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低盐胁迫下LXRα激动剂添加和RNA干扰对大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼鱼脂质代谢的影响
1
作者 刘志峰 徐菲 +6 位作者 赵海池 施越雷 杨明超 黄智慧 孙志宾 徐荣静 马爱军 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1324-1334,共11页
大菱鲆是我国重要的养殖经济鱼类,随着养殖水域逐渐向滩涂和内陆拓展,亟待研究其低盐适应性机制,进而为培育耐低盐良种提供参考。通过腹腔注射干扰剂dsRNA以及激动剂T091317,以进一步检测下游脂质代谢相关基因的表达以及血清脂代谢产物... 大菱鲆是我国重要的养殖经济鱼类,随着养殖水域逐渐向滩涂和内陆拓展,亟待研究其低盐适应性机制,进而为培育耐低盐良种提供参考。通过腹腔注射干扰剂dsRNA以及激动剂T091317,以进一步检测下游脂质代谢相关基因的表达以及血清脂代谢产物的变化。研究设置两个盐度梯度(5和30),每个盐度设置4个处理组(干扰组、激动组、生理盐水组和空白对照组),实验周期72 h。结果显示:在dsRNA注射后,肝脏中LXRα基因的相对表达量呈现出显著的抑制作用,尤其是在盐度30下;盐度5的肝脏组以及不同盐度的肠道组中,干扰效果不明显。激动剂注射后LXRα基因的相对表达量在不同盐度组中均呈现了激动效应,但维持时间较短。低盐可以抑制SREBP-1、CYP7A1和ApoA-IV基因的表达,当LXRα基因受到抑制或激动后,三者尽管表达趋势不同,但整体上均呈现出相应的干扰和激动效应。血清生化结果显示,低盐显著抑制了TG和HDL的含量,对T-CHO以及LDL的含量无显著影响。30盐度下,当LXRα基因受到抑制或激动后,TG的含量呈现出相应的干扰和激动效应。以上表明在腹腔注射干扰剂dsRNA以及激动剂后,都能够相应的导致LXRα基因表达量降低或者升高。LXRα基因受到抑制后,可以引起下游转录因子SREBP-1基因表达的降低,进而抑制了TG的合成,因此血清中甘油三酯的含量可以进一步作为大菱鲆耐低盐选育的表型。 展开更多
关键词 大菱鲆(Scophthalmus maximus) 脂代谢 LXRα基因 rna干扰
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RNA干扰技术防控作物真菌病害研究进展
2
作者 李爽 闫更轩 +2 位作者 田缘 张淑梅 潘钰 《北方园艺》 CAS 北大核心 2024年第3期127-136,共10页
作物真菌病害发生普遍,危害严重,是制约现代农业高质量发展的主要限制因素之一。RNA干扰(RNA interference, RNAi)是真核生物中基于双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的同源mRNA降解、沉默相关基因表达的一种机制。近年来,利用RN... 作物真菌病害发生普遍,危害严重,是制约现代农业高质量发展的主要限制因素之一。RNA干扰(RNA interference, RNAi)是真核生物中基于双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的同源mRNA降解、沉默相关基因表达的一种机制。近年来,利用RNA干扰技术防控作物真菌病害是研究热点,并已成功应用于农业生产,展现出良好的应用前景。该研究就作物真菌病害防治现状、RNA干扰技术原理、防控真菌病害机制及其在作物真菌病害防控中研究进展、基于RNA干扰生物技术存在的问题与应用前景进行了综述,旨在为RNA干扰技术在作物真菌病害防治中的广泛应用提供参考依据。 展开更多
关键词 rna干扰 作物 真菌病害 研究进展
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两个与中华拟同形溞生殖相关基因的筛选及其RNA干扰研究
3
