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Studies on the Degranulation of RBL-2H3 Cells Induced by Traditional Chinese Medicine Injections 被引量:2
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作者 Jia-Ming Tang Jiong Liu Wenbin Wu 《Chinese Medicine》 2012年第4期200-208,共9页
Aims: To study RBL-2H3 cell degranulation phenomena induced by some TCMIs through cell morphological and ultra-structural observation, released enzyme activity and establish RBL-2H3 cell degranulation test indicated ... Aims: To study RBL-2H3 cell degranulation phenomena induced by some TCMIs through cell morphological and ultra-structural observation, released enzyme activity and establish RBL-2H3 cell degranulation test indicated by β- hexosaminidase activity as a method to evaluate TCMIs at nonclinical stage. Methods: RBL-2H3 cells were used to study the degranulation by co-culture with positive control C48/80 and some TCMIs through morphological and ultra-structure observation, β-hexosaminidase activity detection. RBL-2H3 cell degranulation test was established to detect β-hexosaminidase activity caused by 17 kinds of TCMIs and their ingredients. The cytotoxicity effect of some TCMIs on both RBL 2H3 and BRL cells was measured by CCK-8 assay. Results: Toluidine blue staining and ultra-structure of electronic microscope observation of treated RBL-2H3 cells showed degranulation morphologically. Detection of β-hexosaminidase activity in the supernatant of treated cells showed some TCMIs had elevated enzyme release rates. Further analysis of the ingredients and compound in Tanreqing Injection and Shengmai Injection showed Scutellaria baicalensis Georgi in Tanreqing Injection, Red ginseng and Fructus Schisandrae Chinensis in Shengmai Injection were responsible to the degranulation of RBL-2H3 cells. Osmotic pressures and pH influenced RBL-2H3 degranulation. High Osmotic pressure of Tanreqing Injection and low pH of chlorogenic acid at 2.5 and 5.0 mmol/L congcentration might be responsible to high β-hexosaminidase activity. Most of the TCMIs inducing degranulation had cytotoxicity effect for both RBL-2H3 and BRL cells, but some TCMIs inducing degranulation had no cytotoxicity effect. Conclusion: Some TCMIs can induce degranulation of RBL-2H3 cells;RBL-2H3 cell degranulation test can be used in non-clinical stage to detect the risk causing anaphylactoid reactions. Osmotic pressures and pH influenced RBL-2H3 degranulation, and they should be measured before testing. The mechanism of degranulation caused by some TCMIs is cytotoxic, and some are non-cytotoxic and may be through exicytosis. 展开更多
关键词 TRADITIONAL Chinese MEDICINE INJECTION (TCMI) rbl-2h3 cells DEGRANULATION β-hexosaminidase Anaphylactoid Reaction
