高,而RANKL的蛋白表达明显下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:在脓毒症的小鼠模型中OPG及RANK表达升高,RANKL表达下降,表明OPG/RANKL/RANK信号通路可能参与了SA⁃AKI的病理生理过程。 展开更多
关键词 脓毒症 急性肾损伤 OPG/rankl/RANK信号通路
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超前镇痛方案对跟骨关节内骨折患者OPG/RANKL信号通路因子表达的影响
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作者 王剑 欧阳彬 李强 《临床和实验医学杂志》 2024年第4期438-441,共4页
目的 探讨跟骨关节内骨折患者采用超前镇痛方案对骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路因子表达的影响。方法 回顾性选取2017年2月至2022年2月大庆油田总医院收治的跟骨关节内骨折患者100例,依据镇痛方案不同分为... 目的 探讨跟骨关节内骨折患者采用超前镇痛方案对骨保护素(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)信号通路因子表达的影响。方法 回顾性选取2017年2月至2022年2月大庆油田总医院收治的跟骨关节内骨折患者100例,依据镇痛方案不同分为对照组和观察组,每组各50例。对照组患者接受常规性静脉自控镇痛方案,观察组患者接受地佐辛超前镇痛联合常规性静脉自控镇痛方案。统计分析两组围手术期指标(术中出血量、手术时间、术后引流量、术后引流时间、住院时间),麻醉前、手术前、手术后即刻的血流动力学(平均动脉压、心率),手术前、手术后1 d的应激反应[C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)],手术后即刻,手术后6 h、12 h、1 d的镇静[Ramsay镇静评分(RSS)、视觉模拟评分法(VAS)评分]和镇痛效果,以及手术后1 d、手术后1周的血清OPG、RANKL含量和术后并发症发生情况。结果 两组患者的术中出血量、手术时间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);观察组患者的术后引流量为(59.86±2.54) mL,少于对照组[(110.97±9.41) mL],术后引流时间、住院时间分别为(123.23±9.82) h、(5.61±0.45) d,均短于对照组[(178.22±9.32) h、(8.01±0.31) d],差异均有统计学意义(P<0.05)。麻醉前、手术前、手术后即刻,两组患者的平均动脉压、心率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。手术后1 d,两组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6、PGE2水平均明显高于手术前,观察组患者的血清CRP、TNF-α、IL-6、PGE2水平分别为(5.11±1.47) mg/L、(43.15±7.51)μg/L、(32.52±5.31) ng/L、(138.11±12.68) pg/mL,均明显低于对照组[(21.42±3.44) mg/L、(87.60±13.56)μg/L、(75.77±21.35) ng/L、(144.60±15.20) pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。与手术后即刻比较,两组患者手术后6、12、24 h的RSS评分、VAS评分均逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05);手术后6、12、24 h,两组患者的RSS评分、VAS评分比较差异均无统计学意义(P>0.05)。手术后1周,两组患者的血清OPG、RANKL含量均高于手术后1 d,且观察组患者的血清OPG、RANKL含量分别为(188.86±21.47)、(108.37±10.43) pg/mL,均高于对照组[(177.75±19.23)、(98.76±8.26) pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的术后并发症发生率为8.00%,明显低于对照组(32.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 超前镇痛方案能够促进跟骨关节内骨折患者OPG/RANKL信号通路因子表达及患者术后康复,提高镇痛效果,减少术后并发症的发生。 展开更多
关键词 跟骨 骨折 手术后并发症 超前镇痛方案 OPG/rankl信号通路因子
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基于AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路研究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠愈合的机制
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作者 林玉玲 李杰玉 +3 位作者 李增一 刘琳 籍胤玺 金毅 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期133-137,共5页
目的基于AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(sirt)1/核转录因子(NF)-κB受体活化蛋白配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路,探究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠骨折愈合的机制。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤... 目的基于AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(sirt)1/核转录因子(NF)-κB受体活化蛋白配体(RANKL)/骨保护素(OPG)信号通路,探究补阳还五汤促进骨质疏松性骨折大鼠骨折愈合的机制。方法将大鼠随机分成假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组(6.25 g/kg)、补阳还五汤中剂量组(12.50 g/kg)和补阳还五汤高剂量组(25.00 g/kg)。除假手术组外,其余组均构建骨质疏松性骨折模型,并给予相应剂量药物干预。