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基于RNA-seq对复合益生菌作用于肉鸡回肠中新转录本预测及可变剪接、SNP分析
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作者 曹威荣 王燕飞 +3 位作者 张若男 贾浩 刘璇 张利环 《中国饲料》 北大核心 2024年第3期20-27,共8页
为分析复合益生菌饲喂肉鸡回肠转录组中的新转录本预测、可变剪接事件和SNP,选择200只1日龄黄麻肉鸡随机分为2组,每组5个重复,每个重复20只。对照组正常饮水,益生菌组饮用水中补充1%复合菌制剂,试验分为生长前期(1~21 d)、后期(22~42 d... 为分析复合益生菌饲喂肉鸡回肠转录组中的新转录本预测、可变剪接事件和SNP,选择200只1日龄黄麻肉鸡随机分为2组,每组5个重复,每个重复20只。对照组正常饮水,益生菌组饮用水中补充1%复合菌制剂,试验分为生长前期(1~21 d)、后期(22~42 d)两个阶段。42日龄时进行肉鸡屠宰试验,取对照组和益生菌组回肠各3个样本进行转录组测序。对测序数据进行分析,共发现1047个新基因,20176个新转录本,276个新基因在GO数据库中得到归类注释。对转录组数据进行可变剪接分析,外显子跳跃(SE)占可变剪接类型的比例最高,共筛选到1131个显著的差异剪接基因,在外显子跳跃(SE)、第一个外显子可变剪接(A5SS)、最后一个外显子可变剪接(A3SS)、外显子选择性跳跃(MXE)、内含子滞留(RI)事件中鉴定到的差异剪接基因数分别为588、139、176、136、92。对获得的差异剪接基因进行GO富集分析,主要富集在代谢和免疫GO term。KEGG富集到了胞吞作用、MAPK信号通路等。在各样品中大多数碱基取代均为转换大于颠换,其中转换单核苷酸多态性(SNP)所占百分比为73.53%~73.94%;颠换型SNP所占百分比为26.05%~26.47%。试验对对照组、益生菌组肉鸡的回肠进行了RNA-seq测序分析,为发掘复合益生菌作用于肉鸡回肠中的可变剪接事件提供基础,为进一步了解复合益生菌作用于肉鸡回肠中新转录本的发现和SNP位点提供了数据支撑。 展开更多
关键词 肉鸡 rna-seq 新转录本 SNP 可变剪接
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BSA-Seq结合RNA-Seq技术挖掘大豆叶片提前黄化衰老基因
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作者 李世宽 洪慧龙 +3 位作者 付佳祺 谷勇哲 孙如建 邱丽娟 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期294-309,共16页
大豆产量与其生殖生长的持续时间呈正相关,延缓其开花后叶片的衰老,提高其生理功能,有利于增加植物的粒重。叶片黄化是植物衰老的显著特征之一。关于在大豆鼓粒后期叶片黄化的研究鲜见报道。本研究对鼓粒后期叶片提前黄化突变体ly和野生... 大豆产量与其生殖生长的持续时间呈正相关,延缓其开花后叶片的衰老,提高其生理功能,有利于增加植物的粒重。叶片黄化是植物衰老的显著特征之一。关于在大豆鼓粒后期叶片黄化的研究鲜见报道。本研究对鼓粒后期叶片提前黄化突变体ly和野生型ofc杂交组合进行遗传分析,结果表明,大豆鼓粒后期叶片提前黄化性状受单隐性核基因控制。通过BSA-Seq在19号染色体得到一个2.23Mb的初定位区间,经开发标记图位克隆后将区间缩短至1.75 Mb,区间内有219个基因,再结合RNA-Seq分析,得到了区间内12个候选基因,其中有4个SNP变异基因和8个差异表达基因。本研究结果为大豆鼓粒后期叶片黄化衰老基因的克隆奠定了基础。 展开更多
关键词 大豆 突变体 BSA-Seq rna-seq 图位克隆
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基于RNA-Seq分析大白猪和巴马香猪背最长肌组织基因表达差异
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作者 韦茜尹 雷国凤 +8 位作者 陈奎蓉 黄志威 蒋昱雯 陈晓榕 容宁 陈钊 徐玉培 梁晶 兰干球 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期208-214,共7页
以180日龄的大白猪(n=6)与巴马香猪(n=6)为研究对象,屠宰后测定肌内脂肪、肉色、嫩度、pH、滴水损失等肉质性状,采集背最长肌组织提取总RNA,利用RNA-Seq技术鉴定大白猪和巴马香猪背最长肌组织中的表达差异基因及其功能富集通路。结果发... 以180日龄的大白猪(n=6)与巴马香猪(n=6)为研究对象,屠宰后测定肌内脂肪、肉色、嫩度、pH、滴水损失等肉质性状,采集背最长肌组织提取总RNA,利用RNA-Seq技术鉴定大白猪和巴马香猪背最长肌组织中的表达差异基因及其功能富集通路。结果发现,以大白猪为对照组,在巴马香猪和大白猪背最长肌组织中共鉴定到5 037个差异表达基因,其中有3 326个上调表达基因,1 711个下调表达基因。经过KEGG富集通路分析,发现巴马香猪和大白猪一共有168条显著富集通路,其中上调DEGs有92条富集路径,下调DEGs有76条富集路径;GO功能分析中上调表达基因富集到BP有3 058条、CC有413条、MF有559条,下调表达基因富集到BP有3 050条、CC有415条、MF有557条。大白猪与巴马香猪肉色的亮度L在45min时呈极显著差异;大白猪与巴马香猪之间的肌内脂肪、水分均呈现显著差异。本文对大白猪与巴马香猪肌内脂肪含量进行转录组测序分析,初步认为CAPN3、MTM1、TMOD4等基因在巴马香猪肉质中发挥重要作用。 展开更多