作者 赵雅洁 李国庆 +2 位作者 王业平 金齐德 邓道贵 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期176-184,共9页
为了筛选与中华拟同形溞(Daphnia sinensis)生殖相关的基因,选择4个生长阶段的中华拟同形溞(雌性幼溞JF、成熟前1龄雌溞BM、第1成龄雌溞MA和第4成龄雌溞RF)进行转录组测序。在BM vs.JF、MA vs.JF、RF vs.JF、RF vs.MA、MA vs.BM、RF vs... 为了筛选与中华拟同形溞(Daphnia sinensis)生殖相关的基因,选择4个生长阶段的中华拟同形溞(雌性幼溞JF、成熟前1龄雌溞BM、第1成龄雌溞MA和第4成龄雌溞RF)进行转录组测序。在BM vs.JF、MA vs.JF、RF vs.JF、RF vs.MA、MA vs.BM、RF vs.BM等6个组合中,选择每个组合的前30个上调基因进行筛选,获得了163个差异表达基因。这些差异表达基因以鱼类信息素培养的第4成龄雌溞为样本进行RT-qPCR检测,共筛选出19个与生殖相关的候选基因,选择其中2个基因(Cluster-13168.32243,Dsussp和Cluster-13168.22885,Dsmapk)进行RNAi实验。在RNAi后,Dsussp和Dsmapk基因的表达量在含有其dsRNA的大肠杆菌(Escherichia coli)浓度组均显著小于对照组(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP),且与EGFP组相比,Dsmapk和Dsussp基因的表达量在2%和5%大肠杆菌浓度组分别下降了28.1%和32.3%、41.1%和55.6%。在RNAi后,中华拟同形溞在Dsussp和Dsmapk组的怀卵数及产幼溞数与对照组相比均减少,且5%大肠杆菌浓度组均小于2%大肠杆菌浓度组。随着龄数的增加,RNAi对中华拟同形溞怀卵数和产幼溞数的抑制影响均加强。因此,Dsussp和Dsmapk基因被证实在中华拟同形溞的生殖发育中起重要作用。 展开更多
关键词 rna干扰 生殖 转录组测序 中华拟同形溞
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慢病毒介导RNA干扰抑制RRS1基因表达对胆管癌RBE细胞增殖的影响
4
作者 刘伟 郭骏军 +1 位作者 晏强 陈怀周 《中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生》 2024年第6期0164-0169,共6页
研究慢病毒介导RNAi干扰技术抑制RRS1基因在胆管癌RBE细胞表达后对胆管癌RBE细胞增殖产生的影响。方法 运用RT-PCR检测手术切除的胆管癌与癌旁胆管组织标本RRS1 mRNA基因水平的表达。通过慢病毒载体介导RNA干扰技术,从转录水平沉默RRS1... 研究慢病毒介导RNAi干扰技术抑制RRS1基因在胆管癌RBE细胞表达后对胆管癌RBE细胞增殖产生的影响。方法 运用RT-PCR检测手术切除的胆管癌与癌旁胆管组织标本RRS1 mRNA基因水平的表达。通过慢病毒载体介导RNA干扰技术,从转录水平沉默RRS1基因表达,RT-PCR检测抑制RRS1后在胆管癌mRNA基因水平的表达;体外实验观察抑制RRS1基因后对胆管癌RBE细胞增殖的影响,初步探讨抑制RRS1基因表达后对胆管癌细胞增殖的影响。结果 RT-PCR检测结果发现在胆管癌组织中的RRS1 mRNA基因表达水平较癌旁胆管组织明显升高,RNA干扰抑制RRS1基因在胆管癌RBE细胞中表达后,胆管癌RBE细胞的增殖能力受到了明显下降。结论 (1)胆管癌组织中RRS1基因表达上调。(2)慢病毒RNAi干扰抑制RRS1基因在胆管癌RBE细胞中的表达后,RRS1会促进胆管癌细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 RRS1 胆管癌 rna干扰 细胞增殖
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siRNA干扰膀胱恶性肿瘤B7-H3基因表达对T24细胞增殖活力的影响