检测大鼠骨密度(BMD)值、骨折愈合评分及骨痂体积;自动生化分析仪测定血清碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素、钙和磷水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测股骨组织中的丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠骨痂组织的病理形态;Western印迹检测股骨组织中AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组骨痂骨小梁分布稀疏,成骨细胞大量减少且有纤维组织生成,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著升高(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著降低(P<0.05)。与模型组相比,补阳还五汤低、中、高剂量组骨痂骨小梁分布较为密集,成骨细胞增加,骨痂体积、血清中ALP、骨钙素、钙和磷水平及股骨组织中MDA水平、RANKL蛋白水平显著降低(P<0.05),BMD值、骨折愈合评分、骨组织中SOD和GSH-Px水平和AMPK、sirt1、OPG蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论补阳还五汤可能通过抑制氧化应激反应,调节AMPK/sirt1/RANKL/OPG通路,发挥对骨质疏松骨折大鼠的治疗作用。 展开更多
关键词 补阳还五汤 骨质疏松性骨折 氧化应激 AMP活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子(sirt)1/核转录因子(NF)-κB受体活化蛋白配体(rankl)/骨保护素(OPG)通路
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脂联素调节循环RANKL/OPG治疗糖尿病性骨质疏松的实验研究
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作者 涂来勇 田峰 +6 位作者 张恩丰 顾文飞 单烁 马志杰 刘毅 胡铜 赵疆 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期494-499,共6页
目的探讨脂联素对外周循环RANKL/OPG的调节作用,及对糖尿病性骨质疏松的治疗作用。方法使用高脂饮食联合链脲佐霉素构建糖尿病性骨质疏松模型小鼠,使用脂联素治疗,使用阿仑膦酸钠治疗作为阳性对照。分组为:对照组、模型组、治疗组、阳... 目的探讨脂联素对外周循环RANKL/OPG的调节作用,及对糖尿病性骨质疏松的治疗作用。方法使用高脂饮食联合链脲佐霉素构建糖尿病性骨质疏松模型小鼠,使用脂联素治疗,使用阿仑膦酸钠治疗作为阳性对照。分组为:对照组、模型组、治疗组、阳性对照组。完成干预后,测量小鼠体重,收集小鼠静脉血并检测空腹血糖水平、葡萄糖耐量试验、血清RANKL/OPG。分别从各组小鼠股骨提取原代骨髓间充质干细胞,诱导成骨分化并茜素红染色,检测Opg、Rankl基因的表达量。获得小鼠腰3椎体,检测各组小鼠骨微细结构变化。结果脂联素治疗后,与模型组相比,治疗组体重明显下降,空腹血糖水平明显下降,葡萄糖耐量试验明显接近正常水平,血清OPG水平上升,血清RANKL水平下降,血清RANKL/OPG下降。与对照组相比,模型组骨髓间充质干细胞成骨能力明显减弱,显著上调RANKL/OPG;与模型组相比,治疗组骨髓间充质干细胞成骨分化能力明显增强,显著下调RANKL/OPG。脂联素治疗后能显著提高单位长度成骨细胞数量、骨小梁面积百分数、骨小梁厚度。结论脂联素能够降低糖尿病小鼠体重,降低空腹血糖,部分恢复机体的血糖调节能力,促进Opg基因的表达,抑制Rankl基因的表达,促进骨髓间充质干细胞成骨分化,改善骨微细结构,是一种潜在的治疗糖尿病性骨质疏松的选择。 展开更多
关键词 脂联素 rankl OPG 糖尿病性骨质疏松
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利用昆虫细胞表达猪RANKL蛋白及其生物学活性分析
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作者 周亚伟 蒋华正 +4 位作者 杨宁 付钰广 李宝玉 杨彬 刘光亮 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期255-260,共6页
将猪RANKL基因克隆至杆状病毒供体质粒pFastBacHTA中,经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组供体载体pFastBacHTA-RANKL,将其转化至含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体,获得重组转座子Bacmid-RANKL,在脂质... 将猪RANKL基因克隆至杆状病毒供体质粒pFastBacHTA中,经酶切鉴定及测序筛选出阳性重组供体载体pFastBacHTA-RANKL,将其转化至含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体,获得重组转座子Bacmid-RANKL,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,获得含RANKL基因的重组杆状病毒。经SDS-PAGE分析、Western-blot分析以及IFA试验,证明RANKL基因在sf9细胞中成功表达。利用表达的RANKL蛋白刺激IPEC-J2细胞,采用qPCR方法检测处理后细胞中M细胞相关标志基因的表达。结果显示,与阴性对照组相比,猪RANKL处理后的细胞中M细胞特异性的标记基因CK-18、Marcksl1、Sgene1、Spib、CCL20、UBD、NCF4、TRAF6表达量都显著上调。这表明本研究表达的猪RANKL具有良好的生物学活性,可成功诱导IPEC-J2细胞向M细胞分化。本研究结果为后续进一步研究猪肠道M细胞的分化,及研制增强猪肠道黏膜免疫应答的M细胞靶向疫苗打下了良好的物质基础。 展开更多
关键词 rankl M细胞 杆状病毒表达系统
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催乳素对奶牛RANKL基因启动子活性的研究
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作者 毛永尽 杨慧琳 +2 位作者 马晓聪 赵锋 崔英俊 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2024年第2期33-37,共5页