关键词 巴马香猪 大白猪 rna-seq 肉质性状
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基于RNA-Seq探究蔗糖影响黑果枸杞枝刺发生的机理
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作者 乔杨 刘雯 +2 位作者 李璐佳 孙丽丽 王钦美 《经济林研究》 北大核心 2024年第1期126-139,共14页
【目的】黑果枸杞Lycium ruthenicum是集生态、经济和药用价值等为一体的灌木。然而,其密集的枝刺严重阻碍其作为经济林推广,本研究旨在探究蔗糖(Suc)促进黑果枸杞(黑杞)枝刺的发生机理,为培育其无刺优良品种提供依据。【方法】在证明Su... 【目的】黑果枸杞Lycium ruthenicum是集生态、经济和药用价值等为一体的灌木。然而,其密集的枝刺严重阻碍其作为经济林推广,本研究旨在探究蔗糖(Suc)促进黑果枸杞(黑杞)枝刺的发生机理,为培育其无刺优良品种提供依据。【方法】在证明Suc通过能量和信号路径促进黑杞枝刺发生的基础上,利用RNA-Seq对无刺茎顶芽(TleCK)、有刺茎顶芽(ThoCK)、黑暗处理的有刺茎顶芽(ThoDCK)、减少内源Suc处理后有刺变无刺茎顶芽(TleDPL)和喷施外源Suc后无刺变有刺茎顶芽(ThoSuc)5种样品的差异表达基因(DEG)和叶绿体差异基因(cpDEG)进行筛选和分析,并采用RT-qPCR验证了9个DEG的表达情况。【结果】5组有刺和无刺材料顶芽之间(ThoCK vs.TleCK、ThoCK vs.TleDPL、ThoDCK vs.TleDPL、TleCK vs.ThoSuc和TleDPL vs.ThoSuc)的DEG分别为5281、4363、3125、5226和3278个,这5组DEG共同显著富集在9个GO条目和4个KEGG通路(“类黄酮生物合成”“二萜生物合成”“苯丙烷生物合成”、“芪类、二芳基庚烷和姜辣素生物合成”)。韦恩图显示5组比较组共有的DEG是196个,其中33个被预测为转录因子基因,较多转录因子基因被预测为NAC和WRKY家族。5组比较组有3个共有DEG注释在植物激素信号转导KEGG通路,分别参与生长素、茉莉酸和水杨酸信号传导。3个关键有刺和无刺比较组(ThoCK vs.TleCK、ThoCK vs.TleDPL和TleCK vs.ThoSuc)中共有2个DEG被预测为TCP转录因子基因,这3个比较组均有cpDEG被注释到光合作用KEGG通路。9个DEG的RT-qPCR验证了RNA-Seq结果的可靠性。【结论】Suc可能通过影响生长素、茉莉酸和水杨酸信号传导以及赤霉素合成基因表达来促进黑杞枝刺发生,枝刺发生也可能与类黄酮积累和木质素减少有关,而且增施外源和减少内源Suc并非通过简单地逆转cpDEG的表达来影响枝刺发生。注释到WRKY、TCP和NAC转录因子家族的共有DEG可能是调控枝刺发生的关键基因。本研究建立了Suc影响黑杞枝刺发生的机理模型图。 展开更多
关键词 黑果枸杞 顶芽 枝刺 rna-seq 蔗糖
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基于RNA-Seq技术筛选姜曲海猪子宫和卵巢发育相关基因
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作者 朱淑斌 徐盼 +2 位作者 周春宝 许琴瑟 吴嘉韵 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期130-140,共11页
母猪的子宫和卵巢组织发育情况直接影响母猪的繁殖性能,进而对养猪业的经济效益造成重大影响。为探究姜曲海猪子宫和卵巢发育的分子机理,本研究选取1月龄和8月龄姜曲海猪各3头,利用转录组测序技术(RNA-Seq)对子宫和卵巢组织进行测序,通... 母猪的子宫和卵巢组织发育情况直接影响母猪的繁殖性能,进而对养猪业的经济效益造成重大影响。为探究姜曲海猪子宫和卵巢发育的分子机理,本研究选取1月龄和8月龄姜曲海猪各3头,利用转录组测序技术(RNA-Seq)对子宫和卵巢组织进行测序,通过生物信息学手段筛选差异表达基因并进行基因本体(Gene ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto ncyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析,再与猪数量性状基因座(Quantitative trait locus,QTL)数据库比对后鉴定出重要的候选基因。结果显示,1月龄和8月龄姜曲海猪子宫组织中有1688个差异表达基因,表达上调和下调的基因各844个;卵巢组织中存在3833个差异表达基因,其中2831个表达上调,1002个表达下调。富集分析结果显示这些差异表达基因主要显著富集于动物器官发育、组织发育和细胞分化等生物学过程。本研究在子宫和卵巢组织中分别筛选出11个和31个与发育性状有关的候选基因,其中共有的候选基因有6个,分别为LHFPL1、MTUS2、LIF、RBP4、EPHB2和TESC。本研究结果为姜曲海猪子宫和卵巢发育分子层面的研究提供了参考,也为今后姜曲海猪繁殖性状的分子改良提供了新的研究方向。 展开更多