5
作者 徐芝立 李峰 王玲 《河北医药》 CAS 2023年第21期3251-3254,共4页
目的通过siRNA敲低膀胱T24细胞B7-H3基因表达,观察该基因的mRNA水平及蛋白分子表达,探讨B7-H3基因低表达状态下膀胱肿瘤细胞的增殖活力。方法利用小干扰RNA(siRNA)技术构建B7-H3基因低表达的T24细胞系,RT-PCR、Western blot技术验证基... 目的通过siRNA敲低膀胱T24细胞B7-H3基因表达,观察该基因的mRNA水平及蛋白分子表达,探讨B7-H3基因低表达状态下膀胱肿瘤细胞的增殖活力。方法利用小干扰RNA(siRNA)技术构建B7-H3基因低表达的T24细胞系,RT-PCR、Western blot技术验证基因敲低效果,MTS实验检验T24肿瘤细胞增殖能力变化。结果以重组慢病毒为载体,成功构建稳定转染B7-H3基因的膀胱T24细胞系(T24/B7-H3-siRNA)。与T24/control siRNA对照组和T24/non-siRNA比较,T24/B7-H3-siRNA细胞的B7-H3 mRNA表达水平明显下调(P<0.05),B7-H3蛋白表达量也显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。T24/B7-H3-siRNA细胞增殖活力也显著降低(P<0.05)。结论通过siRNA干扰B7-H3基因表达,膀胱T24细胞增殖活力显著降,提示B7-H3分子参与了膀胱肿瘤的恶性增殖行为,可作为肿瘤免疫治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 B7-H3 rna干扰 膀胱恶性肿瘤 免疫检查点
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基于RNA干扰抑制油菜种皮色素合成 被引量：1
6
作者 申敏 柴友荣 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第1期44-49,共6页
甘蓝型油菜是我国最重要的食用植物油来源。在相同遗传背景下黄籽油菜的种子具有种皮薄、含油量高和蛋白质含量高、纤维素和多酚含量低、油质透明等优点。前人研究表明,油菜的模式植物拟南芥TT2基因与种皮颜色有关,而目前油菜TT2基因研... 甘蓝型油菜是我国最重要的食用植物油来源。在相同遗传背景下黄籽油菜的种子具有种皮薄、含油量高和蛋白质含量高、纤维素和多酚含量低、油质透明等优点。前人研究表明,油菜的模式植物拟南芥TT2基因与种皮颜色有关,而目前油菜TT2基因研究较少。为明确甘蓝型油菜TT2基因功能,利用RNA干扰技术沉默甘蓝型TT2基因。首先构建TT2基因RNA干扰载体,通过农杆菌介导法获得转基因材料。对花后15 d的幼种进行TT2基因定量表达分析。考察转基因材料农艺性状,收获种子进行冷冻切片观察种皮厚度变化,测定种皮中木质素、原花青素含量变化。结果显示种皮结实率降低,种皮颜色变浅。细胞冷冻切片结果显示,种皮变薄、栅栏组织稀疏。生理指标测定木质素、原花青素含量均下降。定量PCR显示,RNA干扰技术抑制油菜中TT2基因的表达。研究结果说明,甘蓝型油菜TT2基因特异性在种子内种皮表达,与预测一致。TT2基因缺失导致种皮色素积累减少,种皮颜色变浅,种皮厚度变薄,栅栏组织稀疏。木质素含量降低表明木质素代谢途径作为苯丙烷通路的分支受到TT2基因缺失影响。原花青素含量降低表明类黄酮代谢途径受TT2基因缺失影响。这与黄籽与黑籽油菜区别相一致。本研究为甘蓝型黄籽油菜种皮色泽的遗传性提供依据,推动甘蓝型黄籽油菜的育种进程。 展开更多
关键词 rna干扰 甘蓝型油菜 种皮 木质素 原花青素 TT2基因
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RNA干扰机制及其应用研究进展 被引量：6
7
作者 万春鹏 周寿然 左爱仁 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第2期372-375,共4页