文章以奶牛乳腺上皮细胞为实验模型,探讨催乳素对RANKL基因启动子活性的调节。采用Western Blot方法检测催乳素对RANKL蛋白表达的影响,构建RANKL启动子荧光素酶载体,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测催乳素对RANKL基因启动子活性影响... 文章以奶牛乳腺上皮细胞为实验模型,探讨催乳素对RANKL基因启动子活性的调节。采用Western Blot方法检测催乳素对RANKL蛋白表达的影响,构建RANKL启动子荧光素酶载体,采用双荧光素酶报告基因检测系统检测催乳素对RANKL基因启动子活性影响,采用定点合成突变的方法,构建突变型RANKL启动子荧光素酶载体,运用双荧光素酶报告基因检测系统检测催乳素对突变型RANKL启动子活性影响。结果表明,催乳素能够显著提高乳腺上皮细胞RANKL启动子活性及RANKL蛋白表达,催乳素响应元件在奶牛RANKL基因启动子-826~-814 bp区域。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 催乳素 rankl STAT5a
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基于RANKL/RANK/OPG信号轴探讨骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用
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作者 方祥 周正新 +3 位作者 朱磊 芮仞 许茂玉 朱彩玉 《中国现代医学杂志》 CAS 2024年第7期27-33,共7页
目的观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用,并从核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子/骨保护素(RANKL/RANK/OPG)信号轴探讨其作用机制。方法采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙复制激素性股骨... 目的观察骨痹通消颗粒对激素性股骨头坏死模型小鼠的治疗作用,并从核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子/骨保护素(RANKL/RANK/OPG)信号轴探讨其作用机制。方法采取腹腔注射脂多糖和臀肌注射醋酸泼尼松龙复制激素性股骨头缺血坏死(SONFH)动物模型,经核磁共振鉴定后,将模型复制成功的60只小鼠分成模型(MC)组、骨痹通消颗粒(GBTX)组及通络生骨胶囊(PC)组,每组20只,另设12只正常小鼠作为空白对照(NC)组。分别予以对应组灌胃相应药物12周后麻醉状态下取材,观察各组小鼠治疗前后的一般行为;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠的骨碱性磷酸酶(BALP)和I型氨基端延长肽(PINP)含量;Western blotting和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)检测各组RANK、RANKL、OPG、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Cγ2(PLCγ2)、组织蛋白酶K(CTSK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的蛋白和基因表达。结果核磁共振显示,模型复制成功后的小鼠左侧髋部呈高信号状态。与NC组比较,MC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均降低(P<0.05),RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均升高(P<0.05);与MC组比较,GBTX组和PC组BALP、PINP水平,以及OPG蛋白和基因相对表达量均升高(P<0.05),RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量均下降(P<0.05);与GBTX组比较,PC组OPG、RANK、RANKL、CTSK、TRAP蛋白和基因相对表达量,以及PLCγ2蛋白相对表达量差异均无统计学意义(P>0.05),而PC组PLCγ2基因相对表达量较GBTX组下降(P<0.05)。结论骨痹通消颗粒可能通过上调OPG表达,抑制RANK、RANKL、PLCγ2、CTSK和TRAP表达,从而改善股骨头坏死情况。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 骨痹通消颗粒 rankl/RANK/OPG信号轴
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Study of the OPG/RANKL/RANK signaling pathway in mice treated with sepsis-related acute kidney injury
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作者 LI Hui CHEN Wei-lin NIU Xinrong 《Journal of Hainan Medical University》 CAS 2024年第3期8-14,共7页
Objective:The objective of this study was to investigate the alterations and potential implications of the Osteoprotegerin(OPG)/Receptor Activator of Nuclear Factor-kappa B Ligand(RANKL)/Receptor Activator of Nuclear ... Objective:The objective of this study was to investigate the alterations and potential implications of the Osteoprotegerin(OPG)/Receptor Activator of Nuclear Factor-kappa B Ligand(RANKL)/Receptor Activator of Nuclear Factor-kappa B(RANK)signaling pathway factors in a murine model of sepsis-associated