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基于RBL-2H3细胞脱颗粒抑制作用的体外抗过敏活性益生菌的筛选及鉴定
2
作者 马丁 秦双霞 +2 位作者 郝慧超 邓放明 赵玲艳 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第6期55-63,共9页
为探究乳酸菌的抗过敏活性,本研究采用传统分离技术从发酵蔬菜中获得乳酸菌,并进行益生菌体外评价,结合RBL-2H3细胞脱颗粒抑制实验筛选具有抗过敏活性的益生菌。结果表明,从发酵蔬菜中分离的4株菌株表现出良好的益生特性和安全性;所选4... 为探究乳酸菌的抗过敏活性,本研究采用传统分离技术从发酵蔬菜中获得乳酸菌,并进行益生菌体外评价,结合RBL-2H3细胞脱颗粒抑制实验筛选具有抗过敏活性的益生菌。结果表明,从发酵蔬菜中分离的4株菌株表现出良好的益生特性和安全性;所选4株乳酸菌对RBL-2H3细胞脱颗粒释放β-己糖胺酶均具有较高的抑制作用,并对RBL-2H3细胞脱颗粒释放组胺、肿瘤坏死因子-α和白介素-4均有明显的下调作用,具有作为抗过敏活性益生菌的可能性。4株菌株经16S rDNA测序鉴定为植物乳杆菌2株、发酵乳杆菌和副干酪乳杆菌各1株。 展开更多
关键词 乳酸菌 rbl-2h3细胞 益生特性 脱颗粒 抗过敏活性
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New 4-imino-4H-Chromeno[2,3-d]Pyrimidin-3(5H)-Amine: Synthesis, Cytotoxic Effects on Tumoral Cell Lines and in Silico ADMET Properties
3
作者 Marwa Dhiabi Sirine Karoui +7 位作者 Mehdi Fakhfakh Souhir Abid Emmanuelle Limanton Rémy Le Guével Thierry Charlier Ludovic Paquin Jean-Pierre Bazureau Houcine Ammar 《International Journal of Organic Chemistry》 2024年第3期107-122,共16页
The synthesis of new 4-imino-4H-chromeno[2,3-d]pyrimidin-3(5H)-amine in four steps including one step under microwave dielectric heating is reported. The structural identity of the synthesized compounds was establishe... The synthesis of new 4-imino-4H-chromeno[2,3-d]pyrimidin-3(5H)-amine in four steps including one step under microwave dielectric heating is reported. The structural identity of the synthesized compounds was established according to their spectroscopic analysis, such as FT-IR, NMR and mass spectroscopy. These new compounds were tested for their antiproliferative activities on seven representative human tumoral cell lines (Huh7 D12, Caco2, MDA-MB231, MDA-MB468, HCT116, PC3 and MCF7) and also on fibroblasts. Among them, only the compounds 6c showed micromolar cytotoxic activity on tumor cell lines (1.8 50 50 > 25 μM). Finally, in silico ADMET studies ware performed to investigate the possibility of using of the identified compound 6c as potential anti-tumor compound. 展开更多
关键词 2-Amino-4h-Chromene 4h-Chromeno[2 3-d]Pyrimidin-3(5h)-Amine Microwave Irradiation Tumoral cell Line in Silico ADMET
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Long non-coding RNA H19 regulates neurogenesis of induced neural stem cells in a mouse model of closed head injury 被引量:3
4
作者 Mou Gao Qin Dong +4 位作者 Zhijun Yang Dan Zou Yajuan Han Zhanfeng Chen Ruxiang Xu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2024年第4期872-880,共9页