2006年诺贝尔生理学或医学奖,授予给了美国科学家Andrew Z.Fire和Craig C.Mello以表彰他们发现了RNA干扰(RNA interference RNAi)现象,使人们在基因治疗传染性、恶性肿瘤等危重疾病领域取得了突破性的发展。本文主要综述了RNA干扰系统... 2006年诺贝尔生理学或医学奖,授予给了美国科学家Andrew Z.Fire和Craig C.Mello以表彰他们发现了RNA干扰(RNA interference RNAi)现象,使人们在基因治疗传染性、恶性肿瘤等危重疾病领域取得了突破性的发展。本文主要综述了RNA干扰系统的组成、分子机制、作用特点及其在探索基因功能、传染性、恶性肿瘤的基因治疗和药物研发等四个方面的应用。 展开更多
关键词 rna干扰 rna干扰机制 rna干扰应用
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基于RNA干扰的杀菌剂开发及其对化学杀菌剂的影响 被引量：1
8
作者 宋修仕 高静 周明国 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-11,72,共12页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是真核生物中高度保守的基因沉默现象,在医药与植物保护领域展现出广阔的应用潜力,相关产品已进入或即将进入医药与杀虫剂市场。近年来,科研工作者在基于RNAi技术的植物病原微生物的防控方面开展了大量研... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是真核生物中高度保守的基因沉默现象,在医药与植物保护领域展现出广阔的应用潜力,相关产品已进入或即将进入医药与杀虫剂市场。近年来,科研工作者在基于RNAi技术的植物病原微生物的防控方面开展了大量研究,取得了进展,但仍无法实现基于RNAi防治植物病原真菌技术的商业化应用。本文概述了RNAi研究从1990年至今的发展历程,从细胞生物学、分子生物学角度提出了RNAi病害防控技术产品化瓶颈问题的新见解,同时讨论了基于RNAi的杀菌剂对传统化学杀菌剂的影响,可为RNAi杀菌剂的创制和应用提供参考。 展开更多
关键词 rna干扰 杀菌剂 植物保护 瓶颈 挑战
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RNA干扰疗法降低脂蛋白a的临床研究进展 被引量：1
9
作者 张小芳 张冬颖 《心血管病学进展》 CAS 2023年第7期622-626,共5页
由载脂蛋白(a)[apo(a)]和载脂蛋白B100(ApoB100)组成的脂蛋白a[Lp(a)]与心血管疾病残余风险相关,但目前临床上尚缺乏降低Lp(a)的有效药物。RNA干扰(RNAi)疗法可通过小干扰RNA或反义寡核苷酸干扰apo(a)或ApoB100 mRNA的翻译,减少Lp(a)合... 由载脂蛋白(a)[apo(a)]和载脂蛋白B100(ApoB100)组成的脂蛋白a[Lp(a)]与心血管疾病残余风险相关,但目前临床上尚缺乏降低Lp(a)的有效药物。RNA干扰(RNAi)疗法可通过小干扰RNA或反义寡核苷酸干扰apo(a)或ApoB100 mRNA的翻译,减少Lp(a)合成。现就RNAi降低Lp(a)水平的临床研究进展进行综述。 展开更多
关键词 rna干扰疗法 小干扰rna 反义寡核苷酸 脂蛋白A
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RNA干扰PhCatC 1/2基因对波纹龙虾相关免疫基因表达的影响
10
作者 梁妃爽 梁华芳 +2 位作者 黄佳宇 王潘妹 温崇庆 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第5期1037-1047,共11页