acute kidney injury(SA-AKI).This research aimed to offer novel insights into the mechanistic exploration of SA-AKI.Methods:The SA-AKI model group(CLP group)was established through cecal ligation and puncture surgery(CLP),while the control group consisted of sham-operated animals(Sham group)subjected only to laparotomy without cecal ligation and puncture.Blood samples were collected 24 h post-surgery,and murine kidney tissues were harvested upon euthanasia.Serum levels of Serum Creatinine(Scr)and Blood Urea Nitrogen(BUN)were quantified using assay kits.Furthermore,serum levels of interleukin-6(IL-6),tumor necrosis factor-alpha(TNF-α),and interleukin-1 beta(IL-1β)were assessed through enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).Renal tissue pathological alterations were examined employing hematoxylin-eosin staining(HE),and the mRNA and protein levels of OPG,RANKL,and RANK in murine kidney tissues were determined via reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR)and Western blotting.Results:Comparative analysis revealed that,in comparison to the Sham group,the CLP group demonstrated a significant elevation in the levels of Scr,BUN,IL-6,TNF-α,and IL-1β,with statistically significant disparities(all P<0.05).Histopathological examination of the CLP group's kidneys unveiled glomerular congestion,edema,partial ischemic wrinkling,enlargement of interstitial spaces,the presence of necrotic epithelial cells in select renal tubules,tubular luminal dilation,varying degrees of interstitial edema,and infiltration by a limited number of inflammatory cells.In parallel,relative to the Sham group,the CLP group exhibited substantial upregulation in mRNA expression of OPG and RANK in renal tissues,while RANKL mRNA expression experienced marked downregulation,with statistically significant distinctions(all P<0.05).Moreover,in comparison with the Sham group,the CLP group demonstrated an elevation in protein expression of OPG and RANK in kidney tissues,whereas RANKL protein expression displayed significant downregulation,with statistically significant differences(all P<0.05).Conclusion:In a murine sepsis model,augmented expression of OPG and RANK,coupled with diminished RANKL expression,suggests the potential involvement of the OPG/RANKL/RANK signaling pathway in the pathophysiological progression of SA-AKI. 展开更多
关键词 SEPSIS Acute kidney injury OPG/rankl/RANK signaling pathway
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基于OPG/RANKL及Notch1信号通路探讨温针灸对膝骨性关节炎兔软骨下骨损伤的影响
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作者 冯伦冬 黄卫 +1 位作者 李厚臣 杨晓倩 《针灸临床杂志》 2024年第1期78-82,共5页