Stem cell-based therapies have been proposed as a potential treatment for neural regeneration following closed head injury.We previously reported that induced neural stem cells exert beneficial effects on neural regen... Stem cell-based therapies have been proposed as a potential treatment for neural regeneration following closed head injury.We previously reported that induced neural stem cells exert beneficial effects on neural regeneration via cell replacement.However,the neural regeneration efficiency of induced neural stem cells remains limited.In this study,we explored differentially expressed genes and long non-coding RNAs to clarify the mechanism underlying the neurogenesis of induced neural stem cells.We found that H19 was the most downregulated neurogenesis-associated lnc RNA in induced neural stem cells compared with induced pluripotent stem cells.Additionally,we demonstrated that H19 levels in induced neural stem cells were markedly lower than those in induced pluripotent stem cells and were substantially higher than those in induced neural stem cell-derived neurons.We predicted the target genes of H19 and discovered that H19 directly interacts with mi R-325-3p,which directly interacts with Ctbp2 in induced pluripotent stem cells and induced neural stem cells.Silencing H19 or Ctbp2 impaired induced neural stem cell proliferation,and mi R-325-3p suppression restored the effect of H19 inhibition but not the effect of Ctbp2 inhibition.Furthermore,H19 silencing substantially promoted the neural differentiation of induced neural stem cells and did not induce apoptosis of induced neural stem cells.Notably,silencing H19 in induced neural stem cell grafts markedly accelerated the neurological recovery of closed head injury mice.Our results reveal that H19 regulates the neurogenesis of induced neural stem cells.H19 inhibition may promote the neural differentiation of induced neural stem cells,which is closely associated with neurological recovery following closed head injury. 展开更多
关键词 closed head injury Ctbp2 induced neural stem cell lncRNA h19 miR-325-3p NEUROGENESIS
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Inhibition of the Antigen-Induced Activation of RBL-2H3 Cells by Gab2 siRNA 被引量:1
5
作者 Feng Huang Xiaoyun Tong +2 位作者 Huaming Deng Liangqing Fu Ronghua Zhang 《Cellular & Molecular Immunology》 SCIE CAS CSCD 2008年第6期433-438,共6页
Gab2 plays an important role in FcεRI mediated signal events which lead to degranulation from mast cells. The present study was designed to investigate the effect of the synthetic Gab2 (scaffolding adapter Grb2-asso... Gab2 plays an important role in FcεRI mediated signal events which lead to degranulation from mast cells. The present study was designed to investigate the effect of the synthetic Gab2 (scaffolding adapter Grb2-associated binder 2) siRNA on the antigen-induced activation of RBL-2H3 cells. A double stranded siRNA against Gab2- mRNA was synthesized and transfected into RBL-2H3 cells. After 6 h, cells were then sensitized with