初步研究RNA干扰PhCatC 1/2基因对波纹龙虾(Panulirus homarus)相关免疫基因表达的影响,采用qPCR技术检测PhCatC 1/2、PhTlr 13、PhLys和Phβ-G基因的表达,并观察肝胰腺组织的变化情况。结果表明:注射PhCatC 1-dsRNA后,PhCatC2表达量比... 初步研究RNA干扰PhCatC 1/2基因对波纹龙虾(Panulirus homarus)相关免疫基因表达的影响,采用qPCR技术检测PhCatC 1/2、PhTlr 13、PhLys和Phβ-G基因的表达,并观察肝胰腺组织的变化情况。结果表明:注射PhCatC 1-dsRNA后,PhCatC2表达量比对照组显著下降(P<0.05),与对照组相比PhTlr 13基因表达量在前期呈现显著升高,后下降的趋势,PhLys和Phβ-G基因的表达量均随dsRNA干扰时效的增加而增加;沉默PhCatC 2基因后PhTlr 13和Phβ-G基因的表达量随dsRNA干扰时效的增加而增加,PhCatC 1基因表达量呈现下上调交替的趋势,PhLys基因表达量表现出先下调后上调的趋势。通过PhCatC 1/2基因沉默后的分析初步推测,波纹龙虾可能通过促进Toll样受体和溶酶体通路来参与免疫应答,得出PhCatC 1/2基因具有免疫功能。 展开更多
关键词 波纹龙虾 rna干扰 PhCatC 1/2 PhTlr 13 PhLys Phβ-G 表达分析
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RNA干扰抑制CD147表达对宫颈癌细胞增殖、转移和侵袭能力的影响 被引量：1
11
作者 曹勋荣 吕桂雪 魏雯雯 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期349-353,358,共6页
目的:探讨RNA干扰(RNAi)对宫颈癌组织CD147表达及对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:选取2016年2月至2019年2月济南市第二妇幼保健院病理组织室110份宫颈组织,包括20例正常宫颈上皮组织和90例宫颈癌组织(30例原位宫颈癌组织... 目的:探讨RNA干扰(RNAi)对宫颈癌组织CD147表达及对宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:选取2016年2月至2019年2月济南市第二妇幼保健院病理组织室110份宫颈组织,包括20例正常宫颈上皮组织和90例宫颈癌组织(30例原位宫颈癌组织和60例鳞状宫颈癌组织),免疫组化检测CD147表达。分析CD147表达与宫颈癌患者临床病理参数的相关性。以GFP-shRNA-CD147-NC和GFP-shRNA-CD147分别转染对照组和实验组细胞,另取空白细胞作为正常组。EdU标记实验检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移和侵袭;裸鼠成瘤模型检测细胞体内生长与转移能力;Western blot检测细胞单羧酸转运蛋白1(MCT1)、CD147蛋白表达。结果:与正常宫颈组织相比,原位宫颈癌组织中CD147阳性表达比例明显升高,与原位宫颈癌组织相比,鳞状宫颈癌组织中CD147阳性表达比例明显升高(P<0.05);CD147表达与宫颈癌患者肿瘤大小、浸润深度、淋巴转移关系密切(均P<0.05);与正常组细胞相比,实验组细胞增殖、迁移和侵袭及体内生长和转移能力、MCT1、CD147蛋白表达明显下调(均P<0.05)。结论:宫颈癌组织中CD147表达升高,抑制CD147表达可明显抑制肿瘤细胞体内外增殖、侵袭和转移。 展开更多
关键词 rna干扰 CD147 宫颈癌 增殖 迁移 侵袭
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RNA干扰在系统性红斑狼疮治疗中的研究进展
12
作者 陈英 周淑红 《安徽医学》 2023年第3期343-346,共4页