目的:观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)兔软骨下骨的骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化子配体(RANKL)及Notch1信号通路的影响,探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取新西兰雌雄兔共50只(6个月),随机分为空白组、模型组、药物组和温针灸... 目的:观察温针灸对膝骨性关节炎(KOA)兔软骨下骨的骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化子配体(RANKL)及Notch1信号通路的影响,探讨温针灸治疗KOA的作用机制。方法:选取新西兰雌雄兔共50只(6个月),随机分为空白组、模型组、药物组和温针灸组。采用管型石膏伸直位固定法建立兔KOA模型。经6周实验干预后采用HE染色观察各组软骨下骨形态结构,蛋白质印迹法检测OPG、RANKL及Notch1蛋白表达,实时荧光定量PCR检测各组软骨下骨中OPG、RANKL及Notch1 mRNA含量。结果:与模型组比较,药物组和温针灸组软骨表面相对光滑完整,结构较为清晰,软骨下骨处细胞分布较为整齐均匀。与空白组比较,模型组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,药物组和温针灸组Lequesne MG评分、Mankin评分、RANKL mRNA、Notch1 mRNA、RANKL及Notch1蛋白表达水平均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG mRNA、OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1比值均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。温针灸组Lequesne MG评分及Mankin评分均明显低于药物组,差异具有统计学意义(P<0.01),而OPG蛋白、OPG/RANKL及OPG/Notch1水平均高于药物组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:温针灸可促进OPG表达,抑制RANKL及Notch1表达,通过调控OPG/RANKL及Notch1信号通路,减轻KOA兔软骨下骨的损伤,从而起到治疗KOA的作用。 展开更多
关键词 膝骨性关节炎 温针灸 骨保护素 核因子κB受体活化子配体 NOTCH1
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低强度激光对正畸牙齿移动的疗效及对龈沟液IL-1β,RANKL和OPG表达水平的影响 被引量:2
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作者 董晶 张哲谌 李凌志 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期243-247,共5页
目的:探讨低强度激光(LILT)对正畸牙齿移动的疗效及龈沟液白细胞介素-1β(IL-1β),核因子κB受体激活剂配体(RANKL)和骨保护素(OPG)水平的影响。方法:纳入正畸治疗患者60例,随机分为试验组和对照组各30例,对照组使用牙齿正畸治疗,实验... 目的:探讨低强度激光(LILT)对正畸牙齿移动的疗效及龈沟液白细胞介素-1β(IL-1β),核因子κB受体激活剂配体(RANKL)和骨保护素(OPG)水平的影响。方法:纳入正畸治疗患者60例,随机分为试验组和对照组各30例,对照组使用牙齿正畸治疗,实验组加用LILT治疗。比较治疗后牙齿累积移动距离(CMD)和平均回缩速度(ARS),以及不同时间段疼痛VAS评分和龈沟液IL-1β,RANKL和OPG水平。结果:试验组7、14、21 d,28 d牙齿CMD均大于对照组(P<0.05),7、14和21 d ARS均高于对照组(P<0.05),治疗后4、24 h,7、14、21 d VAS评分均低于对照组(P<0.05),7 d OPG低于对照组,7、14和21 d RANKL高于对照组,21 d和28 d IL-1β高于对照组,7 d RANKL/OPG比率高于对照组(均P<0.05)。结论:LILT可通过影响骨代谢加速正畸牙齿的移动,并缓解治疗过程中的牙齿疼痛与牙周炎症。 展开更多
关键词 低强度激光 正畸牙齿移动 IL-1Β rankl OPG
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Piezo1介导流体剪切力及RANKL分泌在骨质疏松中的研究进展
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作者 陈彦强 姜金 刘京升 《甘肃医药》 2023年第6期489-492,共4页
骨质疏松症(OP)是一种会导致骨脆性和骨折易感性增加的系统性骨骼疾病。OP已成为老龄化社会严重的健康问题。当前对于OP的病理生理基础是破骨细胞和成骨细胞的失衡。Piezo1蛋白质是一种“机械传感器”,研究发现Piezo1可能在机械负荷依... 骨质疏松症(OP)是一种会导致骨脆性和骨折易感性增加的系统性骨骼疾病。OP已成为老龄化社会严重的健康问题。当前对于OP的病理生理基础是破骨细胞和成骨细胞的失衡。Piezo1蛋白质是一种“机械传感器”,研究发现Piezo1可能在机械负荷依赖的骨形成和重塑中发挥重要作用。在力学刺激条件下,Piezo1可以影响破骨细胞的分化和功能,从而反映Piezo1对骨骼系统的重要性。除此之外,破骨细胞分化因子信号通路对破骨细胞增殖和分化至关重要。RANKL/RANK/OPG系统信号通路对破骨细胞增殖分化至关重要,而破骨细胞循环受RANKL信号调控。有研究表示RANKL可以通过影响破骨细胞和成骨细胞的形成来间接影响OP的发生,但是Piezo1介导流体剪切力及RANKL分泌在OP中的机制研仍需进一步研究,本文对以上相关问题作一综述。 展开更多
关键词 骨质疏松 成骨细胞 破骨细胞 Piezo1 rankl
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基于OPG/RANKL/RANK信号通路探讨益肾健骨方 防治 绝经后骨质疏松的作用机制 被引量:5
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作者 叶子丰 戎宽 +3 位作者 张信成 匡建军 万明明 许辉 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期23-28,57,共7页
目的通过研究益肾健骨方对破骨细胞的影响,进一步揭示益肾健骨方对绝经后骨质疏松症的作用机制。方法大鼠去双侧卵巢造模后分为实验组(去势+益肾健骨方灌胃)、模型组(去势+生理盐水灌胃)、假手术组(假手术+生理盐水灌胃)、阳性药物对照... 目的通过研究益肾健骨方对破骨细胞的影响,进一步揭示益肾健骨方对绝经后骨质疏松症的作用机制。方法大鼠去双侧卵巢造模后分为实验组(去势+益肾健骨方灌胃)、模型组(去势+生理盐水灌胃)、假手术组(假手术+生理盐水灌胃)、阳性药物对照组(去势+阿仑膦酸钠灌胃),提取各组BMSCs进行培养、传代后备用,同时分离刚出生不久的大鼠破骨前体细胞进行体外培养,将各组骨髓间充质干细胞与破骨前体细胞共培养构建共培养体系。观察破骨细胞分化与成熟情况,并采用Real-time PCR与Western blot检测骨髓间充质干细胞与破骨前体细胞共培养体系中Wnt10b、β-Catenin、OPG、RANKL的表达情况。结果在共培养体系中模型+OC组Wnt10b、β-Catenin、OPG mRNA与蛋白表达最低,RANKL mRNA与蛋白表达最高,假手术+OC组表达最高,益肾健骨方与阳性对照物组处理后可提升Wnt10b、β-Catenin、OPG mRNA与蛋白的表达情况,且两组间比较差异无统计学意义。在共培养体系中模型+OC组RANKL mRNA与蛋白表达最高,假手术+OC组表达最低,益肾健骨方与阳性对照物组处理后可降低RANKL mRNA及蛋白的表达,且两组间比较差异无统计学意义。结论益肾健骨方可通过调节BMSCs抑制破骨细胞的形成,提高骨质量,同时通过激活OPG/RANKL/RANK信号通路抑制破骨细胞的分化与成熟,影响骨代谢从而防治PMOP。 展开更多