dinitrophenyl (DNP)-specific IgE overnight and challenged with dinitrophenyl-human serum albumin (DNP-HSA) to induce mast cell degranulation before supernatants were collected. Effects of Gab2 siRNA on antigen-induced release of β-hexosaminidase and histamine, cytokine production and regulation of the proteins in the pathway were measured by enzymatic assay, EIA, ELISA and Western blotting. Treatment with Gab2 siRNA significantly decreased Gab2 expression, inhibited the FcεRI-mediated mast cell release of β-hexosaminidase and histamine, reduced the production of IL-4 and TNF-α and inhibited the phosphorylation of Akt, PKC8 and p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK). Data showed that Gab2 siRNA could suppress the antigen-induced activation of RBL-2H3 cells and suggested a possible mechanism through inhibition of signaling molecules downstream of Gab2 in the 2+ FcεRI-mediated Ca -independent pathway. Furthermore, potential usefulness of Gab2 knock-down as a method for inhibition of mast cell-mediated allergic reactions was demonstrated. Cellular & Molecular Immunology. 2008; 5(6):433-438. 展开更多
关键词 RNA interference Gab2 rbl-2h3 cell
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Effect of miR-27b-3p and Nrf2 in human retinal pigment epithelial cell induced by high-glucose
6
作者 Qiao-Ling Lai Ting Xie +1 位作者 Wei-Dong Zheng Yan Huang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2023年第10期1582-1588,共7页
AIM:To determine whether the microRNA-27b-3p(miR-27b-3p)/NF-E2-related factor 2(Nrf2)pathway plays a role in human retinal pigment epithelial(hRPE)cell response to high glucose,how miR-27b-3p and Nrf2 expression are r... AIM:To determine whether the microRNA-27b-3p(miR-27b-3p)/NF-E2-related factor 2(Nrf2)pathway plays a role in human retinal pigment epithelial(hRPE)cell response to high glucose,how miR-27b-3p and Nrf2 expression are regulated,and whether this pathway could be specifically targeted.METHODS:hRPE cells were cultured in normal glucose or high glucose for 1,3,or 6d before measuring cellular proliferation rates using cell counting kit-8 and reactive oxygen species(ROS)levels using a dihydroethidium kit.miR-27b-3p,Nrf2,NAD(P)H quinone oxidoreductase 1(NQO1)and heme oxygenase-1(HO-1)mRNA and protein levels were analyzed using reverse transcription quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR)and immunocytofluorescence(ICF),respectively.Western blot analyses were performed to determine nuclear and total Nrf2 protein levels.Nrf2,NQO1,and HO-1 expression levels by RT-qPCR,ICF,or Western blot were further tested after miR-27b-3p overexpression or inhibitor lentiviral transfection.Finally,the expression level of those target genes was analyzed after treating