系统性红斑狼疮(SLE)是一种多器官受累的自身免疫性疾病,临床表现复杂多样,目前治疗药物不能达到完全缓解。RNA干扰(RNAi)技术在mRNA水平对基因转录进行抑制,进而阻断靶基因表达。RNAi由于其特异性和靶向作用,有可能成为治疗SLE的有效手... 系统性红斑狼疮(SLE)是一种多器官受累的自身免疫性疾病,临床表现复杂多样,目前治疗药物不能达到完全缓解。RNA干扰(RNAi)技术在mRNA水平对基因转录进行抑制,进而阻断靶基因表达。RNAi由于其特异性和靶向作用,有可能成为治疗SLE的有效手段,并为SLE的治疗提供新的方法。本文对RNA干扰在SLE治疗中的应用进展进行综述。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 固有免疫 获得性免疫 rna干扰
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和田羊FGF5基因RNA干扰载体构建及筛选
13
作者 曹少奇 陈岩 +3 位作者 高新梅 喻恒彬 王静 胡广东 《现代畜牧兽医》 2023年第9期32-36,共5页
试验旨在构建并筛选出高效的和田羊成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因的RNA干扰载体,根据和田羊FGF5基因序列,设计4条短发夹RNA(shRNA)干扰片段和1条阴性对照片段。扩增后克隆至pGPU6载体,获得4个重组质粒pGPU6-shRNA-FGF1、pGPU6-shRNA-F... 试验旨在构建并筛选出高效的和田羊成纤维细胞生长因子5(FGF5)基因的RNA干扰载体,根据和田羊FGF5基因序列,设计4条短发夹RNA(shRNA)干扰片段和1条阴性对照片段。扩增后克隆至pGPU6载体,获得4个重组质粒pGPU6-shRNA-FGF1、pGPU6-shRNA-FGF2、pGPU6-shRNA-FGF3、pGPU6-shRNAFGF4和阴性对照质粒pGPU6-shRNA-FGF5。通过琼脂糖凝胶电泳和DNA测序对质粒进行酶切鉴定和测序鉴定。鉴定后的质粒通过电刺激法转染至和田羊成纤维细胞,通过qRT-PCR和Western Blotting(WB)分析FGF5基因的表达情况。结果显示,与阴性载体相比,4个RNA干扰表达载体均可显著降低FGF5 mRNA和蛋白的表达量(P<0.05),其中pGPU6-shRNA-FGF3干扰效率最高,为85.20%。研究表明,FGF5干扰表达载体构建成功并可有效干扰和田羊FGF5基因表达。 展开更多
关键词 和田羊 rna干扰 FGF5基因 载体构建 成纤维细胞
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siRNA干扰对人软骨细胞Skp2表达的影响
14
作者 袁长深 李彦宏 +4 位作者 刘晋邑 廖书宁 梅其杰 徐文飞 段戡 《海南医学院学报》 2023年第13期983-987,996,共6页
目的:研究表达载体介导的siRNA对Skp2在人软骨细胞中表达的抑制效果。方法:利用在线siRNA设计工具设计3条Skp2序列siRNA-59、siRNA-318、siRNA-504作为靶位点,采用基因重组技术体外成功构建Skp2 siRNA表达载体,检测重组质粒转染对Skp2 m... 目的:研究表达载体介导的siRNA对Skp2在人软骨细胞中表达的抑制效果。方法:利用在线siRNA设计工具设计3条Skp2序列siRNA-59、siRNA-318、siRNA-504作为靶位点,采用基因重组技术体外成功构建Skp2 siRNA表达载体,检测重组质粒转染对Skp2 mRNA表达的影响,并采用DNA电泳对其结果进行验证。结果:测序表明Skp2干扰序列正确,siRNA-59、siRNA-318、siRNA-504转染组的Skp2 mRNA表达明显低于空载组和NC组(P<0.05),Skp2 mRNA在siRNA-59、siRNA-318、siRNA-504中的抑制率分别为60%、41%、64%,且以siRNA-504转染组抑制率最高。结论:成功构建Skp2干扰真核表达载体,siRNA重组体能有效抑制人软骨细胞Skp2 mRNA表达,可为骨关节炎治疗提供有力证据。 展开更多
关键词 S期激酶相关蛋白2 骨关节炎 小干扰rna 基因表达