关键词 益肾健骨方 绝经后骨质疏松症 OPG/rankl/RANK WNT/Β-CATENIN 作用机制 信号通路
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异甘草素抑制RANKL/RANK/TRAF6信号通路对骨质疏松大鼠成骨细胞分化的影响 被引量:4
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作者 张超 李强强 +3 位作者 王雄 赵辉 叶仲夺 王勇平 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期488-492,508,共6页
目的探究异甘草素对骨质疏松(OP)大鼠成骨细胞分化的影响是否与调控核因子-κB受体活化体配体(RANKL)/核因子-κB受体活化体(RANK)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)信号通路有关。方法采用去势法建立绝经后OP大鼠模型,造模2周后将大... 目的探究异甘草素对骨质疏松(OP)大鼠成骨细胞分化的影响是否与调控核因子-κB受体活化体配体(RANKL)/核因子-κB受体活化体(RANK)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)信号通路有关。方法采用去势法建立绝经后OP大鼠模型,造模2周后将大鼠随机分为模型组、阳性组(戊酸雌二醇0.09 mg/kg)、异甘草素低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高(40 mg/kg)剂量组,每组10只,另取10只大鼠作为假手术组。给药结束后采用ELISA法检测大鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)、雌二醇(E_(2))水平;Micro-CT扫描观察骨微结构指标;HE染色观察股骨组织病理学;免疫组化法检测大鼠股骨Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达;Western Blot法检测大鼠股骨RANKL、RANK、TRAF6蛋白表达。结果与模型组比,阳性组与异甘草素各剂量组大鼠骨组织病变明显减轻,可见新生骨小梁;ALP[(107.94±9.83)U/L、(75.27±7.51)U/L、(89.35±9.14)U/L、(106.33±10.02)U/L比(53.79±5.62)U/L]、E_(2)[(27.71±2.67)pg/mL、(18.36±1.82)pg/mL、(23.65±2.28)pg/mL、(27.46±2.71)pg/mL比(14.64±1.59)pg/mL]水平,Tb.Th[(0.36±0.04)mm、(0.23±0.02)mm、(0.28±0.03)mm、(0.36±0.03)mm比(0.12±0.01)mm]、Tb.N[(4.45±0.44)1/mm、(2.67±0.27)1/mm、(3.36±0.34)1/mm、(4.41±0.44)1/mm比(1.51±0.12)1/mm]、BMD[(0.37±0.04)g/cm^(2)、(0.22±0.02)g/cm^(2)、(0.29±0.03)g/cm^(2)、(0.38±0.03)g/cm^(2)比(0.14±0.01)g/cm^(2)]、BV/TV[(11.94±1.23)%、(7.12±0.70)%、(8.49±0.85)%、(11.77±1.16)%比(5.75±0.61)%]以及Runx2表达[(0.84±0.08)、(0.41±0.04)、(0.59±0.06)、(0.82±0.08)比(0.27±0.03)]升高(P<0.05),Tb.Sp[(0.25±0.02)mm、(0.43±0.04)mm、(0.34±0.03)mm、(0.23±0.02)mm比(0.56±0.06)mm]以及RANKL[(0.42±0.04)、(0.86±0.08)、(0.64±0.06)、(0.45±0.04)比(1.09±0.11)]、RANK[(0.39±0.04)、(0.81±0.08)、(0.67±0.06)、(0.41±0.04)比(1.03±0.10)]、TRAF6[(0.47±0.05)、(0.77±0.08)、(0.61±0.06)、(0.49±0.05)比(0.96±0.09)]蛋白表达降低(P<0.05),且异甘草素呈剂量依赖性。结论异甘草素可能通过抑制RANKL/RANK/TRAF6信号通路,促进成骨细胞分化,改善股骨病变,有效发挥对OP的治疗作用。 展开更多
关键词 异甘草素 骨质疏松 成骨细胞分化 rankl/RANK/TRAF6信号通路
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RANKL在小鼠肝纤维化形成中抑制肝星状细胞的活化 被引量:1
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作者 周丽佳 钟立 +2 位作者 薛倩 邓亮 黄璐 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期139-145,共7页