hRPE cells with pyridoxamine.RESULTS:Persistent exposure to high glucose gradually suppressed hRPE Nrf2,NQO1,and HO-1 mRNA and protein levels and increased miR-27b-3p mRNA levels.High glucose also promoted ROS release and inhibited cellular proliferation.Nrf2,NQO1,and HO-1 mRNA levels decreased after miR-27b-3p overexpression and,conversely,both mRNA and protein levels increased after expressing a miR-27b-3p inhibitor.After treating hRPE cells exposed to high glucose with pyridoxamine,ROS levels tended to decreased,proliferation rate increased,Nrf2,NQO1,and HO-1 mRNA and protein levels were upregulated,and miR-27b-3p mRNA levels were suppressed.CONCLUSION:Nrf2 is a downstream target of miR-27b-3p.Furthermore,the miR-27b-3p inhibitor pyridoxamine can alleviate high glucose injury by regulating the miR-27b-3p/Nrf2 axis. 展开更多
关键词 human retinal pigment epithelial cell high glucose PYRIDOXAMINE microRNA-27b-3p NF-E2-related factor 2 NAD(P)h quinone oxidoreductase 1 heme oxygenase-1
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基于RBL-2H3细胞的复杂基质生化药类过敏反应评估及体内外相关性评价
7
作者 吴畅 杨奇涛 +6 位作者 王瑶 吴殷囡 刘洋 孟长虹 陆益红 汪玉馨 史清水 《中南药学》 2023年第8期1998-2003,共6页
目的 建立适宜的细胞模型对复杂基质生化药骨肽类注射剂和垂体后叶注射剂类过敏反应风险进行评估,并与类过敏反应体内评价模型实验结果的相关性进行比较。方法 采用RBL-2H3细胞脱颗粒实验,选择β-氨基己糖苷酶作为适宜的评价指标以评估... 目的 建立适宜的细胞模型对复杂基质生化药骨肽类注射剂和垂体后叶注射剂类过敏反应风险进行评估,并与类过敏反应体内评价模型实验结果的相关性进行比较。方法 采用RBL-2H3细胞脱颗粒实验,选择β-氨基己糖苷酶作为适宜的评价指标以评估骨肽类注射剂和垂体后叶注射剂对RBL-2H3细胞脱颗粒的影响;采用实验室已建立的类过敏反应体内评价模型小鼠耳郭蓝染实验,以蓝染率及伊文思蓝升高率为指标评价两种复杂基质生化药注射剂体内类过敏反应风险的相关性。结果 骨肽类注射剂可诱导β-氨基己糖苷酶的释放率增加,与阴性对照组相比差异存在统计学意义(P <0.01),垂体后叶注射剂不可诱导β-氨基己糖苷酶的释放。小鼠耳郭蓝染实验高剂量组中,复方骨肽注射液和骨肽注射液为临床等效剂量的6.67、10倍,类过敏反应阳性率分别为100%、66.7%;随着剂量的降低,复方骨肽注射液和骨肽注射液为临床等效剂量的1.67、2倍时,类过敏反应均判定为阴性,垂体后叶注射剂类过敏反应均为阴性,与体外结果一致。结论通过结合RBL-2H3细胞脱颗粒模型与小鼠耳郭蓝染模型可对药物类过敏反应风险进行评估和筛查,同时也可为复杂基质类生化药类过敏反应物质基础及机制的研究评价提供参考和手段。 展开更多
关键词 类过敏反应 复杂基质生化药 rbl-2h3细胞 小鼠耳郭蓝染实验
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几种常见中药注射剂对RBL-2H3细胞脱颗粒的影响 被引量:33
8
作者 罗霞 王青 +2 位作者 周联 董燕 江益平 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期506-510,共5页
目的通过研究几种常见中药注射剂(TCMI)对RBL-2H3细胞脱颗粒的影响,探讨RBL-2H3细胞模型应用于体外评价TCMI引起类过敏反应的可行性。方法体外培养RBL-2H3细胞,血塞通等7种TCMI与其共同培养,通过中性红染色法计数脱颗粒的RBL-2H3细胞,... 目的通过研究几种常见中药注射剂(TCMI)对RBL-2H3细胞脱颗粒的影响,探讨RBL-2H3细胞模型应用于体外评价TCMI引起类过敏反应的可行性。方法体外培养RBL-2H3细胞,血塞通等7种TCMI与其共同培养,通过中性红染色法计数脱颗粒的RBL-2H3细胞,显色法计算β-氨基己糖苷酶释放率,ELISA法检测培养上清中组胺含量,观察TCMI对RBL-2H3细胞脱颗粒的影响。结果正常RBL-2H3细胞出现少量脱颗粒现象,血塞通、清开灵、双黄连、脉络宁、香丹、穿琥宁等能显著引起细胞脱颗粒;血塞通、穿琥宁和柴胡注射液能不同程度促进β-氨基己糖苷酶的释放;血塞通、清开灵注射液可显著引起RBL-2H3细胞组胺释放。结论RBL-2H3细胞脱颗粒的检测方法敏感、重复性好,其结果与临床报道有一定的相关性,提示其有评价TCMI所致的类过敏反应的潜在应用价值。 展开更多
关键词 类过敏反应 中药注射剂 rbl-2h3细胞 β-氨基己糖苷酶 组胺
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青藤碱对RBL-2H3肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响 被引量:11
9