关键词 姜曲海猪 子宫 卵巢 转录组测序
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利用RNA-seq技术筛选影响文昌鸡腹脂沉积的重要候选基因
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作者 吴红芬 张颖 +4 位作者 侯冠彧 王颖 汪刘浩 吴科榜 那威 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期182-187,共6页
本研究利用RNA-seq技术筛选影响文昌鸡腹脂沉积的重要候选基因,旨在为低脂文昌鸡的分子育种提供理论依据。本研究结果显示,共有15 996个基因在文昌鸡腹部脂肪组织中表达,16 926个基因在儋州鸡腹部脂肪组织中表达,15 580个基因在文昌鸡... 本研究利用RNA-seq技术筛选影响文昌鸡腹脂沉积的重要候选基因,旨在为低脂文昌鸡的分子育种提供理论依据。本研究结果显示,共有15 996个基因在文昌鸡腹部脂肪组织中表达,16 926个基因在儋州鸡腹部脂肪组织中表达,15 580个基因在文昌鸡和儋州鸡腹部脂肪组织中均有表达,95个基因在文昌鸡和儋州鸡腹部脂肪组织中差异表达。GO富集分析结果显示差异表达基因显著富集在细胞过程、分子活性物质运输等过程(P<0.05)。KEGG富集分析结果显示,差异表达基因在PPAR信号通路、TGF-β信号通路、不饱和脂肪酸的生物合成等途径富集。通过筛选与验证,最后确定SCD、SMOC1、IGFBP2、MSMB基因为影响文昌鸡腹脂沉积的重要候选基因。 展开更多
关键词 文昌鸡 腹脂沉积 rna-seq 差异表达基因 候选基因
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基于RNA-seq技术分析德州驴不同部位肌肉的差异表达基因
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作者 许静 姚欢丰 +7 位作者 程杰 王延涛 李泽宇 曲洪磊 李孟孟 朱明霞 王长法 柴文琼 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第5期71-78,共8页
以德州驴为研究对象,利用转录组学(RNA-seq)技术对其背最长肌、腿后腱、臀大肌不同部位差异表达基因进行测序,筛选调控驴肉品质性状的关键基因,探究不同部位驴肉差异的分子机制。结果表明:筛选获得了臀大肌与背最长肌差异表达基因124个... 以德州驴为研究对象,利用转录组学(RNA-seq)技术对其背最长肌、腿后腱、臀大肌不同部位差异表达基因进行测序,筛选调控驴肉品质性状的关键基因,探究不同部位驴肉差异的分子机制。结果表明:筛选获得了臀大肌与背最长肌差异表达基因124个,其中上调基因73个,下调基因51个;腿后腱与背最长肌差异表达基因126个,其中上调基因68个,下调基因58个。对德州驴腿后腱与背最长肌差异基因KEGG通路富集分析发现,差异表达基因主要在赖氨酸降解、β-丙氨酸代谢、脂肪酸降解等通路中高度富集,臀大肌与背最长肌差异表达基因富集氧化磷酸化、亮氨酸和异亮氨酸降解等通路中。同时,肉品质相关候选基因GCDH、ALDH2、IGF1、VGLL2、TECRL、ASS1、ATP5A1、MUT、ACADSB参与肌肉氨基酸脂肪酸代谢过程,在肌肉生长过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 rna-seq 差异表达基因 肉质性状 骨骼肌
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基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制
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作者 王建东 唐玉林 +5 位作者 王敏 张宝锁 杨富强 高海慧 于洋 郭延生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3519-3532,共14页
本试验旨在基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制,分析脾中与免疫相关差异表达基因的变化,为枸杞多糖拮抗雏鸡免疫抑制机制提供参考依据。将120只7日龄海兰褐蛋鸡随机分成3个组,分别为空白组(NC)、环磷酰胺组... 本试验旨在基于RNA-Seq技术研究枸杞多糖对环磷酰胺致雏鸡免疫抑制的拮抗机制,分析脾中与免疫相关差异表达基因的变化,为枸杞多糖拮抗雏鸡免疫抑制机制提供参考依据。将120只7日龄海兰褐蛋鸡随机分成3个组,分别为空白组(NC)、环磷酰胺组(CY)及枸杞多糖组(CYLbGp),CY和CYLbGp两组连续3 d每日胸肌注射80 mg·kg^(-1)环磷酰胺建立免疫抑制雏鸡模型,NC组肌注等体积生理盐水,CYLbGp组在模型建立后通过饮水的方式每天给予5 mg·kg^(-1)枸杞多糖,连续30 d。