目的 探讨核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)在小鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化及肝纤维化进程中的生物学作用。方法 将26只6~8周龄雄性C57BL/6鼠随机分为(n=1... 目的 探讨核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)在小鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)活化及肝纤维化进程中的生物学作用。方法 将26只6~8周龄雄性C57BL/6鼠随机分为(n=13):肝纤维化造模组[按照5μL/g腹腔注射体积分数10%的四氯化碳(carbon tetracholoride,CCL_(4))油剂溶液,2次/周诱导小鼠肝纤维化]和对照组(同时注射等体积的无菌油剂)。6周后通过RT-qPCR、IHC和Western blot等方法检测肝组织、原代肝细胞(hepatocyte,HC)和HSCs中的RANKL,α-平滑肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ)的mRNA及蛋白表达水平。用不同浓度外源性重组RANKL细胞因子培养原代HSCs,采用RT-qPCR和IF分别检测各组RANKL、α-SMA和Collagen-ⅠmRNA及蛋白表达水平。结果 造模组小鼠肝组织中RANKL的mRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.05),且蛋白表达呈弥散分布;对照组小鼠体内,RT-qPCR和Western blot结果均显示HC的RANKL mRNA和蛋白表达水平高于在HSCs中的表达水平(P<0.001),且在CCL_(4)诱导小鼠肝纤维化后,HC的RANKL表达水平进一步升高,而HSCs的RANKL表达水平出现下降;在体外刺激原代HSCs活化时加入不同浓度的RANKL重组细胞因子后,与对照组相比,加入重组RANKL后的HSCs在活化过程中RANKL、α-SMA和Collagen-ⅠmRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05或P<0.01或P<0.001),且有剂量依赖性。结论 在小鼠肝纤维化的进程中,HC表达大量RANKL,而RANKL可抑制HSCs的活化。 展开更多
关键词 rankl 肝星状细胞 肝纤维化
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RANKL/RANK/OPG通路在口腔相关领域的应用研究 被引量:1
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作者 王璐 周静 +1 位作者 张婧 张钊 《口腔颌面修复学杂志》 2023年第4期313-320,共8页
核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of Nuclear factor-kappa B Ligand,RANKL)、核因子-κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)作为肿瘤坏死因子家族的成员... 核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of Nuclear factor-kappa B Ligand,RANKL)、核因子-κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)作为肿瘤坏死因子家族的成员,通过RANKL/RANK/OPG信号通路调节破骨细胞发生及成熟,调控骨代谢,其表达水平直接影响骨质代谢与重塑,现被广泛研究。RANKL/RANK/OPG通路在口腔颌面部形成及改建过程中发挥了关键作用,直接或间接反映出口腔骨破坏类疾病的发生与发展状态。该通路的失衡往往伴随RANKL的增加和(或)OPG的减少,RANKL/OPG的比值影响破骨细胞的成熟及功能,但部分疾病中相关因子的表达水平存在争议,且尚无能应用于临床疾病诊疗的阈值。本文就RANKL/RANK/OPG信号通路调节机制及其在牙周炎、种植、牙齿发育、正畸、颌面部骨缺损修复与再生等口腔相关领域的研究现状进行综述,以进一步探讨口腔中骨代谢及骨破坏类疾病的调节机制,并评价相关因子作为生物标志物的诊断和预后潜力,以期指导临床诊疗及探寻可能的免疫调节靶点。 展开更多
关键词 核因子-ΚB受体活化因子配体 骨保护素 rankl/RANK/OPG通路 种植 破骨细胞
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基于肾主骨理论探讨杜仲通过调控OPG/RANKL/RANK通路对去势骨质疏松大鼠的影响 被引量:6
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作者 秧荣昆 关智宇 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期70-74,共5页
目的基于肾主骨理论探讨杜仲对去势骨质疏松大鼠的影响。方法大鼠分为对照组、模型组、阿法骨化醇组(0.05μg/kg)、杜仲组(2.76 g/kg),每组20只,除对照组外,其余组大鼠建立去势骨质疏松性骨折模型,灌胃给予相应药物,12周后检测各组大鼠... 目的基于肾主骨理论探讨杜仲对去势骨质疏松大鼠的影响。方法大鼠分为对照组、模型组、阿法骨化醇组(0.05μg/kg)、杜仲组(2.76 g/kg),每组20只,除对照组外,其余组大鼠建立去势骨质疏松性骨折模型,灌胃给予相应药物,12周后检测各组大鼠骨密度、血清骨生成指标、尿液骨代谢指标,以及OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠骨密度、股骨质量和压碎力、血清ALP活性、骨钙素水平以及骨组织OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),尿液钙和磷水平升高(P<0.05);与模型组比较,阿法骨化醇组和杜仲组大鼠骨密度、股骨质量和压碎力、血清ALP活性、骨钙素水平以及骨组织OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05),尿液钙和磷水平降低(P<0.05);与阿法骨化醇组比较,杜仲组OPG、RANKL、RANK mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),尿液钙和磷水平降低(P<0.05)。结论杜仲可通过减少钙磷流失,激活OPG/RANK/RANKL通路,进而缓解大鼠骨质疏松症状,起到补肾生骨作用。 展开更多
关键词 杜仲 骨质疏松 OPG/rankl/RANK信号通路 肾主骨
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基于OPG/RANKL/RANK信号通路探究“引血下行法”调控激素性股骨头坏死骨代谢表达的影响
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作者 区志坚 李希文 +3 位作者 邱华耀 黄思聪 林烁 李逸群 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第23期3058-3064,共7页