作者 王文君 李红 +2 位作者 杜群 王培训 梁瑞燕 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期261-263,共3页
目的通过研究青藤碱对肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响,深入探讨青藤碱的抗炎作用机理。方法应用细胞培养,流式细胞术等方法,观察青藤碱等药物对体外培养的RBL-2H3肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响。结果青藤碱对肥大细胞增... 目的通过研究青藤碱对肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响,深入探讨青藤碱的抗炎作用机理。方法应用细胞培养,流式细胞术等方法,观察青藤碱等药物对体外培养的RBL-2H3肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响。结果青藤碱对肥大细胞增殖有明显的抑制作用,其IC50约为1mmol/L,并能促进肥大细胞凋亡,且对RBL-2H3肥大细胞活化脱颗粒有较强的抑制作用。结论青藤碱可能部分通过下调肥大细胞功能发挥抗炎抗风湿作用。 展开更多
关键词 青藤碱 rbl-2h3肥大细胞 增殖 凋亡 脱颗粒
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RBL-2H3细胞诊断过敏性休克的可行性初探 被引量:11
10
作者 郭薇 陈玉川 +1 位作者 刘水平 孔宪涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期611-613,共3页
目的 :探索诊断过敏性休克的体外检测方法。方法 :建立豚鼠过敏性休克模型 ,培养RBL 2H3细胞株 ,用致敏动物血清在体外诱导该细胞脱颗粒 ,观察其形态改变及测定组胺释放量与细胞表面AnnexinV标记阳性率。结果 :RBL 2H3细胞在致敏血清刺... 目的 :探索诊断过敏性休克的体外检测方法。方法 :建立豚鼠过敏性休克模型 ,培养RBL 2H3细胞株 ,用致敏动物血清在体外诱导该细胞脱颗粒 ,观察其形态改变及测定组胺释放量与细胞表面AnnexinV标记阳性率。结果 :RBL 2H3细胞在致敏血清刺激下活化 ,在抗原再次攻击后可以脱颗粒 ,AnnexinV阳性率与组胺释放量呈正比 ,二者与致敏血清的滴度呈剂量依赖关系。结论 :RBL 2H3可望用于过敏性疾病诊断及变应原筛选 。 展开更多
关键词 脱颗粒 ANNEXINV 组胺 rbl-2h3细胞 诊断 过敏性休克
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基于RBL-2H3细胞模型的Ⅰ型过敏反应和类过敏反应研究 被引量:30
11
作者 赵吟 李钦 张信岳 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第11期1310-1315,共6页
Ⅰ型速发型过敏是常见的药物不良反应,长期受到人们的广泛重视和研究。类过敏反应自20世纪80年代在造影剂和麻醉剂的使用中发现以来,其发生频率不断提高,尤其随着中药注射剂的广泛使用而越来越受到重视。但其确切机理还尚未得到阐明。RB... Ⅰ型速发型过敏是常见的药物不良反应,长期受到人们的广泛重视和研究。类过敏反应自20世纪80年代在造影剂和麻醉剂的使用中发现以来,其发生频率不断提高,尤其随着中药注射剂的广泛使用而越来越受到重视。但其确切机理还尚未得到阐明。RBL-2H3细胞是一类表面含有丰富的IgE受体鼠嗜碱性淋巴细胞,在研究过敏反应方面有重要作用。本文就如何以RBL-2H3细胞构建这两类过敏反应的体外细胞模型及如何检测其效应分子进行简单阐述,同时介绍这两类反应机制的研究进展。 展开更多
关键词 rbl-2h3细胞模型 超敏反应 类过敏反应 药物筛选 分子机制
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莽草酸抑制大鼠RBL-2H3细胞脱颗粒和组胺释放 被引量:8
12
作者 陈先勇 郑倩倩 +3 位作者 柳蔚 喻玲玲 王金龄 李世刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期656-659,663,共5页
目的研究莽草酸对大鼠RBL-2H3细胞增殖和化合物48/80(C48/80)诱导后细胞脱颗粒情况及其机制。方法MTT法检测(3、10、30)μg/m L的莽草酸处理后,RBL-2H3细胞的增殖情况,甲苯胺蓝染色观察C48/80诱导RBL-2H3细胞脱颗粒的情况,底物法检测(0... 目的研究莽草酸对大鼠RBL-2H3细胞增殖和化合物48/80(C48/80)诱导后细胞脱颗粒情况及其机制。方法MTT法检测(3、10、30)μg/m L的莽草酸处理后,RBL-2H3细胞的增殖情况,甲苯胺蓝染色观察C48/80诱导RBL-2H3细胞脱颗粒的情况,底物法检测(0、12.5、25、50、80、100)μg/m L C48/80处理后,RBL-2H3细胞内β-氨基己糖苷酶的释放,ELISA检测各处理组细胞上清液中组胺的含量。结果 (3、10、30)μg/m L莽草酸对RBL-2H3细胞增殖无明显抑制作用,RBL-2H3细胞脱颗粒与C48/80的剂量有一定量效关系;莽草酸能抑制大鼠RBL-2H3细胞脱颗粒;与阳性对照组相比,莽草酸处理C48/80刺激后的RBL-2H3细胞,其β-氨基己糖苷酶释放率和组胺释放量均显著降低。结论莽草酸可抑制大鼠RBL-2H3细胞脱颗粒,减少组胺释放。 展开更多
关键词 莽草酸 rbl-2h3细胞 β-氨基己糖苷酶 组胺
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双黄连注射液中8种主要成分对RBL-2H3细胞的影响 被引量:9
13
作者 汪芳 李存玉 +2 位作者 郑云枫 李红阳 彭国平 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1615-1617,共3页