给药结束后,每组随机选取6只雏鸡采集脾,采用RNA-Seq技术检测3组在给予枸杞多糖后的差异表达基因。通过KEGG通路富集分析和蛋白质互作(PPI)网络分析,筛选关键差异基因和通路。结果表明,枸杞多糖干预后共有178个差异表达基因显著回调,显著富集在线粒体自噬-动物、趋化因子信号通路、C型凝集素受体信号通路、B细胞受体信号通路、血小板活化、自然杀伤细胞介导的细胞毒性和Th1和Th2细胞分化等免疫相关通路上。PPI分析结果表明,磷酸肌醇3激酶调节亚基(PIK 3CD)、Janus激酶3(JAK 3)、GATA结合蛋白3(GATA 3)、低氧诱导因子(HIF 1A)、NK2同源异型框5(NKX 2-5)和肌醇多磷酸磷酸酶样1(INPPL 1)为其中的关键基因。RT-qPCR结果与转录组学数据变化趋势基本一致,进一步表明转录组数据有较高的可靠性。综上,枸杞多糖通过作用于PIK 3CD、JAK3、GATA3、HIF 1A、和INPPL 1等关键靶点,参与线粒体自噬、趋化因子信号通路、C型凝集素受体信号通路、B细胞受体信号通路、血小板活化、自然杀伤细胞介导的细胞毒性、Th1和Th2细胞分化等信号通路的调控,进而起到缓解雏鸡免疫抑制的作用。 展开更多
关键词 rna-seq技术 免疫抑制 枸杞多糖 环磷酰胺
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基于BSA-seq和RNA-seq挖掘水稻株高相关QTL
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作者 吴元明 林佳怡 +4 位作者 柳雨汐 李丹婷 张宗琼 郑晓明 逄洪波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期173-184,共12页
株高是影响水稻产量稳定性的重要因素之一,水稻株高相关QTL的定位及候选基因的挖掘,有助于深入了解株高分子调控机制,进而为培育理想株型的水稻品种奠定基础。以油占8号及广西野生稻为亲本构建的285个CSSL群体为试验对象,结合NGS与BSA-... 株高是影响水稻产量稳定性的重要因素之一,水稻株高相关QTL的定位及候选基因的挖掘,有助于深入了解株高分子调控机制,进而为培育理想株型的水稻品种奠定基础。以油占8号及广西野生稻为亲本构建的285个CSSL群体为试验对象,结合NGS与BSA-seq等方法,利用SNP和InDel两种分子标记进行关联分析,对可能与株高相关的基因组区段进行定位。结果显示,Δ(SNP-index)分子标记在Chr.7和Chr.10中分别关联到3.205和1.311 Mb大小的候选基因组区域。Δ(InDel-index)标记关联到的基因组区域大小分别为2.848和1.292 Mb,且全部包含于Δ(SNP-index)关联到的区间内。结合GO、KEGG、Uniprot、eggNOG等数据库中的功能注释、高质量多态性位点筛选以及已有的株高相关转录组数据,最终关联到Chr.7中的5个候选基因,包括功能和机理已知的OsTCP21。RT-qPCR结果显示,OsTCP21在高株和矮株中的表达差异与已有研究结果相一致,LOC_Os07g05050和LOC_Os07g02850在高株中表达量较高,LOC_Os07g04220和LOC_Os07g02770在矮株中表达量较高。这5个候选基因在水稻株高性状的调控中起重要的作用,OsTCP21是一个关键调控基因。 展开更多
关键词 水稻 株高 定位 BSA-seq rna-seq
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基于RNA-Seq的无量山乌骨鸡肝脏组织脂代谢相关基因筛选及其表达分析
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作者 欧正淼 周家文 +2 位作者 刘莉莉 吴芸 陈粉粉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期976-988,共13页
旨在通过分析不同日龄无量山乌骨鸡肝组织mRNA表达谱,挖掘肝脂代谢相关基因及其所参与的调控通路,并确定部分关键基因在肝发育中的表达特征。本研究采集1日龄(D1)和168日龄(D168)各3只母鸡肝组织样品,利用DNBSEQ平台进行转录组测序,随... 旨在通过分析不同日龄无量山乌骨鸡肝组织mRNA表达谱,挖掘肝脂代谢相关基因及其所参与的调控通路,并确定部分关键基因在肝发育中的表达特征。本研究采集1日龄(D1)和168日龄(D168)各3只母鸡肝组织样品,利用DNBSEQ平台进行转录组测序,随机选取10个差异表达基因进行RT-qPCR验证。以|log2FC|≥2、Q value≤0.01和差异基因KEGG分析筛选参与脂代谢的差异表达基因,对筛选出的脂代谢相关差异表达基因进行GO富集、KEGG通路和蛋白互作分析。100只雌性雏鸡以出壳体重组间无差异随机分为5组,每组20只鸡,在D1、D42、D84、D126和D168共5个阶段每组随机屠宰2只健康母鸡(n=10),并提取肝组织RNA,RT-qPCR构建部分差异基因mRNA表达谱。结果,筛选出50个与脂代谢相关的差异表达基因,其中38个基因表达上调,12个基因表达下调。差异表达基因主要富集在脂质代谢、氧化还原、脂肪酸生物合成、脂肪酸代谢、胆固醇生物合成和甾醇生物合成等过程;差异表达基因参与了类固醇生物合成、脂肪酸代谢、甘油脂类代谢、不饱和脂肪酸生物合成和PPAR信号通路。蛋白互作分析筛选出SCD、ACSBG2、SQLE、HSD17B7、LCAT和LPIN1等关键蛋白基因,通过其mRNA表达量不同参与脂代谢调控。通过转录组测序挖掘出与脂代谢相关的差异表达基因50个,且42个差异表达基因之间存在相互作用关系,该研究结果为进一步解析优质鸡脂代谢相关基因的分子调控提供了理论依据。 展开更多