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基于RNA干扰的杀菌剂开发及其对化学杀菌剂的影响
15
作者 宋修仕 高静 周明国 《农化市场十日讯》 2023年第11期30-36,共7页
RNA干扰(RNA interference,缩写为RNAi)是指由RNA(细胞内源或外源)诱发的基因沉默现象,其机制是短的反义RNA通过阻碍与其有互补序列基因的转录或翻译来抑制基因的表达。近年来,基于RNAi机制的有害生物防治策略发展迅速,用于防治有害生物... RNA干扰(RNA interference,缩写为RNAi)是指由RNA(细胞内源或外源)诱发的基因沉默现象,其机制是短的反义RNA通过阻碍与其有互补序列基因的转录或翻译来抑制基因的表达。近年来,基于RNAi机制的有害生物防治策略发展迅速,用于防治有害生物的RNA分子制剂被称为核酸农药。相比于传统的小分子农药,核酸农药靶标特异性强,无残留,且开发成本远低于化学农药,符合当今社会对于环境友好型农药的要求。 展开更多
关键词 有害生物防治 化学杀菌剂 rna干扰 化学农药 反义rna 互补序列 核酸
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RNA干扰在植物中的作用机理及其应用研究进展 被引量：5
16
作者 马超 郝青南 马兵钢 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1920-1927,共8页
RNA干扰(RNAi)是广泛存在于生物中的一种现象,它是小干扰RNA诱导的转录后基因沉默,是生物抵抗异常DNA的一种保护机制,同时在生物生长发育过程中调控基因的表达.本文综述了近年来有关RNA干扰的发现、作用过程及其机理,分析了它与反义寡... RNA干扰(RNAi)是广泛存在于生物中的一种现象,它是小干扰RNA诱导的转录后基因沉默,是生物抵抗异常DNA的一种保护机制,同时在生物生长发育过程中调控基因的表达.本文综述了近年来有关RNA干扰的发现、作用过程及其机理,分析了它与反义寡核苷酸、核酶、脱氧核酶的不同,并介绍了RNA干扰在植物基因功能、植物抗病毒、作物品种改良等方面的应用,为siRNA干扰的进一步利用提供参考资料. 展开更多
关键词 rna干扰 SIrna干扰 植物病毒
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应用RNA干扰技术体外抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达 被引量：3
17
作者 刘明 赵铁强 +4 位作者 冼勋德 高松 范江霖 黄薇 刘国庆 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第1期45-47,共3页
目的　给探讨脂蛋白脂肪酶基因作为动脉粥样硬化基因治疗靶点提供实验基础。方法　利用RNA干扰技术在细胞水平抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达 ,根据人脂蛋白脂肪酶基因设计靶序列短发夹RNA ,构建重组干扰质粒pSIREN DNR shRNA ,将干扰质粒... 目的　给探讨脂蛋白脂肪酶基因作为动脉粥样硬化基因治疗靶点提供实验基础。方法　利用RNA干扰技术在细胞水平抑制脂蛋白脂肪酶基因的表达 ,根据人脂蛋白脂肪酶基因设计靶序列短发夹RNA ,构建重组干扰质粒pSIREN DNR shRNA ,将干扰质粒与人脂蛋白脂肪酶真核表达质粒 pCDNA3 hLPL以脂质体方法共转染COS 7细胞 ,通过实时荧光定量聚合酶链反应、Westernblot和活性检测等方法判断脂蛋白脂肪酶基因抑制的效果。结果　转染干扰质粒的细胞中脂蛋白脂肪酶mRNA、蛋白表达以及酶活性均明显降低 ,抑制率可达 70 %以上。结论　所选靶序列可以有效抑制细胞中脂蛋白脂肪酶基因的表达 。 展开更多
关键词 病理学与病理生理学 脂蛋白脂肪酶基因的rna干扰 rna干扰 脂蛋白脂肪酶 短发夹rna 基因表达 动脉粥样硬化