目的以双黄连注射液为研究对象,探讨其中8种主要成分的致敏性。方法采用RBL-2H3细胞模型,分别用双黄连注射液、黄芩苷、黄芩素、连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸处理细胞,测定细胞脱颗粒率以及β-氨基己糖苷酶... 目的以双黄连注射液为研究对象,探讨其中8种主要成分的致敏性。方法采用RBL-2H3细胞模型,分别用双黄连注射液、黄芩苷、黄芩素、连翘苷、连翘酯苷A、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸处理细胞,测定细胞脱颗粒率以及β-氨基己糖苷酶和5-羟色胺的释放率。结果双黄连注射液、绿原酸及隐绿原酸能直接引起RBL-2H3细胞脱颗粒,并能显著提高细胞内β-氨基己糖苷酶和5-羟色胺的释放,其他成分无显著的致敏性。结论双黄连注射液的致敏性可能是由绿原酸和隐绿原酸引起的。 展开更多
关键词 双黄连注射液 rbl-2h3细胞 类过敏反应 绿原酸 隐绿原酸
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丹皮酚对RBL-2H3肥大细胞活化脱颗粒的影响 被引量:5
14
作者 周国茂 周小勇 +1 位作者 高进 沈琴 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第10期589-591,599,共4页
目的通过建立体外抑制肥大细胞脱颗粒的药效学模型,探讨丹皮酚抗Ⅰ型变态反应作用机制。方法用MTT比色法检测不同浓度的丹皮酚对RBL-2H3肥大细胞增殖的影响。通过ELISA法,明确体外RBL-2H3细胞活化分泌组胺及TNF-α动力学特征。检测不同... 目的通过建立体外抑制肥大细胞脱颗粒的药效学模型,探讨丹皮酚抗Ⅰ型变态反应作用机制。方法用MTT比色法检测不同浓度的丹皮酚对RBL-2H3肥大细胞增殖的影响。通过ELISA法,明确体外RBL-2H3细胞活化分泌组胺及TNF-α动力学特征。检测不同浓度药物对RBL-2H3肥大细胞分泌组胺及TNF-α的影响。结果丹皮酚对RBL-2H3细胞增殖有抑制作用,IC50值为0.22 mg/mL。RBL-2H3细胞活化脱颗粒,分泌组胺的释放率在前30 m in上升较快,30 m in后上升进入平台期;TNF-α分泌的量在1h达高峰。丹皮酚抑制RBL-2H3细胞释放组胺和TNF-α作用不弱于色甘酸钠0.1,0.5 mg/mL。丹皮酚浓度的对数与其对RBL-2H3细胞释放组胺和TNF-α的抑制率呈线性相关(P=0.000<0.01)。结论丹皮酚呈剂量依赖性抑制RBL-2H3细胞分泌组胺和TNF-α。 展开更多
关键词 变态反应 丹皮酚 rbl-2h3 肥大细胞
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hFcεRIα/RBL-2H3细胞株的构建与评价 被引量:3
15
作者 王南南 刘中成 +3 位作者 张艳芬 刘玉欣 崔哲 陈瑶 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1174-1179,共6页
目的构建稳定表达人FcεRIα(h FcεRIα)亚基的RBL-2H3细胞株。方法利用RT-PCR技术克隆h FcεRIα基因,构建真核表达载体p CI-neo-h FcεRIα。脂质体介导法转染RBL-2H3细胞,G418筛选获得稳定转染细胞株。利用RT-PCR、Western blot及... 目的构建稳定表达人FcεRIα(h FcεRIα)亚基的RBL-2H3细胞株。方法利用RT-PCR技术克隆h FcεRIα基因,构建真核表达载体p CI-neo-h FcεRIα。脂质体介导法转染RBL-2H3细胞,G418筛选获得稳定转染细胞株。利用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法鉴定转染结果。结果通过对脂质体介导转染体系进行优化,转染效率可高达75.38%。经Western blot、免疫荧光及RT-PCR鉴定,h FcεRIα基因在RBL-2H3细胞内成功表达。结论成功构建h FcεRIα/RBL-2H3细胞模型,为深入研究Ig E与FcεRI作用机制及相关药物开发提供了实验基础。 展开更多
关键词 hFcεRIα IGE rbl-2h3细胞 脂质体转染 G418筛选 稳定细胞株
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血塞通致RBL-2H3细胞与原代肥大细胞脱颗粒特性的比较 被引量:7
16
作者 邓向亮 周联 +2 位作者 王丽虹 王青 王培训 《广州中医药大学学报》 CAS 北大核心 2012年第2期150-153,158,221,共6页
【目的】通过比较血塞通注射液等在类过敏试验中致RBL-2H3细胞与大鼠腹腔原代肥大细胞脱颗粒特性的异同,以评价2种细胞在中药注射液类过敏试验中的意义。【方法】选用已经明确能引起类过敏反应的3种供试品即血塞通注射液、Compound 48/8... 【目的】通过比较血塞通注射液等在类过敏试验中致RBL-2H3细胞与大鼠腹腔原代肥大细胞脱颗粒特性的异同,以评价2种细胞在中药注射液类过敏试验中的意义。【方法】选用已经明确能引起类过敏反应的3种供试品即血塞通注射液、Compound 48/80和吐温80,分别与RBL-2H3细胞和大鼠腹腔肥大细胞共同孵育1 h,通过β-氨基己糖苷酶释放率和组胺释放率、释放量等的检测,分析比较脱颗粒特性的异同,同时观察了不同浓度血塞通注射液对脱颗粒程度的影响。【结果】2种细胞在血塞通注射液、Compound 48/80和吐温80的直接刺激下均出现脱颗粒现象,脱颗粒程度与血塞通注射液呈剂量依赖性;原代肥大细胞β-氨基己糖苷酶释放率、组胺释放量和释放率均显著高于RBL-2H3细胞,2种细胞比较差异有统计学意义(P<0.01)。【结论】在类过敏反应脱颗粒试验中,RBL-2H3细胞和原代大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒具有相同趋势,均可用于中药注射液类过敏评价,RBL-2H3细胞应用方便,而肥大细胞更加敏感。 展开更多
关键词 血塞通/药理学 类过敏/中药疗法 脱颗粒 rbl-2h3细胞/病理学 肥大细胞/病理学 细胞培养
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丹参酮对RBL-2H3肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响 被引量:4