关键词 无量山乌骨鸡 rna-seq 肝组织 脂代谢 差异表达基因
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基于RNA-Seq的向日葵脂肪酸合成基因筛选与分析
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作者 郭树春 张艳芳 +3 位作者 李素萍 邵盈 邢慧军 于海峰 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1663-1673,共11页
为解析向日葵主要脂肪酸组分的生物合成分子机制,选用高油酸自交系J9、低油酸自交系P50为研究材料;进行错期播种同期采样试验,以液相色谱测定授粉后不同样品籽粒的脂肪酸组分与含量;利用RNA-Seq技术对不同样品测序,获得各样品与脂肪酸... 为解析向日葵主要脂肪酸组分的生物合成分子机制,选用高油酸自交系J9、低油酸自交系P50为研究材料;进行错期播种同期采样试验,以液相色谱测定授粉后不同样品籽粒的脂肪酸组分与含量;利用RNA-Seq技术对不同样品测序,获得各样品与脂肪酸合成相关的基因表达数据,以气象学数据、液相色谱数据、向日葵基因组数据和转录组数据为基础,采用生物信息学方法分析相关数据。结果表明,(1)高油酸向日葵材料脂肪酸组分和含量受温度影响小,而低油酸材料易受温度影响;(2)J9和P50的12个样本的高表达基因数在7500个左右,而中、低表达基因数相当,是高表达基因的2倍,约15000个;(3)品种特异性表达基因和品种间特异表达基因去除重复后,在J9和P50在-CK和S数据集得到15885个,GO功能富集获得的与脂质代谢直接相关的403个DEGs映射到与的脂质代谢相关的KEGG代谢通路,累计29个DEGs直接参与了19条相关KEGG通路。 展开更多
关键词 向日葵 脂肪酸 rna-seq 分子机制
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基于RNA-seq的甘薯芽变株系类胡萝卜素基因代谢差异分析
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作者 赵冬兰 赵凌霄 +4 位作者 刘洋 张安 戴习彬 周志林 曹清河 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期3239-3249,共11页
为研究甘薯类胡萝卜素代谢的分子机制,本研究以浙薯81及其芽变系为材料,利用RNA-seq技术研究了浙薯81及其芽变系的薯皮(红色变黄色)和脉基(紫色变绿色)类胡萝卜素代谢相关基因。经过生物信息学分析,在薯皮和脉基分别筛选出24个和10个差... 为研究甘薯类胡萝卜素代谢的分子机制,本研究以浙薯81及其芽变系为材料,利用RNA-seq技术研究了浙薯81及其芽变系的薯皮(红色变黄色)和脉基(紫色变绿色)类胡萝卜素代谢相关基因。经过生物信息学分析,在薯皮和脉基分别筛选出24个和10个差异表达基因(DEGs),其中有4个DEGs同时存在于薯皮和脉基中。类胡萝卜合成代谢上游途径中,与浙薯81相比,芽变系薯皮中的牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶基因GGDPS (g29773、g38646)、番茄红素合成酶基因PSY (g11630)和ζ-胡萝卜素异构酶基因Z-ISO (g42608)均显著上调, GGDPS (g29773)仅在突变系中有表达;脉基部在类胡萝卜素上游代谢途径中没有筛选到DEGs。番茄红素环化分支点后,在薯皮中检测到2个β-胡萝卜素羟化酶基因CHYB (g33351、g953),与浙薯81相比,芽变系中g33351下调表达, g953则上调表达。在薯皮和脉基分别检测到一个玉米黄质环氧化酶基因ZEP,薯皮中的ZEP (g41700)显著下调,脉基部的ZEP (g1103)显著上调。类胡萝卜素分解代谢中突变体薯皮中类胡萝卜素裂解双加氧酶基因CCD8 (g21348)下调表达;2个9-顺式环氧类胡萝卜素加氧酶基因NCED (g30636、g43412)在突变系的薯皮和脉基中均下调表达;此外在薯皮和脉基分别检测出5个黄氧素脱氢酶基因ABA2,薯皮中有4个上调表达,而脉基中的则全部下调表达。利用实时定量PCR (qRT-PCR)验证了部分基因的表达模式,与RNA-seq分析结果一致。该研究对甘薯类胡萝卜素代谢的分子机制及解析甘薯薯皮和脉基不同颜色突变具有重要参考价值。 展开更多
关键词 甘薯 转录组测序 类胡萝卜素 差异基因 颜色变异
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Identification of a candidate QTG for seed number per silique by integrating QTL mapping and RNA-seq in Brassica napus L.