目的基于OPG/RANKL/RANK信号通路,探究激素性股骨头坏死(SONFH)的发病机制及“引血下行法”治疗SONFH的作用靶点。方法将50只雄性SD大鼠随机分为造模组和对照组(C组),造模组采用脂多糖联合甲强龙的方法建立SONFH模型。6周后从两组中随... 目的基于OPG/RANKL/RANK信号通路,探究激素性股骨头坏死(SONFH)的发病机制及“引血下行法”治疗SONFH的作用靶点。方法将50只雄性SD大鼠随机分为造模组和对照组(C组),造模组采用脂多糖联合甲强龙的方法建立SONFH模型。6周后从两组中随机抽取2只大鼠取新鲜股骨头组织,光镜下行组织形态学检测确认造模成功。含生药浓度分别为2.5、5、10 g/kg的引血下行方对低、中、高剂量治疗组(分别为L组、M组、H组)行灌胃处理;5 g/(kg·d)生理盐水对模型组(O组)、对照组(C组)行灌胃处理。4周后检测各组股骨头组织的病理变化和OPG、TRAF-6、RANKL表达水平。结果与O组相比,光镜下L组、M组、H组股骨头组织的软骨细胞及细胞基质减少程度、破骨性吸收程度、骨小梁结构破坏程度均较轻;细胞脂肪化程度较低。C组及各剂量治疗组的脂肪细胞密度均显著低于O组(P<0.01);C组骨髓腔面积小于O组(P<0.05),各剂量治疗组与O组差异均无统计学意义(P>0.05)。C组、L组、M组、H组的OPG、RANKL、TRAF-6的表达水平及OPG/RANKL比值均低于O组(P<0.01)。结论“引血下行法”能改善股骨头微循环环境,诱导骨小梁生成,起到治疗SONFH的作用;其可能作用机制存在多靶点效应或多样化效应。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 OPG/rankl/RANK信号通路 TRAF-6 引血下行法 SONFH模型
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RANKL靶向抑制对骨纤维结构不良治疗的研究进展
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作者 刘钟毓 白丁 赵雪峰 《口腔医学》 CAS 2023年第11期1028-1033,1046,共7页
骨纤维结构不良(fibrous dysplasia,FD)是一种由骨骼干细胞内GNAS突变引发的骨组织被纤维组织代替的罕见骨病,临床上缺乏有效的药物治疗手段。近年,有研究发现FD病变区域内核因子κB受体配体(receptor activator for nuclear factor-κB... 骨纤维结构不良(fibrous dysplasia,FD)是一种由骨骼干细胞内GNAS突变引发的骨组织被纤维组织代替的罕见骨病,临床上缺乏有效的药物治疗手段。近年,有研究发现FD病变区域内核因子κB受体配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)呈高表达,介导破骨细胞功能亢进,严重者可导致病理性骨折。因此,RANKL成为FD的潜在治疗靶点。目前,国内外有关FD的RANKL靶向抑制治疗研究尚处于初步探索阶段,已有临床病例报道和实验室研究成果支持RANKL靶向抑制对FD骨骼症状的有效缓解作用。本文就国内外关于RANKL靶向抑制对FD治疗进展作一综述。 展开更多
关键词 骨纤维结构不良 rankl 靶向治疗
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基于OPG/RANKL信号通路探讨黄精多糖对糖尿病大鼠骨质疏松骨代谢的影响 被引量:1
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作者 程妍 张守伟 李宜国 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第16期4029-4033,共5页
目的基于骨保护素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)信号通路探讨黄精多糖(PSP)对糖尿病大鼠骨质疏松骨代谢的影响及作用机制。方法选取50只2月龄雄性Wistar大鼠并随机分为对照组、糖尿病骨质疏松(DOP)模型组,高、中、低PSP(H-PSP... 目的基于骨保护素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)信号通路探讨黄精多糖(PSP)对糖尿病大鼠骨质疏松骨代谢的影响及作用机制。方法选取50只2月龄雄性Wistar大鼠并随机分为对照组、糖尿病骨质疏松(DOP)模型组,高、中、低PSP(H-PSP、M-PSP、L-PSP)组各10只,DOP模型组和PSP组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)后饲喂20 w建立DOP模型,造模成功后对照组和DOP模型组灌胃0.9%氯化钠溶液,剂量为10 ml/(kg·d),H-PSP、M-PSP、L-PSP组灌胃PSP溶液,剂量分别为700、400、200 mg/(kg·d),每周检测大鼠体质量。给药8 w后,双能X线骨密度仪检测大鼠股骨骨密度(BMD),酶联免疫吸附试验测定大鼠血清中骨钙素(OC)及尿液中脱氧嘧啶啉(DPD)含量,全自动生化仪检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸性磷酸酶(TRAP)、钙(Ca)、磷(P)及尿钙磷和肌酐(Cre)含量。Western印迹检测股骨OPG、RANKL蛋白表达。结果与对照组比较,造模成功后DOP及PSP组体质量显著增加(P<0.05);给药4 w后,H-PSP、M-PSP组体质量均较模型组明显降低(P<0.05)。给药8 w后,DOP组股骨BMD较对照组显著降低(P<0.05);H-PSP、M-PSP组BMD均较DOP模型组明显升高(P<0.05)。与对照组比较,DOP模型组血清ALP、OC、TRAP、Ca、P及尿Ca、P、DPD/Cre含量显著增加(P<0.05);PSP各剂量组血清ALP、OC、TRAP、Ca、P及尿Ca、P、DPD/Cre均较DOP模型组均有不同程度降低,H-PSP组差异显著(P<0.05)。PSP组股骨组织中RANKL蛋白表达水平较DOP模型组明显降低(P<0.05);各组股骨组织OPG蛋白表达水平均明显升高,H-PSP、M-PSP组与DOP干预组差异有统计学意义(P<0.05)。结论PSP可调节DOP大鼠骨代谢平衡,提高股骨骨密度,对骨质疏松具有改善作用,其作用机制可能与PSP提高OPG蛋白表达和降低RANKL蛋白表达有关。 展开更多
关键词 黄精多糖 糖尿病 骨质疏松 骨代谢 骨保护素(OPG)/核因子κB受体活化因子配体(rankl)信号通路
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