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人PTEN基因RNA干扰及其RESC救援慢病毒载体的构建与鉴定 被引量：1
18
作者 王玉梅 盛光耀 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第3期443-447,共5页
目的:构建人PTEN基因RNA干扰(RNAi)及其逃避RNAi策略结构(RESC)救援的慢病毒载体。方法:利用Invitrogen公司在线软件,针对已筛选确定的PTEN基因RNAi有效靶序列,设计并合成靶序列的oligo DNA,退火形成双链DNA,与经XbaⅠ和XhoⅠ酶切后的pF... 目的:构建人PTEN基因RNA干扰(RNAi)及其逃避RNAi策略结构(RESC)救援的慢病毒载体。方法:利用Invitrogen公司在线软件,针对已筛选确定的PTEN基因RNAi有效靶序列,设计并合成靶序列的oligo DNA,退火形成双链DNA,与经XbaⅠ和XhoⅠ酶切后的pFLRu-GFP载体连接构建成pFLRu-U6-shPTEN慢病毒载体。在此基础上,引入外源设计的PTENmRNA,与经EcoRⅠ和BamHⅠ酶切后的pFLRu-U6-shPTEN载体连接,从而产生在同一个载体内兼有人PTEN基因shRNA及其救援cDNA同时表达的RESC慢病毒载体pFLRu-U6-rrshPTEN。2者均转入到大肠杆菌XL10感受态细胞,制备质粒并用酶切及测序鉴定。分别用pFLRu-U6-shPTEN、pFLRu-U6-rrshPTEN与pCMV-dR8.2ΔR和pCMV-VSV-G质粒共转染293T包装细胞,包装产生2种慢病毒,收集病毒上清,系列稀释法检测病毒悬液的滴度。结果:氨苄青霉素抗性筛选阳性克隆、酶切鉴定、U6前引物测序鉴定结果显示pFLRu-U6-shPTEN和pFLRu-U6-rrshPTEN均为阳性克隆,且2种慢病毒的滴度分别为6.6×105和5.6×105pfu/mL。结论:成功构建出人PTEN基因RNAi及其RESC慢病毒载体。有效地避免了由于脱靶效应所引起的假阳性结果对实验的干扰,为研究PTEN基因功能提供了稳定的转染细胞载体。 展开更多
关键词 PTEN基因 慢病毒载体 rna干扰 逃避rna干扰策略结构 脱靶效应
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基因沉默的维持——长效RNA干扰 被引量：1
19
作者 徐亮 何军林 《国际药学研究杂志》 CAS 2009年第5期389-392,共4页
自揭示了哺乳动物细胞中的RNA干扰(RNAi)现象以来,对其进行了大量的研究与资金投入,期望将其发展成一种切实可行的治疗手段。毫无疑问,RNAi是最具发展潜力的基因治疗策略。由于许多采用RNAi治疗的疾病需要长期用药,因此,有关RNAi类药物... 自揭示了哺乳动物细胞中的RNA干扰(RNAi)现象以来,对其进行了大量的研究与资金投入,期望将其发展成一种切实可行的治疗手段。毫无疑问,RNAi是最具发展潜力的基因治疗策略。由于许多采用RNAi治疗的疾病需要长期用药,因此,有关RNAi类药物长期应用的安全性问题成为关注重点。 展开更多
关键词 rna干扰 基因沉默 小干扰rna rna干扰组合治疗
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dsRNA和RNA干扰技术 被引量：3
20
作者 巢时斌 付文金 彭剑雄 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2003年第1期97-100,共4页
dsRNA在细胞内诱导同源序列的基因表达受抑的现象称为RNA干扰。其机的阐明使它有可能在基因敲除 ,基因功能测定等方面成为一项成熟的技术 ,这将在生命科学领域中引起深刻变化。本文就dsRNA和RNA干扰的关系 ,RNA干扰的机制和特点 。
关键词 DSrna rna干扰 rna干扰技术 基因沉寂
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