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作者 Shuangshuang Xin Hongli Dong +7 位作者 Yixin Cui Yilin Liu Guifu Tian Nanxi Deng Huafang Wan Zhi Liu Xiaorong Li Wei Qian 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2023年第1期189-197,共9页
Seed number per silique(SNPS)is one of seed yield components in rapeseed,but its genetic mechanism remains elusive.Here a double haploid(DH)population derived from a hybrid between female 6Q006with 35–40 SNPS and mal... Seed number per silique(SNPS)is one of seed yield components in rapeseed,but its genetic mechanism remains elusive.Here a double haploid(DH)population derived from a hybrid between female 6Q006with 35–40 SNPS and male 6W26 with 10–15 SNPS was investigated for SNPS in the year 2017,2018,2019 and 2021,and genotyped with Brassica 60K Illumina Infinium SNP array.An overlapping major QTL(qSNPS.C09)explaining 51.50%of phenotypic variance on average was narrowed to a 0.90 Mb region from 44.87 Mb to 45.77 Mb on chromosome C09 by BSA-seq.Subsequently,two DEGs in this interval were detected between extreme individuals in DH and F_2populations by transcriptome sequencing at7 and 14 days after pollination siliques.Of which,BnaC09g45400D encoded an adenine phosphoribosyltransferase 5(APT5)has a 48-bp InDel variation in the promoter of two parents.Candidate gene association analysis showed that this InDel variation was associated with SNPS in a nature population of rapeseed,where 54 accessions carrying the same haplotype as parent 6Q006 had higher SNPS than103 accessions carrying the same haplotype as parent 6W26.Collectively,the findings are helpful for rapeseed molecular breeding of SNPS,and provide new insight into the genetic and molecular mechanism of SNPS in rapeseed. 展开更多
关键词 Adenine phosphoribosyltransferase 5 Brassica napus QTL mapping rna-seq Seed number per silique
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Analysis of differentially expressed genes in Verruca vulgaris vs.adjacent normal skin by RNA-sequencing
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作者 QINGQING GUO JIAYUE QI +4 位作者 XIAOQIANG LIANG ZIGANG ZHAO JIA BAI FANG XIE CHENGXIN LI 《BIOCELL》 SCIE 2023年第11期2435-2443,共9页
Introduction:Verruca vulgaris is one of the most common low-risk HPV infections and is characterized by excessive proliferation of keratinocytes.Currently,very little genetic information is available regarding verruca... Introduction:Verruca vulgaris is one of the most common low-risk HPV infections and is characterized by excessive proliferation of keratinocytes.Currently,very little genetic information is available regarding verruca vulgaris in the Chinese population.This study aimed to obtain comprehensive transcript information of verruca vulgaris by RNA sequencing.Methods:High-throughput sequencing was performed on three fresh verruca vulgaris samples and adjacent normal skin on the Illumina sequencing platform.The transcriptomes were analyzed using bioinformatics and the differentially expressed genes(DEGs)were verified by immunohistochemistry.Verruca vulgaris exhibited a unique molecular signature.Results:In total,1,643 DEGs were identified in verruca vulgaris compared to normal skin.The functions of the DEGs were studies by Gene Ontology(GO)enrichment,Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)pathway analysis,DEGs Reactome analysis,disease annotation function,and STRING protein-protein interaction(PPI)network analysis.The results revealed 595 GO terms associated with the cell cycle,signal transduction,immune system,signaling molecules,and interaction.The Reactome analysis revealed enrichment in reversible