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作者 王文君 王培训 梁瑞燕 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期132-135,共4页
研究丹参酮对肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响,深入探讨丹参酮的抗炎药理机制。应用细胞培养、流式细胞术等方法,观察丹参酮等药物对体外培养的RBL-2H3肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响。结果:丹参酮I、IIA对肥大细胞增殖有... 研究丹参酮对肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响,深入探讨丹参酮的抗炎药理机制。应用细胞培养、流式细胞术等方法,观察丹参酮等药物对体外培养的RBL-2H3肥大细胞增殖凋亡以及活化脱颗粒的影响。结果:丹参酮I、IIA对肥大细胞增殖有明显的抑制作用,其IC50约为20μmol/L,并能明显促进细胞凋亡,且对RBL-2H3细胞活化脱颗粒有较强的抑制作用。结论:丹参酮对肥大细胞功能具有明显的抑制作用,可能是其发挥抗炎作用的一个重要方面。 展开更多
关键词 丹参酮 rbl-2h3肥大细胞 增殖 凋亡 脱颗粒
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小青龙汤对体外培养RBL-2H3细胞增殖及凋亡的影响 被引量:3
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作者 张银萍 朱吾元 +1 位作者 赵变 李明丽 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第6期1443-1445,I0013,共4页
观察小青龙汤对体外培养RBL-2H3细胞增殖及凋亡的影响,探讨小青龙汤治疗过敏性鼻炎的机理。方法:取RBL-2H3细胞,含10%FBS的MEM培养液培养,传代后接细胞培养板,MTT法检测各浓度组细胞的增殖情况,倒置显微镜拍照记录细胞生长情况;Hoechst3... 观察小青龙汤对体外培养RBL-2H3细胞增殖及凋亡的影响,探讨小青龙汤治疗过敏性鼻炎的机理。方法:取RBL-2H3细胞,含10%FBS的MEM培养液培养,传代后接细胞培养板,MTT法检测各浓度组细胞的增殖情况,倒置显微镜拍照记录细胞生长情况;Hoechst33258荧光染色法观察各组细胞凋亡情况,荧光倒置显微镜观察并拍照记录。结果:小青龙汤可抑制体外培养RBL-2H3细胞的增殖,呈一定的浓度依赖性,并可促进体外培养RBL-2H3细胞的凋亡。结论:小青龙汤对过敏性鼻炎的治疗作用与其抑制肥大细胞增殖及促进其凋亡有关。 展开更多
关键词 小青龙汤 rbl-2h3细胞 过敏性鼻炎 增殖 凋亡
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氧化苦参碱对RBL-2H3肥大细胞活化脱颗粒的影响 被引量:14
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作者 周国茂 周小勇 +4 位作者 高进 沈琴 刘冬梅 陈新民 王伟媚 《中国麻风皮肤病杂志》 2006年第11期903-906,共4页
目的:探讨氧化苦参碱的抗I型变态反应的作用机制。方法:用MTT比色法检测不同浓度的氧化苦参碱对RBL-2H3细胞活化的影响。根据MTT比色法分别选择氧化苦参碱5个不同的实验浓度,并以色甘酸钠作为阳性对照。以C48/80刺激RBL-2H3细胞活化脱颗... 目的:探讨氧化苦参碱的抗I型变态反应的作用机制。方法:用MTT比色法检测不同浓度的氧化苦参碱对RBL-2H3细胞活化的影响。根据MTT比色法分别选择氧化苦参碱5个不同的实验浓度,并以色甘酸钠作为阳性对照。以C48/80刺激RBL-2H3细胞活化脱颗粒,测不同浓度药物对RBL-2H3细胞分泌组胺及TNF-α变化。结果:氧化苦参碱对RBL-2H3细胞的增殖有抑制作用。氧化苦参碱能抑制RBL-2H3细胞释放组胺及TNF-α,抑制作用不弱于色甘酸钠组。氧化苦参碱浓度的对数与RBL-2H3细胞释放组胺和TNF-α抑制率呈高度线性关系。结论:氧化苦参碱能抑制RBL-2H3细胞分泌组胺和TNF-α,该抑制作用呈剂量依赖性。其治疗I型变态反应性皮肤病可能和它抑制肥大细胞活化脱颗粒有关。 展开更多
关键词 变态反应 氧化苦参碱 rbl-2h3细胞 组胺 肿瘤坏死因子Α
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RBL-2H3细胞评价血塞通注射剂致敏模型建立 被引量:3
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作者 肖航 项峥 窦德强 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2502-2505,共4页
目的建立最佳血塞通注射液致RBL-2H3细胞过敏介质释放评价模型。方法分别从细胞破坏法、渗透压、细胞体积、反应时间以及底物浓度等方面考察确定组胺和己糖胺酶反应体系,并对96孔板和24孔板进行方法学考察。结果冻融法无法完全破坏细胞,... 目的建立最佳血塞通注射液致RBL-2H3细胞过敏介质释放评价模型。方法分别从细胞破坏法、渗透压、细胞体积、反应时间以及底物浓度等方面考察确定组胺和己糖胺酶反应体系,并对96孔板和24孔板进行方法学考察。结果冻融法无法完全破坏细胞,0.1%Triton X-100被认为是最佳的细胞破碎方法。反应时间为30 min,样品含水量需在80%以下。最终确定组胺和己糖胺酶的最佳反应体系,96孔板和24孔板标准偏差均小于15%,24孔板精密度和重复性稍高于96孔板。结论建立了RBL-2H3细胞评价血塞通注射剂致敏性模型。96孔板和24孔板均可作为评价血塞通注射剂致RBL-2H3细胞过敏指标释放的载体。 展开更多
关键词 血塞通注射剂 rbl-2h3细胞 致敏性 方法学考察
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