hydration of carbon dioxide and BMP signaling,while the disease annotation function revealed that the enriched DEGs are involved in keratosis disorders.The STRING PPI network showed that the edges with the highest density mainly included the 2′-5′oligoadenylate synthase(OAS)family-related proteins.Furthermore,the M-code analysis found ISG15,IRF7,and OASL were scored as significant modules and their high expression compared to the control was verified by immunohistochemistry.Conclusion:These findings contribute to the genetic information of verruca vulgaris in the Chinese population,revealing that interferon-stimulated genes may play essential roles in verruca vulgaris. 展开更多
关键词 Differentially expressed genes rna-seq TRANSCRIPTOME Verruca vulgaris Interferon-stimulated genes
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基于RNA-Seq对柯乐猪正常和异常乳腺差异基因的挖掘研究
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作者 王春源 向进 +3 位作者 吴燕 谭元成 杨酸 张依裕 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期166-175,共10页
本研究旨在获取母猪异常和正常乳腺组织的差异表达基因。选择乳腺发育正常和异常的经产柯乐猪各3头,利用RNA-seq对正常和异常乳腺组织的差异基因进行筛选和生物信息学分析,结果显示:正常与异常乳腺相比较共筛选出1847个差异基因,其中上... 本研究旨在获取母猪异常和正常乳腺组织的差异表达基因。选择乳腺发育正常和异常的经产柯乐猪各3头,利用RNA-seq对正常和异常乳腺组织的差异基因进行筛选和生物信息学分析,结果显示:正常与异常乳腺相比较共筛选出1847个差异基因,其中上调基因767个,下调基因1080个;GO富集分析显示,生物学过程(Biological Process)差异表达基因主要富集在细胞过程(Cellular Process)和生物调节(Biological Regulation),细胞组分(CellularComponent)差异表达基因主要富集在细胞(Cell)、细胞部分(Cell Part)和膜(Membrane),分子功能(MolecularFunction)差异基因主要集中在粘合剂(Binding)和催化活性(Catalytic Activity)方面;KEGG富集分析显示,差异表达基因主要富集在神经活性配体-受体相互作用通路,其次为细胞因子与细胞因子受体的相互作用以及PI3K-Akt信号通路;上调的差异表达基因主要富集在细胞因子与细胞因子受体的相互作用,其次为神经活性配体-受体相互作用通路;下调的差异表达基因主要富集在人乳头瘤病毒感染和神经活性配体-受体相互作用信号通路,其次为PI3K-Akt信号通路和细胞周期等通路。在可变剪接分析中,正常发育乳腺组织的所有可变剪接事件多于发育不良的,A3SS和RI差异可变剪接事件都是上调,而SE、A5SS和MXE差异可变剪接事件中大部分下调。本研究通过对差异基因及其信号通路的功能注释分析,发现乳腺发育显著相关的193个差异基因,主要富集在细胞周期、Th1和Th2细胞的分化、PI3K-Akt信号通路和焦点粘连等信号通路,绘制了193个差异基因的网络互作图,筛选出关联度前10位的差异基因为CDC6、F2、E2F1、DRD2、KNG1、GHRL、LEP、IFNG、FN1、PPARG,且关联度最高的CDC6可调节多个信号通路。研究结果为进一步阐述哺乳动物乳腺发育的调控机制提供了一定的科学依据。 展开更多
关键词 柯乐猪 rna-seq技术 乳腺发育 差异基因
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甘蓝型油菜种子低温萌发差异及RNA-seq分析
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作者 宋佳谕 蒋根水 +2 位作者 陈宇眺 赵坚义 洪晓富 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1217-1226,共10页
为提高种植效益,筛选长江下游地区适宜迟播的油菜品种,探索其耐寒性作用机理,利用6个已审定(登记)的油菜品种,设置6个温度处理,分析低温下种子萌发特性和生理指标变化,利用RNA-seq技术,进一步探索不同耐寒性油菜品种低温萌发差异的原因... 为提高种植效益,筛选长江下游地区适宜迟播的油菜品种,探索其耐寒性作用机理,利用6个已审定(登记)的油菜品种,设置6个温度处理,分析低温下种子萌发特性和生理指标变化,利用RNA-seq技术,进一步探索不同耐寒性油菜品种低温萌发差异的原因。结果显示,随着温度的降低,各品种萌发速率和相对萌发率相应降低,越优1301和越优1510在低于10℃低温条件下,具有明显的抗寒耐迟播优势;SOD活性变化与低温萌发表型结果一致;在越优1301和沣油737中,共检测到920个DGE参与油菜低温萌发过程,并筛选到与ABA途径和淀粉蔗糖代谢途径相关的21个DEG。越优1301具有较强的低温萌发能力,可能通过植物激素信号转导、活性氧清除系统的激活和糖类代谢稳态变化引起种子萌发能力差异,在一定程度上解释了越优1301表现较强耐寒性的原因。本研究为保障长江下游地区迟播油菜的生产安全和种植效益提供理论参考和技术指导。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 低温胁迫 种子萌发 迟播 RNA测序
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基于RNA-seq的HBSS诱导细胞自噬的组学分析及实验验证
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作者 阮晨 曹敬博 +2 位作者 吴冉 王来友 贾永鹏 《西北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第5期88-95,共8页
为寻找Hank’s平衡盐溶液(HBSS)诱导细胞自噬的调控蛋白,对HBSS诱导大鼠肾上皮(NRK)细胞株的细胞自噬现象进行转录组分析和实验验证.用HBSS分别处理细胞不同时长,结合LC3B-Ⅱ蛋白表达量和细胞存活率确定最佳诱导时间.根据最佳诱导时间... 为寻找Hank’s平衡盐溶液(HBSS)诱导细胞自噬的调控蛋白,对HBSS诱导大鼠肾上皮(NRK)细胞株的细胞自噬现象进行转录组分析和实验验证.用HBSS分别处理细胞不同时长,结合LC3B-Ⅱ蛋白表达量和细胞存活率确定最佳诱导时间.根据最佳诱导时间制作细胞样品,进行转录组测序(RNA-seq),原始数据质控过滤后进行注释和分析.选取表达差异变化排序靠前的基因进行敲降实验,筛选具有潜在调控功能的蛋白质,接着用荧光定量PCR实验对该蛋白质的上游基因表达情况进行辅助验证.结果发现,HBSS诱导细胞自噬的最佳诱导时间为3 h;在转录组结果中共鉴定到32305个基因,477个差异表达基因,差异基因的GO和KEGG富集分析结果显示这些基因主要参与代谢底物分解、氨基酸转运以及蛋白质修饰调控等信号调控通路;免疫印迹结果表明干扰基因Sat1的表达可以降低细胞内LC3B-Ⅱ的表达水平.本研究围绕HBSS诱导细胞自噬进行转录组学测序分析,并通过实验发现了影响LC3B-Ⅱ表达的潜在功能调控基因Sat1.综合考虑所有实验结果,Sat1可能通过GO和KEGG显著富集的信号通路影响HBSS诱导的细胞自噬,这些发现可以为细胞自噬相关机制的深入挖掘提供参考. 展开更多
关键词 转录组测序 Hank’s平衡盐溶液 自噬 表达基因 免疫印迹
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转录组与RNA-Seq技术 被引量:60
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作者 张春兰 秦孜娟 +2 位作者 王桂芝 纪志宾 王建民 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期51-56,共6页
转录组是特定细胞或组织在特定时间或状态下转录出来的所有RNA的集合。通过对转录组的研究可以揭示生物体的基因表达、研究结构变异及发现新基因等。转录组分析的研究方法、研究平台发生着日新月异的变化,同时生物信息学分析的内容也在... 转录组是特定细胞或组织在特定时间或状态下转录出来的所有RNA的集合。通过对转录组的研究可以揭示生物体的基因表达、研究结构变异及发现新基因等。转录组分析的研究方法、研究平台发生着日新月异的变化,同时生物信息学分析的内容也在逐渐完善。RNA-Seq作为一种新的转录组研究手段,利用新一代测序技术能够更为快速、准确地为人们提供更多的生物体转录信息。主要比较近年来转录组研究的几种方法和几种RNA-Seq的研究平台,并着重介绍RNA-Seq的原理、用途、步骤和生物信息学分析等及在相关领域的应用等内容,为相关的研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 转录组 rna-seq 新一代测序技术
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基于RNA-Seq技术的牦牛体外受精胚胎发育转录组分析 被引量:13
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作者 字向东 罗斌 +6 位作者 夏威 郑玉才 熊显荣 李键 钟金城 朱江江 张正帆 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1577-1589,共13页
【目的】探明不同发育阶段牦牛体外受精(IVF)胚胎的转录组差异,了解差异表达基因(DEG)在功能、分类和代谢通路的差异,为揭示牦牛早期胚胎发育调控机制,促进牦牛胚胎体外生产技术的发展提供理论基础。【方法】以IVF技术生产的牦牛2-细胞... 【目的】探明不同发育阶段牦牛体外受精(IVF)胚胎的转录组差异,了解差异表达基因(DEG)在功能、分类和代谢通路的差异,为揭示牦牛早期胚胎发育调控机制,促进牦牛胚胎体外生产技术的发展提供理论基础。【方法】以IVF技术生产的牦牛2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑椹胚和囊胚5个发育阶段的胚胎为样本分别提取总RNA,采用Smart-Seq2扩增技术构建5个测序文库,应用Hi SeqTM 2500高通量测序技术进行转录组测序,对获得的有效序列进行功能注释及相关生物信息学分析。【结果】牦牛IVF后的卵裂率和囊胚率分别为69.3%和26.2%。2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑椹胚和囊胚5个发育阶段的牦牛胚胎Clean reads为47 355 570—50 855 888条,其中有85.65%—90.02%的reads能比对到牦牛参考基因组序列上;8-细胞的胚胎比对上的转录本最多(14 893),而囊胚比对上的转录本最少(9 827)。牦牛胚胎转录本主要有5种可变剪接类型,转录起始区域可变剪接(TSS)和转录结束区域可变剪接(TTS)所占比例最大;牦牛2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑椹胚和囊胚基因组分别有116601、234 131、196 420、70 841和94 840个位点存在单核苷酸多态性(SNP)。在4-细胞、8-细胞、桑椹胚、囊胚期开始表达的基因分别有1 221、1 116、142和564个;随着胚胎发育的进行,BMP15、KIT、GDF9、STAT3、ZP3和ZP4等母源基因的表达量逐渐减少,而SARS、IL18、ACO2、TXN2、ATP5B、PCGF4、UBE3A、MAPK13、SNURF和JUP等胚胎基因的表达量则逐渐增加。以|log2ratio|≥1且Q-value<0.05为筛选标准,在2-细胞和4-细胞胚胎、4-细胞和8-细胞胚胎、8-细胞胚胎和桑椹胚以及桑椹胚和囊胚比对中分别筛选到6 922、7 601、8 071和10 555个DEGs。GO分析表明,4个发育阶段的DEGs归类注释都涉及生物过程(BP)、细胞组分(CC)和分子功能(MF)3大类62个二级条目。通过KEGG pathway数据库分析,2-细胞和4-细胞期胚胎的DEGs参与到308条通路中,显著富集剪接体、RNA转运和泛素介导的蛋白水解等11条通路;4-细胞和8-细胞胚胎的DEGs参与到310条通路,显著富集嗅觉转导、神经活性配体-受体互作和核苷酸切除修复等9条通路;8-细胞期胚胎和桑椹胚的DEGs参与到316条通路,显著富集嗅觉转导、泛素介导的蛋白水解和神经活性配体-受体互作等10条通路;桑椹胚和囊胚的DEGs参与到315条通路,显著富集剪接体和RNA转运2条通路。【结论】利用高通量测序技术对牦牛IVF胚胎不同发育阶段的转录组进行测序和分析,揭示了牦牛胚胎发育不同阶段差异表达基因的数量,获得了差异表达基因的功能、分类和代谢通路。为丰富牦牛胚胎转录组信息,揭示牦牛胚胎发育分子调控机制及完善其胚胎体外培养技术研究奠定基础。 展开更多
关键词 牦牛 体外受精 胚胎 转录组 rna-seq
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基于RNA-seq的绿芦笋嫩茎冷藏期间茉莉酸信号变化研究
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作者 付永琦 费柳莹 +2 位作者 钟丽 李衍苏 陈金印 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期101-112,共12页
【目的】为探讨茉莉酸(JA)对绿芦笋采后品质变化进程的影响及其分子机制,对绿芦笋采后冷藏过程中JA含量与品质变化之间的关系以及不同冷藏时期转录组数据进行挖掘分析。【方法】测定绿芦笋冷藏期间品质变化相关指标以及JA含量的变化,采... 【目的】为探讨茉莉酸(JA)对绿芦笋采后品质变化进程的影响及其分子机制,对绿芦笋采后冷藏过程中JA含量与品质变化之间的关系以及不同冷藏时期转录组数据进行挖掘分析。【方法】测定绿芦笋冷藏期间品质变化相关指标以及JA含量的变化,采用RNA-seq技术分析绿芦笋5个冷藏时期嫩茎顶部组织的转录组变化,筛选富集于JA生物合成及信号转导途径的差异表达基因(DEGs),并通过实时荧光定量PCR技术对其中4个基因的表达模式进行验证。【结果】随着贮藏时间延长,绿芦笋的感官评分分值显著下降,失重率显著上升,顶部组织的硬度不断下降,基部组织的硬度呈先升后降;贮藏当天呼吸速率极高,但随着贮藏期的延长呈现先降后升的变化模式。JA含量在贮藏前几个小时含量急剧增加,贮藏期间则呈现先降后升的变化模式,且顶部组织JA含量极显著高于基部;5个时期嫩茎顶部组织中富集于茉莉酸生物合成及信号转导途径的差异基因分别有32个和11个,而其中最关键的基因分别有16个和9个。茉莉酸生物合成途径中,上调表达的差异基因主要涉及JA合成前体物质的产生以及下游调控步骤。JA信号转导途径转录调控非常活跃,以JA活化以及识别蛋白COI1的诱导表达为主要特征,JAZ蛋白响应基因数目最多,且其表达模式与JA含量的变化趋势较为一致。【结论】茉莉酸信号变化与绿芦笋采后品质变化密切相关,且有25个关键基因可能参与了这一响应过程,为进一步阐明绿芦笋采后品质变化的分子机制奠定理论基础。 展开更多
关键词 绿芦笋 贮藏品质 茉莉酸信号 转录组测序
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